СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АНАФРАНИЛА Российский патент 1997 года по МПК G01N21/64 

Изобретение относится к аналитической химии, а именно к способам качественного и количественного определения анафранила (кломипрамина).

Известен способ спектрофотометрического определения дибензазепинов.

Недостатком способа является недостаточная чувствительность, избирательность и длительность анализа.

Целью изобретения является повышение чувствительности, избирательности и упрощение способа.

Поставленная цель достигается описываемым способом определения анафранила (кломипрамина), заключающийся в обработке анализируемой пробы формальдегидом и концентрированной серной кислотой, взятых в соотношении (0,5:2,0), обработку которыми проводят последовательно, а анализ осуществляют путем измерения относительной интенсивности флуоресценции полученного раствора.

Существенными отличиями является:
обработка анализируемой пробы формальдегидом и концентрированной серной кислотой в соотношении 0,5 2,0;
обработка осуществляется последовательно;
анализ осуществляют путем измерения относительной интенсивности флуоресценции полученного раствора.

При изучении оптимальных условий протекания флуоресцентной реакции установлено, что интенсивность флуоресценции не изменяется в течение 24 ч (см. табл. 1). Зависимость интенсивности флуоресценции от соотношения взятых химических реагентов (формальдегида и концентрированной серной кислоты) см. в табл. 2). Прослежена зависимость интенсивности флуоресценции от вида растворителя, применяемого для выяснения конечного эффекта данной реакции (см. табл. 3), последовательности добавления химических реагентов: формальдегида и концентрированной серной кислоты (см. табл. 4). Определению анафранила не мешают лудиомил, дамилен малеинат, бефол. Выявлена избирательность данной реакции в сравнении с прототипом (см. табл. 5), а также представлены данные по упрощению данного способа и повышению чувствительности в отношении прототипа.

Пример 1. Качественное определение анафранила (кломипрамина) в субстанции, драже, ампулированных растворах.

К 1-2 мг порошка растертых таблеток (драже), содержащих действующее вещество анафранил, прибавляют 0,5 мл формальдегида и 2,0 мл концентрированной серной кислоты. При облучении ультрафиолетовым светом наблюдается зеленая флуоресценция. Определению не мешают: лудиомил, дамилен малеинат, бефол, ниаламид, фторацизин, цефедрин.

Пример 2. Количественное определение анафранила (кломипрамина) в таблетках (драже) "Анафранил" (модельные образцы).

К 0,05 г (т.н.) порошка растертых таблеток (драже) вносят в мерную колбу вместимостью на 100 мл, растворяют в 70-80 мл теплой дистиллированной воды, встряхивают 1-2 мин. Полученный раствор доводят дистиллированной водой до метки, перемешивают и фильтруют через складчатый фильтр. Первые 5-10 мл фильтрата отбрасывают (раствор А).

К 1 мл раствора А добавляют 0,5 мл формальдегида, 2,0 мл концентрированной серной кислоты и дистиллированной воды до 10 мл, перемешивают и флуориметрируют относительно стандартных растворов анафранила. Для чего в ряд пробирок прибавляют 0,1; 0,2; 0,4; 0,6; 0,8; 1,0; 1,2; и 1,6 мл стандартного раствора с концентрацией препарата 500 мкг/мл по 0,5 мл формальдегида, 2,0 мл концентрированной серной кислоты и доводят дистиллированной водой до 10 мл соответственно, растворы перемешивают и флуориметрируют одновременно с испытуемыми растворами при длинах волн возбуждения 365 нм и излучения флуоресценции 485 нм.

Расчет найденного количества анафранила в драже "Анафранил" в граммах осуществляют по формуле:
,
где X содержание анафранила, г;
C средняя масса (драже), г;
P объем (мл), до которого разбавляют навеску;
н исходная навеска, г;
1000000 перевод мкг в г.

Полученные результаты представлены в табл. 6.

В результате исследования первого этапа флуоресцентной реакции получено, что квадратичный член В3 0,5, его отбросить невозможно, что указывало на значительную кривизну поверхности вблизи оптимума. Был взят другой интервал на II этапе, получено уравнение регрессии:
У 36,56 11,063 Х1 9,69Х2 2,31 Х3
На основании сравнения значений нулевого уровня с коэффициентом ВО 36,56 было установлено, что получены условия проведения эксперимента, из которых выявлено: оптимальными условиями проведения флуоресцентной реакции являются соотношения формальдегида и концентрированной серной кислоты (0,5 2,0)
Условия проведения эксперимента:
Х1 1,0 0,5 0,5 0,4 0,25 0,1
Х2 2,5 2,2 2,0 2,0 1,90 1,8
, ср. 52,75 73,0 76,75 72,0 69,75 66,5.

Использование: качественное и количественное определение анафранила. Сущность изобретения: пробу предварительно обрабатывают формальдегидом и концентрированной серной кислотой, взятых в соотношении 0,5 : 2,0, обработку которыми проводят последовательно, а анализ осуществляют путем измерения относительной интенсивности флуоресценции полученного раствора. 6 табл.

Способ определения анафранила, отличающийся тем, что анализируемую пробу обрабатывают последовательно формальдегидом и концентрированной серной кислотой, взятых в объемном соотношении 0,5 2,0, с последующим измерением интенсивности флуоресценции полученного раствора.