СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ КАРБОКСИЗАЩИЩЕННЫХ ГЛИКОПЕПТИДОВ ГЛИЦИРРИЗИНОВОЙ КИСЛОТЫ Российский патент 2016 года по МПК C07J53/00 

Изобретение относится к новому способу получения производных тритерпенового гликозида - глицирризиновой кислоты (ГК) (I) - гликопептидов формулы (IIa-g), являющихся коньюгатами ГК с метиловыми эфирами аминокислот, представляющих интерес для медицины в качестве иммуномодуляторов и противовирусных агентов [Кондратенко P.M., Балтина Л.А., Е.В. Васильева, Л.А. Балтина (мл.), А.Ф. Исмагилова, Х.М. Насыров, Н.Ж. Басченко, Р.М. Киреева. Синтез и иммуностимулирующая активность цистеинсодержащих гликопептидных производных глицирризиновой кислоты. // Биоорган, химия, 2004, т. 30, №1, с. 61-67; Hoever G., Baltina L., Michaelis M., Kondratenko R., Baltina L., Tolstikov G., Doerr H.W., Cinatl J., Jr. Antiviral activity of Glycyrrhizic acid derivatives against SAES-Coronavirus. // J. Med. Chem., 2006, 48, 1256-1259; Lin J.-Ch., Cherng J.-M., Hung M.-Sh., Baltina L.A., Baltina L., Kondratenko R. Inhibitory effects of some derivatives of Glycyrrhizic acid against Epstein-Barr virus infection: Structure-activity reationships. // Antiviral Res., 2008, 79, 6-11).

Известен способ получения карбоксизащищенных гликопептидов ГК по схеме 1 (прототип) [RU 2057139 C1, 27.03.1996; Балтина Л.А., Рыжова С.А., Васильева Е.В., Калина А.П., Толстиков Г.А. Трансформации глицирризиновой кислоты. IV. Новый способ получения карбоксизащищенных гликопептидов. Ж. общей хим., 1993, т. 63, вып. 9, 2140-2147].

Способ представляет собой двухстадийный процесс (схема 1), который заключается в обработке ГК (I) N-гидроксибензотриазолом (HOBt) и N,N′-дициклогексилкарбодиимидом (DCC) в среде растворителя (ТГФ или диоксан) при соотношении реагентов ГК/HOBt/DCC, равном 1/3.5-4.0/3.4-4.0 ммоль при 0-5°C 1 ч, при комнатной температуре 6-8 ч с получением активированного эфира (III), который после отделения осадка образующейся N,N′-дициклогексилмочевины (IV) подвергают взаимодействию с эфирами аминокислот (метиловыми, трет-бутиловыми, бензиловыми, 4-нитробензиловыми) (3.5-4.0 ммоль) в виде их гидрохлоридов, тозилатов или бензолсульфонатов (аминокомпонент) (АК) в присутствии третичного амина - N-метилморфолина (NMM), триэтиламина (Et₃N) или трибутиламина (Bu₃N) (4.2-7.2 ммоль). Выход карбоксизащищенных гликопептидов ГК (IIa, IIf, IIe, IIg, Va-Vg), содержащих по три остатка эфиров аминокислот, составил 82-94%.

Основным недостатком данного способа получения карбоксизащищенных гликопептидов ГК является его двухстадийность, связанная с получением на первой стадии активированного эфира (III), и последующее его взаимодействие с аминокомпонентом, получаемым из гидрохлоридов, тозилатов или бензолсульфонатов эфиров аминокислот в растворе с помощью третичного амина (NMM, Et₃N, Bu₃N), что удлиняет время проведения реакции до 24 ч. Несмотря на то что образующаяся на первой стадии синтеза дициклогексилмочевина (IV) очень плохо растворима в органических растворителях, иногда ее не удается полностью удалить из реакционной смеси, и количественное отделение ее от продукта реакции - активированного эфира (III) в ряде случаев бывает затруднительным, что приводит к загрязнению целевого гликопептида - продукта взаимодействия эфира (III) с аминокомпонентом. В качестве конденсирующих реагентов более привлекательными являются водорастворимые карбодиимиды, в частности N-этил-N′-диметиламинопропилкарбодиимид (1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимид) (DEC) (VI), который позволяет решать эту проблему, так как не образует дициклогексилмочевину, избыток его и продукт присоединения молекулы воды остаются в водном растворе при обработке реакционной смеси водой. Кроме того, использование DEC в качестве конденсирующего реагента не требует применения сухих растворителей. Ранее DEC в синтезе гликопептидов - коньюгатов ГК с эфирами аминокислот не применялся.

Задача, на решение которой направлено заявленное техническое решение, заключается в разработке улучшенного способа получения карбоксизащищенных гликопептидов ГК с использованием ГК (I) без предварительной защиты гидроксильных групп углеводной части молекулы и гидрохлоридов метиловых или трет-бутиловых эфиров аминокислот, позволяющего получать целевые продукты - карбоксизащищенные гликопептиды ГК с высоким выходом (90-95%) в одну стадию за более короткое время (10-12 ч).

В заявленном техническом решении поставленная цель достигается тем, что ГК (I), HOBt и аминокомпонент - гидрохлорид эфира аминокислоты (метилового, трет-бутилового) R₁NH₂·HCl, где R₁=С₆Н₅СН₂СН(СООСН₃)-, НОС₆Н₄СН₂СН(СООСН₃)-, (СН₃)₂СНСН₂СН(СООСН₃)-, СН₃СН₂СН(СН₃)СН(СООСН₃)-, (СН₃)₂СНСН(СООСН₃)-, CH₃SCH₂CH₂CH(COOCH₃)-, С₆Н₅СН₂SСН₂CH(СООС(СН₃)₃- обрабатывают карбодиимидом - 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимида гидрохлоридом (DEC) в растворе N,N′-диметилформамида (DMF) при мольном соотношении реагентов ГК/HOBt/АК/карбодиимид, равном 1/3.5-4.0/3.5-4.0/3.5-4.0 ммоль в присутствии избытка третичного амина - N-этилморфолина (NEM), NMM или Et₃N (8-10 ммоль) при комнатной температуре - 10-12 ч (схема 2). Целевые продукты - карбоксизащищенные гликопептиды ГК (IIa-IIg) выделяют путем разбавления реакционной смеси холодной водой, подкисляют лимонной кислотой до рН ~3-4, осадок отфильтровывают, промывают водой и сушат. Выход карбоксизащищенных гликопептидов ГК (IIa-IIg) составляет 90-95%.

Существенные отличия и преимущества предлагаемого способа заключаются в следующем.

Для активации карбоксильных групп ГК (I) используются N-гидроксибензотриазол (HOBt) и 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимида гидрохлорид (DEC) (схема 2) вместо HOBt и DCC (схема 1) в способе-прототипе. В ходе реакции не образуется дициклогексилмочевина (IV), как в способе-прототипе, которую необходимо удалять фильтрованием, а образуется водорастворимая мочевина DECH, которая остается в водном растворе при выделении продукта реакции путем разбавления реакционной смеси водой с подкислением лимонной кислотой.

Реакция проводится в одну стадию за более короткое время (10-12 ч).

В качестве растворителя используется DMF вместо ТГФ и диоксана.

Способ обладает высокой селективностью (побочных продуктов реакции не обнаружено), что позволяет получать целевые соединения с высоким выходом (90-95%).

Сущность изобретения иллюстрируется следующими примерами.

Пример 1. Общая методика получения гликопептидов ГК (IIa-IIg)

К раствору 0.82 г (1 ммоль) глицирризиновой кислоты в 15-20 мл DMF прибавили 0.48 г - 0.54 г (3.5-4.0 ммоль) HOBt, 3.5-4.0 ммоль гидрохлорида эфира аминокислоты (метилового, трет-бутилового), 0.67-0.76 г (3.5-4.0 ммоль) DEC, 8-10 ммоль третичного амина (NEM, NMM, Et₃N) и перемешивали смесь при комнатной температуре 10-12 ч. Реакционную смесь разбавляли водой, подкисляли лимонной кислотой до pH ~3-4, осадок отфильтровывали, промывали водой и сушили. Выходы целевых продуктов, индивидуальных по ТСХ, составили 90-95%. Для получения аналитически чистых образцов продукты переосаждали из водного этанола.

1-О-[3β,20β)-11,30-диоксо-30-дезокси-(N-L-фенилаланина метиловый эфир)-олеан-12-ен-3-ил]-2-O-[β-D-6-оксо-6-дезокси-6-(N-L-фенилаланина метиловый эфир)-глюкуронопиранозил]-β-D-6-оксо-6-дезокси-6-(N-L-фенилаланина метиловый эфир)-глюкуронопиранозид (IIа). Получен по методике (пример 1) из 0.82 г (1 ммоль) ГК, 0.48 г (3.5 ммоль) HOBt, 0.76 г (3.5 ммоль) метилового эфира L-фенилаланина гидрохлорида, 0.67 г (3.5 ммоль) DEC в 20 мл DMF в присутствии 1 мл (8 ммоль) NEM. Выход 1.20 г (92.3%) (белый порошок). R_f=0.72 (хлороформ-метанол-вода, 45:10:1). Продукт переосадили из водного этанола. Выход 0.9 г. $${[\alpha ]}_D^{20}+35°$$ (с 0.04; EtOH). Лит. [Балтина Л.А., Рыжова С.А., Васильева Е.В., Капина А.П., Толстиков Г.А. Трансформации глицирризиновой кислоты. IV. Новый способ получения карбоксизащищенных гликопептидов. Ж. общей хим., 1993, т. 63, вып. 9, 2140-2147]: $${[\alpha ]}_D^{20}+30°$$ (с 0.02; EtOH). ИК-спектр, ν, см^-1: 3600-3200 (ОН, NH), 1742 (СОOМе), 1662 (C=O), 1652 (Ph), 1535 (CONH). Спектр ЯМР ¹Н (CD₃OD, δ, м.д.): 0.68; 0.76; 0.99; 1.08; 1.22; 1.33; 1.36 (все с, 21 Н, 7 СH₃), 3.68, 3.69, 2.72 (все с, 9Н, 3 ОСН₃), 7.15-7.28 (м, Н аром.). Спектр ЯМР ¹³C (CD₃OD, δ, м.д.): 40.5 (С1), 27.5 (С2), 90.8 (С3), 40.6 (С4), 56.4 (С5), 18.5 (С6), 33.8 (С7), 44.5 (С8), 63.01 = (С9), 38.0 (С10), 202.6 (С11), 129.1 (С12), 171.3 (С13), 46.7 (С14), 27.5 (С15), 27.6 (С16), 33.0 (С17), 48.2 (С18), 42.5 (С19), 45.1 (С20), 32.7 (С21), 38.5 (С22), 28.5 (С23), 17.1 (С24), 17.4 (С25), 19.4 (С26), 23.9 (С27), 29.2 (С28), 28.4 (С29), 178.6 (С30), 104.6 (С1′), 80.8 (С2′), 75.5 (С3′), 73.5 (С4′), 77.8 (С5′), 171.3 (С6′), 104.8 (С1′′), 75.5 (С2′′), 75.9 (С3′′), 73.5 (С4′′), 77.1 (С5′′), 171.5 (С6′′); PheOMe: 173.4, 173.0, 172.8, 137.5-128.2, 54.8, 54.6, 54.5, 53.0, 52.9, 52.8, 38.4, 38.2. Найдено, %: N 3.4. C₇₂H₉₅N₃O₁₉. Вычислено, %: N 3.22.

1-О-[3β,20β)-11,30-диоксо-30-дезокси-(N-L-тирозина метиловый эфир)-олеан-12-ен-3-ил]-2-O-[β-D-6-оксо-6-дезокси-6-(N-L-тирозина метиловый эфир)-глюкуронопиранозил]-β-D-6-оксо-6-дезокси-6-(N-L-тирозина метиловый эфир)-глюкуронопиранозид (IIb). Получен по методике (пример 1) из 0.82 г (1 ммоль) ГК, 0.48 г (3.5 ммоль) HOBt, 0.96 г (4.0 ммоль) гидрохлорида метилового эфира L-тирозина гидрохлорида, 0.67 г (3.5 ммоль) DEC в 20 мл DMF в присутствии 1 мл (8 ммоль) NEM. Выход 1.22 г (90.6%). R_f 0.59 (хлороформ-этанол, 5:1). $${[\alpha ]}_D^{20}+45°$$ (с 0.02; МеOН). Лит. [Балтина Л.А., Толстиков Г.А. Трансформации глицирризиновой кислоты. III. Синтез новых гликопептидов, содержащих метиловые эфиры L-аминокислот. // Ж. общей хим., 1993, т. 63, вып. 9, 2140-2147]: $${[\alpha ]}_D^{20}+41$$ (с 0.24, МеOН). ИК-спектр, EtOH ν, см^-1: 3600-3200 (ОH, NH); 1732 (СООСН₃); 1652 (C=O); 1615 (Ph); 1596; 1538; 1516 (CONH); 1500 (Ph). УФ-спектр, λ_max (МеOН): 227 (lg ε 4.5); 250 нм (lg ε 4.2). Спектр ЯМР ¹Н (CD₃OD, δ, м.д.): 0.75; 0.83; 0.86; 1.02; 1.06; 1.15; 1.38 (все с, 21 Н, 7СН₃); 3.66; 3.68; 3.70 (9Н, 3ОСН ₃); 5.61 (с, 1H, = С¹²-Н); 6.65-6.80; 6.90-7.00 (м, Н аром.). Спектр ЯМР, ¹³С (CD₃OD, δ, м.д.): 40.6 (С1); 26.8 (С2); 90.9 (С3); 40.9 (С4); 56.8 (С5); 18.5 (С6); 34.1 (С7); 47.0 (С8); 62.9 (С9); 38.3 (С10); 202.7 (С11); 128.3 (С12); 170.6 (С13); 44.8 (С14); 27.6 (С15); 27.9 (С16); 33.2 (С17); 48.4 (С18); 42.7 (С19); 45.2 (С20); 32.4 (С21); 39.28 (С22); 28.48 (С23); 17.02 (С24); 17.40 (С25); 19.63 (С26); 24.26 (С27); 28.80 (С28); 29.2 (С29); 173.6 (С30); 105.1 (С1′); 81.1 (С2′); 76.1 (С3′); 73.7 (С4′); 77.5 (С5′); 172.2 (С6′); 106.6 (С1′′); 75.5 (С2′′); 76.1 (С3′′); 73.7 (С4′′); 77.8 (С5′′); 172.2 (С6′′); TyrOMe: 173.2; 173.1; 171.4; 157.8; 131.8-116.7 (м, С аром); 62.7; 62.4; 55.2; 53.2 (ОСН₃). Найдено, %: N 2.9. C₇₂H₉₅N₃O₂₂. Вычислено, %: N 3.1.

1-О-[3β,20β)-11,30-диоксо-30-дезокси-(N-L-лейцина метиловый эфир)-олеан-12-ен-3-ил]-2-O-[β-D-6-оксо-6-дезокси-6-(N-L-лейцина метиловый эфир)-глюкуронопиранозил]-β-D-6-оксо-6-дезокси-6-(N-L-лейцина метиловый эфир)-глюкуронопиранозид (IIс). Получен по методике (пример 1) из 0.82 г (1 ммоль) ГК, 0.48 г (3.5 ммоль) HOBt, 0.64 г (3.5 ммоль) гидрохлорида метилового эфира L-лейцина гидрохлорида, 0.67 г (3.5 ммоль) DEC, в 15 мл DMF в присутствии 0.8 мл (8 ммоль) Et₃N. Выход 1.10 г (91.7%) (белый порошок). R_f 0.72 (хлороформ-этанол, 5:1). Для получения аналитически чистого образца продукт переосадили из водного этанола. Выход 0.90 г. $${[\alpha ]}_D^{20}+40°$$ (с 0.04; EtOH). Лит. [Балтина Л.А., Рыжова С.А., Васильева Е.В., Капина А.П., Толстиков Г.А. Трансформации глицирризиновой кислоты. IV. Новый способ получения карбоксизащищенных гликопептидов. Ж. общей хим., 1993, т. 63, вып. 9, 2140-2147]: $${[\alpha ]}_D^{20}+35°$$ (с 0.02; EtOH). ИК-спектр, ν, см^-1: 3600-3200 (ОH, NH), 1740 (СООСН₃), 1660 (C=O), 1540 (CONH). Спектр ЯМР ¹³С (CD₃OD, δ, м.д.): 40.6 (С1), 27.6 (С2), 90.7 (С3), 40.9 (С4), 56.5 (С5), 18.5 (С6), 33.8 (С7), 44.5 (С8), 63.2 (С9), 38.1 (С10), 202.4 (С11), 129.2 (С12), 171.9 (С13), 46.7 (С14), 26.6 (С15), 27.4 (С16), 33.0 (С17), 48.2 (С18), 42.5 (С19), 45.1 (С20), 32.2 (С21), 38.4 (С22), 28.4 (С23), 17.1 (С24), 17.4 (С25), 19.4 (С26), 23.9 (С27), 28.8 (С28), 29.2 (С29), 175.8 (С30), 105.3 (С1′), 81.6 (С2′), 76.3 (С3′), 73.1 (С4′), 77.6 (С5′), 171.6 (С6′), 106.4 (С1′′), 76.0 (С2′′), 76.9 (C3′′), 73.5 (С4′′), 77.3 (С5′′), 171.5 (С6′′); LeuOMe: 174.8, 174.2, 173.3, 52.9, 52.7, 52.3, 52.0, 51.8, 40.6, 40.4, 31.8, 31.7, 31.6, 23.4, 23.3, 20.2, 14.4, 14.2, 14.0. Найдено, %: N 3.6. C₆₃H₁₀₁N₃O₁₉. Вычислено, %: N 3.5.

1-О-[3β,20β)-11,30-диоксо-30-дезокси-N-L-изолейцина метиловый эфир)-олеан-12-ен-3-ил]-2-О-[β-D-6-оксо-6-дезокси-6-β-D-изолейцина метиловый эфир)-глюкуронопиранозил]-β-D-6-оксо-6-дезокси-6-β-D-изолейцина метиловый эфир)-глюкуронопиранозид (IId). Получен по методике (пример 1) из 0.82 г (1 ммоль) ГК, 0.48 г (3.5 ммоль) HOBt, 0.73 г (4.0 ммоль) гидрохлорида метилового эфира L-изолейцина гидрохлорида, 0.67 г (3.5 ммоль) DEC в 20 мл DMF в присутствии 1.0 мл (10 ммоль) NMM. Выход 1.12 г (93.3%) (белый порошок). R_f 0.76 (хлороформ-метанол-вода, 45:10:1). Для получения аналитически чистого образца продукт переосадили из водного этанола. Выход 0.95 г. $${[\alpha ]}_D^{20}+40°$$ (с 0.04; EtOH). Лит. [Балтина Л.А., Рыжова С.А., Васильева Е.В., Капина А.П., Толстиков Г.А. Трансформации глицирризиновой кислоты. IV. Новый способ получения карбоксизащищенных гликопептидов. Ж. общей хим., 1993, т. 63, вып. 9, 2140-2147]: $${[\alpha ]}_D^{20}+40°$$ (с 0.02; EtOH). ИК-спектр, ν, см^-1: 3600-3200 (ОH, NH), 1742 (СООСН₃), 1661 (С=O), 1527 (CONH). Спектр ЯМР ¹Н (CD₃OD, δ, м.д.): 0.81, 0.84, 0.92, 0.95, 1.06, 1.15, 1.42 (все с, 21Н, 7СН₃), 3.72, 3.73, 3.74 (9Н, 3ОСН₃), 5.7 (с, 1Н, Н-12). Спектр ЯМР ¹³С (CD₃OD, δ, м.д.): 40.3 (С1), 27.4 (С2), 90.3 (C3), 40.7 (С4), 56.3 (С5), 18.5 (С6), 33.8 (С7), 44.5 (С8), 63.0 (С9), 38.0 (С10), 202.6 (С11), 129.1 (С12), 171.2 (С13), 46.7 (С14), 26.6 (С15), 27.6 (С16), 32.8 (С17), 48.2 (С18), 42.5 (С19), 44.9 (С20), 32.1 (С21), 38.7 (С22), 28.4 (С23), 17.1 (С24), 17.3 (С25), 19.4 (С26), 23.8 (С27), 28.4 (С28), 29.2 (С29), 178.8 (C30), 104.9 (С1′), 81.6 (С2′), 76.0 (C3′), 73.2 (С4′), 77.2 (С5′), 172.7 (С6′), 105.1 (С1′′), 75.4 (С2′′), 76.3 (C3′′), 73.4 (С4′′), 77.6 (С5′′), 172.7 (С6′′); НеOМе: 174.0, 173.2, 173.1, 58.3, 58.0, 57.6, 52.8, 52.7, 52.6, 17.0, 16.2, 16.0, 12.0, 11.9, 11.4. Найдено, %: N 3.4. C₆₃H₁₀₁N₃O₁₉. Вычислено, %: N 3.5.

1-О-[3β,20β)-11,30-диоксо-30-дезокси-(N-L-валина метиловый эфир)-олеан-12-ен-3-ил]-2-О-[β-D-6-оксо-6-дезокси-6-(N-L-валина метиловый эфир)-глюкуронопиранозил]-β-D-6-оксо-6-дезокси-6-(N-L-валина метиловый эфир)-глюкуронопиранозид (IIe). Получен по методике (пример 1) из 0.82 г (1 ммоль) ГК, 0.48 г (3.5 ммоль) HOBt, 0.68 г (4.0 ммоль) гидрохлорида метилового эфира L-валина, 0.67 г (3.5 ммоль) DEC в 15 мл DMF в присутствии 1.0 мл (10 ммоль) NMM. Выход 1.09 г (94.0%) (белый порошок). R_f 0.62 (хлороформ-этанол, 5:1). Для получения аналитически чистого образца продукт переосадили из водного этанола. Выход 0.85 г. $${[\alpha ]}_D^{20}+35°$$ (с 0.04; EtOH). Лит. [Балтина Л.А., Рыжова С.А., Васильева Е.В., Капина А.П., Толстиков Г.А. Трансформации глицирризиновой кислоты. IV. Новый способ получения карбоксизащищенных гликопептидов. Ж. общей хим., 1993, т. 63, вып. 9, 2140-2147]: $${[\alpha ]}_D^{20}+30°$$ (с 0.02; EtOH). ИК-спектр, ν, см^-1: 3600-3200 (ОH, NH), 1740 (СООСH₃), 1660 (С=O), 1550 (CONH). Спектр ЯМР ¹³С (CD₃OD, δ, м.д.): 40.5 (С1), 27.7 (С2), 90.6 (C3), 40.9 (С4), 56.7 (С5), 18.4(С6), 34.1 (С7), 44.9 (С8), 63.9 (С9), 38.4 (С10), 202.9 (С11), 129.2 (С12), 171.7 (С13), 46.8 (С14), 27.7 (С15), 28.7 (С16), 33.2 (С17), 48.4 (С18), 42.8 (С19), 45.3 (С20), 32.3 (С21), 39.3 (С22), 29.0 (С23), 17.2 (С24), 17.5 (С25), 19.2 (С26), 24.1 (С27), 29.2 (С28), 29.5 (С29), 178.6 (C30), 105.2 (С1′), 81.8 (С2′), 76.3 (C3′), 73.7 (С4′), 78.0 (С5′), 171.7 (С6′), 105.2 (С1′′), 75.8 (С2′′), 76.6 (C3′′), 73.8 (С4′′), 77.6 (С5′′), 171.8 (С6′′); ValOMe: 173.4, 173.3, 173.2, 59.3, 58.7, 58.6, 53.0, 52.9, 32.6, 32.4, 19.7, 19.6, 18.7. Найдено, %: N 3.8. C₆₀H₉₅N₃O₁₉. Вычислено, %: N 3.6.

1-О-[3β,20β)-11,30-диоксо-30-дезокси-(N-L-метионина метиловый эфир)-олеан-12-ен-3-ил]-2-О-[β-D-6-оксо-6-дезокси-6-(N-L-метионина метиловый эфир)-глюкуронопиранозил]-β-D-6-оксо-6-дезокси-6-(N-L-метионина метиловый эфир)-глюкуронопиранозид (IIf). Получен по методике (пример 1) из 0.82 г (1 ммоль) ГК, 0.55 г (4.0 ммоль) HOBt, 0.80 г (4.0 ммоль) гидрохлорида метилового эфира L-метионина, 0.76 г (4.0 ммоль) DEC в 20 мл DMF в присутствии 1.0 мл (10 ммоль) NMM. Выход 1.2 г (95.2%) (аморфный порошок с желтоватым оттенком). R_f 0.68 (хлороформ-метанол-вода, 45:10:1). $${[\alpha ]}_D^{20}+30°$$ (с 0.04; EtOH). Лит. [Балтина Л.А., Рыжова С.А., Васильева Е.В., Капина А.П., Толстиков Г.А. Трансформации глицирризиновой кислоты. IV. Новый способ получения карбоксизащищенных гликопептидов. // Ж. общей хим., 1993, т. 63, вып. 9, 2140-2147]: $${[\alpha ]}_D^{20}+29°$$ (с 0.03; EtOH). ИК-спектр, ν, см^-1: 3600-3200 (ОH, NH), 1740 (СООСH₃), 1660 (С=O), 1540 (CONH). Спектр ЯМР ¹³С (CD₃OD, δ, м.д.): 40.6 (С1), 27.0 (С2), 90.8 (С3), 40.9 (С4), 56.6 (С5), 18.7 (С6), 34.6 (С8), 44.8 (С8), 63.3 (С9), 38.3 (С10), 202.7 (С11), 129.3 (С12), 171.5 (С13), 46.9 (С14), 26.3 (С15), 27.7 (С16), 33.3 (С17), 48.4 (С18), 42.7 (С19), 45.0 (С20), 32.3 (С21), 38.9 (С22), 28.7 (С23), 17.4 (С24), 17.6 (С25), 19.9 (С26), 24.2 (С27), 27.9 (С28), 29.5 (С29), 178.2 (С30), 105.2 (С1′), 82.0 (С2′), 76.2 (С3′), 73.5 (С4′), 77.8 (С5′), 171.5 (С6′), 105.4 (С1′′), 76.1 (С2′′), 76.5 (С3′′), 73.6 (С4′′), 77.3 (С5′′), 171.7 (С6′′); МеtOМе: 174.8, 173.6, 172.9, 53.4, 53.1, 52.9, 52.8, 52.7, 52.6, 31.8, 31.7, 31.4, 31.2,15.7,15.6. Найдено, %: N 3.3; S 8.5. C₆₀H₉₅N₃O₁₉S₃. Вычислено, %: N 3.4; S 8.9.

1-О-[3β,20β)-11,30-диоксо-30-дезокси-N-L-S-бензилцистеина трет-бутиловый эфир)-олеан-12-ен-3-ил]-2-0-[β-D-6-оксо-6-дезокси-6-(N-L-S-бензилцистеина трет-бутиловый эфир)-глюкуронопиранозил]-β-D-6-оксо-6-дезокси-6-(N-L-S-бензилцистеина трет-бутиловый эфир)-глюкуронопиранозид (IIg). Получен по методике (пример 1) из 0.82 г (1 ммоль) ГК, 0.48 г (3.5 ммоль) HOBt, 1.2 г (4.0 ммоль) гидрохлорида трет-бутилового эфира L-S-бензилцистеина, 0.67 г (3.5 ммоль) DEC в 20 мл DMF в присутствии 0.8 мл (8 ммоль) Et₃N. Выход 1.42 г (90.1%) (аморфный порошок). $${[\alpha ]}_D^{20}+38°$$ (с 0.02; МеОH). Лит. [Кондратенко P.M., Балтина Л.А., Васильева Е.В., Балтина Л.А. (мл.), Исмагилова А.Ф., Насыров Х.М., Басченко Н.Ж., Киреева P.M., Фридман СМ., Толстиков Г.А. Синтез и иммуностимулирующая активность цистеинсодержащих гликопептидных производных глицирризиновой кислоты. // Биоорган, химия, 2004, т. 30, №1, 61-67]: $${[\alpha ]}_D^{20}+35°$$ (с 0.02, МеОH). ИК-спектр, ν, см^-1: 3600-3200 (ОH, NH), 1740 (СООСH₃), 1670 (С=O), 1540 (CONH), 1500 (С₆H₅). Спектр ЯМР ¹Н (DMF-d₇, δ, м.д.): 0.78, 0.84, 1.06, 1.08, 1.16, 1.26 (все с, 21Н, 7 СН₃), 1.38, 1.44 (оба с, 27Н, 9СН₃, 3Вu^t), 5.50 (с, 1H, Н-12), 7.20-7.40 (м, Н аром.). Спектр ЯМР ¹³С (DMF-d₇, δ, м.д.): 39.5 (С1), 26.5 (С2), 89.4 (C3), 39.8 (С4), 55.5 (С5), 17.8 (С6), 33.3 (С8), 44.0 (С8), 62.1 (С9), 36.4 (С10), 199.9 (С11), 127.5 (С12), 169.9 (С13), 45.7 (С14), 26.5 (С15), 26.9 (С16), 32.3 (С17), 48.9 (С18), 43.7 (С19), 44.2 (С20), 31.3 (С21), 37.2 (С22), 27.9 (С23), 16.8 (С24, С25), 18.9 (С26), 23.5 (С27), 28.5 (С28), 28.8 (С29), 174.5 (C30), 102.2 (С1′), 82.2 (С2′), 75.9 (C3′), 72.9 (С4′), 77.2 (С5′), 170.2 (С6′), 104.4 (С1′′), 75.4 (С2′′), 75.9 (C3′′), 73.2 (С4′′), 77.0 (С5′′), 170.6 (С6′′); Cys(SBn)OBu^t: 172.0, 171.0, 170.8, 139.1-128.2 (СН₂С₆Н₅), 53.5, 53.0, 53.0, 27.8. Найдено, %: N 2.5, S 6.0. C₈₄H₁₁₉N₃O₁₉S₃. Вычислено, %: N 2.7, S 6.1.

Изобретение относится к пригодному для использования в химической промышленности способу получения производных глицирризиновой кислоты общей формулы I:

В предложенном способе соединения общей формулы I получают путем обработки глицирризиновой кислоты (ГК) N-гидроксибензотриазолом (HOBt), карбодиимидом и аминокомпонентом (АК) при мольном соотношении реагентов ГК/НОВt/АК/карбодиимид, равном 1/3.5-4.0/3.5-4.0/3.5-4.0 ммоль при комнатной температуре в N,N′-диметилформамиде в присутствии N-этилморфолина, причем в качестве карбодиимида используют -1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимида гидрохлорид, в качестве аминокомпонента - гидрохлориды эфиров аминокислот формулы R₁NH₂·HCl, где R₁=C₆H₅CH₂CH(СООСН₃)-, HOC₆H₄CH₂CH(СООСН₃)-, (СН₃)₂CHCH₂CH(СООСН₃)-, CH₃CH₂CH(СН₃)СН(СООСН₃)-, (СН₃)₂СНСН(COOCH₃)-, CH₃SCH₂CH₂CH(СООСН₃)-, C₆H₅CH₂SCH₂CH(СООС(СН₃)₃-, где процесс протекает в одну стадию в течение 10-12 ч. Предложен новый эффективный способ получения ценных соединений, позволяющих упростить их получение с высоким выходом 90-95%. 1 з.п. ф-лы, 1 пр.

1. Способ получения карбоксизащищенных гликопептидов глицирризиновой кислоты общей формулы I

путем обработки глицирризиновой кислоты (ГК) N-гидроксибензотриазолом (HOBt), карбодиимидом и аминокомпонентом (АК) в среде растворителя при мольном соотношении реагентов ГК/НОВt/АК/карбодиимид, равном 1/3.5-4.0/3.5-4.0/3.5-4.0 ммоль при комнатной температуре в присутствии третичного амина, отличающийся тем, что в качестве растворителя используют N,N′ -диметилформамид, в качестве карбодиимида - 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимида гидрохлорид (DEC), в качестве аминокомпонента - гидрохлориды эфиров аминокислот (метилового, трет-бутилового) формулы R₁NH₂·HCl, где R₁=C₆H₅CH₂CH(СООСН₃)-, HOC₆H₄CH₂CH(СООСН₃)-, (СН₃)₂CHCH₂CH(СООСН₃)-, CH₃CH₂CH(СН₃)СН(СООСН₃)-, (СН₃)₂СНСН(COOCH₃)-, CH₃SCH₂CH₂CH(СООСН₃)-, C₆H₅CH₂SCH₂CH(СООС(СН₃)₃-, в качестве третичного амина - N-этилморфолин (NEM), процесс протекает в одну стадию в течение 10-12 ч.

2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что третичный амин берут в избытке - 8-10 ммоль.