Способ количественного определения1,2,5-ТРиМЕТил-4-пРОпиОНилОКСи-4-фЕ-Нил-пипЕРидиНА гидРОХлОРидА Советский патент 1981 года по МПК G01N21/64 

54) СПОСОБ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ 1,2,5-ТРИМЕТИЛ-4-ПРОПИОНИЛ-ОКСИ-4ФЕНИЛПИПЕРИДИНА ГИДРОХЛОРИДА

фику, который строят следующим образом. К 1 мл стандартного водного раствора промедола с содержанием 500 мкг/мл приливают 9 мл 1% раствора формальдегида в концентрированной серной кислоте, тщательно перемешивают. Затем отмеривают О,б,О,7, 0,8, 0,9 и 1,0 мл полученного раствора и добавэтяют дистиллированную воду до 10 мл. Полученные растворы флуориметрируют параллельно с растворами исследуемых образцов. По результатам этих измерейий строят калибровочный график.

Результаты флуориметрического определения 2%-ного раствора промедола представлены в табл. 1. Таблица

Пример 2. Определение проме дола в таблетках 0,025 г. 0,1 г (точная навеска) мелкоизмельченных таблеток переносят в мерную колбу на 50 мл, прибавляют 30 мл дистиллированной воды и энергично встряхивают до полного растворения. Затем, доливают дистиллированной водой до метки и снова тщательно перемешивают. К 1 мл данного раствора прибавляют 9 мл 1%-ного раствора формальдегида в концентрированной . серной кислоте, перемешивают. К 1 мл полученного раствора прибавляют 9 мл дистиллированнойводы и замеряют ин0,1034,8

0,099- 4,5

Таблица 2

0,0240 0,0225

X 0,02325 тенсивность флуоресценции. Содержание промедола определяют по стандартному раствору, для приготовления которого к 1 мл стандартного водного раствора с содержанием препарата 1000 прибавляют 9 мл 1%-ного раствора формальдегида в концентрированной серной кислоте, перемешивают. И 0,5 мл данного раствора прибавляют 9,5 мл дистиллированной воды и флуориметрируют одновременно с растворами исследуемых образцов. Результаты флуориметрического определения промедола в таблетках по 0,025 г представлены в табл. 2.

Пример 3. Определение промедола в сыворотке крови.. 5 мл исследуемой оксалатной крови помещают в центрифужную пробирку и центрифугируют в течение 30 мин при 8 тыс.об/мин. К 2 мл центрифугата в делительной воронке прибавляют 10 мл хлороформа и перемешивают в течение 20 мин., Хлороформный слой отделяют в чашку для выпаривания. Экстрагирование повторяют. Хлороформ выпаривают на водяной бане при температуре не выше 90°С. К сухому остатку приливают 1 мл 1% раствора формальдегида в концентрированной серной кислоте, тщательно перемеивают, добавляют 9 мл дистиллированной воды и переносят в кювету флуоКоличество промедола в сыворотке

6,9

7,4 7,9 5,9

6,5 6,7 8,4

7,(Т

Продолжение табл. 2

риметра, Флуориметрируют одновременно со стандартными образцами. Количество промедола в исследуемом образце определяется по калибровочному

0 графику для построения которого к 1 мл стандартного водного раствора препарата с концентрацией 1000 мкг/мл прибавляют 9 мл 1%-ного раствора формальдегида в концентрированной

5 серной кислоте. К 0,1, 0,5и 1,0 мл данного раствора приливают соответственно 9,9, 9,5 и 9,0 мл дистиллиро:ванной воды. Стандартные образцы .Флуориметрируют одновременно с ис0следуемыми растворами.

Данные по определению промедола в сыворотке крови приведены в табл.. 1таблицаЗ

кровяной

Метрологические

Ъ ±3,76

2o,,688 Истинное значение определяемой величинц:А 35,8+2,688

35,0 Пример 4, Определение проме- дола в моче. К 2 мл мочи в делительной воронке прибавляют 10 мл хлороформа и перемешивают в течение 10 мин. Экстрагирование повторяют. Хлороформный слой отделяют в фарфоровую чашку для выпаривания. Выпаривают на водяной бане при . К сухому остатку приливают 1 мл 1%-ного раствора формальдегида в концентрированной серной кислоте,. тщательно перемешивают, добавляют 9 мл дистиллированной воды. Полученный раствор переносят в кювету флуори метра и флуориметрируют одновременно

Определение производилось на отечественном электронном флуориметрё ЭФ-ЗМА с фильтрами и . Спектры измерялись на флуоресцентном спектрофотометре Хитачи модель MPF-2A производства Японии.

Концентрация раствора формальдегида в концентрированной серной кислоте , используемого для обработки анализируемой пробы, составляет от 0,001 до 0,3 г/мл. Оптимальными концентрациями являются от 0,01 до 0,1 г/мл. Фактически для определения промедола использовалась конценотгация формальдегида в концентриротанной серной кислоте 0,01 г/мл.

Зависимость интенсивности флуоресценции от коэффициента формгшьдегида в серной кислоте приведена в табл. 5

ТаблицаЗ

При изучении оптимальных условий проведения флуоресцентной реакции промелола с формальдегидом в серной кислоте выявлено влияние соотношения объемов водной фазы (стандартный водный раствор промедола) и фазы концентрированной серной кислоты с формальдегидом на интенсивность флуоресценции (табл. 6), Оптимальными являются соотношения объемов 3:1 (раствор формальдегида в концентрированной серной кислоте: водный раствор промедола).

Зависимость относительной интенсивности флуоресценции от соотношения объемов фаз серной кислоты и со стандартными образцами. Количество промедола в исследуемой пробе определяют по калибровочному графику, для построения которого к 1 мл стандартного водного раствора препарата с концентрацией 1000 мкг/мл прибавляют 9 мл 1%-ного раствора формальдегида в концентрированной серной кислоте. К 0,1, 0,5 и 1,0 мл данного раствора приливают 9,9, 9,5 и 9,0 4П дистиллированной воды. Стандартные образцы флуориметрируют одновременно с исследуемыми растворами. Данные по определению промедола в моче отражены в табл. 4. Т а б л и ц а 4

водного раствора промедола приведена в табл. 6.

Таблица 6 При исследовании оптимальных соотношений объема смеси промедола с форм альдегидом в кислоте, приливаемого объема дистиллированной воды и получении флуоресцирующего раствора выявлено, что оптимальными являются соотношения объемов не больше, чем 49:1 и не меньше, чем 9:1. В табл. 7 приведена зависимость относительной интенсивности флуоресценции от разбавления водой анализируемой пробы.

Таблица

Соотношение объемов (вода : кислота) Формула изобретения Способ количественного Определения 1,2,5-триметил-4-пропионил-окси-4-фенилпиперидина гидрохлорида, отличающийс я тем, ч,то, с целью повышения чувствительности определения, анализируемую пробу обрабатывают раствором формальдегида в серной кислоте с последующим добавлением к полученному раствору воды и флуориметрировании полученного раствора. Источники информации, принятые во внимание при экспертизе 1.Инструктивно-методические указания. Вып. 1. М., 1976, с. 45. 2.Государственная фармакология СССР. 10-е изд. М., 1968, с. 563 (прототип).