Устройство для выявления белковых фракций Советский патент 1982 года по МПК A61B10/00 

Изобретение относится к медицинской технике, предназначено для разделения белков и выявления белковых фракций методом электрофореза в агаровом геле, может применяться в общеклинических и биохимических лабораториях.

Наиболее близким к изобретению по технической сущности является устройство для выявления белковых фракций, содержащее камеру с ваннами для буферного электрофоретического раствора, соединенными электродами с блоком питания, и приспособление для размещения белков на агаре.

Приспособление для размещения белков на агаре в известном устройстве представляет собой предметные стекла tl.

В этом устройстве существенными недостатками являются необходимость проведения электрофореза белков на поддерживающих стеклянных предметных пластинках, покрытых агар-агаром, большая трудоемкость подготовки предметных стекол для проведения электрофореза белков, большая трудоемкость обработки предметных стекол .после проведения электрофореза, невозможность окрашивания полученных

образцов на рамке для разделения белков.

Целью изобретения является ускорение выявления фракций и уменьшение расхода агара.

Для достижения этой цели в устройстве для выявления белковых фракций, содержащем камеру с ваннами для буферного электролитического р&ство10ра, соединенными электродами с блоками питания, и приспособление для размещения белков, последнее представляет собой прямбугольную кювету, на дне которой с внутренней стороны

15 выполнены продольные и поперечные бороздки для разделения его на секции, размеры которых соответствуют площади, занимаемой фракциями белка при разделении его в электроста20тическом поле.

На фиг.1 представлено устройство для выявления белковых фракций; на фиг.2: - то же, вид сверху; на фиг.Зприспособление для размещения белков

25 на агаре; на фиг.4 - разрез А-А на фиг.З.

Устройство для выявления белковых фракций содержит камеру, состоящую из прямоугольного основания 1 с бор30тиками 2, на котором по обе стороны установлены цве подвижные ванны 3. Каждая ванна 3 разделена на два отсека перегородкой 4, не доходящей до дна, нижний конец которой погружен в углубление, ограниченное перегородка ми 5 и заполненное агаром. В ваннах 3 установлены электроды б, соединенные с источником пита)1ия. На боковых сторонах 7 ванн 3, обращенных друг к другу, имеются вырезы 8, которые расположены в верхней части и единаново удалены от краев этих сторон. 8этих вырезах 8 установлено приспос бление для размещения белков на агаре, которое представляет собой, прямоугольную кювету 9, на плоском .дне которой с внутренней стороны выпол,нены пересекающиеся под углом продольные и поперечные бороздки соответственно 10 и 11 для разделения его на секции. 12. Глубина бороздок 1,0-1,5 мм, ширина 1,0-1,5 мм. Размеры секций 12 соответствуют площади, занимаемой фракциями белка при разделении его в электростатическом поле. Кювета с помощью бумажного мостика соединяется с электрофоретическими ваннами 3 . Устройство снабжено зажимнь м приспособлением в виде болта 13 с гайкой 14. Устройство работает следующим образом. Электрофорйтические ванны 3 заполняют буферным раствором до необходимого уровня. Поверхность кюветы 9заливают расплавленным 1%-ным агаром, температура 50-52 С. После застывания агара по середине каждого матричного поля штампом пробивают лунку. В.каждую лунку вводят 0,02 мл исследуемого белка. Торцовые стороны слоя агара в прямоугольной кювете соединяют при помощи бумажного мостика с буферным раствором, находящим ся в ваннах. Электрофоретические ван ны 3 закрываются крышкой. Кювета 9 также закрывается крышкой, которая плотно прилегает к стенкам ванн 3. Помещенная под крышку кюветы 9 фильтровальная бумага препятствует попаДанию испаряющегося буфера на поверх ность агара. Буферные растворы соединяют посредством электродов с источником питания, напряжением 220210 В. Длительность разделения белков 2,0-2,5 ч. После окончания разделения на фракции исследуемых об- разцов белка выключают источник питания и извлекают кювету 9. Окрашивание агаровой пленки проводят в кювете по всей плоскости инкубацйонным раствором в условиях термостата при 37-38с, длительностью 120130 мин. По окончании окрашивания агаровая пленка в кювете 9 промывается дистиллированной водой.в течение 60-65 мин, скальпелем пленка агара разрезается по бороздам кюветы и затем полоски агара погружают в 4%-ный раствор уксусной кислоты на 3 ч. Затем полоски агаровой пленки помещают на стекло и высушивают в сушильном шкафу при 50-52 С в течение 2 ч. Готовые агаровые пленки, содержащие разделенные белковые фракции, могут исследоваться на денситомере и долго храниться. Преимущества предлагаемого устрой.ства заключаются в уменьшении сроков исследования с 45-48 ч -до 10-12 ч, уменьшается брак агаровых пленок, который наблюдается в известном устройстве из-за деформации агарового покрытия предметных стекол, уменьшается расход агара с 2,3-2,5 г на одно исследование при известном устройстве до 0,04-0,05 г. Формула изобретения Устройство для выявления белковых фракций, содержащее камеру с ваннами для буферного электролитического paci вора, соединенными электродами с блоками питания, и приспособление для размещения белков на агаре, о тличающееся тем, что, .с целью ускорения выявления фракций и уменьшения расхода агара, приспособление для размещения белков представляет собой прямоугольную кювету, на дне которой с внутренней стороны выполкень продольные и поперечные бороздки для разделения его на секции , размеры которых соответствуют площади, занимаемой фракциями белка при разделении его в электростатическом поле. Источники информации, принятые во внимание при экспертизе 1, Прибор для электрофореза ПЭФ-3, изготав-ливаемлй Фрунзенским заводом медаппаратуры. Паспорт 1И 11.540.016, заводской номер 4875, 1977.

П

1

I I Т 645

Фис.1

R4b

t

-

В

/1