СПОСОБ РАННЕЙ ДИАГНОСТИКИ НИЗКОДИФФЕРЕНЦИРОВАННОЙ АДЕНОКАРЦИНОМЫ ЭНДОМЕТРИЯ Российский патент 2006 года по МПК G01N33/68 

Изобретение относится к медицине и может быть использовано в гинекологии и онкологии.

Актуальность разработки способа ранней диагностики низкодифференцированной аденокарциномы эндометрия обусловлена тем, что эта патология предусматривает тактику лечения (в том числе и объем оперативного вмешательства), отличающуюся от тактики при высоко- или умереннодифференцированных опухолях. В ряде же случаев низкодифференцированная ткань может возникать и на фоне имеющегося опухолевого процесса, при котором морфологически ткань опухоли характеризуется как высоко- или умереннодифференцированная. Возможность использования уже при догоспитальном обследовании больных малоинвазивного по сравнению с гистероскопией, имеющей ряд противопоказаний и ограничений [7], способа диагностики развития в эндометрии низкодифференцированной ткани позволит повысить эффективность результатов лечения пациенток с этими заболеваниями.

Известен способ ранней диагностики доброкачественных гиперпластических процессов эндометрия, для реализации которого используются показатели оксидантного и антиоксидантного статуса, в частности, соотношения глутатионпериксидаза/диеновые конъюгаты и глутатионпериксидаза/восстановленный глутатион, являющиеся диагностическим критерием наличия железисто-фиброзных полипов, железистых полипов и железисто-кистозной гиперплазии эндометрия [2].

Источников по ранней диагностике низкодифференцированной аденокарциномы эндометрия в доступной литературе нами не обнаружено.

Задачей изобретения является ранняя диагностика развития низкодифференцированной аденокарциномы эндометрия.

Задачу решают за счет того, что определяют активность фермента НАД-зависимой малатдегидрогеназы в периферической крови больной и при снижении активности менее 52,68 мкЕ в 1 микролитре крови предполагают наличие низкодифференцированной аденокарциномы эндометрия.

Выбор в качестве диагностического критерия показателя активности фермента НАД-зависимой малатдегидрогеназы (НАДМДГ) обусловлен результатами определения активности НАД- и НАДФ-зависимых ферментов цикла трикарбоновых кислот (ЦТК) в тканях высоко-, умеренно- и низкодифференцированной аденокарциномы эндометрия и в периферической крови больных.

Во-первых, при наличии у больных как высоко- и умереннодифференцированной ("первый патогенетический вариант заболевания"), так и низкодифференцированной аденокарциномы эндометрия ("второй патогенетический вариант") [1] активность ряда ферментов ЦТК в тканях опухолей отличается от их уровней, определяемых в нормальной ткани эндометрия. Так, при первом патогенетическом варианте показатели НАДИЦДГ и НАДФИЦДГ (НАД- и НАДФ-зависимые изоцитратдегидрогеназы) и НАДМДГ равны, соответственно, 84,45±4,50 мкЕ, 42,53±2,15 мкЕ и 149,13±11,5 мкЕ в 1 микрограмме ткани (мкЕ/мкг), что достоверно ниже аналогичных показателей контроля (133,60±15,47 мкЕ/мкг, Р0.01; 61,10±6,11 мкЕ/мкг, Р<0,01; 216,94±15,90 мкЕ/мкг; Р<0,01). Показатель же НАДФМДГ достоверно более высок в опухолевой ткани (7,14±0,48 мкЕ/мкг, в контроле 4,47±0,33 мкЕ/мкг; Р<0,001). Уровни этих ферментов при низкодифференцированной аденокарциноме эндометрия подобным образом соотносятся с уровнем контроля, но их изменения еще более выражены: активность НАДИЦДГ составляет 38,40±3,28 мкЕ/мкг (Р<0,001), НАДФИЦДГ - 20,41±2,42 мкЕ/мкг (Р<0,001), НАДМДГ - 34,20±3,08 мкЕ/мкг (Р<0,001), НАДФМДГ - 22,10±2,72 мкЕ/мкг (Р<0,001). Установленные особенности внутриклеточных реакций опухолевой ткани отражают наиболее общие метаболические механизмы патологических процессов: снижение активности НАД-зависимых ферментов ЦТК, обеспечивающих основные потребности клеток в АТФ, с одновременной выраженной активацией НАДФ-зависимых ферментов. Этот механизм обусловливает повышение уровня пластических реакций метаболизма и способность клеток к пролиферации, что проявляется при многих заболеваниях [3, 4, 8].

Во-вторых, при определении активности этих ферментов в периферической крови установлены соотношения показателей, аналогичные зарегистрированным в ткани эндометрия, причем различия между группами больных и здоровых также достоверны. При высоко- и умереннодифференцированных опухолях активность НАДИЦДГ определяется равной 8,41±0,66 мкЕ/мкл, НАДФИЦДГ - 3,48±0,27 мкЕ/мкл, НАДМДГ - 159,74±17,8 мкЕ/мкл, НАДФМДГ - 4.89±0,39 мкЕ/мкл (в контрольной группе, соответственно: 24,79±3,20 мкЕ/мкл, Р<0,001; 16,36±1,86 мкЕ/мкл, Р<0,001; 238,95±33,5 мкЕ/мкл, Р<0,05; 3,36±0,39 мкЕ/мкл, Р<0,01). При низкодифференцированной аденокарциноме эндометрия показатель НАДИЦДГ равен 3,10±0,32 мкЕ/мкл, НАДФИЦДГ - 2,01±0,19 мкЕ/мкл, НАДМДГ - 36,03±4,46 мкЕ/мкл; НАДФМДГ - 17,95±1,60 мкЕ/мкл (Р<0,001 - достоверность различий с контролем для всех ферментов). Этим подтверждается известная из литературы способность показателей активности метаболических ферментов периферической крови отражать не только нейрогуморальную регуляцию обменных процессов организма, но и особенности метаболических реакций в очаге патологических процессов [5].

В-третьих, методом корреляционного анализа подтверждается тесная взаимозависимость уровней активности ферментов, определяемых в ткани опухолей эндометрия и периферической крови больных женщин. При этом все коэффициенты корреляции между соответствующими парами ферментов положительны и достоверны с уровнем не менее 99 процентов: НАДИЦДГ "ткань-кровь" - 0,56; НАДФИЦДГ "ткань-кровь" - 0,37; НАДМДГ "ткань-кровь" - 0,53; НАДФМДГ "ткань-кровь" - 0,78 (критическое значение коэффициента корреляции для Р<0,01-0,35).

Диагностическим критерием, позволяющим установить наличие у пациентки низкодифференцированной аденокарциномы эндометрия, избран показатель активности фермента НАДМДГ в периферической крови больных высоко- и умереннодифференцированной аденокарциномой эндометрия, так как при статистическом анализе для него установлено максимальное расхождение вариационных рядов в группах больных с первым и вторым патогенетическими вариантами заболевания.

Предлагаемый способ реализуют следующим образом:

активность НАДМДГ определяют методом биолюминесценции с бактериальной люциферазой [6] в 20 мкл периферической крови из пальца обследуемой. При условии снижения у больной активности фермента НАДМДГ ниже 52,68 мкЕ/мкл делают заключение о наличии низкодифференцированной аденокарциномы эндометрия. Указанное "критическое" значение показателя получено из среднего значения параметра группы больных высоко- и умереннодифференцированной аденокарциномой эндометрия, равного 159,74±17,84 мкЕ/мкл, за вычетом его сигмального отклонения для выборки: 159,74-107,06=52,68 мкЕ/мкл.

Пример. Пациентка Б., 52 лет (карта обследования №45) поступила в отделение гинекологии Краевого онкологического диспансера с жалобами на кровянистые выделения из половых путей в течение 2-х недель, слабость, головокружение. В анамнезе 5 беременностей, 2 срочных родов, 3 медицинских аборта, внутриматочная спираль - в течение 7 лет, удалена в возрасте 46 лет. Менопауза в течение 2-х лет, на приеме у гинеколога не была в течение 5-ти лет. При осмотре матка увеличена до размеров 5-6 недель беременности, мягковатой консистенции, безболезненная, подвижная. Придатки матки не пальпируются, своды свободные. Выделения из половых путей кровянистые, в умеренном количестве.

По техническим причинам гистероскопия с биопсией эндометрия не проводилась. В отделении было произведено диагностическое выскабливание полости матки; гистологическое заключение №1336-42: в эндометрии определялось наличие высокодифференцированной аденокарциномы.

При клинико-лабораторном обследовании наряду с общепринятыми анализами произведено определение активности фермента НАДМДГ в периферической крови. Результат - активность фермента равна 38,49 мкЕ/мкл, что предполагало наличие у больной низкодифференцированной аденокарциномы эндометрия.

Оперативное лечение произведено на основании предварительного гистологического заключения - по результатам диагностического выскабливания - в объеме лапаротомии, пангистероэктомии без лимфаденэктомии. Результат окончательного гистологического исследования №1412-31: в эндометрии определялась низкодифференцированная аденокарцинома с инвазией в миометрий до серозной оболочки; придатки матки с возрастными инволютивными изменениями.

В связи с тем, что оперативное лечение было произведено в объеме, не соответствующем стадии и морфологическому варианту опухоли, в дальнейшем больной был назначен курс послеоперационной лучевой терапии с повышенной суммарной дозой - 60 Гр (против 45 Гр, назначаемых при адекватном объеме оперативного лечения) [1].

В таблице представлены результаты обследования 36 женщин, у которых морфологически подтверждено наличие высоко- или умереннодифференцированной аденокарциномы эндометрия (В ДА), и 17 больных с низкодифференцированными опухолями (НДА), использованные для разработки предлагаемого способа. Как определяется из представленных данных, предполагаемый диагноз, устанавливаемый по показателю активности НАДМДГ, не получил своего подтверждения при гистологическим исследовании только в 7 случаях, причем в 4-х из них (карты обследованных №№3, 8, 13, 21) это было связано с "гипердиагностикой".

Преимущества данного способа заключаются в том, что он позволяет при использовании 20 мкл крови из пальца без проведения гистероскопии и забора биопсийного материала или диагностического выскабливания полости матки установить наличие в эндометрии низкодифференцированной опухолевой ткани.

ТаблицаДостоверность оценки морфологического варианта опухоли эндометрия по активности НАДМДГ№ карты больнойАктивность НАДМДГМорфологический вариант опухолиСовпадение диагнозовПредполагаемыйустановленный20.21,56НДАНДАДА49.21,72НДАНДАДА32.25,98НДАНДАДА5.26,77НДАНДАДА10.27,92НДАНДАДА33.28,89НДАНДАДА44.30,59НДАНДАДА41.32,78НДАНДАДА54.33,18НДАНДАДА45.38,49НДАНДАДА19.38,76НДАНДАДА13.41,88НДАВДАНЕТ8.42,44НДАВДАНЕТ42.42,84НДАНДАДА51.44,37НДАНДАДА21.47,88НДАВДАНЕТ53.47,96НДАНДАДА3.48,32НДАВДАНЕТ4.52,87ВДАНДАНЕТ11.53,07ВДАНДАНЕТ26.56,47ВДАНДАНЕТ25.61,13ВДАВДАДА12.61,23ВДАВДАДА29.63,82ВДАВДАДА27.65,24ВДАВДАДА6.73,87ВДАВДАДА47.82,44ВДАВДАДА30.87,62ВДАВДАДА34.96,98ВДАВДАДА55.98,34ВДАВДАДА39.108,74ВДАВДАДА2.112,54ВДАВДАДА43.116,26ВДАВДАДА18.135,89ВДАВДАДА22.140,23ВДАВДАДА14.144,43ВДАВДАДА35.153,26ВДАВДАДА50.159,32ВДАВДАДА56.161,73ВДАВДАДА9.163,47ВДАВДАДА28.183,62ВДАВДАДА52.184,18ВДАВДАДА1.184,37ВДАВДАДА7.187,01ВДАВДАДА16.187,11ВДАВДАДА48.193,52ВДАВДАДА46.207,81ВДАВДАДА31.247,57ВДАВДАДА40.295,38ВДАВДАДА15.322,11ВДАВДАДА24.350,31ВДАВДАДА17.468,27ВДАВДАДА23.472,14ВДАВДАДАСовпадение предполагаемого и установленного морфологических вариантов опухоли86,79%Примечание: ВДА - высоко- и умереннодифференцированная аденокарцинома эндометрия;
НДА - низкодифференцированная аденокарцинома эндометрия.

Источники информации

1. Бохман Я.В. Руководство по онкогинекологии. - СПб.: "ООО Издательство Фолиант", 2002. - 542 с.

2. Брехова И.С. Волков НА., Титова Н.М. Полстяная Г.Н. "Способ ранней диагностики доброкачественных гиперпластических процессов эндометрия". Патент РФ №2120221 от 27.09.2002 г.

3. Булыгин Г.В., Камзалакова Н.И., Андрейчиков А.В. Метаболические основы регуляции иммунного ответа. - Новосибирск: Издательство СО РАМН, 1999. - 346 с.

4. Булыгин Г.В., Якимов С.В. Метаболический иммунодефицит у больных острым панкреатитом и методы его коррекции / И.П. Назаров, Ю.С.Винник, С.С.Дунаевская // Иммунопатология в хирургии и анестезиологии. - Красноярск, 2003. - Ч.3. - С.96-179.

5. Колб В.Г., Зубовская Е.Т. Интерпретация некоторых энзимологических показателей при заболеваниях внутренних органов // Здравоохранение Белоруссии. - 1986. - №9. - С.62-66.

6. Савченко А.А. Высокочувстительное определение активности дегидрогеназ в лимфоцитах периферической крови человека биолюминесцентным методом / А.А. Савченко, Л.Н. Сунцова // Лаб. дело. - 1989. - №11. - С.23-25.

7. Стрижаков А.Н., Давыдов А.И. Гистерорезектоскопия. - М.: Медицина, 1997. - 180 с.

8. Тихонова Е.П., Булыгин Г.В. Метаболические основы иммунореактивности при парентеральных гепатитах В и С. - Новосибирск: Наука, 2003. - 146 с.

Изобретение относится к медицине и может быть использовано в гинекологии и онкологии. У больной определяют активность фермента НАД-зависимой малатдегидрогеназы (НАДМДГ) в периферической крови и при величине показателя менее 52,68 мкЕ/мкл предполагают наличие низкодифференцированной аденокарциномы эндометрия. Способ позволяет без проведения гистероскопии и забора биопсийного материала или диагностического выскабливания полости матки установить наличие в эндометрии низкодифференцированной опухолевой ткани. 1 табл.

Способ ранней диагностики низкодифференцированной аденокарциномы эндометрия, заключающийся в определении активности фермента НАД-зависимой малатдегидрогеназы в периферической крови больной и при снижении активности НАД-зависимой малатдегидрогеназы менее 52,68 мкЕ/мкл предполагают наличие низкодифференцированной аденокарциномы эндометрия.