Способ получения иммунной сыворотки к вирусу клещевого энцефалита Советский патент 1984 года по МПК A61K39/395 

со

sl

05 СП Изобретение относится к области иммунологии, а именно получению и мунных сывороток для серологически Ънализов и лечебно-профилактических целей. Известен способ получения иммунн сьшоротки пу.тем многократного введе ния животным клещевого антигена tl Наиболее близким к изобретению является способ получения иммунной сыворотки к вирусу клещевого энцефалита, включающий многократное вве дение животным-продуцентам вируса с последующим вьщеленйем сыворотки t23. Однако известные способы не позт воляют получить иммунную сыворотку с высокой активностью и специфичностью. Целью изобретения является повышение активности и специфичности. Цель достигается тем, что при осуществлении способа получения иммунной сыворотки к вирусу энцефал та, включающего многократное введение животным-продуцентам вируса с послед тощим выделением сьшоротки, иммунизацию осуществляют подсадкой на животных зараженных вирусом голодных самок иксодовых клещей. Иммунизацию проводят следующим образом. На выстриженную спину животного подсаживают зараженных клещей в при клеенный мешочек. Мешочек завязывают животное сажают в бак стоящий над кюветой с водой. Спустя 7-8 дней напитавшихся клещей снимают, да1от животному отдых 10-14 дней, после чего берут 2 мл крови для контроль ого определения количества антител в серологических реакциях, например в реакции биологической нейтрализации. Если титры антител недостаточно высокие, посадку зараженных клещей повторя ют 1-2 раза. После получения высоки титров антител в сыворотке у животных частично или полностью забирают кров помещают на 1 ч при , затем на 16-18 ч при 4°С, сыворотку после центрифугирования 20 мин при 2500 об/мин отсасывают, разливают по ампулам и хранят в холодильнике до момента исследования12Пример 1. На двух морских свинок подсаживают по 10 самок клещей Dermacentor anjdersoni с титром вируса 4,5 Ig LDjo/0,03 мл. Через 7 дней напитавшихся клещей снимают, животному дают отдых 10 дней и снова пoдcaживaют голодных самок с таким же содержанием вируса. После насьщения этой группы клещей животньгх выдерживают 2 недели и обескровливают. Для контроля морских свинок иммунизируют общеизвестным способом. Сыворотку из опытных и контрольных животных проверяют в реакции нейтрализации. Титр вируса, использованного, в реакции, составлял 7,25 Ig LDyjj . Индекс нейтрализации сыворотки, полученной по предлагаемому способу, - 100000. Индекс нейтрализации сыворотки, полученной по общеизвестному способу, - 2773. Пример 2. На двух морских свинок подсаживают по 10 голодных самок клещей Ixodes ricinus с титром вируса 5,5 Ig LDso мл. Иммунизацию животных проводят двукратным подсаживанием клещей с интервалом в 12 дней между.подсадками. Контролем служат 2 морские свинки, иммунизированные по известному способу. После окончания иммунизации животных выдерживают 2 недели, после чего забирают кровь и исследуют сыворотку в реакции нейтрализации. В первом и втором примерах титр вируса, использованного в реакции, составил 7,25 Ig LDjo Индекс нейтрализации сьшоротки, полученной по предлагаемому, способу 113500, а полученной по известному способу - 2415. Пример 3. На трех кроликов подсадили по 25 самок голодных клещей Dermacentor andersoni с титром вируса 6,3 Ig UBgo Затем подсадку партий зараженных клещей повторили еще 2 раза с интервалом между подсадками соответственно 15 и 30 дней Данные по исследованию сыворотки, полученной по предлагаемому способу, по сравнению с результатами исследования сыворотки в контроле представлены в таблице .

39746514

Сравнительные результаты известного и предложенного

способов

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ИММУННОЙ СЫВОРОТКИ К ВИРУСУ КЛЕЩЕВОГО ЭНЦЕФАЛИТА, включающий многократное введение животным-продуцентам вируса с последующим вьщелением сыворотки, отличающийся тем, что, с целью повышения активности и специфичности .сыворотки, иммунизацию осуществляют подсадкой на животных зараженных вирусом голодных самок иксодовых клещей.