Способ получения липидного экстракта из биологического материала Советский патент 1982 года по МПК G01N33/48 

1

Изобретение относится к медицине, в частности к биологической химии, и быть использовано для диа1- ностики заболеваний печени.

Известен способ получения липидного экстракта из биологического материала путем гомогенизации и экстракции ткани в смеси органических растворителей l .

Выход липидов, полученных.известным способом, составляет 63-75 что не позволяет получить липидный экстракт из микроколичеств материала(0,1-0,001 г и 0,1-0,001 мл).

Цель изобретения - получение липидного экстракта из микроколичеств материала.

Поставленная цель достигается тем, что при осуществлении способа получения ЛИПИДНОГО экстракта из биологического материала путем гомогенизации и экстракции ткани в смеси органических растворителей проводят гомогенизацию и экстракцию

трихлорэтаном и этанолом, инкубируют Ciiecb при 50-60°С в течение 15-20 мин.

Способ осуществляют следующим образом.

Приме р.К сыворотке крови объемом в пределах от 0, 001 до 0,1 мл прибавляют 3 мл смеси Эб -ного этанол-1-трихлорэтан в соотношении 1:1. Биоптат

(Q ткани печени весом в пределах 0,001 и 0,1 г (заранее взвешенный на аналитических весах помещают в стеклянный гомогенизатор, приливают 0,5 мл смеси Эб -ного этанол+трих15 лорэтан в соотношении 1:1, гомогенизируют, добавляют к полученному гомогенату 2,5 мл той же смеси. Далее все этапы экстракции соответствуют Экстракции из сыворотки крови.

20 Смесь инкубируют в течение мин при 55°С..Экстракицию можно проводить при 50-60 С. При снижении ниже уменьшается выход липидов.при выше 60 С происходит разрушение липидов. Сюсле инкубации смесь встряхивают в тече ние 1 мин и фильтруют. В качестве фильтра можно использовать быстрофильтрующие бумажные фильтры. Фильтр промывают 1 мл смеси 96 -ного этанол- -трихлорэтан, К полученному раствору добавляют 0,6 мл дистиллированной воды. Смесь встряхивают и ортааляют на 20-30 мин до получения прозрачного раствора, состоящего из двух фаз. Верхнюю фазу удаляют, нижняя фаза содержит липидныЛ очищенный экстракт. Предлагаемый способ позволяет получить липидный экстракт из микроколичеств биологического материала с высоким выходом (.92, хорошо очищенных нейтральных и кислых липидов. 9 8 Формула изобретения Способ получения липидного экстракта из биологического материала путем гомогенизации и экстракции ткани в смеси органических растворителей, отличающийся тем, что, с целью получения липидного экстракта из микроколичеств материала, проводят гомогенизацию и экстракцию трихлорэтаном и этанолом, инкубируют смеь при 50-60 0 в течение 15-20 мин, Источники информации, принятые во внимание при экспертизе 1. Кейтс М., Техника липидологии, М., Мир, 1975, с. .