Способ получения терпенов,обладающих антипсориатическим действием Советский патент 1983 года по МПК A61K35/78 

39 Н-гексана с водой (10:4), и после отстаивания к н-гексановому раствору добавляют одну десятую от его объема 10-20% гидроокиси калия, и после периодического помешивания его оставляют стоять 6 ч. н-Гексановая фаза нейтрализуется промывкой водой. После выпаривания остаток берут в трехкратный объем 9б -ного этанола и оставляне проиют стоять до тех пор, пока зойдет полное осаждение, обычно ЦВ ч при комнатной температуре. Осадок фильтруют через стеклянные фильтры, имеющие среднюю пористость, при всасывании, промывают его подходящими количествами 9б -ного этанола до тех пор, пока он не станет почти бесцветным, и сушат под вакуумом над гидроокисью калия или концентрированной серной кислотой. Осадок растворяют вн-гексане для получения 10% по весу раствора при комнатной температуре (). Раствор хроматографируют в зависимости от количества материала с элюированием н-гексаном, элюируют в первой 1-литровой фракции (по отношению к 2 л). После выпаривания до концентрации 10 н-гексановому раствору дают возможность кристаллизоваться самопроизвольно при комнатной теипературе. Кристаллы фильтруют с отсасыванием, и маточные жидкости снова упаривают, получая еще одну кристаллическую массу. Другой метод заключается в использовании нейтральной колонки на окиси алюминия АЕгОз (5х100см|) и элюировании н-гексаном. В данном случае элюат экстрагирует фермент, т.е. активный ингредиент. Перекристаллизация происходит в горячем абсолютном этаноле. Фармацевтические композиции приготавливают в виде обычных дозированных форм введением фермента в фармацевтические носители. Активный ингредиент (фермент) должен присутст вовать в композициях в количестве, достаточном для обеспечения противопсориазной активности. Композиции предпочтительно содержат 1-100 мг ак тивного ингредиента на одну дозирова ную единицу, а фармацевтический носи тель может быть твердым или жидким. Примерь 12 кг сухих листье гранулирюванных на сите № 10 (2,5 мм экстрагируют 1,5 ч 10 л 96%-ного эта нола при . Экстракт фильтруют и промывают 10 л 96%-ного этанола на фильтре. Отфильтрованный экстракт уп 0 ривают досуха при умеренном вакууме (20-30 мм рт. ст.). Остаток берут в дмесь н-гексана и воды (15:10 л) и оставляют стоять в течение ночи в сепараторе. Водную фазу удаляют и гексановую фазу осветляют 10%-ным раствором гидроокиси калия в этаноле (5 л). Осветленную таким образом гексановую фазу нейтрализуют с помощью промывки водой и упаривают досуха. Остаток растворяют в 500 мл 96%-ного этанола при нагревании, фильтруют и сушат (выход 50 г). Сухой,осадок растворяют в 1 л н-гексана и хроматографируют на колонке из Гедурана S160 (100x10 см) при элюировании порциями в 1 л Н-гексана. Первая 1-литровая фракция упаривается, и остаток кристаллизуется в горячем гексане, бензоле или абсолютном этаноле (выход 12 г). П р и м е р 2. Зб кг сухого целого растения, гранулированного на дисковой мельнице до размера, проходящего через сито № 10 (2,5 мм), непрерывно экстрагируют н-гексаном при комнатной температуре, гексановый раствор упаривают до 10 л и осветляют в сепараторе 1 л гидроокиси калия в 90%-ном этаноле в течение ночи. Гексановую фазу нейтрализуют промывкой водой и упаривают досуха. Остаток берут в горячий бензол в достаточном количестве для получения насыщенного раствора (1л). Осадок отфильтровывают, охлаждают и кристаллизуют в горячем бензоле или горячем абсолютном этаноле. Кристаллический материал растворяют в Н-гексане (500 мл) и хроматографируют на колонке из Гедурана SI-60 размером 5x50 СМ (фирмы Мери-Дармитадт) при элюировании порциями по поллитра. Две первые поллитровые фракции элюата выпаривают и кристаллизуют в горячем гексане, горячем бензоле или горячем абсолютном этаноле (выход 38 г). ПримерЗ. 12 кг сухого корневища, гранулированного на дисковой мельнице до размера, проходящего через сито Vf 10 (2,5 мм), непрерывно экстрагируют дихлорметаном при комнатной температуре. Дихлорметан упаривают досуха, и остаток берут в 5 л н-гексана. Гексановый раствор осветляют 1 л гидроокиси калия в 90%-ном этаноле в течение ночи, и гексановую фазу затем нейтрализуют промыванием водой и упаривают. Остаток берут в.1 лНгексана и хроматографируют на колонке из силикагеля-6 (100x10 см) с использованиемн-гекса на. Две первые фракции элюата упаривают, и остаток кристаллизуют в горя чем н гексане, горячем бензоле или горячем этаноле (выход 25 г). Примера. При нагревании с обратным холодильником 1ч 12 кг гра нулированного и высушенного целого растения (гранулометрия 2,5 мм или сито If 10) и экстрагируют 100 л мета нола при 70°С. Экстракт фильтруют и промывают на фильтре 20 л метанола. Метаноловый экстракт упаривают, и ос таток берут в смесь Н-гексана и воды (3:2, т. е. 30-20 л) и оставляют сто ять в ночи в сепараторе. Вод ную фазу удаляют, а гексановую фазу осветляют 10 л 20%-ной гидроокиси ка ЛИЯ в этаноле, ее нейтрализу ют промывкой водой и упаривают досуха. Остаток растворяют в 1л горяче го 90% но го этанола и оставляют стоять rjpM комнатной температуре «З ч. Осадок отфильтровывают и сушат под вакуумом над гидроокисью калия. Сухой осадок растворяют в 1 лн-гексана и хроматографируют на колонке из нейтральной окиси алюминия размеров50x5 см при элюироваНии нтексаном. Первые 5 л упаривают, и материал кристаллизуют в н-гексане, циклогексане, горячем бензоле и горячем абсолютном этаноле (выход 12-13 г). ; П р и м е р 5. Использ адт, мл: Фернен 40 Лактоза60 Ингредиенты смешивают, просветляют и вводят в твердые желатиновые капсулы. Капсулу, приготовленную опи санным образом, вводят пациенту три раза в день. П р и м е р 6. Используют, мг: Фернен60 Сахароза ,25 Крахмал20 Тальк5 Стеариновая кислота 5 Фернен и сахарозу смешивают и гра нулируют с раствором 10 желатина. Гранулы просеивают, сушат и затем смешивают с крахмалом, тальком и сте ариновой кислотой. Затем все просеивают и превращают в таблетки. П р и м е р 7- Используют, мг: Фернен50 , Арахисовое масло 100 Ингредиенты смешивают и вводят в мягкие желатиновые капсулы. Лека|эственные препараты получили название Анапсос и плацебо. П р и м ер 8. больной 37 лет страдал псориазом, КОТО1ШЙ развивался 8 лет, болезнь была генерализована по всему телу. Больной принимал Анапсос. 7 мес (tOO-600 мг в день), после принятия лекарства 2 мес у больного практически не осталось мест, пораженных псориазом ив настоящее время он полностью излечился от псориаза. П р и м е р 9. Бопьная 38 лет с общим лсориазом, развивавшимся k г, начала принимать Анапсос 27 июня 1979 Г| и через 1 мес состояние участков ее кожи, пораженных псориазом, значительно улучшигюсь. В следующее гюсещение клиники у нее была обнаружена ярко выраженная эритема кожи, причем из участков кожи, пораженных псориазом и прилегающих нормальных участков были выделены Staphylococcusaurea. Больная продолжала принимать Анапсос совместно с антибиотиком - триметоприм-сульфаметоксазол (12-13) 1 нед. После такого лечения последовало быстрое улучшение состояния пораженных мест. Больная продолжала принимать только Анапсос и до настоящего времени у нее не наблюдается возобнрвления заболевания псориазом. . П р им е р 10. Больная 25 лет страдала от псориаза, развивавшегося 18 лет. Она принимала Анапсос в 1968 г, и поражения псориазом исчезли. Через 6 лет заболевание возобновилось, больная принимала Анапсос, и опять наступила ремиссия. Ей прописали плацебо, которое она принимала 5 мес. Болезнь прогрессировала, и больная стала принимать Анапсос 1 мес. Однако больная далее не возвращалась в клинику и не получала никакого лечения 3 мес, в результате ее состояние ухудшилось. В это время из участков ее кожи, пораженных псориазом, и из прилегающих участков нормальной кожи были выделеЖ9| Staphylococcus aurea. Больная принимала антибиотик 5 дней, не переставая принимать Анапсос. По прошествии 1 мес ее состояние начало улучшаться, и после двух месяцев принятия Анапсоса на ее теле не осталось участков кожи, пораженных псориазом. П р и м е р 11. Больной 8 возрасте 12 лет, страдавший псориазом 8 мес, начал применять Анапсос и по прошест

ьии 1 мес наблюдалась значительная ремиссия участков его кожи, пораженных псориазом. После второго месяца лечения наступила почти полная ремиссия. Через два месяца из мест его кожи, пораженных псориазом, и глотки были выделены Staphylococcus aurea. Больной принимал антибиотик 5 дн вместе с Анапсосом, и по прошествии 1 мес поражения почти полностью исчезли, и в настоящее время возобновления болезни не наб/ж дается.

П р и м е р 12/ Больная в возрасте 59 лет страдала псориазом, развивавшимся в течение двух лет,, начала принимать Анапсос и в этот же день у нее были отобраны бактериальные культуры, и был выделен Staphylococcus aurea. После этого она принимала антибиотик 5 дн, не.прекращая принимать Анапсос. Спустя 3 мес наблюдалось явное улучшение , и по прошествии Ц мес больная в основном поправилась.

Предложенный способ обеспечивает получение терпенов, обладающих антипсориатическим действием. Полученные препараты применены на 152 пациентах, страдающих псориазом, при ежедневной дозе 200 мг, что вызвало исчезновение заболевания в более, чем 80 случаях в течение 1-3 мес. Полученные фармацевтические препараты высокоэффективны, нетоксичны и безвредны.

формула изобретения

Способ получения терпенов, обладающих антипсориатическим действием, ха ра к те ризующийся тем, что высушенные при 50-70°С корневи1да и листья DryopterJs crasslrhizoma, Polypodium vutgara Zinn, Polypod f urn lecotomos, Phlebodium decumanun J. Smith, Polypodium aureum Zinn, Polypodium triseriall и корневища Polypodium aureum Zinn и Polypodium triseriale экстрагируют метанолом, упаривают растворитель, полученный остаток обрабатывают смесью Н-гексана с водой в соотношении 10:4, отстаивают и к раствору добавляют раствор 10-20 -ной гидроокиси калия в этаноле, упаривают, фильтруют, осадок промывают этанолом, растворяют вн-гексане, хроматографируют и перекристаллизовывают в горячем абсогнотном спирте.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Гаммерман А.Ф. Курс фармакогнозии. Л.,,Медгиз, I960, с. 125-137.