Изобретение относится к области аналитической химии и может быть рекомендовано для селективного определения хлорацетанилидных гербицидов (ацетохлора, бутахлора, алахлора) в объектах окружающей среды - почве, продуктах питания, промышленных сточных и природных водах.
Известен способ определения хлорацетанилидных гербицидов (ацетохлор, бутахлор, алахлор) с применением иммуноферментного анализа (WEB: www.abraxiskits.com). Недостатками данного способа являются относительно низкая чувствительность (например, предел обнаружения ацетохлора 0,19 нг/мл, что превышает ПДК), продолжительность (включает несколько стадий), одноразовое использование дорогостоящих биореагентов, косвенное определение аналитов после введения в пробу дополнительных ферментных меток.
Известен способ определения бутахлора с применением иммуноферментного анализа (GUO Yongen, CHEN Jiahua, WANG Nengdong, ZHANG Xiu, GUO Zhenquan, JIN Shenq / Preparation and Application of Polyclonal Antibody to Butachlor // Anal Lett Vol.38, №4, pp.447-452). Недостатками данного способа являются продолжительность (включает несколько стадий), низкая чувствительность (0,5 нг/мл), одноразовое использование дорогостоящих биореагентов, косвенное определение бутахлора после введения в пробу дополнительных ферментных меток.
Наиболее близким по технической сущности и достигаемому результату является способ определения ацетохлора с применением пьезокварцевого иммуносенсора в проточно-инжекционном режиме (Mikhail Yu. Lebedev; Sergei A. Eremin; Petr Skladal // Development of the Piezoelectric Biosensor for Acetochlor Detection // Anal Lett Vol 36, Issue 11 (2003) P.: 2443-2457). Недостатком данного способа является невысокая чувствительность (предел обнаружения равен 0,2 нг/мл, ПДК гербицидов данной группы составляет 0,1 нг/мл). Такой способ не позволяет осуществлять мониторинг хлорацетанилидных гербицидов в объектах окружающей среды.
Задачей настоящего изобретения является снижение предела обнаружения хлорацетанилидных гербицидов (ацетохлор, бутахлор, алахлор), увеличение чувствительности определения и уменьшение его продолжительности в сложных по составу пробах с последующей регенерацией иммунореагентов.
Поставленная задача решается тем, что пробу, содержащую хлорацетанилидный гербицид, обрабатывают ацетонитрилом в присутствии сульфата аммония и к экстракту добавляют фиксированное количество антител в фосфатном буфере (рН 7,1-7,5). Полученный раствор экстракта в фосфатном буфере наносят на поверхность сенсора с покрытием на основе хлорацетанилид-белкового конъюгата и регистрируют изменение частоты колебания сенсора при взаимодействии хлорацетанилид-белкового конъюгата с антителами к хлорацетанилидному гербициду относительно сенсора сравнения с рецепторным слоем на основе белка. Аналитический сигнал обратно пропорционален концентрации хлорацетанилидного гербицида в анализируемой пробе. Регенерацию рецепторного покрытия для проведения последующих определений осуществляют нанесением на поверхность раствора тиоционата калия, обеспечивая многократное использование сенсора.
При осуществлении пробоподготовки микроэкстракцией к 1 мл анализируемой пробы, содержащей хлорацетанилидный гербицид (ацетохлор, бутахлор, алахлор), добавляют 217 мкл ацетонитрила и 0,5370 г высаливателя - (NH4)2SO4 и перемешивают в течение 2 мин до выделения органического растворителя в самостоятельную фазу. Органическую фазу отбирают микрошприцем и используют для анализа. Для этого к 1 мкл экстракта на основе ацетонитрила, содержащего хлорацетанилидный гербицид, добавляют раствор сыворотки, содержащий соответствующие антитела, отвечающий 50%-ному связыванию в гетерогенный иммунокомплекс. Смесь доводят фосфатным буферным раствором до 1 мл (рН=7,1-7,5) и выдерживают до завершения реакции в течение 15 мин при 20°С.
Далее на поверхность массочувствительного пьезокварцевого иммуносенсора с рецепторным покрытием на основе хлорацетанилид-белкового конъюгата (ацетохлор-, бутахлор-, алахлор-), наносят предварительно подготовленную пробу в фосфатном буферном растворе (рН=7,1-7,5), содержащую хлорацетанилидный гербицид и фиксированное количество антител к нему, и регистрируют изменение частоты колебаний сенсора при взаимодействии хлорацетанилид-белкового конъюгата с антителами к хлорацетанилидному гербициду относительно сенсора сравнения, содержащего белковую молекулу. В качестве аналитического сигнала сенсора используют разность изменения частоты колебания индикаторного и сенсора сравнения при взаимодействии хлорацетанилид-белкового конъюгата с поликлональными антителами к соответствующему гербициду, присутствующими в пробе. Аналитический сигнал сенсора обратно пропорционален содержанию хлорацетанилида в анализируемой пробе. После каждого цикла измерения осуществляют регенерацию рецепторного покрытия, нанося на поверхность раствор тиоционата калия.
Отличительными признаками предложенного способа являются:
- высокая чувствительность способа, позволяющая осуществлять определение хлорацетанилидных гербицидов в жидких средах в интервале концентраций 0,005-0,2 нг/мл, при этом предел обнаружения равен 0,002 нг/мл;
- высокая селективность определения хлорацетанилидного гербицида в сложных по составу смесях, в том числе в присутствии родственных соединений;
- многократное (более 30 раз) использование иммуносенсора вследствие регенерации биорецепторного покрытия после каждого цикла измерения;
- относительно невысокая продолжительность анализа.
Это позволяет проводить определение ацетохлора и алахлора в жидких средах в диапазоне концентраций 0,005-0,2 нг/мл и бутахлора - 0,01-0,4 нг/мл в сложных по составу смесях. Высокая селективность обеспечивается использованием специфичных иммунореагентов - поликлональных антител к хлорацетанилидному гербициду и хлорацетанилид-белковых конъюгатов (белок: БСА - бычий сывороточный альбумин, СТИ - соевый трипсиновый ингибитор, ОВА - овальбумин и др.). Многократное (более 30 раз) использование иммуносенсора после регенерации биорецепторного покрытия обеспечивает снижение затрат на осуществление анализа.
Способ осуществляется следующим образом.
Для создания иммуносенсора используется пьезокварцевый массочувствительный резонатор АТ-среза с серебряными электродами диаметром 5-8 мм и собственной частотой колебаний (5-10 МГц)±1 Гц. После тщательной очистки и обезжиривания поверхность серебряного электрода пьезокварцевого резонатора обрабатывают 0,6 мкл 2,5%-го раствора γ-аминопропилтриэтоксисилана в ацетоне, высушивают на воздухе и выдерживают 30-40 минут при 70°С. После нанесения 15 мкл 2,5% свежеприготовленного раствора глутарового альдегида и 10 мкл 0,05% раствора хлорацетанилид-белкового конъюгата происходит прочное закрепление биослоя. Сенсор выдерживают 10-12 часов при 4°С во влажной камере
Создание сенсора сравнения проводят аналогично, только на поверхности электродов кварцевого кристалла закрепляют белок, который использовался при создании гаптен-белкового конъюгата.
При проведении измерений пьезокварцевый иммуносенсор закрепляют в ячейке, содержащей силикагель.
При осуществлении пробоподготовки микроэкстракцией к 1 мл анализируемой пробы, содержащей хлорацетанилидный гербицид, добавляют 217 мкл ацетонитрила и 0,5370 г высаливателя - (NH4)2SO4 и перемешивают в течение 2 мин до выделения органического растворителя в самостоятельную фазу. Органическую фазу отбирают микрошприцем и используют для анализа. Для этого к 1 мкл экстракта на основе ацетонитрила, содержащего хлорацетанилидный гербицид, добавляют раствор сыворотки, содержащий соответствующие антитела, отвечающий 50%-ному связыванию в гетерогенный иммунокомплекс, смесь доводят фосфатным буферным раствором (рН=7,1-7,5) до 1 мл и выдерживают до завершения реакции в течение 15 мин при 20°С.
Перед началом первого измерения пьезокварцевый иммуносенсор выдерживают в фосфатным буферным растворе (рН=7,1-7,5) в течение 30 мин до стабилизации сигнала сенсора. Затем на поверхность обоих сенсоров (индикаторного и сенсора сравнения) наносят предварительно подготовленную пробу (5 мкл), что вызывает снижение частоты колебания сенсора вследствие образования на поверхности электрода иммунокомплекса хлорацетанилид-белкового конъюгата с поликлональными антителами к соответствующему хлорацетанилидному гербициду и неспецифических взаимодействий матричных компонентов пробы (индикаторный сенсор) или только неспецифических взаимодействий матричных компонентов пробы (сенсор сравнения).
В качестве аналитического сигнала пьезокварцевого иммуносенсора используют изменение частоты колебания сенсора (Δf) вследствие увеличения массы рецепторного покрытия в результате взаимодействия антител с хлорацетанилид-белковым конъюгатом относительно сенсора сравнения.
Сигнал рассчитывается по следующему уравнению:
Δf=Δfинд-Δfсравн,
Δf=Δfm-Δf,
где fm - частота колебаний иммуносенсора до начала измерения с предварительно нанесенным биорецепторным слоем; f - минимальная частота колебаний сенсора, соответствующая образованию гетерогенного иммунокомплекса; Δfинд - изменение частоты колебаний индикаторного сенсора после нанесения пробы, Δfсравн - изменение частоты колебаний сенсора сравнения после нанесения пробы.
После этого оба сенсора промывают буферным раствором до стабилизации сигнала сенсора и наносят регенерирующий раствор, разрушающий образовавшийся иммунный комплекс (индикаторный сенсор). Частота колебаний сенсора при этом возвращается к исходному значению.
Концентрацию хлорацетанилидного гербицида в пробе определяют по предварительно построенному градуировочному графику.
Для построения градуировочного графика проводят предварительное концентрирование хлорацетанилидного гербицида методом микроэкстракции. При осуществлении пробоподготовки микроэкстракцией к 1 мл анализируемой пробы, содержащей хлорацетанилидный гербицид с концентрациями 0,005; 0,01; 0,02; 0,05; 0,1; 0,2; 0,4 нг/мл, добавляют 217 мкл ацетонитрила и 0,5370 г высаливателя - (NH4)2SO4 и перемешивают в течение 2 мин до выделения органического растворителя в самостоятельную фазу. Коэффициент концентрирования в этом случае составляет 10, т.е. концентрация гербицида в экстракте по сравнению с исходной увеличивается в 10 раз. Органическую фазу отбирают микрошприцем и используют для анализа. Для этого к 1 мкл экстракта на основе ацетонитрила, содержащего хлорацетанилидный гербицид, добавляют раствор сыворотки, содержащий соответствующие антитела, отвечающий 50%-ному связыванию в гетерогенный иммунокомплекс, смесь доводят фосфатным буферным раствором (рН=7,1-7,5) до 1 мл и выдерживают до завершения реакции в течение 15 мин при 20°С.
Значение аналитического сигнала обратно пропорционально содержанию аналита в пробе.
Градуировочный график линеен в диапазоне концентраций в жидких средах для определения
ацетохлора 0,005-0,2 нг/мл: Δf=-72·с+165;
бутахлора 0,01-0,4 нг/мл: Δf=-2,2·с+45,6;
алахлора 0,005-0,2 нг/мл: Δf=-50·с+123,
где Δf - аналитический сигнал; с - концентрация ацетохлора, бутахлора, алахлора.
Процедура проведения измерений с использованием пьезокварцевого иммуносенсора. К 1 мл исследуемого образца добавляют 217 мкл ацетонитрила и 0,5370 г (NH4)2SO4 и перемешивают в течение 2 мин до выделения органического растворителя в самостоятельную фазу. Затем к 1 мкл экстракта добавляют раствор сыворотки, содержащий соответствующие антитела, отвечающий 50%-му связыванию в гетерогенный иммунокомплекс и доводят до 1 мл фосфатным буферным раствором (рН=7,1-7,5). Подготовленную таким образом пробу наносят на поверхность пьезокварцевого иммуносенсора и выдерживают в течение 2 мин до образования гетерогенного иммунокомплекса на поверхности серийно выпускаемого отечественного пьезокварцевого сенсора АТ-среза с серебряными электродами (диаметром 5-8 мм) и собственной частотой колебаний (5-10 МГц)±1 Гц. Аналитический отклик сенсора обратно пропорционален содержанию хлорацетанилидного гербицида в пробе.
Регенерацию биочувствительного покрытия пьезокварцевого сенсора осуществляют нанесением на поверхность раствора KCNS 0,02-0,10 мМ. Определение концентрации хлорацетанилидного гербицида осуществляют по градуировочному графику, построенному с применением стандартных образцов.
Пример 1. К 1 мл исследуемого образца с концентрацией хлорацетанилидного гербицида (ацетохлор, алахлор) 0,002 нг/мл добавляют 217 мкл ацетонитрила и 0,5370 г (NH4)2SO4 и перемешивают в течение 2 мин до выделения органического растворителя в самостоятельную фазу. Затем к 1 мкл экстракта добавляют раствор сыворотки, содержащий соответствующие антитела, отвечающий 50%-му связыванию в гетерогенный иммунокомплекс и доводят до 1 мл фосфатным буферным раствором (рН=7,1-7,5). Подготовленную таким образом пробу наносят на поверхность пьезокварцевого иммуносенсора и выдерживают в течение 2 мин до образования гетерогенного иммунокомплекса на поверхности серийно выпускаемого отечественного пьезокварцевого резонатора АТ-среза с серебряными электродами (диаметром 5-8 мм) и собственной частотой колебаний (5-10 МГц)±1 Гц. Аналитический отклик сенсора обратно пропорционален содержанию хлорацетанилидного гербицида в пробе.
Регенерацию биочувствительного покрытия пьезокварцевого сенсора осуществляют нанесением на поверхность раствора KCNS 0,02-0,10 мМ. Определение концентрации хлорацетанилидного гербицида осуществляют по градуировочному графику, построенному с применением стандартных образцов.
ацетохлор: Δf=164; найдено 0,001 нг/мл;
алахлор: Δf=121; найдено 0,001 нг/мл.
Предел обнаружения ацетохлора (алахлора) - 0,002 нг/мл. Разработанный метод не позволяет проводить количественное определение концентраций гербицидов на уровне 0,002 нг/мл.
Пример 2. Исследуемый образец хлорацетанилидного гербицида (бутахлор) с исходной концентрацией 0,005 нг/мл после предварительной пробоподготовки (пример 1) наносили на поверхность пьезокварцевого иммуносенсора в фосфатном буферном растворе (рН=7,1-7,5) и выдерживали в течение 2 мин. Далее аналогично примеру 1.
Δf=45 Гц; найдено 0,002 нг/мл. Предел обнаружения бутахлора - 0,005 нг/мл. Разработанный метод не позволяет проводить количественное определение концентраций бутахлора на уровне 0,005 нг/мл.
Пример 3. Исследуемый образец хлорацетанилидного гербицида (ацетохлор, бутахлор, алахлор) с исходной концентрацией 0,02 нг/мл после предварительной пробоподготовки (пример 1) наносили на поверхность пьезокварцевого иммуносенсора в фосфатном буферном растворе (рН=7,1-7,5) и выдерживали в течение 2 мин. Далее аналогично примеру 1.
ацетохлор: Δf=151 Гц; найдено 0,02 нг/мл;
бутахлор Δf=45 Гц; найдено 0,02 нг/мл;
алахлор Δf=113 Гц; найдено 0,02 нг/мл.
Предел обнаружения ацетохлора (алахлора) - 0,002 нг/мл, бутахлора - 0,005 нг/мл.
Пример 4. Исследуемый образец хлорацетанилидного гербицида (ацетохлор, бутахлор, алахлор) с исходной концентрацией 0,05 нг/мл после предварительной пробоподготовки (пример 1) наносили на поверхность пьезокварцевого иммуносенсора в фосфатном буферном растворе (рН=7,1-7,5) и выдерживали в течение 2 мин. Далее аналогично примеру 1.
ацетохлор: Δf=129 Гц; найдено 0,05 нг/мл;
бутахлор Δf=44 Гц; найдено 0,05 нг/мл;
алахлор Δf=98 Гц; найдено 0,05 нг/мл.
Предел обнаружения ацетохлора (алахлора) - 0,002 нг/мл, бутахлора - 0,005 нг/мл.
Пример 5. Исследуемый образец хлорацетанилидного гербицида (ацетохлор, бутахлор, алахлор) с исходной концентрацией 0,1 нг/мл после предварительной пробоподготовки (пример 1) наносили на поверхность пьезокварцевого иммуносенсора в фосфатном буферном растворе (рН=7,1-7,5) и выдерживали в течение 2 мин. Далее аналогично примеру 1.
ацетохлор: Δf=93 Гц; найдено 0,1 нг/мл;
бутахлор Δf=43 Гц; найдено 0,1 нг/мл;
алахлор Δf=73 Гц; найдено 0,1 нг/мл.
Предел обнаружения ацетохлора (алахлора)- 0,002 нг/мл, бутахлора - 0,005 нг/мл.
Пример 6. Исследуемый образец хлорацетанилидного гербицида (ацетохлор, бутахлор, алахлор) с исходной концентрацией 0,2 нг/мл после предварительной пробоподготовки (пример 1) наносили на поверхность пьезокварцевого иммуносенсора в фосфатном буферном растворе (рН=7,1-7,5) и выдерживали в течение 2 мин. Далее аналогично примеру 1.
ацетохлор: Δf=21 Гц; найдено 0,2 нг/мл;
бутахлор Δf=41 Гц; найдено 0,2 нг/мл;
алахлор Δf=23 Гц; найдено 0,2 нг/мл.
Предел обнаружения ацетохлора (алахлора) - 0,002 нг/мл, бутахлора - 0,005 нг/мл.
Пример 7. Исследуемый образец бутахлора с исходной концентрацией 0,3 нг/мл после предварительной пробоподготовки (пример 1) наносили на поверхность пьезокварцевого иммуносенсора в фосфатном буферном растворе (рН=7,1-7,5) и выдерживали в течение 2 мин. Далее аналогично примеру 1.
Δf=39 Гц; найдено 0,3 нг/мл. Предел обнаружения бутахлора - 0,005 нг/мл.
Пример 8. Исследуемый образец бутахлора с концентрацией 0,4 нг/мл после предварительной пробоподготовки (пример 1) наносили на поверхность пьезокварцевого иммуносенсора в фосфатном буферном растворе (рН=7,1-7,5) и выдерживали в течение 2 мин. Далее аналогично примеру 1.
Δf=37 Гц; найдено 0,3 нг/мл.
Предел обнаружения бутахлора - 0,005 нг/мл.
Пример 9. Исследуемый образец 5 мкл, содержащий ацетохлор и структурный аналог (бутахлор, алахлор) в соотношении концентраций 1:1, наносили на поверхность пьезокварцевого иммуносенсора в фосфатном буферном растворе (рН=7,1-7,5) и выдерживали в течение 2 мин. Далее аналогично примеру 1.
Δf=129 Гц. Присутствие структурных аналогов (бутахлора, алахлора) не оказывает влияние на определение ацетохлора.
Пример 10. Исследуемый образец 5 мкл, содержащий ацетохлор и структурный аналог (бутахлор, алахлор) в соотношении концентраций 1:2, наносили на поверхность пьезокварцевого иммуносенсора в фосфатном буферном растворе (рН=7,1-7,5) и выдерживали в течение 2 мин. Далее аналогично примеру 1.
Δf=129 Гц. Присутствие структурных аналогов (бутахлора, алахлора) не оказывает влияние на определение ацетохлора.
Пример 11. Исследуемый образец 5 мкл, содержащий ацетохлор и структурный аналог (бутахлор, алахлор) в соотношении концентраций 1:10, наносили на поверхность пьезокварцевого иммуносенсора в фосфатном буферном растворе (рН=7,1-7,5) и выдерживали в течение 2 мин. Далее аналогично примеру 1.
Δf=129 Гц. Присутствие структурных аналогов (бутахлора, алахлора) не оказывает влияние на определение ацетохлора.
Пример 12. Исследуемый образец 5 мкл, содержащий бутахлор и структурный аналог (ацетохлор, алахлор) в соотношении концентраций 1:1, наносили на поверхность пьезокварцевого иммуносенсора в фосфатном буферном растворе (рН=7,1-7,5) и выдерживали в течение 2 мин. Далее аналогично примеру 1.
Δf=43 Гц. Присутствие структурных аналогов (ацетохлора, алахлора) не оказывает влияние на определение бутахлора.
Пример 13. Исследуемый образец 5 мкл, содержащий бутахлор и структурный аналог (ацетохлор, алахлор) в соотношении концентраций 1:2, наносили на поверхность пьезокварцевого иммуносенсора в фосфатном буферном растворе (рН=7,1-7,5) и выдерживали в течение 2 мин. Далее аналогично примеру 1.
Δf=43 Гц. Присутствие структурных аналогов (ацетохлора, алахлора) не оказывает влияние на определение бутахлора.
Пример 14. Исследуемый образец 5 мкл, содержащий бутахлор и структурный аналог (ацетохлор, алахлор) в соотношении концентраций 1:10, наносили на поверхность пьезокварцевого иммуносенсора в фосфатном буферном растворе (рН=7,1-7,5) и выдерживали в течение 2 мин. Далее аналогично примеру 1.
Δf=43 Гц. Присутствие структурных аналогов (ацетохлора, алахлора) не оказывает влияние на определение бутахлора.
Пример 15. Исследуемый образец 5 мкл, содержащий алахлор и структурный аналог (ацетохлор, бутахлор) в соотношении концентраций 1:1, наносили на поверхность пьезокварцевого иммуносенсора в фосфатном буферном растворе (рН=7,1-7,5) и выдерживали в течение 2 мин. Далее аналогично примеру 1.
Δf=98 Гц. Присутствие структурных аналогов (ацетохлора, бутахлора) не оказывает влияние на определение алахлора.
Пример 16. Исследуемый образец 5 мкл, содержащий алахлор и структурный аналог (ацетохлор, бутахлор) в соотношении концентраций 1:2, наносили на поверхность пьезокварцевого иммуносенсора в фосфатном буферном растворе (рН=7,1-7,5) и выдерживали в течение 2 мин. Далее аналогично примеру 1.
Δf=98 Гц. Присутствие структурных аналогов (ацетохлора, бутахлора) не оказывает влияние на определение алахлора.
Пример 17. Исследуемый образец 5 мкл, содержащий алахлор и структурный аналог (ацетохлор, бутахлор) в соотношении концентраций 1:10, наносили на поверхность пьезокварцевого иммуносенсора в фосфатном буферном растворе (рН=7,1-7,5) и выдерживали в течение 2 мин. Далее аналогично примеру 1.
Δf=98 Гц. Присутствие структурных аналогов (ацетохлора, бутахлора) не оказывает влияние на определение алахлора.
Данный способ позволяет существенно увеличить чувствительность определения ацетохлора (бутахлора, алахлора) в сложных по составу смесях, а также обеспечивает многократное использование иммуносенсора после регенерации биорецепторного покрытия, что снижает затраты на осуществление анализа. Предел обнаружения ацетохлора (алахлора) равен 0,002 нг/мл, бутахлора - 0,005.
Сравнительная характеристика известного и предлагаемого способа определения ацетохлора (бутахлора, алахлора) в жидких средах приведена в таблице.
ацетохлор
| название | год | авторы | номер документа |
|---|---|---|---|
| СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СТРЕПТОМИЦИНА С ПОМОЩЬЮ ПЬЕЗОКВАРЦЕВОГО ИММУНОСЕНСОРА | 2009 |
|
RU2419797C1 |
| СПОСОБ СЕЛЕКТИВНОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ НОНИЛФЕНОЛА В РАСТВОРЕ С ПОМОЩЬЮ ПЬЕЗОКВАРЦЕВОГО ИММУНОСЕНСОРА | 2005 |
|
RU2287820C1 |
| СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ТЕТРАЦИКЛИНОВ С ПОМОЩЬЮ ПЬЕЗОЭЛЕКТРИЧЕСКОГО СЕНСОРА | 2017 |
|
RU2687742C1 |
| СПОСОБ ДЕТЕКТИРОВАНИЯ СУЛЬФАМЕТОКСАЗОЛА С ПОМОЩЬЮ ПЬЕЗОКВАРЦЕВОГО ИММУНОСЕНСОРА | 2004 |
|
RU2271006C1 |
| СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ХЛОРАМФЕНИКОЛА С ПОМОЩЬЮ ПЬЕЗОКВАРЦЕВОГО ИММУНОСЕНСОРА | 2011 |
|
RU2497123C2 |
| КОМПОЗИЦИЯ ПОКРЫТИЯ ПЬЕЗОЭЛЕКТРИЧЕСКОГО СЕНСОРА ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ФТОРХИНОЛОНОВ В ЖИДКИХ СРЕДАХ | 2018 |
|
RU2706362C1 |
| СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ КОНЦЕНТРАЦИИ АНТИТЕЛ В СЫВОРОТКАХ КРОВИ К ПАТОГЕННЫМ БАКТЕРИЯМ YERSINIA ENTEROCOLITICA СЕРОВАРОВ O:3, O:5 ИЛИ O:6,30 С ПРИМЕНЕНИЕМ ПЬЕЗОГРАВИМЕТРИЧЕСКОГО ИММУНОСЕНСОРА | 2005 |
|
RU2288472C1 |
| ПОКРЫТИЕ ПЬЕЗОЭЛЕКТРИЧЕСКОГО СЕНСОРА НА ОСНОВЕ МАГНИТНЫХ УГЛЕРОДНЫХ НАНОКОМПОЗИТОВ | 2022 |
|
RU2783225C1 |
| СПОСОБ ЭКСПРЕСС-ОПРЕДЕЛЕНИЯ КАРДИОМИОГЛОБИНА В ПЛАЗМЕ КРОВИ С ПОМОЩЬЮ ЭЛЕКТРОХИМИЧЕСКОГО ИММУНОСЕНСОРА | 2009 |
|
RU2425382C1 |
| СОСТАВ ПОКРЫТИЯ ПЬЕЗОКВАРЦЕВОГО РЕЗОНАТОРА ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АНТИТЕЛ YERSINIA ENTEROCOLITICA В ВОДНЫХ СРЕДАХ | 2005 |
|
RU2287585C1 |
Изобретение относится к аналитической химии и может быть использовано для определения хлорацетанилидных гербицидов в объектах окружающей среды - почве, продуктах питания, промышленных сточных и природных водах. Способ осуществляют с помощью пьезокварцевого иммуносенсора, причем пробу, содержащую хлорацетанилидный гербицид, обрабатывают ацетонитрилом в присутствии сульфата аммония и к экстракту добавляют фиксированное количество антител в фосфатном буфере (рН 7,1-7,5), затем наносят на поверхность сенсора с покрытием на основе хлорацетанилид-белкового конъюгата и регистрируют изменение частоты колебания сенсора при взаимодействии хлорацетанилид-белкового конъюгата с антителами к хлорацетанилидному гербициду относительно сенсора сравнения с рецепторным слоем на основе белка, аналитический сигнал обратно пропорционален концентрации хлорацетанилидного гербицида в пробе, для проведения последующих определений осуществляют регенерацию рецепторного слоя нанесением на его поверхность раствора тиоцианата калия, обеспечивая многократное использование сенсора. Достигается повышение чувствительности и селективности, а также - ускорение анализа. 1 табл.
Способ высокочувствительного и селективного определения хлорацетанилидных гербицидов (ацетохлор, бутахлор, алахлор) с помощью пьезокварцевого иммуносенсора, отличающийся тем, что пробу, содержащую хлорацетанилидный гербицид, обрабатывают ацетонитрилом в присутствии сульфата аммония и к экстракту добавляют фиксированное количество антител в фосфатном буфере (рН 7,1-7,5), затем наносят на поверхность сенсора с покрытием на основе хлорацетанилид-белкового конъюгата и регистрируют изменение частоты колебания сенсора при взаимодействии хлорацетанилид-белкового конъюгата с антителами к хлорацетанилидному гербициду относительно сенсора сравнения с рецепторным слоем на основе белка, аналитический сигнал обратно пропорционален концентрации хлорацетанилидного гербицида в пробе, для проведения последующих определений осуществляют регенерацию рецепторного слоя нанесением на его поверхность раствора тиоцианата калия, обеспечивая многократное использование сенсора.
