ПРОИЗВОДНЫЕ АМИНОКИСЛОТ, ПРОЯВЛЯЮЩИЕ АНТИАРИТМИЧЕСКУЮ АКТИВНОСТЬ Российский патент 2001 года по МПК C07C233/65 C07C229/04 A61K31/165 A61K31/195 A61P9/06 

Изобретение относится к новым химическим соединениям, конкретно к производным аминокислот, которые проявляют антиаритмическую активность и могут использоваться в медицинской практике в качестве антиаритмических препаратов.

Наиболее близким по технической сущности к предлагаемому изобретению является гидрохлорид 1-фенил-1-(п-нитробензоиламино)-5- (N-диэтиламино)пентан (ГХАП), обладающий антиаритмической активностью (патент СССР N 18336/2, 1987 г.).

Однако это соединение - ГХАП - имеет существенный недостаток, что ограничивает его применение в медицине, а именно: обладает генотоксичностью - ДНК-повреждающим действием и тератогенностью (Золотарева Г.Н., Малахова Л.Н и др. "Изучение генотоксических эффектов аминоамидов в направленном синтезе немутагенного антиаритмика". Бюллетень ВНЦ БАВ, 1993 г., N 2, с. 40-43).

Целью изобретения являются новые соединения, проявляющие антиаритмическую активность и не обладающие генотоксичностью.

Поставленная цель достигается не описанными ранее производными аминокислот общей формулы I:

где R = или
R¹ = NH₂CH₂COO^-; ; ; ;
Новые соединения получают известным способом: взаимодействием эквимолярных количеств аминоуксусной, D,L-аспарагиновой, L-глутаминовой кислот, L-аспарагината магния и ариламидоаминопентанов.

Пример 1. Аминоацетат 1-фенил-1-(п-нитробензоиламино)-5-(N-диэтиламино)пентана (Iа).

В трехгорлую колбу, снабженную мешалкой, термометром и холодильником, загружают 3,84 г (0,01 моль) 1-фенил-1-(п-ниробензоиламино)-5-(N-диэтиламино)пентана (II), 120 мл спирта этилового 80%, 0,79 г (0,01 моль) аминоуксусной кислоты. Реакционную массу перемешивают при температуре 35-40^oC до получения раствора. Затем растворитель отгоняют в вакууме, остаток промывают эфиром, сушат до постоянного веса. Получают 4,25 г (91,80%), T_пл. 91-93^oC.

Найдено, %: C 62,91; H 7,52; N 12,06. C₂₂H₃₄N₄O₅
Вычислено, %: C 62,87; H 7,46; N 12,22.

ИК-спектр ( ν , см^-1): 3200 (NH), 2400 (N⁺, 1670 (C=O), 1598 (C=C).

Пример 2. D, L-Аспарагинат 1-фенил-1-(п-нитробензоиламино)-5-(N-диэтиламино)пентана (Iб).

Получают аналогично примеру 1 из 3,84 г (0,01 моль) II и 0,66 г ((0,005 моль) D,L-аспарагиновой кислоты.

Выход 4,38 (96,2%), T_пл. 105-108^oC.

Найдено, %: C 64,07; H 7,24; N 10,53. C₄₈H₆₄N₇O₁₀.

Вычислено, %: C 64,13; H 7,17; N 10,91.

ИК-спектр ( ν , см^-1): 3245 (NH), 2440 (N⁺), 1670 (C=O), 1597 (C=C).

Пример 3. Mg-L-Аспарагинат 1-фенил-1-(п-нитробензоиламино)-5-(N-диэтиламино)пентана (Iв).

Получают аналогично примеру 1 из 3,84 г (0,01 моль) II, 1,33 г (0,01 моль) L-аспарагиновой кислоты и 0,29 г (0,005 моль) магния гидроксида.

Выход 4,9 г (89,6%), Т_пл. 64-66^oC.

Найдено, %: C 54,12; H 6,57; N 9,97; Mg 4,09. C₂₆H₃₆N₄O₈Mg.

Вычислено, %: C 54,43; H 6,31; N 9,82; Mg 4,23.

ИК-спектр ( ν , см^-1): 3230 (NH), 2445 (N⁺), 1675 (C=O), 1595 (C=C).

Пример 4. L-Глутаминат 1-фенил-1-(п-нитробензоиламино)-5-(N-диэтиламино)пентана (Iг).

Получают аналогично примеру 1 из 3,84 г (0,01 моль) II и 0,74 г (0,005 моль) L-глутаминовой кислоты. Выход 4,05 г (89,3%), T_пл. - 76-78^oC.

Найдено, %: C 61,24; H 7,19; N 10,21. C₂₇H₃₈N₄O₇.

Вычислено, %: C 61,01; H 7,07; N 10,56.

ИК-спектр ( ν , см^-1): 3340 (NH), 2490 (N⁺), 1675 (C=O), 1595 (C=C).

Пример 5. Аминоацетат 1-фенил-1-(циклогексаноиламино)-5-(N-диэтиламино)пентана (Iд).

Получают аналогично примеру 1 из 3,45 г (0,01 моль) 1-фениол-1-(циклогексаноиламино)-5-(N-диэтиламино)пентана (III) и 0,79 г (0,01 моль) аминоуксусной кислоты. Выход 4,02 г Iд (94,6%), T_пл. 82-83^oC.

Найдено, %: C 67,68; H 9,73; N 9,61. C₂₄H₄₁N₃O₃.

Вычислено, %: C 67,93; H 9,65; N 9,76.

ИК-спектр ( ν , см^-1): 3310 (NH), 2350 (N⁺), 1675 (C=O), 1595 (C=C).

Пример 6. D,L-Аспарагинат 1-фенил-1-(циклогексаноиламино)-5-(N-диэтиламино)пентана (Iе).

Получают аналогично примеру 1 из 3,45 г (0,01 моль) III и 0,66 г (0,005 моль) D,L-аспарагиновой кислоты. Выход 3,4 г Iе (94,8%), T_пл. 178-180^oC.

Найдено, %: C 65,36; H 9,12; N 8,83. C₂₆H₄₃N₃O₅.

Вычислено, %: C 65,28; H 8,97; N 8,76.

ИК-спектр ( ν , см^-1): 3250 (NH), 2440 (N⁺), 1670 (C=O), 1600 (C=C).

Пример 7. L-Глутаминат 1-фенил-1-(циклогексаноиламино)-5-(N-диэтиламино)пентана (Iж).

Получают аналогично примеру 1 из 3,45 г (0,01 моль) III и 0,74 г (0,005 моль) L-глутаминовой кислоты. Выход 3,95 г Iж (92,3%), Т_пл. 79-81^oC.

Найдено, %: C 65,73; H 9,24; N 8,43. C₂₇H₄₅N₃O₅.

Вычислено, %: C 65,88; H 9,14; N 8,54.

ИК-спектр ( ν , см^-1): 3235 (NH), 2445 (N⁺), 1685 (C=O), 1595 (C=C).

Биологические исследования антиаритмической активности и генотоксичности проводили на общепринятых моделях.

Исследование антиаритмической активности проводили на двух моделях:
- введение внутривенно гидробромида аконитина в дозе 50 мкг/кг (опыты проведены на беспородных крысах=самцах массой 160-200 г). Исследуемые соединения вводили в хвостовую вену и в желудок. Вычисляли ЭД₅₀ в мг/кг, что соответствует дозе препарата, которая вызывает эффект у 50% экспериментальных животных по отношению к контролю. Расчеты проводили по методу Миллера и Тейнтера.

В качестве препаратов сравнения использовали эффективные антиаритмики - новокаинамид, лидокаин и известное соединение - ГХАП. Результаты экспериментов представлены в табл. 1.

- Ранние окклюзионные и реперфузионные аритмии вызывали у кошек массой 1,8 - 4,0 кг (69 кошек обоего пола) путем перевязки передней ветви коронарной артерии. Перевязку коронарной артерии проводили по стандартной методике. Оценивали следующие показатели: частоту возникновения желудочковых экстасистол (ЖЭС), фибриляции желудочков (ФЖ), желудочковую тахикардию (ЖТ), начало окклюзионных, начало и длительность реперфузионных аритмий. Результаты эксперимента представлены в табл. 2 и 3.

Таким образом, заявляемые соединения Iа-Iж на всех трех изученных моделях: на модели ранних окклюзионных аритмий, реперфузионных и аконитиновых достоверно не отличались по активности от препаратов сравнения и ГХАП, а соединения Iб и Iв по способности предупреждать желудочковую экстрасистологию (ЖЭС) превосходили препараты сравнения обзидан и ГХАП.

Изучение генотоксичности ГХАП и заявляемых производных аминокислот.

Исследование генотоксичности проводили в бактериальных тест-системах: в тесте Salmonella (микросомы, выявляющем способность вещества вызывать мутации у индикаторных бактерий Styphimurium на штаммах, несущих мутации как сдвига рамки считывания генетического кода, так и мутации замены пар оснований в молекуле ДНК. В работе также был использован суспензионный Rec-тест, выявляющий способность исследуемого соединения индуцировать ДНК-повреждение. Оба теста используются как для первичной оценки генотоксичности химического соединения, так и для прогноза его канцерогенной активности.

Кроме того, испытуемые соединения были исследованы на способность индуцировать хромосомные аберрации в соматических клетках костного мозга мышей. Как видно из данных таблицы 4, эти соединения не обладают способностью индуцировать генные мутации, хромосомные аберрации в тестах in vitro и in vivo, а также повреждать ДНК-бактериальной E.coli.

Таким образом, соединения, содержащие в своем составе в качестве аниона аминокислоты, в отличие от известного соединения ГХАП, не обладают генотоксичностью.

Изобретение касается производных аминокислот, представляющих собой новые химические соединения общей формулы I, где R представляет собой или , а R¹ представляет собой NH₂CH₂CO^-, , или , или . Целевые соединения проявляют антиаритмическую активность, при этом они не обладают генотоксичностью, присущей большинству известных антиаритмиков, в связи с чем предполагается возможность их применения в медицинской практике. 4 табл.

Производные аминокислот общей формулы I

где R = или

R¹ = NH₂CH₂COO;



проявляющие антиаритмическую активность.