СПОСОБ ИММУНОЛОГИЧЕСКОГО АНАЛИЗА Российский патент 1995 года по МПК G01N33/53 

Изобретение относится к агглютинационному иммунологическому анализу на основе неорганических носителей, в частности на оксиде железа (III).

Целью изобретения является повышение чувствительности способа.

Способ осуществляют следующим образом: для раститровки антигена (или антител) используют фосфатный буферный раствор следующей рецептуры: KCl 0,2г, NaCl 8,0 г, KH₂PO₄ 0,2 г, Na₂HPO₄ 2,9 г, Н₂O 1 л, рН 6,8-7,4.

В качестве характеристики данного буфера используют величину рН, замеряемую на ионометре универсальном ЭВ-74, при температуре 20^оС.

П р и м е р 1. Осуществляют реакцию агглютинации с оксидом железа (III), на который сорбируют антитела кроличьи к гамма-глобулину человека.

П р и м е р 2. Титр сыворотки 1:2000 (по прототипу 1:200).

В качестве антигена используют человеческий гамма-глобулин (противокоревый). Данным антигеном нагружают частицы Fe₂O₃.

Раститровку кроличьей сыворотки против C-глобулина человека осуществляют фосфатным буферным раствором рН 7,4 и в сравнении в ацетатном буфере (прототип). Титр антител 1:5000.

П р и м е р 3. В качестве антигенов используют антиген-рекомбинатные белки вируса СПИД р 24 и р 41. Данными антигенами нагружали Fe₂O₃, раститровку сыворотки против антигенов р 24 и р 41 осуществляют фосфатным буферным раствором рН 7,2.

П р и м е р 4. Титр 1:25000. Миоглобином нагружают частицы Fe₂O₂, раститровку сыворотки против миоглобина осуществляют в фосфатном буферном растворе рН 6,8.

П р и м е р 5. Титр антител 1:5000. Фибронектином нагружают частицы Fe₂O₃, раститровку сыворотки против фибронектина осуществляют в фосфатном буфере рН 7,4.

П р и м е р 6. Титр антител 1:5000. Чумным антигеном нагружают частицы Fe₂O₃, раститровку сыворотки к чуме проводят в фосфатном буфере. Титр антител 1:100000.

П р и м е р 7. Туляремийным антигеном нагружают частицы Fe₂O₃, раститровку сыворотки к туляремии производят в фосфатном буфере. Титр антител 1: 100000.

П р и м е р 8. В качестве антигена используют трофобластический G-глобулин. Данным антигеном нагружают частицы Fe₂O₃, раститровку сыворотки к трофобластическому G-глобулину осуществляют в фосфатном буферном растворе рН 7,2. Титр антител 1:5000.

П р и м е р 9. Для нагружения частиц Fe₂O₃ используют моноклональные антитела (МкАТ) к туляремии производства института Иммунологии Минмедбиопрома СССР. Раститровку туляремийного антигена осуществляют в фосфатном буфере рН 7,4. Титр антигена 1:100000.

П р и м е р 10. Для нагружения частиц Fe₂O₃ используют МкАТ к фракции 1 чумы производства Средне-Азиатского противочумного института. Раститровку антигена чумы осуществляют в фосфатном буфере рН 7,2. Титр антигена 1: 100000.

П р и м е р 11. Для нагружения частиц Fe₂O₃ используют антитела (АТ) к НВ антигену. Раститровку НВ антигена осуществляют в фосфатном буфере рН 6,8. Титр антигена 1:10000.

По сравнению с прототипом увеличивается чувствительность способа в 5-20 раз в зависимости от использованных в качестве сенситанов антигенов или антител.

Изобретение относится к медицине, а именно к иммунологии, и может быть использовано для проведения иммунологического анализа. Цель изобретения повышение чувствительности способа. Частицы оксида железа сенсибилизируют иммунологическими реагентами, затем инкубируют их с исследуемой пробой, разведенной предварительно фосфатным буфером, рН 6,8 7,6. Содержание веществ в пробе определяют по агглютинации частиц в конечном разведении. По сравнению с прототипом увеличивается чувствительность способа в 5-20 раз.

СПОСОБ ИММУНОЛОГИЧЕСКОГО АНАЛИЗА, включающий сенсибилизацию частиц оксида железа, инкубацию их с исследуемой пробой, разведенной в буферном растворе, а содержание вещества в пробе определяют по наличию агглютинации частиц в конечном разведении, отличающийся тем, что, с целью повышения чувствительности анализа, в качестве буфера для разведения проб используют фосфатный буферный раствор, рН 6,8 7,6.