Способ прогнозирования задержки формирования плаценты и развития эмбриона при обострении цитомегаловирусной инфекции, подавляющей активность сосудисто-эндотелиального фактора и развития эмбриона Российский патент 2018 года по МПК G01N33/53 

Область изобретения: изобретение относится к медицине, а именно к прогнозированию задержки формирования плаценты и развития эмбриона при обострении цитомегаловирусной инфекции на 7-9 неделе гестации, подавляющем активность сосудисто-эндотелиального фактора, оказывающего влияние на формирования плаценты и развитие эмбриона.

Уровень техники

Сосудисто-эндотелиальный фактор в организме представлен пятью родственными белками. Наиболее изучены VEGF₁₂₁ и VEGF₁₆₅ [6]. Факторами, инициирующими продукцию VEGF, являются гипоксия и трансформация структуры клеток под действием механических сил [7]. Гипоксия способствует стабилизации HIF-1α (hypoxia-inducible factor-1α), который при достаточной концентрации кислорода быстро разрушается. В условиях гипоксии HIF-1α и HIF-1β объединяются [6], а полученный комплекс связывается со специфическим чувствительным к гипоксии регионом гена VEGF, что повышает его экспрессию. У плода VEGF принимает участие как в васкулогенезе (развитие сосудов), так и ангиогенезе (росте новых микрососудов из уже существующих). Избыток или недостаток фактора ведет к гибели эмбриона в результате нарушения васкуло- и ангиогенеза. Уровень экспрессии VEGF прогрессивно уменьшается после рождения [1]. Наступление беременности сопряжено с ангиогенезом. Пролиферация трофобласта, его миграция и инвазия является универсальным пусковым механизмом в процессах формирования плаценты, определяемых VEGF-1 [2].

Таким образом, изучению роли VEGF-1 во время беременности уделяется большое значение.

Известны способы прогнозирования плацентарной недостаточности, основанные на определении в сыворотке крови VEGF-1 [3-5], основными недостатками которых являются:

- методы позволяют прогнозировать плацентарную недостаточность только в том триместере, в котором проводится исследование содержания VEGF-1 в крови;

- отсутствует интеграция показателей VEGF-1 с инфекционной патологией и угрозой прерывания беременности ранних сроков;

Указанные факторы могут быть устранены в заявляемом способе.

Техническим результатом является повышение точности прогнозирования задержки формирования плаценты и развития эмбриона при обострении цитомегаловирусной инфекции на 7-9 неделе гестации.

Осуществление изобретения

Обследовано 25 беременных в возрасте 18-25 лет с хронической цитомегаловирусной инфекцией (ХЦМВИ) в стадии обострения на первом триместре гестации (7-9 нед.). 15 беременных было обследовано без заболеваний на всем периоде беременности.

Диагноз ХЦМВИ устанавливался при комплексном исследовании периферической крови на наличие IgM к ЦМВ или четырехкратного и более нарастания титра антител IgG в парных сыворотках в динамике через 10 дней до 1:1600, индекса авидности более 65%, а также наличия ДНК ЦМВ. Исследования проводились с учетом требований Хельсинской декларации Всемирной медицинской ассоциации «Этические принципы проведения научных исследований с участием человека» с поправками 2008 г. и правилами клинической практики в Российской Федерации, утвержденными приказом Министерства РФ №266 от 19.06.2003 г.

Верификация ЦМВ, определение типоспецифических антител, индекс авидности осуществлялись методами ИФА на спектрофотометре «Stat-Fax-2100» (США) с использованием тест-систем ЗАО «Вектор-Бест» (Новосибирск), методами ПЦР на аппарате ДТ-96 с использованием наборов НПО «ДНК-технология» (Москва).

Содержание сосудисто-эндотелиального фактора (VEGF-1) определялось в гомогенате хориона, полученного после проведения медицинского аборта, по случаю обострения ХЦМВИ.

VEGF-1 определяли методом иммуноферментного анализа на спектрофотометре «Stat-Fax-2100» (США) с использованием наборов ЗАО «БиоХимМак» (Москва).

Выполненные исследования показали, что при обострении ХЦМВИ на 7-9 неделе гестации и титре антител IgG к ЦМВ 1:1600 в гомогенате хориона снижается содержание VEGF-1 до 14,40±1,2 нг/мл (в контроле - 46,42±2,1 нг/мл), что создает угрозу формирования плаценты и прерывание беременности.

Новизна заявляемого способа заключается в том, что впервые предлагается прогнозировать угрозу формирования плаценты и развития эмбриона по уровню антител IgG к ЦМВ в сыворотке крови и VEGF-1 в гомогенате хориона. Ранее совокупность указанных признаков в прогнозировании угрозы формирования плаценты и развития эмбриона при обострении цитомегаловирусной инфекции на 7-9 неделе гестации не использовалась.

Сущность заявляемого способа поясняется следующими примерами:

Пример 1. Беременная А., 25 л., находилась на стационарном лечении в гинекологическом отделении Городской клинической больницы (г. Благовещенск). Поступила с болями внизу живота и кровянистыми выделениями из половых путей. Гинекологический анамнез осложнен: 1 медицинский аборт без осложнений.

Проведено исследование крови на ЦМВ, УЗИ органов малого таза.

По ИФА выявлены антитела IgM к ЦМВ, титр антител IgG - 1:1600, индекс авидности - 94%.

По УЗИ: в полости матки плодное яйцо с эмбрионом 7 недель 2 дня. Сердцебиение определяется. Гипертонус по задней стенке матки. Внутренний зев сомкнут. Ниже плодного яйца гематома небольших размеров (отслойка ворсинчатого хориона).

Диагноз: Беременность 7-8 недель. Угрожающий самопроизвольный выкидыш. Хроническая цитомегаловирусная инфекция, стадия обострения.

На третий день стационарного лечения усилились боли внизу живота и кровянистые выделения из половых путей. Выставлен диагноз самопроизвольный выкидыш в ходу при сроке 8 недель беременности. Проведено выскабливание стенок полости матки.

По заявленному способу в гомогенате хориона определено содержание VEGF-1 - 13,73 нг/мл.

Заключение: угроза формирования плаценты и развития эмбриона.

Пример 2. Беременная П., 27 л., поступила в гинекологическое отделение Городской клинической больницы (г. Благовещенск) для проведения медицинского аборта. Гинекологический анамнез осложнен: 1 медицинский аборт без осложнений.

Проведено исследование крови на ЦМВ, УЗИ органов малого таза.

По ИФА титр антител IgG к ЦМВ - 1:800, индекс авидности - 97%.

По УЗИ: в полости матки плодное яйцо с эмбрионом 7 недель 3 дня. Сердцебиение определяется. Внутренний зев сомкнут.

Диагноз: Беременность 7-8 недель. Хроническая цитомегаловирусная инфекция, латентная стадия.

При сроке 7 недель беременности проведен медицинский аборт.

По заявленному способу в гомогенате хориона определено содержание VEGF-1 - 47,1 нг/мл.

Заключение: формирование плаценты и эмбриона без осложнений.

Литература

1. Гавриленко Т.И., Рыжкова Н.А., Пархоменко А.Н. Сосудистый эндотелиальный фактор роста в клинике внутренних заболеваний и его патогенетическое значение // Укр. кардиолог. журн. 2011. №4. С. 87-95.

2. Орлова В.И., Авруцкая В.В., Крымшокалова З.С., Крукнер И.Н. Продукция фактора роста и вазоактивных веществ при задержке роста плода // Журнал акушерства женских болезней Росздрава в Ростове-на-Дону. Т. LVII, Вып. 2. 2008. С. 84-85.

3. Савельева Г.М., Федорова М.В., Клименко П.А. Плацентарная недостаточность. М.: Медицина. 1991. 276 с.

4. Стрижаков А.Н., Кушлинский Н.Е., Тимохина Е.В., Тарабрина Т.В. Роль ангиогенных факторов роста в прогнозировании плацентарной недостаточности // Вопр. гин. акуш. и перинатол. 2009. Т. 8, №4. С. 5-11.

5. Ульянина Е.В., Фаткулин И.Ф. Роль сосудисто-эндотелиального фактора роста в прогнозе сосудистых нарушений у беременных с синдромом задержки развития плода // Казанский мед. Журнал. 2015. Т. 96, №2. С. 220-223.

6. MacGabhann Е., Popel A., Interactions of VEGF isoforms with VEGF-1, VEGF-2 and neurpilin in vivo: a computational model of human skeletal muscle // Amer. J. Physiol. Heart. Circ. Physiol. 2007. Vol. 292. P. 459-474.

7. MacGabhann E., Qutub A., Annex В., Popel A. Systems biology of pro-angiogenic therapies targeting the VEGF system // Wiley Interdiscip. Rev. Syst. Biol. Med. 2010. Vol. 2. P. 694-707.

Изобретение относится к медицине и может быть использовано в качестве способа прогнозирования задержки формирования плаценты и развития эмбриона при обострении цитомегаловирусной инфекции, подавляющей активность сосудисто-эндотелиального фактора и развитие эмбриона. Сущность способа: определяют титр антител IgG к ЦМВ на 7-9 неделе беременности и определяют в гомогенате хориона сосудисто-эндотелиальный фактор VEGF-1. При определении на 7-9 неделе гестации титра антител IgG к ЦМВ 1:1600 происходит снижение в гомогенате хориона содержание сосудисто-эндотелиального фактора VEGF-1 до 14,40±1,2 нг/мл, что создает угрозу формирования плаценты и развития эмбриона. Изобретение обеспечивает повышение точности прогнозирования задержки формирования плаценты и развития эмбриона при обострении цитомегаловирусной инфекции на 7-9 неделе гестации. 2 пр.

Способ прогнозирования задержки формирования плаценты и развития эмбриона вследствие подавления активности при обострении цитомегаловирусной инфекции сосудисто-эндотелиального фактора, регулирующего формирование плаценты и развития эмбриона, включающий определение титра антител IgG к ЦМВ на 7-9 неделе беременности и определении в гомогенате хориона сосудисто-эндотелиального фактора и при определении на 7-9 неделе гестации титра антител IgG к ЦМВ 1:1600 происходит снижение в гомогенате хориона содержание сосудисто-эндотелиального фактора VEGF-1 до 14,40±1,2 нг/мл, что создает угрозу формирования плаценты и развития эмбриона.