Способ дифференциации возбудителей кокцидиодоза и гистоплазмоза Советский патент 1982 года по МПК C12N1/00 

1 Изобретение относится к медицине,

а именно микробиологии.

Известен способ дифференциации воэ- буцителей кокцициоидоза и гистоплазмоза путем идентификации культур COCC 3lJi oides о H StopSasrria capsueutum t-. .

Однако известный способ сложен и трудоемок.

Целью изобретения является ускорение и упрощение способа.

Эта цель достигается тем, что согласно способу цифференциации возбудите- , пей кокцидиеидоза и гистоплазмоаа путем идентификации культур CoccAdl oides irwstopeasms eClf Su Cetum , исспецуемые культуры вносят в дунки агаризованного 1%-ного казеина, инкубируют при 2873700 в течение 20-24 ч и при наличии зоны диффузии идети(|ицируют С;ос d-loidea immHis.

Смесь, состоящую из 1% агара и 1% казеина по Гаммерстену, расплавляют на водяной бане и разливают в чашки Пет

ри по 15 мл. В застывшем агаре пробивают лунки диаметром 5 мм, дно которых покрывают расплавлэнным агаром. Взвесь гриба, выращенного на среце Савуро при 28°С в течение 4-5 недель, стандартизуют по оптическому станцаргу мутности до концентрации 1 млрд. клеток в I мл физиологического раствора. В лунки вносят по 0,05 мл суспензии исследуемого гриба и выдерживают в термостате при в течение 24 ч. Возбудитель кокцициойдоза вызьшает гидролиз казеина, в результате которого вокруг лунок образуются зоны диффузии. Возбудитель гистоплазмоза не вызывает изменения субстрата.

Способ прост в постановке, не требует дефицитных реактивов и сывороток, позволяет выявить различие между двумя возбудителями в течение суток, которое может служить дополнительным дифференциальным призна1-;ом для идентификации культур представителей сравниваемых видов грибов. Предложенный

способ позволяет нагляоно выявить ка- аеинолитическую активность грибов. Интенсивность реакции (рааиус зоны опалесценции) прямо пропорциональна количеству вносимых клеточных элементов и времени наблюдения. Оптимальными аля реакивв являются использование взвесей грибов, соцержаших 50-5ОО млн микробных тел и 2-4-36 ч наблюдения. Все исслецованнью штаммы.возбуцителя кокцициоицоаГа ( mmAtAs ), близкого в антигенном отношении воа.буцителю гистоплазмоза (HietopKosma bapSuSatum ), образуют зоны опалесценции. Все исследуемые штаммы H1Stopeasme OCtpSueatum подобных зон не образуют, что позволяет проводить их дифференциацию.

Формула изобретения

Способ дифференциации возбудителей кокцидиоидоаа и гистоплазмоза путем

интенсификации культур CObticljo dlee imwi s У H BtopHsma tapsyeatum. отличающийся тем, что, с целью ускорения и упрощения способа, исследуемые культуры вносят в лунки

агаризованного 1%-ного казеина, инкубируют при 28-37С в течение 20-24 ч и при наличии зоны диффузии идентифицируют.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. L.,Stainaart Р.Funqjoos DV %eases ITI лап v.tt nibal M troWoCooj 1978, 8, 1, p. 42-45.