ПРОИЗВОДНЫЕ ДОЛАСТАТИНА 15 Российский патент 2002 года по МПК C07K7/06 A61K38/08 A61P35/00 

Ряд коротких пептидов со значительной активностью в качестве ингибиторов роста клеток был выделен из живущего в Индийском океане морского зайца Dolabella auricularia (Bai et al. , Biochem. Pharmacology, 40: 1859-1864 (1990); Beckwith et al., J. Natl. Cancer Inst., 85: 483-488 (1993) и процитированные там ссылки). Эти соединения включают доластатины 1-10 (патент США 4816444, выданный Pettit и др.) и доластатин-15 (заявка на европейский патент 398558). Доластатин 15, например, заметно ингибирует рост линии клеток лимфоцитарного лейкоза (PS система) Р388 Национального Института рака, что является важным показателем эффективности в отношении различных типов злокачественных заболеваний человека.

Чрезвычайно малые количества различных доластатиновых пептидов присутствуют в Dolabella auricularia (вследствие трудностей при очистке достаточных для оценки и использования количеств были предприняты усилия в отношении синтеза этих соединений (Roux et al. Tetrahedron 50: 5345-5360 (1994); Shioiri et al. Tetrahedron 49: 1913-24 (1993); Patino et al., Tetrahedron 48: 4115-4122 (1992) и процитированные там ссылки). Синтетическому доластатину 15, однако, присущи недостатки, которые включают плохую растворимость в водных системах и необходимость использования дорогого сырья для его синтеза. Это, в свою очередь, привело к синтезу и оценке структурно модифицированных производных доластатина 15 [ср.: Bioorg. Med. Chem. Lett. 4: 1947-50 (1994); международная заявка на патент 93 03054; заявка на патент Японии 06234790; международная заявка на патент 93 23424].

Однако существует потребность в синтетических соединениях с биологической активностью доластатина 15, которые имеют нужную растворимость в воде и могут быть получены эффективно и экономично.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Соединения настоящего изобретения включают ингибиторы роста клеток, которые являются пептидами формулы I:
A-B-D-E-F-(G)_r-(К)_s-L (I),
и их солями с кислотами, где А, В, D, Е, F, G и К являются остатками α-аминокислот, и индексы s и r являются каждый независимо 0 или 1. L означает одновалентный радикал, такой как, например, аминогруппа, N-замещенная аминогруппа, β-гидроксиламиногруппа, гидразидогруппа, алкоксигруппа, тиоалкоксигруппа, аминоксигруппа или оксиматогруппа.

Другой аспект настоящего изобретения включает фармацевтические композиции, содержащие соединения формулы I и фармацевтически приемлемого носителя.

Дополнительным вариантом осуществления настоящего изобретения является способ лечения рака у млекопитающих, таких как человек, предусматривающий введение млекопитающему эффективного количества соединения формулы I в фармацевтически приемлемой композиции.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Настоящее изобретение относится к пептидам с противоопухолевой активностью. Оно также включает фармацевтические композиции, содержащие такие соединения, и способы лечения рака у млекопитающих, включая человека, путем введения указанных соединений млекопитающему.

Доластатин 15, пептид, выделенный из морского зайца Dolabella auncularia, является активным ингибитором клеточного роста. Указанное соединение, однако, присутствует в следовых количествах у морского зайца и поэтому его трудно выделить. Синтез доластатина 15 также дорог, и недостатком доластатина 15 является его плохая растворимость в воде. Как здесь, однако, показано, доластатин 15 может служить исходным веществом для получения соединений, лишенных указанных недостатков, но в то же время сохраняющих противоопухолевую активность или проявляющих большую противоопухолевую активность, чем природный продукт. Заявители обнаружили, что некоторые структурные модификации доластатина 15 приводят к соединениям с поразительно улучшенной терапевтической возможностью лечения опухолевых заболеваний по сравнению с доластатином 10 и доластатином 15. Кроме того, соединения настоящего изобретения могут быть удобно синтезированы, как подробно описано ниже.

Для целей настоящего изобретения термин "одновалентный радикал" означает электрически нейтральный молекулярный фрагмент, способный образовывать одну ковалентную связь со вторым нейтральным молекулярным фрагментом. Одновалентные радикалы включают атом водорода, алкильные группы, такие как метильная, этильная и пропильная группы, атомы галогена, такие как атомы фтора, хлора и брома, арильные группы, такие как фенильная и нафтильная группы, и алкоксигруппы, такие как метокси и этоксигруппы. Два одновалентных радикала на соседних связанных α-связью атомах могут также вместе образовывать π-связь между соседними атомами. Два одновалентных радикала могут также быть вместе связаны, например, с помощью полиметиленового звена с образованием циклической структуры. Например, фрагмент -N(R)R', в котором R и R' являются каждый одновалентным радикалом, может вместе с атомом азота образовывать гетероциклическое кольцо. В дополнение к этому, два одновалентных радикала, присоединенные к одному и тому же атому, могут вместе образовывать двухвалентный радикал, такой как атом кислорода или алкилиденовая группа, например пропилиденовая группа.

Для целей настоящего изобретения термин "нормальный алкил" относится к алкильной группе с неразветвленной или прямой углеродной цепью, например нормальный пропил (н-пропил, -СН₂СН₂СН₃).

Соединения настоящего изобретения могут быть представлены формулой I:
A-B-D-E-F-(G)_r-(К)_s-L (I),
где А, В, D, Е, F, G и К означают остатки α-аминокислот, индексы s и r означают каждый независимо 0 или 1 и L означает одновалентный радикал, такой как аминогруппа, N-замещенная аминогруппа, β-гидроксиламиногруппа, гидразидогруппа, алкоксигруппа, тиоалкоксигруппа, аминоксигруппа или оксиматогруппа.

Пептиды формулы I обычно состоят из L-аминокислот, но они могут содержать одну или более D-аминокислот. В последующем обсуждении ссылка на отдельную аминокислоту включает оба энантиомера, если не указывается конкретный энантиомер. Представленные соединения могут также присутствовать в виде солей с физиологически совместимыми кислотами, включая соляную кислоту, лимонную кислоту, винную кислоту, молочную кислоту, фосфорную кислоту, метансульфоновую кислоту, уксусную кислоту, муравьиную кислоту, малеиновую кислоту, фумаровую кислоту, яблочную кислоту, янтарную кислоту, малоновую кислоту, серную кислоту, L-глутаминовую кислоту, L-аспарагиновую кислоту, пировиноградную кислоту, слизевую кислоту, бензойную кислоту, глюкуроновую кислоту, щавелевую кислоту, аскорбиновую кислоту и ацетилглицин.

Далее следует описание настоящего изобретения, включая подробное описание отдельных компонентов и способов применения заявленных соединений.

Соединения настоящего изобретения
Идентичность А
В одном варианте осуществления изобретения А является производным пролина формулы IIa:

где n_а означает целое число, предпочтительно 0, 1, 2 или 3. R_a означает одновалентный радикал, такой как атом водорода или незамещенная или замещенная фтором алкильная группа, например C₁-С₃-алкильная группа с прямой или разветвленной цепью, или циклическая, которая необязательно замещена 1-3 атомами фтора; подходящие примеры включают метил, этил, изопропил, 2-фторэтил, 2,2,2-трифторэтил, 1-метил-2-фторэтил, 1-фторметил-2-фторэтил или циклопропил; предпочтительны метил, этил или изопропил.

В данном варианте осуществления изобретения R_a ¹ является одновалентным радикалом, таким как атом водорода, алкильная группа, такая как метильная, этильная или пропильная группа, или фенильная группа. Фенильная группа может быть замещена; подходящие заместители включают один или несколько атомов галогена, предпочтительно атомы фтора, хлора и брома, C₁-C₄-алкильные группы, метокси, этокси, трифторметильную или нитрогруппы. R_a и R_a ¹ могут вместе образовывать пропиленовый мостик.

R_a ², R_a ³, R_a ⁴ и R_a ⁵ являются каждый независимо одновалентным радикалом, таким как атом водорода или алкильная, предпочтительно метильная, группа.

В другом варианте осуществления изобретения А является замещенным производным глицина формулы IIIa:

где R_a имеет установленное для R_a в формуле IIа значение и R_a ¹ является одновалентным радикалом, например, атомом водорода или C₁-C₆-алкильной группой, предпочтительно метильной, этильной или пропильной группой.

В данном варианте осуществления изобретения R_a ⁶ означает одновалентный радикал, такой как алкильная, замещенная алкильная, алкенильная, фенильная или замещенная фенильная группа. Подходящие примеры включают метоксиметил, 1-метоксиэтил, 1,1-диметилгидроксиметил, 1-трифторметилэтил, 1-трифторметил-2,2,2-трифторэтил, винил и 1-метилвинил. Заместители фенила могут включать один или более атомов галогена, предпочтительно атомы фтора, хлора или брома, и алкильную, метокси, этокси, трифторметильную и нитрогруппы.

Когда R_a ¹ означает алкильную группу, R_a ⁶ может также быть C₁-C₆-алкильной, циклоалкильной, незамещенной бензильной или замещенной бензильной группой. Подходящие заместители бензила включают один или более атомов галогена, таких как атомы фтора, хлора или брома, C₁-C₄-алкильные группы и метокси, этокси, трифторметильную и нитрогруппы.

R_a ⁷ означает одновалентный радикал, предпочтительно метильную, этильную или изопропильную группу.

В другом варианте осуществления изобретения А является производным α-аминокислоты формулы IVa:

где m_a является целым числом, предпочтительно 1 или 2, и R_a и R_a ⁷ имеют значения, установленные для этих заместителей в формуле IIIa.

В другом варианте осуществления изобретения А является производным α-аминокислоты формулы Va:

где R_a и R_a ⁷ имеют значения, установленные для R_a и R_a ⁷ в формуле IIIa.

В другом варианте осуществления изобретения А является замещенным производным пролина формулы VIa:

где R_a и R_a ^1a имеют значения, установленные для R_a и R_a ^1a в формуле IIa, и X_а является одновалентным радикалом, предпочтительно гидрокси, алкокси, например метокси или этокси, группой или атомом фтора.

В другом варианте осуществления изобретения А является тиапролильным производным формулы VIIa:

где R_a, R_a ¹, R_a ², R_a ³, R_a ⁴ и R_a ⁵ имеют значения, установленные для соответствующих заместителей в формуле IIa.

В другом варианте осуществления изобретения А является производным 1,3-дигидроизоиндола формулы VIIIa:

где R_a имеет значение, установленное для R_a для формулы IIa.

В другом варианте осуществления изобретения А является производным 2-азабицикло[2.2.1]гептан-3-карбоновой кислоты формулы IXa:

где Z_а означает простую или двойную связь и R_a имеет установленное для формулы II_a значение. 3-Карбонильный заместитель может иметь экзо- или эндоориентацию.

В другом варианте осуществления изобретения А является производным α-аминокислоты формулы Xa:

где n_а имеет значение, установленное для n_a для формулы IIa, и R_a ⁷ и R_a имеют значения, установленные для R_a ⁷ и R_a для формулы IIIa.

Идентичность В
В означает валильный, изолейцильный, аллоизолейцильный, норвалильный, 2-трет-бутилглицильный или 2-этилглицильный остаток. В также может быть остатком α-аминокислоты формулы IIb:

в которой R_b ¹ и R_b ² являются каждый одновалентным радикалом. R_b ¹ предпочтительно означает атом водорода и R_b ² является, например, алкильной, алкоксиалкильной или алкенильной группой. В предпочтительных вариантах осуществления изобретения R_b ² является циклопропильной группой, бутильной группой с прямой или разветвленной цепью, предпочтительно трет-бутильной группой, метоксиметильной группой, 1-метоксиэтильной группой или 1-метилвинильной группой. Кроме того, R_b ¹ и R_b ² вместе могут представлять изопропилиденовую группу.

Идентичность D
D является N-алкилвалильным, N-алкил-2-этилглицильным, N-алкил-2-трет-бутилглицильным, N-алкилнорлейцильным, N-алкилизолейцильным, N-алкил-алло-изолейцильным или N-алкилнорвалильным остатком, где N-алкильная группа является предпочтительно метильной или этильной группой.

В другом варианте осуществления изобретения D является остатком α-аминокислоты формулы II_d:

где R_d имеет значение, установленное для R_а в формуле IIIa, R_d ¹ является одновалентным радикалом, предпочтительно атомом водорода, и R_d ² является одновалентным радикалом, например, алкильной, алкоксиалкильной или алкенильной группой. В предпочтительных вариантах осуществления изобретения R_d ² означает циклопропильную группу, бутильную группу с прямой или разветвленной цепью, предпочтительно трет-бутильную группу, метоксиметильную группу, 1-метоксиэтильную группу или 1-метилвинильную группу. Кроме того, R_d ¹ и R_d ² вместе могут образовать изопропилиденовую группу.

Альтернативно D может быть производным пролина формулы III_d:

где n_d является целым числом, например 1 или 2, и R_d ³ имеет установленное для R_a ¹ в формуле IIIa значение. X_d является одновалентным радикалом, предпочтительно атомом водорода, и в случае, когда n_d равно 1, может также быть гидрокси или алкокси, например метокси- или этоксигруппой, или атомом фтора.

Идентичность Е
Е означает пролильный, тиазолидинил-4-карбонильный, гомопролильный или гидроксипролильный остаток или остаток циклической -аминокарбоновой кислоты формулы IIе:

где n_е означает целое число, предпочтительно 0, 1 или 2. R_e ¹ имеет установленное для R_a ¹ в формуле IIIa значение. R_e ² и R_e ³ являются каждый одновалентным радикалом и могут быть независимо атомом водорода или алкильной, предпочтительно метильной, группой. R_e ⁴ означает одновалентный радикал, предпочтительно атом водорода, гидрокси, алкокси, например, метокси или этокси, группу, или атом фтора. R_e ⁵ является одновалентным радикалом, предпочтительно атомом водорода или атомом фтора. В случае, когда n_е означает 1, R_e ³ и R_e ⁴ могут вместе образовывать двойную связь или R_e ⁴ и R_e ⁵ могут вместе представлять радикал в виде присоединенного двойной связью атома кислорода. В том случае, когда n_е означает 1 или 2, R_e ¹ и R_e ² могут вместе образовывать двойную связь.

В другом варианте осуществления изобретения Е является остатком 2- или 3-аминоциклопентанкарбоновой кислоты формулы IIIe:

где R_e является алкильной группой, такой как метил или этил, и R_e ¹ имеет установленное для R_a ¹ в формуле IIIa значение.

Идентичность F
F является пролильным, тиазолидинил-4-карбонильным, гомопролильным или гидроксипролильным остатком. F может также быть остатком циклической α-аминокислоты формулы II_f:

где n_f является целым числом, предпочтительно 0, 1 или 2. R_f ¹ имеет установленное для R_a ¹ в формуле IIIa значение. R_f ² и R_f ³ являются каждый одновалентным радикалом и могут быть независимо атомом водорода или алкильной, предпочтительно метильной, группой. R_f ⁴ является одновалентным радикалом, предпочтительно атомом водорода, гидрокси, алкокси, например метокси- или этоксигруппой, или атомом фтора. R_f ⁵ является одновалентным радикалом, предпочтительно атомом водорода или атомом фтора. В случае, когда n_f означает 1, R_f ³ и R_f ⁴ могут вместе образовывать двойную связь или R_f ⁴ и R_f ⁵ могут вместе представлять радикал в виде присоединенного двойной связью атома кислорода. В случае, когда n_f означает 1 или 2, R_f ¹ и R_f ² могут вместе образовывать двойную связь.

В другом варианте осуществления изобретения F является остатком 2- или 3-аминоциклопентанкарбоновой кислоты формулы IIIf:

где R_f является одновалентным радикалом, таким как метильная или этильная группа, и R_f ¹ имеет установленное для R_a ¹ в формуле IIIa значение.

В другом варианте осуществления изобретения F является N-алкилглицильным или N-алкилаланильным остатком, и алкильная группа является предпочтительно метильной группой или этильной группой.

Идентичность G
G является остатком α-аминокислоты формулы IIg:

где R_g ¹ является атомом водорода или алкильной группой, например метилом, этилом или н-пропилом. R_g ² может быть, например, атомом водорода или алкильной, арилалкильной, гетероарилалкильной или арильной группой. Предпочтительно R_g ² является этильной, изопропильной, трет-бутильной, изобутильной, 2-метилпропильной, циклогексилметильной, бензильной, тиазолил-2-метильной, пиридил-2-метильной, н-бутильной, 2,2-диметилпропильной, нафтилметильной или н-пропильной группой, или замещенной или незамещенной фенильной группой. Подходящие заместители фенила включают один или несколько атомов галогена, предпочтительно фтора, хлора или брома, C₁-C₄-алкильные группы, метокси, этокси, нитро или трифторметильную группы или диоксометиленовую группу. Альтернативно R_g ¹ и R_g ² могут вместе с α-углеродным атомом образовывать циклопентановое или циклогексановое кольцо или бензоконденсированное циклопентановое кольцо, такое как, например, инданильная группа.

Идентичность К
К является остатком α-аминокислоты формулы II_k:

где R_k ¹ является идентичным R_g ¹ в формуле IIg и R_k ² является идентичным R_g ² в формуле IIg.

Идентичность L
В одном варианте осуществления изобретения L является амино или замещенной аминогруппой формулы II_l:

где R_l ¹ является одновалентным радикалом, таким как атом водорода, насыщенная или ненасыщенная C₁-C₁₈-алкоксигруппа с прямой или разветвленной цепью, замещенная или незамещенная арилоксигруппа, замещенная или незамещенная арил-C₁-C₆-алкоксигруппа, или замещенная или незамещенная арилокси-C₁-C₆-алкокси или гетероарил-С₁-С₆-алкоксигруппа. Арильная группа является предпочтительно фенильной или нафтильной группой. Гетероарильная группа является 5- или 6-членной кольцевой системой, предпочтительно содержащей азот, кислород или серу, такой как, например, гетероарильная группа, производная от имидазола, изоксазола, изотиазола, тиазола, оксазола, пиразола, тиофена, фурана, пиррола, 1,2,4- или 1,2,3-триазола, пиразина, индола, бензофурана, бензотиофена, изоиндола, индазола, хинолина, пиридазина, пиримидина, бензимидазола, бензопирана, бензотиазола, оксадиазола, тиадиазола или пиридина. Подходящие заместители арила включают один или несколько атомов галогена, предпочтительно фтора, брома или хлора, C₁-C₄-алкильные группы, метокси, этокси или трифторметильную группы, диоксиметиленовую группу или нитрогруппы.

R_l ² означает одновалентный радикал, такой как атом водорода, насыщенную или ненасыщенную С₁-С₁₈-алкильную группу с прямой или разветвленной цепью, С₃-С₁₀-циклоалкильную группу, замещенную или незамещенную арильную группу, или замещенную или незамещенную гетероарильную группу. Арильная группа предпочтительно является фенильной или нафтильной группой. Гетероарильная группа представляет 5- или 6-членную кольцевую систему, предпочтительно содержащую азот, кислород или серу, такую как, например, гетероарильная группа, производная от имидазола, изоксазола, изотиазола, тиазола, оксазола, пиразола, тиофена, фурана, пиррола, 1,2,4- или 1,2,3-триазола, пиразина, индола, бензофурана, бензотиофена, изоиндола, индазола, хинолина, пиридазина, пиримидина, бензимидазола, бензопирана, бензотиазола, оксадиазола, тиадиазола или пиридина. Подходящие заместители арила включают один или несколько атомов галогена, предпочтительно фтора, брома или хлора, С₁-С₄-алкильные группы, метокси, этокси или трифторметильную группы, диоксиметиленовую группу или нитрогруппы.

Альтернативно R_l ² может иметь формулу IIr:

где a_l является целым числом, таким как 0, 1, 2, 3, 4 или 5. R_l ³ означает одновалентный радикал, предпочтительно низшую алкильную группу, такую как метильная, этильная, пропильная или изопропильная группа. R_l ⁴ является одновалентным радикалом, который может представлять насыщенную или частично ненасыщенную карбоциклическую систему, включающую от около 3 до около 10 углеродных атомов, замещенную или незамещенную арильную или гетероарильную группу, где арил и гетероарил и предпочтительные заместители имеют значения, установленные для R_l ² в формуле II_l.

R_l ² может также быть заместителем формулы IIIr:
-(CH₂)₂-W_l-R_l ⁵ (IIIr),
где W_l означает атом кислорода или серы или N-R_l ⁶-группу. R_l ⁵ является одновалентным радикалом, таким как атом водорода, C₁-С₄-алкильная группа или С₃-С₇-циклоалкильная группа, или замещенная или незамещенная арильная или арилметильная группа, где арил и его предпочтительные заместители имеют значения, установленные для R_l ² из формулы IIl. R_l ⁶ является одновалентным радикалом, предпочтительно атомом водорода, C₁-С₄-алкильной группой или С₃-С₇-циклоалкильной группой, C₁-C₁₈-алканоильной группой, бензоильной группой или замещенной или незамещенной арильной или арилметильной группой, где арил и его предпочтительные заместители имеют значения, установленные для R_l ² в формуле II_l.

R_l ² может альтернативно быть заместителем формулы IVr:
-(СН₂)_b1-Z₁, (IVr)
где b₁ является целым числом, предпочтительно 2, 3 или 4. Z₁ может быть одновалентным радикалом, таким как формильная, аминокарбонильная или гидразинокарбонильная группа, или циклической или ациклической ацетальной или тиоацетальной группой.

R_l ² может также быть заместителем формулы Vr:

в которой b_l имеет вышеупомянутое значение. R_l ⁷ может быть одновалентным радикалом, таким как полигликольная группа формулы -О(СН₂-СН₂-O)_d1-СН₃, где d_l является целым числом, предпочтительно в области от около 2 до около 4 или от около 40 до около 90.

R_l ² может быть, кроме того, углеводородом формулы VIr:

где R_l ⁸ является одновалентным радикалом, таким как атом водорода, С₁-С₄-алканоильная или алкильная группа, бензоильная группа или бензильная группа.

L может также быть β-гидроксиламиногруппой формулы III_l:

где R_l ⁹ означает одновалентный радикал, такой как атом водорода, C₁-C₆-алкильная группа или замещенная или незамещенная арильная группа, где арил и его предпочтительные заместители имеют значения, установленные для R_l ². R_l ¹⁰ является одновалентным радикалом, предпочтительно атомом водорода, алкильной, например метильной или фенильной, группой.

Когда r и/или s означают 1, L может также быть аминогруппой формулы IV_l:

где R_l ² и R_l ⁴ являются каждый одновалентным радикалом. R_l ² и R_l ⁴ могут также быть соединены углерод-углеродной связью.

Другой подкласс соединений данного изобретения включает пептиды формулы I, в которой L является гидразидогруппой формулы V_l:

и R_l ¹¹ означает одновалентный радикал, предпочтительно атом водорода. R_l ¹² может быть одновалентным радикалом, таким как атом водорода, C₁-С₈-алкильная группа с прямой или разветвленной цепью, С₃-С₈-циклоалкильная группа, С₃-С₈-циклоалкил-С₁-С₄-алкильная группа или замещенная или незамещенная арильная, гетероарильная, арил-С₁-С₄-алкильная или гетероарил-С₁-С₄-алкильная группа, и где арил, гетероарил и их предпочтительные заместители могут быть выбраны из представленных на выбор вариантов, перечисленных для R_l ².

Когда r и/или s означают 1, R_l ¹¹ может быть также выбран из представленных на выбор вариантов, перечисленных выше для R_l ¹², и два радикала вместе могут дополнительно образовывать пропиленовый или бутиленовый мостик.

Другой подкласс соединений данного изобретения включает пептиды формулы I, в которой L означает одновалентный радикал формулы -O-R_l ¹³ или формулы -S-R_l ¹³, где R_l ¹³ является одновалентным радикалом, таким как С₃-С₁₀-циклоалкильная группа, C₂-C₁₆-алкенилметильная группа с прямой или разветвленной цепью или C₁-C₁₆-алкильная группа, которая может быть замещена от 1 до около 5 атомами галогена, предпочтительно фтора.

R_l ¹³ может также представлять радикал (CH₂)_e-R_l ¹⁴, где е является целым числом, предпочтительно 1, 2 или 3. R_l ¹⁴ означает одновалентный радикал, предпочтительно насыщенный или частично ненасыщенный С₃-С₁₀-карбоцикл.

R_l ¹³, кроме того, может быть одновалентным радикалом-[CH₂-CH=C(СН₃)-CH₂] _f-H, где f является целым числом, предпочтительно 1, 2, 3 или 4.

R_l ¹³ может также быть радикалом [СН₂-СН₂-O]_g-СН₃, где g означает целое число, предпочтительно в области от 1 до около 5.

R_l ¹³ может также быть радикалом -(СН₂)_h-арил или -(СН₂)_h-гетероарил, где арил и гетероарил могут также быть замещены и вместе с их предпочтительными заместителями могут быть выбраны из группы, составленной для R_l ². Индекс h является целым числом, предпочтительно 0, 1, 2 или 3.

R_l ¹³ может, кроме того, быть радикалом (CH₂)_b-W₁-R_l ⁵. Каждый из b, W₁ и R_l ⁵ может быть выбран из представленных вариантов, описанных для формулы IV_l.

Другой подкласс соединений данного изобретения включает пептиды формулы I, в которой L является аминоксигруппой формулы -0-N(R_l ¹⁵) (R_l ¹⁶), где R_l ¹⁵ и R_l ¹⁶ являются каждый одновалентным радикалом, который может независимо быть атомом водорода, C₁-C₈-алкильной группой с прямой или разветвленной цепью, которая может быть замещена атомами галогена, предпочтительно фтора, С₃-С₈-циклоалкильной группой, С₃-С₈-циклоалкил-С₁-С₄-алкильной группой,
замещенной или незамещенной арильной или гетероарильной группой или замещенной или незамещенной арил-С₁-С₄-алкильной группой. Арильные и гетероарильные группы и их предпочтительные заместители могут быть выбраны из вариантов, приведенных для R_l ². R_l ¹⁶ может быть выбран из вариантов, приведенных для R_l ¹⁵. Кроме того, R_l ¹⁵ и R_l ¹⁶ могут вместе образовать 5-, 6- или 7-членный гетероцикл. Соединения настоящего изобретения включают, кроме того, соли описанных выше соединений с физиологически переносимыми кислотами.

Другой подкласс соединений данного изобретения включает пептиды формулы I, в которой L является оксиматогруппой формулы -0-N=C(R_l ¹⁵) (R_l ¹⁶), R_l ¹⁵ и R_l ¹⁶ могут быть выбраны из представленных выше вариантов и, кроме того, могут вместе образовывать циклическую систему, включающую предпочтительно от около 3 до около 7 кольцевых атомов. Эта циклическая система может, кроме того, быть сконденсирована с одним или несколькими ароматическими кольцами. Особенно предпочтительные циклические системы показаны ниже.

В одном варианте осуществления изобретение предоставляет соединения формулы I, где А является производным аминокислоты, выбранным из N-алкил-D-пролила, N-алкил-L-пролила, N-алкил-D-пиперидин-2-карбонила, N-алкил-L-пиперидин-2-карбонила, N, N-диалкил-D-2-этил-2-фенилглицила и N,N-диалкил-L-2-этил-2-фенилглицила, где алкил означает метил, этил или изопропил; и В означает валильный, изолейцильный или 2-трет-бутил-L-глицильный остаток.

Предпочтительные соединения согласно изобретению включают соединения формулы I, где r и s каждый обозначает 0. А является производным аминокислоты, выбранным из
D-N-метилпиперидин-2-карбонила,
L-N-метилпиперидин-2-карбонила, N,N-диметиламино-изобутирила, N-метил-L-пролила,
N-метил-L-тиазолидин-4-карбонила, N,N-диметилглицила,
L-пролила, L-пиперидин-2-карбонила,
N-пропил-D-пиперидин-2-карбонила,
D-пиперидин-2-карбонила, N-этил-D-пиперидин-2-карбонила,
N-метил-[2,2,5,5-тетраметил]-L-тиазолидин-2-карбонила,
N-изопропил-D-пиперидин-2-карбонила, N,N-диметил-2- циклопропилглицила, N,N-диметил-L-2-этил-2-фенилглицила,
N,N-диметил-D-2-этил-2-фенилглицила, D-пролила,
N-метил-D-пролила, N,N-диметил-2-(2-фторфенил)глицила,
1-аза-[3,3,0]бициклооктил-5-карбонила,
N,N-диметил-2-[4-фтор]фенилглицила,
N-метил-[2,2,5,5-тетраметил]тиазолидин-2-карбонила,
2-(R,S)-этил-2-фенилглицила, D,L-1-аминоиндан-1-карбонила,
N, N-диметил-2-(R,S)-метил-2-фенилглицила, 2-[N,N-диметиламино]индан-2-карбонила,
5-[N, N-диметиламино] -5,6,7,8-тетрагидронафталин-5-карбонила, N-изопропил-2-(R,S)-этил-2-фенилглицила, 1-[N,N-диметиламино]индан-2-карбонила,
N,N-диметил-2-пропил-2-фенилглицила,
N,N-диметил-2-[4-метокси]фенилглицила,
N-метил-3-гидрокси-D, L-валила, N, N-диметил-D,L-2-изопропил- 2-фенилглицила, N-метилпиперидин-2-карбонила,
N-метил-L-пролила, N-метил-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-1-карбонила,
N-метилазетидин-2-карбонила, N-изопропилазетидин-2-карбонила, N,N-диметил-[O-метил]серила,
N,N-диметил-[O-метил]треонила,
N-метил-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-3-карбонила,
1-[N,N-диметиламино]циклогексил-1-карбонила,
1-[N,N-диметиламино]циклопентил-1-карбонила и
1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-3-карбонила. В представляет валил, изолейцил или 2-трет-бутилглицил. D представляет N-метилвалил, N-метил-2-трет-бутилглицил или N-метилизолейцил. Е и F каждый представляет независимо пролил, тиапролил, гомопролил, гидроксипролил, 3,4-дидегидропролил, 4-фторпролил и 3-метилпролил. L является алкоксигруппой или аминогруппой формулы R_l ¹-N-R_l ², где R_l ¹ и R_l ² независимо выбраны из группы, состоящей из водорода, алкокси, гидрокси, алкила и алкиларила.

В особенно предпочтительном множестве соединений по изобретению r и s означают каждый 0. А является производным аминокислоты, выбранным из
D, N-метилпиперидин-2-карбонила, N-этил-D-пиперидин-2-карбонила, N-изопропил-D-пиперидин-2-карбонила,
N,N-диметил-2-циклопропилглицила, N-метил-D-пролила,
1-аза-[3,3,0]бициклооктил-5-карбонила,
N-метил-[2,2,5,5-тетраметил]тиазолидин-2-карбонила,
2-(R,S)-этил-2-фенилглицила, D,L-1-аминоиндан-1-карбонила,
N,N-диметил-2-(R,S)-метил-2-фенилглицила,
5-[N,N-диметиламино]-5,6,7,8-тетрагидро-нафталин-5-карбонила,
1-[N,N-диметиламино]индан-2-карбонила,
N, N-диметил-2-пропил-2-фенилглицила, N, N-диметил-L-2-этил-2-фенилглицила, N,N-диметил-D-2-этил-2-фенилглицила, N-метил-3-гидрокси-D,L-валила,
N,N-диметил-D,L-2-изопропил-2-фенилглицила,
N-метилпиперидин-2-карбонила, N-метил-D,L-пролила,
N-метил-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-1-карбонила,
N-метилазетидин-2-карбонила,
N-изопропилазетидин-2-карбонила,
N,N-диметил-[O-метил]серила,
1-[N,N-диметиламино]циклогексил-1-карбонила и
1-[N, N-диметиламино] циклопентил-1-карбонила. В представляет валил; D представляет N-метилвалил; и Е и F каждый представляет пролил. L представляет C₁-C₆-алкоксигруппу или аминогруппу формулы R_l ¹-N-R_l ², где R_l ¹ и R_l ² каждый независимо выбран из группы, состоящей из водорода, C₁-C₆-алкокси, гидрокси, C₁-C₁₂-алкила с прямой или разветвленной цепью или циклического, и фенилалкила.

Синтетические способы
Соединения настоящего изобретения могут быть получены известными способами пептидного синтеза. Так, пептиды могут быть составлены последовательно из отдельных аминокислот или путем связывания подходящих небольших пептидных фрагментов. В случае последовательного присоединения пептидная цепь удлиняется постепенно, начиная с С-конца, на одну аминокислоту за стадию. При сочетании фрагментов фрагменты различной длины могут быть соединены, и фрагменты, в свою очередь, могут быть получены последовательным присоединением из аминокислот или при сочетании фрагментов еще более коротких пептидов.

Как при последовательном присоединении, так и при сочетании фрагментов необходимо соединять отдельные элементы путем образования амидной связи, что может быть осуществлено с помощью ряда ферментативных и химических способов. Химические способы образования амидной связи описываются подробно в стандартных рекомендациях по пептидной химии, включая , Methoden der organischen Chemie Vol. XV/2, 1-364, Thieme Verlag, Stuttgart, (1974); Stewart and Young, Solid Phase Peptide Synthesis, 31-34 and 71-82, Pierce Chemical Company, Rockford, IL (1984); Bodanszky et al., Peptide Synthesis, 85-128, John Wiley & Sons, New York, (1976). Предпочтительные способы включают азидный метод, метод симметричных и смешанных ангидридов, использование in situ генерированных или предварительно образованных активных сложных эфиров, использование защищенных уретаном N-карбоксиангидридов аминокислот и образование амидной связи с использованием реагентов сочетания, таких как активаторы карбоновых кислот, особенно дициклогексилкарбодиимид (DCC), диизопропилкарбодиимид (DIC), 1-этоксикарбонил-2-этокси-1,2-дигидрохинолин (EEDQ), пивалоилхлорид, гидрохлорид 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимида (EDCI), ангидрид н-пропанфосфоновой кислоты (РРА), N,N-бис(2-оксо-оксазолидинил)амидофосфорилхлорид (ВОР-С1), гексафторфосфат бромо-трис(пирролидино)фосфония (PyBrop), дифенилфосфорилазид (DPPA), реагент Кастро (ВОР, PyВор), O-бензотриазолил-N, N, N', N'-тетраметилурониевые соли (HBTU), O-азабензотриазолил-N,N,N',N'-тетраметилурониевые соли (HATU), диэтилфосфорилцианид (DEPCN), диоксид 2,5-дифенил-2,3-дигидро-3-оксо-4-гидрокситиофена (реагент Стеглича; HOTDO) и 1,1'-карбонилдиимидазол (CDI). Реагенты для сочетания могут применяться сами по себе или в комбинации с добавками, такими как N,N-диметил-4-аминопиридин (DMAP), N-гидроксибензотриазол (HOBt), N-гидроксиазабензотриазол (HOAt), N-гидрокси-бензотриазин (HOOBt), N-гидроксисукцинимид (HOSu) или 2-гидроксипиридин.

Хотя использование защитных групп не является обычно необходимым в ферментативном пептидном синтез, легко удаляемая защита реакционноспособных групп, не вовлеченных в образование амидной связи, необходима для обоих реагентов в химическом синтезе. Три общепринятые методики с использованием защитных групп предпочтительны для химического пептидного синтеза: методики с использованием бензилоксикарбонильной (Z), трет-бутоксикарбонильной (Вос) и 9-флуоренилметоксикарбонильной (Fmoc) защиты. Определяющей в каждом случае является защитная группа при α-аминогруппе удлиняющего цепь элемента. Подробный обзор защитных групп для аминокислот приводится в книге , Methoden der organischen Chemie Vol. XV/1, pp 20-906, Thieme Verlag, Stuttgart (1974). Фрагменты, используемые для сборки пептидной цепи, могут реагировать в растворе, в суспензии или по способу, подобному описанному Merrifield, J. Am. Chem. Soc. 85: (1963) 2149.

Растворители, подходящие для пептидного синтеза, включают любой инертный в условиях реакции растворитель, в частности воду, N,N-диметилформамид (ДМФ), диметилсульфоксид (ДМСО), ацетонитрил, дихлорметан (ДХМ), 1,4-диоксан, тетрагидрофуран (ТГФ), N-метил-2-пирролидон (NMP) и смеси этих растворителей.

Пептидный синтез на полимерном носителе может быть проведен в подходящем инертном органическом растворителе, в котором растворимы исходные вещества для получения производных аминокислот. Однако предпочтительные растворители дополнительно обладают свойствами, способствующими набуханию полимера, как, например, ДМФ, ДХМ, NMP, ацетонитрил и ДМСО и смеси этих растворителей. После синтеза пептид удаляют с полимерного носителя. Условия, при которых осуществляется это расщепление для различных типов полимеров, описываются в литературе. Чаще всего используемые реакции расщепления катализируются кислотами и палладием, в первом случае реакцию проводят, например, в жидком безводном
фтороводороде, безводной трифторметансульфоновой кислоте, в разбавленной или концентрированной трифторуксусной кислоте и в смесях уксусная кислота/дихлорметан/трифторэтанол. Второй вариант может быть осуществлен в ТГФ или смесях ТГФ-ДХМ в присутствии слабого основания, такого как морфолин. Некоторые защитные группы также отщепляются в этих условиях.

Частичное снятие защиты с пептида может быть также необходимо перед определенными реакциями дериватизации. Например, диалкилированные по N-концу пептиды могут быть получены путем присоединения подходящей N,N-диалкиламинокислоты к пептиду в растворе или на полимерном носителе при восстановительном алкилировании связанного с полимером пептида в смеси ДМФ/1% уксусная кислота с помощью NaСNВН₃ и соответствующего альдегида или при гидрировании пептида в растворе в присутствии соответствующего альдегида или кетона и Pd/на угле.

Различные не встречающиеся в природе аминокислоты, а также различные неаминокислотные остатки, описанные здесь, могут быть получены из коммерческих источников или могут быть синтезированы из коммерчески доступного сырья при использовании способов, известных в данной области. Например, аминокислотные структурные элементы для построения с группами R¹ и R² могут быть получены согласно способу, описанному Wuensch and Weyl, Methoden der Organische Chemie, vol. XV, Springer Verlag: Stuttgart, p. 306 (1974), и цитируемым там ссылкам.

Способы применения заявленных соединений.

В другом варианте осуществления изобретения представленное изобретение включает способ частичного или полного ингибирования образования или иначе лечения (например, ревертирование или ингибирование дальнейшего развития) твердых опухолей (например, опухолей легкого, молочной железы, ободочной кишки, простаты, мочевого пузыря, прямой кишки или внутриматочных опухолей) или гематологических злокачественных заболеваний (например, лейкозов, лимфом) у млекопитающих, например у человека, путем введения млекопитающему терапевтически эффективного количества соединения или комбинации соединений формулы I. Соединение(я) можно вводить по отдельности или в фармацевтической композиции, включающей соединение(я) и приемлемый носитель или растворитель. Введение можно осуществлять любым из способов, общепринятых для фармацевтических, предпочтительно онкологических, средств, включая пероральные и парентеральные способы, как, например, подкожно, внутривенно, внутримышечно и внутрибрюшинно, назально или ректально. Соединения можно вводить по отдельности или в виде фармацевтической композиции, содержащей соединение или соединения формулы I вместе с фармацевтически приемлемым носителем, подходящим для желательного способа введения. Такие фармацевтические композиции могут представлять комбинацию веществ, т.е. они могут также содержать другие терапевтически активные ингредиенты.

Доза, которую следует ввести млекопитающему, например человеку, содержит терапевтически эффективное количество описанного здесь соединения. Используемое здесь выражение "терапевтически эффективное количество" означает количество, достаточное для ингибирования (частичного или полного) образования опухоли или гематологической злокачественной болезни или для предотвращения или уменьшения ее дальнейшего развития. Для особого состояния или способа лечения доза определяется эмпирически с использованием известных методов и зависит от таких факторов, как биологическая активность отдельного используемого соединения, способы введения, возраст, состояние здоровья и масса тела реципиента, природа и степень симптомов, частота лечения, применение других вариантов лечения и желаемый эффект. Обычная дневная доза составляет от около 0,05 до около 50 мг на 1 кг массы тела при пероральном введении или от около 0,01 до около 20 мг на 1 кг массы тела при парентеральном введении.

Соединения согласно настоящему изобретению можно вводить в виде общепринятых твердых или жидких фармацевтических форм для введения, например, в виде непокрытых таблеток или таблеток с пленочным покрытием, капсул, порошков, гранул, суппозиториев или растворов. Такие формы готовят общепринятыми способами. Активные вещества для этой цели можно обрабатывать обычными фармацевтическими вспомогательными средствами, такими как связывающие вещества для приготовления таблеток, наполнители, консерванты, дезинтегранты, регуляторы текучести, пластификаторы, смачивающие средства, диспергирующие средства, эмульгаторы, растворители, композиции для поддерживания высвобождения, антиоксиданты и/или пропелленты в виде газов (ср. Н. et al. : Pharmazeutische Technologie, Thieme-Verlag, Stuttgart, (1978). Полученные таким образом формы для введения обычно содержат от около 1 до около 90% по массе активного вещества.

Представленное изобретение будет проиллюстрировано следующими примерами, которые не являются ограничивающими.

ПРИМЕРЫ
Названия образующих белки аминокислот сокращаются в примерах с использованием известного трехбуквенного кода. Другими используемыми сокращениями являются: ТФУ = трифторуксусная кислота. Ас = уксусная кислота, ДХМ = дихлорметан, ДМСО = диметилсульфоксид, Вu = бутил, Et = этил, Me = метил, Bzl = бензил. В перечисленных соединениях все образующие белки аминокислоты являются L-аминокислотами, если не указано иначе. Другие используемые сокращения: Ме₂Vаl = N,N-диметилвалин, MeVal = N-метилвалин, Вn = бензил, Me₂Aib = [2-N,N-диметиламино]изомасляная кислота.

Общие методики
Пептиды по изобретению синтезируют либо классическим синтезом в растворе, используя стандартную методологию с Z- и Вос-защитой, как описано выше, либо стандартными способами твердофазного синтеза, используя методику с применением Вос- и Fmoс-защитных групп.

В случае твердофазного синтеза кислоты N,N-диалкилпента- или гексапептидов отщепляют от твердого носителя и затем соединяют с соответствующими С-концевыми аминами в растворе. ВОР-С1 и PyBrop использовались как реагенты для сочетания аминокислоты, следующей за N-метиламинокислотами. Время реакции соответственно возрастало. Для восстановительного алкилирования N-конца удаляли защиту с пептида-полимера при N-конце и затем подвергали реакции с 3-кратным молярным избытком альдегида или кетона в смеси ДМФ/1% уксусная кислота с добавлением 3 эквивалентов NaCNBH₃. После завершения реакции (отрицательный тест Кайзера) полимер несколько раз промывали водой, изопропанолом, ДМФ и дихлорметаном.

В случае синтеза в растворе использование либо Вос-защищенных NCAs аминокислот (N-трет-бутилоксикарбонил-аминокислота-N-карбоксиангидриды), Z-защищенных NCAs аминокислот (N-бензилоксикарбонил-аминокислота-N-карбоксиангидриды), либо использование пивалоилхлорида в качестве конденсирующего агента соответственно является наиболее благоприятным для сочетания аминокислоты, следующей за N-метиламинокислотами. Восстановительное алкилирование N-конца может, например, быть достигнуто при взаимодействии пептидов или аминокислот с удаленной при N-конце защитой с соответствующими альдегидами или кетонами с использованием NaCNBH₃ или водорода в присутствии Pd на угле.

Гидрохлорид валил-N-метилвалил-пролил-пролилбензиламида был получен, например, согласно способам, изложенным в заявке на патент Германии 19527575 А1.

Очистка и характеристика пептидов
Очистку пептидов проводили гель-хроматографией (Сефадекс G-10, G-15/10% HOAc, Сефадекс LH₂O/MeOH), хроматографией среднего давления (стационарная фаза: HD-SIL C-18, 20-45 микрон, 100 ангстрем; подвижная фаза: градиент с А= 0,1% ТФУ/МеОН, В= 0,1% ТФУ/вода), препаративной ВЭЖХ (стационарная фаза: Waters Delta-Pak C-18, 15 микрон, 100 ангстрем; подвижная фаза: градиент с А=0,1% ТФУ/МеОН, В=0,1% ТФУ/вода) или кристаллизацией.

Чистоту полученных продуктов определяли аналитической ВЭЖХ (стационарная фаза: 100 2,1 мм VYDAC C-18, 5 микрон, 300 А; подвижная фаза: градиент ацетонитрил-вода, забуференный 0,1% ТФУ, 40^oС; или 3,9 мм VYDAC C-18, 30^oC). Характеристику осуществляли масс-спектроскопией с бомбардировкой быстрыми атомами и ЯМР-спектроскопией.

Пример 1. Синтез [N-метил-L-пиперидин-2-карбонил]-Val-MeVal-Pro-Pro-NHBn (соединение 1) и [N-метил-D-пиперидин-2-карбонил] -Vаl-МеVаl-Pro-Pro-NHBn (соединение 2)
Получение N-метилпиперидин-2-карбоновой кислоты
Этиловый эфир N-метилпиперидин-2-карбоновой кислоты (5,1 г) растворяли в смеси 100 мл метанола и 10 мл воды. Добавляли NaOH (8 г) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Затем раствор нейтрализовали соляной кислотой, упаривали досуха и четыре раза упаривали с толуолом. Полученный порошкообразный осадок непосредственно использовали на следующей стадии.

Получение [N-метилпиперидин-2-карбонил]-Val-MeVal-Pro-Pro-NHBn
Осадок (5,05 г), полученный как описано выше, и H-Val-MeVal-Pro-Pro-NHBn x HC1 (4,88 г) растворяли в 50 мл сухого ДМФ. После охлаждения раствора на ледяной бане добавляли 1,52 г DEPCN и 2,66 мл триэтиламина. Реакционную смесь перемешивали 2 часа при 0^oС и затем в течение ночи при комнатной температуре. ДМФ удаляли выпариванием при пониженном давлении. Остаток разбавляли дихлорметаном и органическую фазу промывали водной соляной кислотой (рН 2) и водой, сушили над сульфатом натрия и упаривали досуха. Диастереомерную смесь затем разделяли флэш-хроматографией с градиентом, используя гептан/этилацетат и дихлор-метан/метанол. В условиях ВЭЖХ, описанных в предыдущем разделе (обращенная фаза С-18), изомер 1 имеет время удерживания 14,9 минут и изомер 2 имеет время удерживания 15,8 минут. Оба изомера были охарактеризованы масс-спектрометрией с бомбардировкой быстрыми атомами ([М⁺H]⁺= 639).

Пример 2. Получение Me₂Aib-Val-MeVal-Pro-Pro-NHBn (соединение 3)
Получение 2-[N,N-диметиламино]изомасляной кислоты
2-Аминоизомасляную кислоту (10,3 г) растворяли в 200 мл метанола. После добавления 25 мл водного формальдегида и 1 г 10% Pd/C реакционную смесь гидрировали в течение ночи при комнатной температуре. Катализатор отфильтровывали и фильтрат упаривали досуха. Остаток кристаллизовали из изопропанола, получая 4,8 г желаемого продукта.

Получение Me2Aib-Val-MeVal-Pro-Pro-NHBn x HC1
2-[N, N-Диметиламино] изомасляную кислоту (1,3 г, 10 ммоль) и 5,5 г (10 ммоль) H-Val-MeVal-Pro-Pro-NHBn • HC1 растворяли в 50 мл сухого ДМФ. После охлаждения до 0^oС к реакционной смеси добавляли 1,6 г DEPCN (10 ммоль) и 2,9 мл триэтиламина. Полученную смесь перемешивали 2 часа при 0^oС и при комнатной температуре в течение ночи. Затем добавляли ледяную воду (50 мл) и полученную в результате смесь дважды экстрагировали диэтиловым эфиром. Эфирные экстракты промывали 1 N NaOH (lx) и водным NaCl (3х), затем сушили над сульфатом натрия и досуха упаривали при пониженном давлении. Продукт кристаллизовали из 100 мл диэтилового эфира со смесью HCl/эфир и перекристаллизовывали из ацетона, получая 1,2 г желаемого продукта, который характеризовали масс-спектрометрией с бомбардировкой быстрыми атомами ([М⁺H]⁺=627).

Пример 3. Получение [N,N-диметил-2-этил-2-фенилглицил]-Val-MeVal-Pro-Pro-NHBn х HCl (соединение 4)
Получение [N, N-диметил-2-этил-2-фенилглицил] -Val-MeVal-Pro-Pro-NHBn • HC1
Растворяли 2,07 г (10 ммоль) N,N-диметил-2-этил-2-фенилглицина и 5,5 г (10 ммоль) H-Val-MeVal-Pro-Pro-NHBn х HCl в 100 мл сухого ДМФ. После охлаждения до 0^oС добавляли 1,6 г DEPCN (10 ммоль) и 2,9 мл триэтиламина. Реакционную смесь перемешивали 2 часа при 0^oС и в течение ночи при комнатной температуре, затем обрабатывали, как описано выше. Неочищенный продукт кристаллизовали из диэтилового эфира со смесью HCl/эфир, получая 4 г желаемого продукта, который характеризовали масс-спектрометрией с бомбардировкой быстрыми атомами ([М⁺H]⁺=703).

Пример 4. Получение [N-метил-D-Pro]-Val-MeVal-Pro-Pro-NHBn (соединение 5)
Получение Z-D-Pro-Val-MeVal-Pro-Pro-NHBn
Растворяли 3,74 г Z-D-Pro-OH (15 ммоль, ВАСНЕМ) и 8,25 г H-Val-MeVal-Pro-Pro-NHBn х HCl (15 ммоль) в 80 мл сухого ДМФ. После охлаждения до 0^oС добавляли 2,4 г DEPCN (2,25 мл, 15 ммоль) и 4,2 мл триэтиламина (30 ммоль). Реакционную смесь перемешивали несколько часов при 0^oС и при комнатной температуре в течение ночи, затем ДМФ выпаривали при пониженном давлении. Остаток разбавляли этилацетатом и тщательно промывали разбавленной водной HC1 (рН 2), водой, разбавленным водным NaOH (рН 9-10) и водой. Органическую фазу сушили над сульфатом натрия и упаривали досуха, получая 9,2 г желаемого защищенного пентапептида.

Получение D-Pro-Val-MeVal-Pro-Pro-NHBn x HC1
Растворяли 8,2 г (11 ммоль) Z-D-Pro-Val-MeVal-Pro-Pro-NHBn в 70 мл метанола. После добавления к раствору 0,7 мл концентрированной соляной кислоты и 0,3 г 10% Pd/C полученную смесь гидрировали. После фильтрации и выпаривания растворителя получали осадок, который растворяли в воде, доводили рН до 2 и дважды экстрагировали этилацетатом. Доводили рН водной фазы до 9-10 и дважды экстрагировали дихлорметаном. Органические экстракты упаривали и остаток вновь растворяли в диэтиловом эфире и кристаллизовали при добавлении смеси HCl/эфир в виде гидрохлоридной соли, получая 6,5 г желаемого продукта.

Получение [N-метил-D-Рго]-Vаl-МеVаl-Рго-Рго-NНВn х НСl
Растворяли 1,94 г (3 ммоль) D-Pro-Val-MeVal-Pro-Pro-NHBn х НСl в 30 мл метанола. К этому раствору затем добавляли 0,3 г 10% Pd/C и 1,5 мл водного раствора формальдегида и реакционную смесь гидрировали. После фильтрации и выпаривания растворителя полученный остаток растворяли в воде, доводили рН до 2 и дважды экстрагировали диэтиловым эфиром и дополнительно несколько раз дихлорметаном. Доводили рН водной фазы до 9-10 и дважды экстрагировали дихлорметаном. Органические экстракты сушили над сульфатом натрия и упаривали досуха. Осадок кристаллизовался в виде гидрохлоридной соли с получением 0,5 г желаемого продукта, который характеризовали масс-спектрометрией с бомбардировкой быстрыми атомами ([М⁺H]⁺=625).

Соединения, приведенные в таблице 1, были получены способами, описанными в примерах 1-4. Там, где на соединения ссылаются как на "изомер 1" или "изомер 2", изомер 1 означает диастереомер с более коротким временем удерживания в системе при анализе ВЭЖХ с обращенной фазой. Результаты масс-спектрометрии с бомбардировкой быстрыми атомами для ряда выбранных соединений приведены в таблице 2.

Пример 5. Оценка биологической активности
In vitro методика
Цитотоксичность измеряли, используя стандартную методологию для сросшихся клеточных линий, например, тетразолиевый анализ для микрокультуры (МТТ). Детали этого анализа были опубликованы (Alley, M.C. et al. Cancer Research 48: 589-601, (1988)). Для приготовления культур для титрования на планшетах использовали экспоненциально растущие культуры клеток НТ-29 рака ободочной кишки. Клетки засевали по 5000-20000 в ячейку 96-луночного планшета (в 150 мл среды) и выращивали в течение ночи при 37^oС. Добавляли исследуемые соединения в 10-кратных разведениях, варьируемых от 10^-4 М до 10^-10 М. Затем клетки инкубировали в течение 48 часов. Для определения числа жизнеспособных клеток в каждой лунке добавляли краситель МТТ (50 мл раствора бромида 3-(4,5-диметилтиазол-2-ил)-2,5-дифенилтетразолия в солевом растворе с концентрацией 3 мг/мл). Эту смесь инкубировали 5 часов при 37^oС и затем добавляли в каждую лунку 50 мл 25%-ного додецилсульфата натрия, рН 2. После инкубирования в течение ночи определяли поглощение в каждой лунке при 550 нм, используя приспособление для отсчета, применяемое в ELISA-тесте. Величины средних стандартных отклонений данных от продублированных лунок рассчитывали, используя формулу % О/К (% жизнеспособных клеток обработанных/контроль). Концентрация исследуемого соединения, которая дает О/К в 50% ингибирования роста, была обозначена как ИК₅₀.

Таблица 3 представляет значения MK₅₀, определенные в испытании с НТ-29 для ряда соединений по изобретению.

In vivo методика
Соединения данного изобретения могут быть далее исследованы на in vivo активность в любом из различных доклинических испытаний, которые свидетельствуют о клинической применимости. Такие опыты проводят с безволосыми мышами, которым была трансплантирована ("ксенотрансплантирована") опухолевая ткань, предпочтительно от человека, что хорошо известно в данной области. Исследуемые соединения оцениваются с точки зрения их противоопухолевой эффективности после введения мышам с ксенотрансплантатом.

Более конкретно, опухоли человека, выросшие у безволосых мышей с врожденным отсутствием вилочковой железы, могут быть трансплантированы новым реципиентным животным при использовании фрагментов опухоли массой примерно 50 мг. День трансплантации обозначается как день 0. Через 6-10 дней мышей подвергают действию исследуемых соединений, которые вводят в виде внутривенной или внутрибрюшинной инъекции группам из 5-10 мышей для каждой дозы. Соединения вводят ежедневно в течение 5 дней, 10 дней или 15 дней в дозах от 10-100 мг/кг массы тела. Дважды в неделю измеряют диаметр опухолей и массы тела. Массы опухолей рассчитывают, используя диаметры, измеренные циркулем Вернье, по формуле:
(длина х ширина²)/2 = мг массы опухоли
Средние массы опухолей затем рассчитывают для каждой обработанной группы, и величины О/К определяют для каждой группы по отношению к необработанным контрольным опухолям.

Соединения, представленные здесь в качестве примеров, соответствуют последовательностей: поcл. 1: соединения 1-4, 7, 9, 10, 12-19, 22-44, 46, 47, 49, 50, 54-59, 61-65, 67-108, 119-142, 144, 145, 147, 148, 150, 151, 153, 154, 156, 157, 159, 160, 162, 163, 165, 166, 168, 169, 171, 172, 174, 175; поcл. 2: соединения 5, 6, 8, 20, 45, 48, 51-53, 60, 66, 109-118, 143, 146, 149, 152, 155, 158, 161, 167, 170, 173; посл. 3: соединение 11; посл. 4: соединение 21.

РАВНОЦЕННЫЕ ЗАМЕНИТЕЛИ
Специалисты в данной области признают или будут в состоянии убедиться, что для определенных вариантов осуществления описанного здесь изобретения достаточно использовать не больше равноценных методов экспериментирования, чем в установившейся практике экспериментирования. Подразумевается, что такие равноценные заменители включены в рамки следующих далее пунктов формулы изобретения.

Изобретение относится к производным доластатина 15 общей формулы (I) А-В-D-E-F(G)_r-(K)_s-L, где А, В, D, E, F, G и К являются остатками α-аминокислот и s и r являются каждый независимо 0 или 1. L является одновалентным радикалом, таким как, например, аминогруппа, N-замещенная аминогруппа, β-гидроксиламиногруппа, гидразидогруппа, алкоксигруппа, тиоалкоксигруппа, аминоксигруппа или оксиматогруппа; кроме того, изобретение также включает способ лечения рака у млекопитающего, например у человека, заключающийся во введении млекопитающему эффективного количества соединения формулы I. 4 с. и 35 з.п.ф-лы, 3 табл.

1. Соединение формулы
А-В-D-E-F(G)_r-(K)_s-L,
где А означает производное пролина формулы II_a

где n_a является числом от 0 до 3;
R_a означает водород или незамещенный или замещенный фтором С₁-С₃-алкил с прямой или разветвленной цепью, или циклический;
R_a ¹ означает водород, С₁-С₃-алкил, фенил или замещенный фенил; или R_a и R_a ¹ вместе образуют пропиленовый мостик;
R_a ², R_a ³, R_a ⁴ и R_a ⁵ означают каждый независимо водород или алкил;
или производное α-аминокислоты формулы III_a

где R_a означает водород или незамещенный или замещенный фтором С₁-С₃-алкил;
R_a ¹ означает С₁-С₄-алкил;
R_a ⁶ означает алкил, замещенный алкил, алкенил, фенил или замещенный фенил;
или R_a ¹ является алкильной группой и R_a ⁶ является С₁-С₆-алкилом, циклоалкилметилом, бензилом или замещенным бензилом;
R_a ⁷ является водородом или алкилом,
или производное α-аминокислоты формулы IV_a

где m_a означает 1 или 2;
R_a ⁷ означает водород или алкил;
R_a означает водород или незамещенный или замещенный фтором алкил,
или производное α-аминокислоты формулы V_а

где R_a ⁷ является водородом или алкилом;
R_a является водородом или незамещенным или замещенным фтором алкилом;
или производное α-аминокислоты формулы VI_a

где R_a является водородом или незамещенным или замещенным фтором алкилом;
R_a ¹ является водородом, алкилом, фенилом или замещенным фенилом;
или R_a и R_a ¹ вместе образуют пропиленовый мостик;
Х_а является гидрокси, алкокси или фтором,
или производное α-аминокислоты формулы VII_a

где R_a является водородом или незамещенным или замещенным фтором алкилом;
R_a ¹ является водородом, алкилом, фенилом или замещенным фенилом;
или R_a и R_a ¹ вместе образуют пропиленовый мостик;
R_a ², R_a ³, R_a ⁴ и R_a ⁵ являются каждый независимо водородом или алкилом,
или остаток -аминокислоты формулы VIII_a

где R_a является водородом или незамещенным или замещенным фтором алкилом,
или производное 2-азабицикло[2.2.1] гептан-3-карбоновой кислоты формулы IX_а

где 3-карбонильный остаток находится в эндо- или экзоположении;
Z_a означает простую связь или двойную связь;
R_a является водородом или незамещенным или замещенным фтором алкилом,
или остаток α-аминокислоты формулы Х_а

где n_a означает 1, 2 или 3;
R_a ⁷ означает водород или алкил;
R_a является водородом, незамещенным алкилом или замещенным фтором алкилом;
В означает валильный, изолейцильный, алло-изолейцильный, норвалильный, 2-трет-бутилглицильный или 2-этилглицильный остаток,
или остаток α-аминокислоты формулы II_b

где R_b ¹ является водородом;
R_b ² является алкилом или алкенилом;
или R_b ¹ и R_b ² вместе образуют изопропилиденовую группу;
D означает N-алкилвалильный, N-алкил-2-этилглицильный, N-алкил-2-трет-бутилглицильный, N-алкилнорлейцильный, N-алкилизолейцильный, N-алкил-алло-изолейцильные или N-алкилнорвалильный остаток,
или остаток α-аминокислоты формулы II_d

где R_d является водородом или незамещенным или замещенным фтором алкилом;
R_d ¹ является водородом;
R_d ² является алкилом, замещенным алкилом или алкенилом;
или R_d ¹ и R_d ² вместе образуют изопропилиденовую группу,
или остаток α-аминокислоты формулы III_d

где n_d означает 1 или 2;
R_d ³ является водородом, алкилом или замещенным фтором алкилом;
Х_d является водородом;
или n_d означает 1 и Х_d означает фтор, гидрокси, метокси или этокси;
Е означает пролильный, тиазолидинил-4-карбонильный, гомопролильный или гидроксипролильный остаток,
или остаток циклической -аминокарбоновой кислоты формулы II_e

где n_e означает 0, 1 или 2;
R_e ¹ означает водород или незамещенный или замещенный фтором алкил;
R_e ² и R_e ³ означают каждый независимо водород или алкил;
R_e ⁴ означает водород, гидрокси или алкокси;
R_e ⁵ означает водород или фтор;
или n_e означает 1 и R_e ³ и R_e ⁴ вместе образуют двойную связь; или n_e означает 1 и R_e ⁴ и R_e ⁵ вместе образуют двухвалентный радикал в виде связанного двойной связью атома кислорода; или n_e означает 1 или 2 и R_e ¹ и R_e ² вместе образуют двойную связь,
или остаток аминоциклопентанкарбоновой кислоты формулы III_е

где R_e является алкилом и R_e ¹ является водородом или незамещенным или замещенным фтором алкилом;
F означает пролильный, тиазолидинил-4-карбонильный, гомопролильный или гидроксипролильный остаток,
или остаток α-аминокислоты формулы II_f

где n_f означает 0, 1 или 2;
R_f ¹ является водородом или незамещенным или замещенным фтором алкилом;
R_f ² и R_f ³ являются каждый независимо водородом или метилом;
R_f ⁴ является водородом, гидрокси, алкокси или фтором;
R_f ⁵ является водородом или фтором;
или n_f означает 1 и R_f ³ и R_f ⁴ вместе образуют двойную связь; или n_f означает 1 и R_f ⁴ и R_f ⁵ вместе образуют двухвалентный радикал в виде связанного двойной связью атома кислорода; или n_f означает 1 или 2 и R_f ¹ и R_f ² вместе образуют двойную связь,
или остаток 2- или 3-аминоциклопентанкарбоновой кислоты формулы III_f

где R_f является алкилом и R_f ¹ является водородом или незамещенным или замещенным фтором алкилом; или N-алкилглицильным или N-алкилаланильным остатком;
G означает остаток α-аминокислоты формулы II_g

где R_g ¹ является водородом или алкилом и R_g ² является водородом, алкилом, арилалкилом, гетероарилалкилом, фенилом или замещенным фенилом; или R_g ¹ и R_g ² вместе с α-углеродным атомом образуют С₅-С₆ кольцо или бензоконденсированное С₅ кольцо;
К является α-аминокислотой формулы II_k

где R_k ¹ является водородом или алкилом;
R_k ² является водородом, алкилом, арилалкилом, гетероарилалкилом, фенилом или замещенным фенилом; или R_k ¹ и R_k ² вместе с α-углеродным атомом образуют циклопентановое кольцо или бензоконденсированное циклопентановое кольцо;
L является замещенной или незамещенной амино, гидразидо, аминокси или оксиматогруппой;
r и s означают независимо 0 или 1. 2. Соединение по п. 1, где А является производным пролина формулы II_a; R_a означает водород, метил, этил, н-пропил, изопропил, циклопропил, 2-фторэтил, 2,2,2-трифторэтил, 1-метил-2-фторэтил или 1-фторметил-2-фторэтил; R_a ¹ означает водород, метил, этил, пропил, фенил или замещенный фенил, где заместители фенила включат одну или несколько алкильных, алкокси, трифторметильных или нитрогрупп; или R_a и R_a ¹ вместе образуют пропиленовый мостик и R_a ², R_a ³, R_a ⁴ и R_a ⁵ означают каждый независимо водород или метил. 3. Соединение по п. 1, где А является остатком α-аминокислоты формулы III_a, где R_a означает водород, метил, этил, н-пропил, изопропил, циклопропил, 2-фторэтил, 2,2,2-трифторэтил, 1-метил-2-фторэтил или 1-фторметил-2-фторэтил; R_a ¹ означает С₁-С₃-алкильную группу; R_a ⁶ означает метоксиметил,
1-метоксиэтил, винил, 1-метилвинил, 1-трифторметилвинил, 1-трифторметилэтил, 1-трифторметил-2,2,2-трифторэтил, 1,1-диметилгидроксиметил, фенил или замещенный фенил, где заместители фенила включают один или несколько атомов галогена или одну или несколько С₁-С₄-алкильных, метокси, трифторметильных или нитрогрупп, или R_a ¹ означает С₁-С₃-алкил и R_a ⁶ означает С₁-С₆-алкил, циклоалкилметил, бензил или замещенный бензил, где заместители бензила включают один или несколько атомов галогена, или одну или несколько С₁-С₄-алкильных, метокси, этокси, трифторметильных или нитрогрупп; и R_a ⁷ означает метил, этил или изопропил. 4. Соединение по п. 1, где А является остатком α-аминокислоты формулы IV_a, где R_a ⁷ означает метил, этил или изопропил и R_a означает водород, метил, этил, н-пропил, изопропил, циклопропил, 2-фторэтил, 2.2.2-трифторэтил, 1-метил-2-фторэтил или 1-фторметил-2-фторэтил. 5. Соединение по п. 1, где А является остатком α-аминокислоты формулы V_a, где R_a ⁷ означает метил, этил или изопропил и R_a означает водород, метил, этил, н-пропил, изопропил, циклопропил, 2-фторэтил, 2,2,2-трифторэтил, 1-метил-2-фторэтил или 1-фторметил-2-фторэтил. 6. Соединение по п. 1, где А является остатком α-аминокислоты формулы VI_a, где R_a означает водород, метил, этил, н-пропил, изопропил, циклопропил, 2-фторэтил, 2,2,2-трифторэтил, 1-метил-2-фторэтил или 1-фторметил-2-фторэтил; R_a ¹ означает водород, метил, этил, пропил, фенил или замещенный фенил, где заместители фенила включают одну или несколько алкильных, алкокси, трифторметильных или нитрогрупп; или R_a и R_a ¹ вместе образуют пропиленовый мостик; и Х_а означает гидрокси, метокси или этоксигруппу, или атом фтора. 7. Соединение по п. 1, где А является остатком -аминокислоты формулы VII_a, где R_a означает водород, метил, этил, н-пропил, изопропил, циклопропил, 2-фторэтил, 2,2,2-трифторэтил, 1-метил-2-фторэтил или 1-фторметил-2-фторэтил; R_a ¹ означает водород, метил, этил, пропил, фенил или замещенный фенил, где заместители фенила включают одну или несколько алкильных, алкокси, трифторметильных или нитрогрупп; или R_a и R_a ¹ вместе образуют пропиленовый мостик; и R_a ², R_a ³, R_a ⁴ и R_a ⁵ означают каждый независимо водород или метил. 8. Соединение по п. 1, где А является остатком α-аминокислоты формулы VIII_а, где R_a означает водород, метил, этил, н-пропил, изопропил, циклопропил, 2-фторэтил, 2,2,2-трифторэтил, 1-метил-2-фторэтил или 1-фторметил-2-фторэтил. 9. Соединение по п. 1, где А является остатком α-аминокислоты формулы IX_a, где R_a означает водород, метил, этил, н-пропил, изопропил, циклопропил, 2-фторэтил, 2,2,2-трифторэтил, 1-метил-2-фторэтил или 1-фторметил-2-фторэтил. 10. Соединение по п. 1, где А является остатком α-аминокислоты формулы Х_а, где R_a ⁷ означает метил, этил или изопропил и R_a означает водород, метил, этил, н-пропил, изопропил, циклопропил, 2-фторэтил, 2,2,2-трифторэтил, 1-метил-2-фторэтил или 1-фторметил-2-фторэтил. 11. Соединение по п. 1, где В означает остаток соединения формулы II_b, где R_b ¹ означает водород и R_b ² означает циклопропил, н-бутил, изобутил, трет-бутил, метоксиметил, 1-метоксиэтил или 1-метилвинил. 12. Соединение по п. 1, где D означает N-алкилвалильный остаток, N-алкил-2-этилглицильный остаток, N-алкил-2-трет-бутилглицильный остаток, N-алкилнорлейцильный остаток, N-алкилизолейцильный остаток, N-алкил-алло-изолейцильный остаток или N-алкилнорвалильный остаток, где N - алкильная группа является предпочтительно метилом или этилом. 13. Соединение по п. 1, где D означает остаток α-аминокислоты формулы II_d, R_d ¹ является водородом и R_d ² означает циклопропил, метоксиметил, 1-метоксиэтил или 1-метилвинил. 14. Соединение по п. 1, где D означает остаток α-аминокислоты формулы III_d, где R_d ³ означает водород, метил, этил, н-пропил, изопропил, циклопропил, 2-фторэтил, 2,2,2-трифторэтил, 1-метил-2-фторэтил или 1-фторметил-2-фторэтил; и Х_d означает атом водорода; или n_d означает 1 и X_d означает атом фтора, или гидрокси, метокси или этоксигруппу. 15. Соединение по п. 1, где Е означает остаток α-аминокислоты формулы II_e и R_e ¹ означает водород, метил, этил, н-пропил, изопропил, циклопропил, 2-фторэтил, 2,2,2-трифторэтил, 1-метил-2-фторэтил или 1-фторметил-2-фторэтил; R_e ² и R_e ³ являются каждый независимо водородом или метилом; R_e ⁴ означает атом водорода или гидрокси, метокси или этоксигруппу и R_e ⁵ означает водород или фтор; или n_e означает 1 и R_e ³ и R_e ⁴ вместе образуют двойную связь; или n_e означает 1 и R_e ⁴ и R_e ⁵ вместе представляют двухвалентный радикал в виде связанного двойной связью атома кислорода, где n_e означает 1 или 2 и R_e ¹ и R_e ² вместе образуют двойную связь. 16. Соединение по п. 1, где E является остатком аминоциклопентанкарбоновой кислоты формулы III_e, где R_e означает метильную или этильную группу и R_e ¹ означает водород или метил, этил, н-пропил, изопропил, циклопропил, 2-фторэтил, 2,2,2-трифторэтил, 1-метил-2-фторэтил или 1-фторметил-2-фторэтил. 17. Соединение по п. 1, где F является остатком α-аминокислоты формулы II_f, где R_f ¹ означает атом водорода или метил, этил, н-пропил, изопропил, циклопропил, 2-фторэтил, 2,2,2-трифторэтил, 1-метил-2-фторэтил или 1-фторметил-2-фторэтил, R_f ² означает атом водорода или метильную группу; R_f ³ является атомом водорода или метильной группой; R_f ⁴ означает атом водорода, гидрокси, метокси, этокси или атом фтора; R_f ⁵ означает атом водорода или атом фтора; или n_f означает 1 и R_f ³ и R_f ⁴ вместе образуют двойную связь; или n_f означает 1 и R_f ⁴ и R_f ⁵ вместе образуют радикал в виде связанного двойной связью атома кислорода; или n_f означает 1 или 2 или R_f ¹ и R_f ² вместе образуют двойную связь. 18. Соединение по п. 1, где F является остатком 2- или 3-аминоциклопентанкарбоновой кислоты формулы III_f, где R_f означает метил или этил и R_f ¹ означает водород, метил, этил, н-пропил, изопропил, циклопропил, 2-фторэтил, 2,2,2-трифторэтил, 1-метил-2-фторэтил или 1-фторметил-2-фторэтил. 19. Соединение по п. 1, где F означает N-алкилглицильный остаток или N-алкилаланильный остаток и N-алкильная группа является метилом или этилом. 20. Соединение по п. 1, где G является остатком α-аминокислоты формулы II_g, где R_g ¹ означает водород, метил, этил или н-пропил и R_g ² означает водород, этил, изопропил, трет-бутил, изобутил, 2-метилпропил, циклогексилметил, бензил, тиазолил-2-метил, пиридил-2-метил, н-бутил, 2,2-диметилпропил, нефтилметил, н-пропил, фенил или замещенный фенил, где заместителями фенила являются один или несколько атомов галогена, одна или несколько С₁-С₄-алкильных, метокси, этокси, нитро или трифторметильных групп или диоксометиленовая группа. 21. Соединение по п. 1, где К является α-аминокислотой формулы II_k, где R_k ¹ означает водород, метил, этил или н-пропил и R_k ² означает водород, этил, изопропил, трет-бутил, изобутил, 2-метилпропил, циклогексилметил, бензил, тиазолил-2-метил, пиридил-2-метил, н-бутил, 2,2-диметилпропил, нафтилметил, н-пропил, фенил или замещенный фенил, где заместители фенила включают один или несколько атомов галогена, или одну или несколько С₁-С₄-алкильных, метокси, этокси, нитро или трифторметильных групп или диоксометиленовую группу; или R_k ¹ и R_k ² вместе с α-углеродным атомом образуют циклопентановое кольцо или бензоконденсированное циклопентановое кольцо. 22. Соединение по п. 1, где L является аминогруппой формулы II₁

где R₁ ¹ означает атом водорода, насыщенную или ненасыщенную С₁-С₁₈-алкоксигруппу с прямой или разветвленной цепью, замещенную или незамещенную арилоксигруппу, замещенную или незамещенную арил-С₁-С₆-алкоксигруппу, замещенную или незамещенную арилокси-С₁-С₆-алкоксигруппу, где заместители арила включают один или несколько атомов галогена или одну или несколько С₁-С₄-алкильных, метокси, этокси, трифторметильных, диоксометиленовых или нитрогрупп; или гетероарил-С₁-С₆-алкоксигруппу;
R₁ ² означает атом водорода, С₁-С₁₈-алкильную группу с прямой или разветвленной цепью, С₁-С₁₈-алкенильную группу с прямой или разветвленной цепью, С₃-С₁₀-циклоалкильную группу, арильную группу или замещенную арильную группу, где заместители арила включают один или несколько атомов галогена или одну или несколько С₁-С₄-алкильных, метокси, этокси, трифторметильных, циано или нитрогрупп, С₁-С₇-алкоксикарбонильную группу, диоксиметиленовую группу, С₁-С₇-алкилсульфонильную группу, аминогруппу или С₁-С₆-диалкиламиногруппу; гетероарильную группу или замещенную гетероарильную группу, являющуюся производным имидазола, изоксазола, изотиазола, тиазола, оксазола, пиразола, тиофена, фурана, пиррола, 1,2,4- или 1,2,3-триазола, пиразона, индола, бензофурана, бензотиофена, изоиндола, индазола, хинолина, пиридазина, пиримидина, бензимидазола, бензопирана, бензотиазола, оксадиазола, тиадиазола или пиридина, где заместители гетероарила включают одну или несколько С₁-С₆-алкильных, гидроксильных или фенильных групп. 23. Соединение по п. 22, где R₁ ² соответствует формуле II_r

где а₁ означает 0, 1, 2, 3, 4 или 5;
R₁ ³ означает метил, этил, н-пропил или изопропил;
R₁ ⁴ является насыщенной или частично ненасыщенной карбоциклической системой, включающей от около 3 до около 10 углеродных атомов, арильной группой или замещенной арильной группой, где заместители арила включают один или несколько атомов галогена или одну или несколько С₁-С₄-алкильных, метокси, этокси, трифторметильных, циано или нитрогрупп, С₁-С₇-алкоксикарбонильную группу, диоксиметиленовую группу, С₁-С₇-алкилсульфонильную группу, аминогруппу или С₁-С₆-диалкиламиногруппу; гетероарильной группой или замещенной гетероарильной группой, производной от имидазола, изоксазола, изотиазола, тиазола, оксазола, пиразола, тиофена, фурана, пиррола, 1,2,4- или 1,2,3-триазола, пиразина, индола, бензофурана, бензотиофена, изоиндола, индазола, хинолина, пиридазина, пиримидина, бензимидазола, бензопирана, бензотиазола, оксадиазола, тиадиазола или пиридина, где заместители гетероарила включают одну или несколько С₁-С₆-алкильных, гидроксильных или фенильных групп. 24. Соединение по п. 22, где R₁ ² соответствует формуле III_r
-(СН₂)₂-W₁-R₁ ⁵ (III_r)
где W₁ означает N(R₁ ⁶)-группу, атом кислорода или атом серы;
R₁ ⁵ и R₁ ⁶ означают каждый независимо атом водорода или С₁-С₄-алкильную, С₃-С₇-циклоалькильную, арильную, арилметильную, замещенную арильную или замещенную арилметильную группу, где заместители арила включают один или несколько атомов галогена или одну или несколько С₁-С₄-алкильных групп, метокси, этокси, трифторметильных, циано или нитрогрупп, С₁-С₇-алкоксикарбонильную группу, диоксиметиленовую группу, С₁-С₇-алкилсульфонильную группу, аминогруппу или С₁-С₆-диалкиламиногруппу; или R₁ ⁶ означает С₁-С₁₈-алканоильную группу или бензоильную группу. 25. Соединение по п. 22, где R₁ ² является одновалентным радикалом формулы IV_r
-(СН₂)_b1-Z₁ (IV_r)
где b₁ означает 2, 3 или 4;
Z₁ означает формильную, аминокарбонильную, гидразинокарбонильную, циклическую ацетальную, циклическую тиоацетальную, ациклическую ацетальную или ациклическую тиоацетальную группу. 26. Соединение по п. 22, где R₁ ² имеет формулу V_r

где b₁ означает 2, 3 или 4;
R₁ ⁷ означает полигликольную группу формулы:
-О-(СН₂СН₂О)_d1-СH₃,
где d₁ находится между около 2 и около 4 или между около 40 и около 90. 27. Соединение по п. 22, где R₁ ² имеет формулу VI_r

где R₁ ⁸ означает атом водорода или С₁-С₄-алканоильную, С₁-С₄-алкильную, бензоильную или бензильную группу. 28. Соединение по п. 1, где L является β-гидроксиламиногруппой формулы III₁

где R₁ ⁹ является атомом водорода или С₁-С₆-алкильной группой, арильной группой или замещенной арильной группой, где заместители арила включают один или несколько атомов галогена или одну или несколько С₁-С₄-алкильных групп, метокси, этокси, трифторметильных, циано или нитрогрупп, С₁-С₇-алкоксикарбонильную группу, диоксиметиленовую группу, С₁-С₇-алкилсульфонильную группу, аминогруппу или С₁-С₆-диалкиламиногруппу;
R₁ ¹⁰ означает атом водорода, метильную группу или фенильную группу. 29. Соединение по п. 1, где, как минимум, один из индексов r и s означает 1, и L является аминогруппой формулы IV₁

где R₁ ² и R₁ ⁴ означают каждый независимо водород или С₁-С₁₀-алкил или R₁ ², R₁ ⁴ и α-углеродный атом образуют вместе С₅-С₆-карбоцикл. 30. Соединение по п. 1, где L является гидразидогруппой формулы V₁

где R₁ ¹² означает атом водорода, С₁-С₈-алкильную группу с прямой или разветвленной цепью, С₃-С₈-циклоалкильную группу, С₃-С₈-циклоалкил-С₁-С₄-алкильную группу, арильную группу, арил-С₁-С₄-алкильную группу или замещенную арильную или арил-С₁-С₄-алкильную группу, где заместители арила включают один или несколько атомов галогена или одну или несколько метокси, этокси, трифторметильных, диоксиметиленовых, нитро, циано, С₁-С₇-алкоксикарбонильных, С₁-С₇-алкилсульфонильных, амино или С₁-С₇-диалкиламиногрупп; или гетероарил-С₁-С₄-алкильную группу, где гетероарильная группа является производным имидазола, пиррола, тиофена, фурана, тиазола, оксазола, пиразола, 1,2,4- или 1,2,3-триазола, оксадиазола, тиадиазола, изоксазола, изотиазола, пиразина, пиридазина, пиримидина, пиридина, бензофурана, бензотиофена, бензимидазола, бензотиазола, бензопирана, индола, изоиндола, индазола или хинолина и заместители гетероарила включают одну или несколько С₁-С₆-алкильных, гидроксильных или фенильных групп;
R₁ ¹¹ означает атом водорода; или r означает 1, s означает 1 или оба r и s означают 1 и R₁ ¹¹ является С₁-С₈-алкильной группой с прямой или разветвленной цепью, С₃-С₈-циклоакильной группой, С₃-С₈-циклоалкил-С₁-С₄-алкильной группой, арил-С₁-С₄-алкильной группой, арильной группой или замещенной арил-С₁-С₄-алкильной или арильной группой, где заместители арила включат один или несколько атомов галогена или одну или несколько С₁-С₄-алкильных групп, метокси, этокси, трифторметильных, циано или нитрогрупп, С₁-С₇-алкоксикарбонильную группу, диоксиметиленовую группу, С₁-С₇-алкилсульфонильную группу, аминогруппу или С₁-С₆-диалкиламиногруппу; гетероарильной группой, гетероарил-С₁-С₄-алкильной группой или замещенной гетероарильной или гетероарил-С₁-С₄-алкильной группой, производными от имидазола, изоксазола, изотиазола, тиазола, оксазола, пиразола, тиофена, фурана, пиррола, 1,2,4- или 1,2,3-триазола, пиразина, индола, бензофурана, бензотиофена, изоиндола, индазола, хинолина, пиридазина, пиримидина, бензимидазола, бензопирана, бензотиазола, оксадиазола, тиадиазола или пиридина, где заместители гетероарила включают одну или несколько С₁-С₆-алкильных, гидроксильных или фенильных групп; или R₁ ¹¹ и R₁ ¹² вместе образуют пропиленовый мостик или бутиленовый мостик. 31. Соединение по п. 1, где L означает одновалентный радикал формулы
-W-R₁ ¹³,
где W является кислородом или серой;
R₁ ¹³ означает С₃-С₁₀-циклоалкил, С₂-С₁₆-алкенилметил с прямой или разветвленной цепью, С₁-С₁₆-алкил или замещенную галогеном С₁-С₁₆-алкильную группу или R₁ ¹³ является одновалентным радикалом формулы -(СН₂)_е-R₁ ¹⁴, где е означает 1, 2 или 3 и R₁ ¹⁴ является насыщенной или частично ненасыщенной С₃-С₁₀-карбоциклической группой; или R₁ ¹³ является одновалентным радикалом формулы
-[(CH₂-CH= C(CH₃)-CH₂] _f-H, где f означает 1, 2, 3 или 4; или R₁ ¹³ является одновалентным радикалом формулы -[СН₂-СН₂-О] _g-СН₃ и g означает 1, 2, 3, 4 или 5; или R₁ ¹³ является одновалентным радикалом формулы -(СН₂)_h-Х, где h означает 0, 1, 2 или 3, Х является арильной группой или замещенной арильной группой, в которой заместители арила включают один или несколько атомов галогена или одну или несколько С₁-С₄-алкильных групп, метокси, этокси, трифторметильных, циано или нитрогрупп, С₁-С₇-алкоксикарбонильную группу, диоксиметиленовую группу, С₁-С₇-алкилсульфонильную группу, аминогруппу или С₁-С₆-диалкиламиногруппу; или Х является гетероарильной группой или замещенной гетероарильной группой, производной от имидазола, изоксазола, изотиазола, тиазола, оксазола, пиразола, тиофена, фурана, пиррола, 1,2,4- или 1,2,3-триазола, пиразина, индола, бензофурана, бензотиофена, изоиндола, индазола, хинолина, пиридазина, пиримидина, бензимидазола, бензопирана, бензотиазола, оксадиазола, тиадиазола или пиридина, где заместители гетероарила включают одну или несколько С₁-С₆-алкильных, гидроксильных или фенильных групп, арил-С₁-С₄-алкильную группу или гетероарил-С₁-С₄-алкильную группу; или R₁ ¹³ означает одновалентный радикал формулы -(СН₂)_b-W₁-R₁ ⁵, где b означает целое число, W₁ является атомом кислорода, атомом серы или NR₁ ⁶-группой, b означает 2, 3 или 4; R₁ ⁵ является насыщенной или частично ненасыщенной карбоциклической системой, которая содержит от около 3 до около 10 углеродных атомов, арильной или замещенной арильной группой, где заместители арила включают один или несколько атомов галогена или одну или несколько С₁-С₄-алкильных групп, метокси, этокси, трифторметильных, циано или нитрогрупп, С₁-С₇-алкоксикарбонильную группу, диоксиметиленовую группу, С₁-С₇-алкилсульфонильную группу, аминогруппу или С₁-С₆-диалкиламиногруппу; гетероарильной группой или замещенной гетероарильной группой, производной от имидазола, изоксазола, изотиазола, тиазола, оксазола, пиразола, тиофена, фурана, пиррола, 1,2,4- или 1,2,3-триазола, пиразина, индола, бензофурана, бензотиофена, изоиндола, индазола, хинолина, пиридазина, пиримидина, бензимидазола, бензопирана, бензотиазола, оксадиазола, тиадиазола или пиридина, где заместители гетероарила включают одну или несколько С₁-С₆-алкильных, гидроксильных или фенильных групп; R₁ ⁶ означает атом водорода или С₁-С₄-алкильную, С₃-С₇-циклоалкильную, С₁-С₁₈-алканоильную, бензоильную, арильную или арилметильную группу или замещенную арильную или арилметильную группу, где заместители арила включают один или несколько атомов галогена или одну или несколько С₁-С₄-алкильных групп, метокси, этокси, трифторметильных, циано или нитрогрупп, С₁-С₇-алкоксикарбонильную группу, диоксиметиленовую группу, С₁-С₇-алкилсульфонильную группу, аминогруппу или С₁-С₆-диалкиламиногруппу. 32. Соединение по п. 1, где L является аминоксигруппой формулы -О-N(R₁ ¹⁵)(R₁ ¹⁶), где R₁ ¹⁵ и R₁ ¹⁶ означают каждый независимо атом водорода, С₁-С₈-алкильную группу с прямой или разветвленной цепью, замещенную галогеном С₁-С₈-алкильную группу с прямой или разветвленной цепью, С₃-С₈-циклоалкильную группу, С₃-С₈-циклоалкил-С₁-С₄-алкильную группу, арильную группу, арил-С₁-С₄-алкильную группу или замещенную арильную или арил-С₁-С₄-алкильную группу, где заместители арила включают один или несколько атомов галогена или одну или несколько С₁-С₄-алкильных групп, метокси, этокси, трифторметильных, циано или нитрогрупп, С₁-С₇-алкоксикарбонильную группу, диоксиметиленовую группу, С₁-С₇-алкилсульфонильную группу, аминогруппу или С₁-C₆-диалкиламиногруппу; гетероарильную группу, гетероарил-С₁-С₄-алкильную группу или замещенную гетероарильную или гетероарил-С₁-С₄-алкильную группу, которые являются производными имидазола, изоаксазола, изотиазола, тиазола, оксазола, пиразола, тиофена, фурана, пиррола, 1,2,4- или 1,2,3-триазола, пиразина, индола, бензофурана, бензотиофена, изоиндола, индазола, хинолина, пиридазина, пиримидина, бензимидазола, бензопирана, бензотиазола, оксадиазола, тиадиазола или пиридина, где заместители гетероарила включают одну или несколько С₁-С₆-алкильных, гидроксильных или фенильных групп; или R₁ ¹⁵ и R₁ ¹⁶ вместе с атомом азота образуют гетероциклическую структуру, включающую 5, 6 или 7 атомов. 33. Соединение по п. 1, где L является оксиматогруппой формулы -О-N= С(R₁ ¹⁵)(R₁ ¹⁶), где R₁ ¹⁵ и R₁ ¹⁶ означают каждый независимо атом водорода, С₁-С₈-алкильную группу с прямой или разветвленной цепью, замещенную галогеном С₁-С₈-алкильную группу с прямой или разветвленной цепью, С₃-С₈-циклоалкильную группу, С₃-С₈-циклоалкил-С₁-С₄-алкильную группу, арильную группу, арил-С₁-С₄-алкильную группу или замещенную арильную или арил-С₁-С₄-алкильную группу, где заместители арила включают один или несколько атомов галогена или одну или несколько С₁-С₄-алкильных групп, метокси, этокси, трифторметильных, циано или нитрогрупп, С₁-С₇-алкоксикарбонильную группу, диоксиметиленовую группу, С₁-С₇-алкилсульфонильную группу, аминогруппу или С₁-С₆-диалкиламиногруппу; гетероарильную группу или замещенную гетероарильную группу, производную имидазола, изоксазола, изотиазола, тиазола, оксазола, пиразола, тиофена, фурана, пиррола, 1,2,4- или 1,2,3-триазола, пиразина, индола, бензофурана, бензотиофена, изоиндола, индазола, хинолина, пиридазина, пиримидина, бензимидазола, бензопирана, бензотиазола, оксадиазола, тиадиазола или пиридина, где заместители гетероарила включают одну или несколько С₁-С₆-алкильных, гидроксильных или фенильных групп; или R₁ ¹⁵ и R₁ ¹⁶ вместе с атомом углерода образуют циклическую систему или циклическую систему, конденсированную с ароматическим кольцом. 34. Соединение по п. 33, где циклическая система выбрана из группы, состоящей из




35. Соединение по п. 1, где А означает производное аминокислоты, выбранное из группы, состоящей из N-алкил-D-пролила, N-алкил-L-пролила, N-алкил-D-пиперидин-2-карбонила, N-алкил-L-пиперидин-2-карбонила, N, N-диалкил-D-2-этил-2-фенилглицила и N, N-диалкил-L-2-этил-фенилглицила, где алкил означает метил, этил или изопропил; и В означает валил, изолейцил или 2-трет-бутил-L-глицил. 36. Соединение формулы
А-В-D-E-F-L,
где А является производным аминокислоты, выбранным из группы, в которую входят D-N-метилпиперидин-2-карбонил, L-N-метилпиперидин-2-карбонил, N, N-диметиламино-изобутирил, N-метил-L-пролил, N-метил-L-тиазолидин-4-карбонил, N, N-диметилглицил, L-пролил, L-пиперидин-2-карбонил, N-пропил-D-пиперидин-2-карбонил, D-пиперидин-2-карбонил, N-этил-D-пиперидин-2-карбонил, N-метил-[2,2,5,5-тетраметил] -L-тиазолидин-2-карбонил, N-изопропил-D-пиперидин-2-карбонил, N, N-диметил-2-циклопропилглицил, N, N-диметил-D-2-этил-2-фенилглицил, N, N-диметил-L-2-этил-2-фенилглицил, D-пролил, N-метил-D-пролил, N, N-диметил-2-(2-фторфенил)глицил, 1-аза-[3,3,0] бициклооктил-5-карбонил, N, N-диметил-2-[4-фтор] фенилглицил, N-метил-[2,2,5,5-тетраметил] тиазолидин-2-карбонил, 2-(R, S)-этил-2-фенилглицил, D, L-1-аминоиндан-1-карбонил, N, N-диметил-2-(R, S)-метил-2-фенилглицил, 2-[N, N-диметиламино] индан-2-карбонил, 5-[N, N-диметиламино] -5,6,7,8-тетрагидронафталин-5-карбонил, N-изопропил-2-(R, S)-этил-2-фенилглицил, 1-[N, N-диметиламино] индан-2-карбонил, N, N-диметил-2-пропил-2-фенилглицил, N, N-диметил-2-[4-метокси] фенилглицил, N-метил-3-гидрокси-D, L-валил, N, N-диметил-D, L-2-изопропил-2-фенилглицил, N-метилпиперидин-2-карбонил, N-метил-L-пролил, N-метил-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-1-карбонил, N-метилазетидин-2-карбонил, N-изопропилазетидин-2-карбонил, N, N-диметил-[O-метил] серил, N, N-диметил-[O-метил] треонил, N-метил-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-3-карбонил, 1-[N, N-диметиламино] циклогексил-1-карбонил, 1-[N, N-диметиламино] циклопентил-1-карбонил и 1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-3-карбонил;
В является остатком аминокислоты, выбранным из группы, состоящей из валила, изолейцила и 2-трет-бутилглицила;
D является остатком аминокислоты, выбранным из группы, в которую входят N-метилвалил, N-метилизолейцил и N-метил-L-2-трет-бутилглицил;
Е и F означают каждый независимо остаток аминокислоты, выбранный из группы, в которую входят пролил, тиапролил, гомопролил, гидроксипролил, 3,4-дидегидропролил, 4-фторпролил и 3-метилпролил;
L является алкоксигруппой или аминогруппой формулы R₁ ¹-N-R₁ ², где R₁ ¹ и R₁ ² независимо выбраны из группы, состоящей из водорода, алкокси, гидрокси, алкила и алкиларила. 37. Соединение формулы
А-В-D-E-F-L,
где А является производным аминокислоты, выбранным из группы, в которую входят D-N-метилпиперидин-2-карбонил, N-этил-D-пиперидин-2-карбонил, N-изопропил-D-пиперидин-2-карбонил, N, N-диметил-2-циклопропилглицил, N-метил-D-пропил, 1-аза-[3,3,0] -бициклооктил-5-карбонил, N-метил-[2,2,5,5-тетраметил] тиазолидин-2-карбонил, 2-(R, S)-этил-2-фенилглицил, D, L-1-аминоиндан-1-карбонил, N, N-диметил-2-(R, S)-метил-2-фенилглицил, 5-[N, N-диметиламино] -5,6,7,8-тетрагидронафталин-5-карбонил, 1-[N, N-диметиламино] -индан-2-карбонил, N, N-диметил-2-пропил-2-фенилглицил, N-метил-3-гидрокси-D, L-валил, N, N-диметил-D, L-2-изопропил-2-фенилглицил, N-метилпиперидин-2-карбонил, N-метил-D, L-пролил, N-метил-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-1-карбонил, N-этилазетидин-2-карбонил, N-изопропилазетидин-2-карбонил, N, N-диметил-[O-метил] серил, 1-[N, N-диметиламино] циклогексил-1-карбонил, N, N-диметил-D-2-этил-2-фенилглицил, N, N-диметил-L-2-этил-2-фенилглицил и 1-[N, N-диметиламино] циклопентил-1-карбонил;
В означает валил;
D означает N-метилвалил;
Е и F означают каждый пролил;
L является С₁-С₆-алкоксигруппой или аминогруппой формулы R₁ ¹-N-R₁ ², где R₁ ¹ и R₁ ² выбраны независимо из группы, состоящей из водорода, С₁-С₆-алкокси, гидрокси, С₁-С₁₀-алкила с прямой, или разветвленной цепью, или циклического и фенилалкила. 38. Способ лечения рака у млекопитающих, предусматривающий введение млекопитающему терапевтически эффективного количества соединения по п. 1. 39. Способ по п. 38, где млекопитающим является человек.