Способ определения микроколичествгЕРбицидОВ пРОизВОдНыХ фЕНилАМидАВ РАСТиТЕльНыХ ТКАНяХ Советский патент 1981 года по МПК G01N31/06 

1

Изобретение относится к способам химического анализа гербицидов производных фениламида в растительных тканях, содержащих значительные количества хлорофилла и каротиноидов и может быть использовано учреждениями агрохимслужбы и токсикологическими лабораториями для контроля за качеством кормов и продуктов урожая.

Известен способ определения микроколичеств гербицидов в растительных тканях, включающий экстракцию гербицида из ткани и количественное определение гербицида 1.

Однако он мало пригоден для массовых анализов остаточных количеств гербицидов из-за длительности и невысокой точности определения.

Известен также способ определения микроколичеств гербицидов производных фениламида в растительных тканях, включающий экстракцию гербицида из ткани, очистку гербицида от растительных пигментов, извлечение очищенного гербицида растворителем и количественное определение гербицида 2.

Способ предусматривает экстракцию гербицидов из пробы хлороформом в течение 12-18 ч при 25°С, высушивание и сжигание

сухого остатка H2S04 (,84) в течение 30-60 мин для удаления растительных пигментов, нейтрализацию и подщелачивание 50%-ным раствором NaOH, извлечение очищенных гербицидов н-гексаном и последующее их хроматографирование в тонком слое окиси алюминия.

Однако способ не обладает достаточной точностью и связан с значительными трудозатратами. Это обусловлено следующими причинами: длительная экстракция препарата из пробы органическим растворителем (12-18 ч); при очистке от растительных пигментов в течение 30-60 мин происходит

сильное разогревание пробы, приводящее к гидролизу гербицидов до их метаболитов. При этом невозможно выделить имеющиеся в пробе и возможно образовавшиеся в процессе очистки метаболиты; улетучивание

имеющегося и образовавшегося метаболита при нейтрализации 50% NaOH.

При этом теряется 50-60% токсикантов, что снижает оценку их уровня содержания в объекте.

Целью изобретения является повышение точности определения и сокращение трудозатрат.

Поставленная цель достигается тем, что очистку гербицида от растительных пигмеиtoB проводят на хроматографической колонке с цеолитом 4А (щелочная форма), а в качестве растворителя для извлечения очищенного гербицида истользуют смесь н-гексан : диэтиловый эфир в соотношении 3:1 - 4 : 1. Цеолит 4 А обладает избирательным поглощением по отношению к хлорофилло- и каротиноидоподобным пигментам. Кроме того, цеолит 4 А необменно поглощает ароматические амины, как возможные метаболиты гербицидов, так и природные амины, содержащиеся в растительных тканях, что дает возможность определять только гербициды. Пример. В пробу водорослей или корнеплодов моркови добавляют заданное количество стандартного раствора гербицидов (например, 100 мкг цропанида, линурона или арезина) и основных метаболитов этих гербицидов (20-200 мкг 3,4-дихлоранилина или 4-хлоранилина) и выдерживают в течение 1 ч. 30 г водорослей, зеленой массы или корнеплодов моркови предварительно измельчают, помещают в колбу на 250 мл, затем добавляют 150 мл смеси н-гексан : ацетон (9:1) и экстрагируют гербициды встряхиванием в течение 1 ч. После экстракции содержимое колб фильтруют, и остаток на фильтре промывают смесью растворителей (3X15-20 мл). Полученный экстракт для обезвоживания фильтруют через безводный сернокислый натрий и упаривают досуха. Для отделения от растительных пигментов сухой остаток, содержащий гербициды, заливают 25-30 мл я-гексана и пропускают через колонку (20-25X40-50 мл) с цеолитом 4А (щелочная форма), используя фракцию 0,1-0,5 мм.

Содержание гербицидов в растительных тканях

Таблица 1 Причем, колонку с цеолитом 4 А перёд анализом не промывают. Гербициды элюируют из сорбента 50- 55 мл смеси растворителей н-гексан : диэтиловый эфир (3 : 1). При этом элюант упаривают досуха на роторном испарителе. Затем в колбу к сухому остатку добавляют 5 мл 50%-ной серной кислоты, тщательно перемешивают и кипятят в течение 5 мин с обратным холодильником (для гидролиза фениламида до анилинов). В охлажденные колбы после гидролиза (содержащие 3,4-дихлоранилин (3,4-ДХА) или 4-хлоранилин (4-ХА) приливают 10 мл дистиллированной воды и 5 мл Юн. NaOH, охлаждают до комнатной температуры, раствор количественно переносят в мерные колбы на 50 мл, окрашивают по реакции диазотирования - азосочетания с 1-нафтолом. Для этого в мерные колбы добавляют 1 мл 2%-ного водного раствора NaN02 и тщательно перемещивают. Через 2 мин прибавляют 1 мл 10%-ного водного раствора сульфаминовой кислоты, после чего колбу в течение 10 мин-периодически встряхивают до полного разложения избытка кислоты. Прибавляют 1 мл 0,2%-ного спиртового раствора 1-нафтола и тщательно перемешивают. Для развития окраски азосоединения добавляют 4 мл 10 н. NaOn и доводят до метки дистиллированной водой. В зависимости от содержания герби; цидов в анализируемой пробе окраска растворов будет изменяться от бледно-розовой до ярко-малиновой. Экстинкцию растворов измеряют на фотоэлектрокалориметре с зеленым светофильтром или на спектрофотометре при Я 510-515 нм. Данные сведены в табл. 1.

Как видно из табл. 1, относительная ошибка при t 0,95 предложенного способа меньше, чем в известном способе, что свидетельствует о более высокой его точности.

Существенным моментом предложенного способа является экспериментально подобранная элюирующая смесь н-гексан : диэтиловый эфир 3:1, позволяющая количе ственно (на 92-93%) выделить гербициды. При использовании смеси 4: 1 получены идентичные данные.

При соотношении н-гексан : диэтиловый эфир (2:1) - происходит неполное вымывание гербицидов (на 82%), а при (5:1) - происходит вымывание из сорбированной смеси (гербициды + метаболиты + растительные пигменты) не только гербицидов (на 92-93%), но и пигментов, затрудняющих дальнейшую идентификацию этих гербицидов. Следовательно, нредложенный способ определения содержания микроколичеств гер- 5 Сравнительное хронометрирование осн микроколичеств гербицидов

Использование предложенного способа определения содержания микроколичеств гербицидов в растительных тканях обеспечивает по сравнению с существующим способом следующие преимущества: эффективную очистку пробы от растительных пигментов и достаточно полную элюцию соединений (92-94%); сокращение продолжительности операции очистки до 10-15 мин; полное разделение исходных гербицидов от их основных метаболитов и растительных пигментов; более высокую точность и воспроизводимость определения; сокращение общего времени проведения операций по определению гербицидов в растительных объектах в 6,5 раз.

Формула изобретения

Способ определения микроколичеств гербицидов производных фениламида в растительных тканях, включающий экстракцию гербицида из ткани, очистку гербицида от

растительных пигментов, извлечение очищенного гербицида растворителем и количественное определение гербицида, отличающийся тем, что, с целью повышения точности определения и сокращения трудозатрат, очистку гербицида от растительных пигментов проводят на хроматографической

о

колонке с цеолитом 4А (щелочная форма), а в качестве растворителя для извлечения очищенного гербицида используют смесь н-гексан : диэтиловый эфир в соотношении 3:1-4:1.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

2.Методы определения микроколичеств пестицидов в продуктах питания, кормах и внешней среде. М., «Колос, 1977, с. 173- 178 (прототип). бицидов позволяет повысить точность и Воспроизводимость, эффективное разделение гербицидов от их метаболитов и растительных пигментов, а также сократить время проведения операций (табл. 2). Таблица 2 овных операций при определении в растительных тканях