СПОСОБ СНИЖЕНИЯ РЕАКТОГЕННОСТИ ВАКЦИН И АНТИГЕНОВ Российский патент 2003 года по МПК A61K39/00 

Изобретение относится к медицине, в частности к иммунологии, и направлено на уменьшение побочных действий вакцин при сохранении их антигенных свойств и может быть использовано в вакцинологии.

В медицине вакцинация широко используется для создания иммунитета у населения. Во многом эффект от вакцинации зависит от полноты охвата прививками населения (особенно детского). Этому мешает реактогенность существующих вакцин, которые могут вызывать развитие иммунопатологических процессов, поэтому имеются многочисленные противопоказания, что сужает круг прививаемых и отражается на эпидемиологическом благополучии.

Чтобы избежать нежелательных реакций вакцинации, используют способы, направленные на получение высокоочищенных протективных антигенов и вакцин (Р.В. Петров, Р.М. Хаитов. Искусственные антигены и вакцины. М., 1988).

Эти способы многоэтапные и требуют сложных биотехнологических подходов.

В вакцинологии наиболее принятым методом снижения уровня реактогенности является использование сниженных доз вакцинных препаратов (АДС-М анатоксин) (Н.В. Медуницын. Вакцинология. М., 1999; Инструкция по применению АДС-М анатоксина, утвержденная МЗ РФ 15.04.98).

Однако при применении АДС в сниженных дозах достаточного антительного ответа с развитием полноценного иммунитета не всегда удается достигнуть. В связи с этим Комитет ВОЗ по некоторым вакцинам (дифтерия, столбняк) рекомендует использовать вакцины с нормальной дозой, но нежелательные реакции предупреждать фармакологическими средствами и проводить специальную подготовку детей с риском возникновения побочных реакций.

Целью предлагаемого способа является сохранение исходной антигенной активности вакцин и антигенов.

Решение поставленной задачи обеспечивается тем, что сниженные вакцинирующие дозы, полученные путем гомеопатического разведения и потенцированные до С 200, С 30, 1х, соединяют в соотношении 1:1:2.

Пример 1. Дифтерийно-столбнячный анатоксин.

Берут коммерческую АДС-вакцину 1 мл, из которой получают потенцированием по гомеопатическому методу ряд последовательных разведении вакцины 1х, С 30, С 200. Для получения одной вакцинирующей дозы берут 0,25 мл из разведения 1х, 0,125 мл из разведения С 30 и 0,125 мл из разведения С 200, которые смешивают и интенсивно встряхивают.

Животных (белых мышей) вакцинируют внутрибрюшинно двухкратно с интервалом в 14 дней в дозе 0,5 мл следующими тремя препаратами:
- препарат I. Исходная коммерческая АДС-вакцина без разведения и потенцирования;
- препарат II. Коммерческая АДС-вакцина, разведенная дистиллированной водой, но не потенцированная гомеопатическим методом;
- препарат III. Коммерческая АДС-вакцина, разведенная дистиллированной водой и потенцированная гомеопатическим методом по предлагаемому способу;
- препарат IV. Коммерческая АДС-М вакцина.

Через 14 дней после второй вакцинации забирают кровь и в сыворотках определяют уровень антитоксических антител в реакции непрямой гемагглютинации с коммерческими диагностикумами. Результаты, представленные в табл. 1, показывают, что снижение иммунизирующей дозы приводит к уменьшению антигенности и антителообразования, в то время как снижение дозы разведении в сочетании с потенцированием сохраняет антигенность вакцины.

Результаты определения гиперчувствительности замедленного типа у белых мышей на введение дифтеритно-столбнячной вакцины приведены в табл. 2.

Из табл. 1 видно, что уменьшение доз снижает реактогенность вакцин, но при использовании предлагаемого способа антигенность соответствует уровню АДС-вакцины.

Пример 2. Лептоспирозная концентрированная цельноклеточная вакцина жидкая.

Берут 1 мл коммерческой лептоспирозной вакцины, содержащей 250 тыс. клеток лептоспир в 1 мл, и из нее получают по гомеопатическому методу ряд последовательных разведении вакцины 1х, С 30, С 200. Для получения одной вакцинирующей дозы берут 0,25 мл из разведения 1х, 0,125 мл из разведения С 30 и 0,125 мл из разведения С 200, которые смешивают и интенсивно встряхивают.

Животных (золотистых хомячков) вакцинируют внутрибрюшинно двухкратно с интервалом в 14 дней в дозе 0,5 мл следующими препаратами:
- препарат I. Исходная коммерческая лептоспирозная вакцина без разведения и потенцирования;
- препарат II. Коммерческая лептоспирозная вакцина, разведенная дистиллированной водой, но не потенцированная гомеопатическим методом;
- препарат III. Коммерческая лептоспирозная вакцина, разведенная дистиллированной водой и потенцированная гомеопатическим методом по предлагаемому способу.

Из табл. 3 видно, что малые дозы лептоспирозной вакцины, потенцированные гомеопатическим методом по предлагаемому способу, вызывают образование антител, равнозначное использованию цельной концентрированной вакцины.

Изучение реактогенности проводили путем оценки реакции гиперчувствительности замедленного типа (ГЗТ) в тесте отека лапки белых мышей. Результаты представлены в табл. 4.

Результаты показывают, что интенсивность реакции ГЗТ у животных была выражена при применении концентрированной вакцины и практически не выявлялась при использовании препаратов II и III групп.

Таким образом, предлагаемый способ снижает реактогенность вакцины за счет ее разведения. При этом уровень антигенности вакцины по заявляемому способу равнозначен применению цельной концентрированной вакцины.

Пример 3. Капсульный антиген Haemophilus influenzae type В (Hib).

Берут 1 мл раствора антигена капсульного полисахарида с содержанием в 1 мл 20 мкг полисахарида Hib, из которого получают потенцированием по гомеопатическому методу ряд последовательных разведении антигена 1х, С 30, С 200.

Для получения одной вакцинирующей дозы берут 0,25 мл из разведения 1х, 0,125 мл из разведения С 30 и 0,125 мл из разведения С 200, которые смешивают и интенсивно встряхивают.

Животных (белых мышей) вакцинируют внутрибрюшинно двухкратно с интервалом в 20 дней в дозе 0,5 мл следующими препаратами:
- препарат I. Исходный антиген - капсульный полисахарид (Hib) без разведения и потенцирования;
- препарат II. Капсульный полисахарид (Hib), разведенный дистиллированной водой, но не потенцированный гомеопатическим методом;
- препарат III. Капсульный полисахарид (Hib), разведенный дистиллированной водой и потенцированный гомеопатическим методом по предлагаемому способу.

Через 14 дней после второй вакцинации забирают кровь и в сыворотках определяют уровень антител к капсульному антигену Hib в реакции иммуно-ферментного анализа. Результаты представлены в табл. 5.

Изучение реактогенности проводили путем оценки реакции гиперчувствительности замедленного типа (ГЗТ) в тесте отека лапки белых мышей. Результаты приведены в табл. 6.

Таким образом, при потенцировании по гомеопатическому методу снижаются реактогенные свойства вакцин при сохранении антигенности препаратов, что выявляется антителообразованием у экспериментальных животных.

Изобретение относится к медицине, в частности к иммунологии, направлено на уменьшение побочных действий вакцин при сохранении их антигенных свойств и может быть использовано в вакцинологии. Сущностью способа является приготовление потенцированных доз вакцин и антигенов в последовательных разведениях С 200, С 30 и 1х и объединение полученных разведений в соотношении 1: 1: 2 соответственно. Техническим результатом является снижение реактогенности вакцин и антигенов при сохранении исходной антигенной активности. 6 табл.

Способ снижения реактогенности вакцин и антигенов путем использования сниженных вакцинирующих доз, отличающийся тем, что из вакцин и антигенов готовят потенцированные дозы в последовательных разведениях С 200, С 30 и 1х и полученные разведения объединяют в соотношении 1:1:2 соответственно.