6-МЕТИЛ-1-(ТИЕТАНИЛ-3)УРАЦИЛ, СТИМУЛИРУЮЩИЙ ЗАЩИТНУЮ АКТИВНОСТЬ ФАГОЦИТОВ Российский патент 2013 года по МПК C07D409/04 A61P39/06 A61P9/00 

Предлагаемое изобретение относится к органической химии и медицине, а именно к новому соединению - 6-метил-1-(тиетанил-3)урацилу, стимулирующему защитную активность фагоцитов.

В качестве прототипа и препарата сравнения взят метилурацил (бета-форма 2,4-диоксо-6-метил-1,2,3,4-тетрагидропиримидина), применяемый в медицине [Машковский М.Д. Лекарственные средства. // М., ООО «Новая волна», 2004, т.2, с.160-161], известный в качестве средства для активации альвеолярных макрофагов [патент RU 2063226, 1996 г.].

Задачей изобретения является расширение арсенала биологически активных веществ, в том числе обладающих фагоцитарной активностью.

Технический результат - получение биологически активного вещества, стимулирующего защитную активность фагоцитов.

Сущность изобретения: 6-метил-1-(тиетанил-3)урацил формулы (I):

стимулирующий защитную активность фагоцитов.

Указанное соединение и его свойства в литературе не описаны.

Заявляемое соединение синтезируют взаимодействием 6-метилурацила с 2-хлорметилтиираном в присутствии гидроксида калия в водной среде в результате тииран-тиетановой перегруппировки.

Пример 1. Синтез заявляемого соединения

К раствору 4,02 г (72 ммоль) гидроксида калия в 60 мл воды добавляют 7,56 г (60 ммоль) 6-метилурацила и нагревают до 50°С. Затем добавляют 6,9 г (66 ммоль) 2-хлорметилтиирана и перемешивают 2 часа при 50-55°С. Осадок отфильтровывают из горячей реакционной смеси, обрабатывают этилацетатом, горячей водой, сушат при 60°С. Тпл.=231-233°С. Получают 3,03 г (29%) 6-метил-1-(тиетанил-3)урацила, очищают кристаллизацией из смеси этанол-вода (объемное соотношение 1:1). Непрореагированный 6-метилурацил количественно возвращают в синтез.

ИК спектр, ν, см^-1: 710 (S(CH₂)₂), 1348 (C-N), 1741 (C²=O), 1640 (C⁴=O), 1607 (C=C), 2953 (N-H).

Спектр ЯМР ¹H (DMFA-d₇), δ, м.д.: 1,66 (3Н, с, 6-СН₃); 2,20-2,32 (2Н, м, S(CH)₂); 3,34-3,40 (2Н, м, S(CH)₂); 4,60 (1Н, с, 5-H); 5,15-5,21 (1Н, м, NCH); 10,30 (1Н, уш. с, 3-NH).

Спектр ЯМР ¹³С (DMFA-d₇), δ, м.д.: 17,99 (6-СН₃); 32,07 (S(CH₂)₂); 47,05 (NCH); 151,95 (С⁵); 152,45 (С⁶); 162,39 (С²); 162,59 (С⁴).

Масс-спектр (ЭУ, 70 эВ), m/z (I_отн, %): 198 [M]⁺ (28), 151 [M-SMe]⁺ (17), 127 [M-CHS(CH₂)₂]⁺ (100).

Элементный анализ.

Найдено, %: С 48,51; Н 5,15; N 14,58 - C₈H₁₀O₂N₂S.

Вычислено, %: С 48,55; Н 5,21; N 14,37.

Заявляемое соединение представляет собой белый или белый с желтоватым оттенком кристаллический порошок, нерастворимый в воде, этаноле, хлороформе, растворимый в диметилформамиде, диметилсульфоксиде, растворах щелочей.

Пример 2. Фагоцитарная активность

Влияние заявляемого соединения и препарата сравнения на процессы свободнорадикального окисления (СРО) в модельных системах in vitro изучали с использованием экспресс-метода, основанного на регистрации хемилюминесценции (ХЛ) - свечения, возникающего при взаимодействии свободных радикалов (Байматов В.Н., Фархутдинов P.P., Багаутдинов A.M. // Хемилюминесцентные методы исследования свободнорадикального окисления в сельском хозяйстве, ветеринарной медицине и животноводстве. - Уфа, изд-во «Здравоохранение Башкортостана», 2009. - 104 с.).

Хемилюминесценцию регистрировали на установке ХЛМ-003 (Россия). ХЛ модельных систем характеризовалась спонтанным свечением, быстрой вспышкой и развивающейся затем медленной вспышкой. Основными наиболее информативными характеристиками ХЛ служили светосумма свечения, определяющаяся по интенсивности излучения, и амплитуда максимального свечения.

Для оценки влияния исследуемых соединений на процессы СРО in vitro исследования были проведены на модельных системах, генерирующих активные формы кислорода (АФК) в клетках крови (модель фагоцитоза).

Характер влияния на процессы генерации свободных радикалов фагоцитами изучали по схеме: гепаринизированную венозную кровь в объеме 0,1 мл инкубировали с исследуемым препаратом в течение 5 мин, затем смешивали с 2,0 мл подогретого до 37°С раствора люминола (5×10^-5 М) и измеряли ХЛ в течение 5 мин.

Препараты добавляли в модельные системы в концентрациях, соответствующих терапевтической дозе назначаемого препарата, - метилурацил. В качестве контроля использовали модельные системы, в которых вместо исследуемых препаратов добавляли 0,9% физиологический раствор в том же объеме.

Изобретение иллюстрируется чертежом, на котором представлено влияние заявляемого соединения и метилурацила на процессы СРО в модельной системе фагоцитоза (венозная кровь), где К - контроль, I - заявляемое соединение, II - препарат сравнения метилурацил.

В крови образование АФК сопровождалось ХЛ, усиливающейся в присутствии люминола. Интенсивность ХЛ коррелирует с потреблением клетками кислорода и степенью завершенности фагоцитоза. Добавление заявляемого соединения вызывало увеличение светосуммы и максимальной светимости люминолзависимой хемилюминесценции по сравнению с уровнем обозначенных параметров интактных клеток крови (см. чертеж). Это свидетельствует о том, что данное соединение стимулирует фагоцитарную активность клеток крови.

Влияние заявляемого соединения на процессы СРО в модельной системе фагоцитоза представлено в таблице.

Заявляемое химическое соединение стимулирует фагоцитарную активность клеток крови, превосходя метилурацил в 2 раза.

Таблица Влияние заявляемого соединения на процессы СРО в модельной системе фагоцитоза Соединение Клетки крови (светосумма, у.е.) 0,01 мг/мл Контроль 43,6 I 65,8 II 131,0

Предлагаемое изобретение относится к новому соединению - 6-метил-1-(тиетанил-3)урацилу формулы I:

стимулирующему защитную активность фагоцитов. 1 з.п. ф-лы, 1 ил.,1 табл., 2 пр.

1. 6-Метил-1-(тиетанил-3)урацил формулы:

2. Вещество по п.1, стимулирующее защитную активность фагоцитов.