ТРИГИДРАТ 4,10-ДИАЦЕТОКСИ-2α-БЕНЗОИЛОКСИ-5β, 20-ЭПОКСИ-1,7β-ДИОКСИ-9-ОКСО-ТАКС-11-ЕН-13α-ИЛ (2R,3S)-3-БЕНЗОИЛАМИНО-2-ОКСИ-3-ФЕНИЛПРОПИОНАТ И СПОСОБ ЕГО ПОЛУЧЕНИЯ Российский патент 2000 года по МПК C07D305/14 

Настоящее изобретение относится к способу получения тригидрата 4,10-диацетокси-2 α -бензоилокси-5 β ,20-эпокси 1,7 β -диокси-9-оксо-такс-11-ен-13 α -ил (2R,3S)-3- бензоиламино-2-окси-3-фенилпропионата.

4-10-диацетокси-2 α -бензоилокси-5 β ,20-эпокси-1,7 β -диокси-9-оксо-такс-11-ен-13 α -ил (2R,3S)-3-бензоиламино-2-окси-3-фенилпропионат (или паклитаксель) обладает противораковыми и противолейкемическими свойствами.

4,10-диацетокси-2 α -бензоилокси-5 β ,20-эпокси-1,7 β - диокси-9-оксо-такс-11-ен-13 α -ил (2R,3S)-3- бензоиламино-2-окси-3-фенилпропионат может быть выделен из коры тиса, либо из баккатина III или 10-дезацетил-баккатина III в соответствии со способами, описанными в европейских заявках на патент EP 0336840 и EP 0400971 или в международной заявке PCT WO 94/07878.

Было отмечено, что тригидрат 4,10-диацетокси-2 α - бензоилокси-5 β , 20-эпокси-1,7 β -диокси-9-оксо-такс-11-ен-13 α -ил (2R,3S)-3-бензоиламино-2-окси-3-фенилпропионата имеет значительно более высокую стабильность, нежели безводные продукты.

В соответствии с изобретением, тригидрат 4,10-диацетокси-2 α бензоилокси-5 β , 20-эпокси-1,7 β диокси-9- оксо-такс-11-ен-13 α -ил (2R,3S)-3-бензоиламино-2-окси- 3-фенилпропината может быть получен путем кристаллизации 4,10-диацетокси-2 α -бензоил-окси-5 β , 20-эпокси-1,7 β -диокси-9-оксо- такс-11-ен-13 α -ил (2R, 3S)-3-бензоил-амино-2-окси-3- фенилпропионата в смеси воды и алифатического спирта, содержащего от 1 до 3 атомов углерода, с последующим высушиванием полученного продукта под пониженным давлением и выдерживанием при относительной влажности выше 20% при температуре около 25^oC.

Для осуществления способа по изобретению, предпочтительно, проводят следующие стадии:
-4,10-диацетокси-2 α -бензоил-окси-5 β ,20-эпокси-1,7 β -диокси-9-оксо-такс-11-ен-13 α -ил (2R, 3S)-3- бензоиламино-2-окси-3-фенилпропионат растворяют или суспендируют в алифатическом спирте, содержащем от 1 до 3 атомов углерода,
- промывают раствор или суспензию в воде, содержащей, при необходимости, неорганическое основание, такое как водородсодержащий карбонат натрия,
- отделяют полученные кристаллы, затем
- высушивают их при пониженном давлении, затем
- при необходимости, выдерживают на воздухе при относительной влажности выше 20% и при температуре около 25^oC.

Как правило, 4,10-диацетокси-2 α -бензоилокси-5 β ,20-эпокси-1,7 β -диокси-9-оксо-такс-11-ен-13 α -ил (2R,3S)-3-бензоил-амино-2-окси-3-фенилпропионат растворяют в избытке алифатического спирта, предпочтительно метаноле. Предпочтительно, содержание спирта составляет от 6 до 12 вес. частей по отношению к используемому 4,10-диацетокси- 2 α -бензоилокси-5 β ,20-эпокси-1,7 β -диокси- 9-оксо-такс-11-ен-13 α -ил (2R,3S)-3-бензоиламино-2-окси-3-фенилпропионату.

Как правило, воду добавляют таким образом, чтобы весовое соотношение вода/спирт составляло от 3/1 до 1/3. Добавляемая вода может содержать до 10% (вес. /об.) неорганического основания, такого как водородсодержащий карбонат натрия, так чтобы pH реакционной смеси была равна или выше 7, предпочтительно от 7 до 8, до отделения кристаллов.

Кристаллизующийся тригидрат 4,10-диацетокси-2 α -бензоилокси-5 β ,20-эпокси-1,7 β -диокси-9-оксо-такс-11-ен- 13 α -ил (2R,3S)-3-бензоиламино-2-окси-3-фенилпропионата отделяют, предпочтительно, фильтрованием или центрифугированием, затем высушивают. Сушка осуществляется при пониженном давлении от 1 до 7 кПа, при температуре около 40^oC, полученный продукт, при необходимости, выдерживают на воздухе при относительной влажности выше 20% и при температуре от 0^o до 60^oC, предпочтительно около 25^oC.

Для осуществления способа кристаллизация может быть проведена, предпочтительно, в присутствии аскорбиновой кислоты, которую добавляют при растворении или суспендировании 4,10-диацетокси- 2 α -бензоилокси-5 β ,20-эпокси-1,7 β -диокси-9-оксо-такс- 11-ен-13 α -ил (2R,3S)-3- бензоиламино-2-окси-3-фенилпропионата в спирте. Можно использовать до 1 вес.% аскорбиновой кислоты.

Тригидрат 4,10-диацетокси-2 α -бензоилокси-5 β ,20-эпокси- 1,7 β -диокси-9-оксо-такс-11-ен-13 α -ил (2R,3S)-3- бензоиламино-2-окси-3-фенилпропионата был исследован путем дифференциального термогравиметрического и калориметрического анализа и дифракцией рентгеновского излучения.

Термогравиметрический анализ показывает потерю массы около 6% при температуре от 25 до 140^oC, что соответствует трем молекулам воды на молекулу 4,10-диацетокси-2 α бензоилокси- 5 β ,20-эпокси-1,7 β -диокси-9-оксо-такс-11-ен- 13 α -ил (2R,3S)-3-бензоиламино-2-окси-5-фенилпропионата.

Для осуществления способа по изобретению, при использовании полисинтетического паклитакселя, полученного по способам, описанным, например, в европейских патентах EP 0336840 и EP 0440971 или в международной заявке PC WO 94/07828, которые ведут к получению в качестве промежуточного соединения паклитакселя, гидроксигруппы которых защищены, можно работать непосредственно с раствором или суспензией 4,10- диацетокси-2 α бензоилокси-5 β ,20-эпокси-1,7 β -диокси-9-оксо- такс-11-ен-13 α -ил (2R,3S)-3-бензоиламино-2-окси-3- фенилпропионата, полученного после удаления защитных групп гидроксигрупп цикла таксана и боковой цепи. Например, в условиях, описанных в международной заявке PCT WO 94/07878, получают в качестве промежуточного соединения 4,10- диацетокси-2 α бензоилокси-5 β ,20-эпокси-1-окси- 7 β -триэтилсилилокси-9-оксо-такс-11-ен-13 α -ил (4S,5R)-3-бензоил-2-(4-метокси-фенил)-4-фенил- 1,3-оксазолидин-5-карбоксилат, защитные группы которых могут быть удалены с помощью трифторуксусной кислоты в метаноле.

Следующие примеры иллюстрируют настоящее изобретение.

Пример 1
В реактор в темноте вводят 5,014 г 4,10- диацетокси-2 α -бензоилокси-5 β , 20-эпокси-1-окси- 7 β триэтилсилилокси-9-оксо-такс-11-ен-13 α -ил (4S, 5R)-3-бензоил-2-(4-метоксифенил)-4-фенил-1,3-оксазолидин- 5-карбоксилата с содержанием 98 вес. % (4,52 ммоль) и 5 см³ метанола. В перемешанную белую суспензию быстро добавляют 7 см³ трифторуксусной кислоты. Температуру повышают до приблизительно 35^oC. После охлаждения до температуры приблизительно 5^oC добавляют 110 см³ 6%-ого водного раствора гидрогенкарбоната натрия (вес. /об. ), pH равно 7. Кристаллы отделяют фильтрованием на фриттированном стекле и промывают 4 раза в 15 см³ смеси метанол-вода (30-70 объемных частей). После высушивания при пониженном давлении при температуре 35^oC получают 3,676 г 4,10-диацетокси-2 α -бензоилокси-5 β ,20-эпокси-1,7 β -диокси-9-оксо-такс-11-ен-13 α -ил (2R,3S)-3-бензоиламино-2-окси-3-фенилпропионата с весовым содержанием 93,1% и содержанием воды приблизительно 4,8%.

Характеристика полученного продукта представлена в виде диаграммы порошка в рентгеновских лучах (фиг. 1).

Выход чистого продукта составляет 89,3% по отношению к используемому сложному эфиру.

Выдержанный при относительной влажности выше 20% продукт стабилизируется при содержании воды около 6%. На диаграмме DPRX (порошковая диаграмма дифракции рентгеновского излучения), представленной на фиг. 2, показано, что полученный таким образом продукт представлен в виде тригидрата (теоретически содержание воды в тригидрате 4,10-диацетокси-2 α -бензоилокси-5 β , 20-эпокси-1,7 β -диокси-9-оксо-такс-11-ен-13 α -ил (2R,3S)-3-бензоиламино-2- окси-3-фенилпропионата составляет 5,95%). Т.пл. 220^oC.

Порошковая диаграмма дифракции - рентгеновского излучения получена с помощью прибора Philips PW 1700^® с кобальтовой антикатодной трубкой угол первоначальной развертки 5^o 2-0, конечной развертки 40^o 2-0, с шагом 0,02^o 2-0 из расчета 1 с на шаг и с использованием кремниевой фильтровальной пластинки.

Пример 2
В реактор в темноте помещают 3,006 г 4,10- диацетокси-2 α -бензоилокси-5 β , 20-эпокси-1-окси-7 β -триэтилсилилокси-9-оксо-такс-11-ен-13 α ил (4S, 5R)-3-бензоил-2-(4-метокси-фенил)-4-фенил-1,3-оксазолидин-5-карбоксилата с весовым содержанием 98% (2,70 ммоль) и 30 см³ метанола. В перемешанную белую суспензию добавляют 6,3 см³ 99%-ой трифторуксусной кислоты. После охлаждения до температуры приблизительно 5^oC добавляют в течение 15 минут 7,5 см³ деминерализованной воды. Кристаллы отделяют фильтрованием на фриттированном стекле и промывают 3 раза в 5 см³ смеси метанол-вода (80-20 объемных частей) при 5^oC. После высушивания при пониженном давлении при температуре 35^oC получают 1,989 г 97,8%-ого 4,10-диацетокси-2 α -бензоилокси- 5 β ,20-эпокси-1,7 β -диокси-9-оксо-такс-11-ен- 13 α ил (2R,3S)-3-бензоиламино-2-окси-3-фенилпропионата с содержанием воды приблизительно 6,8%.

Выход составляет 84,3% по отношению к используемому сложному эфиру.

Описывается способ получения нового соединения - тригидрата 4,10-диацетокси-2α-бензоилокси-5β, 20-эпокси-1,7β-диокси-9-оксо-такс-11-ен-13α-ил (2R, 3S)-3-бензоиламино-2-окси-3-фенилпропионата, отличающийся тем, что осуществляют кристаллизацию 4,10-диацетокси-2α-бензоилокси-5β, 20-эпокси-1,7β-диокси-9-оксо-такс-11-ен-13α-ил (2R, 3S)-3-бензоиламино-2-окси-3-фенилпропионата в смеси воды и алифатического спирта, содержащего от 1 до 3 атомов углерода, с последующим высушиванием полученного продукта при пониженном давлении и выдерживанием при относительной влажности выше 20%. Описывается также само новое соединение. Оно обладает противораковыми и противолейкемическими свойствами. 2 с. и 3 з.п. ф-лы, 2 ил.

1. Способ получения тригидрата 4,10-диацетокси-2α-бензоилокси-5β, 20-эпокси-1,7β-диокси-9-оксо-такс-11-ен-13α-ил (2R, 3S)-3-бензоиламино-2-окси-3-фенилпропионата, отличающийся тем, что осуществляют кристаллизацию 4,10-диацетокси-2α-бензоилокси-5β, 20-эпокси-1,7β-диокси-9-оксо-такс-11-ен-13α-ил(2R, 3S)-3-бензоиламино-2-окси-3-фенилпропионата в смеси воды и алифатического спирта, содержащего от 1 до 3 атомов углерода, с последующим высушиванием полученного продукта при пониженном давлении и выдерживанием при относительной влажности выше 20%. 2. Способ по п.1, отличающийся тем, что весовое соотношение вода/спирт составляет от 3/1 до 1/3. 3. Способ по одному из п.1 или 2, отличающийся тем, что спирт является метанолом. 4. Способ по п.1, отличающийся тем, что высушивание осуществляется при температуре около 40^oC при пониженном давлении, а полученный продукт стабилизируется при 6% воды при относительной влажности воздуха выше 20%. 5. Тригидрат 4,10-диацетокси-2α-бензоил-окси-5β, 20-эпокси-1,7β-диокси-9-оксо-такс-11-ен-13α-ил (2R, 3S)-3-бензоиламино-2-окси-3-фенилпропионата.