СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ОСТРОЙ ПНЕВМОНИИ Российский патент 1997 года по МПК G01N33/53 G01N33/48 

Изобретение относится к медицине, а именно к пульмонологии и может быть использовано для диагностики пневмонии, а также туберкулеза.

Известен способ диагностики острой пневмонии путем исследования периферической крови. Диагностика и лечение острых пневмоний и ОРВИ, осложненных бронхообструктивным синдромом у детей раннего возраста. (Методические рекомендации, Черновцы, 1989, с 24).

Цель изобретения ускорение и повышение точности способа.

Способ осуществляется следующим способом.

Обследуют доноров и больных, находящихся на лечении в стационаре. У обследуемого берут кровь из вены в пробирку с гепарином, на 1 мл крови 25 ед. гепарина. Кровь разводят раствором Хенкса в соотношении 1:1. На дно сухой пробирки наливают 3 мл градиента плотности (1,077 г/мл). Наслаивают разбавленную кровь на градиент плотности, не допуская перемешивания сред. Центрифугируют 40 минут при 1500 об/мин. После центрифугирования убирают надосадочную жидкость пипеткой и собирают верхнее кольцо, состоящее из лимфоцитов в сухую пробирку. Нижний слой плазмы, содержащий гранулоциты, собирают в другую пробирку. Добавляют раствор Хенкса до 5 мл, ресуспеидируют и отмывают при 1500 об/мин 10 минут. Убирают надосадочную жидкость до 0,1 мл. Добавляют раствор Хенкса, чтобы получилась суспензия лимфоцитов в объеме 1 мл, гранулоцитов 0,7 мл. Ресуспендируют. Подсчитывают клетки в камере Горяева и доводят до нужной концентрации (лимфоциты 4,5•10⁶ мл, гранулоцитов 3,0•10⁶ мл). Переносят лимфоциты в бакпечатку, гранулоциты на покровное стекло в бакпечатку и инкубируют 1 ч. при 37^oC в термостате. После инкубации убирают надосадочную жидкость с гранулоцитов и добавляют к гранулоцитам лимфоциты. Инкубируют 1 ч. при 37^oC в термостате. Затем добавляют 1 каплю 3% глютарового альдегида и выдерживают в течение 5 мин при комнатной температуре. Убирают надосадочную жидкость. Мазки высушивают. Окрашивают по Маю-Грюнвальду. Помещают на предметное стекло и высушивают при комнатной температуре. С помощью микроскопа определяют количество свободнолежащих гранулоцитов и связанных гранулоцитов,свободнолежащих лимфоцитов и розеткообразующих.

Для повышения точности результатов подсчета ведут на 300 клетках в 3-х полях зрения.

Полученные результаты, характеризующие характер заболевания представлены в таблице.

У больных с острыми пневмониями по цитолейкограмме выявлена закономерность образования 4-х связанных гранулоцитов и уменьшение двойных розеток (1 лимфоцит + 2 гранулоцита) по сравнению с донорами в 1,3 1,8 раза.

Разработанный способ диагностики позволяет получить достоверные данные в течение 4-х ч. не требует особой стерильности, дефицитных реакторов, дорогостоящих приборов и прост в использовании.

Использование: в области медицины, а именно в пульмонологии и может применяться для диагностики острой пневмонии, а так же туберкулеза. Сущность изобретения: исследуют кровь больных с острыми пневмониями по сравнению с донорами. Показатели крови оценивают по цитолейкограмме. У больных с острыми пневмониями выявлена закономерность образования 4-х связанных гранулоцитов и уменьшение двойных розеток (1 лимфоцит + 2 гранулоцита) по сравнению с донорами в 1,3-1,8 раза. Способ позволяет получить достоверные данные в течении 4-х ч, не требует особой стерильности, дефицитных реакторов, дорогостоящих приборов и прост в использовании. 1 табл.

Способ диагностики острой пневмонии путем исследования крови, отличающийся тем, что показатели крови оценивают по цитолейкограмме и при выявлении четырех связанных гранулоцитов и при уменьшении двойных розеток в 1,3 1,8 раза относительно нормы диагностируют острую пневмонию.