Изобретение относится к органической химии, а именно к новой конденсированной гетероциклической системе, к 3-амино-2-карбэтокси-5,5-диметил-8-(N-морфолино)-4, 5-дигидро- 7Н-пирано(4,3-d)тиено(2,3-b)пиридину формулы I
обладающему антимутагенной активностью, который может найти применение в медицине.
Цель изобретения расширение ассортимента антимутагенных препаратов за счет разработки новой конденсированной системы формулы I.
П р и м е р 1. 5,5-Диметил-8-(N-морфолино)-2-меркапто-3-циан- 4,5-дигидро-7Н-пирано(4,3-с)пиридин. Смесь 2,5 г (0,01 моль) 2-амино-5,5-диметил-3-циан-4,5-дигидро-7Н-пирано-(3,4-с)- 8Н-тиопирантиона-8, 5 мл морфолина в 10 мл этанола нагревают на водяной бане в течение 4 ч. После охлаждения образовавшиеся кристаллы отфильтровывают, промывают этанолом, сушат. Выход 2,0 г (80%), т.пл. 221-222оС (метанол), Rf 0,71 (пиридин-этилацетат, 1:2).
Найдено, C 58,78; H 6,10; N 13,56; S 10,41
C15H19N3O2S
Вычислено, C 53,99; H 6,27; N 13,76; S 10,50.
В ИК-спектре имеются следующие полосы поглощения, ν, см-1: 1120 ср (С-О-С); 1560 с (С=С, С=N); 2220 c (CN); 2480 cp (SH).
ПМР-спектр (CDCl3), σ, м.д. 1,10 (6H, c 5-(CH3)2); 2,50 (2H, c, 4-CH2); 2,90-3,20 (4H, м, CH2NCH2); 3,40-3,70 (4Н, м, CH2OCH2); 4,30 (2H, c, 7-CH2); 4,50 (1Н, шир.полоса, SH).
Масс-спектр: м/e (%): 305 (М*) (100); 290 (16); 274 (32); 260 (16); 248 (28).
П р и м е р 2. 3-Амино-2-карбэтокси-5,5-диметил-8-(N-морфолино) -4,5-дигиро-7Н-пирано(4,3-d)тиено(2,3-b)пиридин (соединение I). К раствору, приготовленному из 0,46 г (0,02 г-атом) натрия и 50 мл абсолютного этанола, добавляют 3,0 г (0,01 моль) 5,5-диметил-8-(N-морфолино)-2-меркапто-3-циан-4,5-дигидро-7Н- пирано(4,3-с)пиридина, синтезированного по примеру 1. Затем при перемешивании прибавляют по каплям 1,25 г (0,01 моль) этилового эфира хлоруксусной кислоты, реакционную смесь нагревают при 55-60оС в течение 2 ч. После охлаждения прибавляют 50 мл воды, образовавшиеся кристаллы отфильтровывают, промывают водой и сушат. Выход 2,7 г (69,2%), т.пл. 276-277оС (DMCO). Rf 0,63 (хлороформ-эфир, 3:1).
Найдено, C 58,45; H 6,31; N 10,63; S 8,12.
C19H25N2O4S.
Вычислено, C 58,29; H 6,44; N 10,73; S 8,19.
В ИК-спектре имеются следующие полосы поглощения, ν, см-1: 1110 ср (С-О-С); 1600 с (C=C, C=N); 1660 c (C=O); 3315, 3410 c (NH2).
Масс-спектр, м/е, (%): 391 (М*) (100); 376 (10); 360 (12); 346 (12); 334 (14); 333 (14); 321 (24); 288 (16).
Антимутагенное действие 3-амино-2-карбэтокси-5,5-диметил-8-(N- морфолино)-4,5-дигидро-7Н-пирано(4,3-d)тиено(2,3-b)-пиридина изучали на биохимических мутантах: Escherichia coli P-678 thr-, Actinomyces rimosus 222 lys (исходный штамм RS-21), ауксотрофном по лизину, на индикаторном штамме Salmonella typhimurium TA 1535 luz, несущем мутацию типа замены основания в молекуле ДНК, генотип luz 46, LPS-, rfa, Δ uvr B, ауксотрофном по гистидину.
Антимутагенное действие соединения I изучали методом доза-эффект по двум направлениям, УФ-облучение проводили бактерицидной лампой низкого давления БУФ-30 при комнатной температуре и постоянном перемешивании в течение 90 с на расстоянии 60 см от источника излучения. Опыты проводили в затемненном боксе при красном свете. Исследовали влияние соединения I на частоту встречаемости спонтанных мутаций у тест-культур и влияние на мутации, индуцированные УФ-лучами. Контролями служили спонтанная частота мутаций и частота мутаций, возникающих при УФ-облучении микроорганизмов. Полученные данные были статистически обработаны. Соединение I изучали в виде суспензии в синтетической среде.
Результаты изучения антимутагенного действия соединения I и контрольных протекторов в отношении кишечной палочки и актиномицетов приведены в табл.1. Из таблицы видно, что соединение I заметно влияет на появление спонтанной мутации у указанных тест-культур. Оно на 20-35,5% меньше индуцирует ревертанты, чем спонтанно появившиеся в контрольных вариантах опыта, оказывая примерно такое же действие, как контрольные протекторы 2-меркаптоэтиленамин (МЭА) и диметилсуль- фоксид (ДМСО), но превосходя l-цистеин.
Результаты изучения влияния соединения I и контрольных протекторов на выживаемость клеток и индукции мутаций у штамма сальмонелл ТА 1535 представлены в табл.2. Из таблицы видно, что соединение I при высоком проценте выживаемости клеток сальмонелл оказывает заметное протекторное действие и индуцирует мутации на 30% меньше по сравнению с контролем. Соединение I по протекторному действию на сальмонеллы уступает l-цистеину, но превосходит МЭА и ДМСО.
Результаты изучения влияния соединения I и контрольных протекторов на выживаемость микроорганизмов и на индуцированные УФ-лучами мутации клеток кишечной палочки и актиномицетов приведены в табл.3. Как видно из этой таблицы, соединение I и в этом случае оказывает заметное протекторное действие увеличивает выживаемость клеток бактерий и снижает число мутаций, индуцированных УФ-лучами, оказывая примерно такое же действие, как контрольные препараты ДМСО и l-цистеин, но уступая МЭА.
Острую токсичность соединения I изучали на 40 белых беспородных мышах путем однократного введения внутрибрюшинно. На каждую концентрацию брали 4 мыши массой 18-20 г. Наблюдения над животными вели в течение одной недели. Определяли максимально переносимую дозу (МПД). Результаты изучения показали, что соединение I малотоксично. Его МПД равна 2500 мг/кг массы животного.
3-Амино-2-карбэтокси -5,5-диметил-8-(N -морфолино)-4,5-дигидро -7Н-пирано-(4,3-d) тиено(2,3-b)пиридин формулы
обладающий антимутагенной активностью.
| I.Prakt | |||
| Chem., 1974, 316(6), р.1030. |
