Изобретение относится к новым биологически активным соединениям, а именно к гидрохлоридам 3-(3-хлор- -алкоксифенил)- 5,6-дигидроимидазо 2,1-Ы тиазолов общей формулы где R - Н -пропил или н -бутил, проявл ющим мутагенную активность. Эти соединения могут найти приме ние в сельском хозяйстве и микробио гической промышленности. В качестве химических мутагенов широкое применение получили этиленимин(ЭИ) и N-нитрозометилмочевина (НИМ). Однако ЭЙ характеризуется сравнительно невысокой активностью. Кроме того, незаметно испаряясь, он оказывает очень сильное токсическое действие через дыхательные пути и кожу. МММ, хотя и -является сильным мутЪгеном, однако неустойчив и токси-. чен. Заметное разложение его наблюдается при хранении в течение несколь ких месяцев при 20°С, а при более высокой температуре может произойти внезапное взрывоподобное разложение Ш« Целью изобретения является расшире ние арсенала веществ с мутагенной активностью, устойчивых и безопасных при работе. Предлагаются новые гидрохлориды 3-(3-хлор-4-алкоксифенил)-5,6-дигидроимидазо 2,1-Ъ тиазолов формула 1 в качестве веществ, проявляющих мутагенную активность. Соединения формулы 1 получают путем взаимодействия 3-хлор- -алкоксифенацилбромидов общей формулы - til где к имеет вышеуказанные значения ,с 2-меркапто-2-имидазолином в абсо лютном этаноле при температуре кипения реакционной смеси с последую щим превращением полученных гидробромидов 3- (3 хлор- -алкоксифени -5,6-дигидроимидазо 2,1- Ь тиазоло действием щелочи в основания и переводом свободных оснований в соответствующие гидрохлориды. Строение синтезированных соедин ний подверждено хроматографически в тонком слое на пла..тинках Silufo в системе Н-бутанол-уксусн кислота-водаCt:2:5). Проявление ультрафиолетовым светом. Пример. 3(3-Хлор- -пропок сифенил)-5,6-дигидроимидазо 2,1-Ь тиазол;Смесь 2,9 г (0,01 моль} 3 хлор4-пропоксифенацилбромида, 1 г (.0,01 моль) 2-меркапто-2-имидазолин и 0 мл абсолютного этанола кипятя 5-6 ч..Растворитель отгоняют и доб ляют абсолютный эфир. Осадок гидро бромида 3-(3-хлор- -пропоксифенил) 5 ,6-дигидроимидазо 2,1-bj тиазола деляют, растворяют в воде и подщелачивают 15%-ным раствором едкого натра. Выпавший осадок отфильтровывают и перекристаллизовывают и смеси этанол-вода 1:1 . Выход 2,2 г (yt.), т.пл. ЭЗ-ЭЗ С. RI 0,68 ,температура плавления гидробр мида iSit-lSS C. Найдено, %; С 56,91; Н 5,06; N 9,36; S 10,63. . Вычислено, %:С 57, Н 5,13; N 9,50; S 10,88. 3- СЗ-Хлор- -бутоксифенил)-5,6-дигидроимидазо 2,1-ЬЗтиазол получают аналогичным образом из 3,1 г COjM моль) 3-хлор- -бутоксифенацил бромида, 1 г 10,01 моль 2-меркаг;то-2-имидазолина в мл абсолютного этанола.. Выход 2,3 г (7,), т.пл. 90-91 С. R 0,71. Температура плавления гидробромида 18318 С. Найдено, %: С 58,13; Н 5,3+, N 8,88; S 10,24. Ci5H 7ClNQ OS. Вычислено, %: С 58, И 5,55; N 9,07, S 10,38. Гидрохлорид 3-{3-хлор-«-пропоксифенил -5,6-дигидроимидазо 2,1-Ь1тиазола(соединение 1). 4 2,9 г (0,01 моль) 3-(3-хлор- пропоксифенил)-5,6-дигидроимидазо 2 , l-fcjтиазола растворяют в 35 мл абсолютного этанола и насыщают .сухим хлористым водородом до кислой реакции на конго. Большую часть этанола отгоняют в вакууме,создаваемом водоструйным насосом и добавляют абсолютный эфир. Выпавший осадок гидрохлорида соединения (IV отфильтровывают и перекристаллизовывают из метилэтилкетона. Выход 2,6 г (78,); т.пл„ 197-198°С. Rf 0,71.М (масс-спектрометрически). Найдено, ,: С ( ионный) 11,43о ,(,, Вычислено, %: С1(ионный) 10,27. Гидрохлорид 3 (3 хлор-4-бутоксифенил) -5,6- Д1 гидроимидаз42,1 -Ь тиазола (соединение 2) получают аналогично из 3,1 г (0,01 моль) 3-(3 -хлор-4-бутоксифенил)-5,6-дигидроимидазо 2,1-Ь11иазола в 35 мл абсо-г лютного этанола. Выход 2,7 г (78,, т.пл. 170-172 0.R 0,73; М 308/310 (масс-спектрометрически). Найдено, %: С1 (ионный) 10,20. CigHigCl N OS. Вычислено, %: С1 (ионный) 10,27. 3-Хлор-4-пропоксифенацилбромид. К смеси 8,5 г (0,04 моль) 3-хлор-4-пропоксиацетофенона в 100 мл абсолютного эфира прибавляют по каплям 2 мл (0,0 моль) брома и перемешивают при комнатной температуре 2 ч. Затем смесь два раза промывают холодной воой, эфирный слой отделяют и сушат над прокаленным сернокислым натрием. После отгонки растворителя остаток перегоняют в вакууме. Выход 8,2 г (70,4%) j т.кип. 175-177 С/2 мм.рт.ст., т. пл. 36-38 0. Найдено, %: С 5,10; Н 4,39, Вг 26,98. Cx,,j BrClOi2.. Вычислено, %: С 45,31; Н +,14-, Вг 27,0. 3 Хлор-4-бутоксифенацилбромид получают аналогично. Выход 68, т,кип, 182-184с/2 мм рт. CT.,atj,+896-, nif 1,5762. Найдено,%: С 47,1, Н ,30, Вг 5,88. С11 Н аВычислено, %: С ,1б; Н 4,61; г 26,14. Мутагенное действие гидрохлоридов 3 1,3 хлор- -алкоксифенил)-5,6-дигидроимидазо 2,1-Ь тиазолов. Мутагенное действие соединений формулы 1 изучали на ауксотрофных штаммах Escherichia colij Р-678, нуждающихся в треонине, лейцине и витамине В , Actinomyces rimosus 222 (исходный штамм RS-21), которые нужда лись в лизине,.и на индикаторных штаммах Salmonella typhimuriim ТА-1535 и ТА-1950, несущих мутацию ти па замены основания в ДНК, Оба штамма сальмонелл ауксотрофные по гистиди ну. На штамме сальмонелл ТА-1950 изучали мутагенное действие исследуемого соединения, подвергнутого метаболическому превращению. Наследственный характер обратных и прямых (морфологических) мутаций проверяли нескольких пассажах. Полученные результаты обрабатывали статистически Результаты изучения мутагенного летального действия гидрохлоридов 3-АЗ-хлор- -алкоксифенил)-5,6-дигидроимидазо 2,1-Ь тиазолов в отношении треонинового локуса кишечной палочки и лизинового докуса актином цетов приведены в табл. 1. Из данных этой таблицы видно, что соединения формулы 1 обладают мутагенным действием. Среди этих соединений наиболее активным по двум локусам тест-объектов оказалось . соединение с пропоксирадикалом гидрохлорид 3-(3-хлор- -пропоксифенил)-5,6-дигидроимидазо{2,1-Ь тиазола П), который индуцирует обратные мутации по треониновому локусу кишеч ной палочки в 500 раз больше, чем контроль (спонтанной мутации) и значительно больше мутации по лизино вому локусу актиномицетов - индуциру ет ревертанты больше контроля в 3888 раз. Это соединение отобрано дл подробного и всестороннего изучения в качестве химического мутагена.. Результаты изучения мутагенного и летального действия соединения 1 и известного мутагена - ЭИ в зависимос ти от времени обработки биохимических мутантов приведены в табл.2. Из этой таблицы видно, что по мере увеличения экспозиции обработки тест-объектов исследуемым соединение 1 выживаемость клеток, в особенности актиномицетов, снижается и одно-временно резко увеличивается частота встречаемости ревертантов, послед
ния 1 в отношении сельмонелл ТА-1535 приведены в табл. 3.
Из этой таблицы видно, что соединение 1 оказывает заметное мутагенное нее продолжается до определенной экспозиции.Дальнейшее увеличение экспозиции не приводит к увеличению активности-. При сравнении полученных результатов (.максимальные значения) по треониновому локусу соединение 1 и ЭЙ оказывают примерно одинаковое действие. По лизиновому локусу соединение 1 оказывает высокое избирательное действие, превосходит по мутагенной активности ЭЙ более чем в 14 раз, причем в концентрации, в 20 рад меньшей, чем концентрация ЭИ. Результаты изучения мутагенного и летательного действия соединедействие и в отношении этого индикаторного штамма. При сравнительно высо кой выживаемости клеток сальмонелл соединение 1 индуцирует обратные мутации по гостидиновому локусу в 635 раз больше контроля. Результаты изучения мутагенного и летальнг го действия соединения 1 в отношении сальмонелл ТА-1350 приведены в табл. k, Из этой таблицы видно, что соединение 1 индуцирует мутации по гистидиновому локусу максимально в 95 раз больше контроля. Результаты изучения действия соединения 1, подвергнутого метаболическому превращению, приведены в табл.5. Как видно из табл. 5, действие соединенения 1 под воздействием гомогената печени крыс линии Вистар и Кофактора НАДФН изменяется, снижается его детальное и мутагенное . При той же концентрации и времени обработки объекта предлагаемое соединение при высокой - 90%-ной выживаемости клеток сохраняет мутагенное действие. Влияние соединения 1 на изменение морфологических признаков колоний Act. rimosus приведено в . 6. Данные этой таблицы показывают, что соединение 1 индуцирует прямые мутации, увеличивает морфологигические мутации колоний актиномицетов в 2,Об раза больше контроля. Сравнительные данные генетического действия соединения 1 и К-нитрозометилмочевины (МММ) в отношении Act. rimosus, полученные при близких
ггроцентах выживаемости спор приведены в табл. 7.
Данные этой таблицы показывают, что соединение 1 за непродолжительную экспозицию обработки тест-объекта и при концентрации, приблизительно в 20 раз меньшей концентрации МММ, индуцирует обратные мутации в 852 раза больше, чем известный мутаген.
Таким образом, выявлено мутагенное действие у соединений i и 2. Гидрохлорид 3(3 хлор-«-пропоксифенил)-5 6-дигидроимидазо-Г2,l-b тиазола (1) оказывает сильное мутагенное действие по лизиновому, треониновому и гистидиновому локусам тестобъектов. Заметно индуцирует прямые
мутации - изменяет морфологические признаки колоний актииомицетов.
Соединение 1 оказывает избирательное сильное мутагенное действие на лизиновый локус актиномицетов -и по активности превосходит этиленимин и N-нитрозометилмочевину соответственно в 1 и 8,5 раз.
Гидрохлорид 3(3-хлор- -пропоксифенил)-5,6-Дигидроимидазо- 2,1-Ь тиазола (1) как сильный химический мутаген может найти применение в селекционной работе - в создании новых полезных форм растений и животных и в получении новых мутантных штаммов микроорганизмов для микробиологической промышленности.
та
З
S
с; ю ш
сэ сэ ол
о сэ м
CV(
ил г го
v)
| название | год | авторы | номер документа |
|---|---|---|---|
| ГИДРАЗОН-4-АМИЛОКСИ-3-НИТРОАЦЕТОФЕНОНА, ПРОЯВЛЯЮЩИЙ АНТИМУТАГЕННУЮ АКТИВНОСТЬ | 1989 |
|
SU1626614A1 |
| КОМПЛЕКС КРАУН-ЭФИРА ПИРИДАЗИНОВОГО РЯДА С ХЛОРИСТЫМ КАЛИЕМ, ПРОЯВЛЯЮЩИЙ АНТИМУТАГЕННУЮ АКТИВНОСТЬ | 1979 |
|
SU784267A1 |
| КРАУН-ЭФИРЫ ПИРИДАЗИНОВОГО РЯДА, ПРОЯВЛЯЮЩИЕ АНТИМУТАГЕННУЮ АКТИВНОСТЬ | 1979 |
|
SU784266A1 |
| КРАУН-ЭФИРЫ ИЛИ ИХ КОМПЛЕКСЫ, ПРОЯВЛЯЮЩИЕ АНТИМУТАГЕННУЮ АКТИВНОСТЬ | 1979 |
|
SU764324A1 |
| 1-АМИНО-8,9- ДИГИДРО-5- МОРФОЛИНО-7,7,8- ТРИМЕТИЛ-2-ЭТОКСИКАРБОНИЛ-6Н-ТИЕНО [2,3-C] [2,7] НАФТИРИДИН ИЛИ ЕГО ДИГИДРОХЛОРИД, ОБЛАДАЮЩИЕ МУТАГЕННОЙ АКТИВНОСТЬЮ | 1989 |
|
SU1640984A1 |
| КОМПЛЕКС КРАУН-ЭФИРА ПИРИДАЗИНОВОГО РЯДА С ХЛОРИСТЫМ КАЛИЕМ, ПРОЯВЛЯЮЩИЙ АНТИМУТАГЕННУЮ АКТИВНОСТЬ | 1979 |
|
SU784268A1 |
| КРАУН-ЭФИРЫ ПИРИДАЗИНОВОГО РЯДА, ПРОЯВЛЯЮЩИЕ АНТИМУТАГЕННУЮ АКТИВНОСТЬ | 1979 |
|
SU784265A1 |
| 8-АМИНО-4,5,5- ТРИМЕТИЛ -7- ЦИАН-5,6- ДИГИДРО-3Н-ТИОПИРАНО [3,4-С] ПИРИДИН-2-ТИОН, ОБЛАДАЮЩИЙ АНТИМУТАГЕННОЙ АКТИВНОСТЬЮ, И СПОСОБ ЕГО ПОЛУЧЕНИЯ | 1984 |
|
SU1226819A1 |
| 3-АМИНО-2-КАРБЭТОКСИ- 5,5- ДИМЕТИЛ-8- (N-МОРФОЛИНО)-4,5- ДИГИДРО-7Н-ПИРАНО(4,3-D)ТИЕНО (2,3-B) ПИРИДИН, ОБЛАДАЮЩИЙ АНТИМУТАГЕННОЙ АКТИВНОСТЬЮ | 1984 |
|
SU1184244A1 |
| ПРОИЗВОДНОЕ НИТРОИМИДАЗОЛА ПРОТИВ ТУБЕРКУЛЕЗА ЛЕГКИХ | 2016 |
|
RU2675622C1 |
-эо
сэ
о
о «м
о
ViJ
о сэ о оо
сэ о
сэ сэ
-3ил
о см
сэ сэ
CVJ
сэ
сэ оо
ГГ
г- ил
к
ал
пз г сэ
-01,ч со
с; так
о t-S
а
н ота
с
о о
- г
- см
4
ш
Э
з: q ю та
ьCD О
ил
чО
«
О
+1
чО
л
о а (I
О
ii
Контроль
Таблица 3
Таблица
100
65
15
2520 2U 336 62
60
Кон2 42 103 176 16 троль
91063716
Таблица 5
Таблица 6
6«3 25,5 2,06
31
1,0
303
17
НИМ .100 ()
В скобках число мутаций в контроле.
Формула изобретениягде R - н-пропил или н-бутил,
Гидрохлориды 3-(З-хлор- -алкоксифе-обладающие мутагенной активностью. нил)-5,6-дигидроимидазо 2,1-ЪЗтиазолов общей формулы . Источники информации,
titv. ,
// П Т rHdl Супермутагены под ред. И.А.РаRO- V-l N1попорт.М., Наука, 1966.
18
910637 Таблица 7
10,03 23328(6Г 388800 852
0,0t7 752(1,652) it5600 100
25принятые во внимание при экспертизе
