СПОСОБ КОРРЕКЦИИ ГИПЕРГОМОЦИСТЕИН-ИНДУЦИРОВАННОЙ ЭНДОТЕЛИАЛЬНОЙ ДИСФУНКЦИИ ПРЕПАРАТОМ "ФОСФОГЛИВ" КАПСУЛЫ Российский патент 2011 года по МПК G09B23/28 A61K31/683 A61P9/00 A61P43/00 

Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной кардиофармакологии, и может быть использовано для коррекции гипергомоцистеин-индуцированной эндотелиальной дисфункции.

Наиболее близким к заявленному решению является способ коррекции гипергомоцистеинемии с использованием витаминов В₆, B₁₂, фолиевой кислоты и их комбинаций, описанный Toole J.F. и соавторами в статье «Lowering homocysteine in patients with ischemic stroke to prevent recurrent stroke, myocardial infarction and death: the Vitamin Intervention for Stroke Prevention (VISP) randomized controlled trial», опубликованной в журнале JAMA, 2004, №291, p.565-575. В указанной статье описана коррекция повышенного уровня гомоцистеина в плазме крови с помощью применения комбинации витаминов В₆, В₁₂ и фолиевой кислоты.

Однако данный способ не охватывает оценку возможности коррекции гипергомоцистеинемии и гипергомоцистеин-индуцированной эндотелиальной дисфункции в эксперименте с помощью эссенциальных фосфолипидов - препарата «Фосфоглив» капсулы (ОАО «Фармстандарт-Лексредства»).

Задачей изобретения является способ коррекции эндотелиальной дисфункции при гипергомоцистеин-индуцированном дефиците оксида азота, включающий внутрижелудочное введение препарата «Фосфоглив» капсулы в дозе 2,2 г/кг (содержание фосфатидилхолина 231,4 мг/кг).

Поставленная задача достигается тем, что на фоне моделирования эндотелиальной дисфункции внутрижелудочным введением самцам крыс линии Wistar аминокислоты метионин в дозе 3 г/кг ежедневно в течение 7 суток проводится ее коррекция путем внутрижелудочного введения препарата «Фосфоглив» капсулы в дозе 2,2 г/кг в течение 7 суток через 1 час после введения метионина. Оценка развития эндотелиальной дисфункции и ее коррекция препаратом «Фосфоглив» капсулы производится с помощью коэффициента эндотелиальной дисфункции и определения концентрации гомоцистеина в сыворотке крови.

Способ осуществляется следующим образом.

Эксперименты выполнены на половозрелых самцах крыс линии Wistar массой 180-220 г. Раствор для внутрижелудочного введения метионина готовили ex tempore с помощью солюбилизатора ТВИН-80 и 1% крахмального раствора. С целью изучения возможности моделирования эндотелиальной дисфункции метионин (ООО «Полисинтез», г.Белгород) вводили ежедневно 1 раз в сутки внутрижелудочно в дозе 3 г/кг в течение 7 дней (n=10 животных). Второй группе животных через один час после введения метионина внутрижелудочно вводили препарат «Фосфоглив» капсулы в дозе 2,2 г/кг 1 раз в сутки в течение 7 дней. Третьей группе животных производили ежедневное (1 раз в сутки, в течение 7 дней) внутрижелудочное введение 10% раствора ТВИН 80 в дозе 1 мл/кг (контроль, n=10 животных).

На 8 день от начала эксперимента под наркозом (хлоралгидрат 300 мг/кг) вводят катетер в левую сонную артерию для регистрации показателей артериального давления (АД), болюсное введение фармакологических агентов осуществляют в правую бедренную вену. Показатели гемодинамики: систолическое артериальное давление (САД), диастолическое артериальное давление (ДАД) и частоту сердечных сокращений (ЧСС) измеряют непрерывно посредством датчика «Biopac» и компьютерной программы «AcqKnowledge». Функциональные пробы: эндотелийзависимая вазодилатация (ЭЗВ) - внутривенное введение ацетилхолина (АХ) в дозе 40 мкг/кг, эндотелийнезависимая вазодилатация (ЭНЗВ) - внутривенное введение нитропруссида натрия (НП) в дозе 30 мкг/кг.

Степень развития эндотелиальной дисфункции и степень ее коррекции оценивается с помощью коэффициента эндотелиальной дисфункции, являющегося отношением площади треугольника над трендом реакции восстановления АД в ответ на введение НП к площади треугольника над трендом реакции восстановления АД в ответ на введение АХ.

Степень развития гипергомоцистеинемии оценивается по содержанию гомоцистеина в сыворотке крови экспериментальных животных. Концентрация гомоцистеина определяется методом иммунотурбодиметрии с помощью набора фирмы Pliva-Lachema Diagnostika s.r.o.

При статистической обработке данных рассчитывали среднее значение, величину стандартного отклонения. Различия считали достоверными при p<0,05.

Пример конкретного выполнения

В таблице 1 представлены данные о влиянии внутрижелудочного введения метионина на функциональные показатели сердечно-сосудистой системы экспериментальных животных.

Обнаружено, что ежедневное введение метионина по обозначенной схеме не вызывает достоверного изменения артериального давления (таблица 1). Внутрижелудочное введение препарата «Фосфоглив» также не влияло на показатели гемодинамики (таблица 1).

Обработка полученных экспериментальных данных при проведении функциональных проб на эндотелийзависимое (ацетилхолин 40 мкг/кг в/в) и эндотелийнезависимое (нитропруссид 30 мг/кг в/в) расслабление сосудов у экспериментальных животных позволила установить, что внутрижелудочное введение 10% раствора ТВИН-80 в дозе 1 мл/кг не вызывает повышения коэффициента эндотелиальной дисфункции. Достоверное повышение коэффициента эндотелиальной дисфункции получили в группе животных с внутрижелудочным введением метионина в дозе 3 г/кг в течение 7 дней (КЭД равен 3,3±0,3) (таблица 1).

Таблица 1 Влияние метионина и препарата «Фосфоглив» капсулы на показатели гемодинамики и коэффициент эндотелиальной дисфункции при моделировании гомоцистеин-индуцированной эндотелиальной дисфункции (М±m). Группы животных Функциональная проба САД, мм рт.ст ДАД, мм рт.ст S сосудистой реакции при проведении ЭЗВД с АХ и ЭНВД с НП, усл.ед. КЭД, усл.ед. 10% ТВИН 80
1 мл/кг
Контроль Исходные 129,2±4,3 82,4±5,9     АХ 74,1±2,9 39,4±3,1 1124,2±63,7 0,9±0,2 НП 67,2±5,1 42,9±5,4 1011,8±94,6   Метионин 3 г/кг
1 раз/сутки в течение 7 дней Исходные 118,9±10,1 76,6±7,2     АХ 80,1±2,9 41,4±2,3 854,6±61,4* 3,3±0,3* НП 72,3±6,7 45,9±4,3 2820,2±210,4*   Метионин 3 г/кг + Фосфоглив капсулы 2,2 г/кг Исходные 117±2 72,6±5,4   1,7±0,2** АХ 80,6±2,9 38,9±1,6 810,3±63,7   НП 102,1±5,9 58,7±3,7 1402±161**   * - р<0,05 - в сравнении с группой животных, получавших 10% ТВИН 80; ** - р<0,05 - в сравнении с группой животных, получавших метионин. САД - систолическое артериальное давление, ДАД - диастолическое артериальное давление, S - площадь над кривой восстановления артериального давления при проведении фармакологических проб, КЭД - коэффициент эндотелиальной дисфункции.

Внутрижелудочное введение препарата «Фосфоглив» капсулы производства ОАО «Фармстандарт-Лексредства» в дозе 2,2 г/кг вызывает достоверное снижение коэффициента эндотелиальной дисфункции до 1,7±0,2 (таблица 1).

Результаты определения концентрации гомоцистеина в сыворотке крови позволили установить достоверное повышение уровня гомоцистеина в группе экспериментальных животных, получавших метионин в дозе 3 г/кг. Значение концентрации гомоцистеина в группе животных, получавших метионин и препарат «Фосфоглив» капсулы в дозе 2,2 г/кг, достоверно уменьшалось (таблица 2).

Таблица 2 Влияние метионина и препарата «Фосфоглив» капсулы на концентрацию гомоцистеина при моделировании гомоцистеин-индуцированной эндотелиальной дисфункции (М±m). Группы животных 10% ТВИН 80 1 мл/кг Контроль Метионин 3г/кг 1 раз/сутки в течение 7 дней Метионин 3 г/кг + Фосфоглив капсулы 2,2 г/кг Концентрация гомоцистеина (мкмоль/л) 8,6±2,1 53,5±3,2* 39,4±3,1** * - p<0,05 - в сравнении с группой животных, получавших 10% ТВИН 80; ** - p<0,05 - в сравнении с группой животных, получавших метионин.

Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной кардиофармакологии, и может быть использовано для коррекции гипергомоцистеин-индуцированной эндотелиальной дисфункции. Для этого у белых крыс-самцов линии Wistar моделируют эндотелиальную дисфункцию внутрижелудочным введением метионина в дозе 3 г/кг ежедневно в течение 7 суток. При этом оценивают степень развития дисфункции по соотношению показателей эндотелийнезависимой и эндотелийзависимой вазодилатации, а также по повышению концентрации гомоцистеина. Коррекцию эндотелиальной дисфункции проводят внутрижелудочным введением препарата «Фосфоглив» - капсулы в дозе 2,2 г/кг один раз в день через час после введения метионина. Способ обеспечивает изучение коррекции гипергомоцистеин-индуцированной эндотелиальной дисфункции с помощью фосфоглива при создании определенной модели указанной патологии. 2 табл.

Способ коррекции гипергомоцистеин-индуцированной эндотелиальной дисфункции, отличающийся тем, что в эксперименте белым крысам самцам линии Wistar с эндотелиальной дисфункцией, моделируемой внутрижелудочным введением аминокислоты метионин в дозе 3 г/кг ежедневно, в течение 7 суток, оценивая степень развития дисфункции по отношению показателей эндотелийнезависимой и эндотелийзависимой вазодилатации и повышению концентрации гомоцистеина, внутрижелудочно, через 1 ч после введения метионина, вводят препарат «Фосфоглив» - капсулы в дозе 2,2 г/кг один раз в день, в течение 7 суток.