ШТАММ AMYCOLATOPSIS MEDITERRANEI - ПРОДУЦЕНТ РИФАМИЦИНА В Российский патент 1996 года по МПК C12P1/06 C12P17/18 C12P1/06 C12R1/365 

Изобретение относится к микробиологической промышленности, в частности, к производству антибиотиков, а именно, рифамицина В. Рифамицин В служит основой для производства полусинтетического антибиотика рифамицина, применяемого для лечения туберкулеза, лепры и т.д.

Известно несколько штаммов продуцентов рифамицина В: Streptomyces mediterranei ATCC 13685 с активностью 400 мкг/мл [1] Str. mediterranei ATCC 21789 с активностью 2300 мкг/мл [2] Str. albovinaceus ATCC 12951 с активностью 400 мкг/мл [1] Str. tolypophorus B-2847 с активностью 250 мкг/мл [3] Nocardia asiatica 2739 с активностью 400 мкг/мл [4] Str. albovinaceus G5/A с активностью 5500 мкг/мл [5]
Прототипом предлагаемого изобретения является самый активный из описанных штаммов мутант Streptomyces albovinaceus G5/A с активностью 5500 мкг/мл на 150 ч ферментации [5]
Недостатком всех известных штаммов продуцентов рифамицина В является низкая активность.

Целью изобретения является получение штамма продуцента, обладающего высокой активностью.

Цель была достигнута путем многоступенчатой селекции штамма Nocardia (по современной классификации Amycolatopsis) mediterranei P-84 [6] с отбором мутантов по признаку уменьшенной чувствительности биосинтеза к концентрации барбитала в ферментационной среде.

В результате получен новый штамм Amycolatоpsis mediterranei P-91, отличающийся высокой продуктивностью биосинтеза рифамицина В, а также рядом морфологических, культуральных и физиологических свойств. Новый штамм P-91 образует 20500 мкг/мл рифамицина В на 216 ч, что почти в три раза превышает продуктивность биосинтеза штамма прототипа G5/A (5500 мкг/мл на 150 ч).

Штамм Amycolatоpsis medinerranei P-91 депонирован в коллекции культур Всесоюзного научно-исследовательского института антибиотиков под номером 2142. Справка о депонировании прилагается.

В таблицах 1 и 2 дано описание культурально-морфологических и физиологических свойств штаммов G5/A и P-91.

Субстратный мицелий и растворимый пигмент у штамма Р-91 характеризуются коричневым, красным, желтым, бурым оттенками, тогда как у прототипа, штамма G5/A, обычны серые и голубоватые оттенки (на средах Ваксмана, ISP 2, 3, 4).

В отличие от штамма Р-91, штамм G5/A не усваивает галактозу и сахарозу и слабо усваивает раффинозу. Основные отличия штаммов суммированы в табл. 3.

Изобретение иллюстрируется следующим примером.

Суспензией мицелия культуры Amycolatopsis mediterranei P-91, выросшей на агаризованной среде, засевают жидкую посевную среду следующего состава (мас. ): соевая мука 2,5; мел 0,5; аммоний фосфорнокислый двузамещенный - 0,02; глицерин 3,0; вода остальное. Через 65 ч роста посевным мицелием в количестве 10% засевают ферментационную среду следующего состава (мас.): глюкоза 4,0; сахароза 9,0; соевая мука 3,0; аммоний сернокислый 1,1; диаммоний фосфат 0,06; мел 1,6; вода остальное.

Через 216 ч ферментации в культуральной жидкости накапливается 20500 мкг/мл рифамицина В.

Использование: биотехнология, биосинтез антибиотика рифамицина В. Сущность изобретения: с целью повышения продуктивности процесса биосинтеза рифамицина В изыскан новый штамм Amycolatopsis mediterranei 2142 - продуцента рифамицина В. 3 табл.

Штамм Amycolatopsis mediterranei 2142- продуцент рифамицина В.