СПОСОБ ПОСТАНОВКИ АГГЛЮТИНАЦИОННОГО ИММУНОЛОГИЧЕСКОГО АНАЛИЗА Российский патент 1999 года по МПК G01N33/53 

Изобретение относится к иммунологии и биотехнологии, в частности к агглютинационному анализу на основе гидрозолей - ультрадисперсных частиц соединений металлов, на поверхность которых засорбированы биоспецифические лиганды (А.Г. Мешандин и соавторы. Положительное решение по заявке N 4813085/30-14; А. Г. Мешандин. Авторское свидетельство СССР N 1.839.560 от 30.12.93).

Недостатками решения, взятого за прототип, является низкая чувствительность гидрозольных диагностикумов и недостаточная скорость проведения реакции.

Задачей изобретения является увеличение чувствительности реакции и ускорение проведения анализа. Задача решается тем, что для разведения гидрозолей и биологических жидкостей используют буферные растворы, содержащие в своем составе поверхностно-активные вещества (ПАВ) в количествах от 10^-6 до 10⁺² мг/мл. В качестве ПАВ используются различные неионогенные препараты и белковые молекулы, также обладающие свойствами поверхностной активности.

Изобретение иллюстрируется следующими примерами конкретного выполнения.

Пример 1
Осуществляют нагружение оксида железа (III) противокоревым человеческим γ- глобулином. Далее производят разведение гидрозоля и сывороток в буферах, содержащих ПАВы, а также фосфатном буферном растворе, не содержащем ПАВ (прототип). Результаты эксперимента представлены в табл.1 (см. в конце описания).

Пример 2
Осуществляют нагружение гидроокиси меди антигеном бычьим кардиолипиновым. Далее осуществляют операции, аналогичные примеру 1. Результаты эксперимента представлены в табл.2 (см. в конце описания).

Пример 3
Осуществляют нагружение гидроокиси цинка антителами к миоглобину. Далее осуществляют операции, аналогичные примерам 1-2. Результаты эксперимента представлены в табл.3 (см. в конце описания)
Пример 4
Осуществляют нагружение частиц водной (желтой) окиси железа Fe₂O₃ * H₂O генно-инженерными антигенами ВИЧ (ENV+GAG).Далее осуществляют операции,аналогичные примерам 1-3. Результаты эксперимента представлены в табл.4 (см. в конце описания).

Таким образом, из представленных примеров видны очевидные преимущества заявляемого технического решения в сравнении с известными.

Изобретение может быть использовано в медицине, а именно в иммунологии. Дисперсный препарат с сорбированными на его поверхности биоспецифическими лигандами соединяют с анализируемыми образцами цельной либо разбавленной биологической жидкости и оценивают результат реакции по агглютинации, при этом в растворы для разведения указанных компонентов вводят поверхностно-активные вещества в концентрациях от 10^-6 до 10⁺² мг/мл. Способ обеспечивает увеличение чувствительности и ускорение проведения анализа. 4 табл.

Способ осуществления агглютинационного иммунологического анализа, заключающийся в том, что дисперсный препарат с сорбированными на его поверхности биоспецифическими лигандами соединяют с анализируемыми образцами цельной либо разбавленной биологической жидкости и оценивают результат реакции по агглютинации, отличающийся тем, что в растворы для разведения указанных компонентов вводят поверхностно-активные вещества в концентрациях от 10^-6 до 10⁺² мг/мл.