Стандартный образец для поверки флуориметров и спектрофлуориметров в зеленой области спектра Советский патент 1982 года по МПК G01N21/64 

I - .Изобретение относится к оптическому приборостроению, а именно - к поверке флуориметров и спектрофлуо риметров в зеленой области спектра и найдет применение преимущественно при конструировании и поверке этих приборов в заводских и лабораторных условиях.

В настоящее время для поверки флуориметров и спектрофлуориметров в зеленой области сг1ёктра используются растворы флуоресцёина в 0,010,1 М растворе едкого натра tl.

Недостатками этих стандартов являются узкие, сильно перекрывающиеся полосы поглощения и люмин1есценции, которые характеризуются высоким значением коэффициента молярного погашения и квантового выхода люминесценции. В силу этого при поверке люминесцентных. .приборов необходимо применять очень разбавленные растворы (10 ®моль/л и ниже), которые устойчивы в темноте не более

12 Ч и подвергаются сильному фотолизу при облучении. Требуется сложная предварительная очистка веи(ества, включающая стадии .хроматографирования на окиси алюминия и многократные перекристаллизации.

Цель изобретения - улучшение оптических характеристик поверочного средства, повышение устойчивости спектрально-люминесцентных свойств,

to снижение фотохимической активности и упрощение предварительной очистки веществаi

Поставленная цель достигается применением в качестве стандартных

ts образцов для поверки флуориметров и спектрофлуориметров в зеленой области спекта растворов 2-окси-З-нафтойной кислоты.Водные растворы этого соединения имеют широкие бес20структурные, практически не перекрывающиеся полосы поглощения и люминесценции, характеризующиеся низкими значениями коэффициента молярного 39 погашения и квантового выхода люминесценции, что подтверждается сле дующими данными: Максимум поглощения, Молярный коэффициент погашения в максимуме, л моль см- 2100t50 Полуширина полосы поглощения, см 3750 Максимум люминесценсии, см 19000 Полуширина полосы люминесценсии, см 200 Квантовый выход , 0,13 Распределение интенсивности в исправленном нормированном спектре люминесценции -представлено в таблице. Благодаря низким значениям моляр ного коэффициента погашения и относительного квантового выхода люмине ценции отпадает необходимость приготовления для поверки современных приборов растворов с концентрацией ниже 10 моль/л. Растворы с концен рацией 10 моль/л сохраняют постоян ное значение интенсивности люминесценции не менее 7 сут с момента при готовления и не подвергаются заметному фотолизу Г1ри облучении световы ми потоками 10 - Эйнштейн (XsBjO -360 нм). Для приготорления повероч ных растворов можно использовать 2-окси-З-нафтойную техническую кислоту. В этом случае интенсивность люминесценции растворов с концентра цией 0,5 5 10 мол ь/л н,е более чем на 3% отличается от значений, полученных для растворов, которые приготовлены из 2-окси-З-нафтойной кислоты, очищеной переосаждением из щелочного раствора. Пример. Растворяя 0, г 2-окси-З-нафтойной кислоты, взвешенной с точностью до 0,0002 г, в перегнанном этаноле в мерной колбе вместимостью 200 мл, приготавливают исходный раствор, содержащий 2,5-1(Г моль/л 2-окси-З-нафтойной кислоты. Рабочий раствор f 1 (2,5-10 моль/л) получают разбавлением 2 мл исходного раствора в мерной колбе вместимостью 200 мл бидис тиллированной водой. Разбавляя 20мл рабочего раствора № 1 в мерной колбе вместимостью 200 мл бидистиллиро ванной водой, получают рабочий раствор If 2 (2,5-10 моль/л). В ряд мерных колб вместимостью 100 мл отбирают при помощи бюреток вместимостью 25 мл с ценой наименьшего деления 0,05 мл ,0v «.О} 6,0; 8,0- 10,0-, 12,0; 1,0; 16,Oj 18,0; 20,0 мл рабочего раствора № 1 -или К 2 и разбавляют до метки бидисциллированной водой. Концентрация полученных поверочных растворов 0,25-10 V моль/л (при использовании рабочего раствора)) № 1) и 0,2510 V моль/л при использовании рабочего раствора № 2). Возбуждая люминесценцию полученных растворов ультрафиолетовым светом с длиной волны З 0-3б0 нм, вырезаемым из спектра источника возбуждений светофильтром или монохроматором в зависимости от конструкции прибора, измеряют интенсивность люминесценции на флуориметре или записывают спектр люминесценции на спектрофлуориметре. Из полученных значений вычитают интенсивность люминесценции фона и строят график зависимости интенсивности люминесценции (за вычетом фона) о.т концентрации раствора (при поверке спектрофлуориметров интенсивность люминесценции измеряют в максимуме). Полученный градуировочный график должен представлять собой прямую линию. Определяют по методу наименьших квадратов угловой коэффициент прямой (к) и среднеквадратичное отклонение точек от расчетной прямой (S). С использованием 35-критерия по формуле -lil Snin к находят предел обнаружения 2-окси-Знафтойной.кислоты на данной приборе. Tak, при поверке флуориметра КФЛ-2-1-найдено: ,6Ь10, S 1.36, т.е. , -l.blMO Таким образом, применение в качестве поверочного средства растворов 2-окси-З-нафтойной кислоты улучшает оптические характеристики стандарта, что подтверждается вышеприведенными данными. Благодаря повышению устойчивости растворов по сравнению с флуоресцеином увеличивается срок службы поверочных средств. Отпадает необходимость сложной пред59112524

варительной очистки вещества. Кро-чувстаительности.флуорммстроа и

ме того, в отличие от флуоресцеинаспектрофлуориметров, но и для калибте же самые растворы могут быть ис-ровки спектрофлурриметров по спектпользованы не только для оценкиральной квантовой чувствительности.

Длина волны, нм k70 ЦВО ЭО 500 510 520 530 5«0 550 560 Относительная квантовая интен-. сивность, %36,0 51,8 69,2 87,0 Длина волны, нм 570 580 590 Относительная квантовая интенсивность, % 78,1 67,7 Формула изобретения Применение водных растворов 2-ок си-3-нафтойной кислоты в качестве стандартных образцов для поверки . флуориметров и спектрофлуориметров в зеленой области спектра. . 96,0 99, 99,8 98,0 93,7 86,9 600 610 620 57,0 Л8,0 39,531,6 Источники информации, . принятые во внимание при экспертизе 25 1. Паркер С. Фотолюминесценция растворов. М., Мир, 1972, С.Й61 9.