Способ получения аминопроизводных глицерина или их солей Советский патент 1981 года по МПК C07C217/08 A61K31/13 A61P31/12 C07C217/28 C07C217/32 

и полуценный продукт выделяют в виде свободного соединения или соли или аккилируют в случае, когда Rj в соединении формулы 1 означает алкил С Пример 1, 1,3 Ди-0-(и-гекса децил)-2-Ог(3-аминопропил)-глицерина гидрохлорид„ а)1,3-ДИ-0-(н-гeкcaдeцил)-2-0- (2-цианоэтил)-глицерин. Смесь 80 г 1 3 ди-0-(н-гексадецил)-глицерина (Ц8 ммоль), 1,9 кг акрилонитрила (28,1 ммоль) и 1,2 л водной 2 н.гидроокиси натрия нагревают до 50С. Медленно добавляют 19,2 г 0 -ного водного раствора гидроокиси тетрабу тиламмония (29,5 ммоль), в результате чего температура экзотермической реакции в смеси поднимается до 8090°С. Реакционную смесь затем переме шивают в течение 20 мин без внешнего нагрева с последующим охлаждением до и добавлением 1 л воды. Твердый материал (смесь непрореагировавшего и цианоэтилированного 1,3 ди-0-(н-гексадецил)-глицерина) выделяют и вновь обрабатывают 1,9 к свежего акрилонитрила (28,1 ммоль), 1,2 л водной 2 НоГидроокиси натрия и 19,2 г ffO/o-Horo раствора гидроокиси тетрабутиламмония (29,15 ммоль) в течение 20 мин при перемешивании при 50°С, с последующим охлаждением и добавлением 1. л воды Результирующий 1,3-ди-О-(н-гексадецил)-2-о-(2-цианоэтил)-глицерин в виде твердого вещества отфильтровывают, промывают последовательно водой, метанолом и ацетонитрилом и сушат. Выход 93 - (82 г); т.пл. 45-46°С„ ИК-спектр (CHClo,) 2250 . ЯМР-спектр (CDClj) : ,92 (t, NCCHQ.CHQ.O-); 3,33-3,67 (n, 9, .0СН С 5Нз1%) ; 2,62 (t, 2, NCCHr CH- 0-) и 0,75-1,58 (m, б2, алифатические протоны). б)Смесь 20,5 г 1 ,3-ди-О-(н-гекса децил)-2-0- (2-цианоэтил)-глицерина (3,5 ммоль), 200 мл тетрагидрофуран 10 мл этанола и 3 г скелетного никелевого катализатора (Ренея) насыщают газообразным аммиаком при 0-5°С, а затем гидрогенизируют при давлении 3,15 атм в гидрогенизаторе .Паара в течение 3 ч при комнатной температур Затем смесь фильтруют, катализатор промывают 50 мл тетрагидрофураном и фильтрат в целом упаривают в вакуу ме до получения маслообразного продукта. Эту процедуру трижды повторя84т со свежими реагентами и катализатором с получени.ем всего 77 г масла„ асло растворяют 500 мл диэтилового фира и раствор промывают 2%-ным Водным раствором гидроокиси аммония (500 мл), сушат MgSO.фильтруют и паривают в вакууме с получением вердого вещества. Твердое вещество растворяют в 300 мл этанола и раствор насыщают газообразным хлористым водородом с последующим упариванием в вакууме до твердого вещества, перекристаллизовывают из этилацетата с получением искомого продукта с неольшими примесями (63 г) ; выход т.пло б9-70С. Затем дважды перекристаллизовывают из смеси изопропанол-ацетонитрил (1:1). Получают 800 мл (47,5 г) готового соединения; выход т.-пло 58-59°С. ЯМР-спектр (СОС1г): .84 (t, .2, HQ.NCHiCH CHQ.0); 3,55 (m, 9, -ОСИ/ /CHfiOCHaClsHij.) ; 3,24 (t, 2, HQ f lCHaCHaClllO-) ; 2,04 (m, 2, НоГКН2 СН,СНор-) и 0,90 - 1,32 (m 62, алифатические протоны). Элементный анализ: Вычислено,: С 72,04; Н 12,73; N 2,21. Найдено, %: С 71,20; Н 12,41; 2-7. Используя меры методику примера 1 при употреблении 1,3 или 1 ,2-ди-О-(н-высшеалкил)-глицеринов в качестве исходных материаловR -0-СНо л I СН-01СНг1),,МИ (1) R -0-CHrj cн OLcH(i),н,i я. - о - сц 1 - о - си получают соединения, приведенные в табЛо 1. Пример 8. 1 ,3-Ди-О-(н-гексадецил) -2-0-(Z-аминоэтил)-глицерина гидрохлорид а) 1,3-Ди-О-(н-гексадецил)-2-О-(2-карбоксиэтил)-глицерин, Смесь 4,8 г 1 ,3-ди-О-(н-гексадецил) -2-0- (2-цианоэтил)-глицерина (8,1 ммоль), 50 мл концентрированной соляной кислоты и 50 мл муравьиной

кислоты перемешивают в течение 1б ч при нагревании до кипения с обратным холодильником, затем охлаждают и 3 раза экстрагируют 100 мл диэтилового эфира. Скомбинированный эфирный экстракт промывают 200 мл воды, осушают MgSO, отфильтровывают и упаривают в вакууме с получением tjS г 1,3 Ди-0-(н-гексадецил)-2-о-(2-карбоксиэтил)-глицерина в виде твердого вещества, которое очищают громатографией на силикагеле (элюирование толуол-этанолом) . Получают 3,5 г промежуточного продукта; выход 71%; т„пл„ 3-А5С.

ИК-спектр (СНС1з): см .

ЯМР-спектр (сое 1 з): о«- 3,93 (t, J 6 Гц, 2, ) и 2,65 (t, J 6 Гц, 2, -ОСНаСН 2.СООН).

б) 3,5 г 1,3-ди-О-(н-гексадецил)-2-0-(2-картоксиэтил)-глицерина (5,7 ммоль) растворяют в смеси 55 мл бензола и 5,89 г концентрированной серной кислоты„ Затем каплями добавляют 6,3 мл азотводородной кислоты (,б5 весД раствора в бензоле; 6,0 ммоль) и смесь перемешивают в течение 2 ч при комнатной температуре. Анализ с помощью тонкослойной хроматографии (тех) показывает приблизительно конверсию 2-карбоксиэтильного соединения. Каплями добавляют 6,3t мл азот во дородной кислоты Л5,б5 весД бензольного раствора; 6,0 ммоль) и реакционную смесь перемешивают еще в течение, 16 ч при 40С. В этом случае ТХС-анализ показывают по существу полное завершение реакции. Затем добавляют 50 мол воды и водную 2 н.гидроокись натрия, и результирующую смесь 3 раза экстрагируют 200 мл диэтилового эфира Скомбинированный эфирный экстракт осушают , фильтруют, насыщают газообразным хлористым водородом и упаривают в вакууме с получением твердого продукта, Твердое вещество очищают хроматографией на силикагеле (элюирование хлороформом-метанолом) и перекристаллизовывают из горячего этилацетата 570 мг конечного продукта; выход 16%; т„ пл. 79-804,

ЯМР-спектр (CDCIi,): сЛ 3,95 (т, 2, -OCHQ CHf NM о) и 3,22 (т, 2, -OCHi CUjNHj

Элементный анализ:

Вычислено, %: С 71,б2; Н 12,б7; N 2,26.

Найдено, %: С 70,90; Н 12,19; N 2,05.

П р и м е р 9. 1,3Ди-0-(н-гeкcaдeцил)-2-0- (З-этиламинопропил) -глицерина гидрохлорид„

а)1 ,3-Ди-0-(н-гeкcaдeцил)-2-0- (З-ацетамидопропил)-глицерин.

1 г гидрохлорида 1,3-ди-О-(н-гексадецил)-2-0-(3 ацетамидопропил)-глицерина (1,6 ммоль) добавляют к смеси 830 мг карбоната калия (6,0 ммоль) и 75 мл бензола. Затем добавляют 150 мг ацетилхлорида (1,9 ммоль) и результирующую смесь перемешивают в течение 1 ч при кипении с обратным холодильником. Добавляют 150 мг ацетилхлорида (1,9 ммоль) и реакционную смесь перемешивают еще в течение 1 ч при кипении с обратным холодильником. ТХС-анализ показывает полное завершение реакции. Реакционную смесь охлаждают, добавляют 75 мл воды и результирующую смесь трижды экстрагируют too мл диэтилового эфира„ Комбинированный эфирный экстракт осушают MgSO, фильтруют и упаривают в вакууме. Получают 800 г промежуточного соединения; выход 79% т.пл. 53-5 С. ИК-спектр (СНС1 з) : и 1670 см ЯМР-спектр (CDCIj): сг«-1 ,97 (s, 3,

-НСОСНэ).

б)700 г 1,3-ди-О-(н-гексадецил)-2-0-(З-ацетамидопропил)-глицерин (1,1 ммоль) растворяют в 100 мл диэтилового эфира и обрабатывают 500 мг литий-алюминий-гидрида (13 ммоль) Затем добавляют 100 мл воды и смесь дважды экстрагируют 100 мл диэтилового эфира. Комбинированный эфирный экстракт осушают MgSO,, , фильтруют, обрабатывают газообразным хлористым водородом и.упаривают в вакууме с получением Ц7 мг твердого продукта,, который перекристаллизовывают из горячего этилацетата, выход 66%;

т. пл, б1-б2°С.

ЯМР-спектр (CDC1J,): , (t, 3, -KHCHQ CHoj).

Элементный анализ:

Вычислено, %: С 72,51; Н 12,78; N 2,11.

Найдено, %: С 72, Н 12,56; N 2,03.

Примерю. 1 ,3-Ди-О-(н-гексадецил) -2-0-(З-изопропиламинопропил)-глицерина гидрохлорид.

а) 700 г 1 ,3-ди-О-(н-гексадецил)-2-0-(З-аминопропил)-глицерина гидрахлорида (1,1 ммоль) растворяют в растворе 1,05 мл уксусной кислоты; 350 мг ацетата натрия (k,3 ммоль) и 1 ,3 мл ацетонэо Небольшими порциями добавляют 1,25 г боргидрида натрия (33 ммоль) до тех пор,пока ТХСанализ не показывает, что израсходо вано все 3 аминопропиловое соединение. Затем реакционную смесь обрабатывают 20 мл водной 2 Но гидроокиси натрия и 20 мл воды и трижды экстрагируют 40 мл диэтилового эфира Комбинированный эфирный экстракт осушаю MgSO, , фильтруют, обрабатывают газообразным хлористым водородом, а затем упаривают в вакууме с получением 210 г твердого продукта, который перекристаллизовывают из горячего этилацетата. Твердое вещество содер жит около 1/2 моль НлО на 1 моль продукта, выход т„пл. , ЯМР-спектр (СОСЦ): о 1 ,42 (d, 6 -NHCH ). Элементный анализ: Вычислено, %; С 71.82; Н 12,79; N 2,04. Найдено, %: С 7Ь92; Н 12,46; N 1,94. Пример 1. 1,2-Ди-О-(н-гекс децил)(2-изопропиламиноэтил)-глицерина гидрохлоридо а) 1 ,2-Ди-О-(н-гексадецил)-3 0-аллил-глицерин1 ,78 г гидрида натрия (50 весД дисперсии в минеральном масле, 37 ммоль) добавляют при к раст вору 10 г 1,2-ди-О-(н-гексадецил)-глицерина (18,5 ммоль) в 100 мл М,М-диметилформамида и результирующий раствор перемешивают при в течение 20 мин Затем каплями добавляют 4,47 г аллилбромида (37 ммол и результирующую смесь перемешивают в течение 3 ч при 90 С, охлаждают, осторожно разбавляют 200 мл воды дл гашения реакции и экстрагируют диэт ловым эфиром (3x150 мл), Комбинированный эфирный экстракт промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия, осушают MgSO, фильтруют и упаривают в вакууме с получением ма лообразного продукта, который очища с .помощью хроматографии на силикагеле (элюирование бензолом) 10 г; выход 93 (масло). ЯМР-спектр (СОСЦ): ,Ь6-6,1б (т, Г, -OCHf CH CHfj) ; 5,25 (d дублетов, 2, -OCHnCH CHrj) и 4,03 (d, 2, -OCHfjCH CH,). : б) 1,2-Ди-0-(н-гeкcaд8цил)-3-0-фopмилмeтил-глицepин „ 90 мг тетроксида осмия (0,354 ммоль) добавляют к 4,5 г раствора 1,2-ди-О-(н-гексадецил)-3 0-аллил-глицерина (7,15 ммоль) в тетрагидрофуран/воде (3:1,120 мл) и результирующий раствор перемешивают в течение 5 мин при комнатной температуре. Затем добавляют 9 г периодата натрия (42 ммоль) и реакционный раствор перемешивают в течение 16 ч при комнатной температуре в атмосфере азота. Затем реакционный раствор разбавляют 150 мл воды и экстрагируют диэтиловым эфиром (2x150 мл). Комбинированный эфирный экстракт промывают 150 мл воды, осушают MgSO и упаривают в вакууме до маслообразного продукта, который очищают хроматографией на силикагеле (элюирование бензолом/этилацетатом), 2,6 г. Получают аморфное твердое вещество, выход ИК-спектр (CHCIci): 1735 ЯМР-спектр (СОС1з): ,38 (t, Гц, 1, -ОСН2 СНо) и 4,07 (d, J 1 Гц, 2, -ОСН(СНО). в) 0,1 г цианоборогидрида натрия (1,6 ммоль) добавляют к раствору 1,5 г 1,2-ди-О-(н-гексадецил)-3 0-формилметил-глицерина (2,6 ммоль) и 0,89 г изопропиламина (15 ммоль) в метаноле/тетрагидрофуране (1 :1 ,50 мл) и смесь перемешивают в течение 2 ч при комнатной температуре. Затем рН доводят до 6 добавлением 5 н.метанольной хлористоводородной кислоты, добавляют 0,1 г цианоборогидрида натрия (1,6 ммоль) и реакционную смесь затем перемешивают в течение еще 60 ч при комнатной температуре,фильтруют, обрабатывают 3 г воды, 1П мл гидроокиси натрия и 200 мл насыщенного водного раствора хлорида натрия и экстрагируют диэтиловым эфиром (2x150 мл)„ Комбинированный эфирный экстракт осушают MgSO, фильтруют и упаривают в вакууме с получением маслянистого твердого вещества, которое очищают хроматографией на силикагеле (элюирование бензолом/этанолом) и растворяют в метаноле. Раствор обрабатывают газообразным хлористым водородом и упаривают в вакууме с получением твердого вещества, которое перекристаллизовываот из этилацетата, получая 400 мг соединения, твердое вещество содержит около 1/4 моль НлО на 1 моль продукта, выход т„пл. 71-72°C. ЯМР-спектр (СОСЦ); сМ ,it2 (d, J 6 Гц, 6, -ЫНСН(СНз),). Элементный анализ: Вычислено, :С 72,02; Н 12,76; N 2,10. Найдено, %-. G 72,89; Н 12, N 2,09. Пример 12. 1,3-Ди-о-(н-гек-: садецил) -2-0-(4-аминобутил) -глицери- на гидрохлоридо а)1,3-Ди-О-(н-гeкcaдeцил)-2-0- (3 гидроксипропил) -глицерин. 6,5 мл борано-метилсульфидного (БМС) комплекста (68,5 ммоль) добавляют при к раствору 10,82 г 1,(н- гексадецил)-2-0-аллилглицерина (18,6 ммоль). Полученный аналогично примеру 11а в гексане результирующий раствор (190 мл) затем снова охлаждают до 0-5 Си для разло жения остаточного БМС каплями добавляют 17,3 мл этанола. Реакционный раствор затем обрабатывают 13 мл вод ной Зн. гидроокиси натрия и 30 вес. водной перекиси водорода (11 мл), перемешивают в течение 16 ч при кипении с обратным холодильником, охлаждают и выливают в ледяную воду, содержащую бисульфит натрия. Раствор в ледяной воде перемешивают до тех пор, пока он не дает отрицательную крахмало-иодидную реакцию на перекис и затем экстрагируют диэтиловым эфиром (3x200 мл). Комбинированный эфир ный экстракт промывают 200 мл воды, промывают 200 мл насыщенного раствора хлорида натрия, осушают MgS04, фильтруют и упаривают в вакууме. Результирующий продукт очищают хр матографией на силикагеле (эллюирование бензолом/этанолом), 5 г; выход 5%; т.пл. 29С. ЯМР-спектр (CDC12,): сА-3,80 (t, J 5 Гц, 2, -OCHfiCHQ CH OH ) и 3,75 (t, J 5 Гц, 2, -CHQ CH-j CHijpH). б)1 ,3-Ди-0-(н-гeкcaдeцил)-2-OГЗ- (п-т:озилокси)-пропил -глицерин, 8,0 г 1,3-ди-О-(н-гексадецил)-2-0 -(З-гидроксипропил)-глицерина (13, ммоль) добавляют при ЮС к 5,25 г раствора н-толуолсульфонилхлорида (27,5 ммоль) и 10 мл пиридин в 200 мл метиленхлорида и смесь пере мешивают в течение 60 ч при комнатной температуре. Затем добавляют 200 мл воды, разделяют метиленхлорид нуюи водную фазы и последнюю экстрагируют метиленхлоридом (2x150 мл). Три метиленхлоридных слоя комбиниру8, 0 ;ют, промывают водо11 С7хТ5СГмл), осушают MgS04, фильтруют и упаривают в вакууме Результирующий тозилат очи щают хроматографией на силикагеле (элюирование бензолом), 3,0 г; выход 30, масло.i ИК-спектр (СНС1 э,): 1130 и 1350 смИ ЯМР-спектр (СОСЦ): ,53 (q, ,: протоны на фенильном кольце); 4,15 (t, 2, -SO CHaCHuO-)} 3,63 (t, 2, -SO CHaCHijCHiiO-); 3, (m, 9, -OCH(CHQpCHiC 5H3 Q.); 2,t5 (s, 3, , Аг-СНз); 1,90 (m, 2, -SOgCH CH CHfiO-)И 0,90-1,50 (m, 62, алифатические ; протоны).; в)1,3 Ди-0-(н-гексадецил)-2-о- ; -(З-Цианопропия)-глицерин, 3,0 г 1,3-Ди-0-(н-гeкcaдeцил)-2-0-3-(п-тoзилoкcи)-пpoпил-глицepинa (4,0 ммоль) растворяют в 0,5 г раствора цианида натрия (610 ммоль) а 50 мл М,М-диметилформамида и результирующий раствор переме1вивают в течение 16 ч при 80С, охлаждают, разбавляют 100 мл вода и экстрагируют диэтиловым эфиром (3x100 мл). Комбинированный эфирный экстракт промывают последовательно 1н. соляной кислотой (3x75 мл), насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (3x75 мг} , 75 мл воды и 75 мл насыщенного водного раствора хлорида натрия, затем осушают MgSO, фильтруют и упаривают в вакууме с получением 2,0 г аморфного твердого вещества, которое используют на следующей стадии без ; дальнейшей очистки; выход 83%. : ИК-спектр (CHCI,): 2250 г)800 мг литий-алюминий-гидрида (21 ммоль) добавляют к 2,0 г раствора 1,3-ДИ-0-(н-гeкcaдeцил)-2-0-(3-циaнoпpoпил)-глицepинa О,3 ммоль) в ТОО мл диэtилoвoгo эфира и смесь перемешивают в течение 60 ч при комнатной температуре. Осторожно добавляют количество воды, достаточное , для гашения реакции, с последующим добавлением дополнительных 100 мл водыо Результирующую смесь переме- ; шивают в течение 1 ч при комнатной температуре, а затем экстрагируют диэтиловым эфиром (3x100 мл). Комбинированный эфирный экстракт npof jeaют насыщенным водным раствором хлорида натрия (3x75 мл), осушают MgSO, фильтруют и упаривают в вакууме до : маслообразного продукта, который очищают хроматографией на силикагеле (элюирование бензолом/этанолом) и 11 ; затем растворяют в этаноле. Раствор обрабатывают газообразным хлористым водородом и после этого упаривают в вакууме с получением Ц г твердого вещества, которое перекристаллизоБывают из этилацетата; выход т.пло ,5 Со ЯМР-спектр (СОСЬ):сАЗ,б7 (t, 2, -OCHaCHiCHaCH NHQ); 3,55 (m, 9, -ОСНГСНаОСН(1С-,5Но)| ; 3,10 (t,2, -OCHi CHQ CH/, 1,50 - 2,00 (m, i, -COHQ CH CHriCH NH) и 0,80-1,5 (m, 62,алифатические протоны). Элементный анализ: С 72,23; Н 12,74; Вычислено, N 2,16. С 62,53; Н 12, Найдено, % N 2,10. Пример 13. 1,2-Ди-0-(н-гекс децил)(3 аминометилбензил)-глицерина гидрохлорид. а)1 ,2-Ди-О-(н-гексадецил) (3-цианобензил)-глицерин 1,056 г гидрида натрия (50 вес. дисперсии в минеральном масле, 22 ммоль) добавляют 9,73 г раствора 1,2-ди-О-(н-гексадецил)-глицерина (18 ммоль) в 150 мл тетрагидрофуране и результирующий раствор перемешиваю в течение 20 мин при комнатной температуре в атмосфере азота. Добавляют ,0 г м-цианобензилбромида (20 ммоль) и реакционную смесь перемешивают в течение ночи при комнатной температуре в атмосфере азота. Затем осторожно добавляют 200 мл воды и результирующую смесь экстраги руют этилацетатом (3x150 мл). Комбинированный этилацетатный экстракт осушают MgSO, фильтруют и упаривают в вакууме с получением 12 г масла, которое очищают хроматографией на силикагеле (элюирование бензолом/ге саном), 8,0 г; выход 68, масло. ИК-спектр .(СНСЦ): 230 смЛ б)1,0 г раствора 1 ,2-ди-О-(н-ге садецил)-3-0-(ЗЦианобензил)-глицерина (1,5 ммоль) в 10 мл диэтилового эфира медленно добавляют в атмосфере азота к 0,057 г суспензии литий-алю миний-гидрида (1,5 ммоль) в tO мл эфира и результирующую смесь переме шивают в течение 1 ч при кипении с обратным холодильником в атмосфере азота Затем охлаждают, осторожно д бавляли 50 мл воды и смесь экстраги руют диэтиловым эфиром (3x50 мл). К бинированный эфирный экстрат осушаю MgS04, фильтруют и упаривают в ваку е до масла, которое очищают хроматорафией на силикагеле (элюирование ензолом/этанолом) , а затем растворят в этилацетате Раствор обрабатыают газообразным хлористым водородом, затем упаривают в вакууме с полуением 220 г твердого вещества, которое перекристаллизовывают из этил88-904. ацетата; выход т„пл„ Элементный анализ: : С 7, Н 11,87; Вычислено, N2,01. С 7А,35; Н 11, Найдено, % N 2,15. Н-25« Аналогично Примеры 13 при использоваметодике примера нии в качестве исходных материалов подходящих 1,3- или 1,2-0-(-н-высшеалкил или алкенил)-глицерина и цианоензилбромидаB.iO- СНз CHg-O-CHg В.20--СВ2 СН2 снгШг RO-CH R.20-CH2 приведенные в соединения, получают табЛо 2. 1 ,2-Ди-0-(н-гекПример 2б, садецил)-3-0-(-аминометилфенил)-глицерина гидрохлориДо а)1,2-Ди-О-(и-гексадецил)-З-О- (п-тозил)-глицерин. Аналогично методике примера 136 соединение получено по реакции 1,2-ди-0-(н-гексадецил)-глицерина с п-толуолсульфонилхлоридом. Очистку проводят перекристаллизацией из этилацетата; т.пл. . ИК-спектр (СНСЬ): 1360 и 1180 б)1,2-Ди-О- н-гексадецил -3-0-(4-диаиофенил)- глицерин, Смесь 1,4 г 1,2-ди-О-(н-гексадецил)-3-0-(п-тозил)-глицерина (2,0 ммоль); 0,5 г 4-цианофенилята натрия ( ммоль) и 100 мл ксилола перемешивают в течение 16 ч при кипении с обратным холодильником. Так как реакция не доходит до конца, ксилол отгоняют и заменяют 100 мл N,N-диметилформамида и результирующий раствор перемешивают еще в течение 1б ч при . Реакционный раствор затем охлаждают, разбавляют 100 мл 3 воды и экстрагируют диэтиловым эфир (2x100 мл). Комбинированный эфирный экстракт промывают последовательно 100 мл ЗНо соляной кислоты (10 весД 100 мл водного раствора бикарбоната натрия и 100 мл воды, осушают MgSOu фильтруют и упаривают в вакууме до масла, которое очищают хроматографией на силикагеле (элюирование бен золом), 0,65 г; выход 50%; т,пло 53-55 С„ ИК-спектр (CHCIj): 2210 см-,. в) 0,6 г 1,2-ди-0-(н-гeкcaдeцил) -3-o-( -дианофенил)-гли1дерина (0,93 ммоль) добавляют к 0,3 г суспензии литий-алюминий-гидрида (7,9 ммоль) в 25 мл диэтилового эфи ра и результирующую смесь перемешивают в течение 30 мин при комнатной температуре. Затем осторожно добавл ют 25 мл воды, разделяют эфирную и водную фазы и последнюю экстрагирую эфиром (3x25 мл) и 25 мл этилацетат Пять органических экстрактов комбинируют, осушают MgSO, фмльтруют и упаривают в вакууме до масла, которо растворяют в диэтиловом эфире. Раст вор обрабатывают газообразным хлори тым водородом, что вызывает осаждение 0,1 г твердого вещества, выход б , т.пл. 110-112°С. ЯМР-спектр (CDCI): 0,02 (5,2, CH/|,NH(2). Элементный анализ: 5: С 73,91; Н 11,81; Вычислено, N 2,05. С 73,62; Н 11,71; Найдено, % N 2,k. Примеры 27-29. Аналогично методике примера 26, исходя из подходящего тозилата (полученного аналогично примеру 2ба) и цианофеноля та натрия Л-гексвЭецил-О-СНа I /О СН H-2e/rcsfe« ил-0--CHg у-гексаЗёцил - СНв-О II О - СН Н-гмсо еиил-О-СН получают соединения, приведенные в табЛо 3. Пример 30, 1 ,2-Ди-0-(н-гексадецил) (3-аминопропил)ч)енилгли церина гидрохлорид. сВгШ Аналогично методике примера 2б соединение получают при использовании t-(2-цианоэтил)-фенолята натрия. Т.пл, 153-155С. Элементный анализ: Вычислено, %:С. 7.37; Н 11,91; N 1,97. Найдено, %: С 7,13; Н N 2,08. Пример 31. 1 ,2-Ди-о-(н-гек-: садецил)-3-0-(З-изопропиламино-2-гидроксипропил)-глицерина гидрохлорид. а) 1,2-Ди-О-(н-гексадецил -3-0- (.2 ,3-эпоксипропил)-глицерин. Раствор 5,8 г 1,2-ди-О-(н-гекса- , децил)-3-аллил-глицерина (10,0 ммоль) и 1,86,г м-хлорпербензойной кислоты (10,8 ммоль) в 50 мл бензола перемешивают в течение 16 ч при нагреве до кипения с обратным холодильником. Реакционную смесь затем охлаждают, обрабатывают 10 мл насыщенного водного раствора бисульфита натрия и 50 мл насыщенного водного раствора бикарбоната натрия и экстрагируют эфиром (2x50 мл), Комбинированный эфирный экстракт промывают ТОО мл воды, 100 мл насыщенного водного раствора натрия, осушают MgSO., фильтруют и упаривают в вакууме до маслообразного продукта (4,9%, выход 82%; ЯМР-анализ показал отсутствие олефиновых протонов), который очищают хроматографией на силикагеле (элюирование бензолом/этил ацетатом), +,2 г; выход 70%, в ходе выстаивания масло затвердевало. б) 2,0 г раствора 1,2-ди-О-(н-гексадецил)-3-0-(2,3-эпоксипропил)-глицерина (3,35 ммоль) в 0 мл изопров течение 16 ч ияамина нагревают ри 100 С в бомбе из нержавеющей стаи , охлаждают, концентрируют в вакуме и растворяют в 100 мл диэтилового фира. Эфирный раствор промывают 100 мл 1 Н.соляной кислотой, осушают gSO, фильтруют, обрабатывают древесным углем, снова фильтруют, а заем охлаждают погружением колбы в ванну сухой лед-ацетон, в результате его образуется осадок. Фильтрацией выделяют 1,3 г осадка и очищают хроатографией на силикагеле (элюироваие бензолом/этанолом), 720 мл. Полуают твердое вещество, содержащее коло 1/2 моль ИпО на 1 моль продука, выход 31%; То пл. 55-57 С. ЯМР-спектр (CDClj): сА-1 ,+5 (d, 6 -NHCH ,). Элементный анализ: Вычислено, I: С 70,19; Н 12,50; N 2,00. Найдено, %: С 70,10; Н 12,19; N 1,87. Примеры 32-25. Аналогично методике примера 31 путем реагирования подходящего 2,3-эпоксида {полу ценного аналогично примеру 31а) |д алкиламина Я-гексаЗем л -О-СНя Н ov I CHft-OH-Oy f4-N Н-2ексо е4 м/1-O-CH 1Ч н-гексс75е(и/1 - СН -О-tH WCHQ NHR, Н-гексадеиил- - Щ получают соединения, приведенные в табл. k. Пример Збо 1,2-Ди-0-(н-гексадецил)-3-0-(З-амино-2-гидроксипропил)-глицерина гидрохлорид а)1,2-Ди-О-(н-гексадецил)-З-О-(З-азидо-2-гидроксипропил)-глицерин Раствор 0,5 г азида натрия (,7,7 ммо . в 5 мл воды добавляют к нагревающемуся до кипения с обратным холодиль,НИКОМ раствору г .1 ,2-ди-О-(н-гек садецил)-З-о-(2,3-эпоксипропил)-глицерина (5,5 ммоль) в 100 мл 1 ,-диок сана, Результирующий раствор перемешивают при кипении с обратным холодильником в течение 16 ч„ Так как реакция не завершена, добавляют 0,5 азида натрия (7,7 ммоль) и реакционную смесь перемешивают при кипении с обратным холодильником еще в течение 16 ч. Реакционный раствор зате охлаждают, концентрируют в вакууме, разбавляют 100 мл воды и экстрагирую эфиром (3x100 мл). Комбинированный эфирный экстрат промывают 100 мл .воды, осушают MgSO, фильтруют и упа ривают в вакууме до получения 2,2 г маслообразного продукта; выход б2%„ ИК-спектр (СНСЦ): 2105 смЛ б)300 мг литий-алюминий-гидрида (7,9 ммоль) добавляют к раствору 2,2 1,2-ди-О-(н-гексадецил)-З-О-(З-азидо -2-гидроксипропил)-глицерина (3,+ ммо в 100 мл эфира и результирующую смес перемешивают в течение 1 ч при комнатной температуре, 5 мл этанола и 200 мл воды добавляют для тушения реакции, и смесь затем экстрагируют эфиром (2x100 мл). Комбинированный эфирный экстракт осушают МдЗОд.,фильтруют и упаривают в вакууме. Результирующий продукт очищают хроматографией на силикагеле (элюирование бензолом/этанолом) , а затем преобразовывают в гидрохлоридную соль о Получают 800 мг твердого вещества, содержащегося около 2 моль на 1 моль продукта; выход k%: т.пл. U9-150C. ЯИР-спектр (СОС1з). ,QQ - i,35 (m, 1, -OCHr CHPCHCHQ NHj); 3,33-3,73 (m, 11, C.,5H3 CHri OCflQCHQpCfl|: C 5f1jjCH20CHQ) 3,03-3,25 (m, 2, -OCllfj CHOHCH/ NH) и 0 ,87-1 ,67 .(п1,б2 , алифатические протоны) . Элементный анализ: Вычислено, X: С 66,8; Н 12,33; N 2,0i. Найдено, I: С 66,68; Н 11,85; N 2,02. Пример 37о 1 ,3-Ди-О-(н-гексадецил)-2-0-(3 амино-2-гидроксипропил)-глицерин. Аналогично методике примера Зб из 1,3-ДИ-О-(н-гексадецил)-2-0-(2,3-эпоксипропил)-глицерина (получено аналогично примеру 31 а) получают свободное основание; ТоПл, 61-63 С. Элементный анализ: Вычислено, %: С ,3; Н 12,9б; N 2,28. Найдено, I: С ,9; Н 13,10; N 2,12. Пример 38о 1,2-Ди-0-(н-гексадецил)(2-аминопропил)-глицерина гидрохлорид„ а)1,2-Ди-О-(н-гексадецил)-3-0- 2-(п-тозилокси)-пропил -глицерин Аналогично методике, описанной в примере 12 1,2-ди-О-(н-гексадецил)-3-о-аллил-глицерин вводят в реакцию с ВМС и результирующие 2-гидроксипропильное и 3-гидроксипропильное соединения преобразовывают до их соответственных тазилатов„ На этой стадии разделения не производят, так как смесь тозилатов непосредственно используют на следующей стадии. б)1,2-Ди-О-(н-гексадецил)-З-О- (2-азидопропил) -глицерин., 3,0 г результирующей смеси тозилатов С,О ммоль)растворяют в 50 мл N,N-димeтилaцeтaмидa и обрабатывают раствором 0,326 г азида натрия (5,0 ммоль) в 5 мл воды в течение 16 ц при 90°С. Реакционный раствор затем охлаждают, разбавляют 200 мл воды и экстрагируют эфиром (2x150 мл Комбинированный эфирный экстракт промывают водой , осушают MgSO,фильт руют и упаривают в вакууме до получения 2 г масла (выход ИК-спект (),) 2100 ) - смеси 2-азидопропилового и Зззидопропилового сое динений, которые без дальнейшей очистки используют на следующей стадии в) 2 г результирующей смеси азидо (3,2 ммоль) растворяют в 100 мл эфир обрабатывают 0, г литий-алюминий-гидрида (10,5 ммоль) и продолжают перемешивать в течение 2 ч при комнатной температуре. Избыток гидрида разлагают осторожным добавлением 10 мл этанола и 150 мл воды Затем смесь экстрагируют эфиром (2x100 мл) Комбинированный эфирный экстракт осушают МдЗОф, фильтруют и концентрируют в вакууме до получения 1,8 г масла, которое очищают хроматографией на силикагеле (элюирооание бензолом/этанолом) , а затем преобразуют до гидрохлоридной соли растворением и обработкой газообразным хлористым водородом. Соль перекристаллизовываю из этилацетата и получают 0,21 г твердого вещества, содержащего около 1/2 моль на 1 моль названного продукта; выход 10%; т.пл. 56-58 00 Злементый анализ: Вычислено, % С 71,03; Н 12,70; N 2,18. Найдено, %: С 7Ы1; Н 12,91 ; N 2,16. Пример 39-. 1 ,2-Ди-0-(н-октадецил)-3-0-(2-аминопропил)-глицерина гидрохлорид. Аналогично методике, описанной в примере 38 а, 1,2-ди-О-(н-октадецил)(2-гидроксипропил)-глице,рин получают из 1,2-ди-О-(н-октадецил)-3-0-аллил-глицеринао Из 1,2-ди -0-(н-октадецил)-3-0-(2-гидроксипро пил) -глицерина путем, аналогичным описанному в примере 38 получают тве дое вещество, содержащее около 1 мол на 1 моль продукта; т,пло 65674. Элементный анализ: Вычислено, % С 71,19; Н 12,80; N 1,98. Найдено, I: С 71 ,12; Н 12,52; N 1,93. Пример kQ. 1,2-Ди-0-(н-гексадецил)-3-0- 3-(1-гидрокси-2-трет18-бутиламиноэтил)-бензил -глицерина гидрохлорид. а) 1,2-Ди-О-(н-гексадецил)-З-О-(З-формилбензил)-глицерин. 5 г раствора 1,2-ди-О-(н-гексадецил)-3-0-(3 дианобензил)-глицерина (7,6 ммоль). и 1,17 г диизобутилалюминийгидрида (8,2 ммоль) в 25 мл бензола перемешивают в течение 16 ч , при температуре окружающей среды. Реакционную смесь обрабатывают i,22 мл метанола и 2 ,5 мл воды и перемешивают при разложении непрореагировавшего гидрида, а затем фипьтруют и экстрагируют бензолом (3x25 мл). Комбинированный бензольный экстракт осушают , фильтруют и упаривают в вакууме до масла, которое очищают хроматографией на силикагеле (элюирование бензолом), 2,0 г; выход lO, масло. ИК-спектр (СНСЦ) : 1700 см-. ЯМР-спектр (CDClg): tAlO, (s,1, -ArCHiiO). б) 1 ,2-Ди-О-(н-гексадецил)-З-О-ГЗ-(1 ,2-эпоксиэтил)-бензил -глицерин. Суспензию 3,23 г гидрида натрия (57 вес.% дисперсии в минеральном масле, 67 ммоль) в 117 мл диметилсульфоксида нагревают в атмосфере азота при 70-75°С до тех пор, пока не прекращается выделение водорода (45 мин) . Добавляют 88 мл тетрагидрофурана и смесь охлаждают до . Затем порциями добавляют г триметилсульфонийиодида (67 ммоль) с последующим быстрым добавлением раствора 7,0 г 1,2-ди-О-(н-гексадецил)-3-0-(3-формилбензил)-глицерина (10,6 ммоль) в 58мл тетрагидрофурана. Результирующую смесь перемешивают в течение 1б ч прл комнатной температуре, выливают в 200 мл воды и экстрагируют эфиром (3x180 мл). Комбинированный эфирный экстракт промывают водой (2x100 мл) и 100 мл насыщенного водного раствора . хлорида натрия, осушают MgSO, фильтруют И упаривают в вакууме до получения 7 г масла (выход 9о), которое достаточно чисто для использования на следующей стадии. в) Смесь 30 мл трет-бутиламина и 2 г 1,2-ди-О-(н-гексадецил)-3-0-3 -(1,2-эпоксиэтил)-бензил-глицерина (3,0 ммоль) нагревают в течение 9 ч при в стальной бомбе. Реакционную смесь охлаждают, трет-бутиламин удаляют отгонкой в вакууме, и результирующее масло ощичают хроматографией на силикагеле (элюирование бензолом/этанолом) , а затем растворяют. Раствор насыщают газообразным хлорис тым водородом, а затем упаривают в вакууме с получением твердого вещест ва, которое перекристаллизовывают из этилацетата. Получают бЗО мг твердог вещества, содержащего около 1 моль Нг):0 на 1 моль продукта, выход 27%; т. пл. 49-51°С. ЯМР-спектр (CDCla) : с I, (s,9, -C,jCH). Элементный анализ: Вычислено, %: С 71,99; Н 11,83; N 1,75. Найдено, %: С 71,86; И 11,30; N 1,69. Пример Л1. 1,3-Ди-О-(н-гекс децил)-2-0-ГЗ- (1-гидрокси-2-трет-бутиламиноэтил)-бензил -глицерина гидр хлорид. Аналогично методике, описанной в примере tO, 1 , 3-ДИ-О-(н-гексадецил)-2-0-(З-Цианобензил)-глицерин, полученный аналогично методике примера It, преобразовывают до 1,3-ди-0-(н-гексадецил)-2-0- 3-(1,2-эноксиэтил) -бензил -глицерина. По реакции указанного эпоксидного соединения с трет-бутиламином с использованием методики примера Ц8в получают твердо вещество, содержащее около 1 моль на 1 моль продукта; т.пл. . Элементный анализ: Вычислено, %: С 71,99; Н 11,83; N 1,75. Найдено, %: С 72,Об; Н 11,3; N 1,71. Пример 2, 1,2-Ди-0-( н-гекс децил)-3-0-13-гидрокси- (2-изопропил аминоэтил)-бензил -глицерина гидрохлорид . Аналогично методике, описанной в примере Ов, при использовании изопропиламина вместо трет-бутиламина п лучают твердое вещество, содержащее около З/ моль на 1 моль продукт т.пл. 53-55°С. Элементный анализ; Вычислено,: С II,М; И 11,79; N 1,79. Найдено, %: С 72,11 ; Н 11,55; N 1,92. П р и jv е р kj,. 1 - 2,3-Ди(н-гек садецилокси) -пропил - -аминометил-А-феНИЛпиперидина дигидрохлорид. 20 а),(н-гексадецилокси)-пропил - -циано- -фенилпиперидин . Смесь 6,96 г 1,2-ди-0-(н-гексадецил)-3-0-(п-тозил)-глицерина (10 ммоль); 1.13 г 4-диано-4-фенилпиперидина гидрохлорида (10 ммоль); 2 мл триэтиламина и «О мл N,N-димeтилформамида перемешивают в течение 1б ч при 95-100 С. Реакционную смесь затем охлаждают , разбавляют 200 мл воды и экстрагируют этилацетатом (3x150 мл). Комбинированный этилацетатный экстракт осушают MgS04. Фильтруют и упаривают в вакууме до получения 6 г масла, которое очищают хроматогра | 1ей в колонке (злюирование бензолом/этилацетатом). Ж-спектр (СИСЦ): 2220 cMl б)Раствор 2,5 г 1-Г2,3-ди-(н-гексадецилокси)-пропил - -циано- -фенилпиперидина (3,6 ммоль) в 100 мл диЭТИЛОВОГО эфира обрабатывают 0,4 г литий-алюминий-гидрида (10,5 ммоль) и результирующую смесь перемешивают в течение 4 ч при комнатной температуре. Реакционную смесь осторожно обрабатывают 100 мл воды и экстрагируют эфиром (3x100 мл). Комбинированный эфирный экстракт осушают MgSQj, фильтруют и упаривают в вакууме до масла, которое очищают хроматографией на силикагеле (элюирование бензолом/этанолом), а затем растворяют. Раствор обрабатывают газообразным хлористым водородом, а затем упаривают в вакууме с получением твердого вещества, которое перекристаллизовывают из этилацетата и получают 1,1 г твердого вещества, содержащего около З/ моль на 1 моль продукта; выход т.пл. 132-13+°С. Элементный анализ: Вычислено, %: С 70,60; Н 11,53; N 3,50. Найдено, %: С lQ,lk; Н 11,35; Примеры . Аналогично методике, описанной в примере 43, исходя из подходящего 1,2-ди-0-(н-алкил или алкенил)(п-тозил)-глицеринаR - О - СНJ R - О - СН полученного по методике примера 2ба, получают соединения, представленные в табл. 5. 21 Соединения, полученные предяагаемым способом, проявляют противовирус ную активность по отношению к широко му диапазону разновидностей вирусов in vivo в организме млекопитающих и in vitro для культур тканей млекопитающих. По меньшей мере в значительной части эта активность связана со способностью указанных соединений индуцировать выработку интерферона в клетках, т.е. эндогенного интерферона. Пример 47. Активность in vi 113-ДИ-О-(н-гексадецил)-2-0-(З-амино пропил)-глицерина гидрохлорида в отношении ЭМК-вируса. Препарат в виде эмульсии получают путем сплавления и смешивания равных частей названного соединения, полисорбата-80 и глицерина с последующим диспергированием смеси в горячей воде при интенсивном перемешивании. Препарат затем доводят до окончатель ных концентраций добавлением О,1 Н хлорида натрия и 0,01 М фосфата натрия, рН 7. Дальнейшее разбавление производят буферным раствором рН 7 смесью 0,1 М хлористого натрия и 0,01 М фосфата натрия. Трем группам по десять самок белы мышей (вес тела 20-25 г) внутрибрюши но делают инъекции 0,5 мл препарата, содержащего дозировки 1,5; 5 и 15 мг названного соединения на 1 кг веса тела, соответственно. Четвертой, контрольной, группе мышей инъекций не делают. Спустя 18-24 ч, всем четырем группам делают подкожно инъекции 0,2 мл препарата, содержащего 20-кратную дозу 105овируса энцифаломиокардита (ЭМК). На протяжении 10 сут. регистрируют данные на выживаемости и рассчитывают коэффициент относительной выживаемости Sr, приведенный в табл. 6. Прот(твовирусная активность выражается как относительная выживаемост Sr в экспериментальных группах в сопоставлении с контрольной на десятые сутки после заражения и определяется по формуле -to s X Pi X X 100, 100+100 коэффициент относительной где Sr выживаемости;8 s процент выживания спустя десять суток в экспериментальной группе; число выживших особей на х i-e.сутки в экспериментальной группе; 2i - число выживших особей на i-e сутки в контрольной группе. Примеры . В соответствии с методикой примера 7 проводят определение активности in vivo в отношении ЭМК-вируса для соединений, приведенных в табл.7. Пример 7К Снижение выхода вируса на человеческих полипозных клетках in vitro под действием 1,3-ди-0-(н-гексадецил)-2-О-(З-аминопропил)-глицерина гидрохлорида. Среда для выращивания получена дополнением 100 мл минимальной питательной среды Игла, 2 мл концентрированного 100х раствора антибиотикафунгицида, 1 мл 200 М раствора глютамина, 1 мл концентрированного 100 X раствора несущественных аминокислот, 1 мл 100 мН раствора натриевой соли пировиноградной кислоты и термоинактивированной сыворотксж плода стельной коробы. На каждую ячейку 9б-ячеечных микротитровальных чашей высевают около 50 000 человеческих полипозных клеток носовой полости, суспендированных в 0,2 мл среды для выращивания. Чашки затем инкубируют в течение 8-10 сут при 37°С в атмосфере 5% COij для формирования моносяоев клеток. К концу 8-10 суточного периода выращивания клеток сливающиеся монослои на чашках промывают четырехкратно фосфатным буфером и непосредственно после этогообрабатывают 0,2 мл на ячейку поддерживающей среда, содержащей 10; 5,0; t,0; 0,5; 0,1 и о мкг/мл названного соединения, соответственно. Поддерживающая среда идентична, среде для выращивания, за исключением того, что уровень содержания сыворотки плода стельной коровы сое-; тавляет 2%. Чашки инкубируют в течение еще 18 ч при 37°С, и монослои затем четырехкратно промывают фосфатным буфером для удаления названного соединения, контактируют с составом, содержащим приблизительно 1000-кратную дозу TCIjQ, вируса пузырькового стоматита (ВПС) в течение 2 ч при ЗТС периода адсорбции, четырехкрат но промывают фосфатным буфером для удаления неадсорбированных вирусных частиц и вновь наполняют 0,2 мл поддерживающей среды на ячейку. Затем чашки инкубируют в течение 7 ч при и с каждой чашки снимают культурную среду с 5-8 ячеек-дубликатов, хранят в замороженном виде в пробирках, а затем титруют на опрёделение количества инфекционного ви руса, присутствующего в микротитровальных чашках мышинных фибробласто Мышинные (L-929) культуры подсчитывают под микроскопом и анализируют три-четыре дня спустя с выявлением следующего процентного снижения выхода вирусов (относительно контроля для пяти концентраций испытанного соединения; Процентное снижение выхода вирус показано в табл. 0. Примеры 72-99. С использо ванием методики, описанной в примере 71 . снижение выхода вируса на . человеческих полипозных клетках п vitro определяют для соединений, пе речисленных в таЪл. 9. Пример 100. Способность 1, -ди-0-(н-гексадецил)-2-0-(З-аминопро пил)-глицерина гидрохлорида индукцировать циркуляцию интерферона. Смесь равных весов соединения, полисорбата-80 и глицерина сплавляют, а затем гомогенизируют в горячем 0,Н М хлориде натрия, содержащем 0,01 М фосфат натрия (фосфатный буферный солевой раствор - ФБС), рН 7. Результирующую эмульсию типа масло в воде легко разбавляют перед употреблением ФБС-раствором. Самкам белых мышей (весом тела 2026 г) внутрибрюшинно делают инъекцию 0,5 мл эмульсии(Содержащей 25 мг исследуемого соединения на 1 кг веса тела. У четырех мышей отбирают и накапливают образцы плазмы через 8,12, 16 и 20 ч после инъекции. Последовательно разбавляя в среде Лейбовина L-15t содержащей сыворотку плода стельной коровы, образцы инкубируют в микротитровальных чашках на протяжении ночи при 37°С, на сливающихся монослоях мышинных (L-929) фиброплас тов. Монослои затем промывают депротеинизированной средой, контактируют с 10-кратной ТС 1 Dg-p вируса пузырькового стоматита (ВПС) на протяжении одночасового периода адсорбции при 37°С , промывают, вторично обрабатыват средой L-15i содержащей сыворотку плода стельной коровы, а затем инкубируют снова при в течение ч. Культуры L-929 затем подсчитывают под микроскопом на предмет выявления вирусной цитопатологии и анализируют с целью определения по уровню содержания интерферона в плазме обратной величины разбавления плазмы, обеспечивающего 50%-ную защиту монослоев L-929. Второй эксперимент проводят в соответствии с описанной методикой, исключая то, что мышам делают инъекцию 10 мг исследуемого соединения на 1 кг веса тела и у четырех мышей отбирают образцы внутрибрюшинной жидкости с их накоплением через 6,9 и 12 ч после инъекции. Образцы отбирают путем обнажения диафрагмы, инъекции 1 мл сбалансированного солевого раствора Ханка, содержащего 100 ед/мл пеницилина и 100 мкг/мл стрептомицина, в брюшную полость, короткого массажа живота и засасывания внутрибрюшинной жидкости. Результаты приведены в табл. 10 Примеры 1Г 1-105« Используя методику.описанную в примере 100, определяют способность индуцировать циркуляцию интерферона для соединений, приведенных в табл. 11. Пример 106 о Усилие под действием 1,3-ди-О-(н-гексадецил)-2-0-(З-аминопропил)-глицерина гидрохлорида индуцированной полиинозиновой-полицитидиловой кислотой (поли 1:1) клеточной резистивности в отношении вирусной инфекции„ Среда для выращивания получена дополнением 100 мл минимальной пита тельной среды Игла 2 мл ЮОх концентрированного антибиотик-фунгицидного раствора, 1 мл 200 мМ раствора глютамина и 5 термоинактивированной сыворотки плода стельной коровы. Мышиные фибробласты L-929 суспендируют в среде для выращивания, и каждую ячейку 9б-ячеечных микротитровальных чашей засевают 0,2 мл указанной суспензии, содержащими 20 00030 000 клеток Чашки инкубируют в течение 2-Ц ч при 37°С в атмосфере S% для формирования монослоев клеток. Чашки четырехкратно промывают фосфатным буфером непосредственно Перед обработкой.

Полиинозиновую-полицитидиловую кислоту (поли 1:1) подготавливают с концентрацией 5,0; 1,0; 0,2 и 0,04 мкг/мл в описанной среде без телячей сыворотки. 0,1 мм каждого разбавления комбинируют на решетчатой конструкции на монослоях клеток L-929 с 0,1 мл разбавлениями, содержащими 20,0; 4,0; 0,8; О,16 и 0,032 мкг исследуемого соединения на 1 мл бессывороточной среды. Контрольные ячейки заполняют только либо поли (1:СУ, либо названным соединением. Чашки инкубируют в течение 6 ч при в атмосфере 5% COQ, четырехкратно промывают фосфатным буфером, и снова заполняют 0,1 мл на ячейку среды для .выращивания, содержащей 2% сыворотки плода стельной коровы. Спуся 18 ч инкубирования производят подсчет с целью определения токсичности, а затем заполняют ячейки 0,1 мл на ячейку суспензии вируса пузырькового стоматита, содержащей 10-30-кратную дозу ТС150 Чашки инкубируют в течение еще 3-4 сут, а затем под микроскопом подсчитывают цитопатогенныи эффект (ЦПЭ). Защищенные от вирусной инфекции клетки не характеризуются наличием ДПЭ. Определяют минимальную защитную дозу (МЗД)для поли (1:С), а также величину усиления противовирусной активности, вызванного комбинированием с исследуемым соединением и зарегистрированную для каждого разбавления соединения.

Усиление индуцированной поли (I.C) клеточной резистивности в отношении вирусной инфекции под действием соединения приведено в табл. 12.

Примечание: комбинирование поли (1:С) с соединением обеспечивает тот же противовирусный эффект, что и увеличение концентрации поли (1:С), указанное по кратности.

Примеры 107-132, С использованием методики, описанной в примере 106, определяют усиление индуцированной поли (1:С) клеточной резистивности в отношении вирусной инфекции соединений, приведенных в табл.13

- ол о оо

vD CS (Г чО

04 CS)

о I си ее

г- -ЭСГЧ N

(О I

Lf т- чГ) -Я- СМ ил -Я- ил ОЧ Г СГ|

й

о

I ш

S

т

3

ш

Г-

о

(Т см -

СМ

) 1Л Г CTi LA CXD т- ,-ь

гч| М СМ CS

с;

о

о

ч;

О)

I

о. го ГС q

SSi: а

(U о

1

5 ,

X 0) ш

0о

о s

1о

а

с:

го -d- LA VO

- см гм см

q Ю « kk н-Тетрадецил (HeoOjWji.ZHCl. l iO-UZ «(5 н-Октадецил C5 Hgj02N2.2HCr 115-117 А& н-Октадец-9-енил C Hg5 -OjNy2HCl118-120

Таблица 3

Таблица 5

Таблица 6 Э. 11,25 3,75 б9,5 П ,00 SrtS 71,9511,603,2971,6711,19.3,38 71,17 11,23 3,25 71,06 10,84 3,09 100 5,0 1,0 0,5 0,1 Э 90 8 75 68

Таблица 7

35 снижение более Примечание: +снижение менее

36

893128

Т а б л и

ц а + - сн жение около 68°о; N0 - не определялось

Таблица 10

39

Примечание: +- усиление более 5; Формула изобретения Способ получения аминопроизводн глицерина общей формулы 1. CHgQ щ щ где один из Q или Q является -0-Y-MHR -группой, а другой - OR,-г па; R и R. являются алкилом С.|)Или нормальным алкенилом ® имею двойной связи в положении I;

893128Цо

Продолжение табл. 13

± - усиление около 5;

- - усиление менее 5 Y - алкилен C(j , причем две его валентности отнесены к разным атомам углерода, о-, м-, или п-фенилендиме СНг)е тилен и о-, м-, пгде q - целое число 1-3, а левая связь Присоединена к 0; R3 водород или ал кил Сг,д, или их солей, от-личающийс тем, что соединение формулы Ц fH2-a сн- a СН ок.2 . dV является , где один из а другой - OY -СН-группа или -OYNa . пкилен С , присоединена к О и , где левая связь присоединена к О, и Я-ь-водород, восстанавливают путем каталитической гидрогенизации или комплексным гидридом щелочного металла и полученный продукт выделяют в виде свободного соединения или соли или алкилируют в случае, когда R в соединении формулы 1 означает алкил Источники информации, принятые во внимание при экспертизе 1„ Авторское свидетельство СССР № 505350,-кл. С 07 С 93/00, 19oOi,