СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ КАРДИОВАСКУЛЯРНОГО СИФИЛИСА Российский патент 2003 года по МПК G01N33/48 

Изобретение относится к медицине, а именно к венерологии и кардиологии.

Высокая заболеваемость сифилисом сопровождается изменением его течения и клинических проявлений. Среди больных сифилитической инфекцией (преимущественно вторичным рецидивным, серорезистентным и скрытыми формами) чаще стали регистрироваться поражения внутренних органов. Из висцеральных проявлений наиболее распространенными являются поражения сердечно-сосудистой системы. Морфологические и функциональные исследования указывают, что при сифилисе наблюдаются универсальные поражения сосудистого аппарата. Это обуславливает поиск новых способов диагностики для выявления начальных признаков заболевания, что создает реальные возможности для раннего выявления скрытой кардиальной патологии.

Основными способами диагностики кардиоваскулярного сифилиса являются функциональные.

В качестве прототипа авторами предлагается функциональная оценка деятельности сердца при раннем скрытом сифилисе с целью установления диагностических критериев сифилитического поражения сердечной мышцы, используя методики стандартной электрокардиографии (ЭКГ), прикроватного мониторинга кардиоитервалограммы и ЭКГ, вазокардиографии (ВКГ), вариационной пульсометрии, постуральной пульсометрии, реокардиографии (РКГ) (Шейх-Заде К.Ю. Функциональная оценка сердца в норме и при раннем скрытом сифилисе. Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата мед. наук. - Краснодар, 2001, с. 19). Предложенные методы исследования позволяют комплексно оценить деятельность сердца, изучить внутрисердечную гемодинамику, установить начальные признаки дисфункции миокарда с выделением наиболее ценных диагностических показателей, определить адаптационный потенциал сердечно-сосудистой системы. Преимуществом этих методов является достоверная диагностика функциональных нарушений в работе сердечной мышцы, а также неинвазивность методов. Однако они трудоемки, продолжительны, зачастую требуют пребывания больного в стационаре.

Основные, ранее предложенные биохимические способы диагностики (динамика активности металлопротеидов в сыворотке крови, определение С-реактивного белка в сыворотке крови, динамика уровня лактатдегидрогеназы в сыворотке крови, определение уровня свободных аминокислот в сыворотке крови, определение активности трансаминаз и альдолазы в сыворотке крови) не являются специфичными для кардиоваскулярного сифилиса, а лишь подтверждают изменения биохимических показателей при сифилисе. Изучение изменений биохимических показателей при сифилитическом поражении сердечно-сосудистой системы не проводилось.

Авторы предлагают собственный способ диагностики кардиоваскулярного сифилиса с помощью определения уровня фосфатидилинозитидов в сыворотке крови. Фосфатидилинозитиды (ФИ) являются необходимыми компонентами биологических мембран, выполняя функцию вторичных мессенджеров в передаче различных трансмембранных сигналов, обеспечивающих адекватный иммунный ответ при контакте с микробным агентом. Для определения уровня ФИ использовался метод проточной горизонтальной хроматографии на тонких слоях силикагеля в специальной камере; количественное содержание ФИ определялось с помощью денситометрии и вычислялось в мг-процентах (мг%) от общего фосфора. Исследовали периферическую кровь. Экстракцию липидов проводили путем добавления к 0,8 мл цельной крови смеси хлороформ-метанола (1:2). Затем фильтровали в пробирки и осадок на фильтре трижды промывали смесью "хлороформ - метанол" (2:1), содержащей 0,5% НСl по объему. К фильтрату добавляли 2-3 мл 0,02%-ного раствора хлористого кальция до образования двух фаз: хлороформной и водно-метаноловой, затем 1-2 минуты встряхивали и добавляли 2 мл хлороформа. После четкого расслоения верхнюю фазу отсасывали. Оставшиеся в верхней фазе липиды экстрагировали 2 мл хлороформа. Нанесенный методом осаждения слой адсорбента высушивали на воздухе, далее 15 минут активизировали в сушильном шкафу при температуре 120^oС и разделяли на 14 дорожек, шириной 4-5 мм. Исследуемый липидный материал в количестве 10-14 мкг наносили на пластинку, помещенную в плоскую стеклянную камеру для проточной хроматографии в течение 60-70 минут. Идентификацию фосфолипидных фракций проводили с помощью цветных тестов, значений Rf и свидетелей фирмы "Sigma" (США). Уровень содержания ФИ определяли денситометрическим методом. Для этих целей использовали денситометр "БИАН-170", позволяющий анализировать тонкослойные хроматограммы. Для построения калибровочной кривой использовался стандартный препарат фосфатидилинозитов фирмы "Sigma" (США), который наносился на отдельные полосы силикагеля так, чтобы концентрация липидного фосфора составляла 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8 мкг соответственно. После хроматографии пластинка проявлялась над раствором хромовой смеси при температуре 200^oС в течение 30 минут, затем денситометрировалась. По данным денситометрии строилась калибровочная кривая. ФИ определяли в диапазоне концентраций от 0,2 до 8,0 мкг. Далее проводили калориметрирование с помощью калориметра-нефелометра КФК-2-УХЛ 4,2 при длине волны 670 нм. Одновременно с исследуемыми растворами калориметрировались "холостые" пробы, не содержащие 0,1 мг фосфора. Расчет содержания фосфора осуществляли путем сравнения оптических плотностей анализируемых и стандартных растворов. Результаты выражали в мг%.

Под нашим наблюдением находилась группа больных из 110 человек, в том числе 79 женщин и 31 мужчина, с различными клиническими формами сифилиса (36 вторичным, 38 ранним скрытым и 36 серорезистентным сифилисом) с давностью заболевания более 6 месяцев возрасте от 15 до 56 лет. Средний возраст составил 33,4±1,8 года. Группу доноров составили 30 человек, сопоставимые по возрасту и возрастному показателю с группой больных сифилисом, с отсутствием в анамнезе сифилитической инфекции и заболеваний сердечно-сосудистой системы. Уровень ФИ в цельной крови больных сифилисом составил 13,03±1,4 мг%, что значительно меньше (р<0,001), чем у доноров - 20,45±0,26 мг%. В группу наблюдения (110 больных) вошли больные сифилисом с кардиологическими жалобами и (или) объективными изменениями со стороны сердечно-сосудистой системы. Наиболее часто их беспокоили колющие и ноющие боли в области сердца при физическом и эмоциональном напряжении. Часть больных жаловалась на одышку или чувство нехватки воздуха при физических нагрузках, не приводящие к ограничению их активности. При аускультации сердца обращало на себя внимание ослабление первого тона и (или) систолический шум на верхушке (у 68 больных), диастолический шум над аортой и в точке Боткина-Эрба при сохранении звучности второго тона (у 6 больных). По результатам анамнестических и объективных данных у 110 больных мы предположили кардиоваскулярный сифилис (сифилитическое поражение сердечно-сосудистой системы).

Серологическое исследование методами (РИФ, РПГА, микрореакции) выявило наличие сифилитической инфекции у 100% больных.

У всех больных, независимо от формы сифилиса, уровень ФИ в цельной крови был значительно снижен: от 18,7 до 5,08 мг%, (13,03±1,4 мг%, р<0,001), однако у 81 пациента этот уровень колебался в диапазоне от 11,9 до 5,08 мг%, а у 19 больных - от 18,7 до 11,9 мг%. Всем пациентам проводилось ультразвуковое исследование сердца, по данным которого у 81 больного, независимо от формы сифилиса, с уровнем ФИ в цельной крови от 11,9 до 5,08 мг% (среднее значение 8,49±0,9 мг%) был диагностирован кардиоваскулярный сифилис (при ультразвуковом исследовании сердца выявлены различные патологические изменения сердечно-сосудистой системы - нарушения диастолической и (или) систолической функции левого желудочка, склеротические изменения подклапанных структур аорты, по данным прикроватного мониторинга кардиоинтервалограммы и ЭКГ - изменения нервной регуляции и нарушения сердечного ритма, обусловленные сифилитической инфекцией). У больных сифилисом с уровнем ФИ в цельной крови от 18,7 до 11,9 мг% (среднее значение 15,3±0,52 мг%) специфической патологии сердца и аорты обнаружено не было.

Таким образом, способ обладает качественно новым подходом и высокой эффективностью в диагностике липидных нарушений при поражении сердца и подклапанных структур выносящего тракта аорты, что может позволить на более раннем этапе проводить диагностику кардиоваскулярного сифилиса.

Пример 1. Больной Ф., 38 лет (стационарная карта 135), который впервые был выявлен в мае 1997 года и зарегистрирован с диагнозом: сифилис ранний скрытый. Лечение проходил амбулаторно - экстенциллином по 2,4 млн. ЕД в/м 3 инъекции. Состоял на диспансерном учете в Тверском КВД. В связи с медленной негативацией серологических реакций крови 15.02.01 направлен на стационарное лечение в 1 отд. ОКВД. При поступлении жалоб не предъявлял. При аускультативном исследовании сердца первый тон был ослаблен на верхушке, второй тон сохранен, над аортой - с металлическим оттенком. Кожные покровы и слизистые свободны от специфических высыпаний. В клиническом анализе крови и общем анализе мочи патологических изменений нет. Холестерин 4,6 ммоль/л. Серологические реакции: ТПГА - положительная, RW - слабоположительная, РИФ-200 - отрицательная, РИФ-абс - резкоположительная. Уровень ФИ в цельной крови составил 10,5 мг%. Проводилось лечение: пенициллин по 1 млн. ЕД 6 раз в сутки в/м (на курс 120 млн. ЕД).

Консультирован смежными специалистами: невропатологом специфической патологии не выявлено. Учитывая снижение уровня фосфотидилинозитидов на мембранах лимфоцитов периферической крови и аускультативные данные рекомендовано: ЭКГ, УЗИ сердца. ЭКГ: синусовый ритм 75 ударов в минуту, нормальное положение электрической оси сердца, признаки диастолической перегрузки левого желудочка. Эхокардиография: уплотнение корня аорты, аортального кольца; небольшой степени выраженности гипертрофия левого желудочка, полость левого желудочка по верхней границе нормы. Допплер: АК - определяется регургитация 2 степени, МК - регургитация 1 степени.

Клинический диагноз: сифилис серорезистентный. Осложнения: поражение аортального клапана; аортальная недостаточность.

Таким образом, диагноз кардиоваскулярного сифилиса дополнительными функциональными методами исследования был подтвержден.

Пример 2. Больной Р., 30 лет (стационарная карта 135), который был выявлен в апреле 2001 года при самостоятельном обращении к венерологу ОКВД и зарегистрирован с диагнозом: сифилис вторичный с поражением кожи и слизистых. При поступлении предъявлял жалобы на колющие боли в области сердца при физической и эмоциональной нагрузке, которые стали беспокоить в последние 5 месяцев, высыпания в области кожи туловища и половых органов, не сопровождающиеся субъективными ощущениями, поредение волос. При аускультативном исследовании сердца отмечалось ослабление первого тона на верхушке. В области волосистой части головы определялась мелкоочаговая алопеция, на коже туловища и разгибательных поверхностях конечностей - розеолезная сыпь, в области гениталий - гипертрофические папулы и широкие кондиломы, в полости рта - эритеметозно-папулезная ангина. В клиническом анализе крови и общем анализе мочи без патологии; холестерин 3,5 ммоль/л. Серологические реакции: ТПГА - резкоположительная, RW - резкоположительная (титр 1:8), РИФ-200(+) - резкоположительная, РИФ-абс - резкоположительная. Уровень ФИ в цельной крови составил 17,5 мг%. Проводилось лечение: пенициллин по 1 млн. ЕД 4 раза в сутки в/м (на курс 80 млн. ЕД).

Консультирован смежными специалистами: невропатологом - специфической патологии не выявлено. Учитывая незначительное снижение уровня фосфотидилинозитидов в цельной крови, жалобы со стороны сердечно-сосудистой системы и аускультативные данные рекомендовано: ЭКГ, УЗИ сердца. ЭКГ: синусовый ритм 69 ударов в минуту, нормальное положение электрической оси сердца. Эхокардиография: корень аорты, аортальное кольцо без особенностей; проллапс митрального клапана 1 степени. Допплер: АК - регургитации нет, МК - регургитация 1 степени.

Клинический диагноз: сифилис вторичный с поражением кожи и слизистых. Осложнений со стороны сердечно-сосудистой системы не обнаружено.

Изобретение относится к медицине, в частности к венерологии и кардиологии. Способ позволяет повысить эффективность диагностики кардиоваскулярного сифилиса. Проводят функциональные методы диагностики, кроме того, методом проточной горизонтальной тонкослойной хроматографии у больных сифилисом определяют уровень фосфатидилинозитидов (13,03±1,4 мг%) и при его снижении от 11,9 до 5,08 мг% диагностируют кардиоваскулярный сифилис.

Способ диагностики кардиоваскулярного сифилиса, включающий функциональные методы диагностики, отличающийся тем, что методом проточной горизонтальной тонкослойной хроматографии у больных сифилисом определяют уровень фосфатидилинозитидов (13,03±1,4 мг%) и при его снижении от 11,9 до 5,08 мг% диагностируют кардиоваскулярный сифилис.