СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ L-ЛИЗИНА Российский патент 2004 года по МПК C12N1/21 C12P13/08 C12N1/21 C12R1/19 

Текст описания в факсимильном виде (см. графическую часть)н

Изобретение относится к биотехнологии. Способ получения L-лизина включает культивирование бактерии Escherichia, накопление L-лизина в культуре и сбор указанной аминокислоты. Для улучшения продуктивности используют бактерию Escherichia, у которой увеличена активность аспартат-полуальдегиддегидрогеназы или фосфоенолпируваткарбоксилазы и при этом увеличена активность(и) специфического фермента(ферментов). Данное изобретение позволяет получать L-лизин с высокой степенью эффективности. 3 с. и 6 з.п. ф-лы, 20 ил., 4 табл.

1. Способ получения L-лизина, который включает культивирование бактерии в подходящей среде для продуцирования, накопление L-лизина в культуре и сбор L-лизина из культуры, где указанная бактерия представляет собой бактерию Escherichia, у которой (1) увеличены внутриклеточные активности дигидродипиколинатсинтазы, аспартокиназы и дигидродипиколинатредуктазы и (2) увеличена/увеличены внутриклеточная активность диаминопимелатдегидрогеназы или внутриклеточные активности тетрагидродипиколинатсукцинилазы и сукцинилдиаминопимелатдеацилазы, при этом внутриклеточная активность аспартат-полуальдегид-дегидрогеназы или фосфоенолпируваткарбоксилазы увеличена.2. Способ получения L-лизина, который включает культивирование бактерии в подходящей среде для продуцирования, накопление L-лизина в культуре и сбор L-лизина из культуры, где указанная бактерия представляет собой бактерию Escherichia, у которой (1) увеличены внутриклеточные активности дигидродипиколинатсинтазы, аспартокиназы и дигидродипиколинатредуктазы и (2) увеличена/увеличены внутриклеточная активность диаминопимелатдегидрогеназы или внутриклеточные активности тетрагидродипиколинатсукцинилазы и сукцинилдиаминопимелатдеацилазы, при этом внутриклеточная активность фосфоенолпируваткарбоксилазы и внутриклеточная активность никотинамид-аденин-динуклеотид-трансгидрогеназы или аспартат-полуальдегид-дегидрогеназы увеличены.3. Способ получения L-лизина, который включает культивирование бактерии в подходящей среде для продуцирования, накопление L-лизина в культуре и сбор L-лизина из культуры, где указанная бактерия представляет собой бактерию Escherichia, у которой (1) увеличены внутриклеточные активности дигидродипиколинатсинтазы, аспартокиназы и дигидродипиколинатредуктазы и (2) увеличена/увеличены внутриклеточная активность диаминопимелатдегидрогеназы или внутриклеточная активность тетрагидродипиколинатсукцинилазы и сукцинилдиаминопимелатдеацилазы, при этом внутриклеточные активности фосфоенолпируваткарбоксилазы и никотинамид-аденин-динуклеотид-трансгидрогеназы и внутриклеточная активность аспартат-полуальдегид-дегидрогеназы и/или аспартазы увеличены.4. Способ по п.3, где увеличены внутриклеточные активности аспартат-полуальдегид-дегидрогеназы и аспартазы.5. Способ по п.3 или 4, где аспартокиназа, дигидродипиколинатредуктаза, тетрагидродипиколинатсукцинилаза, сукцинилдиаминопимелатдеацилаза, фосфоенолпируваткарбоксилаза и аспартат-полуальдегид-дегидрогеназа получены из бактерии Escherichia, никотинамид-аденин-динуклеотид-трансгидрогеназа и аспартаза, если присутствуют, получены из бактерии Escherichia; дигидродипиколинатсинтаза получена из бактерии Escherichia или бактерии Brevibacterium, и диаминопимелатдегидрогеназа получена из бактерии Brevibacterium.6. Способ по любому из пп.1-5, где внутриклеточная активность фермента, внутриклеточная активность которого увеличена, увеличена посредством внедрения плазмиды, имеющей ген этого фермента.7. Способ по любому из пп.1-5, где внутриклеточная активность фермента, внутриклеточная активность которого увеличена, увеличена посредством увеличения числа копий гена этого фермента в хромосоме.8. Способ по любому из пп.1-5, где внутриклеточная активность фермента, внутриклеточная активность которого увеличена, увеличена посредством модификации промоторной последовательности гена фермента в хромосоме.9. Способ по любому из пп.1-8, где внутриклеточная активность дигидродипиколинатсинтазы и аспартокиназы увеличена за счет содержания дигидродипиколинатсинтазы, у которой ингибирование по типу обратной связи L-лизином десенсибилизировано и аспартокиназы, у которой ингибирование по типу обратной связи L-лизином десенсибилизировано, и внутриклеточная активность диаминопимелатдегидрогеназы увеличена за счет внедрения гена диаминопимелатдегидрогеназы.