СПОСОБ МОДЕЛИРОВАНИЯ ПОСТМЕДИКАМЕНТОЗНОГО ИММУНОДЕФИЦИТА Российский патент 2009 года по МПК G09B23/28 

Известен способ моделирования постмедикаментозного иммунодефицита (Микроволны миллиметрового диапазона в профилактике экспериментального постмедикаментозного иммунодефицита цитостатического генеза. Авт. Н.И.Демешко и др. Актуальные вопросы восстановительной медицины, курортологии и физиотерапии: Матер. Международного конгресса «Здравница - 2006. - М., 2006). Способ прототипа заключается в инициации иммунодефицитного состояния посредством разовой внутрибрюшинной инъекции 0,5 мл цитостатика циклофосфана в дозе 4-8 мг/100 г массы тела животного. Этот способ нельзя признать полностью адекватным реальным клиническим ситуациям, когда у многих онкологических пациентов химиотерапия протекает на фоне другого не менее важного фактора иммунодефицита - стресса.

Способ изобретения гораздо более близок к этим ситуациям. Сущность его заключается в том, что вначале у экспериментальных животных, например крыс, вызывают стресс. Этот процесс осуществляется путем вынужденного плавания животных в водопроводной воде при температуре 18°-20°С по 15-20 минут в течение 3 дней ежедневно. На следующий день производят инъекцию циклофосфана в дозе 8-10 мг/100 г массы тела животного внутрибрюшинно. На 5 день после инъекции проводят прижизненные иммунологические исследования - содержание лейкоцитов и лейкоформула крови, фагоцитоз нейтрофилами по Иванову и Чухловину (К методике определения поглотительной и переваривающей способности нейтрофилов. - Лаб. дело. - 1967. - 10. - 610-613), масс селезенки и тимуса.

Способ осуществляют следующим образом - вначале инициируют модель стресса путем вынужденного плавания животных в питьевой водопроводной воде при температуре 18°-20°С по 15-20 минут в течение 3 дней ежедневно, на следующий день производят разовую внутрибрюшинную инъекцию 8-10 мг циклофосфана в расчете на 100 г массы тела животного в 1,0 мл раствора. На 5-6 день после инъекции исследуют иммунологические показатели.

Для изучения адекватности и тяжести предлагаемой модели изучено 31 крыс-самцов линии Вистар массой тела 200-250 г, разделенные на 4 группы. Первую группу представляли 7 интактных животных. 7 крыс второй группы получали инъекцию циклофосфана в дозе 8-10 мг/100 г массы тела; у 8 животных 3 группы инициировали стресс путем вынужденного плавания животных в питьевой водопроводной воде при температуре 18°-20°С по 15-20 минут в течение 3 дней ежедневно); 4 группа - крысы, у которых сначала инициировался стресс по вышеописанной методике, а затем они получали инъекцию циклофосфана (9).

На 5-6 день после инъекции производилось исследование иммунологических тестов.

Данные таблицы убедительно показывают, что в результате воздействия по способу изобретения развиваются достоверные иммуносупрессорные сдвиги как в отношении масс иммунокомпетентных органов, так и по основным показателя фагоцитоза - ФАЛ (фагоцитарная активность лейкоцитов), ФИЛ (фагоцитарный индекс лейкоцитов) и ПЗФ (показатель завершенности фагоцитоза).

 Влияние разработанной модели и ее компонентов на показатели иммунитетаПоказательГруппаN гр.NMmPМасса селезенки, мгИнтактная17134596,21-2<0.012-3<0.01ц/ф 1,027898100,11-3>0.12-4>0.05стресс381475,1150,41-4>0.63-4>0.2Стресс + ц/ф 1.0491250136,5 Масса тимуса, мгИнтактная19248,324,21-2<0.0012-3<0.01ц/ф 1,027101,618,81-3>0.12-4>0.1стресс38199,924,51-4<0.013-4>0.05Стресс + ц/ф 1.049143,418,4 ФАЛ, %Интактная1947,81,931-2<0.0012-3>0.05ц/ф 1,02723,42,171-3<0.0012-4>0.8стресс3818,801,001-4<0.0013-4<0.05Стресс + ц/ф 1.04922,91,38 ФИЛ, ед.Интактная190,980,091-2<0.0012-3>0.05ц/ф 1,0270,390,081-3<0.0012-4>0.3стресс380,230,021-4<0.0013-4>0.2Стресс + ц/ф 1.0490,300,05 ПЗФ, %Интактная1926,71,451-2<0.0012-3>0.3ц/ф 1,0275,862,421-3<0.0012-4>0.5стресс3810,503,651-4<0.0013-4>0.5Стресс + ц/ф 1.0498,032,78 

Способ может быть проиллюстрирован следующими примерами.

1. Интактная крыса-самец линии Вистар №1, масса тела 210 г. Дополнительных воздействий не получала. Исследование животного осуществлено одновременно с животными опытной группы (на 5 день после инъекции циклофосфана). Масса селезенки 1200 мг, масса тимуса 243 мг, АОК селезенки 104 Кл/чП, ФАЛ 54%, ФИЛ 1,56 ед., ПЗФ 28,2%.

2. Крыса-самец линии Вистар №23, масса тела 210 г получила инъекцию раствора циклофосфана в вышеуказанной дозе. Исследование животного осуществлено на 5 день после инъекции. Масса селезенки 570 мг, масса тимуса 64 мг, АОК селезенки 136 Кл/чП, ФАЛ 26%, ФИЛ 0,28 ед., ПЗФ 7,14%.

3. Крыса-самец линии Вистар №13, масса тела 230 г, у которой сначала инициировался стресс по вышеописанной методике, а затем она получила инъекцию циклофосфана в вышеуказанной дозе. Исследование животного осуществлено на 5 день после инъекции. Масса селезенки 970 мг, масса тимуса 86 мг, АОК селезенки 120 Кл/чП, ФАЛ 24%, ФИЛ 0,36 ед., ПЗФ 11,1%.

4. Крыса-самец линии Вистар №14, масса тела 250 г, у которой сначала инициировался стресс по вышеописанной методике, а затем она получила инъекцию циклофосфана в вышеуказанной дозе. Исследование животного осуществлено на 5 день после инъекции. Масса селезенки 1130 мг, масса тимуса 140 мг, АОК селезенки 160 Кл/чП, ФАЛ 24%, ФИЛ 0,26 ед., ПЗФ 7,6%.

Изобретение относится к экспериментальной медицине и может быть использовано для моделирования иммунодефицита, характерного для онкологических пациентов. Для чего осуществляют вынужденное плавание животных в водопроводной воде при температуре 18°-20°С по 15-20 минут в течение 3 дней ежедневно. Затем на следующий день проводят разовую внутрибрюшинную инъекцию 8-10 мг циклофосфана в расчете на 100 г массы тела животного в 1,0 мл раствора и исследование иммунологических показателей на 5-6 день после инъекции. Способ обеспечивает адекватное воспроизведение модели, наиболее приближенной к реальной ситуации за счет предварительной инициации стресса. 1 табл.

Способ моделирования иммунодефицита, характерного для онкологических пациентов, включающий вынужденное плавание животных в водопроводной воде при температуре 18°-20°С по 15-20 мин в течение 3 дней ежедневно, затем на следующий день разовую внутрибрюшинную инъекцию 8-10 мг циклофосфана в расчете на 100 г массы тела животного в 1,0 мл раствора и исследование иммунологических показателей на 5-6 день после инъекции.