СПОСОБ ФАРМАКОЛОГИЧЕСКОЙ КОРРЕКЦИИ ИШЕМИИ КОНЕЧНОСТИ Российский патент 2007 года по МПК A61K31/198 A61P9/10 

Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной кардиофармакологии.

Наиболее близким к заявленному решению является способ коррекции ишемии конечности с помощью трентала (пентоксифиллин), относящегося к препаратам, улучшающим микроциркуляцию, описанный Савельевым B.C., Кошкиным В.М. "Критическая ишемия нижних конечностей". Глава 7. Лечение больных с хроническими облитерирующими заболеваниями артерий нижних конечностей. Москва, 1997 г. Издательство "Медицина", который заключается во внутриартериальном, внутривенном, внутримышечном и пероральном приеме этих препаратов у больных для коррекции нарушения периферического кровообращения.

Основным недостатком способа является ограниченная патогенетическая направленность, связанная с отсутствием эндотелий-зависимого вазодилятирующего эффекта на фоне приема трентала. В основе механизма действия трентала лежит уменьшение вязкости крови и повышение эластичности эритроцитов, улучшение микроциркуляции и увеличение концентрации кислорода в тканях. Повышение эластичности эритроцитов, по-видимому, обусловлено ингибированием фосфодиэстеразы и повышением в результате этого содержания цАМФ в эритроцитах. Понижение вязкости крови может быть следствием уменьшения концентрации фибриногена в плазме и подавления агрегации эритроцитов и тромбоцитов.

В основе эндотелий-зависимого вазодилятирующего эффекта лежит способность клеток эндотелия секретировать оксид азота (NO), представляющий собой двухатомную молекулу, образующуюся из L-аргинина под действием эндотелиальной NO-синтазы. В нормальных условиях тонически высвобождаемый NO диффундирует в гладкомышечные клетки сосудов, где активирует связанную с протеином G гуанилатциклазу, что приводит к увеличению внутриклеточного содержания циклического гуанозинмонофосфата с последующим расслаблением гладкомышечных клеток сосудов. Оксид азота также ингибирует адгезию тромбоцитов, тормозит образование эндотелина, подавляет воспалительный ответ.

Техническим результатом изобретения является способ коррекции ишемии конечности, включающий использование L-аргинина, относящегося к донаторам NO.

Технический результат достигается тем, что на 7 день после моделирования ишемии конечности вводили внутрибрюшинно, один раз в сутки L-аргинин в дозе от 30 мг/кг до 200 мг/кг, который является донатором NO и регулирует тканевую перфузию за счет эндотелий-зависимого вазодилятирующего эффекта.

СПОСОБ ОСУЩЕСТВЛЯЕТСЯ СЛЕДУЮЩИМ ОБРАЗОМ

Опыты проводят на белых крысах-самках линии Wistar массой 250-300 г.

Моделирование ишемии конечности проводили под наркозом (этаминал натрия 35 мг/кг) путем удаления участка магистрального сосуда, включающего бедренную артерию, подколенную артерию и начальные отделы артерии голени. Оценку микроциркуляции в мышцах голени животного проводят при помощи лазер-доплеровского флоуметра Biopac-systems MP-100 и датчика TSD-144 (США). Для этого под наркозом (этаминал натрия 35 мг/кг) иссекали участок кожи в переднебоковом участке области голени. Запись уровня микроциркуляции осуществляли в пяти точках (середина длины мышцы, точки на 3-5 мм выше и ниже, латеральное и медиальнее первой). Регистрация уровня микроциркуляции проводилась в группах с моделированием ишемией конечности и в группах на фоне лечения ишемии конечности L-аргинином.

При статистической обработке данных рассчитывали среднее значение, величину стандартного отклонения. Различия считали достоверными при р<0,05.

ПРИМЕР КОНКРЕТНОГО ВЫПОЛНЕНИЯ

Уровень микроциркуляции в правой и левой мышцах голени интактных животных не отличался друг от друга и составлял 533,2±9,7 п.е. (перфузионных единиц). Результаты оценки уровня микроциркуляции у животных с моделированием ишемии задней конечности и групп, получавших лечение представлены в таблице (табл.1). L-аргинин в дозе 30 мг/кг и 200 мг/кг вводили внутрибрюшинно, один раз в сутки на 7 день после моделирования ишемии конечности.

Из таблицы видно, что уровень микроциркуляции после операции моделирования ишемии задней конечности резко падает (с 533,2 п.е. до 209,2 п.е.; р<0,001), а затем медленно восстанавливается. На 28 сутки уровень микроциркуляции в контроле остается достоверно ниже значения в группе интактных животных (369,6 п.е. 533,2 п.е.; р<0,001).

На фоне лечения отличия между опытными и контрольными группами появляются уже на 10 сутки, причем микроциркуляция в группе животных, получавших L-аргинин в дозе 200 мг/кг достоверно выше, чем в контроле (р<0,05).

На 21 сутки лечения контрольная группа и группа животных с лечением 30 мг/кг достоверно не отличались, а в группе с лечением 200 мг/кг уровень микроциркуляции был выше, чем в контроле (р<0,001).

Максимальные различия между опытом и контролем имели место на 28 сутки. Здесь статистически значимая разница отмечена в обеих опытных группах (30 мг/кг и 200 мг/кг) (р<0,001). Следует отметить, что уровень микроциркуляции в группе животных, получавших L-аргинин в дозе 200 мг/кг, на 28 сутки достоверно не отличался от такового в группе интактных животных (489,4 п.е. против 533,2 п.е.; р>0,05).

Таким образом, применение L-аргинина в качестве донатора N0 позволяет констатировать активизацию фармакологической коррекции ишемии задней конечности.

Таблица 1
Влияние L-аргинина на показатели микроциркуляции крыс на фоне ишемии задней конечности (М±m; в абсолютных значениях, n=10)Группа10 сутки21 сутки28 суткиКритическая ишемия конечности209,2±6,4 п.е.312,1±13,9 п.е.369,6±14,6 п.е.Критическая ишемия конечности + Аргинин в дозе 30 мг/кг226,2±9,2 п.е.282,8±13,6 п.е.426,3±15,6 п.е.*Критическая ишемия конечности + Аргинин в дозе 200 мг/кг239,5±11,6 п.е.*415,4±19,7 п.е.*489,4±18,5 п.е.** - при Р<0,05 по сравнению с контролем

Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной медицине, и может быть использовано для коррекции ишемии конечности. Для этого с 7-го по 28-й день после моделирования ишемии конечности вводят внутрибрюшинно L-аргинин в дозе от 30 до 200 мг/кг веса. Способ обеспечивает эффективное лечение ишемии конечности в эксперименте за счет оптимальных доз и режима введения донатора NO - L-аргинина. 1 табл.

Способ фармакологической коррекции ишемии конечности, отличающийся тем, что в эксперименте лабораторному животному с экспериментальной ишемией конечности вводят внутрибрюшинно L-аргинин однократно с 7-го по 28-й день после моделирования ишемии в дозе от 30 до 200 мг/кг.