Способ определения азалептина Советский патент 1992 года по МПК G01N21/64 

1

(21)4898235/25

(22)03.01.91

(46)07.11.92. Бюл №41

(71) Курский государственный медицинский

институт

(72)Л.А.Котова

(56) Люминесцентный анализ./Под ред.

М.А.Константиновой-Шлезингер, М.1 Гос.

из-вофиз.мат. лит. 1961 с 304-306.

Фармокопейная статья 42-391-87 (лепо- некс. азалептин клозапин)

(54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АЗАЛЕПТИ- НА

(57) Способ определения азалептина заключается в том, что в качестве химических ре- агентов используют формальдегид и концентрированную серную кислоту, взятых (30:70), обработку которыми проводят последовательно После этого измеряют интенсивность флуоресценции пoлyчe ного раствора при максимуме возбуждения флуоресценции 365 нм и максимуме излучения флуоресценции 410нм 6 табл

Изобретение относится к аналитической химии, а именно к способам качественного и количественного определения азалептина.

Известен способ качественного определения азалептина, основанный на использовании ТС-хроматографии препарата и просмотре зоны локализации в УФ-свете при поглощении А 254 нм. Недостатком данного способ является недостаточная чувствительность (ВФС 42-391-87).

Известен способ количественного определения азалептина. основанный на растворении анализируемой пробы в смеси хлороформа и метанола (8:2), с последующим добавлением хлористоводородной кислоты и измерении оптических характеристик полученного раствора спектрофото- метрическим методом (ВФС 42-391-87), Недостатком данною способа является недостаточная избирательность

Целью изобретения является - повышение чувствительности и избирательности способа

Поставленная цель достигается за счет обработки анализируемой пробы формальдегидом и концентрированной серной кислотой, взятыми в соотношении (30:70). обработку которыми проводят последовательно, после чего измеряют интенсивность флуоресценции полученного раствора при максимуме возбуждения флуоресценции 365 нм и максимуме излучения флуоресценции 410 нм.

Существенными отличиями предлагаемого способа является то что в качестве химических реагентов используют формальдегид и концентрированную серную кислоту, взятых в соотношении (30 70);

обработку проводят последовательно;

измерение интенсивности флуоресценции полученного раствора осуществляют при максимуме возбуждении флуоресценции 365 нм и максимуме иЗЛУЧГ нпч флуоресценции 410 нм

При изучении оптимальных уповии протекания фл оресцентнпи реакции /ста новлено, что ин генсивног гь 1уоресценции не изменяется в темени-3 ч Знписпмость

сл

с

ч|

ч|

4 ГО

СА)

СЛ

интенсивности флуоресценции от времени приведена в табл. 1.

Найдена зависимость интенсивности флуоресценции о г соотношения взятых химических реагентов: формальдегида и концентрированной серной кислоты табл. 2. Прослежена зависимость интенсивности флуоресценции от вида растворителя, применяемого для выяснения конечного эффекта данной реакции табл. 3, последовательности добавления химических реагентов: формальдегида и концентрированной серной кислоты табл. 4.

П р и м е р 1. Качественное определение азалетинэ в субстанции. 1-2 мгазалепгина обрабатывают последовательно формальдегидом и концентрированной серной кислотой в соотношении (30:70), яркая фиолетовая флуоресценция, свидетельствующая о наличии азалептина в пробе, наблюдается в результате облучения полученного раствора ультрафиолетовым светом,

П р и м е р 2. Количественное определение азалептина в таблетках. 0,05 г (точная навеска) растертых тэблегок вносят в мерную колбу вместимостью 100 мл. обрабатывают 30 мл формальдегида и доводят концентированной серной кислотой до метки (р-р А), 8 ряд пробирок помещают 0,2; 0,4; 0,6; 0,8; 1,0: 1.2; 1,4; 1,6 мл стандартного раствора А с концентрацией препарата ШОО мкг/мл и доводят растворы до 10 мл этиловым эфиром уксусной кислоты соответственно.

Полученные растворы перемешивают и флуориметрмруют одновременно с испытуемыми растворами при длинах волн возбуждения флуоресценции 365 нм и излучения флуоресценции 410 нм.

Расчет найденного количества азалептина Б таблетках Азалептин в г осуществляют по формуле:

ХА х Р х С

И х 1000000

(де X - содержание азалептина, г;

С - средняя масса таблетки, г;

Р - объем (мл), до которою разбавляют исходную навеску;

Н - исходная навеска, г

1000000- перевод мкг в г.

Сравнение предлагаемого способа и прототипа по избирательности и чувствительности в табл. Б,

Результаты количественного определения азалептина в таблетках на модельных смесях обработаны статистически и пред- главлены в табл 6.

П р и м е р 3. Качественное и количественное определение эзалептина в воздухе рабочей зоны. Исследуемый воздух со скоростью 10 л/мин аспирируют через два последовательно соединенных сосуда прибора Зайцева. Проба обрабатывается формальдегидом и концентрированной серной кислотой (30:70). Для определения азалептина отбирают 1 мл, добавляют до 10 м1

этилового эфира уксусной кислоты соответственно, Полученные растворы перемешивают и флуориметрируют.

Интенсивность флуоресценции полученных растворов измеряют соответствеино градуировочным растворам по сравнению с контролем, которые готовят одновременно и идентично пробам. Для чего в ряд пробирок вносят 0,2; 0,4; 0,6; 0,8; 1,0; 1,2; 1,4 и 1.6 мл стандартного раствора

азалептина с содержанием вещества 1000 мкг/мл, добавляют до 10 мл этилового эфира уксусной кислоты соответственно; перемешивают и флуориметрируют при длинах волн возбуждения флуоресценции

365 нм и излучения флуоресценции 410 нм. Расчет концентрации азалептина и воздухе рабочей зоны осуществляют по формуле:

30

Y А х В

х т--где А - концентрация вещества в анализируемом растворе пробы, найденная относи- тельно стандартного раствора, мкг/мл; В - общий обьем пробы, мл;- Б - объем раствора пробы, взятый на анализ, мл;

У - объем воздуха, л, отобранный для анализа и приведенный к стандартным условиям.

Формула изобретения Способ определения азалептина, иключающий обработку анализируемой пэобы химическими реагентами с последуй: щим измерением оптических характеристик полученной смеси, по которым проводят определение, отличающийся тем, что, с

целью повышения чувствительности и избирательности способа, в качестве химических реагентов используют формальдегид и концентрированную серную кислоту, взятых в соотношении 30:70, обработку которыми проводят последовательно, после чего измеряют интенсивность флуоресценции полученного раствора при максимуме возбуждения флуоресценции 365 нм и максимуме излучения флуоресценции 410 нм.

Таблица 1

Зависимость интенсивности флуоресценции от времени протекания флуоресцентной

реакции.

Таблица 2 Зависимость интенсивности флуоресценции от соотношения взятых реагентов.

Таблица 3

Зависимость интенсивности флуоресценции от вида раст- ворителл, применяемого для выяснения конечного эффекта данной реакции

Вил растворителя

Вода дистиллированна

Метанол

Пропанол

Диоксан

Хлороформ

Толуол

Этиловый эфир уксус™ ной кислоты

Дпметилформамид

Гексан

Бензиловый спирт

Ацетон

Ксилол

Этоноп

Интенсивность флуоресценции, %

10 9

10,3 8,7

не идет не идет

17,5 6,7

не идет 7, 11,7

не идет 7,6

Таблица

Зависимость интенсивности флуоресценции от последовательности добавления химических реагентов 100 мкг/мл

римечание Для выяснения конечного

эффекта реакции берут 1 мл 100 мкг/мл доводят до 10 мл этиловым эфиром уксусной кисло гы

Т а б л и ц а 5

-Сравнения заявляемого способа и прототипа по избирательности и чувствительности

Заявляемый способI Прототип

По избирательности

Определению не мешают;лудир™ мил, бефол, анафранил, наблюдается ярко-фиолетовая флуоресценция

А 365 HMJ

fl 410 нм

1 мкг/мл

По чувствительности

Мешают: лудиомил, анафранил, бефол и др. антидепрессанты

fl 254 им

100 мкг/мл

Результаты количественного определения азалептина в таблетках,на модельных смесях; п 7, Р Э5%

0,027 0,026 0,024 0,026 0,027 0,026 0,026

108,0

10,О

96,0

104,0

108,0

104,0

104,0

Таблицаб

X 104,0 S 4,000 Sj 1,5122 ДХ 3,7048

3,56