Способ диагностики вирусной инфекции при эндометрите Российский патент 2018 года по МПК G01N33/53 

Изобретение относится к медицине, в частности к акушерству и гинекологии, патологической анатомии, и может быть использовано врачами-акушерами-гинекологами, патологоанатомами для диагностики этиологического фактора хронического эндометрита и стадии воспалительного процесса.

Известен способ диагностики инфекции в стенке матки путем полимеразной цепной реакции (ПЦР), который основан на определении малых концентраций определенных фрагментов нуклеиновой кислоты (ДНК) в биологическом материале [Базина, М.И. Предгравидарная подготовка женщин при репродуктивных неудачах: дисс.… д-ра мед. наук: 14.01.01. / Базина Марина Ивановна. - Москва, 2016. - 305 с.].

Недостатками этого способа являются невозможность проведения микроскопического исследования и определения локализации антигена вируса в структурах эндометрия, наличия или отсутствия воспалительной реакции; невозможность оценки взаимосвязи интенсивности экспрессии антигена вируса и характера морфологических изменений;

Ближайшим к заявляемому является способ диагностики хронического эндометрита и характера воспаления [Пат. РФ №2003104391].

Недостатком способа, выбранного в качестве прототипа, является отсутствие диагностики этиологического фактора эндометрита, а также оценки стадии воспалительного процесса.

Задачей настоящего изобретения является повышение эффективности диагностики вирусного поражения матки.

Технический результат настоящего изобретения достигается тем, что в способе диагностики вирусной инфекции при эндометрите, основанном на анализе аспиратов из полости матки, которые берутся на 7-10 день менструального цикла, выполняют иммуногистохимическое исследование на определение антигенов вирусов в ткани эндометрия и при локализации антигенов вирусов в строме диагностируют острую вирусную инфекцию, а при локализации антигенов вирусов в клетках желез диагностируют хроническую вирусную инфекцию.

После проникновения вирусной инфекции в организм наступает стадия вирусемии и с током крови через структуры гистогематического барьера (стенка микрососудов) инфекционный агент проникает в орган-мишень. Для данного проникновения необходима достаточно высокая концентрация и патогенность вируса. В эндометрии вирус через стенку микрососудов попадает непосредственно в строму, что обуславливает развитие инфекции. При этом закономерно, что обнаружение антигенов вирусов в строме эндометрия отражает период инфекционного процесса, свидетельствующий об острой вирусной инфекции. Далее, при более длительном течении вирусной инфекции инфекционный агент проникает в железы эндометрия, что свидетельствует о более длительном течении вирусной инфекции и переходе ее в хроническую стадию.

Кроме того, наряду с локализацией антигенов вирусов в одном препарате, оцениваются морфологические признаки воспалительного процесса: лимфоидная инфильтрация ткани эндометрия, отек стромы, очаговый склероз стромы, что позволяет оценить взаимосвязь между наличием вирусной инфекции и характером морфологических изменений в эндометрии.

Таким образом, заявляемые приемы повышают эффективность диагностики воспалительного процесса при эндометрите.

Способ осуществляется следующим образом. На 7-10 день менструального цикла осуществляется аспирационная биопсия из полости матки, полученный материал фиксируют в 10% забуференном формалине. Иммуногистохимическую реакцию в срезах проводят по схеме, рекомендуемой фирмой-производителем. В работе используются мышиные моноклональные антитела к цитомегаловирусу и вирусу Эпштейн-Барр фирмы «Novocastra», поликлональными антителами вируса простого герпеса фирмы «Daco». Продукт реакции проявляется в виде стойкого окрашивания в коричневый цвет. Количественный анализ результатов иммуногистохимических реакций проводят при увеличении объектива микроскопа ×400 в 3 полях зрения. Подсчитывают количество положительно окрашенных клеток в каждом поле зрения. Оценивают локализацию положительно окрашенных клеток (строма, железы). При локализации АГ вирусов в строме диагностируют острую вирусную инфекцию, а при локализации АГ вирусов в клетках желез диагностируют хроническую вирусную инфекцию в эндометрии.

Наряду с локализацией АГ вирусов в одном препарате оцениваются морфологические признаки воспалительного процесса: лимфоидная инфильтрация ткани эндометрия, отек стромы, очаговый склероз стромы, что позволяет оценить взаимосвязь между наличием вирусной инфекции и характером морфологических изменений в эндометрии.

Пример 1. Ист. бол. №154233. Пациентка Б., 32 л. При обследовании в СПБГБУЗ «Женская консультация 22» Санкт-Петербурга 18.11.2016 г. по данным морфологического исследования биоптата эндометрия диагностирован хронический эндометрит. Посев из полости матки - стерилен.

В соответствии с заявляемым способом положительно окрашенные клетки определялись в строме эндометрия, что позволило диагностировать острую вирусную инфекцию в стенке матке. На основании полученных данных было назначено этиотропное лечение. Контроль эффективности лечения был проведен через 3 месяца после проведенной терапии. По данным контрольного иммуногистохимического исследования антигены вируса простого герпеса и цитомегаловируса в эндометрии не были выявлены, что позволило сделать вывод об успешно подобранной терапии.

Пример 2. Ист. бол. №456712. Пациентка Г., 27 л. При обследовании в СПБГБУЗ «Женская консультация 22» Санкт-Петербурга 22.10.2016 г. по данным морфологического исследования биоптата эндометрия диагностирован хронический эндометрит.

В соответствии с заявляемым способом положительно окрашенные клетки определялись в железах эндометрия, что позволило диагностировать хроническую вялотекущую вирусную инфекцию. На основании полученных данных была назначена этиотропная и патогенетически обоснованная терапия. По данным контрольного иммуногистохимического исследования антигены вируса простого герпеса и цитомегаловируса в эндометрии выявлены не были, что позволило сделать вывод об успешно подобранной терапии.

Заявляемый способ позволяет повысить эффективность диагностики эндометрита. Способ является высокочувствительным, достоверным. Он позволяет проводить оценку наличия, локализации антигена вируса и характера морфологических изменений одновременно в одном гистологическом препарате, что несомненно упрощает специфическую диагностику.

Изобретение относится к медицине, в частности к акушерству и гинекологии, патологической анатомии, и может быть использовано врачами-акушерами-гинекологами, патологоанатомами для диагностики этиологического фактора хронического эндометрита и стадии воспалительного процесса. Способ включает анализ аспиратов из полости матки, которые берутся на 7-10 день менструального цикла, выполняется иммуногистохимическое исследование на определение антигенов вирусов в ткани эндометрия и при локализации антигенов вирусов в строме диагностирует острую вирусную инфекцию, а при локализации в клетках желез - хроническую вирусную инфекцию. Способ является высокочувствительным, достоверным, позволяет проводить оценку наличия, локализации антигена вируса и характера морфологических изменений одновременно в одном гистологическом препарате, что несомненно упрощает специфическую диагностику. Использование изобретения позволяет повысить эффективность диагностики эндометрита. 2 пр.

Способ диагностики вирусной инфекции при эндометрите, основанный на анализе аспиратов из полости матки, которые берутся на 7-10 день менструального цикла, отличающийся тем, что выполняют иммуногистохимическое исследование на определение антигенов вирусов в ткани эндометрия и при локализации антигенов вирусов в строме диагностируют острую вирусную инфекцию, а при локализации антигенов вирусов в клетках желез диагностируют хроническую вирусную инфекцию.