Способ диагностики бактериальной дизентерии Советский патент 1981 года по МПК A61K39/00 

Изобретение относится к области медицины и касается диагностики дизе терии . Известен способ диагностики бакте риальной дизентерии путем определени IB сыворотке крови специфических антител к дизентерийному возбудителю 111 . Однако известный способ иедостато но чувствителен и в 20-30% случаев дает ложноположительные результаты. Цель изобретения - повьшение чувствительности способа. Поставленная цель достигается тем что способ осуществляют путем исследования крови, из которой готовят мо нослой 10%-ной взвеси эритроц1 тов больного и добавляют аутологичные лимфоциты, предварительно сенсибилизированные О-антигеном шигелл Флекс ра, и комплемент, затем после инкубирования их 2-2,5 ч при и 1718 ч при подсчитывают количество участков лизированных эритроцитов и при повышении их числа на 10% по сравнению с контролем диагностируют дизентерию. Способ осуществляют следующим образом. Берут 10 мл крови в пробирку, содержащую 20 ед. кристаллического гепарина, и разделяют на фракции лимфоцитов и эритроцитов путем центрифугирования при 1000 об/мин в течение 15 мин в грещиенте плотности фиколл-верографина. В пробирках готовят два образца, содержащих монослой 10%-ной взвеси эритроцитов больного, трижды отмытых фосфатным буфером, в один из которых (контроль) добавляют равные объемы взвеси аутологичных лимфоцитов в концентрации мл, и комплемент в виде свежей сыворотки крови белой икаак в разведении 1:5. В другой образец (опыт) добавляют также равные объемы взвеси аутологичных лимфоцитов, сенсибилизированных предварительно с равным объемом липополисахаридного 0-антигена шигелл при 37 С в течение 30 мин в концентрации 210 мл, и комплемента млши в разведении 1:5, и запускают в камеру Горяева, помещенную в увлажненную чашку Петри. Затем контрольнуй и опытную смеси запускают в камеру Горяева, которую предварительно помещают в чаику Петри, содержащую увлажнеНиую фильтровгшьную бумагу, Оба образца смеси выдерживают в течение 2 ч в термостате при 37 С, а затем 18 ч в холодильнике при 4с. Подсчитывают количество участков лиэированных эритроцитов, площадь кото рых не менее 5 клеток, и при повышении их количества в опыте на 10% и больше по сравнению с контролем диаг юстируют дизентерию. Пример. Больной И.Г., 23ле поступил в стационар (без жалоб на н рушения желудочно-кишечного тракта и других систем организма} в со случайным обнаружением в кале шигелл Зонне, с подозрением на дизентерию. Реакция пассивной гемагглютинации с эритроцитарным антигеном шигелл Зонне была отрицательна. С помощью предлагаемого способа был выставлен диагноз дизентерии: показатель контроля 4%/ а при стимуляции этой реакции О-антигеном шигелл равен 15%. Следовательно, реакция пассивной гемагглютинации была ложноотрицатель на. П р и м е р 2. Больная К.С.М., 14 лет, поступила в стационар с проявлениями гемоколита (боли в животе преимущественнр слева, спазм сигмы, стул 5-8 раз в день со слизью и кровью|| . Предварительный диагноз дизертерия. При использовании контрольного ди дизентеагностического препарата рии показатель реакции был равен 69%, т.е. почти в 9 раз превышая показатель контроля, что также свидетельствовало о диагнозе - дизе2|терия При использовании предлагаемого способа был получен отрицательный ре зультат - при добавлении О-антигена шигелл Флекснера количество лизированных эритроцитов в виде овальных участков просветления монослоя вели чиной в 5 клеток и более было равно 7%, а в контроле - 8%. В дальнейшем правильность этого ответа была подтверждена высевом из кала сапмонелл энтеридес. Исходя из этого, окончательный диагноз был исправлен на сапмонеллез. Пример 3. Больная К.С.Л., 23 лет, госпитализирована с неясными признаками, присущими дизентерии и пищевым инфекциям (водянистый понос, нормальная копрограмма) % С помощью предлагаемого способа был выставлен правильный диагноз дизентерии, так как результаты способа были следующие г показатель контроля 9%, показатель стимуляии реакции препаратом О-антигена шигелл - 19%. Использование предлагаемого способа позволяет повысить достоверность диагностики бактериальной дизентерии до 92-94%. Формула изобретения Способ диагностики бактериальной дизентерии путем исследования крови, отличающийся тем, что, с целью повышения чувствительности способа готовятМОНОСЛОЙ 10%-ной взвеси эритроцитов больного и добавляют аутологичные лимфоциты, предварительно сенсибилизированные О-антигеном шигелл Флекснера,и компле- мент, затем после инкубирования их 2-2,5 ч при и 17-18 ч при 4с, подсчитывают количество участков лизированных эритроцитов и при повышении их числа на 10% по сравнению с контролем диагностируют дизентерию. Источники информации, принятые во внимание при экспертизе 1. Покровский В.И. и др. Дизентерия. М., Медгиз, 1979, с. 209.