СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ СРЕДСТВА, ОБЛАДАЮЩЕГО ЖЕЛЧЕГОННЫМ ДЕЙСТВИЕМ Российский патент 2012 года по МПК A61K36/534 A61K36/23 A61K36/28 B01D11/02 A61P1/16 

Изобретение относится к фармацевтической промышленности и может быть использовано для получения средств, обладающих желчегонным действием.

Известен способ получения настоя желчегонного сбора №2 (Государственный Реестр лекарственных средств, том I. 2006.). Для приготовления водного извлечения 4 г сбора заливают 200 мл воды очищенной комнатной температуры, настаивают в инфундирном аппарате в течение 15 минут, затем охлаждают при комнатной температуре в течение 45 минут; процеживают, отжимают и добавляют воду до требуемого объема.

Недостатком известного способа является то, что в результате получают средство, не имеющее постоянного состава, нестойкое при хранении, характеризующееся высокой степенью микробной обсемененности. Кроме того, технология получения настоя не позволяет в полной мере извлечь из сырья комплекс гидрофобных биологически активных веществ, ответственных за проявление фармакологического эффекта, и провести соответствующую стандартизацию препарата. Приготовление в домашних условиях ведет к возможности нарушения технологического процесса, трудностям в индивидуальном дозировании. Термическое воздействие при получении водного извлечения сопровождается физико-химическими превращениями, снижающими фармакологическую активность биологически активных компонентов растений.

Таким образом, известное техническое решение не дает возможности извлечь из известной композиции, проявляющей ту же активность и характеризующейся сходными признаками: качественным и количественным составом, полный комплекс действующих веществ и использовать его в виде удобной и дозированной лекарственной формы.

Новая техническая задача - разработка способа, позволяющего получить на основе стандартизированного экстрактивного комплекса природного сырья желчегонного сбора №2 средство, обладающее высокой биологической активностью и характеризующееся лучшими товароведческими показателями по сравнению с водным извлечением.

Для решения поставленной задачи в способе получения средства, обладающего желчегонным действием, заключающемся в экстракции сбора растительного сырья содержащего: цветки бессмертника песчаного, плоды кориандра посевного, траву тысячелистника обыкновенного и листья мяты перечной, измельченные, кроме плодов кориандра, до 3-5 мм, взятые в соотношении 4:2:2:2, экстрагируют 40% этиловым спиртом путем многоступенчатой противоточной экстракции, содержащей от 1 до 6 ступеней экстрагирования, со временем настаивания 12 часов, после отстаивания при 7-8°С в течение 2 суток экстракт подвергают фильтрации и сгущению под вакуумом при температуре не более 50°С до содержания влаги не более 25%.

Способ осуществляют следующим образом. Сбор растительного сырья, содержащего: цветки бессмертника песчаного, плоды кориандра посевного, траву тысячелистника обыкновенного и листья мяты перечной, измельченные, кроме плодов кориандра, до 3-5 мм, взятые в соотношении 4:2:2:2, экстрагируют 40% этиловым спиртом путем многоступенчатой противоточной экстракции, содержащей от 1 до 6 ступеней экстрагирования, со временем настаивания 12 часов, коэффициентом съема готовой продукции - 2,0 с последующим сгущением экстракта до остаточной влажности 25%.

Предлагаемое техническое решение иллюстрируется следующим примером.

Предварительно измельченное до 3-5 мм сырье листьев мяты перечной, травы тысячелистника обыкновенного, цветков бессмертника песчаного, не измельченные плоды кориандра смешивают в соотношении 4:2:2:2 и экстрагируют спиртом этиловым 40% методом противоточной многоступенчатой экстракции. Время настаивания 12 часов. Первый слив готового продукта проводят через 5 суток в объеме, соответствующем количеству, в 2,0 раза превышающему массу сырья, загруженному в 1 перколятор (1:2,0), что позволяет истощить сырье на 86% по величине содержания полифенольных соединений (гидроксикоричных кислот ГКК), основных БАВ, ответственных за желчегонный эффект. После отстаивания при 7-8°С в течение 2 суток экстракт подвергают фильтрации и сгущению под вакуумом при температуре не более 50°С до содержания влаги не более 25%.

Проведенная сравнительная оценка эффективности предлагаемого способа свидетельствует, что содержание ГКК в сравнении со стандартным методом получения извлечения из желчегонного сбора №2 в 2 раза превышает соответствующий показатель. Доброкачественность экстракта по ГКК возрастает с 0,1 до 0,17, а истощение сырья по другому показателю, экстрактивным веществам, увеличивается в 1,6 раз (таблица 1).

Для разработки эффективного способа и отработки технологических параметров режима экстракции, влияющих на процесс извлечения биологически активных веществ из желчегонного сбора №2, была проведена серия экспериментов, результаты которых представлены в таблице 2.

Пример 1

Высушенные цветки бессмертника песчаного, листья мяты перечной, траву тысячелистника обыкновенного измельчают до размеров 3-5 мм, смешивают одновременно с цельными плодами кориандра посевного в соотношении 4:2:2:2 и экстрагируют 60% спиртом этиловым методом противоточной многоступенчатой экстракции. Время настаивания 12 ч.

Выход:

ЭВ 2,12%, гидроксикоричные кислоты 2,56%.

Пример 2

Высушенные цветки бессмертника песчаного, листья мяты перечной, траву тысячелистника обыкновенного измельчают до размеров 3-5 мм, смешивают одновременно с цельными плодами кориандра посевного в соотношении 4:2:2:2 и экстрагируют 60% спиртом этиловым методом противоточной многоступенчатой экстракции. Время настаивания 6 ч.

Выход:

ЭВ 0,92%, гидроксикоричные кислоты 2,01%.

Пример 3

Высушенные цветки бессмертника песчаного, листья мяты перечной, траву тысячелистника обыкновенного измельчают до размеров не более 1 мм, смешивают одновременно с цельными плодами кориандра посевного в соотношении 4:2:2:2 и экстрагируют 60% спиртом этиловым методом противоточной многоступенчатой экстракции. Время настаивания 12 ч.

Выход:

ЭВ 2,15%, гидроксикоричные кислоты 2,75%.

Пример 4

Высушенные цветки бессмертника песчаного, листья мяты перечной, траву тысячелистника обыкновенного измельчают до размеров не более 1 мм, смешивают одновременно с цельными плодами кориандра посевного в соотношении 4:2:2:2 и экстрагируют 60% спиртом этиловым методом противоточной многоступенчатой экстракции. Время настаивания 6 ч.

Выход:

ЭВ 1,71%, гидроксикоричные кислоты 2,21%.

Пример 5

Высушенные цветки бессмертника песчаного, листья мяты перечной, траву тысячелистника обыкновенного измельчают до размеров 3-5 мм, смешивают одновременно с цельными плодами кориандра посевного в соотношении 4:2:2:2 и экстрагируют 40% спиртом этиловым методом противоточной многоступенчатой экстракции. Время настаивания 12 ч.

Выход:

ЭВ 1,92%, гидроксикоричные кислоты 2,49%.

Пример 6

Высушенные цветки бессмертника песчаного, листья мяты перечной, траву тысячелистника обыкновенного измельчают до размеров 3-5 мм, смешивают одновременно с цельными плодами кориандра посевного в соотношении 4:2:2:2 и экстрагируют 40% спиртом этиловым методом противоточной многоступенчатой экстракции. Время настаивания 6 ч.

Выход:

ЭВ 1,68%, гидроксикоричные кислоты 1,50%.

Пример 7

Высушенные цветки бессмертника песчаного, листья мяты перечной, траву тысячелистника обыкновенного измельчают до размеров не более 1 мм, смешивают одновременно с цельными плодами кориандра посевного в соотношении 4:2:2:2 и экстрагируют 40% спиртом этиловым методом противоточной многоступенчатой экстракции. Время настаивания 12 ч.

Выход:

ЭВ 2,79%, гидроксикоричные кислоты 2,55%.

Пример 8

Высушенные цветки бессмертника песчаного, листья мяты перечной, траву тысячелистника обыкновенного измельчают до размеров не более 1 мм, смешивают одновременно с цельными плодами кориандра посевного в соотношении 4:2:2:2 и экстрагируют 40% спиртом этиловым методом противоточной многоступенчатой экстракции. Время настаивания 6 ч.

Выход:

ЭВ 2,04%, гидроксикоричные кислоты 1,67%.

Влияние числа ступеней экстракции на выход БАВ, выраженное через степень истощения сырья, было рассчитано теоретически (ЭВ) и проверено экспериментально (ЭВ, ГКК), введение 7-й ступени экстракции к значимому повышению истощаемости не приводит, результаты представлены на Фиг.1.

Пример 9

Высушенные цветки бессмертника песчаного, листья мяты перечной, траву тысячелистника обыкновенного измельчают до размеров 3-5 мм, смешивают одновременно с цельными плодами кориандра посевного в соотношении 4:2:2:2 и экстрагируют 40% спиртом этиловым методом противоточной многоступенчатой экстракции через три ступени экстракции. Соотношение фаз (1:1), время настаивания 6 ч.

Истощение сырья по:

ЭВ 40,56%, гидроксикоричным кислотам 47,92%.

Пример 10

Высушенные цветки бессмертника песчаного, листья мяты перечной, траву тысячелистника обыкновенного измельчают до размеров 3-5 мм, смешивают одновременно с цельными плодами кориандра посевного в соотношении 4:2:2:2 и экстрагируют 40% спиртом этиловым методом многоступенчатой противоточной экстракции через четыре ступени экстракции. Соотношение фаз (1:1), время настаивания 6 ч.

Истощение сырья по:

ЭВ 43,90%, гидроксикоричным кислотам 52,50%.

Пример 11

Высушенные цветки бессмертника песчаного, листья мяты перечной, траву тысячелистника обыкновенного измельчают до размеров 3-5 мм, смешивают одновременно с цельными плодами кориандра посевного в соотношении 4:2:2:2 и экстрагируют 40% спиртом этиловым методом противоточной многоступенчатой экстракции через пять ступеней экстракции. Соотношение фаз (1:1), время настаивания 6 ч.

Истощение сырья по:

ЭВ 48,40%, гидроксикоричным кислотам 56,90%.

Пример 12

Высушенные цветки бессмертника песчаного, листья мяты перечной, траву тысячелистника обыкновенного измельчают до размеров 3-5 мм, смешивают одновременно с цельными плодами кориандра посевного в соотношении 4:2:2:2 и экстрагируют 40% спиртом этиловым методом противоточной многоступенчатой экстракции через шесть ступеней экстракции. Соотношение фаз (1:1), время настаивания 6 ч.

Истощение сырья по:

ЭВ 54,10%, гидроксикоричным кислотам 61,16%.

Пример 13

Высушенные цветки бессмертника песчаного, листья мяты перечной, траву тысячелистника обыкновенного измельчают до размеров 3-5 мм, смешивают одновременно с цельными плодами кориандра посевного в соотношении 4:2:2:2 и экстрагируют 40% спиртом этиловым методом противоточной многоступенчатой экстракции через семь ступеней экстракции. Соотношение фаз (1:1), время настаивания 6 ч.

Истощение сырья по:

ЭВ 55,40%, гидроксикоричным кислотам 62,90%.

В результате обработки полученных данных были подобраны наиболее значимые факторы и их оптимальные параметры, положенные в основу предлагаемого способа экстракции, т.е. многоступенчатую противоточную экстракцию желчегонного сбора №2 необходимо проводить при следующих параметрах:

1. Измельчение соответственно до 3-5 мм (плоды кориандра не измельчать).

2. 40-60% этиловым спиртом.

3. Использование от 1 до 6 ступеней экстрагирования (перколяторов).

4. Время настаивания от 6 до 12 ч.

5. Коэффициентом съема готовой продукции, равным - 2,0.

Изучение желчегонного действия экстрактивного комплекса ЖС-2, полученного предлагаемым способом, проведено в условиях острых опытов на белых крысах. Результаты эксперимента свидетельствуют, что экстрактивный комплекс значимо усиливает интенсивность секреции желчи у крыс, вследствие чего общее количество желчи, выделившееся за 4 часа в среднем, на 68,4% превышает аналогичные показатели контрольной и на 44,2% - показатели опытной группы животных, получавших соответственно воду очищенную и настой. Характерным для него является более существенное в сравнении с действием настоя увеличение скорости секреции желчи и изменение ее компонентного состава. А также улучшение общего физико-химического состояния желчи, на что указывает рост холат-холестеринового коэффициента до 13,03 ед. против контрольной величины 9,54 ед. (таблица 3).

Таким образом, предлагаемый способ позволяет более эффективно использовать биологически активные вещества растительного сырья: цветков бессмертника песчаного, плодов кориандра посевного, травы тысячелистника обыкновенного и листьев мяты перечной путем экстракции спиртом этиловым 40. Использование средства в виде густого экстракта с последующим возможным переводом в твердую лекарственную форму позволяет значительно улучшить биологическую доступность вышеперечисленных растительных компонентов, удобство при применении, повысить стабильность, точность дозирования и уровень стандартизации.

Приложение

Таблица 1. Сравнительная оценка эффективности предлагаемого способа в сравнении с известным методом.

Таблица 2. Влияние режима обработки на качество конечного продукта.

Таблица 3. Влияние препаратов на основе ЖС-2 на интенсивность секреции и состав желчи крыс при однократном введении.

Фиг.1 Зависимость степени истощения БАВ ЖС-2 от числа ступеней экстракции.

Таблица 1 Показатель Извлечение по методике производителя Экстракция 6-ступенчатая Соотношение фаз 1-50 1-2 Экстрагент вода горячая 40% спирт этиловый Метод экстрагирования 15 мин на кипящей водяной бане, 45 мин при комнатной температуре противоточное ступенчатое экстрагирование Время экстракции, ч - 12 Масса обработанного сырья, г 4,0 120,0 Объем полученного извлечения, мл 200,0 240,0 Объем экстрагента общий, мл 200,0 648,0 Сумма ЭВ в сырье (в 100 г сбора) 23,0±1,1 15,7±0,7 Содержание ЭВ в извлечении ЖС-2, % 0,22±0,01 6,06±0,25 Сумма ЭВ в извлечении ЖС-2 на 100 г сырья 11,00±0,47 12,12±0,46 Истощение сырья по ЭВ,% 47,83±2,00 77,20±3,47 Сумма ГКК в сырье (в 100 г сбора) 2,4±0,12 Содержание ГКК в извлечении ЖС-2, % 0,021±0,001 1,03±0,04 Сумма ГКК в извлечении ЖС-2 на 100 г сырья 1,05±0,034 2,06±0,1 Истощение сырья по ГКК, % 43,75±1,4 85,83±2,58 Доброкачественность извлечения по ГКК 0,10 0,17

Таблица 2 номер опыта концентрация экстрагента размер частиц, мм время настаивания, ч ЭВ, % гидроксикоричные кислоты, % 1 60 4-5 12 2,12 2,56 2 60 4-5 6 0,92 2,01 3 60 ≤1 12 2,15 2,75 4 60 ≤1 6 1,71 2,21 5 40 4-5 12 1,92 2,49 6 40 4-5 6 1,68 1,50 7 40 ≤1 12 2,79 2,55 8 40 ≤1 6 2,04 1,67

Таблица 3 Группы животных Общий объем желчи за 4 часа, мл/кг Средняя скорость секреции желчи, мл/кг/ч Биохимические показатели желчи билирубин, мкмоль на литр желчные кислоты, мг % холестерин, мг % ХХК контрольная (n=8) 7,0±0,3 1,77 46,84±2,0 117,38±4,9 12,30±0,6 9,54 1. настой (n=10) 8,7¹±0,4 2,19¹ 50,70±1,5 142,77¹±5,4 13,22¹±0,5 10,81¹ 2. экстракт (n=10) 11,9^1,2±0,6 2,97^1,2 52,94±2,0 175,21^1,2±3,7 13,46¹±0,5 13,03^1,2 Примечание: p<0,05 по сравнению с группой:
¹ контрольная; ² 1-я опытная (вводили настой ЖС-2).

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, в частности к средству, обладающему желчегонным действием. Способ получения средства, обладающего желчегонным действием, заключающийся в том, что измельченные цветки бессмертника песчаного, траву тысячелистника обыкновенного и листья мяты перечной смешивают с плодами кориандра, экстрагируют 40% этиловым спиртом путем многоступенчатой противоточной экстракции, отстаивают, фильтруют, сгущают при определенных условиях. Средство, полученное вышеописанным способом, обладает высокой фармакологической активностью и стабильностью. 1 ил., 3 табл, 13 пр.

Способ получения средства, обладающего желчегонным действием, заключающийся в том, что цветки бессмертника песчаного, траву тысячелистника обыкновенного и листья мяты перечной, измельченные до 3-5 мм смешивают с плодами кориандра в соотношении 4:2:2:2, экстрагируют 40% этиловым спиртом путем многоступенчатой противоточной экстракции от 1 до 6 ступенями экстрагирования, со временем настаивания 12 ч, коэффициентом съема готовой продукции - 2,0, отстаивают при температуре 7-8°С, в течение 2 суток, фильтруют, сгущают экстракт до остаточной влажности 25%.