ЗАМЕЩЕННЫЕ ОМЕГА-АЗОЛИЛАЛКАНАНИЛИДЫ, СПОСОБ ИХ ПОЛУЧЕНИЯ И ПРИМЕНЕНИЕ В КАЧЕСТВЕ АНТИАГРЕГАНТОВ Российский патент 2008 года по МПК C07D233/54 C07D235/04 C07D249/08 A61K31/4172 A61K31/4184 A61K31/4196 A61P7/02 

Изобретение относится к химии гетероциклических соединений, а именно к замещенным ω-азолилалкананилидам (ω-(1Н-азол-1-ил)-N-фенилалканамидам) общей формулы I:

где Z и Y означают атом азота или СН-группу, или одновременно являются цепью С-СН=СН-СН=СН-С, составляющей вместе аннелированное кольцо; n означает целое число от 1 до 3; R одинаковые или разные означают атом водорода, галогена, алкильную группу с числом атомов углерода от 1 до 4, алкоксигруппу с числом атомов углерода от 1 до 4, алкилендиоксигруппу, бензилоксигруппу, перфторалкильную группу с числом атомов углерода от 1 до 4, нитрогруппу, алкоксикарбонильную группу, карбоксильную группу, галогенфенилтиогруппу, галогенбензоилгруппу, m означает целое число атомов от 0 до 5; к их солям с кислотами, обладающим антиагрегационной активностью.

Соединения общей формулы I могут найти применение в качестве медицинских, ветеринарных и фитотерапевтических препаратов, в первую очередь антиагрегантов.

Изобретение относится также к способам получения соединений общей формулы I и использованию этих соединений в качестве антиагрегантов.

Известны многие продукты с азольными циклами, в частности N-фенил-N-бензил 2-гетерилацетамиды с бактерицидной активностью, применяемые в сельском хозяйстве и садоводстве, общей формулы II, где Х и Y атом означают атом водорода, низший алкил или атом галогена; Het означает пиперидино, метилпиперидино, диметилпиперидино, гексаметиленимино, пиразолил, имидазолил или 1,2,4-триазолил [патент Японии № 4145067, МКИ C07D 249/08. - Заявл. - 04.10.1990].

Известны 2-(азол-1-ил)-N-фенилацетамиды с противораковой активностью общей формулы III, где R означает атом водорода, метильную группу или нитрогруппу; R₁ означает атом водорода или метильную группу [Kasai S., Nagasawa H., Yamashita M. New Antimetastatic Hypoxic Cell Radiosensitizers: Desing, Synthesis, and Biological Activities of 2-Nitroimidazole-acetamide, TX-1877, and its Analogues. // Bioorg. Med. Chem. - 2001. - No.9. - P.453-64].

Известны 2-азолил-N,N-дифенилацетамиды общей формулы IV, где Z означает атом азота или СН-группу S.Dalkara, A.Willke. Synthesis of Some N-Arylazole Acetamide Derivatives and Their Anticonvulsant and Antimicrobial Activities. // Arzneim. - Forsch. / Drug Res. - 1994. - Vol.44 (II). - № 8. - P.920-924], которые обладают противосудорожной активностью.

Наиболее близкими к заявленным замещенным ω-(1Н-азол-1-ил)-N-фенилалканамидам по структуре и по способу получения являются N-фенил-2-(азол-1-ил)-2-алканамиды общей формулы V, где R₁ означает алкильную группу с числом атомов углерода от 1 до 10, фенильную или феноксигруппу; R₂ означает атом водорода, алкильную группу с числом атомов углерода от 1 до 5, аллильную группу; R₃ означает алкильную группу с числом атомов углерода от 1 до 8, аллильную группу, циклоалкильную группу, фенильную группу; R₄ означает атом водорода, низшую алкильную группу или атом галогена [патент Японии №58052256, МКИ C07D 249/10. - Заявл. - 24.09.1981], применяемые как бактерициды промышленного или сельскохозяйственного назначения, гербициды или фунгициды. Соединения общей формулы V получают в две стадии, сначала взаимодействием 2-бромацилгалогенидов с аминами в инертном растворителе, например бензоле, толуоле или тетрагидрофуране в присутствии водного раствора карбоната или гидроксида натрия при температуре -10 - +10°C, получают 2-бромацетамиды, которыми алкилируют азолы в диметилсульфоксиде в присутствии 1,8-диазобицикло[5.4.0]ундец-7-ена (ДБУ) при нагревании до 60°C в течение 24 часов.

Первое место среди причин летального исхода занимают заболевания сердечно-сосудистой системы. Назначение антитромбоцитарных препаратов (антиагрегантов) предупреждает развитие тяжелых сосудистых осложнений, снижает риск тяжелых сосудистых исходов: инфаркта миокарда, инсультов. Данная группа препаратов является важной составной частью лечения и профилактики стенокардии, атеросклероза периферических артерий и проявлений атеротромбоза.

Антиагреганты ингибируют агрегацию тромбоцитов, уменьшают их способность к склеиванию и прилипанию (адгезии) к эндотелию кровеносных сосудов. Антиагреганты способны не только предупреждать агрегацию, но и вызывать дезагрегацию уже агрегированных кровяных пластинок. Применяют их для предупреждения образования послеоперационных тромбов, при тромбофлебитах, тромбозах сосудов сетчатки, нарушениях мозгового кровообращения, а также для предупреждения тромбоэмболических осложнений при ишемической болезни сердца, в том числе и при инфаркте миокарда [Харкевич Д.А. Фармакология. - М.: ГЭОТАР Медицина, 2000. - 664 с.].

Важное место среди антиагрегантов занимают производные азолов, в первую очередь имидазола, являющиеся ингибиторами тромбоксансинтетазы [Демина О.В., Ходонов А.А., Швец В.И., Варфоломеев С.Д. Агрегация тромбоцитов человека: молекулярно-кинетические механизмы и пути регуляции. // Биолог. мембраны. - 2002. - Т.19, № 2. - С.115-152].

После стимуляции клетки арахидоновая кислота высвобождается из мембранных фосфолипидов и превращается в результате последовательности ферментных реакций (каскад арахидоновой кислоты) во множество различных производных метаболитов по двум основным путям - липоксигеназному и циклооксигеназному. Продуктами циклооксигеназного пути являются широко распространенные простагландины, из устойчивого простациклина PGH₂ образуется как простациклин (PGI₂), образующийся в эндотелии сосудов, так и тромбоксан (ТхА₂), который синтезируется в тромбоцитах. При ряде заболеваний наблюдается дисбаланс между этими двумя эйкозаноидами, перепроизводство тромбоксана А₂ выявлено при многих паталогических состояниях. Ингибиторы тромбоксансинтетазы, например дазоксибен, блокируют биосинтез тромбоксана, при этом наблюдается конверсия тромбоцитарных эндоперекисей (PGH₂) в простациклин PGI₂, что способствует повышению атромбогенных свойств сосудистой стенки, ингибированию адгезии тромбоцитов, их агрегации и коагуляции, а также может сопровождаться понижением давления [Garsia-Szabo R.R., Peterson M.B., Watkins W.D. et. al. Thromboxane generation after thrombin. Protective effect of thromboxane synthetase inhibition on lang Huid balance. // Circ. Res. - 1983. - Vol.53, N2. - P.214-222].

Многие антиагреганты - ингибиторы тромбоксансинтетазы применяют в качестве вазодилаторов, антигипертензивных препаратов, антиангинальных средств, церебровазодилаторов, коронарных вазодилаторов, средств лечения бронхиальной астмы и ринита.

Наиболее близкими к заявленным замещенным ω-(1Н-азол-1-ил)-N-фенилалканамидам по применению в качестве антиагрегантов являются феноксиалкилимидазолы общей формулы IV, где R означает водород или алкил; с числом метиленовых групп n от 1 до 9; m от 0 до 8; Z означает атом О, S или NH группу [Патент США № 4632934. - Заявл. - 21.08.1979], которые ингибируют тромбоксансинтетазу и за счет этого находят применение как антигипертензивные противовоспалительные, противотромбоэлические средства [Cross P.E., Dickinson R.P., Parry M.J., Randall M.J. Selective tromboxane synthetase Inhibitors. I. 1-[(Aryloxy)alkyl]-1H-imidazoles. // J. Med. Chem. - 1985. - Vol.28. - P.1427-32]

Техническая задача данного изобретения состоит в увеличении эффективности антиагрегационных лекарственных средств и расширении ассортимента гематотропных препаратов.

Поставленная задача решается получением соединений общей формулы I, обладающих антиагрегационной активностью. Согласно настоящему изобретению ω-азолилалкананилиды (ω-(1Н-азол-1-ил)-N-фенилалканамиды) формулы I получают двумя способами. По первому способу взаимодействием ω-галогенацилгалогенидов, например хлорацетилхлорида с замещенными анилинами (VII) в среде органических растворителей, например хлористом метилене, хлороформе, толуоле и др., в присутствии водного раствора гидроксидов или карбонатов щелочных или щелочно-земельных металлов при температуре от 0 до 20°С по реакции Шоттена-Баумана получали ω-галогенациланилиды (VIII), которыми алкилировали азолаты щелочных металлов в среде полярного апротонного растворителя, например ацетонитрила, диметилформамида, диметилсульфоксида и др. при температуре от 40 до 150°С.

По второму способу получают соединения общей формулы I взаимодействием ω-азолилалкановых кислот (IX) с хлорирующими агентами, например хлоридом фосфора (V), хлоридом фосфора (III), тионилхлоридом, оксалилхлоридом, в инертном растворителе, например в диоксане, тетрагидрофуране, хлористом метилене и др., при температуре от 20 до 50°С получали гидрохлориды хлорангидридов ω-азол-1-илалкановых кислот (X), которые затем вводили в реакцию с замещенными анилинами (VII) в среде полярного апротонного растворителя, например ацетонитрила, диметилформамида, диметилсульфоксида либо хлористого метилена, диоксана в присутствии оснований, например триэтиламина, диазабициклооктана, ДБУ и др. при температуре от 20 до 60°С.

В приведенных схемах R, n, m, Z и Y имеют те же значения, что и в формуле I, X означает хлор, бром; М означает щелочной металл, например натрий, калий и т.п.; :В означает основание, например триэтиламин, ДБУ, гидроксид или карбонат щелочного или щелочно-земельного металлов.

Алкилированию азолов, в частности имидазола и 1,2,4-триазола, посвящено множество статей. Первоначально получают 1,2,4-триазолат щелочного металла, например, взаимодействием с гидридом натрия в ДМФА или с этилатом натрия в спирте, к которому затем прибавляют алкилгалогенид и получают 1-алкил-1,2,4-триазолы [Bergtrap M., Larsen P. Alkylation, acylation and silylation of azoles. // Acta Chem. Scand. - 1990. - Vol.44, № 10. - Р.1050-1057].

2-(Имидазол-1-ил)-N,N-дифенилацетамид получают взаимодействием 2-бром-N,N-дифенилацетамида с имидазолатом натрия в кипящем ДМФА в течение 48 ч [F.ÖzkanIi, S.Dalkara, Ü.Çaliş, A.Willke. Synthesis of Some N-Arylazole Acetamide Derivatives and Their Anticonvulsant and Antimicrobial Activities. // Arzneim.-Forsch. / Drug Res. - 1994. - Vol.44 (II). - № 8. - P.920-924].

Замещенные 2-галогенацетамиды (VIII), например бромацетамиды, получают взаимодействием анилинов (VII) с бромацилбромидом в эфире в присутствии водного раствора гидроксида натрия. S.Dalkara, A.Willke. Synthesis of Some N-Arylazole Acetamide Derivatives and Their Anticonvulsant and Antimicrobial Activities. // Arzneim.-Forsch. / Drug Res. - 1994. - Vol.44 (II). - № 8. - P.920-924].

Техническим результатом изобретения являются новые вещества - замещенные ω-(1Н-азол-1-ил)-N-фенилалкиламиды общей формулы I и способ их получения. В указанном патенте [патент Япония № 58052256, - Заявл. - 24.09.1981] предлагают получать целевые 1-замещенные азолы в трудноудаляемых растворителях, например, в диметилсульфоксиде в течение длительного времени взаимодействия. Мы предлагаем проводить алкилирование в легко удаляемых растворителях, например в ацетонитриле, при существенно меньшем времени взаимодействия. Нами предложен альтернативный способ получения целевых соединений из азолилалкановых кислот в две стадии. Вначале взаимодействием с хлорирующими агентами с высоким выходом получали хлорангидриды кислот, которыми затем ацилировали анилины.

Технической результатом изобретения также является применение ω-(1Н-азол-1-ил)-N-фенилалкиламиды формулы I в качестве антиагрегантов, которые превосходят по активности известный антиагрегационный препарат дазоксибен (гидрохлорид 4-[2-(имидазол-1-ил)этокси]бензойной кислоты) [J. Med. Chem. - 1985. - Vol.28. - P.1427-32], что позволяет увеличить эффективность антиагрегационных лекарственных средств и расширить ассортимент гематотропных препаратов. Эффект ω-(1Н-азол-1-ил)-N-фенилалкиламидов формулы I в экспериментах in vitro проявлялся в диапазоне фармакологически приемлемых концентраций 10^-4-10^-6 M, при этом оптическая плотность плазмы снижалась до 7,7-42,6%. Исследуемые соединения, например, 30, 45, 47 превосходили эталон дазоксибен, как при агрегации вызываемой АДФ, так и коллагеном.

Сравнивая степень влияния соединения 30 на АДФ-индуцированную агрегацию тромбоцитов in vivo в концентрациях 11, 16, 21 мг/кг, установлено, что оно во всех изученных концентрациях в разной степени проявляло антиагрегационное действие, при этом максимум действия наступал через 7, 9 и 11 часов в зависимости от используемой дозы. Степень подавления агрегации также зависела от дозы, и значения оптической плотности составляли 26,5% (11 мг/кг), 18,8% (16 мг/кг) и 16,9% (21 мг/кг) соответственно. Продолжительность эффекта соединения 30 в концентрации 11 мг/кг наблюдалась в интервале от 1 до 13 часов, а под влиянием концентраций 16 и 21 мг/кг не значительное подавление АДФ-индуцированной агрегации тромбоцитов наблюдалось и спустя 24 часа после введения. В то время как сравнительное изучение влияния дазоксибена на АДФ-индуцированную агрегацию тромбоцитов in vivo в концентрациях 11, 16, 21 мг/кг позволило установить, что максимум действия при изучении всех концентраций наступал через 1 час после введения препарата, при этом значения оптической плотности плазмы составляли 31% при изучении концентрации 11 мг/кг, 29,4% при изучении концентрации 16 мг/кг и 29,3% при изучении концентрации 21 мг/кг соответственно.

Сопоставление данных, полученных при изучении влияния соединения 30 в концентрациях 11, 16, 21 мг/кг на плазменные факторы свертывания крови in vivo, позволило установить, что изучаемое соединение во всех концентрациях увеличивало время образования сгустка. На максимуме действия соединение 30 в концентрациях 16 и 21 мг/кг (28,9, 29,2 с) показывало примерно равные результаты, а в концентрации 11 мг/кг (22,7 с) несколько уступало им. Таким образом, все изученные концентрации (11, 16, 21 мг/кг) соединения увеличивали время образования сгустка при изучении действия на плазменные факторы свертывания крови. При этом на максимуме действия соединение 30 в концентрациях 16 и 21 мг/кг (28,9, 29,2 с) в равной степени увеличивало время образования сгустка, а в концентрации 11 мг/кг (22,7 с) несколько уступало более высоким концентрациям. Эффект при использовании концентрации 16 и 21 мг/кг длился более 12 часов, а под действием концентрации 11 мг/кг до 8 часов. В то время как сравнительное изучение влияния дазоксибена в концентрациях 11, 16, 21 мг/кг на плазменные факторы свертывания крови in vivo, позволило установить, что изучаемое соединение во всех концентрациях увеличивало значения АЧТВ. При этом не зависимо от концентрации значимое увеличение времени образования сгустка наблюдалось через 3 часа после введения. Таким образом, все изученные концентрации (11, 16, 21 мг/кг) дазоксибена увеличивали время образования сгустка при изучении действия на плазменные факторы свертывания крови. При этом на максимуме действия активность всех концентраций была примерно равной, но продолжительность максимального эффекта увеличивалась с увеличением концентрации изучаемого соединения (1 час при концентрации 11 мг/кг, 2 часа при концентрации 16 мг/кг и 4 часа при концентрации 21 мг/кг). Непосредственно сам эффект при использовании концентрации 11 и 16 мг/кг длился в промежутке между 1 и 7 часами, а под действием концентрации 21 мг/кг на 2 часа дольше (между 1 и 9 часами).

Изобретение может быть проиллюстрировано следующими примерами.

Пример 1. 2-Хлор-N-фенилацетамид (1).

К смеси 19,7 мл 20%-ного раствора гидроксида натрия, 9,3 г (0,1 моль) анилина и 100 мл хлористого метилена, охлаждаемой в бане со льдом и солью до 5°C, при перемешивании добавляют по каплям 13,56 г, 9,6 мл (0,12 моль) 2-хлорацетилхлорида так, чтобы температура смеси не превышала 10°C, а затем перемешивают при комнатной температуре еще 2 часа. Выпавший осадок отфильтровывают и промывают водой, фильтрат промывают насыщенным раствором гидрокарбоната натрия (2×15 мл), водой (3×20 мл), рассолом (15 мл) и сушат над сульфатом магния. После отгонки растворителя в вакууме водоструйного насоса полученный остаток перекристаллизовывают из смеси гексан:толуол (2:1) и получают 19,64 г (86%) 2-хлор-N-фенилацетамида (1) с т.пл. 129-131°C.

Аналогично получены замещенные 2-хлор-N-фенилацетамиды. Таблица 1.

Таблица 1Температуры плавления и выход синтезированных 2-хлор-N-фенилацетамидов (n=1)СоединениеRmВыход, %Т.пл., °C1Н086129-13124-Cl185170-17234-OBn154139-14043,4-Cl₂292111-11353-CF₃18460-6264-CF₃198161-16274-i-Pr190130-13284-NO₂197159-16294-CO₂Et 8491-93

Пример 2. 2-(1,2,4-Триазол-1-ил)-N-фенилацетамид (10).

К суспензии 2,73 г (0,03 моль) 1,2,4-триазолата натрия, в 30 мл ацетонитрила при перемешивании добавляют 5 г (0,03 моль) 2-хлор-N-фенилацетамида (1), кипятят реакционную массу в течение 10 часов, выпавший осадок отфильтровывают и промывают 5 мл дистиллированной воды и высушивают. Получают 5,628 г технического продукта, являющегося смесью изомеров 1- и 4-алкилирования триазола, из которой методом «сухой» флеш-хроматографии, используя в качестве элюента смесь метанол:хлороформ 1:10, выделяют 3,20 г (57%) 2-(1,2,4-триазол-1-ил)-N-фенилацетамид (10) с т.пл. 146-148°C.

Пример 3. 2-(1,2,4-Триазол-1-ил)-N-(4-трифторметилфенил)ацетамид (17).

К 1,61 г (0,01 моль) 4-1,1,1-трифторметиланилина в 20 мл абсолютного ацетонитрила при перемешивании добавляют 1,82 г (0,01 моль) гидрохлорида хлорангидрида 1,2,4-триазол-1-ил уксусной кислоты и 2,02 г (0,02 моль) триэтиламина. Перемешивают в течение двух часов. Выпавший осадок отфильтровывают, промывают 2 мл воды и 2 мл ацетонитрила. Осадок перекристаллизовывают из изопропилового спирта. Получают 2,16 г (41%) 2-(1,2,4-Триазол-1-ил)-N-(4-1,1,1-трифторметилфенил)ацетамида (17) с т.пл. 187-188°C.

Аналогично получены замещенные 2-(1,2,4-триазол-1-ил)-N-фенилацетамиды (таблица 2).

Пример 4. 2-(Имидазол-1-ил)-N-фенилацетамид (11).

К суспензии 2,70 г (0,03 моль) имидазолата натрия, в 25 мл ацетонитрила при перемешивании добавляют 5 г (0,03 моль) 2-хлор-М-фенилацетамида (1), кипятят в течение 10 часов, выпавший осадок отфильтровывают и промывают 5 мл дистиллированной воды, высушивают и перекристаллизовывают из изопропилового спирта, получают 2,64 г (64%) 2-(имидазол-1-ил)-N-фенилацетамид (2) с т.пл. 138-140°C.

Аналогично получены замещенные 2-(имидазол-1-ил)-N-фенилацетамиды (таблица 2).

Пример 5. Этил 4[(1Н-бензимидазол-1-ил ацетил)амино]бензоат (43).

К 1,65 г (0,01 моль) этил 4-аминобензоату в 10 мл абсолютного ацетонитрила при перемешивании добавляют порциями 2,37 г (0,01 моль) гидрохлорида хлорангидрида (бензимидазол-1-ил)уксусной кислоты и 2,02 г (0,02 моль) триэтиламина. Нагревают до 40°С и выдерживают при этой температуре при перемешивании в течение восемнадцати часов. Выпавший осадок отфильтровывают, промывают водой (2×3 мл), перекристаллизовывают из метилового спирта. Получают 1,03 г (32%) этил 4-[(1Н-бензимидазол-1-ил ацетил)амино]бензоата (43)с т.пл. 222-223°C.

Аналогично получены замещенные 2-(1Н-бензимидазол-1-ил ацетил)-N-фенилацетамиды (таблица 3).

Пример 6. 4-(1Н-имидазол-1-ил)-N-(3-нитрофенил)бутанамид (26).

К 1,38 г (0,01 моль) 3-нитроанилина в 10 мл абсолютного диметилформамида при перемешивании добавляют порциями 1,725 г (0,01 моль) гидрохлорида хлорангидрида 4-(имидазол-1-ил)бутановой кислоты и 2,02 г (0,02 моль) триэтиламина. Реакционную массу нагревают до 40°С в течение суток. Выпавший осадок отфильтровывают, промывают 5 мл воды и 1 мл изопропилового спирта, фильтрат упаривают в вакууме водоструйного насоса. К полученному остатку добавляют 10 мл воды и фильтруют. Полученный осадок перекристаллизовывают из изопропилового спирта. Получают 0,56 г (26%). 4-(1Н-имидазол-1-ил)-N-(3-нитрофенил)бутанамид (26) с т.пл. 145-7°C.

Пример 7. Этил 3-([4-(1Н-имидазол-1-ил)бутаноил]амино)бензоат (30).

а) Гидрохлорид хлорангидрида 4-(имидазол-1-ил)бутановой кислоты. К 1,16 г (0,0075 моль) 4-(имидазол-1-ил)бутановой кислоты в 5 мл абсолютного диоксана добавляют порциями при перемешивании 1,56 г (0,0075 моль) пятихлористого фосфора. Реакционную массу нагревают до 40°C в течение шести часов до полного растворения пятихлористого фосфора, охлаждают до комнатной температуры и перемешивают еще десять часов. Реакционную массу упаривают в вакууме водоструйного насоса. Получают 1,56 г (99%) гидрохлорид хлорангидрида 4-(имидазол-1-ил)бутановой кислоты в виде масла. По результатам потенциометрического аргентометрического титрования определяют содержание хлора. Найдено: Cl 34,35%; С₇Н₁₀Cl₂N₂O; вычислено: Cl 33,97%. В дальнейшем продукт используют без дополнительной очистки.

б) К 1,25 г (0,0075 моль) 3-этоксикарбониланилину в 10 мл абсолютного диоксана при перемешивании добавляют порциями 1,56 г (0,0075 моль) гидрохлорида хлорангидрида 1Н-имидазол-1-ил бутановой кислоты и 1,515 г (0,0075 моль) триэтиламина. Реакционную массу нагревают в течение сорока восьми часов. Выпавший осадок отфильтровывают, промывают 10 мл воды, перекристаллизовывают из изопропилового спирта. Получают 0,56 г (26%) этил 3-{[4-(1Н-имидазол-1-ил)бутаноил]амино}бензоата (30) с т.пл. 146-148°С.

Аналогично получены замещенные ω-(азол-1-ил)-N-фенилалканамиды.

ЯМР ¹Н-спектры записаны на приборе «Bruker AC-200» (рабочая частота 200 МГц), сдвиги измерены относительно тетраметилсилана, в качестве растворителя использовали d₆-ДМСО. ИК-спектры регистрировали с призмами NaCl в тонкой пленке в вазелиновом масле на спектрометре «Specord M80».

Таблица 2Температуры плавления и выход синтезированных ω-(1,2,4-триазол-1-ил)-N-фенилалканамидов и ω-(имидазол-1-ил)-N-фенилалканамидовСоединениеZnRmВыход, %Т.пл., °C123456710N1Н057146-14811СН1Н064138-14012N14-Cl160198-19913СН14-Cl198191-19214N14-Br174210-21115СН14-Br164207-20816N13,4-Cl₂263207-20817N13-CF₃267146-14718СН13-CF₃160162-16519N23-CF₃138200-20120N14-CF₃141187-18821СН14-CF₃127191-19222N14-i-Pr143193-19523СН14-i-Pr148188-19024N14-NO₂168230-23225СН14-NO₂162140-14426СН33-NO₂126145-14727N14-CO₂Et157170-17228СН14-CO₂Et151171-17329СН23-CO₂Et152120-12130СН33-CO₂Et126146-14731N13,4-(ОСН₂СН₂O)269205-20732СН13,4-(ОСН₂СН₂O)246190-19333N14-OCH₂Ph175184-18634СН14-OCH₂Ph183180-18335N13-NO₂, 5-(4-FPhS)256180-18336СН13-NO₂, 5-(4-FPhS)251204-20637СН12-(2-ClBz), 4-Br258310-312Таблица 3Температуры плавления и выход синтезированных 2-(бензимидазол-1-ил)-N-фенилацетамидов (n=1, m=1)СоединениеRВыход, %Т.пл., °С384-Cl11247-248394-Br25260-261404-CF₃38207-209414-NO₂33272-273424-ОСН₃31200-201434-CO₂Et15222-223443-CF₃18197-199

Пример 8. Гидрохлорид 2-(имидазол-1-ил)-N-(4-хлорофенил)ацетамида (45).

К раствору 0,326 г (1,38 ммоль) 2-(имидазол-1-ил)-N-(4-хлорофенил)ацетамида (13) в 5 мл метилового спирта при перемешивании добавляют 1,41 мл (2,08 ммоль) 1,47М раствора хлороводорода в метаноле. Растворитель отгоняют в вакууме водоструйного насоса досуха. Получают 0,373 г (98%) гидрохлорида 2-(имидазол-1-ил)-N-(4-хлорофенил)ацетамида (45) с т.пл. 216-217°C.

Аналогично получены гидрохлориды замещенных 2-(азол-1-ил)-N-фенилалканамидов: из этил 4-[2-(1Н-имидазол-1-ил)ацетиламино]бензоата (28) гидрохлорид этил 4-[2-(1Н-имидазол-1-ил)ацетиламино]бензоата (46) с т.пл. 105-106°С, из этил 4-[2-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)ацетиламино]бензоата (27) гидрохлорид 4-[2-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)ацетиламино]бензоата (47) с т.пл. 144-146°С.

Пример 9. Проведение испытаний ω-азол-1-илалкан анилидов на наличие антиагрегационной активности in vitro.

Методика проведения эксперимента. Богатую тромбоцитами плазму (в среднем 3×10⁸ в 1 см³ тромбоцитов) получали центрифугированием свежеполученной крови здоровых доноров (стабилизатор - 3.8%-ный цитрат натрия, соотношение крови и раствора цитрата 9:1) в течение 10 минут при 1000 об/мин при комнатной температуре. До проведения эксперимента и в конце его в каждом образце подсчитывали количество тромбоцитов. В том случае, если плазма содержала большее количество кровяных пластинок, то ее разводили до необходимого количества безтромбоцитарной плазмой, полученной центрифугированием цитратной крови в течение 10 минут при 3000 об/мин. В качестве индуктора агрегации использовали АДФ, коллаген (НПО «РЕНАМ», Россия). Агрегацию тромбоцитов изучали методом светорассеяния по методу Born [Born J.V.R. Aggregation of blood platelets by adenosine diphosphate and its reversal. // Nature - 1962. - V.194, N5. - P.927-929. Born J.V.R. Quantitative investigation into the aggregation of blood platelets. // J. Physiol. - 1962. - V.162, N4. - P.487-511] на агрегометре фирмы «CHRONO-LOG» (США).

Условия проведения эксперимента: 37°C, объем богатой тромбоцитами плазмы 450 мкл, объем исследуемого раствора вещества 50 мкл, время прединкубации с препаратом ингибитора 5 минут при перемешивании, объем индуктора агрегации 50 мкл, конечная концентрация для АДФ 1×10^-5 М, коллагена - 0,2 мг/мл. (В качестве контроля использовали богатую тромбоцитами плазму в объеме 450 мл). Количественной характеристикой степени агрегации служило относительное падение оптической плотности на максимуме амплитуды агрегатограммы. В процессе записи наблюдали изменение оптической плотности исследуемой плазмы в диапазоне 100% (богатой тромбоцитами плазмы) до 0% (безтромбоцитарная плазма) (длина волны зондированного светового потока 660 нм). Результат выражали в процентах падения оптической плотности на максимуме амплитуды агретограммы.

Были проведены эксперименты сравнения антиагрегационных свойств веществ и эталона, известного препарата дазоксибена.

Таблица 5Влияние ω-(1Н-азол-1-ил)-N-фенилалкиламидов и дазоксибена на АДФ-индуцированную агрегацию тромбоцитов in vitroСоединение% падения оптической плотности плазмыКонтрольКонцентрация соединения-антиагреганта, моль/л10^-3 М10^-4 М10^-5 M10^-6 М10^-7 M3059,1±1,316,9±1,518,3±1,226,4±1,730,7±2,246,6±2,64559,2±1,214,0±1,822,2±2,142,9±1,343,0±2,048,0±2,54756,3±2,318,0±1,718,6±1,624,5±2,328,4±2,846,1±2,3Дазоксибен57,9±1,740,9±1,340,1±1,741,0±1,846,1±1,954,0±2,8Таблица 6Влияние ω-(1Н-азол-1-ил)-N-фенилалкиламидов и дазоксибена на коллаген-индуцированную агрегацию тромбоцитов in vitroСоединение% падения оптической плотности плазмыКонтрольКонцентрация соединения- антиагреганта, моль/л10^-3 М10^-4 М10^-5 M10^-6 М10^-7 M3058,3±1,711,4±1,915,1±1,615,4±1,828,1±1,349,3±1,7Дазоксибен58,7±1,427,1±1,730,2±1,337,8±1,246,1±1,656,9±2,2

Пример 10. Проведение биологических испытаний ω-азол-1-илалкан анилидов на наличие антиагрегационной активности in vivo.

Выбранные соединения вводились кроликам породы Шиншилла внутривенно в краевую вену уха в дозах 11, 16, 21 мг/кг. Первый забор крови для исследования осуществлялся через 30 мин после введения, далее через 1 час, 3, 5, 7, 9, 11 и 24 часа. В том случае если оптическая плотность плазмы через 11 часов после введения исследуемого соединения значительно отличалась от контрольных значений, то забор крови делали еще через 13 и 15 часов после введения. В качестве индуктора использовали АДФ в пороговой концентрации (1×10^-5 М).

Полученные результаты суммированы и представлены в таблице 7.

Пример 11. Сравнительное изучение действия новых производных азолилалкановых кислот и дазоксибена на плазменные факторы свертывания крови in vivo.

Соединения вводились кроликам породы Шиншилла внутривенно в краевую вену уха, в дозах 11,16, 21 мг/кг. Полученные результаты суммированы и представлены в таблице 8. Первый забор крови для исследования осуществлялся до введения изучаемого соединения (контроль). Далее через 30 мин после введения, через 1 час, 3, 5, 7, 9, 11 и 24 часа. В том случае если получаемые результаты значительно отличалась от контрольных значений через 11 часов после введения исследуемого соединения, то забор крови делали еще через 13 и 15 часов после введения.

Таблица 7Влияние соединения 30 и дазоксибена на максимальную амплитуду агрегатограмм в экспериментах in vivoВеществомг/кг% падения оптической плотностиКонтрольВремя после введения30 мин1 ч3 ч5 ч7 ч9 ч11 ч13 ч15 ч24 ч301160,1±1,350,9±1,539±1,933,2±2,127,4±1,426,5±1,729,5±1,638,7±2,549±1,959,8±2,260,6±2,91661,1±1,649,1±1,836,8±1,336±1,934,6±2,221,5±2,118,8±1,122,1±1,330,1±1,535,1±2,656,2±2,52159,7±1,247,2±1,432,7±1,125,8±1,622±2,120±1,918,1±1,716,9±2,319,1±1,325,2±2,354±3,4Дазоксибен1159,7±1,145,7±2,331±1,433,5±1,844,2±2,457,5±1,159,1±1,559,5±2,5--61,2±2,81662,3±2,146,3±1,329,4±1,130,2±1,433,2±2,251,7±1,858,1±1,759,2±2,1--60,9±2,52160,6±1,648,1±1,430±1,729,3±1,130,3±1,240,9±1,654,7±2,358,7±1,9--59±1,8Примечание: * - достоверно, по сравнению с контролем, при р<0,05Таблица 8Влияние соединения 30 и дазоксибена на показатели АЧТВ кроликов при внутривенном введении (М±т).Веществомг/кгЗначения АЧТВконтрольВремя после введения30 мин1 ч3 ч5 ч7 ч9 ч11 ч13 ч15 ч24 ч301115,7±1,315,2±1,515,9±1,116,4±1,618±1,421,3±2,322,7±2,220,3±1,218,2±1,916,8±2,415,4±2,11615,3±1,615,7±1,815,9±1,119,5±2,123,5±1,426±1,828,1±1,328,9±1,226,1±2,324,1±2,515,2±1,92116,1±1,116,7±1,617±2,119±1,322,9±1,126,5±1,829,1±1,629,2±2,329±1,927,4±1,516,3±2,4Дазоксибен1114,8±1,415,3±1,616,6±1,223,3±1,921,4±1,317,5±2,115,5±1,215,4±1,7--15,1±2,31615,1±1,115,2±1,416±1,724,8±1,324±1,917±1,215,3±2,415,4±2,2--15,3±1,82115,5±1,715,9±1,316,6±1,224,3±1,923,5±1,523,1±2,118,3±1,816,3±1,6--15,6±2,1

Применение ω-(1Н-азол-1-ил)-N-фенилалкиламидов формулы I в качестве антиагрегантов в медицине позволяет увеличить эффективность антиагрегационных лекарственных средств и расширить ассортимент гематотропных препаратов. По проявленному эффекту как в эксперементах in vitro, так и in vivo некоторые исследуемые соединения превосходили эталон дазоксибен, как при агрегации вызываемой АДФ, так и коллагеном, оказывали дозазависимое влияние на плазменные факторы свертываемости крови. Таким образом, указанные соединения могут расширить арсенал лекарственных препаратов? применяемых при заболеваниях сердечно-сосудистой системы.

Изобретение относится к замещенным ω-азолилалкананилидам. Описываются замещенные ω-(1Н-азол-1-ил)-N-фенилалканамиды общей формулы I:

где Z и Y означают атом азота или СН-группу, или одновременно являются цепью С-СН=СН-СН=СН-С, составляющей вместе аннелированное кольцо, n означает целое число от 1 до 3, R одинаковые или разные означают атом водорода, галогена, алкильную группу с числом атомов углерода от 1 до 4, алкоксигруппу, алкилендиоксигруппу, бензилоксигруппу, перфторалкильную группу с числом атомов углерода от 1 до 4, нитрогруппу, алкоксикарбонильную группу, карбоксильную группу, галогенфенилтиогруппу, галогенбензоилгруппу, m означает целое число атомов от 0 до 5, их соли с кислотами. Также описываются способы получения соединений I и их применение в качестве антиагрегационных препаратов. Технический результат: получены новые соединения, обладающие полезными биологическими свойствами. 4 c.п. ф-лы, 8 табл.

1. Замещенные ω-азолилалкананилиды общей формулы I

где Z и Y означают атом азота или СН-группу, или одновременно являются цепью С-СН=СН-СН=СН-С, составляющую вместе аннелированное кольцо, n означает целое число от 1 до 3, R одинаковые или разные означают атом водорода, галогена, алкильную группу с числом атомов углерода от 1 до 4, алкоксигруппу, алкилендиоксигруппу, бензилоксигруппу, перфторалкильную группу с числом атомов углерода от 1 до 4, нитрогруппу, алкоксикарбонильную группу, карбоксильную группу, галогенфенилтиогруппу, галогенбензоилгруппу, m означает целое число атомов от 0 до 5, их соли с кислотами.

где Z и Y означают атом азота или СН-группу, или одновременно являются цепью С-СН=СН-СН=СН-С, составляющую вместе аннелированное кольцо, n означает целое число от 1 до 3, R одинаковые или разные означают атом водорода, галогена, алкильную группу с числом атомов углерода от 1 до 4, алкоксигруппу, алкилендиоксигруппу, бензилоксигруппу, перфторалкильную группу с числом атомов углерода от 1 до 4, нитрогруппу, алкоксикарбонильную группу, карбоксильную группу, галогенфенилтиогруппу, галогенбензоилгруппу, m означает целое число атомов от 0 до 5, заключающийся в том, что ω-галогенацилгалогенидами ацилируют замещенные анилины в среде органических растворителей, в присутствии водного раствора гидроксидов или карбонатов щелочных или щелочноземельных металлов при температуре от 0 до 20°С с получением ω-галогенацетанилидов формулы II, где R, m, n имеют те же значения, что и в формуле I, X означает галоген, которые подвергают взаимодействию с азолатами щелочных металлов в среде полярного апротонного растворителя при температуре от 40 до 150°С.

где Z и Y означают атом азота или СН-группу, или одновременно являются цепью С-СН=СН-СН=СН-С, составляющую вместе аннелированное кольцо, n означает целое число от 1 до 3, R одинаковые или разные означают атом водорода, галогена, алкильную группу с числом атомов углерода от 1 до 4, алкоксигруппу, алкилендиоксигруппу, бензилоксигруппу, перфторалкильную группу с числом атомов углерода от 1 до 4, нитрогруппу, алкоксикарбонильную группу, карбоксильную группу, галогенфенилтиогруппу, галогенбензоилгруппу, m означает целое число атомов от 0 до 5, заключающийся в том, что ω-азолилалкановые кислоты формулы III, где n, Z и Y имеют те же значения, что и в формуле I, вводят во взаимодействие с хлорирующими агентами в инертном растворителе при температуре от 20 до 50°С с получением гидрохлоридов хлорангидридов ω-азол-1-илалкановых кислот формулы IV, где n, Z и Y имеют те же значения, что и в формуле I, которыми ацилируют замещенные анилины в среде полярного апротонного растворителя, в присутствии оснований при температуре от 20 до 60°С

где Z и Y означают атом азота или СН-группу, или одновременно являются цепью С-СН=СН-СН=СН-С, составляющую вместе аннелированное кольцо, n означает целое число от 1 до 3, R одинаковые или разные означают атом водорода, галогена, алкильную группу с числом атомов углерода от 1 до 4, алкоксигруппу, алкилендиоксигруппу, бензилоксигруппу, перфторалкильную группу с числом атомов углерода от 1 до 4, нитрогруппу, алкоксикарбонильную группу, карбоксильную группу, галогенфенилтиогруппу, галогенбензоилгруппу, m означает целое число атомов от 0 до 5, и их солей с кислотами в качестве антиагрегационных препаратов.