ПРИМЕНЕНИЕ АЦИЗОЛА В КАЧЕСТВЕ ГЕПАТОПРОТЕКТОРА Российский патент 2005 года по МПК A61K31/4164 A61P1/16 

Настоящее изобретение относится к медицине, в частности к лечению заболеваний печени и ее токсических поражений.

Известны гепатопротекторные свойства легалона и его применение при острых (токсических) гепатитах, для поддерживающей терапии при хронических заболеваниях печени и при циррозе (М.Д.Машковский, \Лекарственные средства\, М., Новая Волна, 2002 г., т.1, стр.506).

Недостатком этого известного средства является его сравнительно высокая токсичность при длительном применении.

Известно применение эссенциале при хронических гепатитах, дистрофии и циррозе печени, токсических поражениях печени (там же, стр.508).

Недостатками его являются сравнительно невысокая эффективность и возможность развития гепатоза, увеличение массы печени.

Задача изобретения - новое более активное гепатопротекторное средство.

Поставленная задача решается применением ацизола [бис(1-винилимидазол)цинкдиацетат] в качестве такого средства.

Ранее ацизол нашел применение в качестве антидота при отравлениях монооксидом углерода и другими продуктами горения (Патент РФ № 2038079. МПК А 61 К 31\315, 1988 г.).

Гепатопротекторное действие ацизола изучалось в соответствии с рекомендациями Минздрава России в \Руководстве по экспериментальному (доклиническому изучению новых фармакологических веществ\ М., Минздрав РФ, \Ремедиум\, 2000, стр.228-231).

Изучение гепатопротекторных свойств ацизола.

Материалы и методы исследования.

Для моделирования токсического гепатита использовали дихлорэтан и ацетаминофен (фенацетин). Оба соединения вводили в/ж крысам-самцам стандартной массы (160-170 г) через металлический атравматический зонд в дозах 500 и 400 мг/кг соответственно 1 раз в день на протяжении 4 дней в смеси с оливковым маслом (1:1). Кроме того, использовали сочетанное введение дихлорэтана и ацетаминофена в дозах 300 и 250 мг/кг соответственно. Через 10 дней у всех экспериментальных животных по морфологической картине печени подтверждалось наличие токсического гепатита. С этого времени на протяжении 10 дней экспериментальным животным с лечебной целью вводили 1 раз в сутки ацизол (30 мг/кг, в/м) и препараты сравнения: эссенциале-ампулы (1 мл/кг, в/в, в хвостовую вену) и легалон (силимарин) (100 мг/кг, в/ж).

Об эффективности лечения судили по клинической картине, динамике массы тела, относительной массе печени, содержанию билирубина, трансаминаз, фосфатаз, цероулоплазмина, общего белка, липидов сыворотки крови, содержанию гликогена, глутатиона, SH-групп, цитохромов в печени, нагрузочным пробам (гексеналовый тест, бромсульфоалеиновая проба) и гистологической картине печени.

Динамику массы тела крыс определяли на весах ВЛР-500. Печень животных для определения относительной массы к весу тела взвешивали на электронных весах 1602 МР немецкой фирмы \Sartorius\.

Содержание восстановленного глутатиона в печени определяли иодометрически, сульфгидрильных групп цельной крови - амперометрическим титрованием по Н.С.Рубиной, а содержание гликогена в печени - методом Самодьи.

Количественное определение цитохромов Р450 и В5 в суспензии микросом печени проводили на двухлучевом спектрофотометре \Perkin Elmar\ (США).

Антитоксическую функцию печени оценивали по продолжительности гексеналового сна (70 мг/кг, массы тела, а экскреторную функцию печени определяли с помощью бромсульфалеиновой пробы.

Кровь для биохимических исследований получали пункцией хвостовой вены крыс.

Активность аланинаминотрансферазы (АЛТ), аспартатаминотрансферазы (ACT), щелочной фосфатазы (ЩФ), кислой фосфатазы (КФ), лактатдегидрогеназы (ЛДГ), тимоловую пробу, содержание общего белка, липидов, глюкозы, холестерина, билирубина сыворотки крови определяли с помощью наборов Био-Ла-Тест чешской фирмы \Лахема\. Активность ХЭ сыворотки определяли по Хестрину, содержание церулоплазмина - по Бабенко. Протромбиновое время определяли унифицированным методом для разведенной плазмы.

Забитые декапитацией животные подвергались патологоанатомическому вскрытию. Для гистологического исследования брали печень. Материал фиксировали в 15% формалине и заливали в парафин. Замороженные срезы печени окрашивали суданом III на жир. Парафиновые срезы окрашивали гематоксилин-эозином.

Статистическую обработку результатов экспериментов проводили по Стьюденту-Фишеру.

Эффективность ацизола при токсическом поражении печени дихлорэтаном

Исследование показало, что в группе без лечения к 20 дню эксперимента наблюдалась гибель 40% подопытных животных, в группе с легалоном погибло 10% крыс, а в группах с ацизолом и эссенциале летальности не наблюдалось.

Клиническая картина в группе без лечения характеризовалась гиподинамией, снижением аппетита (уменьшение потребления корма и воды), заторможенностью, взъерошенностью шерсти, неопрятностью. Наблюдалась некоторая желтушность слизистых оболочек и склер, пальпаторно можно было определить увеличение размеров печени.

При создании экспериментальной модели гепатита путем интоксикации животных дихлорэтаном были получены достоверные показатели снижения массы тела и увеличения относительной массы печени. По сравнению с лечением легалоном применение ацизола позволило вернуть массу тела и относительную массу печени к показателям нормы (см. таблицу 1).

При поражении дихлорэтаном в крови подопытных животных отмечались явные биохимические сдвиги, свидетельствующие о поражении печени: повышение активности трансаминазы, фосфатазы, лактатдегидрогеназы, снижение содержания в сыворотке крови общего белка, липидов, резерва сульфгидрильных групп крови, повышение уровней билирубина и церулоплазмина, значительно замедлялась экскреция бромсульфалеина.

При оценке лечения ацизолом и препаратами сравнения показано, что все препараты уменьшают признаки поражения печени, однако при применении ацизола большинство исследованных биохимических показателей практически вернулось к норме в отличие от лечения эссенциале или легалоном (таблица 2).

При интоксикации дихлорэтаном в самой печени уменьшались запасы гликогена, восстановленного глутатиона, уровни детоксицирующих цитохромов. Поражение печени подтверждалось снижением ее функциональной активности: в 2 раза возрастала длительность гексеналового сна. По сравнению с лечением легалоном применение эссенциале и \Ацизола\ обеспечило практически полное восстановление функциональной активности печени, нормализацию уровня восстановленного глутатиона, а также улучшение показателей детоксицирующих цитохромов (таблица 3).

Таким образом, применение лекарственных препаратов улучшало течение патологического процесса, причем наиболее эффективными оказались ацизол и эссенциале. В группах с этими препаратами животные сохраняли активность и быстро набирали массу. При этом биохимические сдвиги носили минимальный характер и имели тенденцию к полному восстановлению. Показатели, непосредственно характеризующие состояние паренхимы печени (запасы гликогена, глутатиона, активность микросомальных ферментов, относительная масса печени) были лучше в группе с ацизолом. Это подтверждалось и морфологической картиной печени.

Таким образом, из трех использованных препаратов ацизол оказался наиболее эффективным. Его эффективность сопоставима и даже превосходит гепатопротекторную эффективность такого известного препарата, как эссенциале-ампулы.

Эффективность ацизола при токсическом поражении печени фенацетином.

В группе без лечения к 20 дню эксперимента наблюдалась гибель 60% подопытных животных, в группе с легалоном погибло 30% крыс, а в группах с ацизолом и эссенциале летальности не наблюдалось.

Клиническая картина в группе без лечения характеризовалась гиподинамией, снижением аппетита (уменьшение потребления корма и воды), заторможенностью, взъерошенностью шерсти, неопрятностью, кровоточивостью из носовых ходов. Наблюдалась некоторая желтушность слизистых оболочек и склер, пальпаторно можно было определить некоторое увеличение размеров печени.

При интоксикации животных фенацетином достоверно снижалась масса тела и увеличивалась относительная масса печени. По сравнению с лечением эссенциале и легалоном лечение ацизолом позволило вернуть массу тела и относительную массу печени к практически нормальным значениям (таблица 4).

Биохимически определялись признаки поражения печени, аналогичные случаю дихлорэтана, - повышение активности трансаминаз, фосфатаз, снижение содержания общего белка, липидов, резерва сульфгидрильных групп крови, увеличение протромбинового времени, повышение уровней билирубина и церулоплазмина, причем даже более выраженные.

Наиболее эффективными при лечении оказались ацизол и эссенциале, причем ацизол показал даже лучший лечебный эффект (таблица 5).

В печени уменьшались запасы гликогена, восстановленного глутатиона, уровни детоксицирующих цитохромов. Поражение печени подтверждалось снижением ее функциональной активности в виде уменьшения скорости распада гексенала и экскреции бромсульфалеина.

Применение ацизола в большей степени способствовало восстановлению печеночных показателей, чем препаратов эссенциале и легалон (таблица 6).

В печени уменьшались запасы гликогена, восстановленного глутатиона, уровни детоксицирующих цитохромов. Поражение печени подтверждалось снижением ее функциональной активности в виде уменьшения скорости распада гексенала и экскреции бромсульфалеина.

Применение ацизола и эссенциале значительно улучшало общее состояние животных, предотвращало их гибель и положительно сказывалось на морфометрических, биохимических и функциональных показателях, отражающих состояние печеночной паренхимы.

Это подтверждалось и морфологической картиной печени.

Таким образом, из трех использованных гепатопротекторов ацизол оказался и в случае фенацетинового гепатита наиболее эффективным. Его эффективность превосходила гепатопротекторную эффективность эссенциале-ампул.

Эффективность ацизола при сочетанном токсическом поражении печени дихлорэтаном и фенацетином.

В группе без лечения к 20 дню эксперимента наблюдалась гибель 80% подопытных животных, в группе с легалоном погибло 50% крыс, в группе с эссенциале - 30%, а в группе с ацизолом летальности не наблюдалось. По выраженности морфометрических, биохимических, функциональных изменений печени, а также по морфологической картине органа данное сочетанное поражение печени больше всего походило на картину при вирусном гепатите.

Комбинированное поражение характеризуется в целом более серьезными и глубокими нарушениями, чем в случае применения только дихлорэтана или фенацетина. Об изменении основных морфометрических, биохимических и печеночных показателей, а также об эффективности лечебного действия ацизола и обоих препаратов сравнения в этом случае можно судить по данным, приведенным в таблицах 7-9.

Таким образом, применение ацизола в случае комбинированного поражения, вызванного дихлорэтаном и фенацетином, предотвращало гибель животных, значительно улучшало их общее состояние и положительно сказывалось на морфометрических, биохимических и функциональных показателях, отражающих состояние печеночной паренхимы.

Это подтверждалось и морфологической картиной печени.

Таким образом, в случае комбинированного поражения печени (наиболее приближающегося по характеру нарушений печени к вирусному гепатиту) из трех использованных препаратов ацизол оказался самым эффективным. Его лечебное действие превосходило гепатопротекторную эффективность эссенциале-ампул.

Данные морфологии.

Печень исследовали через 1, 3 и 10 дней лечения.

При просмотре гистологических препаратов печени животных, погибших или убитых через 1 сутки после перорального введения дихлорэтана, наблюдались признаки острого токсического гепатита. На препаратах, окрашенных суданом, было видно, что цитоплазма гепатоцитов густо заполнена мелкими и крупными каплями жира. Жировая дистрофия печени носила диффузный характер. На препаратах, окрашенных гематоксилин-эозином, наблюдалась вакуолизация цитоплазмы гепатоцитов, набухание клеточных тел, нечеткость клеточных границ и бледная окраска некоторых групп ядер.

У животных, леченых в течение 3 дней ацизолом и эссенциале, степень и распространение жировой дистрофии были менее выражены, чем у нелеченых животных и животных, получавших легалон.

У животных, леченых в течение 10 дней ацизолом, наблюдалась нормализация структуры печени. На препаратах, окрашенных гематоксилин-эозином, клеточные границы были выраженными. Ядра гепатоцитов имели достаточное содержание хроматина и четкую мембрану. На препаратах, окрашенных суданом, капли жира были видны лишь в единичных гепатоцитах. В случае применения эссенциале полной нормализации морфологической картины печени не происходило.

Аналогичная картина наблюдалась и при введении фенацетина.

В случае комбинированного отравления морфологическая картина поражения печени носила более выраженный и тотальный характер. Помимо описанных выше изменений печеночной паренхимы, наблюдались очаги дольковых некрозов. Назначение ацизола значительно улучшало гистологическую картину органа. Следовательно, по данным патоморфологического исследования, ежедневное в течение 10 дней применение ацизола устраняет признаки жировой дистрофии и нормализует структуру печени опытных крыс.

ЭФФЕКТИВНОСТЬ АЦИЗОЛА ПРИ ТОКСИЧЕСКОМ ПОРАЖЕНИИ ПЕЧЕНИ ЧЕТЫРЕХХЛОРИСТЫМ УГЛЕРОДОМ.

Моделирование острого токсического гепатита.

В связи с тем, что в литературе нам не удалось найти описания экспериментальной модели вирусного гепатита, мы использовали экспериментальную модель, которая вызывает токсическое повреждение печени, наиболее сходное с таковым при вирусном гепатите - повреждение печени, вызванное четыреххлористым углеродом.

Острый токсический гепатит у крыс вызывали внутрижелудочным (в/ж) введением 50% раствора четыреххлористого углерода (CCl₄) в оливковом масле в дозе 1 мл/кг в течение 6 дней. Через 10 дней у всех экспериментальных животных по морфологической картине печени подтверждалось наличие токсического гепатита, после чего были сформированы 3 группы по 8 крыс. С этого времени на протяжении 10 дней экспериментальным животным 1 и 2 группы с лечебной целью вводили 2 раза в сутки препараты: ацизол в дозе 10 мг/кг в виде водного раствора содержимого капсул через атравматичный металлический зонд в/ж, карсил в дозе 100 мг/кг в виде крахмальной суспензии в/ж (производство компании АО СОФАРМА, София, Болгария, драже по 0,45 г) и легалон (силимарин) в дозе 100 мг/кг в/ж. Дозирование осуществлялось на действующее начало. Животные 3 группы вместо лечения получали эквиобъемные количества дистиллированной воды, 4 группа была интактной.

Оценку функционального состояния печени проводили в соответствии с методическими указаниями по изучению гепатозащитной активности фармакологческих веществ.

Для дифференциальной диагностики основных патологических синдромов определяли активность ферментов печеночного происхождения в сыворотке крови. Оценку степени выраженности цитолитического, холестатического и мезенхимально-воспалительного синдромов проводили с помощью стандартных биохимических методик с использованием реактивов Био-Ла-Тест фирмы \Lachema\. При исследовании уровня индикаторных ферментов цитолитического синдрома определяли активность АЛТ и ACT, ЛДГ, КФ и церулоплазмин. Определяли эксреционный фермент - маркер холестаза щелочную фосфатазу.

Содержание в крови белков, углеводов и липидов определяли по уровню общего белка, холестерина, глюкозы, общих липидов и тимоловой пробе, используя реактивы Био-Ла-Тест фирмы \Lachema\. Гликоген в печени определяли методом Самодьи.

Для изучения экскреторной функции печени в крови измеряли ретенцию бромсульфалеина (БСФ) и общий билирубин.

Перекисное окисление липидов (ПОЛ) и активность антиоксидантной системы печени оценивали по содержанию восстановленного глутатиона (иодометрически), резерву сульфгидрильных групп в цельной крови (амперометрическое титрование по Н.С.Рубиной).

Для исследования антитоксической функции печени проводили количественное определение цитохрома Р₄₅₀ в суспензии микросом печени на двухлучевом спектрофотометре \Perkin Elmar\ по величине поглощения комплекса восстановленных гемопротеинов с окисью углерода при 450 нм; количество цитохрома В5 регистрировали по разнице в поглощении между его окисленной и восстановленной формами.

Печень животных для определения относительной массы печени (отношение массы печени в мг к массе тела в г), характеризующей степень выраженности воспалительного процесса в органе, взвешивали на электронных весах 1602 МР фирмы \Sartorius\.

При проведении гексеналовой пробы крысам вводили внутрибрюшинно гексенал в дозе 80 мг/кг. Продолжительность наркоза животных позволяет оценить скорость метаболизма гексенала, осуществляемого цитохром Р₄₅₀-зависимой монооксигеназной системой гепатоцитов, и характеризует состояние антитоксической функции печени. Экскреторную функцию печени определяли с помощью бромсульфалеиновой пробы.

Кроме вышеперечисленных параметров, об эффективности лечения судили по клинической картине и выживаемости животных.

Пробы крови и печени брали у животных после эвтаназии нембуталом в дозе 70 мг/кг. Все животные подвергались патологоанатомическому вскрытию и гистологическому исследованию. Опытных и контрольных крыс умерщвляли декапитацией. Материал фиксировали в 10-15% формалине и заливали в парафин. Парафиновые срезы окрашивали гематоксилин-эозином. Фиксированные замороженные срезы окрашивали суданом III на жир.

Статистическую обработку результатов экспериментов проводили по Стьюденту-Фишеру.

Эффективность ацизола при токсическом гепатите, вызванном CCl₄.

Эффективность препарата ацизол оценивалась по нескольким группам показателей: морфометрическим, биохимическим, функциональным. Прежде всего наблюдали клиническую картину интоксикации. Клиническая картина в группе крыс, получавших ССЦ без лечения, характеризовалась гиподинамией, заторможенностью, взъерошенностью шерсти и неопрятностью животных. Они хуже набирали вес, чем остальные крысы. В этой группе к 15-му дню исследования погибло 75% животных.

В четырех экспериментальных группах к началу лечения (10-й день) наблюдалась гибель 40% животных. По результатам гистологических исследований и клинической картине после введения CCl₄ можно было сделать вывод, что была сформирована модель тяжелой и среднетяжелой степени отравления. К окончанию лечения (20-й день) процент гибели в группах составил: ацизол - 50%, карсил - 55%; легалон - 60%.

Применение ацизола, карсила и легалона практически полностью купировало проявления интоксикации. Эти данные подтверждались результатами объективных анализов (таблица 10).

Оказалось, что интоксикация четыреххлористым углеродом сопровождается снижением массы тела и увеличением относительной массы печени. Введение препаратов нормализовало эти показатели.

Клиническая картина в группе без лечения характеризовалась гиподинамией, снижением аппетита (уменьшение потребления корма и воды), заторможенностью, взъерошенностью шерсти, неопрятностью, кровоточивостью из носовых ходов. Наблюдалась желтушность слизистых оболочек и склер, пальпаторно можно было определить некоторое увеличение размеров печени.

Это подтверждалось также данными гистологических исследований. При воздействии CCl₄ в данных условиях опыта в печени опытных крыс наблюдались глубокие повреждения гепатоцитов в виде жировой и белковой дистрофии. Крупные капли жира заполняли целиком цитоплазму гепатоцитов. Крупнокапельная жировая дистрофия была диффузной. Не содержали жира лишь небольшое количество гепатоцитов, цитоплазма которых была гомогенной. На парафиновых препаратах на месте жировых включений были видны крупные вакуоли. Цитоплазма небольшой части гепатоцитов интенсивно закрашивалась эозином. У части крыс, помимо этих изменений были, видны мелкие очаги некробиоза; гепатоциты в этих участках были бледными с неразличимыми клеточными границами, без ядер. Ядра большей части гепатоцитов были набухшими, просветленными, с гиперхроматозом ядерной мембраны.

У большинства крыс, получавших препараты ацизол, карсил и легалон дистрофические изменения печени практически отсутствовали. Трабекулярное строение печени нарушений не представляло. Границы гепатоцитов были четкими. Ядра содержали достаточное количество хроматина. Реакция на жир с использованием судана III у большинства крыс была отрицательной. В двух случаях при лечении карсилом и в одном случае при лечении легалоном наблюдалась очаговая мелкокапельная жировая дистрофия.

Показатели, характеризующие состояние и функцию печени, представлены в таблице 11.

Из материалов, представленных в таблице, видно, что интоксикация CCl₄ нарушала все функции печени: белково-синтетическую, детоксицирующую, липосинтезирующую, что сопровождалось биохимическими признаками цитолиза. В крови повышалась активность трансаминаз, фосфатаз, снижалось содержание в сыворотке крови общего белка, липидов, резерва сульфгидрильных групп, повышались уровни билирубина и церулоплазмина. В печени уменьшались запасы гликогена, восстановленного глутатиона, уровни детоксицирующих цитохромов. Поражение печени сопровождалось снижением ее функциональной активности: значительно возрастала длительность гексеналового сна, замедлялась экскреция бромсульфалеина.

Применение ацизола, карсила и легалона значительно улучшало общее состояние животных, снижало летальность и достоверно нормализовало функцию печени, что подтверждалось морфометрическими, биохимическими и функциональными показателями состояния печеночной паренхимы.

Данные электронной микроскопии.

В печени крыс на 10 сутки отравления наблюдали преимущественно центролобулярное поражение гепатоцитов. В центре области дистрофических изменений можно было встретить зоны некрозов гепатоцитов, на периферии и вне ее можно было наблюдать умеренные изменения, выражающиеся в появлении достаточно крупных липидных капель (липосом). Количество лизосом существенно не изменялось. Двуядерные гепатоциты встречались редко.

У животных, получавших ацизол в течение 10 дней, изменения гепатоцитов оказались выражены в гораздо меньшей степени. Наиболее характерным являлось некоторое увеличение количества липосом и умеренное набухание митохондрий и эндоплазматического ретикулума, что свидетельствует об активных процессах репарации.

Полученные данные свидетельствуют о том, что применение ацизола приводит к активации процессов репарации гепатоцитов при индуцированных гепатитах, что подтверждается электронно-микроскопическими исследованиями.

Результаты проведенных исследований позволяют заключить, что ацизол по спектру фармакологической активности может быть отнесен к гепатопротекторам. По гепатопротекторной активности ацизол не уступает и даже превосходит зарегистрированные препараты этой фармакологической группы.

Полученные результаты свидетельствуют о высокой эффективности ацизола при интоксикации и поражении печени, вызванных четыреххлористым углеродом. По спектру гепатопротекторного действия ацизол превосходит зарегистрированный препарат карсил.

Проведенные испытания показали высокую гепатопротекторную активность и позволяют рекомендовать ацизол в терапии токсических и вирусных гепатитов и гепатозов.

Таблица 1
Морфометрические показатели экспериментальных животных при лечении ацизолом и препаратами сравнения токсического поражения печени, вызванного дихлорэтаном (20 день эксперимента), М±mПоказателиЭкспериментальные группы Контроль (интактные животные)Дихлорэтан (без лечения)Дихлорэтан и лечение анизоломДихлорэтан и лечение эссенциалеДихлорэтан и лечение легалономМасса тела. г190±5170±10*190±10185±10175±5*Относительная масса печени, мг/100 г массы тела27.7±1.142.4±1.6*31.6±0.834.4±1.2*37.7±1.7** - достоверное отличие от контроля (р<0,05)

Таблица 2
Биохимические показатели крови экспериментальных животных при лечении ацизолом и препаратами сравнения токсического поражения печени, вызванного дихлорэтаном (20 день эксперимента), М±mПоказателиЭкспериментальные группы Контроль (интактные животные)Дихлорэтан (без лечения)Дихлорэтан и лечение ацизоломДихлорэтан и лечение эссенциалеДихлорэтан и лечение легалономОбщий белок, г/л64±240±4*58±656±2*50±4*Общие липиды, г/л3.7±0.32.8±0.2*3.5±0.13.0±0.33.0±0.3Глюкоза, ммоль/л5.0±0.33.2±0.6*4.8±0.64.8±0.64.3±0.3Холестерин, ммоль/л1.72±0.441.86±0.361.66±0.241.68±0.361.70±0.22Билирубин общий,
ммоль/л3.0±0.36.2±0.4*3.2±0.23.2±0.44.1±0.1*АЛТ, мккат/л0.20±0.031.62±0.11*0.36±0.04*0.32±0.06*0.52±0.08*ACT, мккат/л0.60±0.050.98±0.12*0.72±0.060.52±0.120.66±0.08ЩФ, мккат/л0.69±0.102.12±0.24*0.73±0.080.96±0.14*0.88±0.11КФ, мккат/л0.74±0.121.98±0.20*0.77±0.090.72±0.130.96±0.11*ЛДГ, ммоль/ч/л4.92±0.3210.76±1.346.88±0.36*5.96±0.42*7.89±0.47*Тимоловая проба, ед. помутнения1.46±0.045.77±0.36*1.58±0.121.56±0.182.88±0.19*-SH-группы, мкмоль/100 мл1650±90362±20*990±50*486±40*350±80*Церулоплазмин, мг/л420±10840±60*470±30450±40670±90*ХЭ, мкмоль/г/мин2.5±0.11.6±0.2*2.4±0.22.6±0.21.8±0.1*Бромсульфалеин, на 10-й минуте после введения, мг %13.86±1.236.6± 2.4*16.8±0.824.2±1.6*27.4±1.7** - достоверное отличие от контроля (р<0,05)

Таблица 4
Морфометрические показатели экспериментальных животных при лечении ацизолом и препаратами сравнения токсического поражения печени, вызванного фенацетином (20 день эксперимента), М±mПоказателиЭкспериментальные группы Контроль (интактные животные)Фенацетин (без лечения)Фенацетин и лечение ацизоломФенацетин и лечение эссенциалеФенацетин и лечение легалономМасса тела. г190±5164±12*191±11186±5171±8*Относительная масса печени, мг/100 г массы тела27.7±1.144.6±1.2*30.2±1.232.4±1.6*38.6±1.3** - достоверное отличие от контроля (р<0.05)

Таблица 5
Биохимические показатели крови экспериментальных животных при лечении ацизолом и препаратами сравнения токсического поражения печени, вызванного фенацетином (20 день эксперимента), М±mПоказателиЭкспериментальные группы Контроль (интактные животные)Фенацетин (без лечения)Фенацетин и лечение ацизоломФенацетин и лечение эссенциалеФенацетин и лечение легалономОбщий белок, г/л64±238±4*59±554±2*48±4*Общие липиды, г/л3.7±0.32.9±0.1*3.6±0.13.2±0.23.0±0.3Глюкоза, ммоль/л5.0±0.33.6±0.4*4.2±0.44.8±0.24.1±0.3Холестерин, ммоль/л1.72±0.441.90±0.241.68±0.241.72±0.361.74±0.20Билирубин общий, ммоль/л3.0±0.36.8±0.2*3.1±0.13.1±0.24.2±0.2*,АЛТ, мккат/л0.20±0.031.76±0.21*0.34±0.06*0.30±0.04*0.50±0.11*ACT, мккат/л0.60±0.050.92±0.11*0.70±0.040.62±0.080.70±0.04ЩФ, мккат/л0.69±0.102.27±0.34*0.69±0.080.82±0.110.88±0.12КФ, мккат/л0.74±0.122.01±0.15*0.79±0.030.82±0.111.12±0.12*ЛДГ, ммоль/ч/л4.92±0.3211.37±1.125.97±0.24*6.36±0.25*8.37±0.43*Тимоловая проба, ед. помутнения1.46±0.046.33±0.45*1.66±0.181.72±0.242.76±0.21*-SH-группы, мкмоль/100 мл1650±90440±20*1100±70*720±50*470±80*Церулоплазмин, мг/л420±10800±50*450±50470±60680±80*ХЭ, мкмоль/г/мин2.5±0.11.8±0.3*2.4±0.22.5±0.22.0±0.1*Протромбиновое время, с33±562±7*30±542±647±5*Бромсульфалеин, на 10-й минуте после введения, мг %13.86±1.242.4±1.6*17.2±0.8*20.0±1.8*22.6±1.2*

Таблица 6
Печеночные показатели экспериментальных животных при лечении ацизолом и препаратами сравнения токсического поражения печени, вызванного фенацетином (20 день эксперимента), М±mПоказателиЭкспериментальные группы Контроль (интактные животные)Фенацетин (без лечения)Фенацетин и лечение ацизоломФенацетин и лечение эссенциалеФенацетин и лечение легалономВосстановленный глутатион, мг %160±570±10*170±10150±10120±15*Гликоген, мг %2500±100800±60*2100±1001900±200*1300±150*Цитохром Р₄₅₀, ммоль/мг белка ×10^-41.24±0.030.88±0.06*1.10±0.041.00±0.05*0.92±0.11*Цитохром В₅, ммоль/мг белка ×10^-40.85±0.040.46±0.06*0.63±0.07*0.60±0.060.58±0.05*Гексеналовый сон, мин25.0±1.544.5±2.5*26.0±1.527.5±1.530.0±1.5** - достоверное отличие от контроля (р<0.05)

Таблица 7
Морфометрические показатели экспериментальных животных при лечении ацизолом и препаратами сравнения сочетанного токсического поражения печени, вызванного дихлорэтаном и фенацетином (20 день эксперимента), М±mПоказателиЭкспериментальные группы Интактные животныеБез леченияЛечение ацизоломЛечение эссенциалеЛечение легалономМасса тела. г190±5150±10*180±15170±5*160±10*Относительная масса печени, мг/100 г массы тела27.7±1.156.2±1.2*31.3±1.3*42.2±1.8*46.6±1.6** - достоверное отличие от контроля (р<0.05)

Таблица 8
Биохимические показатели крови экспериментальных животных при лечении ацизолом и препаратами сравнения сочетанного токсического поражения печени, вызванного дихлорэтаном и фенацетином (20 день эксперимента), М±mПоказателиЭкспериментальные группы Интактные животныеБез леченияЛечение ацизоломЛечение эссенциалеЛечение легалоном123456Общий белок, г/л64±228±4*52±5*48±4*40±4*Общие липиды, г/л3.7±0.32.9±0.1*3.2±0.12.9±0.2*2.6±0.3*Глюкоза, ммоль/л5.0±0.33.2±0.4*4.2±0.44.6±0.24.0±0.3*Холестерин, ммоль/л1.72±0.441.92±0.241.58±0.211.70±0.261.64±0.20Билирубин общий, ммоль/л3.0±0.38.2±0.2*3.2±0.13.8±0.2*4.4±0.2*АЛТ, мккат/л0.20±0.032.55±0.25*0.54±0.08*0.99±0.06*1.32±0.12*ACT, мккат/л0.60±0.051.54±0.17*0.82±0.06*0.96±0.08*1.12±0.04*ЩФ, мккат/л0.69±0.103.15±0.35*0.72±0.090.92±0.12*1.56±0.12*КФ, мккат/л0.74±0.123.07±0.17*0.82±0.031.11±0.17*2.12±0.34*ЛДГ, ммоль/ч/л4.92±0.3215.5б±1.3*б.82±0.34*8.24±0.35*10.27±1.2*Тимоловая проба, ед. помутнения1.46±0.0410.27±1.5*2.8б±0.44*3.93±0.53*4.98±0.27*-SH-группы, мкмоль/100 мл1650±90330±30*900±50*640±50*310±30*Церулоплазмин, мг/л420±10920±70*520±50*610±80*720± 80*ХЭ, мкмоль/г/мин2.5±0.11.8±0.3*2.1±0.22.2±0.22.0±0.1*Протромбиновое время, с33±592±17*43±556±8*62±11*Бромсульфалеин, на 10-й минуте после введения, мг %13.86±1.254.2±2.6*19.3±1.1*23.0±1.6*36.6±1.2*

Таблица 9
Печеночные показатели экспериментальных животных при лечении ацизолом и препаратами сравнения сочетанного токсического поражения печени, вызванного дихлорэтаном и фенацетином (20 день эксперимента), М±mПоказателиЭкспериментальные группы Интактные животныеБез леченияЛечение ацизоломЛечение эссенциалеЛечение легалономВосстановленный глутатион, мг %160±550±10*165±1080±10*60±15*Гликоген, мг %2500±100400±60*1600±100*1500±200*1200±150*Цитохром Р₄₅₀, ммоль/мг белка ×10^-41.24±0.030.72±0.06*0.98±0.06*0.82±0.03*0.74±0.11*Цитохром В₅, ммоль/мг белка ×10^-40.85±0.040.34±0.06*0.54±0.07*0.48±0.04*0.30±0.07*Гексеналовый сон, мин25.0±1.552.5±2.5*27.0±1.529.5±1.5*32.0±1.5** - достоверное отличие от контроля (р<0,05)

Таблица 10
Масса тела и относительная масса печени у экспериментальных животных при интоксикации CCl₄ и лечении препаратом ацизол в сравнении с зарегистрированными препаратами, М±mПоказателиИнтактныеИнтоксикация CCl₄ Без леченияацизоллегалонкарсилМасса тела, г189±7165±10*186±8175±5*183±10Относительная масса печени, мг/100 г25.8±1.349.6±3.1*26.6±1.437.7±1.7*31.1±2.0* - достоверные отличия от интактных животных при р<0.05

Таблица 11
Биохимические и функциональные показатели состояния печени экспериментальных животных при интоксикации CCl₄ и введении ацизола в сравнении с зарегистрированными препаратами, М±mПоказателиИнтоксикация CCl₄ ИнтактныеБез леченияАцизолЛегалонКарсил123456Общий белок, сыворотка, г/л64±231±4*63±550±4*48±6*Общие липиды, сыворотка, г/л3.5±0.32.5±0.3*3.6±0.093.0±0.33.4±0.1АЛТ, мккат/л0.21±0.032.44±0.10*0.23±0.030.52±0.08*0.29±0.08ACT, мккат/л0.62±0.043.16±0.12*0.70±0.050.66±0.080.83±0.11ЩФ, мккат/л0.68±0.092.48±0.23*0.69±0.100.88±0.110.93±0.14КФ, мккат/л0.76±0.112.27±0.19*0.71±0.120.96±0.11*1.06±0.11*ЛДГ, ммоль/ч/л4.94±0.328.48±0.36*4.73±0.307.89±0.47*6.30±0.47ХЭ, мкмоль/г/мин2.5±0.11.6±0.2*2.4±0.22.6±0.21.8±0.1*Тимоловая проба, ед. помутнения1.46±0.035.99±0.35*1.40±0.111.46±0.191.88±0.19SH-группы, сыворотка, мг %1535±64263± 39*1602±401350±801587±74Восстановленный глутатион, печень, мг %165±660±10*171±12167±13118±11*Р₄₅₀, печень, ммоль/мг белка ×10^-41.13±0.040.54±0.08*1.22±0.031.11±0.060.94±0.14B₅, печень, ммоль/мг белка ×10^-4.0.85±0.050.57±0.06*0.82± 0.020.75±0.030.62±0.04*Гликоген, печень, мг %2482±99739±78*2430±1062530±1071710±195*Гексеналовый сон, мин36.9±6.399.0±9.6*43.6±5.645.3±6.249.9±4.8Концентрация бромсульфалеина на 10-й минуте после введения,13.7±0.940.4±4.2*16.7±0.527.4±1.7*14.4±1.6продолжение табл.11сыворотка, экстинция     Церулоплазмин, сыворотка, мг/л417±12989±81*453± 21670±90*679±45*Холестерин, сыворотка, ммоль/л1.77±0.241.32±0.201.79±0.351.70±0.221.67±0.20Билирубин общий, сыворотка, ммоль/л3.2±0.47.4±0.3*3.3±0.24.1±0.1*3.8±0.5

Изобретение относится к области химико-фармацевтической промышленности и касается применения ацизола в качестве гепатопротектора. Ацизол показал высокую эффективность при токсичном поражении печени хлорированными углеводородами, лекарственными средствами при невысоких дозах вводимого препарата. 11 табл.

Применение ацизола в качестве гепатопротектора.