Показать метаданные Скрыть метаданные

(19)

(11)

2 346 004

(13)

(51)

МПК

C07K14/705(2006-01-01)

(21) (22)

Заявка

2005117971/13, 2003-10-30

(24)

Дата начала отсчета патента

2003-10-30

(22)

дата подачи заявки

2003-10-30

(45)

опубликовано

2009-02-10

(72)

авторы

Якобсен Бент КарстенАндерсен Торбен БентМоллой Питер ИмонЛи ЙиБоултер Джонатан Майкл

(73)

патентообладатели

Эвидекс Лимитед

(56)

Документы, цитированные в отчете о поиске

ЭКСПОНИРОВАНИЕ Т-КЛЕТОЧНЫХ РЕЦЕПТОРОВ Российский патент 2009 года по МПК C07K14/705

Описание патента на изобретение RU2346004C2

Текст описания приведен в факсимильном виде.

Иллюстрации к изобретению RU 2 346 004 C2

Реферат патента 2009 года ЭКСПОНИРОВАНИЕ Т-КЛЕТОЧНЫХ РЕЦЕПТОРОВ

Изобретение относится к биотехнологии. Описана фаговая частица, экспонирующая на своей поверхности Т-клеточный рецептор (TCR), представляющий собой scTCR человека. Экспонированная полипептидная пара dTCR или экспонированный полипептид scTCR включает последовательности α и β цепей внеклеточного константного Ig домена нативного TCR, а дисульфидная связь связывает аминокислотные остатки указанных последовательностей цепей константного Ig домена, где указанная дисульфидная связь находится между цистеиновыми остатками. Представлена библиотека полипептидных пар мутированных TCR или полипептидов scTCR, экспонированных на описанной фаговой частице. Представлена нуклеиновая кислота, кодирующая описанную фаговую частицу. Раскрыт способ идентификации TCRs. Изобретение может использоваться для создания разнообразных библиотек TCR для идентификации высокоаффинных TCRs. 7 н. и 10 з.п. ф-лы, 63 ил., 2 табл.

Формула изобретения RU 2 346 004 C2

1. Фаговая частица, экспонирующая на своей поверхности Т-клеточный рецептор (TCR), характеризующаяся тем, что TCR представляет собой scTCR человека, полипептидную пару dTCR человека, или полипептидную пару dTCR не человека, а также характеризующаяся тем, что экспонированная полипептидная пара dTCR или экспонированный полипептид scTCR включает последовательности α и β цепей внеклеточного константного Ig домена нативного TCR, а дисульфидная связь связывает аминокислотные остатки указанных последовательностей цепей константного Ig домена, где указанная дисульфидная связь находится между цистеиновыми остатками, на которые замещены

Thr 48 экзона 1 TRAC*01 и Ser 57 экзона 1 TRBC1*01 или TRBC2*01, или Thr 45 экзона 1 TRAC*01 и Ser 77 экзона 1 TRBC1*01 или TRBC2*01, или Tyr 10 экзона 1 TRAC*01 и Ser 17 экзона 1 TRB1*P01 или TRBC2*01, или Thr 45 экзона 1 TRAC*01 и Asp 59 экзона 1 TRBC1*01 или TRBC2*01, или Ser 15 экзона 1 TRAC*01 и Glu 15 экзона 1 TRBC1*01 или TRBC2*01, или их эквиваленты нечеловеческого происхождения.

2. Фаговая частица по п.1, у которой или

а) С-конец одного составляющего полипептидной пары dTCR или С-конец scTCR полипептида связан пептидной связью с остатком, экспонированным на поверхности фаговой частицы, или

б) С-конец одного составляющего полипептидной пары dTCR или С-конец scTCR полипептида связан дисульфидной связью с цистеиновым остатком, экспонированным на поверхности фаговой частицы.

3. Фаговая частица по п.1, экспонирующая на своей поверхности полипептидную пару dTCR, которая включает:

первый полипептид, в котором последовательность α или β цепи вариабельного домена TCR слита с N-концом последовательности а цепи внеклеточного константного домена TCR, и

второй полипептид, в котором последовательность α или β цепи вариабельного домена TCR, слита с N-концом последовательности β цепи внеклеточного константного домена TCR.

4. Фаговая частица по п.1, где последовательности α и β цепей внеклеточного константного Ig домена нативного TCR усечены на своих С-концах, соответствующих таковым нативных последовательностей, таким образом, что цистеиновые остатки, формирующие нативную межцепочечную дисульфидную связь, исключаются.

5. Фаговая частица по п.2, где последовательности α и β цепей внеклеточного константного Ig домена нативного TCR усечены на своих С-концах, соответствующих таковым нативных последовательностей, таким образом, что цистеиновые остатки, формирующие нативную межцепочечную дисульфидную связь, исключаются.

6. Фаговая частица по п.3, где последовательности α и β цепей внеклеточного константного Ig домена нативного TCR усечены на своих С-концах, соответствующих таковым нативных последовательностей, таким образом, что цистеиновые остатки, формирующие нативную межцепочечную дисульфидную связь, исключаются.

7. Фаговая частица по п.1, где в последовательностях цепей внеклеточного константного Ig домена нативного TCR цистеиновые остатки, формирующие нативную межцепочечную дисульфидную связь, замещены нецистеиновыми остатками.

8. Фаговая частица по п.1, которая представляет собой нитевидную фаговую частицу, экспонирующую на своей поверхности димерную полипептидную пару Т-клеточного рецептора (dTCR), причем указанная пара включает:

9. Фаговая частица по п.1, которая представляет собой нитевидную фаговую частицу, экспонирующую на своей поверхности димерную полипептидную пару Т-клеточного рецептора (dTCR), причем указанная пара включает:

первый полипептид, в котором последовательность α цепи вариабельного домена TCR слита с N-концом последовательности α цепи внеклеточного константного домена TCR, и второй полипептид, в котором последовательность β цепи вариабельного домена TCR слита с N-концом последовательности β цепи внеклеточного константного домена TCR, причем первый и второй полипептиды связаны дисульфидной связью, находящейся между цистеиновыми остатками, на которые замещены Thr 48 экзона 1 TRAC*01 и Ser 57 экзона 1 TRBC1*01 или TRBC2*01, или их эквиваленты нечеловеческого происхождения, а С-конец одного составляющего полипептидной пары dTCR связан пептидной связью с белком оболочки фага, и где последовательности α и β цепей внеклеточного константного Ig домена нативного TCR усечены на своих С-концах, соответствующих таковым нативных последовательностей, таким образом, что цистеиновые остатки, формирующие нативную межцепочечную дисульфидную связь, исключаются.

10. Библиотека полипептидных пар мутированных TCR или полипептидов scTCR, экспонированных на фаговых частицах по п.1.

11. Библиотека полипептидных пар мутированных dTCR, экспонированных на фаговых частицах dTCR по п.8.

11. Библиотека мутированных TCRs по п.10 или 11, в которой различия находятся в вариабельном домене или доменах dTCR или полипептидов scTCR.

12. Нуклеиновая кислота, кодирующая фаговую частицу по п.1.

13. Нуклеиновая кислота, кодирующая фаговую частицу по п.8.

15. Способ идентификации TCRs с характеристиками, выбираемыми из (i) усиленной экспрессируемости и/или усиленных характеристик (ii) связывания и/или (iii) стабильности, причем указанный способ заключается в том, что библиотека по п.10 подвергается: процессу отбора по указанным характеристикам с выделением фаговых частиц, экспонирующих TCR с указанными характеристиками, и, необязательно, амплификацией для увеличения количества выделенных частиц и/или процессу скрининга, который измеряет указанные характеристики, идентифицируя те фаговые частицы, которые экспонируют TCR с желаемыми характеристиками, и выделяя эти фаговые частицы и, необязательно, амплификацией для увеличения количества выделенных частиц.

16. Способ идентификации TCRs с характеристиками, выбираемыми из (i) усиленной экспрессируемости и/или усиленных характеристик (ii) связывания и/или (iii) стабильности, причем указанный способ заключается в том, что библиотека по п.11 подвергается: процессу отбора по указанным характеристикам, и выделением фаговых частиц, экспонирующих TCR с указанными характеристиками, и, необязательно, амплификацией для увеличения количества выделенных частиц и/или процессу скрининга, который измеряет указанные характеристики, идентифицируя те фаговые частицы, которые экспонируют TCR с желаемыми характеристиками, и выделяя эти фаговые частицы и, необязательно, амплификацией для увеличения количества выделенных частиц.

17. Способ по п.15 или 16, в котором усиленной характеристикой является повышенная аффинность к TCR лиганду.

Документы, цитированные в отчете о поиске Патент 2009 года RU2346004C2

Прибор, замыкающий сигнальную цепь при повышении температуры	1918	Давыдов Р.И.	SU99A1
Дорожная спиртовая кухня	1918	Кузнецов В.Я.	SU98A1
Печь для непрерывного получения сернистого натрия	1921	Настюков А.М. Настюков К.И.	SU1A1
СПОСОБ ИЗМЕРЕНИЯ МАЛЫХ ОТКЛОНЕНИЙ ЧАСТОТЫ	0		SU192291A1
Буровой раствор	1982	Морозов Олег Андреевич Анисимов Александр Алексеевич	SU1118661A1
Способ идентификации микроорганизмов	1977	Стефен Аллен Морс Барбара Хотан Иглевски	SU731904A3

RU 2 346 004 C2

Авторы

Якобсен Бент Карстен

Андерсен Торбен Бент

Моллой Питер Имон

Ли Йи

Боултер Джонатан Майкл

Даты

2009-02-10—Публикация

2003-10-30—Подача

название	год	авторы	номер документа
ОДНОЦЕПОЧЕЧНЫЕ РЕКОМБИНАНТНЫЕ Т-КЛЕТОЧНЫЕ РЕЦЕПТОРЫ	2003	Якобсен Бент Карстен Глик Мейр	RU2355703C2
БИБЛИОТЕКИ TCR	2015	Якобсен Бент Карстен Моллой Питер Иамон Вуидепот Аннелизе Бриджитт Лидди Натаниел Росс	RU2722696C2
БИФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ СВЯЗЫВАЮЩИЕ ПОЛИПЕПТИДЫ	2019	Босси, Джованна Реис, Карлос Тавар, Радживкумар Карнок, Адам Смит, Никола	RU2806747C2
Т-КЛЕТОЧНЫЕ РЕЦЕПТОРЫ, СПЕЦИФИЧНЫЕ В ОТНОШЕНИИ КОМПЛЕКСА ОПУХОЛЕВЫЙ АНТИГЕН NY-ESO-1/HLA-A*02	2016	Честер, Фиона Нокс, Эндрю Александр Лоутер, Джонатан Патрик Пател, Вирен Винубхай Бастон, Эмма Элизабет Хаг, Рут Мартинез	RU2775394C2
НЕ РЕСТРИКТИРОВАННЫЕ ПО HLA T-КЛЕТОЧНЫЕ РЕЦЕПТОРЫ И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ	2019	Садлейн, Мишель Мансилла-Сото, Хорхе, А. Экем, Жюстэн Добрин, Антон	RU2812917C2
РЕЖИМ ДОЗИРОВАНИЯ ДЛЯ ГИБРИДНОГО БЕЛКА GP100-СПЕЦИФИЧНЫЙ ПЕРЕНАПРАВЛЯЮЩИЙ TCR-АНТИ-CD3 SCFV	2017	Коглин Кристина	RU2766119C2
ФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ РАСТВОРИМЫЕ ГЕТЕРОДИМЕРЫ МНС II КЛАССА СО СТАБИЛИЗИРУЮЩЕЙ ДИСУЛЬФИДНОЙ СВЯЗЬЮ	2011	Лёсет Гейр Оге Фригстад Терье Сандлье Ингер Боген Бьярне	RU2604813C2
Т-КЛЕТОЧНЫЕ РЕЦЕПТОРЫ	2018	Аддис, Филип Уильям Бедке, Николь Джой Боуард, Люси Харпер, Стефан Лидди, Натаниэль Махун, Тара Одвайер, Ронан Падраик	RU2762255C2
НОВЫЕ БИСПЕЦИФИЧНЫЕ ПОЛИПЕПТИДНЫЕ КОМПЛЕКСЫ ПРОТИВ CD3/CD19	2018	Лю, Цзеин Сюй, Цзяньцин Ван, Чжочжи Мей, Цинь Ли, Цзин	RU2788127C2
МНОГОЦЕПОЧЕЧНЫЙ ХИМЕРНЫЙ АНТИГЕННЫЙ РЕЦЕПТОР И ЕГО ПРИМЕНЕНИЯ	2013	Смит Джулианна Шаренберг Эндрю Манниуи Сесиль Экем Жюстэн	RU2663725C2