СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ АДЕНОЗИН МОНОФОСФАТА Российский патент 1997 года по МПК C07H19/16 

Изобретение относится к области органической химии и фармакологии, в частности, к способам получения аденозина монофосфата.

АМФ (лекарственный препарат фосфаден), применяется в фармакологии в качестве сосудорасширяющего средства, обладающего антиагригационными свойствами, способствующими макро- и микроциркуляции. Существует ряд способов получения АМФ. Известен способ фосфорилирования рибонуклеозидов с помощью хлорокиси фосфора с последующим выделением продукта на хроматографической колонке [1] Недостатком метода является длительная и трудоемкая очистка целевого продукта на хроматографической колонке и сравнительно невысокий выход целевого продукта.

Известно также избирательное фосфорилирование нуклеозидов с помощью хлорокиси фосфора, карбоксильной кислоты, органического основания и полярного растворителя [1]
Недостатком данного способа является многокомпонентность реакционной среды и необходимость дополнительной очистки целевого продукта на активированном угле.

Наиболее близким является метод фосфорилирования нуклеозидов, описанный в статье "Tetrahedron Letter" [2] прототип.

Согласно данному способу незащищенный аденозин в количестве 0,004 моль обрабатывается 0,004 моль хлористого фосфора в присутствии 5 мл триалкилфосфата. Время синтеза 6 ч. Выход целевого продукта в реакционной смеси 84
Данный способ позволил получить аналитические количества АМФ. Поэтому способ-прототип не предусматривает выделение целевого продукта из реакционной смеси. В то же время выделение целевого продукта из реакционной смеси вызывает определенные трудности (см. приведенные выше аналоги).

Предложенный авторами заявки метод избирательного фосфорилирования аденозина, заключающийся в фосфорилировании аденозина хлорокисью фосфора в триэтилфосфате (ТЭФ) с последующим гидролизом и экстракцией хлороформом, позволяет преодолеть ряд недостатков аналогов и прототипа. Метод прямого фосфорилирования аденозина хлорокисью фосфора в присутствии триэтилфосфата при соотношении исходных веществ позволяет повысить образование АМФ в реакционной смеси. А экстракция смесью хлороформ вода в соотношении 8 11 с последующей кристаллизацией позволяет выделить целевой продукт с малым содержанием примесей без использования хроматографических методов (см. аналоги).

Кроме того, обработка реакционной смеси хлороформом приводит к изъятию фосфорной кислоты из реакционной смеси, что позволяет снизить содержание фосфора в готовом продукте.

Заявленный способ иллюстрируется следующими примерами:
В колбу загружают 120 мл триэтилфосфата и 0,07 моль аденозина, перемешивают и при 0^oC приливают смесь 0,11 моль хлорокиси фосфора и 10 мл триэтилфосфата, выдерживают 5 6 ч при перемешивании.

Контроль за реакцией осуществляют с помощью тонкослойной хроматографии в системе пропанол аммиак вода (7 3 2). Выход целевого продукта 98,0% К реакционной массе приливают смесь хлороформ вода в соотношении 8 11 и перемешивают. Нижний слой отделяют и передают на регенерацию триэтилфосфата.

Верхний слой подщелачивают 30 мл 25% аммиака до pH 1,85 1,95 и кристаллизуют из 150 мл этилового спирта при 0 12^oC. Выпавший осадок АМФ отфильтровывают и промывают 60 мл 50% водного спирта, охлажденного до 5 - 10^oC.

Технический АМФ перекристаллизовывают в 240 мл дистиллированной воды при температуре 80 90^oC с добавлением 0,5 г активированного угля, перемешивают, фильтруют, уголь промывают горячей водой.

Выпавший осадок АМФ отфильтровывают, промывают 60 мл охлажденной воды.

Осадок промывают в 80 мл этилового спирта, охлажденного до 8 10^oC и фильтруют.

Влажный АМФ сушат при температуре 45 50^oC и p 10 12 мм рт.ст.

Получают 17,9 г АМФ (содержание основного вещества не менее 98%).

Преимущества способа:
1. Увеличивается выход целевого продукта.

2. Используется негорючие реагенты.

3. Используемые реагенты обладают меньшей летучестью.

4. Хорошее разделение слоев в процессе экстракции (из-за большой разности удельных весов водного слоя и органического слоя позволяет максимально избежать потери целевого продукта).

5. Дополнительное изъятие фосфорной кислоты продукта реакции из водного раствора АМФ осуществляется за счет хорошего растворения ее в хлороформе (часть фосфорной кислоты растворяется в ТЭФ). Это приводит к снижению свободного фосфора в готовом продукте.

6. Возможность регенерации и возвращения в синтез дорогостоящего и дефицитного ТЭФ.

Использование: в качестве лекарственного препарата сосудорасширяющего действия. Сущность изобретения: аденозин монофосфат. Выход 98,0 %. Реагент 1: аденозин. Реагент 2: хлорокись фосфора в присутствии триэтилфосфата в соотношении 1:1,2:10,4 об./об. После чего проводят экстракцию смесью хлороформ-вода об./об. в соотношении 8 : 11, и после отделения верхнего слоя добавляют к нему 25 %-ный раствор аммиака до pH 1,8 - 1,95, промывают 50 %-ным водным этанолом и высушивают.

Способ получения аденозин монофосфата (АМФ), включающий обработку аденозина хлорокисью фосфора в присутствии триэтилфосфата, отличающийся тем, что аденозин, хлорокись фосфора и триэтилфосфат берут в массовом соотношении 1: 1,2:10,4, с экстракцией целевого продукта смесью хлороформ вода в соотношении 8: 11 с последующим отделением верхнего слоя и добавлением к нему 25% -ного раствора аммиака до рН 1,8 1,95, промывкой полученного осадка 50%-ным водным этанолом и высушиванием.