СПОСОБ ОЦЕНКИ ИММУННОГО СТАТУСА ДЕТЕЙ С АТОПИЧЕСКИМ ДЕРМАТИТОМ Российский патент 1999 года по МПК G01N33/53 G01N33/554 

Изобретение относится к области медицины, а именно к оценке достаточно сложного и труднодоступного иммунологического анализа с помощью наиболее простого и доступного метода, в частности используя общий анализ крови.

Известно, что в основе атопического дерматита лежат иммунологические нарушения. Поэтому определение иммунного статуса у детей с данной патологией является крайне необходимым исследованием. Это позволит выявить типы иммунологических реакций, лежащих в основе патогенетических механизмов заболевания для определения тактики терапевтических мероприятий (1, 2). Для этого требуется оценка иммунограммы больного атопическим дерматитом. Однако комплексное иммунологическое обследование недоступно для широкого использования в практическом здравоохранении, так как требует специально оборудованной лаборатории, дорогостоящих и дефицитных реактивов. Поэтому необходим поиск эффективного способа оценки иммунного статуса с помощью доступных и простых методов исследования, в частности используя общий анализ крови.

Выявление в результате математических исследований статистически значимые множественные коэффициенты корреляции между показателями общего анализа крови и иммунного статуса подтверждают наличие их взаимосвязи и позволяют осуществить определение одних величин через другие (табл. 1).

В качестве исходных величин прогноза взяты 7 показателей общего анализа крови: лейкоциты (L), палочкоядерные (п) и сегментоядерные (с) нейтрофилы, эозинофилы (э), лимфоциты (л), моноциты (м) и базофилы (б). Известная зависимость показателей общего анализа крови от возрастного периода детей предполагает добавочное введение к исходным величинам возраста обследуемого ребенка с атопическим дерматитом.

Результирующими величинами являются 22 показателя иммунного статуса: СД₃ (т-лимфоциты), СД₄ (т-хелперы), СД₆ (т-супрессоры), ИРИ (СД₄/СД₈), СД₁₉ (B-лимфоциты), СД₅₆ (NK-клетки), Е-РОК (относительное количество T-лимфоцитов), ЕАС-РОК (относительное количество B-лимфоцитов), T_абс (абсолютное количество T-лимфоцитов), B_абс (абсолютное количество B-лимфоцитов), иммуноглобуллины: IgA, IgM, IgG, IgE, ЦИК (циркулирующие иммунные комплексы), CH₅₀ (комплемент), НСТ_сп (спонтанный тест), НСТ_ст (стимулированный тест). ФИ_лат (фагоцитарный индекс с латексом). ФЧ_лат (фагоцитарное число с латексом), ФИ_staph (фагоцитарный индекс со стафилококком), ФЧ_staph (фагоцитарное число со стафилококком).

В качестве математической модели, описывающей эту зависимости использовалась линейная множественная ремиссия, так как ее параметры легко определяются через коэффициенты корреляции.

Регрессионное уравнение строится отдельно для каждого из 22 показателей иммунного статуса и имеет следующий вид:
Показатель = C0 = C1 • возраст + C2 • L + C3 • n + C4 • c + C5 • э + C6 • л + C7 • м + C8 • б,
где C_0-8 - экспериментально определенные коэффициенты регрессии для каждого показателя.

Для группы мальчиков (табл. 2), девочек (табл. 3) и детей с экземой (табл. 4) коэффициенты регрессии каждого иммунологического показателя представлены в таблицах 2, 3, 4. Ошибка прогноза (среднеквадратическое отклонение) в соответствующих единицах указана в последней колонке каждой таблицы.

У большинства обследованных детей результаты прогноза отличаются от истинных значений не более чем на 25%. Это позволяет оценить как среднее значение иммунологических показателей, так и тенденцию отклонения от нормы данного показателя.

Пример 1 прогноза. Девочка 12 лет страдает диссеминированным нейродермитом средне тяжелой формы.

Диагноз: нейродермит, распространенная форма, в стадии обострения, поливалентной этиологии, средней тяжести.

15.10.95 г. проведено комплексное иммунологическое обследование.

Результаты:
СД₃ - 48%, СД₄ - 40%, СД₈ - 12%, ИРИ - 3,3, СД₁₉ - 22%, Е-РОК - 46%, T_абс - 0,70 • 10⁹/л, ЕАС-РОК - 20%, B_абс - 0,22%, СД₅₆ - 12% IgA - 0,4 г/л, IgG - 0,9 г/л, IgM - 2,1 г/л, IgE - 420 к.ед, ЦИК - 0,039 ед. опт. пл., CH₅₀ - 51 ед, НСТ_сп - 8%, НСТ_ст - 34%, ФИ_лат - 54%, ФЧ_лат - 5, ФИ_staph - 18%, ФЧ_staph - 12.

Данные общего анализа крови: лейкоциты - 5,6 • 10⁹/л, п - 0%, с - 51%, э - 11%, л - 25%, б - 0%, м - 12%.

По данным гомограммы проводим прогноз двадцати двух показателей иммунного статуса на основе формулы регрессии и коэффициентов регрессии, приведенных в табл. 3.

СД₃ = 35,225849 + 1,633830 • 12 + 0,333070 • 5,6 + 2,480680 • 0 - 0,159690 • 51 - 0,732790 • 11 + 0,233590 • 25 + 0,580550 • 12 + 7,150080 • 0 = 53,2;
СД₄ = 42,737701 - 0,037020 • 12 - 0,706540 • 5,66 + 1,252510 • 0 + 0,085890 • 51 - 0,961190 • 11 - 0,082740 • 25 + 1,039860 - 12 + 4,262780 • 0 = 42,5;
СД₈ = -62,538952 - 0,284500 - 12 + 2,635790 • 5,6 - 0,080440 • 0 + 0,69200 • 51 + 0,920980 • 11 + 0,881120 • 25 + 0,09417 • 12 - 0,520590 • 0 = 17,3;
ИРИ = 21,680679 + 0,038620 • 12 - 0,533490 • 5,6 - 0,033740 • 0 - 0,161870 • 51 - 0,286650 • 11 - 0,190820 • 25 - 0,008090 • 12 + 0,065570 • 0 = 2,9;
СД₁₉ = -13,150960 - 1,018590 • 12 - 1,071610 • 5,6 + 0,296000 • 0 + 0,594470 • 51 + 0,912270 • 11 + 0,418750 • 25 + 0,289640 • 12 - 1,220790 • 0 = 22,9;
Е-РОК (Т%) = -4,417120 - 0,255510 • 12 - 0,195520 • 5,6 - 1,155590 • 0 + 0,224530 • 51 + 0,62435 • 11 + 1,206390 • 12 - 5,631320 • 0 = 53,0;
Е-РОК_абс (T_абс) = -0,199330 - 0,123240 • 12 + 0,033770 • 5,6 + 0,026610 • 0 - 0,012330 • 51 + 0,033130 • 11 + 0,039210 • 25 + 0,033950 • 12 - 0,053950 • 0 = 0,890;
ЕАС-РОК (B%) = -50,129742 + 1,315230 • 12 - 0,451560 • 5,6 - 0,034880 • 0 + 0,759190 • 51 - 0,102930 • 11 + 0,781400 • 25 + 0,061780 • 12 - 5,511710 • 0 = 25,4
ЕАС-РОК (B_абс) = -0,430880 + 0,025860 • 12 - 0,08410 • 5,6 - 0,014570 • 0 + 0,000190 • 51 + 0,037720 • 11 + 0,028040 • 25 - 0,020230 • 12 - 0,003830 • 0 = 0,291;
IgA = -5,216670 + 0,183530 • 12 + 0,362010 • 5,6 - 0,265290 • 0 + 0,022000 • 51 - 0,001730 • 11 + 0,066300 • 25 - 0,074020 • 12 - 0,109890 • 0 = 0,8;
IgG = 18,382259 + 0,928400 • 12 - 0,247510 • 5,6 - 1,599020 • 0 - 0,185120 • 51 - 0,449350 • 11 + 0,147960 • 25 - 0,537390 • 12 - 0,466310 • 0 = 11,0;
IgM = 8,004120 + 0,086230 • 12 - 0,23387 • 5,6 + 0,317770 • 0 - 0,089260 • 51 + 0,110130 • 11 - 0,053420 • 25 - 0,084800 • 12 + 0,321630 • 0 = 2,0;
IgE = 1730, 336792 + 53,468651 • 12 + 80,097778 • 5,6 - 98,046570 • 0 - 21,231510 • 51 - 56,087769 • 11 - 8,58448 • 25 - 35,654289 • 12 - 101,183792 • 0 = 476,28;
ЦИК = 0,032360 + 0,001400 • 12 + 0,002160 • 5,6 + 0,008210 • 0 - 0,000390 • 51 - 0,000260 • 11 - 0,000007 • 25 - 0,001140 • 12 + 0,005490 • 0 - 0,026;
CH₅₀ = 60,087189 - 1,572430 • 12 + 1,915050 • 5,6 + 4,705830 • 0 - 0,070700 • 51 - 0,757970 • 11 - 0,250010 • 25 + 0,837510 • 12 + 12,867570 • 0 = 44,0;
НСТ_сп = 10,087380 - 1,725250 • 12 + 2,631290 • 5,6 + 5,311830 • 0 + 0,132300 • 51 + 0,171360 • 11 - 0,986690 • 25 + 0,256340 • 12 + 7,116340 • 0 = 13;
НСТ_ст = -68,543404 - 4,141250 • 12 + 8,932960 • 5,6 + 10,053780 • 0 + 1,239940 • 51 + 1,054910 • 11 + 0,773300 • 25 + 1,815850 • 12 + 0,886990 • 0 = 47,0;
ФИ_лат = -5,570990 - 4,429820 • 12 + 3,624350• 5,6 + 3,388480 • 0 + 1,021840 • 51 + 0,774420 • 11 + 0,317570 • 25 + 0,947820 • 12 + 1,413400 • 0 = 42,5;
ФЧ_лат = -0,100540 - 0,317420 • 12 - 0,300320 • 5,6 + 0,159500 • 0 + 0,058860 • 51 + 0,257400 • 11 + 0,089100 • 25 + 0,143160 • 12 - 0,090550 • 0 = 4,2
ФИ_staph = 18,670349 - 0,400570 • 12 + 1,610940 • 5,6 + 9,176930 • 0 + 0,315990 • 51 - 2,189600 • 11 + 0,952370 • 25 - 0,727810 • 12 + 18,865440 • 0 = 29,9;
ФЧ_staph = 35,809930 - 0,334160 • 12 - 1,116210 • 5,6 + 1,536800 • 0 - 0,250770 • 51 + 0,26900 • 11 - 0,236720 • 25 - 0,117840 • 12 + 2,078090 • 0 = 8,0;
СД₅₆ = 143,826447 - 3,642630 • 12 + 4,760600 • 5,6 + 1,210390 • 0 - 0,934610 • 51 - 2,147310 • 11 - 1,423640 • 25 - 0,550220 • 12 - 2,098460 • 0 = 13,2.

Приводим сравнение результатов иммунограммы у данной больной на основании лабораторных исследований и по данным общего анализа крови (табл. А).

Пример 2. Мальчик 11 лет.

Диагноз: хронический нейродермит в стадии обострения, локализованная форма, поливалентной этиологии, средней тяжести.

Данные общего анализа крови:
L - 6,3 • 10⁹/л, п - 0%, с - 43%, э - 19%, л - 29%, м - 9%, б - 0%.

Данные иммунного статуса:
СД₃ - 60%, СД₄ - 41%, СД₈ - 40%, ИРИ - 1,03, СД₁₉ - 25%, СД₅₆ - 6,8%, Е-РОК - 60%, T_абс - 0,90 • 10⁹/л, ЕАС-РОК - 28%, B_абс - 0,51 • 10⁹/л, CH₅₀ - 41,2%, IgA - 2,1 г/л, IgG - 14,5 г/л, IgM - 2,7 г/л, IgE - 360 г/л, ЦИК - 0,15 ед. опт. пл. , НСТ_сп - 15%, НСТ_ст - 47%, Фи_лат - 30%, ФЧ_лат - 30, ФИ_staph - 70%, ФЧ_staph - 10,4.

Оценка иммунного статуса через общий анализ крови со среднеквадратическим отклонением:
СД₃ - 61,2% (± 10,59), СД₄ - 45,4 (± 4,81), СД₈ - 34,5% (± 9,03), ИРИ - 1,33 (± 1,04), СД₁₉ - 25,7% (± 7,07), СД₅₆ - 4,12 (± 9,88), Е-РОК - 52,16% (± 11,32), T_абс - 0,936 • 10⁹ (± 0,38), ЕАС-РОК - 26,02 (± 8,31), B_абс - 0,52 • 10⁹ (± 1,04), CH₅₀ - 44,78% (± 18,05), IgA - 1,25 г/л (± 11,1), IgG - 12,91 г/л (± 2,89), IgM - 2,4 г/л (± 0,78), IgE - 242,26 г/л (± 28,8), ЦИК - 1,08 ед. опт. пл. (± 0,007), НСТ_сп - 10,3% (± 8,46), НСТ_ст - 37,99% (15,45), ФИ_лат - 27,33% (10,69), ФЧ_лат - 5,04 (1,52), ФИ_staph - 67,70% (16,81), ФЧ_staph - 5,16 (1,69).

Данный способ оценки требует сложных трудоемких вычислений, поэтому для практического применения разработана программа прогнозирования для ЭВМ. Программа предельно упрощает трудоемкий процесс прогнозирования, который сводится к введению в компьютер возраста больных и полученных данных общего анализа крови нажатием соответствующих клавиш. На основе разработанной методики прогнозирования за короткий промежуток времени можно получить данные иммунного статуса у конкретного больного ребенка без существенных материальных и временных затрат.

Программа прогнозирования разработана с помощью пакета Visual Basic в виде приложения для операционной системы Windows. Дискета с программой содержит исполняемые файлы (prog-win.exe - программа для Windows и prog-dos.exe - упрощенная версия для DOS), файлы данных (dn,txt, nan.txt. e.txt, normo: txt, data o.txt), содержащие коэффициенты регрессии, и файл readme.txt, содержащий инструкцию по запуску программы.

Для работы с программой дискета вставляется в дисковод A. Установив курсор на файл prog-win.exe, нажимаем клавишу "Enter" - "ввод". Автоматически загружается операционная система Windows и на экране появляется диалоговое рабочее окно желтого цвета с заголовком "Прогноз иммунного статуса" (фиг. 1). При нажатии мышью на экране кнопки "инструкция" появляется описание по работе с прогнозом (фиг. 2). Далее с помощью мыши устанавливаются параметры пола (мальчик или девочка). Форма заболевания (нейродермит или экзема), а в левой колонке, указывая стрелкой мыши на соответствующие окошки, вводятся необходимые значения: возраст ребенка и семь показателей общего анализа крови (лейкоциты, палочкоядерные и сегментоядерные нейтрофилы, эозинофилы, лимфоциты, моноциты, базофилы). После этого указатель на экране подводится к кнопке "ОК" и производится нажатие на нее посредством левой кнопки мыши. Справа появляется показатели иммунного статуса - значение каждого из них и его отношение к норме снижено, в норме или выше (фиг. 3). Значения ниже нормы выделены зеленым цветом, выше нормы - красным. Для проведения последующих прогнозов необходимо подвести стрелку на экране к кнопке "следующий" и нажать левую кнопку мыши, что приведет к очистке всех окон.

Для закрытия программы стрелка мыши подводится к левому верхнему углу диалогового окна и производится нажатие мыши на кнопку "- минус".

Разработанная программа не требует от пользователя специальных знаний программирования и компьютерной грамотности, проста в работе и может широко применяться в любом медицинском учреждении, оснащенном персональными компьютерами.

Данный способ оценки позволяет без проведения дорогостоящих исследований иммунного статуса в кратчайшее время определить имеющие отклонения различных параметров иммунограммы.

Источники информации
1. Стефан Д. В., Вельтищев Ю.Е. Иммунология и иммунопатология детского возраста. - М.: 1996.

2. Клиническая иммунология и аллергология /под ред. Л. Йегера. Т. 1. - М., 1990.

Изобретение относится к области медицины, а именно к оценке показателей иммунного статуса. Способ обеспечивает простоту и доступность исследования. У ребенка берут общий анализ крови и оценивают 7 величин гемограммы: лейкоциты, палочкоядерные и сегментоядерные нейтрофилы, эозинофилы, моноциты, лимфоциты, базофилы. К исходным величинам добавляют возраст ребенка. В качестве математической модели прогнозирования используют линейную множественную регрессию. Регрессионное уравнение строят для каждого показателя иммунограммы и оно имеет вид: Показатель = С0 + С1 • возраст + C2 • L + С3 • п + C4 • с + С5 • э + С6 • л + С7 • м + С8 • б. Результирующими величинами являются 22 показателя иммунного статуса. 5 табл., 3 ил.

Способ оценки иммунного статуса у детей с атопическим дерматитом путем исследования показателей иммунограммы по тенденции отклонения от нормы, отличающийся тем, что определяют лейкоциты (L), палочкоядерные (п) и сементоядерные нейтрофилы (с), эозинофилы (э), лимфоциты (л), моноциты (м), базофилы (б), а также учитывают возраст и пол ребенка, проводят расчет двадцати двух показателей иммунного статуса по формуле регрессии: Показатель = C0+Cl•возраст + С2•L+ C3•п + С4•с + С5•э + С6•л + С7•м + С8•б, где СО - 8 - экспериментально определенные коэффициенты регрессии и коэффициенты регрессии с помощью ЭВМ и при этом сравнением результатов показателей расчета и нормы показателей иммунограммы определяют иммунный статус как выше нормы, ниже нормы и в пределах нормы.