Перекрестная ссылка на родственные заявки

Настоящая заявка притязает на преимущество приоритета заявки на китайский патент № 201210185004.2, поданной 6 июня 2012 г., которая полностью включена в настоящее описание изобретения в качестве ссылки.

Область техники, к которой относится изобретение

Настоящее изобретение относится к способам улучшения популяций кишечной микробиоты и композициям для их осуществления, а также к применению в лекарственных средствах, пищевых добавках, диетических продуктах, пищевых продуктах и напитках.

Уровень техники

За исключением особо оговоренных случаев вещества, описанные в данном разделе, не являются прототипами формулы изобретения, представленной в настоящей заявке, и не могут быть признаны в качестве прототипов в связи с включением в данный раздел.

В организме человека обитает большое количество симбиотических микроорганизмов, среди которых кишечная микробиота имеет особенно важное значение для здоровья хозяина. Существует более 1000 видов бактерий, количество которых в 10 раз превышает число клеток человека, при этом количество генов указанных видов примерно в 150 раз превышает число генов в клетках человека. В данной связи организм человека следует рассматривать как ”суперорганизм”, состоящий из клеток-хозяев и симбиотических микроорганизмов, включая кишечную микробиоту, и генома, кодирующего консорцию кишечных микроорганизмов (микробиоту), который считается вторым геномом человека, известным как ”метагеном человека”. При изменении состояния здоровья человека соответствующим образом изменяется состав симбиотических микроорганизмов. И наоборот, при изменении состава симбиотических микроорганизмов изменяется состояние здоровья человека. Разнообразие генома человека и генома кишечной микробиоты влияет на иммунитет, питание, обмен веществ, здоровье и болезни человека-хозяина. Однако до настоящего времени было неясно, каким образом кишечная микробиота влияет на этиологию и патологию, бактерии какого типа положительно коррелированы с состоянием здоровья хозяина и бактерии какого типа отрицательно коррелированы с состоянием здоровья хозяина.

Сущность изобретения

Нижеследующее краткое описание изобретения является иллюстративным и никоим образом не ограничивает изобретение. Помимо иллюстративных объектов, вариантов осуществления и вышеописанных признаков изобретения, благодаря ссылке на прилагаемые чертежи и приведенное ниже подробное описание изобретения станут очевидны другие объекты, варианты осуществления и признаки настоящего изобретения.

Одним объектом изобретения является способ улучшения популяции кишечной микробиоты. В одном варианте осуществления изобретения указанный способ включает введение субъекту композиции для увеличения первой популяции микробиоты кишечника при одновременном уменьшении второй популяции кишечной микробиоты у субъекта. Первая популяция кишечной микробиоты может включать бактерии, продуцирующие короткоцепные жирные кислоты (SCFA). Вторая популяция кишечной микробиоты может включать бактерии, продуцирующие эндотоксин.

Другим объектом изобретения являются способ скрининга испытуемого соединения, способного улучшить популяцию кишечной микробиоты. В одном варианте осуществления изобретения указанный способ включает введение контрольному субъекту эффективного количества контрольной композиции для увеличения первой популяции кишечной микробиоты при одновременном уменьшении второй популяции кишечной микробиоты у контрольного субъекта, введение испытуемому субъекту определенного количества испытуемого соединения и сравнение популяции кишечной микробиоты контрольного субъекта с популяцией кишечной микробиоты испытуемого субъекта. Подобие, равное по меньшей мере примерно 80%, указывает на то, что испытуемое соединение активно улучшает популяцию кишечной микробиоты. Первая популяция кишечной микробиоты может включать бактерии, продуцирующие короткоцепные жирные кислоты (SCFA). Вторая популяция кишечной микробиоты может включать бактерии, продуцирующие эндотоксин.

Другие объектом изобретения является композиция, предназначенная для улучшения популяции кишечной микробиоты. В одном варианте осуществления изобретения указанная композиция способна избирательно увеличивать первую популяцию кишечной микробиоты при одновременном уменьшении второй популяции кишечной микробиоты у субъекта. Первая популяция кишечной микробиоты может включать бактерии, продуцирующие короткоцепные жирные кислоты (SCFA). Вторая популяция кишечной микробиоты может включать бактерии, продуцирующие эндотоксин. В одном варианте осуществления изобретения указанную композицию вводят субъекту в дозе от около 50 кг/кг массы тела до около 400 мг/кг массы тела один раз в сутки в течение по меньшей мере двух недель.

Краткое описание чертежей

Вышеуказанные и другие признаки настоящего изобретения станут более очевидными из нижеследующего описания изобретения и прилагаемой формулы изобретения наряду с прилагаемыми чертежами. Следует отметить, что прилагаемые чертежи отображают только несколько вариантов осуществления изобретения, рассмотренных в настоящем описании изобретения, и поэтому не могут ограничивать объем изобретения, которое будет более подробно и с большей специфичностью описано с помощью прилагаемых чертежей.

На фигуре 1 показано влияние берберина на структуру кишечной микробиоты крыс; на фигуре 1А показан график оценки РСоА изменений структуры кишечной микробиоты крыс при скармливании рациона с высоким содержанием жира (HFD) и введении берберина; на фигуре 1В показано распределение кишечной микробиоты на основании расстояний Мехаланобиса, вычисленных методом MANOVA; и на фигуре 1С показан индекс Шеннона - Винера, вычисленный после выполнения одинакового числа считываний последовательностей для всех образцов.

На фигуре 2 показаны некоторые репрезентативные различия в структуре кишечной микробиоты, вызванные введением берберина, которые были выявлены при помощи тройного графика расстояний RDA микробиоты кишечника.

На фигуре 3 показано влияние на содержание короткоцепных жирных кислот в фекалиях крыс при скармливании крысам рациона с высоким содержанием жира или нормального рациона; на фигуре 3А показаны уровни общего содержания короткоцепных жирных кислот (SCFA); на фигуре 3В показан уровень уксусной кислоты; на фигуре 3С показан уровень пропионовой кислоты; и на фигуре 3D показан уровень масляной кислоты (D).

На фигуре 4 показано влияние берберина на фенотипы ожирения и потребление пищи у крыс; на фигуре 4А показано влияние берберина на увеличение массы тела крыс; на фигуре 4В показано влияние берберина на индекс ожирения, вычисленный в виде массы жировой ткани (сумма эпидидимальной и периренальной жировой ткани) на 100 г общей массы тела; и на фигуре 4С показано потребление корма крысами в течение всего эксперимента.

На фигуре 5 показано влияние берберина на восприимчивость к инсулину у крыс; на фигуре 5А показано влияние берберина на уровень глюкозы в крови натощак (FBG); на фигуре 5В показано влияние берберина на уровень инсулина в сыворотке натощак (FINS); на фигуре 5С показано влияние берберина на оценку гомеостаза устойчивости к инсулину (HOMA-IR), вычисленную в соответствии с формулой: уровень инсулина натощак (мкед/мл) × уровень глюкозы натощак (ммоль/л)/22,5; на фигуре 5D показано влияние берберина на пероральную пробу на толерантность к глюкозе (OGTT); и на фигуре 5Е показано влияние берберина на внутрибрюшинную пробу на толерантность к инсулину (ITT).

На фигуре 6 показано влияние берберина на уровень воспалительных факторов у крыс; на фигуре 6А показано влияние берберина на уровень сывороточного белка (LBP), связывающего липополисахарид (LPS); на фигуре 6В показано влияние берберина на уровень лептина в сыворотке; на фигуре 6С показано влияние берберина на уровень МСР-1 в сыворотке; и на фигуре 6D показано влияние берберина на уровень адипонектина в сыворотке, скорректированного в отношении содержания жира в организме.

Подробное описание изобретения

Нижеследующее подробное описание изобретения содержит ссылку на прилагаемые чертежи, которые составляют часть описания изобретения. На чертежах одинаковые символы обычно обозначают одинаковые компоненты за исключением тех случаев, когда из контекста следует обратное. Иллюстративные варианты осуществления изобретения, представленные в подробном описании изобретения, на чертежах и в формуле изобретения, не ограничивают объем изобретения. Могут быть использованы другие варианты осуществления изобретения и внесены другие изменения, не выходящие за пределы существа или объема изобретения. Следует отметить, что объекты изобретения, рассмотренные в настоящем описании изобретения и иллюстрированные чертежами, могут быть расположены, заменены, объединены, разделены и спроектированы в разных конфигурациях, которые полностью входят в объем настоящего изобретения.

Настоящее изобретение относится наряду с прочим к композициям, способам, процессам, приборам, системам, устройствам и/или продуктам, предназначенным для улучшения популяции кишечной микробиоты.

Настоящее изобретение относится к способам улучшения популяции кишечной микробиоты и новым композициям для их осуществления. Настоящее изобретение позволяет идентифицировать семейства бактерий, тесно связанные с обменом веществ хозяина, например, при помощи высокопроизводительного секвенирования и многомерных статистических методов.

Одним объектом изобретения является способ улучшения популяции микробиоты кишечника. В одном варианте осуществления изобретения указанный способ может включать избирательное обогащение первой популяции кишечной микробиоты. Первая популяция кишечной микробиоты может включать, например, бактерии, продуцирующие короткоцепные жирные кислоты (SCFA). В одном варианте осуществления изобретения указанный способ может включать подавление второй популяции кишечной микробиоты. Вторая популяция кишечной микробиоты может включать, например, бактерии, продуцирующие эндотоксин.

В одном варианте осуществления изобретения указанный способ может включать стадию введения субъекту композиции. Указанная композиция может представлять собой препарат для перорального или парентерального ведения. Указанная композиция может избирательно увеличивать первую популяцию кишечной микробиоты при одновременном уменьшении второй популяции кишечной микробиоты.

Обогащение первой популяции кишечной микробиоты и подавление второй популяции кишечной микробиоты может быть осуществлено одновременно. Указанный способ позволяет предотвратить или лечить метаболический синдром, в том числе, не ограничиваясь ими, ожирение, сахарный диабет, устойчивость к инсулину, гиперлипопротеинемию, гиперурекемию, жировую дегенерацию печени, гиперхолестеринемию, гипертриглицеридемию, воспаление и другие нарушения.

Кишечные бактерии, продуцирующие короткоцепные жирные кислоты (SCFA), являются в основном благоприятными бактериями. Такие бактерии прямо или косвенно, путем повышения уровня короткоцепных жирных кислот в кишечнике, выполняют, не ограничиваясь ими, функции, включающие защиту от воспаления, защиту кишечного барьера, регулирование обмена веществ и иммунной системы. Указанные функции позволяют предотвратить или лечить ожирение, устойчивость к инсулину, диабет и другие болезни обмена веществ.

С помощью способов улучшения популяции кишечной микробиоты по настоящему изобретению можно увеличить популяцию кишечной микробиоты, включающую Alistipes, Allobaculum, Bacteroides, Barnesiella, Blautia, Butyricicoccus, Butyricimonas, Dorea, Helicobacter, Hespellia, Holdemania, Lawsonia, Oscillibacter, Parabacteroides, Phascolarctobacterium, Prevotella или Sedimentibacter. В одном варианте осуществления изобретения увеличенная популяция кишечной микробиоты может включать Bacteroidaceae, Coriobacteriaceae, Desulfovibrionaceae, Erysipelotrichaceae, Flavobacteriaceae, Helicobacteraceae, Incertae Sedis XI, Incertae Sedis XIV, Lachnospiraceae, Porphyromonadaceae, Prevotellaceae, Rikenellaceae, Ruminococcaceae или Veillonallaceae; альтернативно увеличенная популяция кишечных бактерий может включать Campylobacterales, Desulfovibrionales, Bacteroidales, Coriobacteriales, Flavobacteriales, Clostridiales или Erysipelotrichales; альтернативно увеличенная популяция кишечных бактерий может включать Epsilonproteobacteria, Deltaproteobacteria, Bacteroidia, Coriobacteridae, Flavobacteria, Clostridia или Erysipelotrichi; альтернативно увеличенная популяция кишечных бактерий может включать Proteobacteria, Bacteroidetes, Actinobacteria или Firmicutes.

Например, увеличенная популяция кишечной микробиоты может включать бактерии, в которых V3-область последовательности гена рРНК 16S по меньшей мере примерно на 70%, по меньшей мере примерно на 75%, по меньшей мере примерно на 80%, по меньшей мере примерно на 85%, по меньшей мере примерно на 90%, по меньшей мере примерно на 95%, по меньшей мере примерно на 98% или по меньшей мере примерно на 99% подобна последовательности нуклеиновой кислоты, выбираемой из группы, состоящей из SEQ ID NO:1-93.

Кишечные бактерии, продуцирующие эндотоксин, являются наиболее вредными бактериями, которые прямо или косвенно, путем повышения уровня эндотоксина, стимулируют воспалительные процессы, разрушают кишечный барьер, нарушают обмен веществ и ослабляют иммунную систему, вызывая, таким образом, ожирение, устойчивость к инсулину, диабет и другие болезни обмена веществ.

С помощью способов улучшения популяции кишечной микробиоты по настоящему изобретению можно уменьшить популяцию кишечной микробиоты, включающую Alistipes, Anaeroplasma, Barnesiella, Bifidobacterium, Butyricimonas, Butyrivibrio, Coprococcus, Fastidiosipila, Helicobacter, Hespellia, Marvinbryantia, Oribacterium, Oscillibacter, Prevotella, Roseburia, Ruminococcus или TM7_genera_incertae_sedis; альтернативно можно уменьшить популяцию кишечных бактерий Helicobacteraceae, Lachnospiraceae, Porphyromonadaceae, Prevotellaceae, Rikenellaceae, Ruminococcaceae, Anaeroplasmataceae или Bifidobacteriaceae. В одном варианте осуществления изобретения уменьшенная популяция кишечной микробиоты может включать Campylobacterales, Bacteroidales, Clostridiales, Anaeroplasmatales или Bifidobacteriales; альтернативно уменьшенная популяция кишечных бактерий может включать Epsilonproteobacteria, Alphaaproteobacteria, Bacteroidia, Clastridia, Actinobacteridae или Mollicutes. В одном варианте осуществления изобретения уменьшенная популяция кишечной микробиоты может включать Proteobacteria, Bacteroidetes, Actinobacteria, Firmicutes или Tenericutes.

Например, уменьшенная популяция кишечных бактерий может включать бактерии, в которых V3-область последовательности гена рРНК 16S по меньшей мере примерно на 70%, по меньшей мере примерно на 75%, по меньшей мере примерно на 80%, по меньшей мере примерно на 85%, по меньшей мере примерно на 90%, по меньшей мере примерно на 95%, по меньшей мере примерно на 98% или по меньшей мере примерно на 99% подобна последовательности нуклеиновой кислоты, выбираемой из группы, состоящей из SEQ ID NO:94-268.

Способы по настоящему изобретению позволяют снизить в сыворотке уровни провоспалительных факторов. В качестве примера провоспалительных факторов можно привести, не ограничиваясь ими, цитокины, такие как белок, связывающий липополисахариды, протеин-1, являющийся хемоаттрактантом моноцитов, или лептин. Дополнительно и необязательно способы по настоящему изобретению позволяют повысить в сыворотке уровень такого цитокина как адипонектин.

С помощью способов по настоящему изобретению можно повысить уровень короткоцепных жирных кислот в кишечнике. Короткоцепные жирные кислоты могут включать, не ограничиваясь ими, уксусную кислоту, пропионовую кислоту, масляную кислоту, валериановую кислоту, изомасляную кислоту и изовалериановую кислоту.

Композиции, предназначенные для улучшения популяции кишечной микробиоты, могут быть введены перорально или парентерально. В одном варианте осуществления изобретения такая композиция может входить в состав пищевого продукта, напитка, пищевой добавки или фармацевтического препарата. В одном варианте осуществления изобретения указанная композиция может быть в форме суппозитория, таблетки, пилюли, гранулы, порошка, пленки, микрокапсулы, аэрозоля, спиртового раствора, настойки, тонизирующего средства, жидкой суспензии или сиропа. Композиция по настоящему изобретению может быть введена в дозе от около 50 мг/кг массы тела до около 400 мг/кг массы тела.

В одном примере субъекту была введена композиция, включающая берберин. Популяцию микробиоты кишечника указанного субъекта затем анализировали методом пиросеквенирования 454 последовательностей и определяли содержание короткоцепных жирных кислот при помощи газовой хроматографии. Полученные результаты показали, что берберин способен изменять популяцию кишечной микробиоты, а именно обогащать популяцию определенных бактерий, в том числе бактерий, продуцирующих короткоцепные жирные кислоты, и одновременно подавлять или устранять популяцию определенных бактерий, в том числе бактерий, продуцирующих эндотоксин. Полученные результаты далее показали, что берберин, вводимый перорально, способен повышать уровень короткоцепных жирных кислот в кишечнике, причем указанное увеличение является более выраженным у субъектов, страдающих метаболическим синдромом. Дополнительные эксперименты и наблюдения далее показали, что вышеописанное воздействие берберина на популяцию кишечной микробиоты является благоприятным и позволяет улучшить восприимчивость к инсулину, уменьшить воспаление, контролировать увеличение массы тела и предотвратить ожирение, вызванное перееданием, хроническим воспалением и устойчивостью к инсулину.

Другим объектом изобретения являются способы скрининга лекарственных средств, соединений, композиций, экстрактов или препаратов, способных улучшать популяцию кишечной микробиоты. Способы по настоящему изобретению могут быть использованы при разработке лекарственных средств, пищевых добавок, диетических продуктов, пищевых продуктов и напитков, позволяющих улучшить состояние здоровья и/или предотвратить ожирение или другие связанные с ожирением метаболические синдромы благодаря целенаправленному воздействию на популяцию кишечной микробиоты у субъекта.

В одном варианте осуществления изобретения способ скрининга по настоящему изобретению может включать введение контрольному субъекту эффективного количества контрольной композиции для увеличения первой популяции кишечной микробиоты при одновременном уменьшении второй популяции кишечной микробиоты у контрольного субъекта, введение испытуемому субъекту определенного количества испытуемой композиции и сравнение популяции кишечной микробиоты у контрольного субъекта и популяции кишечной микробиоты у испытуемого субъекта.

В использованном здесь значении термин ”субъект” означает животное, такое как млекопитающее, например, человек. В некоторых вариантах осуществления изобретения субъект может быть крысой. В некоторых вариантах осуществления изобретения субъект может быть мышью. В некоторых вариантах осуществления изобретения субъект может быть человеком.

Испытуемое соединение, демонстрирующее такое же воздействие на микробиоту кишечника, что и контрольное соединение, обладает активностью, позволяющей улучшать популяции кишечной микробиоты. В использованном здесь значении термин ”подобный” означает сходство, равное по меньшей мере примерно 75%, по меньшей мере примерно 80%, по меньшей мере примерно 90%, по меньшей мере примерно 95%, по меньшей мере примерно 98% или по меньшей мере примерно 99%.

Испытуемая композиция может представлять собой отдельное соединение, смесь, пищевой продукт, пищевую добавку, питательную добавку, диетический продукт, фармацевтический препарат или напиток.

Другим объектом изобретения являются композиции, предназначенные для улучшения популяции кишечной микробиоты. В одном варианте осуществления изобретения композиция по настоящему изобретению может избирательно увеличивать первую популяцию кишечной микробиоты при одновременном уменьшении второй популяции кишечной микробиоты у субъекта.

Композиция по настоящему изобретению может включать химическое соединение, природное лекарственное средство, природный продукт или растительный экстракт. В одном варианте осуществления изобретения химическое соединение может включать, не ограничиваясь ими, берберин, производные берберина, изохинолиновые алкалоиды или любые комбинации указанных веществ.

В одном варианте осуществления изобретения композиция может включать природное лекарственное средство, целое, фрагментированное или порошкообразное растение либо растительный экстракт, выделенный из растений Berberis, Coptis, Scutellaria, Phellodendron, Momordica, Ilex, Sophora, Gentiana, Anemarrhena, Gardenia, Rheum или Taraxacum. В одном варианте осуществления изобретения композиция может включать природное лекарственное средство, целое, фрагментированное или порошкообразное растение либо растительный экстракт, выделенный из растений Berberidaceae, Ranunculaceae, Lamiaceae, Rutaceae, Cucurbitacea, Aquifoliaceae, Leguminosae, Gentianaceae, Agavaceae, Rubiaceae, Polygonaceae, Asteraceae, Menispermaceae или Cucurbitaceae. В одном варианте осуществления изобретения композиция может включать природное лекарственное средство, целое, фрагментированное или порошкообразное растение либо растительный экстракт, выделенный из Berberis vulgaris, Coptischinensis, Scutellariabaicalensis, Phellodendri Chinensis, Momordicacharantia, Ilex kudingcha, Sophoraflavescens, Gentianascabra, Anemarrhenaasphodeloides, Gardenia jasminoides, Pheum palmatum или Herba Taraxaci.

Нижеследующие примеры приведены для иллюстрации выполнения и особенностей репрезентативного способа по настоящему изобретению. Приведенные примеры не ограничивают объем изобретения.

Примеры

В примерах использованы крысы Wistar (самцы в возрасте 8 недель) в качестве испытуемых субъектов и берберин в качестве репрезентативного соединения. 40 крыс Wistar акклиматизировали в течение двух недель и затем произвольно распределяли в четыре группы: группа, получавшая нормальный рацион (NCD), группа, получавшая нормальный рацион и берберин (NCD+BBR), группа, получавшая рацион с высоким содержанием жира (HFD), и группа, получавшая рацион с высоким содержанием жира и берберин (HFD+BBR). Каждую группу исследовали в течение 18 недель. На протяжении указанных 18 недель группе NCD+BBR внутрижелудочно вводили берберин в указанных количествах. Образцы фекалий каждого животного собирали в разные периоды времени. Было выполнено пиросеквенирование 454 последовательностей для анализа структуры кишечной микробиоты. Содержание короткоцепных жирных кислот в фекалиях анализировали с помощью газовой хроматографии. Кроме того, в течение 18 недель контролировали и измеряли массу тела, потребление корма, восприимчивость к инсулину и уровни системных воспалений.

Берберин изменял популяцию кишечной микробиоты в условиях скармливания как нормального рациона, так и рациона с высоким содержанием жира

Популяции кишечной микробиоты у крыс во всех четырех экспериментальных группах исследовали путем пиросеквенирования 454 последовательностей и выполнения многомерных статистических анализов. Анализ РСоА на основании невзвешенного значения расстояния Unifrac показал, что берберин изменял структуру кишечной микробиоты как в группе, получавшей нормальный рацион, так и в группе, получавшей рацион с высоким содержанием жира, на статистически значимом уровне; при этом на долю берберина приходится 12,6% от общего изменения популяции кишечной микробиоты (фигура 1А). Рацион также оказывал статистически значимое воздействие на популяцию кишечной микробиоты. На фигуре 1А на вертикальной оси показано статистически значимое различие (3,7%) популяции кишечной микробиоты для двух разных рационов (NCD и HFD). Многомерный дисперсионный анализ (MANOVA), выполненный в отношении четырех групп, показал, что берберин или рацион оказывают статистически значимое воздействие на микробиоту кишечника (Р<0,01), но наиболее выраженное различие имеет место при введении берберина (фигура 1В). Индекс Шеннона - Винера показывает, что берберин уменьшает множественность популяций кишечной микробиоты на статистически значимом уровне (Р<0,05).

Берберин увеличивает количество бактерий, продуцирующих короткоцепные жирные кислоты, и уменьшает количество бактерий, продуцирующих эндотоксин, в популяции кишечной микробиоты.

Было идентифицировано 268 относящихся к берберину операционных таксономических единиц (OTU) при выполнении анализа с введением избыточности (RDA), и детальные результаты анализа приведены на фигуре 2, таблица 1 и таблица 2. Берберин позволил обогатить 93 OTU (SEQ ID NO:1-93) (таблица 1), при этом 175 OTU (SEQ ID NO:94-268) (таблица 2) было подавлено или уничтожено.

Такстономию указанных 268 операционных таксономических единиц (OTU) анализировали при помощи классификатора RDP с использованием репрезентативной последовательности OTU. Было установлено, что бактерии, подавленные берберином, включают бактерии Alistipes, Anaeroplasma, Barnesiella, Bifidobacterium, Butyricimonas, Butyrivibrio, Coprococcus, Fastidiosipila, Helicobacteer, Hespellia, Marvinbryantia, Oribacterium, Oscillibacter, Prevotella, Roseburia, Ruminococcus, TM7_genera_incertae_sedis и другие. Среди указанных бактерий бактерии Helicobacter, относящиеся к Proteobacteria phylum, способны продуцировать высокоактивный эндотоксин. Кроме того, было установлено, что популяции бактерий, увеличенные берберином, включают бактерии Alistipes, Allobaculum, Bacteroides, Barnesiella, Blautia, Butyricicoccus, Butyricimonas, Dorea, Helicobacter, Hespellia, Holdemania, Lawsonia, Oscillibacter, Parabacteroides, Phascolarctobacterium, Prevotella и Sedimentibacter. Среди указанных бактерий бактерии Blautia, Allobaculum, Prevotella, Bacterioides и Butyricimonas присутствуют в достаточно большом количестве и способны продуцировать короткоцепные жирные кислоты.

Таким образом, при введении субъекту берберин способен увеличивать количество бактерий, продуцирующих короткоцепные жирные кислоты, и уменьшать количество бактерий, продуцирующих эндотоксин, в популяции кишечной микробиоты.

Берберин повышает уровень короткоцепных жирных кислот в кишечнике крыс, получавших нормальный рацион или рацион с высоким содержанием жира

Содержание короткоцепных жирных кислот (включающих уксусную кислоту, пропионовую кислоту, масляную кислоту, валериановую кислоту, изомасляную кислоту, изовалериановую кислоту и т.д.) в фекалиях крыс анализировали с помощью газовой хроматографии. Полученные результаты показали, что пероральное введение 100 мг/кг массы тела позволяет повысить уровень короткоцепных жирных кислот в кишечнике крыс, получавших нормальный рацион или рацион с высоким содержанием жира. Особенно выраженным является воздействие на уровни уксусной кислоты и пропионовой кислоты (фигура 3). Таким образом, берберин способен повышать уровень короткоцепных жирных кислот в кишечнике крыс, получавших нормальный рацион или рацион с высоким содержанием жира.

Берберин уменьшает фенотип ожирения крыс.

Массу тела крыс во всех четырех группах контролировали и анализировали на протяжении всех экспериментов. Полученные результаты показали, что после скармливания рациона с высоким содержанием жира в течение 18 недель крысы в группе HFD имели значительно большую массу тела по сравнению с группой, получавшей нормальный рацион (Р<0,01); внутрижелудочное введение берберина в дозе 100 мг/кг массы тела эффективно ограничивает увеличение массы тела крыс, особенно у крыс, получавших рацион с высоким содержанием жира. Особенно удивительным результатом является то, что в течение всего эксперимента масса тела крыс в группе HFD+BBR оставалась на таком же уровне, что и в группе, получавшей нормальный рацион, при отсутствии статистически значимого отличия (Р>0,05). Берберин также в некоторой степени влиял на массу тела крыс, получавших нормальный рацион (фигура 4).

В конце эксперимента животных умерщвляли. Измеряли массу тела натощак, массу эпидидимальной жировой ткани и массу периренальной жировой ткани. На фигуре 4В приведен индекс ожирения ([масса эпидидимальной жировой ткани + масса периренальной жировой ткани]/масса тела натощак ×100). После скармливания рациона с высоким содержанием жира в течение 18 недель индекс ожирения в группе HFD был значительно выше, чем в группе NCD, при этом введение берберина позволяет значительно снизить индекс ожирения. Кроме того, ни рацион с высоким содержанием жира, ни берберин не оказали существенного воздействия на печень и поджелудочную железу, из чего следует, что длительное введение берберина не оказывает очевидного побочного эффекта на нормальные физиологические функции крысы. Результаты измерения калорий, потребляемых крысами, показали, что пероральное введение берберина в дозе 100 мг/кг массы тела оказывает значительное ингибирующее воздействие на потребление корма крысами, особенно крысами, получавшими рацион с высоким содержанием жира (фигура 4С).

Берберин уменьшает восприимчивость к инсулину у крыс, получавших нормальный рацион или рацион с высоким содержанием жира.

У крыс во всех четырех экспериментальных группах измеряли уровень глюкозы в крови натощак (FBG) и уровень инсулина в сыворотке натощак (FINS). Крысы, получавшие HFD в течение 18 месяцев, характеризовались значительно более высоким уровнем FBG по сравнению с аналогичным показателем в группе NCD. Весьма удивительным является то, что берберин эффективно снижал FBG у крыс в группах NCD и HFD, особенно у крыс в группе HFD, где снижение FBG было значительным (Р<0,05) (фигура 5А). Результат воздействия берберина на уровень инсулина показан на фигуре 5В. Уровень инсулина в сыворотке натощак (FINS) у крыс, получавших рацион с высоким содержанием жира (HFD), был значительно выше по сравнению с аналогичным показателем у крыс в группе NCD; однако после введения берберина в дозе 100 мг/кг массы тела в течение 18 месяцев уровень FINS значительно снизился даже у крыс, получавших рацион с высоким содержанием жира (HFD+BBR), достигнув уровня, сравнимого с уровнем, имевшим место у крыс, получавших нормальный рацион. На фигуре 5С приведено значение индекса устойчивости к инсулину HOMA, характеризующее устойчивость крыс к инсулину, которое показывает, что после скармливания рациона с высоким содержанием жира в течение 18 недель у крыс возникла очевидная устойчивость к инсулину, но введение берберина в дозе 100 мг/кг массы тела предотвращает возникновение устойчивости к инсулину (Р<0,05).

Для дальнейшего исследования восприимчивости к инсулину был выполнен анализ пероральной пробы на толерантность к глюкозе и внутрибрюшинной пробы на толерантность к инсулину; полученные результаты приведены соответственно на фигурах 5D и 5Е. В соответствии с результатами FBG и FINS после скармливания рациона с высоким содержанием жира в течение 18 недель показатели пероральной пробы на толерантность к глюкозе и внутрибрюшинной пробы на толерантность к инсулину были существенно ухудшены, в то время как введение берберина в дозе 100 мг/кг массы тела в значительной степени предотвратило снижение толерантности к глюкозе и толерантности к инсулину, из чего следует, что берберин может играть важную роль в улучшении глюкозного обмена.

Берберин снижает уровень системного воспаления у крыс, получавших рацион с высоким содержанием жира.

Для оценки уровней системного воспаления у крыс во всех четырех экспериментальных группах измеряли уровни белка (LBP), связывающего липополисахарид (LPS), протеина-1, являющегося хемоаттрактантом моноцитов (МСР-1), лептина и адипонектина в сыворотке; полученные результаты приведены на фигуре 6. Результаты экспериментов показывают, что скармливание рациона с высоким содержанием жира существенно повышает уровень LBP в сыворотке, но введение берберина в дозе 100 мг/кг массы тела в значительно степени подавляет повышение уровня LBP в сыворотке (Р<0,05, фигура 6А).

МСР-1 является провоспалительным цитокином, вызывающим хемотаксис и активацию моноцитов/макрофагов. С МСР-1 тесно связано возникновение и развитие многих воспалительных заболеваний, в том числе атеросклероза, ожирения, диабета 2-го типа, артрита, сепсиса и хронических бактериальных инфекций. Результаты данного эксперимента показали, что в процессе постепенного возникновения ожирения и устойчивости к инсулину, вызываемых у крыс рационом с высоким содержанием жира, уровень МСР-1 постепенно повышается; однако после введения берберина уровень МСР-1 значительно снизился, при этом весьма удивительным является то, что уровень МСР-1 был даже ниже, чем у крыс в группе NCD (фигура 6В).

Лептин является гормоном, секретируемым жировой тканью, который широко участвует в липидном, глюкозном и энергетическом обмене. Результаты, полученные при выполнении данного эксперимента, показали, что уровень лептина в сыворотке у крыс в группе HFD значительно выше, чем у крыс в группе NCD (P<0,01); однако берберин позволил существенно снизить уровень лептина в сыворотке, особенно у крыс, получавших рацион с высоким содержанием жира, (Р<0,05, фигура 6С).

Во всех четырех группах были исследованы уровни адипонектина. Полученные результаты показывают, что уровень адипонектина, нормализованный относительно массы жировой ткани, был значительно ниже у крыс в группе HFD по сравнению с аналогичным показателем в группе NCD (Р<0,001); однако введение берберина позволило существенно повысить уровень адипонектина у крыс, получавших HFD (P<0,01, фигура 6D). Таким образом, берберин улучшает популяцию кишечной микробиоты, снижает уровни LPB, МСР-1 и лептина и повышает секрецию адипонектина. В таблице 1 приведены последовательности V3-области гена рРНК 16S бактерий, обогащенных берберином.

Таблица 1
Последовательности V3-области гена рРНК 16S бактерий, обогащенных берберином Список последовательностей Название OTU Последовательность V3-области гена рРНК 16S SEQ_ID_NO_1 R_U00449939 TAGGGAATATTGCTCAATGGGGGAAACCCTGAAGCAGCAACGCCGCGTGGAGGATGAAGGTTTTCGGATTGTAAACTCCTTTTCTAAGAGAAGATTATGACGGTATCTTAGGAATAAGCACCGGCTAACTCCGTGCC SEQ_ID_NO_2 R_U01131573 GGGGAAACCCTGAAGCAGCAACGCCGCGTGGAGGATGAAGGTTTCGGATTGTAAACTCCTTTCTAAGAGAAGATTATGACGGTATCTTAGGAATAAGCACCGGCTAACTCCGTGCC SEQ_ID_NO_3 R_U00442991 TGGGGAATATTGCGCAATGGGCGAAAGCCTGACGCAGCGACGCCGCGTGAGGGATGAAGGTCCTCGGATCGTAAACCTCTGTCAGGGGGGAAGAAGCGCCTGTGAGCAAATAGTTCATGGGTTTGACGGTACCCCCAAAGGAAGCACCGGCTAACTCCGTGCC SEQ_ID_NO_4 R_U01131468 TGAGGAATATTGGTCAATGGGCGCAGGCCTGAACCAGCCAAGTAGCGTGAAGGATGACTGCCCTATGGGTTGTAAACTTCTTTTATATGGGAATAAAGTTTTCCACGTGTGGAATTTTGTATGTGCCATATGAATAAGGATCGGCTAACTCCGTGCC SEQ_ID_NO_5 R_U00000076 TGAGGAATATTGGTCAATGGACGAGAGTCTGAACCAGCCAAGTAGCGTGAAGGATGACTGCCCTATGGGTTGTAAACTTCTTTTATATGGGAATAAAGTGAGCCACGTGTGGCTTTTTGTATGTACCATACGAATAAGGATCGGCTAACTCCGTGCC SEQ_ID_NO_6 R_U00000261 TGAGGAATATTGGTCAATGGGCGCAGGCCTGAACCAGCCAAGTAGCGTGAAGGATGACTGCCCTATGGGTTGTAAACTTCTTTTATATGGGAATAAAGTTTTCCACGTGTGGAATTTTGTATGTACCATATGAATAAGGATCGGCTAACTCCGTGCC SEQ_ID_NO_7 R_U00277049 TGAGGAATATTGGTCAATGGGCGCAGGCCTGAACCAGCCAAGTAGCGTGAAGGATGACTGCCCTATGGGTTGTAAACTTCTTTTATATGGGAATAAAGTTTTCCTACGTGTGGAATTTTGTTATGTACCATATGAATAAGGATCGGCTAACTCCGTGCC SEQ_ID_NO_8 R_U01140154 TGAGGAATATTGGTCAATGGGCGCGAGCCTGAACCAGCCAAGTAGCGTGCAGGACGACGGCCCTATGGGTTGTAAACTGTCTTTTATACGGGGATAAAGTATGCCACGTGTGGTTTATTGCAGGTACCGTATGAATAAGGACCGGCTAATTCCGTGCC SEQ_ID_NO_9 R_U00797917 TGAGGAATATTGGTCAATGGGCGCGAGCCTGAACCAGCCAAGTAGCGTGCAGGACGACGGCCCTATGGGTTGTAAACTGCTTTTATACGGGGATAAAGTATGCCACGTGTGGTTTATTGCAGGTACCGTATGAATAAGGACCGGCTAATTCCGTGCC

SEQ_ID_NO_10 R_U01135802 TGAGGAATATTGGTCAATGGGCGGAAGCCTGAACCAGCCAAGTCGCGTGAGGGAAGACGGCCCTACGGGTTGTAAACCTCTTTTGCCGGGGAGGCAATGCCCACGCTCGCGAGCTGGGAAGGAGAGTACCCGGAGAAAAAGACATCGGCTAACTCCGTGCC SEQ_ID_NO_11 R_U01199632 TGAGGAATATTGGTCAATGGGCGGAAGCCTGAACCAGCCAAGTCGCGTGAGGGAAGACGGCCCTACGGGTTGTAAACCTCTTTTGCCGGGGAGCAATGCCCACGCTCGCGAGCTGGGAAGGAGAGTACCCGGAGAAAAAGACATCGGCTAACTCCGTGCC SEQ_ID_NO_12 R_U01136954 TGAGGAATATTGGTCAATGGGCGGAAGCCTGAACCAGCCAAGTCGCGTGAGGGAAGACGGCCCTACGGGTTGTAAACCTCTTTTGCCGGGGAGCAAATGCCCAGCTCGCGAGCTGGGAAGGAGAGTACCCGGAGAAAAAGCATCGGCTAAACTCCGTGCC SEQ_ID_NO_13 R_U01156163 TGAGGAATATTGGTCAATGGGCGAGAGCCTGAACCAGCCAAGTCGCGTGAGGGAAGACGGCCCTACGGGTTGTAAACCTCTTTTGTCAGGGAGCAAGAACAGGCACGTGTGCCTGACTGAGAGTACCTGAAGAAAAAGACATCGGCTAACTCCGTGCC SEQ_ID_NO_14 R_U00436427 TGAGGAATATTGGTCAATGGCCGGAAGGCTGAACCAGCCAAGTCGCGTGAGGGACTAAGGCCCTACGGGTCGTAAACCTCTTTTGCCGGGGAGCAATGGGGCCCTTGCGAGGGCCCAGGGAGAGTACCCGGAGAAAAAGCATCGGCTAACTCCGTGCC SEQ_ID_NO_15 R_U01161731 TGAGGAATATTGGTCAATGGCCGGGAGGCTGAACCAGCCAAGTCGCGTGAGGGATGACGGCCCTACGGGTTGTAAACCTCTTTTGTCGGGGAGCAAAGGACTTCACGAGTGGAGTTTCGAGAGTACCCGAAGAAAAAGACATCGGCTAACTCCGTGCC SEQ_ID_NO_16 R_U00804243 TGAGGAATATTGGTCAATGGCCGGGAGGCTGAACCAGCCAAGTCGCGTGAGGGATGACGGCCCTACGGGTTGTAAACCTCTTTTGTCGGGGAGCAAAGGACTTCACGAGTGGAGTTTCGAGAGTACCCGAAGAAAAAGCATCGGCTAACTCCGTGCC SEQ_ID_NO_17 R_U00832647 TGAGGAATATTGGTCAATGGCCGGGAGGCTGAACCAGCCAAGTCGCGTGAGGGATGACGGCCCTACGGGTTGTAAACCTCTTTGTCGGGGAGCAAAGGACTTCACGAGTGGAGTTTCGAGAGTACCCGAAGAAAGACATCGGCTAACTCCGTGCC SEQ_ID_NO_18 R_U00013412 TGAGGAATATTGGTCAATGGGCGAGAGCCTGAACCAGCCAAGTCGCGTGAGGGAAGACGGCCCTACGGGTTGTAAACCTCTTTTGTCAGGGAGCAAGAACAGGCACGTGTGCCTGACTGAGAGTACCTGAAGAAAAAGCATCGGCTAACTCCGTGCC SEQ_ID_NO_19 R_U00807079 TGAGGAATATTGGTCAATGGCCGAGAGGCTGAACCAGCCAAGTCGCGTGAGGGATGACGGCCCTACGGGTTGTAAACCTCTTTTGTCGGGGAGCAAAGGACTTCACGTGTGAAGTTTCGAGAGTACCCGAAGAAAAAGCATCGGCTAACTCCGTGCC SEQ_ID_NO_20 R_U00005346 TGAGGAATATTGGTCAATGGGCGGAAGCCTGAACCAGCCAAGTCGCGTGAGGGAAGACGGTCCTATGGATTGTAAACCTCTTTTGCCGGGGAGCAATGCCGCTCTTGCGAGAGCGGAGGGAGAGTACCCGGAGAAAAAGCATCGGCTAACTCCGTGCC

SEQ_ID_NO_21 R_U00004086 TGAGGAATATTGGTCAATGGCCGGAAGGCTGAACCAGCCAAGTCGCGTGAGGGAATAAGGCCCTACGGGTCGTAAACCTCTTTTGTCAGGGAGCAAAGCTGGCTACGCGTAGCCAGAAGGAGAGTACCTGAAGAAAAAGCATCGGCTAACTCCGTGCC SEQ_ID_NO_22 R_U01130438 TGAGGAATATTGGTCAATGGGCGGAAGCCTGAACCAGCCAAGTCGCGTGAGGGAAGACGGCCCTACGGGTTGTAAACCTCTTTGCCGGGAGCAATGCCCAGCTCGCGAGCTGGGAAGGAGAGTACCCGGAGAAAAGACATCGGCTAACTCCGTGCC SEQ_ID_NO_23 R_U01131459 TGAGGAATATTGGTCAATGGGCGGAAGCCTGAACCAGCCAAGTCGCGTGAGGGAAGACGGCCCTACGGGTTGTAAACCTCTTTGCCGGGGAGCAATGCCCAGCTCGCGAGCTGGGAAGGAGAGTACCCGGAGAAAAGACATCGGCTAACTCCGTGCC SEQ_ID_NO_24 R_U00436448 TGAGGAATATTGGTCAATGGGCGGAAGCCTGAACCAGCCAAGTCGCGTGAGGGACTAAGGCCCTACGGGTCGTAAACCTCTTTTGCCGGGGAGCAAGCCGTCCCACGTGTGGGCCGGTGGAGAGTACCCGGAGAAAAAGCATCGGCTAACTCCGTGCC SEQ_ID_NO_25 R_U00474862 TGAGGAATATTGGTCAATGGGCGGAAGCCTGAACCAGCCAAGTCGCGTGAGGGACTAAGGCCCTACGGGTCGTAAACCTCTTTTGCCGGGGAGCAAGCCGTCCCACGTGTGGGCCGGTGGAGAGTACCCGGAGAAAAAGACATCGGCTAACTCCGTGCC SEQ_ID_NO_26 R_U00001388 TGAGGAATATTGGTCAATGGGCGGAAGCCTGAACCAGCCAAGTCGCGTGAGGGAAGACGGCCCTACGGGTTGTAAACCTCTTTTGCCGGGGAGCAATGCCCAGCTCGCGAGCTGGGAAGGAGAGTACCCGGAGAAAAAGCATCGGCTAACTCCGTGCC SEQ_ID_NO_27 R_U01185184 TGAGGAATATTGGTCAATGGGCGGAAGCCTGAACCAGCCAAGTCGCGTGAGGGAAGACGGCCCTACGGGTTGTAAACCTCTTTTTGCCGGGGGAGCAATGCCCAGCTCGCGAGCTGGGAAGGAGAGTACCCGGAGAAAAAAGCATCGGCTAACTCCGTGCC SEQ_ID_NO_28 R_U00000528 TGAGGAATATTGGTCAATGGGCGAGAGCCTGAACCAGCCAAGTCGCGTGAAGGATGAAGGATCTATGGTTTGTAAACTTCTTTTATATGGGAATAAAGTGAGGAACGTGTTCCTTTTTGTATGTACCATATGAATAAGCATCGGCTAACTCCGTGCC SEQ_ID_NO_29 R_U00000002 TGAGGAATATTGGTCAATGGACGAGAGTCTGAACCAGCCAAGTAGCGTGAAGGATGACTGCCCTATGGGTTGTAAACTTCTTTTATACGGGAATAAAGTGAGGCACGTGTGCCTTTTTGTATGTACCGTATGAATAAGGATCGGCTAACTCCGTGCC SEQ_ID_NO_30 R_U00147566 TGAGGAATATTGGTCAATGGACGCAAGTCTGAACCAGCCATGCCGCGTGCAGGAAGACGGCTCTATGAGTTGTAAACTGTCTTTTGTACTAGGGTAAACGCTCTTACGTGTAGGAGCCTGAAAGTATAGTACGAATAAGGATCGGCTAACTCCGTGCC SEQ_ID_NO_31 R_U00000394 TGAGGAATATTGGTCAATGGACGCAAGTCTGAACCAGCCATGCCGCGTGCAGGAAGACGGCTCTATGAGTTGTAAACTGCTTTTGTACTAGGGTAAACGCTTCTACGTGTAGGAGCCTGAAAGTATAGTACGAATAAGGATCGGCTAACTCCGTGCC

SEQ_ID_NO_32 R_U00047397 TGGGGAATTTTGCGCAATGGGGGGAACCCTGACGCAGCAACGCCGCGTGCGGGATGACGGCCCTCGGGTTGTAAACCGCTTTCAGCAGGGAAGACCACGACGGTACCTGCAGAAGAAGCTCCGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_33 R_U00000552 TGAGGAATATTGGGCAATGGGCGGAAGCCTGACCCAGCCATGCCGCGTGCAGGAAGACAGCCCTATGGGTCGTAAACTGCTTTTTTAGAGGAAGAATAAAGTCTACGTGTAGACCGATGACGGTACTTTAAGAAAAAGCATCGGCTAACTCCGTGCC SEQ_ID_NO_34 R_U00441706 GTAGGGAATATTGCACAATGGGGGAAACCCTGATGCAGCGACGCCGCGTGAAGGAAGAAGTATCTCGGTATGTAAACTTCTATCAGCAGGGAAGACAATGACGGTACCTGACTAAGAAGCCCCGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_35 R_U00119974 TGGGGAATATTGCACAATGGGGGAAACCCTGATGCAGCGACGCCGCGTGAAGGAAGAAGTATTTCGGTATGTAAACTTCTATCAGCAGGGAAGAAAGTGACAGTACCTGACTAAGAAGCCCCGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_36 R_U00104206 TGGGGAATATTGCACAATGGGGGAAACCCGTACGATGCAGCGACGCCGCGTGAAGGAAGAAGTATCTCGGTATGTAAACTTCTATCAGCAGGGAAGATAATGACGGTACCTGACTAAGAAGCCCCGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_37 R_U00580795 TGGGGAATATTGCACAATGGGGGAAACCCGTACGATGCAGCGACGCCGCGTGAAGGAAGAAGTATCTCGGTATGTAAACTTACTATCAGCAGGGAAGATAATGACGGTACCTGACTAAGAAGCCCCGGCCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_38 R_U01129900 AAACCCTGATGCAGCGACGCCGCGTGAAGGAAGAAGTATCTCGGTATGTAAACTTCTATCAGCAGGGAAGACAATGACGGTACCTGACTAAGAACGCCCGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_39 R_U00016467 TGGGGAATATTGCACAATGGGGGAAACCCTGATGCAGCGACGCCGCGTGAAGGAAGAAGTATCTCGGTATGTAAACTTCTATCAGCAGGGAAGATAATGACGGTACCTGACTAAGAAGCCCCGGCTAATTACGTGCC SEQ_ID_NO_40 R_U00000367 TGGGGAATATTGCACAATGGGGGAAACCCTGATGCAGCGACGCCGCGTGAAGGAAGAAGTATCTCGGTATGTAAACTTCTATCAGCAGGGAAGATAATGACGGTACCTGACTAAGAAGCCCCGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_41 R_U00459481 TGGGGAATATTGCACAATGGGGGAAACCCTGATGCAGCAACGCCGCGTGGGTGAAGGAGCGTTTCGGCGCGTAAAGCCCTGTCAGCGGGGAAGAAAAAAGACGGTACCCGACCAAGAAGCCCCGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_42 R_U00000215 TGGGGAATATTGCACAATGGGCGCAAGCCTGATGCAGCGACGCCGCGTGAGTGAAGAAGTATTTCGGTATGTAAAGCTCTATCAGCAGGGAAGAAAATGACGGTACCTGACTAAGAAGCCCCGGCTAACTACGTGCC

SEQ_ID_NO_43 R_U00071963 TGGGGAATATTGCACAATGGGGGAAACCCTGATGCAGCGACGCCGCGTGAAAGATGAAGTATTTCGGTATGTAAACTTCTATCAGCAGGGAAGAAAATGACGGTACCTGACTAAGAAGCCCCGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_44 R_U00000939 TGGGGAATATTGCACAATGGAGGAAACTCTGATGCAGCGACGCCGCGTGAGTGAAGAAGTATTTCGGTATGTAAAGCTCTATCAGCAGGGAAGACAGTGACGGTACCTGACTAAGAAGCTCCGGCTAAATACGTGCC SEQ_ID_NO_45 R_U00472681 TGGGGAATATTGCACAATGGGGGGAACCCTGATGCAGCGACGCCGCGTGAGTGACGAAGTATCTCGGTATGTAAAGCTCTGTCAGCAGGGAAGAAGAATGACGGTACCTGAAGAAGAAGCACCGGCTAAATACGTGCC SEQ_ID_NO_46 R_U00000105 TGGGGAATATTGCACAATGGGCGAAAGCCTGATGCAGCGACGCCGCGTGAGTGAAGAAGTATTTCGGTATGTAAAGCTCTATCAGCAGGGAAGAAAATGACGGTACCTGACTAAGAAGCCCCGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_47 R_U00000279 TGGGGAATATTGCACAATGGGCGAAAGCCTGATGCAGCAACGCCGCGTGAAGGAAGACGGTTTTCGGATTGTAAACTTCTATCAATAGGGAAGAAAGAAATGACGGTACCTAAATAAGAAGCCCCGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_48 R_U00022935 TGGGGAATATTGCACAATGGGGGAAACCCTGATGCAGCAACGCCGCGTGAAGGAAGACGGTTTTCGGATTGTAAACTTCTATCAATAGGGAAGAAAGAAATGACGGTACCTAAATAAGAAGCCCCGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_49 R_U00000550 TGGGGAATATTGCACAATGGGGGAAACCCTGATGCAGCGACGCCGCGTGGAGGAAGAAGGTCTTCGGATTGTAAACTCCTGTCCCAGGGGACGATAATGACGGTACCCTGGGAGGAAGCACCGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_50 R_U00009280 TGGGGAATATTGCACAATGGGCGCAAGCCTGATGCAGCAACGCCGCGTGAAGGAAGACGGTTTTCGGATTGTAAACTTCTGTTCTTAGTGAAGAAGAATGACGGTAGCTAAGGAGCAAGCCACGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_51 R_U00164237 TGGGGAATATTGCACAATGGGCGCAAGCCTGATGCAGCAACGCCGCGTGAAGGAAGACGGTTTTCGGATTGTAAACTTCTGTTCTTAGTGAAGAATAATGACGGTAACTAAGGAGCAAGCCACGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_52 R_U00032911 TGGGGAATATTGCACAATGGGGGAAACCCTGATGCAGCGACGCCGAGTGAGGGAAGAAGGTTTTCGGATTGTAAACCTCTGTCCTTGGTGAAGATAATGACGGTAGCCAAGGAGGAAGCTACGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_53 R_U00040533 TGGGGGATATTGCACAATGGGGGAAACCCTGATGCAGCGACGCCGCGTGAGGGAAGACGGCCTTCGGGTTGTAAACCTCTGTCGCAGGGGACGAAGGAAGTGACGGTACCCTGTGAGGAAGCCACGGCTAACTACGTGCC

SEQ_ID_NO_54 R_U01145869 GAATATTGCGCAATGGGGGCAACCCTGACGCAGCAACGCCGCGTGAAGGATGAAGGTTTTCGGATTGTAAACTTCTTTTATCAAGGACGAAGGACGTGACGGTACTTGATGAATAAGCCACGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_55 R_U00211687 TGGGGAATATTGGGCAATGGGGGAAACCCTGACCCAGCAACGCCGCGTGAAGGAAGAAGGCTTTCGGGTTGTAAACTTCTTTTACCAGGGGACGAAGGACGTGACGGTACCTGGAGAAAAAGCAACGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_56 R_U01206474 TGGGGAATATTGGGCAATGGGGGAAACCCTGACCCAGCAACGCCGCGTGAAGGAAGAAGGCTTTCGGGTTGTAAACTTCTTTACCTAGGGACGAAGGACGTGACGGTACCTGGAGAAAAAGACAACGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_57 R_U01219720 TGGGGAATATTGGGCAATGGGGGAAACCCTGACCCAGCAACGCCGCGTGAAGGAAGAAGGTTTTCGGGTTGTAAACTTCTTTTACCAGGGACGAAGGACGTGACGGTACCTGGAGAAAAAGCAACGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_58 R_U01210669 GACCCAGCAACGCCGCGTGAAGGAAGAAGGTCGTTTCGGGTTAGTAAACTTCTTTTACCGAGGGACGAAGGACGTGACGGTACCTGGAGAAAAAGCAACGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_59 R_U00001394 TGGGGAATATTGGGCAATGGGGGAAACCCTGACCCAGCAACGCCGCGTGAAGGAAGAAGGCTTTCGGGTTGTAAACTTCTTTTACCAGGGACGAAGGACGTGACGGTACCTGGAGAAAAAGCAACGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_60 R_U00460521 TGGGGAATATTGGGCAATGGGGGAAACCCTGACCCAGCAACGCCGCGTGAAGGAAGAAGGCTTTCGGGTTGTAAACTTCTTTTACCTAGGGACGAAGGACGTGACGGTACCTGGAGAAAAAGACAACGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_61 R_U00831992 TGGGGAATATTGGGCAATGGGGGAAACCCTGACCCAGCAACGCCGCGTGAAGGAAGAAGGCTTTCGGGTTGTAAACTTCTTTTACCAGGGACGAAGGACGTGACGGTACCTGGAGAAAAGACAACGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_62 R_U01143501 TGGGGAATATTGGGCAATGGGCGCAAGCCTGACCCAGCAACGCCGCGTGAAGGAAGAAGGCTTTCGGGTTGTAAACTTCTTTTCTGGGGGACGAAGAAAGTGACGGTACCCCACGGAATAAGCCACGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_63 R_U00815791 TGGGGAATATTGGGCAATGGGCGCAAGCCTGACCCAGCAACGCCGCGTGAAGGAAGAAGGCTTTCGGGTTGTAAACTTCTTTTCTGGGGGGCGAAGAAAGTGACGGTACCCCAGGAATAAGCCACGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_64 R_U00043629 TGGGGAATATTGGGCAATGGGCGCAAGCCTGACCCAGCAACGCCGCGTGAAGGAAGAAGGCTTTCGGGTTGTAAACTTCTTTTCTGGGGGACGAAGAAAGTGACGGTACCCCAGGAATAAGCCACGGCTAACTACGTGCC

SEQ_ID_NO_65 R_U00164098 TGGGGAATATTGGGCAATGGGCGCAAGCCTGACCCAGCAACGCCGCGTGAAGGAAGAAGGCTTTCGGGTTGTAAACTTCTTTTCTCGGGGACGAACAAATGACGGTACCCGAGGAATAAGCCACGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_66 R_U00000374 TGGGGAATATTGCGCAATGGGGGCAACCCTGACGCAGCAACGCCGCGTGATTGAAGAAGGTCTTCGGATTGTAAAAATCTTTTATCAAGGACGAAGAAGTGACGGTACTTGATGAATAAGCTCCGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_67 R_U00003296 TGGGGAATATTGGGCAATGGGGGGAACCCTGACCCAGCAACGCCGCGTGAGGGAAGAAGGTTTTCGGATCGTAAACCTCTGTCCTTGGTGAAGAGGAGAAGACGGTAGCCAAGGAGGAAGCCCCGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_68 R_U00027329 TGGGGAATATTGGGCAATGGGGGAAACCCTGACCCAGCAACGCCGCGTGAGGGAAGAAGGTTTTCGGATCGTAAACCTCTGTCCTTGGTGAAGAGAAGAAGACGGTAGCCAAGGAGGAAGCCCCGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_69 R_U00003420 TGGGGAATATTGCACAATGGGCGAAAGCCTGATGCAGCAACGCCGCGTGAAGGATGAAGTATTTCGGTATGTAAACTTCTATCAGCAGGGAAGATAACGACGGTACCTGACTAAGAAGCCCCGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_70 R_U00436238 TGGGGAATATTGCACAATGGGCGCAAGCCTGATGCAGCAACGCCGCGTGAACGAAGAAGGTCTTCGGATTGTAAAGTTCTGTCCTTAGGGAAGAAGAAAGTGACGGTACCTAAGGAGGAAGCCCCGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_71 R_U00439751 TGGGGAATATTGCACAATGGGCGAAAGCCTGATGCAGCGACGCCGCGTGAGTGAAGAAGTATTTCGGTATGTAAAGCTCTATCAGCAGGGAAGAAAATGACGGTACCTG SEQ_ID_NO_72 R_U00004741 TGGGGAATATTGCACAATGGGGGAAACCCTGATGCAGCGACGCCGCGTGAAGGAAGAAGTATTTCGGTATGTAAACTTCTATCAGCAGGGAAGAAAATGACGGTACCTGACTAAGAAGCCCCGGCTAATTACGTGCC SEQ_ID_NO_73 R_U01160251 TAGGGAATTTTTCGTCAATGGGCGCAAGCCTGAACGAGCAATGCCGCGTGGGCGAAGAAGGTCTTCGGATCGTAAAACTCTGTTGCGGGGGAAAAAGGAAGGGAAGAGGAAATGCTTTTCTTTTGATGGTACCCCGCCAGAAAGTCACGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_74 R_U01166410 TAGGGAATTTTTCGTCAATGGGCGCAAGCCTGAACGAGCAATGCCGCGTGAGCGAAGAAGGTCTTCGGATCGTAAAACTCTGTTGCGGGGGAAAAAGGAAGGAAAGAGGAAATGCTTTTCTTTTGATGGTACCCCGCCAGAAAGTCACGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_75 R_U01169117 TAGGGAATTTTCGTCAATGGGCGCAAGCCTGAACGAGCAATGCCGCGTGGGCGAAGAAGGTCTTCGGATCGTAAAAACTCTGTTGCGGGGGAAAAAAGGAAGGGAAGAGGAAATGCTTTTCTTTTGATGGTACCCCGCCAGAAAGTCACGGCTAACTACGTGCC

SEQ_ID_NO_76 R_U01180557 TAGGGAATTTTCGTCAATGGGCGCAAGCCTGAACGAGCAATGCCGCGTGGGCGAAGAAGGTCTTCGGATCGTAAAACTCTGTTTGCGGGGGGAAAAAGGAAGGGAAGAGGAAATGCTTTTCTTTTGATGGTACCCCGCCAGAAAGTCACGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_77 R_U00804007 TAGGGAATTTTCGTCAATGGGCGCAAGCCTGAACGAGCAATGCCGCGTGGGCGAAGAAGGTCTTCGGATCGTAAAACTCTGTTGCGGGGGAAAAAGGAAGGGAAGAGGAAATGCTTTTCTTTTGATGGTACCCCGCCAGAAAGTCACGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_78 R_U01143008 TAGGGAATTTTCGTCAATGGGCGCAAGCCTGAACGAGCAATGCCGCGTGAGCGAAGAAGGTCTTCGGATCGTAAAACTCTGTTGCGGGGAAAAGGAAGGGAAGAGGAAATGCTTTTCTTTTGTATGGTACCCCGCCAGAAAGTCACGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_79 R_U01145549 TAGGGAATTTTCGTCAATGGGCGCAAGCCTGAACGAGCAATGCCGCGTGGGCGAAGAAGGTCTTCGGATCGTAAAACTCTGTTGCGGGGGAAAAGGAAGGGAAGAGGAAATGCTTTTCTTTTGTATGGTACCCCGCCAGAAAGTCACGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_80 R_U00808391 TAGGGAATTTTCGTCAATGGGCGCAAGCCTGAACGAGCAATGCCGCGTGGGCGAAGAAGGTCTTCGGATCGTAAAACTCTGTTGCGGGGGAAAAGGAAGGGAAGAGGAAATGCTTTTCTTTTGATGGTACCCCGCCAGAAAGTCACGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_81 R_U01144224 GGTAATTTTCGTCAATGGGCGCAAGCCTGAACGAGCAATGCCGCGTGGGCGAAGAAGGTCTTCGGATACGTAAACTCTGTTGCGGGGGAAAAAGGAAGGGAAGAGGAAATGCTTTCTTTTGATGGTACCCCGCCAGAAAGTCACGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_82 R_U01214804 TAGGGAATTTTCGTCAATGGGCGCAAGCCTGAACGAGCAATGCCGCGTGAGCGAAGAAGGTCTTCGGATCGTAAAACTCTGTTGCGGGGGAAAAAGGAAGGGAAGAGGAAATGCTTTTCTTTTGATGGTACCCCGCCCAGAAAGTCACGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_83 R_U01173110 TAGGGAATTTTCGTCAATGGGCGCAAGCCTGAACGAGCAATGCCGCGTGAGCGAAGAAGGTCTTCGGATCGTAAAACTCTGTTGCGGGGGAAAAAAGGAAGGGAAGAGGAAATGCTTTTCTTTTGATGGTACCCCGCCAGAAAGTCACGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_84 R_U00305232 TAGGGAATTTTCGTCAATGGGCGCAAGCCTGAACGAGCAATGCCGCGTGAGCGAAGAAGGTCTTCGGATCGTAAAACTCTGTTGCGGGGGAAAAAGGAAGGGAAGAGGAAATGCTTTTCTTTTGATGGTACCCCGCCAGAAAGTCACGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_85 R_U00043735 TAGGGAATTTTTCGTCAATGGGCGCAAGCCTGAACGAGCAATGCCGCGTGAACGAGGAAGGTCTTCGGATCGTAAAGTTCTGTTGAGAGGGAAAAAGGGTCACCAGAGGAAATGCTGGTGAAGTGATATTACCTTTCGAGGAAGTCACGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_86 R_U00000409 TAGGGAATTTTCGTCAATGGGCGCAAGCCTGAACGAGCAATGCCGCGTGAACGAGGAAGGTCTTCGGATCGTAAAGTTCTGTTGAGAGGGAAAAAGGGTCACCAGAGGAAATGCTGGTGAAGTGATATTACCTTTCGAGGAAGTCACGGCTAACTACGTGCC

SEQ_ID_NO_87 R_U00029718 GGTAATTTTCGTCAATGGGCGCAAGCCTGAACGAGCAATGCCGCGTGAACGAGGAAGGTCTTCGGATCGTAAAGTTCTGTTGAGAGGGAAAAAGGGTCACCAGAGGAAATGCTGGTGAAGTGATATTACCTTTCGAGGAAGTCACGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_88 R_U00007185 TAGGGAATTTTCGTCAATGGGCGCAAGCCTGAACGAGCAATGCCGCGTGAACGAGGAAGGTCTTCGGATCGTAAAGTTCTGTTGAGAGGGAAAAAAGGGTCACCAGAGGAAATGCTGGTGAAGTGATATTACCTTTCGAGGAAGTCACGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_89 R_U00011248 TAGGGAATTTTCGTCAATGGGCGCAAGCCTGAACGAGCAATGCCGCGTGAACGAGGAAGGTCTTCGGATCGTAAAGTTCTGTTGAGAGGGAAAAGGGTCACCAGAGGAAATGCTGGTGAAGTGATATTACCTTTCGAGGAAGTCACGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_90 R_U01156257 TAGGGAATTTTCGTCAAGTGGGCGCAAGCCTGAACGAGCAATGCCGCGTGAACGAGGAAGGTCTTCGGATACGTAAAGTTCTGTTGAGAGGAAAAAGGGTCACCAGAGGAAATGCTGGTGAAGTGATATTACCTTTCGAGGAAGTCACGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_91 R_U00808203 TAGGGAATTTTCGTCAATGGGCGCAAGCCTGAACGAGCAATGCCGCGTGAGCGAAGAAGGTCTTCGGATCGTAAAACTCTGTTGCGGGGGAAAAGGAAGGGAAGAGGAAATGCTTTTCTTTTGATGGTACCCCGCCAGAAAGTCACGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_92 R_U00003073 TAGGGAATTTTCGGCAATGGGCGAAAGCCTGACCGAGCAACGCCGCGTGAGTGAAGAAGGCCTTCGGGTTGTAAAGCTCTGTTGTGAAGGAAGAACGGCTCATAGAGGGAATGCTATGGGAGTGACGGTACTTTACCAGAAAGCCACGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_93 R_U00000235 TGGGGAATCTTCCGCAATGGACGAAAGTCTGACGGAGCAACGCCGCGTGAGTGATGAAGGATTTCGGTCTGTAAAGCTCTGTTGTTTATGACGAACGTGCAGTGTGTGAACAATGCATTGCAATGACGGTAGTAAACGAGGAAGCCACGGCTAACTACGTGCC

Таблица 2 Последовательности V3-области гена рРНК 16S бактерий, подавленных/уничтоженных берберином Список последовательностей Название OTU Последовательность V3-области гена рРНК 16S SEQ_ID_NO_94 R_U00436195 TGAGGAATATTGGGCAATGGGGGCAACCCTGACCCAGCCATGCCGCGTGAGTGAAGAAGGTTTTCGGATTGTAAAGCTCTTTCGGATGTGACGATGATGACGGTAGCATCTAAAGAAGCCCCGGCAAACTTCGTGCC SEQ_ID_NO_95 R_U00101416 GNGGGAAACCCTGAAGCAGCAACGCCGCGTGGAGGATGAAGGTTTCGGATTGTAAACTCCTTTGTTAGAGAAGATAATGACGGTATCTAACGAATAAGCACCGGCTAACTCCGTGCC SEQ_ID_NO_96 R_U00000407 TAGGGAATATTGCTCAATGGGGGAAACCCTGAAGCAGCAACGCCGCGTGGAGGATGAAGGTTTTCGGATTGTAAACTCCTTTTGTTAGAGAAGATAATGACGGTATCTAACGAATAAGCACCGGCTAACTCCGTGCC SEQ_ID_NO_97 R_U00800966 TGAGGAATATTGGTCAATGGGCGGAAGCCTGAACCAGCCAAGTAGCGTGCAGGAAGACGGCCCTACGGGTTGTAAACTGCTTTTATGCGGGGATAAAGTGCAATACGTGTATTGCTTTGCAGGTACCGCATGAATAAGGACCGGCTAATTCCGTGCC SEQ_ID_NO_98 R_U01131982 TGAGGAATATTGGTCAATGGGCGGAAGCCTGAACCAGCCAAGTAGCGTGCAGGATGACGGCCCTACGGGTTGTAAACTGCTTTTTTGCGGGAATAAAGCGGCTCACGTGTGAGCCTTTGCATGTACCGCACGAATAAGGACCGGCTAATTCCGTGCC SEQ_ID_NO_99 R_U00797839 TGAGGAATATTGGTCAATGGGCGAGAGCCTGAACCAGCCAAGTAGCGTGCAGGATGACGGCCCTATGGGTTGTAAACTGCTTTTATACGGGGATAAAGTTGGGGACGTGTCCCCATTTGTAGGTACCGTATGAATAAGGACCGGCTAATTCCGTGCC SEQ_ID_NO_100 R_U00003981 TGAGGAATATTGGTCAATGGTCGTGAGACTGAACCAGCCAAGTAGCGTGCGGGATGAAGGCCCTCCGGGTCGTAAACCGCTTTTAGACGGGGATAAAAGGGCATACGTGTATGCCGTATTGCATGTACCGTCAGAAAAAGGACCGGCTAATTCCGTGCC

SEQ_ID_NO_101 R_U00001404 TGAGGAATATTGGTCAATGGGCGAGAGCCTGAACCAGCCAAGTAGCGTGAAGGAAGACTGCCCTATGGGTTGTAAACTTCTTTTATAAGGGAATAAAGAGCGCCACGTGTGGTGTGTTGTATGTACCTTATGAATAAGCATCGGCTAATTCCGTGCC SEQ_ID_NO_102 R_U00000052 TGAGGAATATTGGTCAATGGGCGTGAGCCTGAACCAGCCAAGCCGCGTGAGGGAAGAAGGCGCCAGGCGTCGTAAACCTCTTTTGCCGGGGAACAAAGGGCGCCACGTGTGGCGTTGTGAGTGTACCCGGAGAAAAAGCATCGGCTAACTCCGTGCC SEQ_ID_NO_103 R_U00000964 TGAGGAATATTGGTCAATGGGCGTGAGCCTGAACCAGCCAAGCCGCGTGAGGGAGGAAGGCGCCAGGCGTCGTAAACCTCTTTTGCCGGGGAACAAAGGGCGCCACGTGTGGCGTTGTGAGTGTACCCGGAGAAAAAGCATCGGCTAACTCCGTGCC SEQ_ID_NO_104 R_U00040690 TGAGGAATATTGGTCAATGGGCGTGAGCCTGAACCAGCCAAGCCGCGTGAGGGAGGAAGGCGCCAGGCGTCGTAAACCTCTTTTGCCGGGGAACAAAGGGCGCCACGTGTGGCGTTGTGAGTGTACCCGGAGAAAAGCATCGGCTAACTCCGTGCC SEQ_ID_NO_105 R_U00823991 TGAGGAATATTGGTCAATGGGCGTGAGCCTGAACCAGCCAAGCCGCGTGAGGGAGGAAGGCGCCAGGCGTCGTAAACCTCTTTTGCCGGGGAACAAAGGGCGCCACGTGTGGCGTTGTGAGTGTACCCGGAGAAAAAAGCATCGGCTAACTCCGTGCC SEQ_ID_NO_106 R_U00000804 TGAGGAATATTGGTCAATGGGCGGGAGCCTGAACCAGCCAAGCCGCGTGAGGGAATAAGGCGCCAAGCGTCGTAAACCTCTTTTGTCAGGGAACAAAAGCGGGCACGCGTGCCCGTCCGAGTGTACCTGAAGAAAAAGCATCGGCTAACTCCGTGCC SEQ_ID_NO_107 R_U01155915 TGAGGAATATTGGTCAATGGGCGAGAGCCTGAACCAGCCAAGCCGCGTGAAGGAAGAAGGTGCTAAGCATTGTAAACTTCTTTTGTCAGGGAACAAAGAGCGCGACGAGTCGCGCCGTGAGTGTACCTGAAGAAAAAGACATCGGCTAACTCCGTGCC SEQ_ID_NO_108 R_U00459850 TGAGGAATATTGGTCAATGGGCGAGAGCCTGAACCAGCCAAGCCGCGTGAAGGAAGAAGGTGCTAAGCATTGTAAACTTCTTTTGTCAGGGAACAAAGAGCGCGACGAGTCGCGCCGTGAGTGTACCTGAAGAAAAAGCATCGGCTAACTCCGTGCC

SEQ_ID_NO_109 R_U00798098 TGAGGAATATTGGTCAATGGGCGAGAGCCTGAACCAGCCAAGCCGCGTGAAGGAAGAAGGTGCTAAGCATTGTAAACTTCTTTTGTCAGGGAACAAAGAGCGCGACGAGTCGCGCCGTGAGTGTACCTGAAGAAAAGCATCGGCTAACTCCGTGCC SEQ_ID_NO_110 R_U00009170 TGAGGAATATTGGTCAATGGTCGGAAGACTGAACCAGCCAAGCCGCGTGAAGGAAGAAGGTGCTCGGCATCGTAAACTTCTTTTGTCAGGGAACAAAGGGCGGTACGTGTACCGCTGTGAGTGTACCTGAAGAAAAAGCATCGGCTAACTCCGTGCC SEQ_ID_NO_111 R_U01102153 TGAGGAATATTGGTCAATGGTCGGAAGACTGAACCAGCCAAGCCGCGTGAAGGAAGAAGGTGCTCGGCATCGTAAACTTCTTTTGTCAGGGAACAAAGGGCGGTACGTGTACCGCTGTGAGTGTACCTGAAGAAAAAAGCATCGGCTAACTCCGTGCC SEQ_ID_NO_112 R_U00006230 TGAGGAATATTGGTCAATGGGCGTGAGCCTGAACCAGCCAAGCCGCGTGAAGGAAGAAGGTGCAGGGCATCGTAAACTTCTTTTGCCGGGGAACAATAAGCGGGACTAGTCCCGCGACGAGTGTACCCGGAGAAAAAGCATCGGCTAACTCCGTGCC SEQ_ID_NO_113 R_U00465344 TGAGGAATATTGGTCAATGGGCGTGAGCCTGAACCAGCCAAGCCGCGTGAAGGAAGAAGGTGCAGGGCATCGTAAACTTCTTTTGCCGGGGAACAATAAGCGGGACTAGTCCCGCGACGAGTGTACCCGGAGAAAAGACATCGGCTAACTCCGTGCC SEQ_ID_NO_114 R_U00001202 TGAGGAATATTGGTCAATGGTCGGGAGACTGAACCAGCCAAGCCGCGTGAGGGATGGAGGTACAGAGTATCGTAAACCTCTTTTGTCAGGGAACAAAGGGCGCCACGTGTGGCGCTATGAGGGTACCTGAAGAAAAAGCATCGGCTAACTCCGTGCC SEQ_ID_NO_115 R_U00001384 TGAGGAATATTGGTCAATGGGAGAGATCCTGAACCAGCCAAGCCGCGTGAGGGAAGACGGCACTACGTGTTGTAAACCTCTTTTGCCGGGGAACAAAAGCGGGGACGCGTCCCCGTCCGCGTGTACCCGGAGAAAAAGCATCGGCTAACTCCGTGCC SEQ_ID_NO_116 R_U00802799 TGAGGAATATTGGTCAATGGGCGGGAGCCTGAACCAGCCAAGTCGCGTGAGGGAAGACGGCCCTACGGGTTGTAAACCTCTTTTGTCGGGGAGCAAAGAGCGCCACGCGTGGCGAGATGAGAGTACCCGAAGAAAAAGCATCGGCTAACTCCGTGCC

SEQ_ID_NO_117 R_U00808453 TGAGGAATATTGGTCAATGGGCGGGAGCCTGAACCAGCCAAGTCGCGTGAGGGAAGACGGCCCTACGGGTTGTAAACCTCTTTTGTCGGGGAGCAAAGAGCGCCACGCGTGGCGAGATGAGAGTACCCGAAGAAAAAGACATCGGCTAACTCCGTGCC SEQ_ID_NO_118 R_U00026711 TGAGGAATATTGGTCAATGGGCGGGAGCCTGAACCAGCCAAGCCGCGTGAAGGAAGACGGCCCTACGGGTTGTAAACTTCTTTTGTTGCAGGACAACACCCCGGACGCGTCCGGGCATGAGTGTATGCAAAGAAAAAGCATCGGCTAACTCCGTGCC SEQ_ID_NO_119 R_U00000650 TGAGGAATATTGGTCAATGGGCGGGAGCCTGAACCAGCCAAGCCGCGTGAGGGAATAAGGCCCTACGGGTCGTAAACCTCTTTTGTCGGGGAACAAAACCGGAGACGAGTCTCCGGCTGCGTGTACCCGAAGAAAAAGCATCGGCTAACTCCGTGCC SEQ_ID_NO_120 R_U00000839 TGAGGAATATTGGTCAATGGGCGGGAGCCTGAACCAGCCAAGCCGCGTGAGGGAAGAAGGCGCTCAGCGTCGTAAACCTCTTTAGCCGGGGAACAAAGAGCTGCTCGGGAAGCAGCGTTGAGCGTACCCGGAGAATAAGCATCGGCTAACTCCGTGCC SEQ_ID_NO_121 R_U01157930 TGAGGAATATTGGTCAATGGGCGGAAGCCTGAACCAGCCAAGTCGCGTGAGGGACGACGGTCCTACGGATTGTAAACCTCTTTTGCCGGGGAGCAATGCGCGGTACGCGTACCGCGACGGAGAGTACCCGGAGAAAAAGCATCGGCTAACTCCGTGCC SEQ_ID_NO_122 R_U00798420 TGAGGAATATTGGTCAATGGGCGAGAGCCTGAACCAGCCAAGTCGCGTGAGGGAAGACGGCCCTACGGGTTGTAAACCTCTTTTGTCGGGGAGCAAAGAGCGCCACGCGTGGCGAGATGAGAGTACCCGAAGAAAAGACATCGGCTAACTCCGTGCC SEQ_ID_NO_123 R_U00001933 TGAGGAATATTGGTCAATGGGCGCGAGCCTGAACCAGCCAAGTCGCGTGAGGGAAGACGGCCCTACGGGTTGTAAACCTCTTTTGTCGGGGAGCAAGGACTGCCACGAGTGGCAGGGCGAGAGTACCCGAAGAAAAAGCATCGGCTAACTCCGTGCC SEQ_ID_NO_124 R_U00001491 TGAGGAATATTGGTCAATGGGCGGGAGCCTGAACCAGCCAAGTCGCGTGAGGGAAGACGGTCTTACGGATTGTAAACCTCTTTTGCCGGGGAGCAAAGGGCGCCACGCGTGGCGTTTCGAGAGTACCCGGAGAAAAAGCATCGGCTAACTCCGTGCC

SEQ_ID_NO_125 R_U00006476 TGAGGAATATTGGTCAATGGCCGAGAGGCTGAACCAGCCAAGTCGCGTGAGGGAAGACGGTCCTATGGATTGTAAACCTCTTTTGTCGGGGAGCAAAAGGCGTCACGTGTGACGCTATGAGAGTACCCGAAGAAAAAGCATCGGCTAACTCCGTGCC SEQ_ID_NO_126 R_U00001502 TGAGGAATATTGGTCAATGGCCGGAAGGCTGAACCAGCCAAGCCGCGTGAGGGAGGAAGGCGCAGAGCGTCGCAGACCTCTTTTGCCGGGGGACAAAAGGCCGGACTCGTCCGGTCCTGAGGGTACCCGGAGAAAAAGCATCGGCTAACTCCGTGCC SEQ_ID_NO_127 R_U00001504 TGAGGAATATTGGTCAATGGGCGCGAGCCTGAACCAGCCAAGTCGCGTGAGGGATGACGGCCCTACGGGTTGTAAACCTCTTTTGTCGGGGAGCAAATTCCGTTACGTGTAACGGAGTCGAGAGTACCCGAAGAAAAAGCATCGGCTAACTCCGTGCC SEQ_ID_NO_128 R_U00000609 TGAGGAATATTGGTCAATGGGCGGAAGCCTGAACCAGCCAAGTCGCGTGAGGGAAGACGGTCCTATGGATTGTAAACCTCTTTTGCAGGGGAGCAAGGCACGGTACGTGTACCGTGAAGGAGAGTACCCTGAGAAAAAGCATCGGCTAACTCCGTGCC SEQ_ID_NO_129 R_U00009261 TGAGGAATATTGGTCAATGGGCGGAAGCCTGAACCAGCCAAGTCGCGTGAGGGAAGACGGTCCTATGGATTGTAAACCTCTTTTGTCGGGGAGCAAAGCCGCTCACGTGTGAGCGGAAGGAGAGTACCCGAAGAAAAAGCATCGGCTAACTCCGTGCC SEQ_ID_NO_130 R_U01136992 TGAGGAATATTGGTCAATGGGCGGAAGCCTGAACCAGCCAAGTCGCGTGAGGGAGGACGGTCCTATGGATTGTAAACCTCTTTTGTCGGGGAGCAAAGCCGCTCACGTGTGAGCGGAAGGAGAGTACCCGAAGAAAAAGCATCGGCTAACTCCGTGCC SEQ_ID_NO_131 R_U00000497 TGAGGAATATTGGTCAATGGCCGAAGGGCTGAACCAGCCAAGTCGCGTGAGGGAAGACGGCCCTACGGGTTGTAAACCTCTTTTGCCGGGGAGCAAAGGCGGTCACTGGTGACCGGATGAGAGTACCCGGAGAAAAAGCATCGGCTAACTCCGTGCC SEQ_ID_NO_132 R_U00000886 TGAGGAATATTGGTCAATGGGCGAGAGCCTGAACCAGCCAAGTCGCGTGAGGGAAGACGGTCCTATGGATTGTAAACCTCTTTTGTCAGGGAGCAAGGAGGGCCACGAGTGGCGCTTCGGAGAGTACCTGAAGAAAAAGCATCGGCTAACTCCGTGCC

SEQ_ID_NO_133 R_U01143292 TGAGGAATATTGGTCAATGGCCGAGAGGCTGAACCAGCCAAGTCGCGTGAGGGAAGACGGCCCTACGGGTTGTAAACCTCTTTTGTCGGGGAGCAAACAGCGCAACGCGCTTGCGCATTGAGAGTACCCGAAGAAAAAGCATCGGCTAACTCCGTGCC SEQ_ID_NO_134 R_U00803188 TGAGGAATATTGGTCAATGGGCGAGAGCCTGAACCAGCCAAGTCGCGTGAGGGAAGACGGCCCTACGGGTTGTAAACCTCTTTTGTCGGGGAGCAAAGAGCGCCACGCGTGGCGAGATGAGAGTACCCGAAGAAAAAGCATCGGCTAACTCCGTGCC SEQ_ID_NO_135 R_U00008782 TGAGGAATATTGGTCAATGGGCGAGAGCCTGAACCAGCCAAGTCGCGTGAGGGAAGACGGCCCTATGGGTTGTAAACCTCTTTTGCCGGGGAGCAAAGAACCGCACGTGTGCGGTCTGGAGAGTACCCGGAGAAAAAGCATCGGCTAACTCCGTGCC SEQ_ID_NO_136 R_U00001406 TGAGGAATATTGGTCAATGGGCGGAAGCCTGAACCAGCCAAGTCGCGTGAGGGAATAAGGCCCTAAGGGTCGTAAACCTCTTTTGCCGGGGAGCAATGGTTCGCTTGCGAGCGGACAGGGAGAGTACCCGGAGAAAAAGCATCGGCTAACTCCGTGCC SEQ_ID_NO_137 R_U00030880 TGAGGAATATTGGTCAATGGCCGTAAGGCTGAACCAGCCAAGTCGCGTGAGGGAAGACGGCCCTACGGGTTGTAAACCTCTTTTGCCGGGGAGCAAAAGGCGCCACGCGTGGCGTTTCGAGAGTACCCGGAGAAAAAGCATCGGCTAACTCCGTGCC SEQ_ID_NO_138 R_U00450938 TGAGGAATATTGGTCAATGGGCGTAAGCCTGAACCAGCCAAGTCGCGTGAGGGAAGACGGCCCTATGGGTTGTAAACCTCTTTTGTCGGGGAGCAAAGCCGCCCACGTGTGGGCGGAAGGAGAGTACCCGAAGAAAAAGCATCGGCTAACTCCGTGCC SEQ_ID_NO_139 R_U00009763 TGAGGAATATTGGTCAATGGGCGTAAGCCTGAACCAGCCAAGTCGCGTGAGGGAAGACGGCCCTATGGGTTGTAAACCTCTTTTGTCGGGGAGCAAAGCCGCCCACGAGTGGGCGGAAGGAGAGTACCCGAAGAAAAAGCATCGGCTAACTCCGTGCC SEQ_ID_NO_140 R_U01155495 TGAGGAATATTGGTCAATGGGCGTAAGCCTGAACCAGCCAAGTCGCGTGAGGGAAGACGGCCCTATGGGTTGTAAACCTCTTTTGTCGGGGAGCAAAGCCGCCCACGAGTGGGCGGAAGGAGAGTACCCGAAGAAAAAGACATCGGCTAACTCCGTGCC

SEQ_ID_NO_141 R_U00798694 TGAGGAATATTGGTCAATGGGCGTAAGCCTGAACCAGCCAAGTCGCGTGAGGGAAGACGGCCCTATGGGTTGTAAACCTCTTTTGTCGGGGAGCAAAGCCGCCCACGAGTGGGCGGAAGGAGAGTACCCGAAGAAAAGACATCGGCTAACTCCGTGCC SEQ_ID_NO_142 R_U00802360 TGAGGAATATTGGTCAATGGGCGGTAGCCTGAACCAGCCAAGTCGCGTGAGGGAAGACGGTCCTATGGATTGTAAACCTCTTTTGCCGGGGAGCAAGGCCATGTACGTGTACGTGGCCTGAGAGTACCCGGAGAAAAAGCATCGGCTAACTCCGTGCC SEQ_ID_NO_143 R_U01162782 TGAGGAATATTGGTCAATGGGCGCGAGCCTGAACCAGCCAAGTCGCGTGAGGGAAGACGGTCCTAAGGATTGTAAACCTCTTTTGTCAGGGAGCAAGGAGCGCCACGTGTGGCGCGGCGAGAGTACCTGAAGAAAAAGACATCGGCTAACTCCGTGCC SEQ_ID_NO_144 R_U00002709 TGAGGAATATTGGTCAATGGGCGCGAGCCTGAACCAGCCAAGTCGCGTGAGGGAAGACGGTCCTAAGGATTGTAAACCTCTTTTGTCAGGGAGCAAGGAGCGCCACGTGTGGCGCGGCGAGAGTACCTGAAGAAAAAGCATCGGCTAACTCCGTGCC SEQ_ID_NO_145 R_U00005232 TGAGGAATATTGGTCAATGGGCGAGAGCCTGAACCAGCCAAGTCGCGTGAGGGAAGACAGTCCTATGGATTGTAAACCTCTTTTGCCGGGGAGCAAAGAGCGGCACGTGTGCCGCGCCGAGAGTACCCGGAGAAAAAGCATCGGCTAACTCCGTGCC SEQ_ID_NO_146 R_U00000305 TGAGGAATATTGGTCAATGGGCGAGAGCCTGAACCAGCCAAGTCGCGTGAGGGAAGACGGTCCTATGGATTGTAAACCTCTTTTGCCGGGGAGCAAAGAGCGGCACGTGTGCCGCGCCGAGAGTACCCGGAGAAAAAGCATCGGCTAACTCCGTGCC SEQ_ID_NO_147 R_U00006821 TGAGGAATATTGGTCAATGGGCGAGAGCCTGAACCAGCCAAGTCGCGTGAGGGAAGACGGTCCTATGGATTGTAAACCTCTTTTGTCGGGGAGCAACGAAGGCACGTGTGCCAGAAGCGAGATTACCCGAAGAAAAAGCATCGGCTAACTCCGTGCC SEQ_ID_NO_148 R_U01199405 TGAGGAATATTGGTCAATGGGCGAGAGCCTGAACCAGCCAAGTCGCGTGAGGGAAGACGGTCCTATGGATTGTAAACCTCTTTTGTCGGGGAGCAACGAAGGCACGTGTGCCAGAAGCGAGATTACCCGAAGAAAAAGACATCGGCTAACTCCGTGCC

SEQ_ID_NO_149 R_U00006150 TGAGGAATATTGGTCAATGGGCGAGAGCCTGAACCAGCCAAGTCGCGTGAGGGAAGACGGTCCTATGGATTGTAAACCTCTTTTGTCGGGGAGCAACGAAGGCACGTGTGCCTGAAGCGAGATTACCCGAAGAAAAAGCATCGGCTAACTCCGTGCC SEQ_ID_NO_150 R_U00000206 TGAGGAATATTGGTCAATGGGCGGGAGCCTGAACCAGCCAAGTCGCGTGAGGGAAGACGGTCCTATGGATTGTAAACCTCTTTTGTCGGGGAGCAAAGAGGCCACGTGTGGTCAAAAGCGAGAGTACCCGAAGAAAAAGCATCGGCTAACTCCGTGCC SEQ_ID_NO_151 R_U01150673 TGAGGAATATTGGTCAATGGGCGGGAGCCTGAACCAGCCAAGTCGCGTGAGGGAAGACGGTCCTATGGATTGTAAACCTCTTTTGTCGGGGAGCAAAGAGGCCACGTGTGGTCAAAAGCGAGAGTACCCGAAGAAAAAGACATCGGCTAACTCCGTGCC SEQ_ID_NO_152 R_U00805811 TGAGGAATATTGGTCAATGGGCGGAAGCCTGAACCAGCCAAGTCGCGTGAGGGAAGACGGTCCTATGGATTGTAAACCTCTTTTGTCGGGGAGCAAGGATCCGCACGAGTGCGGAGGCGAGAGTACCCGAAGAAAAAGCATCGGCTAACTCCGTGCC SEQ_ID_NO_153 R_U01199471 TGAGGAATATTGGTCAATGGGCGGAAGCCTGAACCAGCCAAGTCGCGTGAGGGAAGACGGTCCTATGGATTGTAAACCTCTTTTGTCGGGGAGCAAGGATCCGCACGAGTGCGGAGGCGAGAGTACCCGAAGAAAAAGACATCGGCTAACTCCGTGCC SEQ_ID_NO_154 R_U00000068 TGAGGAATATTGGTCAATGGGCGAGAGCCTGAACCAGCCAAGTCGCGTGAGGGAAGAATGGTCTATGGCCTGTAAACCTCTTTTGTCAGGGAAGAATAAGGATGACGAGTCATTCGATGCCAGTACTTGACGAATAAGCATCGGCTAACTCCGTGCC SEQ_ID_NO_155 R_U00005559 TGAGGAATATTGGTCAATGGACGCAAGTCTGAACCAGCCATGCCGCGTGCAGGAAGACGGCTCTATGAGTTGTAAACTGCTTTTGTACGAGGGTAAACCCGGATACGTGTATCCGGCTGAAAGTATCGTACGAATAAGGATCGGCTAACTCCGTGCC SEQ_ID_NO_156 R_U00801961 CTAAGGATATTCCGCAACGGGCGGAAGCCCGGCGGAGCGACGCCGCGTGGACGAGGAAGGCCGGAAGGTTGCAGAGTCCTTTTGCGGGGGAAGAAGGAGCCGCGGAGGGAATGCCGCGGCGGCGACCGAACCCCGCGAATAAGGGGCGGCTAATTACGTGCC

SEQ_ID_NO_157 R_U00000126 TGGGGAATATTGCACAATGGGCGCAAGCCTGATGCAGCGACGCCGCGTGCGGGATGGAGGCCTTCGGGTTGTAAACCGCTTTTGTTCAAGGGCAAGGCACGGCTTCGGGCCGTGTTGAGTGGATTGTTCGAATAAGCACCGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_158 R_U00164105 TGGGGAATATTGCACAATGGGGGGAACCCTGATGCAGCGACGCCGCGTGGGTGAAGAAGTATTTCGGTATGTAAAGCCCTATCAGCAGGGAAGAAAAAGACGGTACCTGACTAAGAAGCCCCGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_159 R_U00118078 TGGGGAATATTGCACAATGGGGGAAACCCTGATGCAGCGACGCCGCGTGAAGGAAGAAGTATTTCGGTATGTAAACTTCTATCAGCAGGGAAGAAAATGACGGTATCTGACTAAGAAGCCCCGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_160 R_U01148376 TGGGGGATATTGCACAATGGGGGAAACCCTGATGCAGCGACGCCGCGTGGGTGAAGAAGTATTTCGGTATGTAAAGCCCTATCAGCAGGGAAGAAAATGACAGTACCTGAATAAGAAGCCCCGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_161 R_U00444002 TGGGGGATATTGCACAATGGGGGGAACCCTGATGCAGCGACGCCGCGTGGGTGAAGAAGTATTTCGGTATGTAAAGCCCTATCAGCAGGGAAGAAAGAAGACGGTACCTGAGTAAGAAGCCCCGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_162 R_U01130396 TGGGGAGTATTGCACAATGGGGGAAACCCGTGATGCAGCGACGCCGCGTGAGTGAAGAAGTATTTCGGTATGTAAAGCTCTATCAGCAGGGAAGAAAATAGACGGTACCTGACTAAGAAGCCCCGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_163 R_U00011582 TGGGGGATATTGGACAATGGGGGGAACCCTGATCCAGCGACGCCGCGTGAGTGAAGAAGTATTTCGGTATGTAAAGCTCTATCAGCAGGGAAGAAAGAAATGACGGTACCTGACCAAGAAGCCCCGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_164 R_U00439888 TGGGGAATATTGCACAATGGGGGAAACCCTGATGCAGCGACGCCGCGTGAGTGAAGAAGTAATTCGTTACGTAAAGCTCTATCAGCAGGGAAGAAAAAGAAATGACGGTACCTGATTAAGAAGCCCCGGCTAACTACGTGCC

SEQ_ID_NO_165 R_U01163617 TGGGGAATATTGCACAATGGGGGGAACCCTGATGCAGCAATGCCGCGTGAGTGAAGAAGTATTTCGGTATGTAAAGCTCTATCAGCAGGGAAGAAAAAAGACGGTACCTGACTAAGAAGCCCCGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_166 R_U00029306 TGGGGAATATTGCACAATGGGGGAAACCCTGATGCAGCAATGCCGCGTGAGTGAAGAAGTATTTCGGTATGTAAAGCTCTATCAGCAGGGAAGAAAAAAGACGGTACCTGACTAAGAAGCCCCGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_167 R_U00797985 TGGGGAATATTGCACAATGGAGGAAACTCTGATGCAGCGACGCCGCGTGAGTGAAGAAGTAATTCGTTACGTAAAGCTCTATCAGCAGGGAAGAAAAAATGACGGTACCTGACTAAGAAGCACCGGCTAAATACGTGCC SEQ_ID_NO_168 R_U01173594 TGGGGAATATTGCACAATGGAGGAAACTCTGATGCAGCGACGCCGCGTGAGTGAAGAAGTAATTCGTTACGTAAAGCTCTATCAGCAGGGAGAAAAAAATGACGGTACCTGACTAAGAAGCACCGGCTAAATACGTGCC SEQ_ID_NO_169 R_U00009282 TGGGGGATATTGCACAATGGGGGAAACCCTGATGCAGCGACGCCGCGTGAGTGAAGAAGTATTTCGGTATGTAAAGCTCTATCAGCAGGGAAGAAGATGACAGTACCTGACTAAGAAGCCCCGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_170 R_U00165288 TGGGGAATATTGCACAATGGGGGGAACCCTGATGCAGCAACGCCGCGTGAGTGAAGAAGTATTTCGGTATGTAAAGCTCTATCAGCAGGGAAGAAAATGACGGTACCTGACTAAGAAGCTCCGGCTAAATACGTGCC SEQ_ID_NO_171 R_U00003481 TGGGGAATATTGCACAATGGGGGAAACCCTGATGCAGCGATGCCGCGTGGAGGAAGAAGGTTTTCGGATTGTAAACTCCTGTCTTAAAGGACGATAATGACGGTACTTTAGGAGGAAGCTCCGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_172 R_U00003548 TGGGGAATATTGCACAATGGGCGCAAGCCTGATGCAGCGACGCCGCGTGAGTGAGGAAGTATTTCGGTATGTAAAGCTCTATCAGCAGGGAAGAAGAATGACGGTACCTGACTAAGAAGCACCGGCTAAATACGTGCC

SEQ_ID_NO_173 R_U00798472 TGGGGAATATTGCACAATGGAGGGAACTCTGATGCAGCGACGCCGCGTGAGTGAAGAAGTAATTCGTTATGTAAAGCTCTGTCAGCAGGGAAGAAAGTGACGGTACCTGAAAAAGAAGCTCCGGCTAAATACGTGCC SEQ_ID_NO_174 R_U00804005 TGGGGAATATTGCACAATGGGGGAAACCCTGATGCAGCGACGCCGCGTGAGTGAAGAAATATTTCGGTATGTAAAGCTCTATCAGCAGGGAAGAAAATGACGGTACCTGAGTAAGAAGCCCCGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_175 R_U00164814 TGGGGAATATTGCACAATGGGGGAAACCCTGATGCAGCGACGCCGCGTGAGTGAAGAAGTAATTCGTTATGTAAAGCTCTATCAGCAAGGAAGAAAAAAGACGGTACTTGACTAAGAAGCCCCGGCTAAATACGTGCC SEQ_ID_NO_176 R_U00507409 TGGGGGATATTGCACAATGGGGGAAACCCTGATGCAGCGACGCCGCGTGGGTGAAGAAGTATTTCGGTATGTAAAGCCCTATCAGCAGGGAAGAAGATGACAGTACCTGACTAAGAAGCCCCGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_177 R_U00009952 TGGGGGATATTGCACAATGGGGGGAACCCTGATGCAGCGACGCCGCGTGGGTGAAGGAGTACTCCGGTATGTAAAGCCCTATCGGCAGGGAAGAAGATGACGGTACCTGACTAAGAAGCTCCGGCTAAATACGTGCC SEQ_ID_NO_178 R_U00832549 TGGGGGATATTGCACAATGGGGGAAACCCTGATGCAGCGACGCCGCGTGAGTGAAGAAGTATTTCGGTATGTAAAGCTCTATCAGCAGGGAAGAAAGTGACAGTACCTGAGTAAGAAGCCCCGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_179 R_U00013476 TGGGGGATATTGGACAATGGGGGGAACCCTGATCCAGCGACGCCGCGTGAGTGAAGAAGTATCTCGGTATGTAAAGCTCTATCAGCAGGGAAGAAAGAAATGACGGTACCTGAGTAAGAAGCCCCGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_180 R_U00000012 TGGGGGATATTGGACAATGGGGGGAACCCTGATCCAGCGACGCCGCGTGAGTGAAGAAGTATCTCGGTATGTAAAGCTCTGTCAGCAGGGAAGAAAGAAATGACGGTACCTGACCAAGAAGCCCCGGCTAACTACGTGCC

SEQ_ID_NO_181 R_U00808065 TGGGGGATATTGGACAATGGGGGGAACCCTGATCCAGCGACGCCGCGTGAGTGAAGAAGTATTTCGGTATGTAAAGCTCTGTCAGCAGGGAAGAAAGAAATGACGGTACCTGAAGAAGAAGCCCCGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_182 R_U00816625 TGGGGGATATTGCACAATGGGGGGAACCCTGATGCAGCGACGCCGCGTGGGTGAAGGAGTGCTTCGGCATGTAAAGCCCTATCGGCAGGGAAGAAGAAGGACGGTACCTGACTAAGAAGCCCCGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_183 R_U00164605 TGGGGGATATTGCACAATGGGGGGAACCCTGATGCAGCGACGCCGCGTGGGTGAAGAAGCGCCCCGGCGCGTAAAGCCCTATCGGCAGGGAAGAAGATGACGGTACCTGGCTAAGAAGCCCCGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_184 R_U00232096 GGGGATATTGCACAATGGGGGAACCCGTGATGCAGCGACGCCGCGTGGGTGAAGAAGCGCCCCGGCGCGTAAAGCCCTATCGGCAGGGAAGAAGATGACGGTACCTGGCTAAGAAGCCCCGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_185 R_U00031502 TGGGGAATATTGCACAATGGGGGGAACCCTGATGCAGCGACGCCGCGTGAGTGAAGAAGTATTTCGGTATGTAAAGCTCTATCAGCAGGAACGAAGAAGACGGTACCTGACTAAGAAGCCCCGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_186 R_U01130683 TGGGGAATATTGCACAATGGGGGAAACCCTGATGCAGCGACGCCGCGTGAGTGAAGAAGTAATTCGTTACGTAAAGCTCTATCAGCAGGAAAGAAAGAAGACGGTACCTGACTAAGAAGCCCCGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_187 R_U01139355 TGGGGGATATTGCACAATGGGGGAAACCCTGATGCAGCGACGCCGCGTGAGCGAAGAAGTATTTCGGTATGTAAAGCTCTATCAGCGGGGAAGAGAATGACGGTACCCGACTAAGAAGCTCCGGCTAAATACGTGCC SEQ_ID_NO_188 R_U00851599 TGGGGGATATTGCACAATGGGGGAAACCCTGATGCAGCGACGCCGCGTGAGTGAAGAAGTATTTCGGTATGTAAAGCTCTATCAGCAGGGAAGAAGATGACAGTACCTGAATAAGAAGCCCCGGCTAACTACGTGCC

SEQ_ID_NO_189 R_U00010047 TGGGGAATATTGCACAATGGGGGAAACCCTGATGCAGCGACGCCGCGTGAGCGAGGAAGTATTTCGGTATGTAAAGCTCTATCAGCAGGGAAGAAAATGACGGTACCTGACTAAGAAGCCCCGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_190 R_U00164135 TGGGGAATATTGGGCAATGGGCGCAAGCCTGACCCAGCAACGCCGCGTGAGCGATGAAGGTCTTCGGATTGTAAAGCTCTGTCGCAGGGGACGAAGTATGACGGTACCCTGTAAGAAAGCCCCGGCAAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_191 R_U00034050 TGGGGAATATTGCACAATGGGGGAAACCCTGATGCAGCGACGCCGCGTGAGCGAAGAAGTATCTCGGTATGTAAAGCTCTATCAGCAGGGAAGAAGAATGACGGTACCTGAGTAAGAAGCACCGGCTAAATACGTGCC SEQ_ID_NO_192 R_U01139670 TGGGGGATATTGCACAATGGGGGAAACCCTGATGCAGCGACGCCGCGTGAGCGAAGAAGTATTTCGGTATGTAAAGCTCTATCAGCAGGGAAGAAAATGACGGTACCTGAACAAGAAGCTCCGGCTAAATACGTGCC SEQ_ID_NO_193 R_U00033670 TGGGGAATATTGCACAATGGGGGGAACCCTGATGCAGCAACGCCGCGTGAGTGAAGAAGTATTTCGGTATGTAAAGCTCTATCAGCAGGGAAGAAAATGACGGTACCTGACTAAGAAGCACCGGCTAAATACGTGCC SEQ_ID_NO_194 R_U00033693 TGGGGGATATTGCACAATGGGGGGAACCCTGATGCAGCGACGCCGCGTGAGTGAAGGAGTACTTCGGTATGTAAAGCTCTATCAGCAGGGAAGAAGCAAGACGGTACCTGACCAAGAAGCCCCGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_195 R_U00002583 TGGGGAATATTGCACAATGGGGGGAACCCTGATGCAGCGACGCCGCGTGAGCGAAGAAGTATTTCGGTATGTAAAGCTCTATCAGCAGGGAAGAAAATGACGGTACCTGACTAAGAAGCCCCGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_196 R_U00044129 TGGGGAATATTGGGCAATGGAGGCAACTCTGACCCAGCAACGCCGCGTGAGCGATGAAGGTCTTCGGATTGTAAAGCTCTTTAAGTGGGGACGAAGAAAGTGACTGTACCCACAGAATAAGCCTCGGCTAACTACGTGCC

SEQ_ID_NO_197 R_U00042653 TGGGGAATATTGGGCAATGGAGGAAACTCTGACCCAGCAACGCCGCGTGAATGATGAAGGTCTTCGGATTGTAAAGTTCTTTTCTAAGGGAAGAAGAAAGTGACGGTACCTTAGGAATAAGCCTCGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_198 R_U00855328 TGGGGAATATTGCACAATGGGGGGAACCCTGATGCAGCAATGCCGCGTGGGTGAAGAAGTACCCCGGTATGTAAAGCCCTATCAGCAGGGAAGAAAATGACGGTACCTGGCTAAGAAGCCCCGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_199 R_U00164196 TGGGGAATATTGCACAATGGGGGAAACCCTGATGCAGCGACGCCGCGTGAGCGAAGAAGTATTTCGGTATGTAAAGCTCTATCAGCAAGGAAGATAATGACGGTACTTGACTAAGAAGCTCCGGCTAAATACGTGCC SEQ_ID_NO_200 R_U00164256 TGGGGAATATTGCACAATGGGCGAAAGCCTGATGCAGCAACGCCGCGTGAAGGAAGAAGGGTTTCGGCTCGTAAACTTCTATCAACAGGGACGAAGGAAGTGACGGTACCTGAATAAGAAGCCCCGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_201 R_U00003079 TGGGGAATATTGCACAATGGGGGAAACCCTGATGCAGCAACGCCGCGTGAGTGAAGAAGTATTTCGGTATGTAAAGCTCTATCAGCAGGGAAGAAAATGACGGTACCTGACTAAGAAGCTCCGGCTAAATACGTGCC SEQ_ID_NO_202 R_U00002404 TGGGGAATATTGCACAATGGGGGAAACCCTGATGCAGCGACGCCGCGTGGAGGAAGAAGGCCCTCGGGTTGTAAACTCCTGTCTTTGGGGACGATAATGACGGTACCCAAGGAGGAAGCCACGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_203 R_U00804375 TGGGGAATATTGCACAATGGGGGAAACCCTGATGCAGCGACGCCGCGTGGAGGAAGAAGGCCCTCGGGTTGTAAACTCCTGTCTTCGGGGACGATAATGACGGTACCCGAGGAGGAAGCCACGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_204 R_U00443872 TGGGGGATATTGCACAATGGGGGGAACCCTGATGCAGCGACGCCGCGTGAGCGAAGAAGATCTTCGGATTGTAAAGCTCTGTCTTAGGGGACGATGATGACGGTACCCTGAGAGGAAGCCACGGCTAACTACGTGCC

SEQ_ID_NO_205 R_U00000128 TGGGGGATATTGCGCAATGGGGGCAACCCTGACGCAGCAACGCCGCGTGAAGGATGAAGGTTTTCGGATTGTAAACTTCTTTTCTTAAGGACGAAATTTGACGGTACTTAAGGAATAAGCTCCGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_206 R_U00002777 TGGGGAATATTGGGCAATGGGCGCAAGCCTGACCCAGCAACGCCGCGTGAAGGAAGAAGGCTTTCGGGTTGTAAACTTCTTTTAAGAGGGACGAAGGAAGTGACGGTACCTCTTGAATAAGCCACGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_207 R_U00001166 TGAGGGATATTGGTCAATGGGGGAAACCCTGAACCAGCAACGCCGCGTGAGGGAAGACGGTCTTCGGATTGTAAACCTTTGTCCTCTGTGAAGATAATGACGGTAGCAGAGGAGGAAGCTCCGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_208 R_U00002087 TGGGGGATATTGCACAATGGGGGAAACCCTGATGCAGCAACGCCGCGTGAAGGAAGAAGGTCTTCGGATTGTAAACTTTTGTCCTTGGTGAAGATAATGACGGTAGCCAAGGAGGAAGCTCCGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_209 R_U00008098 TGGGGAATATTGGGCAATGGGCGCAAGCCTGACCCAGCAACGCCGCGTGAAGGAAGAAGGCTTTCGGGTTGTAAACTTCTTTTGTCAGGGAAGAGCAGAAGACGGTACCTGACGAATAAGCCACGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_210 R_U00000981 TGGGGGATATTGCACAATGGGGGAAACCCTGATGCAGCGACGCCGCGTGTGGGAAGACGGTCCTCTGGATTGTAAACCACTGTCCCCAGGGACGAAGATGACGGTACCTGGGGAGGAAGCTCCGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_211 R_U00436292 TGGGGAATATTGCACAATGGGGGGAACCCTGATGCAGCGATGCCGCGTGGAGGAAGAAGGTTTTCGGATTGTAAACTCCTGTCGACAGGAAAGAAAAAGGACTGTACCTGTCAAGAAAGCTCCGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_212 R_U00002551 TGGGGAATATTGCACAATGGGGGGAACCCTGATGCAGCGATGCCGCGTGGAGGAAGAAGGTTTTCGGATTGTAAACTCCTGTCTTAAAGGACGATAATGACGGTACTTTAGGAGGAAGCTCCGGCTAACTACGTGCC

SEQ_ID_NO_213 R_U00164297 TGGGGAATATTGCACAATGGAGGAAACTCTGATGCAGCGATGCCGCGTGAGGGAAGAAGGTTTTCGGATTGTAAACCTCTGTCTTAAGGGACGATAATGACGGTACCTTAGGAGGAAGCTCCGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_214 R_U00806937 TGGGGGATATTGCACAATGGAGGGAACTCTGATGCAGCGATGCCGCGTGAGGGAAGAAGGTTTTCGGATTGTAAACCTCTGTGGACAGAGACGATAATGACGGTATCTGTCAAGGAAGCCACGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_215 R_U00002723 TGGGGGATATTGCACAATGGGGGAAACCCTGATGCAGCGATGCCGCGTGAGGGAAGAAGGTTTTCGGATTGTAAACCTCTGTGGAGGGGGACGATAATGACGGTACCCCTTAAGGAAGCCACGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_216 R_U00004878 TGGGGGATATTGGACAATGGGGGAAACCCTTATCCAGCGACGCCGCGTGAGGGAAGAAGGTTTTCGGATTGTAAACCTCTGTCAGCGGGGACGATAATGACGGTACCCGCGGAGGAAGCCACGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_217 R_U01142982 TGGGGAATATTGGGCAATGGGCGAAAGCCTGACCCAGCGACGCCGCGTGAAGGAAGACGGTCTTCGGATTGTAAACTTTAGTACTCAGGGACGAAGAAATGACGGTACCTGAGGTTAAGCCACGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_218 R_U00806884 TGGGGGATATTGCGCAATGGGGGAAACCCTGACGCAGCAACGCCGCGTGAAGGAAGAAGGTTTTCGGATTGTAAACTTCTTTTATTAAGGACGAAAGATGACGGTACTTAATGAATAAGCTCCGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_219 R_U00810531 TGGGGAATATTGGGCAATGGACGCAAGTCTGACCCAGCAACGCCGCGTGAAGGAAGAAGGCTTTCGGGTTGTAAACTTCTTTTGTCAGGGAAGAGAAGAAGACGGTACCTGACGAACAAGCCACGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_220 R_U00000149 TGGGGAATATTGGGCAATGGGCGCAAGCCTGACCCAGCAACGCCGCGTGAAGGAAGAAGGCTTTCGGGTTGTAAACTTCTTTTGACAGGGAAGAGCAGAAGACGGTACCTGTCGAATAAGCCACGGCTAACTACGTGCC

SEQ_ID_NO_221 R_U00004501 TGGGGGATATTGCGCAATGGGGGCAACCCTGACGCAGCAACGCCGCGTGAAGGATGAAGGTTTTCGGATTGTAAACTTCTTTTATTAAGGACGAATTTTGACGGTACTTAATGAATAAGCTCCGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_222 R_U00132882 TGGGGAATATTGGGCAATGGGCGCAAGCCTGACCCAGCAACGCCGCGTGAAGGAAGAAGGCTTTCGGGTTGTAAACTTCTTTTAAGAGGGAAGAGCAGAAGACGGTACCTCTTGAATAAGCTCCGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_223 R_U00800387 TGGGGAATATTGGGCAATGGGGGAAACCCTGACCCAGCAACGCCGCGTGAGGGAAGAAGGCTTTCGGGTTGTAAACCTCTTTTACCAGGGACGAAGGACGTGACGGTACCTGGAGAAAAAGCAACGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_224 R_U00000908 TGGGGAATATTGGGCAATGGGGGAAACCCTGACCCAGCAACGCCGCGTGAAGGAAGAAGGCCTTCGGGTTGTAAACTTCTTTTACCAGGGACGAAGGACGTGACGGTACCTGGAGAAAAAGCAACGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_225 R_U00204386 TGGGGAATATTGGGCAATGGGCGAAAGCCTGACCCAGCAACGCCGCGTGAAGGAAGAAGGCCTTCGGGTTGTAAACTTCTTTTAAGAGGGACGAAGAAAGTGACGGTACCTCTTGAATAAGCCACGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_226 R_U00799453 TGGGGAATATTGGGCAATGGGCGCAAGCCTGACCCAGCAACGCCGCGTGAAGGAAGAAGGCTTTCGGGTTGTAAACTTCTTTTGAGAGGGACGAAACAAATGACGGTACCTCTTGAATAAGCCACGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_227 R_U00806071 TGGGGAATATTGGGCAATGGGCGGAAGCCTGACCCAGCAACGCCGCGTGAAGGAAGAAGGCTTTCGGGTTGTAAACTTCTTTTCTTGGGGACGAAGAAAGTGACGGTACCCAAGGAATAAGCCACGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_228 R_U01132907 TGGGGAATATTGGGCAATGGGCGCAAGCCTGACCCAGCAACGCCGCGTGAAGGAAGAAGGCTTTCGGGTTGTAAACTTCTTTTGAGGGGGACGAAGGATGTGACGGTACCCCTTGAATAAGCCACGGCTAACTACGTGCC

SEQ_ID_NO_229 R_U00463337 TGGGGAATATTGGGCAATGGGCGCAAGCCTGACCCAGCAACGCCGCGTGAAGGAAGAAGGCTTTCGGGTTGTAAACTTCTTTTCTTGGGGACGAAGAAAGTGACGGTACCCGAGGAATAAGCCACGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_230 R_U00812994 TGGGGAATATTGCACAATGGGGGAAACCCTGATGCAGCGACGCCGCGTGGGTGAAGAAGTATTTCGGTATGTAAAGCCCTATCAGCAGGGAAGATCATGACGGTACCTGACTAAGAAGCCCCGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_231 R_U00010018 TGGGGAATATTGGGCAATGGGCGCAAGCCTGACCCAGCAACGCCGCGTGAAGGAAGAAGGCTTTCGGGTTGTAAACTTCTTTTCTGAGGGACGAAGCAAGTGACGGTACCTTAGGAATAAGCCACGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_232 R_U00164720 TGGGGAATATTGGGCAATGGGCGCAAGCCTGACCCAGCAACGCCGCGTGAAGGAAGAAGGCTTTCGGGTTGTAAACTTCTTTTGACAGGGAAGAGGAGAAGACGGTACCTGTCGAATAAGCTCCGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_233 R_U00004418 TGGGGAATATTGGGCAATGGGCGCAAGCCTGACCCAGCAACGCCGCGTGAAGGAAGAAGGCCCTCGGGTTGTAAACTTCTTTTATCAGGGACGAAGAAGTGACGGTACCTGATGAATAAGCCACGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_234 R_U00208153 TGGGGAATATTGCGCAATGGGGGAAACCCTGACGCAGCAACGCCGCGTGATTGAAGAAGGCCTTCGGGTTGTAAAGATCTTTAATCGGGGACGAATTTTGACGGTACCCGAAGAATAAGCTCCGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_235 R_U00030870 TGGGGAATATTGCGCAATGGGGGAAACCCTGACGCAGCAACGCCGCGTGATTGAAGAAGGCCCTCGGGTTGTAAAGATCTTTAATCGGGGACGAAGAATGACGGTACCCGAAGAATAAGCTCCGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_236 R_U00837797 TGGGGAATATTGCGCAATGGGGGAAACCCTGACGCAGCAACGCCGCGTGAGTGAAGAAGGCCTTCGGGTTGTAAAGCTCTTTAATCAGGGACGAAGAACGACGGTACCTGAAGAATAAGCTCCGGCTAACTACGTGCC

SEQ_ID_NO_237 R_U00449804 TGGGGAATATTGGGCAATGGGCGAAAGCCTGACCCAGCAACGCCGCGTGAAGGAAGAAGGTCTTCGGATTGTAAACTTCTTTTATCAGGGACGAAGGAAGTGACGGTACCTGATGAATAAGCCACGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_238 R_U00436332 TCGGGAATATTGCGCAATGGAGGCAACTCTGACGCAGTGACGCCGCGTATAGGAAGAAGGTTTTCGGATTGTAAACTATTGTCCACAGGGAAGAAAAGGACTGTACCTGTGAAGAAAGCTCCGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_239 R_U00003435 TCGGGAATATTGCGCAATGGAGGAAACTCTGACGCAGTGACGCCGCGTATAGGAAGAAGGTTTTCGGATTGTAAACTATTGTCCACAGGGAAGATAAAAGACTGTACCTGTGAAGAAAGCTCCGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_240 R_U00198673 TCGGGAATATTGCGCAATGGAGGAAACTCTGACGCAGTGACGCCGCGTATAGGAAGAAGGTTTTCGGATTGTAAACTATTGTCGATAGGGAAGAAAAAAGACTGTACCTATCAAGAAAGCTCCGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_241 R_U00002720 TCGGGAATATTGCGCAATGGAGGGAACTCTGACGCAGTGACGCCGCGTATAGGAAGAAGGTTTTCGGATTGTAAACTATTTTAGTCAGGGAAGAAAGCAGACGGTACCTGAAGAATAAGCTCCGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_242 R_U00195707 TCGGGAATATTGCACAATGGAGGAAACTCTGATGCAGTGACGCCGCGTGCAGGAAGAAGGTTTTCGGATTGTAAACTGCTTTAGACAGGGAAGAAAAAAGACAGTACCTGTAGAATAAGCTCCGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_243 R_U00002686 TCGGGAATATTGCGCAATGGAGGAAACTCTGACGCAGTGACGCCGCGTATAGGAAGAAGTTTTTCGGAATGTAAACTATTGTCGTTAGGGAAGAGAAAGGACAGTACCTAAGGAGGAAGCTCCGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_244 R_U00008959 TCGGGAATATTGCGCAATGGAGGGAACTCTGACGCAGTGACGCCGCGTATAGGAAGAAGGTTTTCGGATTGTAAACTATTGTCGTTAGGGAAGAAAAAAGACAGTACCTAAGGAGGAAGCCCCGGCTAACTATGTGCC

SEQ_ID_NO_245 R_U00034351 TCGGGAATATTGCGCAATGGAGGAAACTCTGACGCAGTGACGCCGCGTATAGGAAGAAGGTCTTCGGATTGTAAACTATTGTCGTTAGGGAAGAGAAAGGACAGTACCTAAGGAGGAAGCTCCGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_246 R_U00437009 TCGGGAATATTGCGCAATGGAGGAAACTCTGACGCAGTGACGCCGCGTGCAGGAAGAAGGTTTTCGGATTGTAAACTGCTTTAGACAGGGAAGAAACAAATGACAGTACCTGTAGAATAAGCTCCGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_247 R_U00032486 TCGGGAATATTGCGCAATGGAGGAAACTCTGACGCAGTGACGCCGCGTATAGGAAGAAGGTTTTCGGATTGTAAACTATTGTCGTGAGGGAAGAAATTGACAGTACCTCAGGAGGAAGCTCCGGCTAACTATGTGCC SEQ_ID_NO_248 R_U00000999 TCGGGAATATTGCGCAATGGAGGAAACTCTGACGCAGTGACGCCGCGTATAGGAAGAAGGTTTTCGGATTGTAAACTATTGTCGTTAGGGAAGAGAAAGGACAGTACCTAAGGAGGAAGCTCCGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_249 R_U00002201 TCGGGAATATTGCGCAATGGAGGAAACTCTGACGCAGTGACGCCGCGTGCAGGAAGAAGGTTTTCGGATTGTAAACTGCTTTAGACAGGGAAGAAAGAAATGACGGTACCTGTAGAATAAGCTCCGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_250 R_U00001891 TCGGGAATATTGCGCAATGGAGGAAACTCTGACGCAGTGACGCCGCGTATAGGAAGAAGGTTTTCGGATTGTAAACTATTGTCGTTAGGGAAGATAAAAGACTGTACCTAAGGAGGAAGCCCCGGCTAACTATGTGCC SEQ_ID_NO_251 R_U00803665 TCGGGAATATTGCGCAATGGAGGAAACTCTGACGCAGTGACGCCGCGTATAGGAAGAAGTTTTTCGGAATGTAAACTATTGTCATTAGGGAAGAGAAAGGACGGTACCTAAGGAGGAAGCCCCGGCTAACTATGTGCC SEQ_ID_NO_252 R_U00027111 TCGGGAATATTGCGCAATGGAGGAAACTCTGACGCAGTGACGCCGCGTATAGGAAGAAGGTTTTCGGATTGTAAACTATTGTCGTTAGGGAAGAAAAAAGACAGTACCTAAGGAGGAAGCCCCGGCTAACTATGTGCC

SEQ_ID_NO_253 R_U00454157 TTGGGAATATTGGACAATGGAGGAAACTCTGATCCAGTGACGCCGCGTGAAGGAAGAAGGTCTTCGGATTGTAAACTTATTTTGTCAGGGAAGAATAAATGACTGTACCTGAAGAAAAAGCACCGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_254 R_U00080174 TGGGGAATATTGCGCAATGGGGGAAACCCTGACGCAGCAACGCCGCGTGCAGGAAGAAGGTCTTCGGATTGTAAACTGTTGTCGCAGGGGAAGAAGACAGTGACGGTACCCTGTGAGAAAGTCACGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_255 R_U00803302 TGGGGAATATTGGGCAATGGGCGAAAGCCTGACCCAGCAACGCCGCGTGGAGGAAGAAGGTTTTCGGATCGTAAACTCCTGTCCTAAGAGACGAGGAAGAGACGGTATCTTAGGAGGAAGCCCCGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_256 R_U00032208 TGGGGAATATTGGGCAATGGGCGAAAGCCTGACCCAGCAACGCCGCGTGAGGGAAGAAGGTTTTCGGATTGTAAACCTCTGTCCTAAGTGACGAAGGAAGTGACGGTAGCTTAGGAGGAAGCCCCGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_257 R_U00001116 TGGGGAATATTGGGCAATGGGCGAAAGCCTTACCCAGCAACGCCGCGTGAGGGAAGAAGGTTTTCGGATTGTAAACCTCTGTCCTGGGGGACGAAGGAAGTGACGGTACCCCGGGAGGAAGCCCCGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_258 R_U00807704 TGGGGAATATTGGGCAATGGGGGAAACCCTGACCCAGCAACGCCGCGTGAAGGAAGAAGGTTTTCGGATCGTAAACTTCTATCCTTGGTGAAAATGATGATGGTAGCCAAGAAGGAAGCCCCGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_259 R_U00000272 TGGGGAATATTGGGCAATGGGCGAAAGCCTGACCCAGCAACGCCGCGTGAGGGAAGAAGGGTTTCGGCTCGTAAACCTCTGTCCTATGGGACGAAGGAAGTGACGGTACCATAGGAGGAAGCCCCGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_260 R_U00805277 TGGGGAATATTGCACAATGGGCGAAAGCCTGATGCAGCAACGCCGCGTGAGCGAAGAAGGTCTTCGGATCGTAAAGCTCTGTCCTTGGGGAAGATAATGACGGTACCCAAGGAGGAAGCCCCGGCTAACTACGTGCC

SEQ_ID_NO_261 R_U01136238 TGGGGAATATTGGGCAATGGAGGCAACTCTGACCCAGCAACGCCGCGTGAATGAAGAAGGTCCTAGGATTGTAAAGTTCTTTTATGATAGACGAATAAAATGACGGTATATCATGAATAAGCCACGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_262 R_U00848639 TGGGGAATATTGGGCAATGGAGGCAACTCTGACCCAGCAACGCCGCGTGAATGAAGAAGGCCTTCGGGTTGTAAAGTTCTTTAATGGGGGACGAAGAAAGTGACGGTACCCCAAGAATAAGCCACGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_263 R_U00004249 TGGGGGATATTGCACAATGGGGGAAACCCTGATGCAGCGACGCCGCGTGAGTGAAGAAGTATTTCGGTATGTAAAGCTCTATCAGCAGGGAAGAAAATGACGGTACCTGACTAAGAAGCCCCGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_264 R_U00012096 TTAGGAATATTCGTCAATGGGGGAAACCCTGAACGAGCAATGCCGCGTGAGTGATGACGGTCTTTATGATTGTAAAACTCTGTTGTAAGGAAAGAACCCTTATCATAGGAAATGATGATAAGTTGACGGTACCTTACCAGAAAGCCCCGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_265 R_U01152122 TAGGGAATTTTCGGCAATGGGGGGAACCCTGACCGAGCAACGCCGCGTGAACGAAGAAGTTATTCGTAATGTAAAGTTCTTTTATCAGGGAAGAAAAGAAGGGAATTGACGGTACCTGATGAATAAGCTCCGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_266 R_U01123199 TGGGGAATCTTCCGCAATGGGCGAAAGCCTGACGGAGCGACGCCGCGTGAGTGAAGAAGGTCTTCGGACCGTAAAGCTCTTTTGTTGCAGGCGAAAGGACTTAAGAGGAAATGCTTAAGTTAAGACGGTATGGAACGAATAAGCCACGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_267 R_U00000737 TAGGGAATCTTTCACAATGGGCGAAAGCCTGATGGAGCAACGCCGCGTGCAGGATGAAGGCCTTCGGGTTGTAAACTGCTTTTATAAGCGAGAAATATGATGGTAACTTATGAATAAGGATCGGCTAACTACGTGCC SEQ_ID_NO_268 R_U00822040 TGGGGAATTTTGGACAATGGACGGAAGTCTGATCCAGCAACGCAGCGTGAAGGACGAAGGTTCTCGGATTGTAAACTTCTTTTGCAGGGGAAGAAAAAAATGACGGTACCCTGTGAATAAGCCACGGCTAACTACGTGCC

Приведенное выше подробное описание изобретения содержит ссылку на прилагаемые чертежи, которые составляют часть описания изобретения. На чертежах одинаковые символы обычно обозначают одинаковые компоненты за исключением тех случаев, когда из контекста следует обратное. Иллюстративные варианты осуществления изобретения, представленные в подробном описании изобретения, на чертежах и в формуле изобретения, не ограничивают объем изобретения. Могут быть использованы другие варианты осуществления изобретения и внесены другие изменения, не выходящие за пределы существа или объема изобретения. Следует отметить, что объекты изобретения, рассмотренные в настоящем описании изобретения и иллюстрированные чертежами, могут быть расположены, замены, объединены, разделены и спроектированы в разных конфигурациях, которые полностью входят в объем настоящего изобретения.

Настоящее изобретение не ограничено конкретными вариантами его осуществления, рассмотренными в данной заявке, которые служат только для иллюстрации разных объектов изобретения. В настоящее изобретение могут быть внесены многие модификации и изменения, не выходящие за пределы существа и объема изобретения, как должно быть очевидно специалистам в данной области. Из приведенного выше описания изобретения специалистам в данной области должны быть очевидны функционально эквивалентные способы и устройства, входящие в объем изобретения, помимо рассмотренных в настоящем описании изобретения. Такие модификации и изменения входят в объем прилагаемой формулы изобретения. Настоящее изобретение должно быть ограничено только прилагаемой формулой изобретения наряду с полным объемом эквивалентов, охватываемых данной формулой изобретения. Следует отметить, что настоящее описание изобретения не ограничено конкретными способами, реагентами, соединениями, композициями или биологическими системами, которые, несомненно, могут изменяться. Кроме того, следует отметить, что терминология, приведенная в настоящем описании изобретения, использована только с целью описания конкретных вариантов осуществления изобретения и не ограничивает объем изобретения.

Что касается использования терминов во множественном и/или единственном числе, то специалисты в данной области могут интерпретировать термины во множенном числе как термины в единственном числе и/или термины в единственном числе как термины во множественном числе в зависимости от контекста и/или применения. Разные изменения форм единственного/множественного числа могут быть специально указаны в настоящем описании изобретения для достижения большей ясности изложения.

Как должно быть понятно специалистам в данной области, термины, использованные в настоящем описании изобретения и особенно в прилагаемой формуле изобретения (например, в основной части прилагаемой формулы изобретения), как правило, представлены в виде ”открытых” терминов (например, термин “включающий” следует интерпретировать как ”включающий, но не ограниченный”, термин ”имеющий” следует интерпретировать как ”имеющий по меньшей мере”, термин ”включает” следует интерпретировать как ”включает, но не ограничен” и т.д.). Специалистам в данной области также должно быть понятно, что конкретное число, которое предполагается привести в формуле изобретения, будет включено в формулу изобретения, и отсутствие такого указания означает отсутствие такого намерения. Например, приведенная ниже формула изобретения может содержать вводные фразы ”по меньшей мере один” и “один или несколько” для указания объектов. Однако использование таких фраз не следует рассматривать как ограничение любого конкретного пункта формулы изобретения, содержащего только один объект, даже когда пункт формулы изобретения включает вводные фразы “один или несколько” или “по меньшей мере один” и объект в единственном числе (например, объект в единственном числе следует интерпретировать как ”по меньшей мере один” или “один или несколько”). Кроме того, даже если точно указано численное значение объекта, специалистам в данной области должно быть понятно, что такое указание следует интерпретировать как по меньшей мере данное число (например, фраза ”два объекта” без других определений означает по меньшей мере два объекта либо два или более объектов). Далее в тех случаях, когда использована фраза, аналогичная фразе ”по меньшей мере один из А, В, С и т.д.”, такую конструкцию следует интерпретировать, например, как “систему, имеющую по меньшей мере один из А, В и С”, которая включает, но не ограничивается системами, имеющими только А, только В, только С, вместе А и В, вместе А и С, вместе В и С и/или вместе А, В и С”, и т.д. Специалистам в данной области должно быть также понятно, что фактически любое разделяющее слово и/или фраза, представляющая два или более альтернативных терминов в описании изобретения, формуле изобретения или на чертежах, следует рассматривать как возможность включения одного из терминов, любого из терминов или обоих терминов. Например, фраза ”А или В” означает возможность использования ”А” или “В” либо “А и В”.

Кроме того, когда признаки или объекты изобретения описаны в виде групп Маркуша, специалистам в данной области должно быть понятно, что может быть использован любой отдельный член или подгруппа членов группы Маркуша.

Как должно быть понятно специалисту в данной области, любые диапазоны, указанные в настоящем описании изобретения, включают любые и все возможные поддиапазоны и комбинации указанных поддиапазонов. Любой приведенный диапазон может быть разбит по меньшей мере на равные половины, трети, четверти, пятые части, десятые части и т.д. В качестве неограничивающего примера можно отметить, что каждый диапазон, приведенный в настоящем описании изобретения, может быть легко разбит на три части и т.д. Как должно быть понятно специалисту в данной области, такие фразы как ”до определенного числа”, “по меньшей мере” и тому подобные включают указанное число и относятся к диапазонам, которые могут быть затем разбиты на вышеуказанные поддиапазоны. И наконец, как должно быть понятно специалисту в данной области, в диапазон входят все отдельные числа. Так, например, группа, состоящая из 1-3 элементов, означает группы, включающие 1, 2 или 3 элемента. Аналогичным образом группа, содержащая 1-5 элементов, означает группы, включающие 1, 2, 3, 4 или 5 элементов, и так далее.

Из вышеизложенного следует, что разные варианты осуществления настоящего изобретения описаны в целях иллюстрации, и возможны разные модификации, не выходящие за пределы объема и существа изобретения. Таким образом, разные варианты осуществления изобретения, рассмотренные в настоящем описании изобретения, не ограничивают изобретение, и действительный объем и существо изобретения изложены в нижеследующей формуле изобретения.

Группа изобретений относится к медицине и предназначена для улучшения структуры кишечной микробиоты. Описано применение берберина, позволяющее избирательно увеличивать первую популяцию кишечной микробиоты при одновременном уменьшении второй популяции кишечной микробиоты у субъекта. Первая популяция кишечной микробиоты включает бактерию, продуцирующую короткоцепочечную жирную кислоту (SCFA), и вторая популяция кишечной микробиоты включает бактерию, продуцирующую эндотоксин. Группа изобретений позволяет улучшить структуру кишечной микробиоты. 2 н. и 16 з.п. ф-лы, 6 ил., 1 табл., 1 пр.

1. Применение берберина для увеличения первой популяции кишечной микробиоты с одновременным снижением второй популяции кишечной микробиоты,

где первая популяция кишечной микробиоты включает Allobaculum, Bacteroides, Blautia, Butyricicoccus, Dorea, Holdemania, Lawsonia, Parabacteroides, Phascolarctobacterium и Sedimentibacter и

где вторая популяция кишечной микробиоты включает Anaeroplasma, Bifidobacterium, Butyrivibrio, Coprococcus, Fastidiosipila, Marvinbryantia, Oribacterium, Roseburia, Ruminococcus и TM7_genera_incertae_sedis.

2. Применение по п. l, в котором первая популяция кишечной микробиоты включает бактерию, в которой V3-область последовательности гена рРНК 16S по меньшей мере примерно на 95% подобна последовательности нуклеиновой кислоты, выбираемой из группы, состоящей из SEQ ID NO: 1-93.

3. Применение по п. 1, в котором первая популяция кишечной микробиоты включает бактерию, в которой V3-область последовательности гена рРНК 16S по меньшей мере примерно на 80% подобна последовательности нуклеиновой кислоты, выбираемой из группы, состоящей из SEQ ID NO: 1-93.

4. Применение по п. 1, в котором вторая популяция кишечной микробиоты включает бактерию, в которой V3-область последовательности гена рРНК 16S по меньшей мере примерно на 95% подобна последовательности нуклеиновой кислоты, выбираемой из группы, состоящей из SEQ ID NO: 94-268.

5. Применение по п. 1, в котором вторая популяция кишечной микробиоты включает бактерию, в которой V3-область последовательности гена рРНК 16S по меньшей мере примерно на 80% подобна последовательности нуклеиновой кислоты, выбираемой из группы, состоящей из SEQ ID NO: 94-268.

6. Применение по п. 1, в котором берберин является препаратом для перорального введения или препаратом для парентерального введения.

7. Применение по п. 1, в котором берберин имеет форму суппозитория, таблетки, пилюли, гранулы, порошка, пленки, микрокапсулы, аэрозоля, спиртового раствора, настойки, тонизирующего средства, жидкой суспензии или сиропа.

8. Применение по п. 1, в котором берберин снижает уровень первого цитокина в сыворотке и повышает уровень второго цитокина в сыворотке, при этом первый цитокин включает белок, связывающий липополисахарид, протеин-1, являющийся хемоаттрактантом моноцитов, лептин или их комбинацию, и второй цитокин является адипонектином.

9. Применение по п. 1, в котором берберин повышает уровень короткоцепочечных жирных кислот в фекалиях.

10. Применение берберина для скрининга испытуемого соединения, которое активно увеличивает первую популяцию кишечной микробиоты с одновременным снижением второй популяции кишечной микробиоты, которое включает:

введение контрольному субъекту эффективного количества берберина для увеличения первой популяции кишечной микробиоты при одновременном уменьшении второй популяции кишечной микробиоты у контрольного субъекта,

где первая популяция кишечной микробиоты включает Allobaculum, Bacteroides, Blautia, Butyricicoccus, Dorea, Holdemania, Lawsonia, Parabacteroides, Phascolarctobacterium, Sedimentibacter и

где вторая популяция кишечной микробиоты включает Anaeroplasma, Bifidobacterium, Butyrivibrio, Coprococcus, Fastidiosipila, Marvinbryantia, Oribacterium, Roseburia, Ruminococcus, TM7_genera_incertae_sedis; и

сравнение популяции кишечной микробиоты контрольного субъекта с популяцией кишечной микробиоты испытуемого субъекта, при этом сходство, равное по меньшей мере примерно 80%, свидетельствует о том, что испытуемое соединение активно улучшает популяцию кишечной микробиоты.

11. Применение по п. 10, в котором сходство, равное по меньшей мере примерно 95%, свидетельствует о том, что испытуемое соединение активно улучшает популяцию кишечной микробиоты.

12. Применение по п. 10, в котором сходство, равное по меньшей мере примерно 75%, свидетельствует о том, что испытуемое соединение активно улучшает популяцию кишечной микробиоты.

13. Применение по п. 10, в котором первая популяция кишечной микробиоты включает бактерию, в которой V3-область последовательности гена рРНК 16S по меньшей мере примерно на 95% подобна последовательности нуклеиновой кислоты, выбираемой из группы, состоящей из SEQ ID NO: 1-93.

14. Применение по п. 10, в котором первая популяция кишечной микробиоты включает бактерию, в которой V3-область последовательности гена рРНК 16S по меньшей мере примерно на 80% подобна последовательности нуклеиновой кислоты, выбираемой из группы, состоящей из SEQ ID NO: 1-93.

15. Применение по п. 10, в котором вторая популяция кишечной микробиоты включает бактерию, в которой V3-область последовательности гена рРНК 16S по меньшей мере примерно на 95% подобна последовательности нуклеиновой кислоты, выбираемой из группы, состоящей из SEQ ID NO: 94-268.

16. Применение по п. 10, в котором вторая популяция кишечной микробиоты включает бактерию, в которой V3-область последовательности гена рРНК 16S по меньшей мере примерно на 80% подобна последовательности нуклеиновой кислоты, выбираемой из группы, состоящей из SEQ ID NO: 94-268.

17. Применение по п. 10, в котором берберин снижает уровень первого цитокина в сыворотке и повышает уровень второго цитокина в сыворотке, при этом первый цитокин включает белок, связывающий липополисахарид, протеин-1, являющийся хемоаттрактантом моноцитов, лептин или их комбинацию, и второй цитокин является адипонектином.

18. Применение по п. 10, в котором берберин повышает уровень короткоцепочечных жирных кислот в кишечнике.

название	год	авторы	номер документа
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ МОДЕЛИ ОЖИРЕНИЯ ЖИВОТНОГО	2013	Чжао Липин Фэй На	RU2644204C2
КОМПОЗИЦИИ ДЛЯ БАЛАНСА КИШЕЧНОЙ МИКРОБИОТЫ, ИХ ПОЛУЧЕНИЕ И ПРИМЕНЕНИЕ	2013	Чжао Липин	RU2607351C1
КОМПОЗИЦИИ И СПОСОБЫ УМЕНЬШЕНИЯ ПОПУЛЯЦИИ Bilophila wadsworthia ИЛИ ИНГИБИРОВАНИЯ ЕЕ РОСТА	2017	Соколь, Арри Лянжелла, Филипп Нативида, Джейн Вега, Патрик Ван Хилкама Влиг, Йохан	RU2758969C2
НОВЫЕ ПРИМЕНЕНИЯ И СПОСОБЫ	2017	Фанса-Бертон, Паскаль Элизабет Рене Фалькао, Лейла Дэниз Били, Антуан Шарль Роллер, Марк Биртик, Симона	RU2765804C2
СПОСОБЫ МОДУЛЯЦИИ КИШЕЧНОЙ МИКРОБИОТЫ	2017	Нордкилд Питер Векамп Ян Кьерульф Сёрен	RU2738265C2
СПОСОБ ПРОФИЛАКТИКИ И/ИЛИ ЛЕЧЕНИЯ ИНСУЛИНОРЕЗИСТЕНТНОСТИ	2012	Ниувдорп Макс Де Вос Виллем Мейндерт	RU2613322C2
ТЕРАПЕВТИЧЕСКОЕ ПРИМЕНЕНИЕ Lactobacillus plantarum	2018	Робертсон, Анна-Карин	RU2772025C2
КОМПОЗИЦИИ И СПОСОБЫ	2014	Маккензи Грегори Маккензи Мэри-Джейн Ломбардо Кук Дэвид Вулик Марин Фон Малтзан Джоффри Гудман Брайан Аунинс Джон Дж. Хенн Мэтью Р. Берри Дэвид А. Уинклер Джонатан	RU2664479C2
Способ прогнозирования частоты ОРВИ у детей в возрастной группе 1-6 лет	2023	Курдюкова Татьяна Ивановна Красноруцкая Ольга Николаевна	RU2817268C1
СИНБИОТИЧЕСКИЕ КОМПОЗИЦИИ	2019	Охромбель, Инес Шпекман, Бодо Пельцер, Штефан Шварм, Михаэль Пфефферле, Вальтер	RU2799354C2

КОМПОЗИЦИЯ ПИЩЕВЫХ ВОЛОКОН ДЛЯ ПРОФИЛАКТИКИ ИЛИ ЛЕЧЕНИЯ ЗАБОЛЕВАНИЙ ПИЩЕВАРИТЕЛЬНОЙ СИСТЕМЫ И КОМПОЗИЦИЯ ПИЩЕВЫХ ВОЛОКОН, ЭФФЕКТИВНАЯ ПРИ ЛЕЧЕНИИ ХОЛЕРЫ	2006	Троуп Джон П. Фолк Энн Л.	RU2395218C2
и др., справочное руководство по гастроэнтерологии, МИА-2003, с
Зеркальный стереовизир	1922	Тамбовцев Д.Г.	SU382A1

СПОСОБЫ И КОМПОЗИЦИИ ДЛЯ УЛУЧШЕНИЯ ПОПУЛЯЦИИ КИШЕЧНОЙ МИКРОБИОТЫ И ИХ ОСУЩЕСТВЛЕНИЯ Российский патент 2017 года по МПК A61K36/8964 A61K36/29 A61K31/702 A61P1/14 G01N33/48

Описание патента на изобретение RU2631595C2

Похожие патенты RU2631595C2

Иллюстрации к изобретению RU 2 631 595 C2

Реферат патента 2017 года СПОСОБЫ И КОМПОЗИЦИИ ДЛЯ УЛУЧШЕНИЯ ПОПУЛЯЦИИ КИШЕЧНОЙ МИКРОБИОТЫ И ИХ ОСУЩЕСТВЛЕНИЯ

Формула изобретения RU 2 631 595 C2

Документы, цитированные в отчете о поиске Патент 2017 года RU2631595C2

RU 2 631 595 C2