СПОСОБ ПРОФИЛАКТИКИ ТУБЕРКУЛЕЗА МОЛОДНЯКА КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА Российский патент 2000 года по МПК A61K39/04 A61K31/115 

Изобретение относится к ветеринарной медицине и может быть использовано для профилактики туберкулеза - заразной болезни, общей для человека и животных.

Известен способ профилактики туберкулеза молодняка крупного рогатого скота с использованием живой вакцины, изготовленной из микобактерий туберкулеза штамма БЦЖ (Наставление по применению вакцины БЦЖ при туберкулезе крупного рогатого скота, утвержденное Главным управлением ветеринарии 26 февраля 1990 г.). Способ включает внутрикожное введение 0,3 мл вакцины, содержащей 1 мг живых микобактерий БЦЖ, телятам 10 - 20-дневного возраста в область шеи на расстоянии 8 - 10 см от переднего края лопатки. Через 14 - 16 месяцев после иммунизации животных исследуют внутрикожным введением туберкулина; реагирующих сдают на убой, остальных, в дальнейшем, исследуют в порядке, предусмотренном санитарными (СП 3.1.093-96) и ветеринарными (ВП 13.3.1325) правилами (см. книгу "Профилактика и борьба с заразными болезнями, общими для человека и животных". Сборник санитарных и ветеринарных правил. Госкомсанэпиднадзор и Минсельхозпрод России. Москва. 1996).

Однако эффективность профилактики с использованием указанного способа невысока, поскольку вакцина БЦЖ не обеспечивает достаточную защиту животных от заражения туберкулезом.

Кроме этого, сроки формирования противотуберкулезного иммунитета за счет использования вакцины БЦЖ достаточно длительны. При этом, телята, сенсибилизированные живыми микобактериями БЦЖ, особенно восприимчивы к заражению и для их эффективной защиты от туберкулеза в период формирования иммунитета необходима полная изоляция, что в условиях неблагополучных хозяйств, практически, нереально.

Известны также способы профилактики туберкулеза с использованием вакцины БЦЖ в сочетании с иммуностимуляторами с целью повышения уровня иммунитета.

Так, известен способ профилактики туберкулеза (Спиридонов Г.Н. Влияние отдельных иммуномодуляторов на показатели противотуберкулезного иммунитета. Автореферат канд. дисс. , 1988), заключающийся в том, что животному вводят внутрикожно вакцину БЦЖ и одновременно 5%-ный стерильный раствор нуклеината натрия в дозе 5 мг/кг живой массы по схеме: первые две инъекции с интервалом 24 часа, через 3-е суток еще две инъекции с интервалом 24 часа.

Кроме нуклеината натрия способ предусматривает возможность использования левомизола в виде 3%-ного стерильного раствора по той же схеме.

Недостатком данного способа является также, как и предыдущего аналога, невысокая эффективность профилактических мероприятий, обусловленная незначительным увеличением устойчивости животных к заражению. Кроме этого, способ трудоемок, поскольку предусматривает многократное введение иммуномодулятора (до 4-х раз).

Наиболее близким к заявленному является способ профилактики туберкулеза животных (см. патент СССР N 1790414 по кл. A 61 K 39/04, опубликован. 23.01.93 г. ), заключающийся во внутрикожном введении вакцины БЦЖ с иммуномодулятором, в качестве которого используют высокомолекулярную РНК из дрожжей (ВПР).

Введение РНК осуществляют вначале одновременно с вакциной в количестве 0,5 - 50 мг/кг, а затем через 13 - 15 дней в том же количестве.

Эффективность указанного способа для профилактики туберкулеза у молодняка крупного рогатого скота также невысока, так как применение иммуномодулятора усиливает сенсибилизирующие свойства вакцины БЦЖ и риск возможного заражения в период формирования иммунитета (2 - 3 месяца) еще более усиливается. Кроме того, сенсибилизация к туберкулину у отдельных животных сохраняется неопределенно долго, что приводит к их преждевременной выбраковке.

Изобретение направлено на решение задачи обеспечения эффективной профилактики туберкулеза крупного рогатого скота в значительно короткие сроки при создании высокого уровня напряженности иммунитета.

Поставленная задача решается путем внутримышечных инъекций профилактического препарата и иммуномодулятора, в качестве профилактического препарата используют туберкулин (туберкулопротеин), в качестве иммуномодулятора - препарат, содержащий (мас. %): формальдегид - 0,07-0,1; хлорид натрия - 0,9-0,95; дистиллированную воду - остальное, при этом, вначале вводят туберкулин однократно молодняку молозивного возраста в дозе 3 - 4 мл на голову, а через 30 - 40 минут - иммуномодулятор в дозе 4 - 6 мл на голову.

В известных источниках патентной и научно-технической информации не описано способа профилактики туберкулеза крупного рогатого скота, позволяющего осуществить эффективную профилактику в значительно короткие сроки и обеспечивающего высокий уровень напряженности иммунитета за счет использования в качестве профилактического средства - туберкулина, в качестве иммуномодулятора - препарата на основе формальдегида.

В отличие от известных аналогов в заявляемом способе вместо вакцины БЦЖ (живых клеток микобактерий туберкулеза) используется туберкулин (туберкулопротеин). По своей природе туберкулин является экзотоксином, в производственных условиях его получают из продуктов жизнедеятельности вирулентных микобактерий туберкулеза бычьего вида и в малых дозах используют при диагностике туберкулеза.

При инфицировании или вакцинации живыми вакцинами микобактерии размножаются, выделяя продукты жизнедеятельности, на которые восприимчивое животное отвечает выработкой защитных средств. Однако для выработки достаточного количества антигена нужно определенное время, как правило, 2 - 3 месяца. В этот период животное находится в стадии повышенной чувствительности (сенсибилизации) и особенно уязвимо для повторного заражения. Введение в макроорганизм готового антигена (туберкулина) в достаточном количестве способствует непосредственному защитному действию организма: выработке противотуберкулезных антител.

Известно, что парентеральное введение туберкулина способствует специфической десенсибилизации с одновременной стимуляцией синтеза противотуберкулезных антител (Кноринг В.Е., Павлова М.В., Иванова Л.А. Влияние туберкулинотерапии на иммунологические показатели у подростков, больных туберкулезом легких. Проблемы туберкулеза, 1991, 12 с. 31 - 34). Под влиянием туберкулина прослеживается отчетливая тенденция коррегирующего действия на факторы клеточного иммунитета, при этом нарастает уровень 1g G, 1g M и падает 1g A.

Известно, что защитные реакции, возникающие в организме в различных сочетаниях как при туберкулезном процессе, вакцинации БЦЖ, так и при введении микобактериальных антигенов или туберкулинов, развиваются по одному типу неспецифических иммуноморфологических изменений в тканях, имеющих четкую связь с антигенным стимулом (Авербах М.М., Литвинов В.И. Иммунобиологические основы противотуберкулезной вакцинации. М. 1970. с. 120 - 122).

Таким образом, парентерально введенный туберкулин вызывает иммунную перестройку аналогично вакцине БЦЖ, но в более короткие сроки и без сенсибилизации организма. Применение в качестве профилактического средства растворимого антигена создает предпосылки и для одновременного прямого воздействия на иммуноген иммунокорректирующих веществ.

С другой стороны, известно использование иммунокорректирующего средства, содержащего 0,22 - 0,4% формалина (соответственно 0,08 - 0,16%-ный раствор формальдегида) для профилактики и лечения желудочно-кишечных заболеваний сельскохозяйственных животных (см. патент РФ N 2028804 по кл. A 61 K 31/115, опубл. 20.02.95 г. и патент РФ N 2035190 по кл. A 61 K 39/12, опубл. 20.05.95 г.). Препарат позволяет повысить специфическую иммунную защиту, под его воздействием происходит изменение естественного фона метаболического формальдегида.

Известен также препарат, содержащий (мас.%): формальдегид - 0,07-0,24%; хлорид натрия - 0,9-0,95; дистиллированную воду - остальное (см. патент РФ N 2077882 по кл. A 61 K 31/115, опубл. 27.04.97 г.), препарат используется в качестве модулятора естественной резистентности, обеспечивающий саморегуляцию всех систем макроорганизма.

Нами установлено, что введение животным туберкулина совместно с иммуномодулятором на основе формальдегида сопровождается образованием антител, выявляемых реакцией преципитации.

На наш взгляд, ответная реакция организма в сравнительно короткие сроки наступает в связи с тем, что туберкулин адсорбируется на клетках крови, фиксируется введенным препаратом на основе формальдегида, в результате чего каждая клетка несет на себе специфический антигенный раздражитель. Это согласуется и с литературными данными (Зильбер Л.А. Основы иммунологии. М. 1948, с. 469 - 471; Острый О.Я. Инфекционный процесс. Медгиз, 1962, с. 61 - 65), по которым уже на следующий день после введения протеина увеличивается способность эритроцитов связывать токсины и адсорбировать бактерии.

Таким образом, вводя теленку молозивного периода внутримышечно необходимую дозу туберкулина, а затем для фиксации препарат на основе формальдегида, мы создаем условия для образования в организме на клеточном уровне идеальной вакцины, а образующиеся при этом антитела надежно защищают теленка от возбудителя туберкулеза в первые, наиболее опасные для заражения месяцы жизни, обеспечивая затем защиту и в более старшем возрасте.

На основании изложенного считаем, что способ профилактики туберкулеза соответствует критерию изобретательского уровня и решает задачу эффективной профилактики туберкулеза молодняка крупного рогатого скота.

Способ профилактики туберкулеза осуществляется следующим образом.

Телятам молозивного возраста (от 1 до 10 дней) вводят внутримышечно в область крупа по 3 - 4 мл туберкулина (туберкулопротеина) для млекопитающих в концентрации, применяемой для аллергической диагностики туберкулеза (Наставление по применению туберкулинов для аллергической диагностики туберкулеза млекопитающих и птиц, утвержденное ГУВ МСХ СССР 9 февраля 1978 г. См. Ветеринарное законодательство, том 3. Москва. "Колос". 1981, с. 217).

Через 30 - 40 минут телятам вводят внутримышечно также в область крупа по 4 - 5 мл препарата, содержащего формальдегид, хлорид натрия и дистиллированную воду.

Оба препарата вводят животным однократно.

Рабочий раствор туберкулина (туберкулопротеина) представляет собой прозрачную бесцветную жидкость со слабым запахом фенола.

Иммуномодулятор представляет собой бесцветную прозрачную жидкость со слабым запахом формалина, готовят его перед употреблением согласно ТУ 9336-231-00494 189-97.

Все последующие мероприятия по профилактике и ликвидации туберкулеза проводят в соответствии с Ветеринарными правилами ВП 13.3.1325-96, утвержденными Департаментом ветеринарии Минсельхозпрода РФ 18.06.96 г. (В сб. санитарных и ветеринарных правил "Профилактика и борьба с заразными болезнями, общими для человека и животных". Изд-во Госкомсанэпиднадзор России и Минсельхозпрод России, Москва, 1966).

Эффективность способа оценивали по результатам аллергических исследований, предусмотренных вышеприведенными правилами. Защищенные от заражения возбудителем туберкулеза животные либо не дают положительных аллергических реакций на туберкулин даже при их содержании в длительно неблагополучных по туберкулезу хозяйствах, либо их количество незначительно в острых очагах инфекции.

Ниже приведены примеры применения предлагаемого способа профилактики туберкулеза у молодняка крупного рогатого скота.

Пример 1. В неблагополучном по туберкулезу хозяйстве создали две группы аналогов из нарождающегося молодняка.

Первая группа (опытная) состояла из 250 голов (бычков и телочек), набранных по мере растела коров. Телятам после выпойки молозива в первые 1 - 5 дней жизни однократно вводили внутримышечно 4 мл туберкулопротеина (ППД), изготовленного Курской биофабрикой. Разведение сухого туберкулина проводили в соответствии с методикой его применения. Через 30 - 40 минут телятам вводили препарат, содержащий (мас. %): формальдегид - 0,07, хлорид натрия - 0,09, дистиллированную воду - остальное. Препарат готовили непосредственно перед употреблением согласно ТУ 93336-231-00494 189-97, вводили внутримышечно в дозе 4 мл на голову.

Всех привитых животных надежно метили и затем они содержались в соответствии с технологией, принятой в хозяйстве.

Вторая группа новорожденных телят в количестве 110 голов была сформирована в эти же сроки и служила контролем. Телятам этой группы не вводили ни туберкулин, ни иммуномодулятор.

Все телята находились в одинаковых условиях выращивания и подвергались плановым аллергическим исследованиям в соответствии с мероприятиями по профилактике и борьбе с туберкулезом крупного рогатого скота.

За время опыта (срок наблюдения - 3 года) среди поголовья крупного рогатого скота дважды были выявлены животные с клиникой туберкулеза, а после убоя на вскрытии обнаруживалась генерализованная форма заболевания, что говорит о том, что в хозяйстве постоянно присутствовал источник возбудителя заболевания.

Через 2 года из вакцинированных указанным способом телят за 8 исследований выделено 16 телят (6%) с положительными реакциями на туберкулин. Телята (реагирующие) были убиты, обследованы патологоанатомически, а материал от них подвергался лабораторным методам исследования. Ни в одном случае туберкулез не подтвержден.

Среди контрольных телят за 8 аллергических исследований выявлено 77 голов, реагирующих на туберкулин (70%), у 23 из них туберкулез подтвержден на вскрытии, у остальных туберкулез подтвержден биопробой.

Таким образом, в хозяйстве с острым течением туберкулеза осуществление способа профилактики туберкулеза позволило создать устойчивость к туберкулезу у молодняка крупного рогатого скота с эффективностью 94%.

Пример 2. Хозяйство - длительно неблагополучно по туберкулезу крупного рогатого скота с поголовьем 1300 коров. Оздоровление хозяйства проводилось общепринятым методом систематических аллергических исследований через 60 дней с последующим удалением реагирующих из стада.

С января 1997 года в течение 6-ти месяцев все новорожденные телята (300 голов бычков и телочек) после выпойки молозива в первые 10 дней были привиты туберкулином в дозе 3 мл на голову и иммуномодулятором - в дозе 5 мл каждому через 30 - 40 минут после введения туберкулина. Препараты вводили внутримышечно, в область крупа однократно.

Все дальнейшие мероприятия проводились по инструкции, по плану хозяйства. В результате, через 1,5 года в хозяйстве из привитых животных сформировали гурт телок в количестве 180 голов для дальнейшего их изолированного выращивания взамен неблагополучного поголовья коров, так как ни в одном случае при аллергическом исследовании привитого поголовья положительно реагирующих на туберкулин не обнаружено. Кроме того, при убое части вакцинированных бычков на мясо признаков туберкулеза также не зафиксировано.

В то же время среди невакцинированных животных постоянно выделяли положительно реагирующих на туберкулин, а у части из них туберкулез подтверждали даже на вскрытии.

Таким образом, осуществление предлагаемого способа профилактики туберкулеза у молодняка крупного рогатого скота в длительно неблагополучных по туберкулезу хозяйствах решает поставленную задачу создания достаточно напряженного иммунитета.

Пример 3. В условно благополучном по туберкулезу хозяйстве с поголовьем 980 коров, где систематически выделяли реагирующих на туберкулин животных, но не удавалось подтвердить туберкулез на вскрытии, также применили указанный способ профилактики.

С января по июнь 1995 года было привито 234 теленка в первую неделю жизни. Туберкулин вводили по 3 мл внутримышечно в область крупа, через 30 - 40 минут - иммуномодулятор по 4 мл также внутримышечно. Все дальнейшие мероприятия осуществляли в соответствии с инструкциями.

Наблюдение за этим поголовьем велось 3 года, ни в одном случае у вакцинированных телят положительных реакций на туберкулин не обнаружено, в то время как среди остального поголовья при каждом аллергическом исследовании выделяли по 5 - 15 голов положительно реагирующих, хотя туберкулез на вскрытии так и не был установлен.

Полученные в примере 3 результаты указывают, что применение способа не осложняет последующую диагностику туберкулеза ложноположительными реакциями на туберкулин и создает достаточно прочный иммунитет.

Таким образом, приведенные примеры подтверждают высокую эффективность способа профилактики туберкулеза молодняка крупного рогатого скота путем применения однократного внутримышечного введения туберкулина в дозе 3 - 4 мл на голову, а через 30 - 40 минут - иммуномодулятора в дозе 4 - 5 мл на голову.

Доза введения туберкулина подобрана экспериментально. Установлено, что введение туберкулина в дозе менее 3 мл не приводит к решению поставленной задачи, а именно - созданию достаточно напряженного иммунитета. Введение туберкулина более 4 мл нецелесообразно с экономической точки зрения.

Доза иммуномодулятора 4 - 6 мл также подобрана экспериментально. Интервал в 30 - 40 минут между инъекциями соответствует периоду наибольшего притока крови к месту инъекции, обусловленному первой фазой реакции организма на туберкулин.

Иммунизация телят молозивного возраста (1 - 10 дней) обусловлена не только целью ускорения иммунного ответа, но и усиления его за счет колостральных антител.

Приведенные данные позволяют утверждать, что заявляемый способ профилактики туберкулеза молодняка крупного рогатого скота позволяет создать у телят высокую устойчивость к возбудителю туберкулеза в хозяйствах и стационарно неблагополучных, и в острых очагах заболевания.

Осуществление способа позволяет в условиях неблагополучия создавать гурты здоровых телок из животных своего хозяйства для замены неблагополучного поголовья.

Кроме того, использование способа снимает проблему дальнейшей диагностики заболевания у привитых животных.

Изобретение относится к ветеринарной медицине и может быть использовано для профилактики туберкулеза - заразной болезни, общей для человека и животных. Изобретение обеспечивает эффективную профилактику туберкулеза крупного рогатого скота при создании в короткие сроки высокого уровня напряженности иммунитета. Способ профилактики туберкулеза осуществляется следующим образом. Телятам молозивного возраста (от 1 до 10 дней) вводят внутримышечно в область крупа по 3-4 мл туберкулина (туберкулопротеина) для млекопитающих в концентрации, применяемой для аллергической диагностики туберкулеза. Через 30-40 мин телятам вводят внутримышечно также в область крупа по 4-5 мл препарата, содержащего формальдегид, хлорид натрия и дистиллированную воду. Оба препарата вводят животным однократно.

Способ профилактики туберкулеза молодняка крупного рогатого скота путем введения профилактического препарата и иммуномодулятора, отличающийся тем, что в качестве профилактического препарата используют туберкулин, а в качестве иммуномодулятора - препарат, содержащий, мас.%:
Формальдегид - 0,07 - 0,1
Хлорид натрия - 0,9 - 0,95
Дистиллированная вода - Остальное
при этом вначале вводят туберкулин однократно молодняку молозивного возраста в дозе 3 - 4 мл на голову, а через 30 - 40 мин осуществляют введение иммуномодулятора в дозе 4 - 6 мл на голову, причем введение туберкулина и иммуномодулятора осуществляют внутримышечно.