МАКРОЦИКЛИЧЕСКИЕ ПРОИЗВОДНЫЕ ПИРИДАЗИНОНА Российский патент 2018 года по МПК C07D471/18 C07D487/08 C07D487/18 C07D487/22 C07D498/18 A61K31/504 A61P35/00 A61P37/00 

Настоящее изобретение относится к макроциклическим производным пиридазинона формулы (I) в качестве ингибиторов IRAK и к их применению в лечении рака и других заболеваний, связанных с повышенной экспрессией IRAK, таких как ревматоидный артрит, системная красная волчанка или волчаночный нефрит.

Предпосылки создания изобретения

Киназы катализируют фосфорилирование белков, липидов, сахаров, нуклеозидов и других клеточных метаболитов и играют главную роль во всех аспектах эукариотической физиологии клеток. В особенности протеинкиназы и липидкиназы участвуют в сигнальных событиях, контролирующих активацию, рост, дифференциацию и выживаемость клеток под влиянием внеклеточных медиаторов или стимулов, таких как факторы роста, цитокины или хемокины. В целом, протеинкиназы подразделены на две группы - те, которые преимущественно фосфорилируют остатки тирозина и те, которые преимущественно фосфорилируют остатки серина и/или треонина.

Киназы являются важными терапевтическими мишенями для разработки противовоспалительных лекарственных препаратов (Cohen, 2009 Current Opinion in Cell Biology 21, 1-8), например, киназы, которые участвуют в управлении адаптивными и врожденными иммунными реакциями. Представляющие особый интерес киназные мишени являются членами семейства IRAK.

Киназы, связанные с рецептором интерлейкина-1 (IRAKs), принимают непосредственное участие в регуляции внутриклеточной сети сигналов, контролирующих воспаление (Ringwood и Li, 2008. Cytokine 42, 1-7). IRAKs экспрессируются во многих типах клеток и могут опосредовать сигналы от различных клеточных рецепторов, включая толл-подобные рецепторы (TLRs). IRAK4 считается инициальной протеинкиназой активированной ниже рецептора интерлейкина-1 (IL-1) и всех толл-подобных рецепторов (TLRs), за исключением TLR3, и инициирует передачу сигналов во врожденную иммунную систему через быструю активацию IRAK1 и более медленную активацию IRAK2. IRAK1 была впервые выявлена вследствие биохимической очистки IL-1 зависимой киназной активности, которая подвергается коиммунопреципитации с IL-1 рецептором типа 1 (Cao et al., 1996. Science 271 (5252): 1128-31). IRAK2 была идентифицирована во время поиска маркера экспрессируемой последовательности человека (EST) в базе данных для последовательностей, гомологичных IRAK1 (Muzio et al., 1997. Science 278 (5343): 1612-5). IRAK3 (также называемая IRAKM) была идентифицирована с использованием мышиной EST последовательности, кодирующей полипептид со значительной гомологией к IRAK1 для скрининга человеческого активированного фитогемагглютинином лейкоцита периферической крови (PBL) библиотеки кДНК (Wesche et al., 1999. J. Biol. Chem. 274 (27): 19403-10). IRAK4 была идентифицирована с помощью поиска в базе данных для IRAK-подобных последовательностей и ПЦР универсальной библиотеки кДНК (Li et al., 2002. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 99 (8): 5567-5572).

Мыши, которые экспрессируют каталитически неактивный мутант IRAK4 вместо киназы дикого типа полностью устойчивы к септическому шоку, вызванному несколькими агонистами TLR, и ослаблены в своей реакции на IL-1. Дети с дефицитом активности IRAK4 вследствие генетического дефекта, страдают от повторяющихся инфекций, вызванных пиогенными бактериями. Получается, что IRAK-зависимые TLRs и IL-1 Rs жизненно необходимы для детского иммунитета против некоторых пиогенных бактерий, но в иммунной защите от большинства инфекций у взрослых играют резервную роль. Поэтому ингибиторы IRAK4 могут быть пригодными для лечения хронических воспалительных заболеваний у взрослых, не делая их слишком чувствительным к бактериальным и вирусным инфекциям (Cohen, 2009. Current Opinion in Cell Biology 21, 1-8). Были разработаны сильные ингибиторы IRAK4 (Buckley et al., 2008. Bioorg Med Chem Lett. 18 (12):3656-60). IRAK1 незаменим для TLR7-опосредованной и ТLR9-опосредованной активации IRF7 и получения интерферона-альфа (IFN-α), давая основание предполагать, что ингибиторы IRAK1 могут быть пригодны для лечения системной красной волчанки (СКВ). IRAK2 активируется ниже от IRAK4 и имеет важное значение для выработки противовоспалительного цитокина. Поэтому ингибиторы IRAK2 могут быть пригодны для лечения воспалительных заболеваний.

Сущность изобретения

В соответствии с одним аспектом изобретения предлагаются соединения формулы (I).

В соответствии с другим аспектом изобретения предлагаются соединения формулы (I), которые пригодны для лечения и/или предупреждения заболеваний связанных с IRAK.

В соответствии с другим аспектом изобретения предлагаются соединения, способные модулировать, в частности ингибировать активность или действие IRAK при болезненных состояниях у млекопитающих, особенно у людей.

В соответствии с другим аспектом изобретения предлагаются способы лечения и/или предупреждения расстройств, выбранных из аутоиммунных, воспалительных заболеваний, сердечно-сосудистых заболеваний, нейродегенеративных расстройств, бактериальных и вирусных инфекций, аллергии, астмы, панкреатита, полиорганной недостаточности, заболевания почек, агрегации тромбоцитов, рака, трансплантации органов, подвижности сперматозоидов, дефицита эритроцитов, отторжения трансплантата, повреждения легких, респираторных заболеваний и ишемических болезней.

В соответствии с другим аспектом в настоящем изобретении предлагаются соединения формулы (I), являющиеся селективными IRAK-4 и/или IRAK-1.

В соответствии с другим аспектом изобретения предлагается набор или комплект, содержащий, по меньшей мере, одно соединение формулы (I), предпочтительно в комбинации с иммуномодулирующими средствами. Предпочтительно, набор состоит из отдельных упаковок:

(а) эффективного количества соединения формулы (I) и/или его фармацевтически пригодных производных или таутомеров, сольватов, солей, гидратов и стереоизомеров, включая их смеси во всех соотношениях, и

(б) эффективного количества дополнительного действующего вещества лекарственного средства.

В соответствии с другим аспектом изобретения предлагается способ синтеза соединений формулы (I) и связанных формул.

Подробное описание изобретения

В одном варианте осуществления настоящее изобретение обеспечивает соединение формулы (I)

в которой

R1, R3 каждый, независимо друг от друга, означают Н, (CH₂)_pCON(R5)₂, OA, Hal, СООН, СООА, (CH₂)_pNHCOA, (CH₂)_pHet1, (CH₂)_pNR2R5, или ОН;

R2 означает Н или линейный, или разветвленный алкил с 1, 2 или 3 атомами углерода, причем один или два Н атома алкильной группы могут быть заменены посредством OR6, NR5R6, NHCOR5, CONR5R6;

R4 означает Н или A;

R5 означает Н или линейный, или разветвленный алкил с 1, 2 или 3 атомами углерода;

R6 означает Н или линейный, или разветвленный алкил с 1, 2 или 3 атомами углерода;

Z отсутствует или означает Ar-диил или Het-диил;

L означает (CH₂)_n, причем одна или две CH₂ группы могут быть заменены посредством O и/или группы CH=CH, и/или причем один или два Н атома могут быть замещены посредством OR2, NR2R5 или Het1;

Ar-диил означает 1,2-, 1,3- или 1,4-фенилен, по выбору замещенный посредством от 1 до 5 групп, независимо выбранных из Hal, CN, -CF₃, -OCF₃, ОН, OA, SO₂-A, СООН, СООА, -СО-А, O-фенил, SO₂-фенил, SO₂-CF₃, Het2 и/или A;

Het-диил означает ненасыщенный, насыщенный или ароматический 5-или 6-членный гетероцикл, имеющий от 1 до 2 атомов N, О и/или S, который может быть незамещенным или моно-, ди- или тризамещенным посредством Hal, CN, -CF₃, -OCF₃, OA, SO₂-A, СООН, СООА, -СО-А, O-фенил, SO₂-фенил, SO₂-CF₃, Het2 и/или A;

А означает неразветвленный или разветвленный алкил, имеющий от 1 до 10 атомов углерода, в котором от 1 до 5 атомов Н могут быть заменены посредством F и/или в котором одна или две несмежных CH₂ группы могут быть заменены посредством O;

Het1 означает морфолинил, пиперидинил или пирролидинил;

Het2 означает морфолинил, пиперидинил или пирролидинил;

Hal означает F, Cl, Br, I;

n означает 1, 2, 3, 4, 5 или 6;

p означает 0, 1 или 2;

и его фармацевтически приемлемые таутомеры, сольваты, соли и стереоизомеры, включая их смеси во всех соотношениях.

Настоящее изобретение, в частности, охватывает таутомерную форму (I'):

В случае если R2 означает алкил, атом углерода которого несет R2 может иметь абсолютную стереоконфигурацию, будучи R или S.

R2 предпочтительно означает Н или линейный, или разветвленный алкил с 1, 2 или 3 атомами углерода, в котором один или два (наиболее предпочтительно один) из атомов Н могут быть заменены посредством OR6, NR5R6, NHCOR5, CONR5R6, причем R5 и R6, независимо друг от друга, означают предпочтительно Н, метил, этил, н-пропил или изопропил.

R3 предпочтительно означает Н или (CH₂)_pCON(R5)₂, OA, F, Cl, COOH, COOA, (CH₂)_pNHCOA, (CH₂)_pHet1, (CH₂)_pNR2R5, или ОН, в которой A означает метил, этил, пропил, изопропил, бутил, изобутил, втор-бутил или трет-бутил, пентил, 1-, 2- или 3-метилбутил, 1,1-, 1,2- или 2,2-диметилпропил, 1-этилпропил или гексил в котором от 1 до 5 атомов Н могут быть заменены посредством F и/или в котором одна или две несмежных CH₂ группы могут быть заменены посредством O, А наиболее предпочтительно означает метил, этил, пропил, изопропил, в котором от 1 до 5 атомов Н могут быть заменены посредством F. Наиболее предпочтительно R3 означает (CH₂)₂NR5R6, (CH₂)₂OR5, (CH₂)₂NHCOCH3, (CH₂)₂CONR5R6 или ОН, причем R5 и R6, независимо друг от друга, означают предпочтительно Н, метил, этил, н-пропил или изопропил.

В особенно предпочтительных вариантах осуществления R4 означает Н или метил.

Het-диил предпочтительно означает пиридин-диил, пиримидин-диил, пиридазин-диил, пиразол-диил, имидазол-диил, пиперидин-диил или пирролидин-диил, каждый из которых является незамещенным или моно- или дизамещенным посредством А.

Алкил, в частности, означает метил, этил, н-пропил или изопропил.

В других предпочтительных вариантах осуществления R3 означает Н и R1 означает (CH₂)_pCON(R5)₂, OA, Hal, СООН, СООА, (CH₂)_pNHCOA, (CH₂)_pHet1, (CH₂)_pNR5R6, или ОН. В этих вариантах осуществления A предпочтительно означает метил, этил, пропил, изопропил, бутил, изобутил, втор-бутил или трет-бутил, пентил, 1-, 2- или 3-метилбутил, 1,1-, 1,2- или 2,2-диметилпропил, 1-этилпропил или гексил в котором от 1 до 5 атомов Н могут быть заменены посредством F и/или в котором одна или две несмежных CH₂ группы могут быть заменены посредством O, А наиболее предпочтительно означает метил, этил, пропил, изопропил, в котором от 1 до 5 атомов Н могут быть заменены посредством F.

В случае если ни R1, ни R3 не означают Н, то R1 и R3 предпочтительно представляют собой те же самые группы (например, R1=R3=(CH₂)_pCON(R5)₂, OA, Hal, СООН, СООА, (CH₂)_pNHCOA, (CH₂)_pHet1, (CH₂)_pNH₂, или ОН). В таких случаях A наиболее предпочтительно означает метил, этил, пропил, изопропил, бутил, изобутил, втор-бутил или трет-бутил, пентил, 1-, 2- или 3-метилбутил, 1,1-, 1,2- или 2,2-диметилпропил, 1-этилпропил или гексил, наиболее предпочтительно метил, этил, пропил, изопропил, в котором от 1 до 5 атомов Н могут быть заменены посредством F и/или в котором одна или две несмежных CH₂ группы могут быть заменены посредством O, А наиболее предпочтительно означает метил, этил, пропил, изопропил, в котором от 1 до 5 атомов Н могут быть заменены посредством F.

В случае, если Z отсутствует, то n означает предпочтительно 4, 5 или 6. В случае, если Z присутствует, то n предпочтительно означает 1 или 2. В предпочтительных вариантах осуществления, в которых Z отсутствует, одна CH₂ группа из L заменена посредством O и один атом Н из L заменен посредством ОН. В другом варианте осуществления одна CH₂ группа из L заменена посредством O и другая CH₂ группа из L заменена посредством группы CH=CH.

Z предпочтительно означает 1,3-фенилен, являющийся незамещенным или монозамещенным посредством A, Hal, ОН, или OA. В таких случаях А наиболее предпочтительно означает метил, этил, пропил, изопропил, бутил, изобутил, втор-бутил или трет-бутил, пентил, 1-, 2- или 3-метилбутил, 1,1-, 1,2- или 2,2-диметилпропил, 1-этилпропил или гексил, наиболее предпочтительно метил, этил, пропил, изопропил, в котором от 1 до 5 атомов Н могут быть заменены посредством F и/или в котором одна или две несмежных CH₂ группы могут быть заменены посредством О. И наиболее предпочтительно А означает метил, этил, пропил, изопропил, в котором от 1 до 5 атомов Н могут быть заменены посредством F.

А предпочтительно означает метил, кроме того этил, пропил, изопропил, бутил, изобутил, втор-бутил или трет-бутил, кроме того также пентил, 1 -, 2-или 3-метилбутил, 1,1-, 1,2- или 2,2-диметилпропил, 1-этилпропил, гексил, 1-, 2-, 3- или 4-метилпентил, 1,1-, 1,2-, 1,3-, 2,2-, 2,3- или 3,3-диметилбутил, 1- или 2-этилбутил, 1-этил-1-метилпропил, 1-этил-2-метилпропил, 1,1,2- или 1,2,2-триметилпропил, кроме того предпочтительно, например, трифторметил.

В особенно предпочтительном варианте осуществления R4 означает Н или метил, Het-диил означает пиридин-диил, пиримидин-диил, пиридазин-диил, пиразол-диил, имидазол-диил, пиперидин-диил или пирролидин-диил, каждый из которых является незамещенным или моно- или дизамещенным посредством А, и n группы L означает 1 или 2. К тому же, в этих вариантах осуществления A наиболее предпочтительно означает метил, этил, пропил, изопропил, бутил, изобутил, втор-бутил или трет-бутил, пентил, 1-, 2- или 3-метилбутил, 1,1-, 1,2- или 2,2-диметилпропил, 1-этилпропил или гексил, наиболее предпочтительно метил, этил, пропил, изопропил, в котором от 1 до 5 атомов Н могут быть заменены посредством F и/или в котором одна или две несмежных CH₂ группы могут быть заменены посредством О. И наиболее предпочтительно А означает метил, этил, пропил, изопропил, в котором от 1 до 5 атомов Н могут быть заменены посредством F.

В другом предпочтительном варианте осуществления R4 означает Н или метил, Z означает 1,3-фенилен, являющийся незамещенным или монозамещенным посредством A, Hal, ОН, или OA и n группы L означает 1 или 2. К тому же, в этих вариантах осуществления A наиболее предпочтительно также означает метил, этил, пропил, изопропил, бутил, изобутил, втор-бутил или трет-бутил, пентил, 1-, 2- или 3-метилбутил, 1,1-, 1,2- или 2,2-диметилпропил, 1-этилпропил или гексил, наиболее предпочтительно метил, этил, пропил, изопропил, в котором от 1 до 5 атомов Н могут быть заменены посредством F и/или в котором одна или две несмежных CH₂ группы могут быть заменены посредством О. Но наиболее предпочтительно А означает метил, этил, пропил, изопропил, в котором от 1 до 5 атомов Н могут быть заменены посредством F.

Соединения в соответствии с формулой (I), в которой R2 означает Н или линейный, или разветвленный алкил с 1, 2 или 3 атомами углерода, в котором один или два (наиболее предпочтительно один) из атомов Н могут быть заменены посредством (CH₂)₂NR5R6, (CH₂)₂OR5, (CH₂)₂NHCOCH₃ или (CH₂)₂CONR5R6 и R4 означает Н или метил, R1 означает Н и R³ означает (CH₂)_pCON(R5)₂, OA, Hal, СООН, COO A, (CH₂)_pNHCOA, (CH₂)_pHet1, (CH₂)_pNR5R6, или ОН, Het-диил означает пиридин-диил, пиримидин-диил, пиридазин-диил, пиразол-диил, имидазол-диил, пиперидин-диил или пирролидин-диил, каждый из которых является незамещенным или моно- или дизамещенным посредством A и n группы L означает 1 или 2. В таких случаях A наиболее предпочтительно означает метил, этил, пропил, изопропил, бутил, изобутил, втор-бутил или трет-бутил, пентил, 1-, 2- или 3-метилбутил, 1,1-, 1,2- или 2,2-диметилпропил, 1-этилпропил или гексил, наиболее предпочтительно метил, этил, пропил, изопропил, в котором от 1 до 5 атомов Н могут быть заменены посредством F и/или в котором одна или две несмежных CH₂ группы могут быть заменены посредством О. И наиболее предпочтительно А означает метил, этил, пропил, изопропил, в котором от 1 до 5 атомов Н могут быть заменены посредством F.

Изобретение в особенности также относится к соединениям в соответствии с формулой (I), в которой R4 означает Н или метил, R1 означает Н и R³ означает (CH₂)_pCON(R5)₂, OA, Hal, СООН, СООА, (CH₂)_pNHCOA, (CH₂)_pHet1, (CH₂)_pNR5R6, или OH, Z означает 1,3-фенилен, являющийся незамещенным или монозамещенным посредством A, Hal, ОН, или OA и n группы L означает 1 или 2. В таких случаях вновь A наиболее предпочтительно означает метил, этил, пропил, изопропил, бутил, изобутил, втор-бутил или трет-бутил, пентил, 1-, 2-или 3-метилбутил, 1,1-, 1,2- или 2,2-диметилпропил, 1-этилпропил или гексил, наиболее предпочтительно метил, этил, пропил, изопропил, в котором от 1 до 5 атомов Н могут быть заменены посредством F и/или в котором одна или две несмежных CH₂ группы могут быть заменены посредством О. И наиболее предпочтительно А означает метил, этил, пропил, изопропил, в котором от 1 до 5 атомов Н могут быть заменены посредством F.

В другом предпочтительном варианте осуществления, настоящее изобретение обеспечивает следующее соединение

в которой

Ra, Rb каждый независимо означают Н, Hal или X,

Z означает Ar или Het,

L означает алкилен или алкоксиалкилен, имеющий от 1 до 4 атомов углерода

Ar означает 1,2-, 1,3- или 1,4-фенилен, по выбору замещенный посредством от 1 до 5 групп, независимо выбранных из Hal, CN, -CF₃, -OCF₃, ОН (to include ex.12), О-алкил, SO₂-алкил, COOR, -СО-алкил, O-фенил, SO₂-фенил, SO₂-CF₃, O-(CH₂)_n-алкил, X,

R означает Н или линейный или разветвленный алкил, имеющий от 1 до 12 атомов углерода,

Het означает моноциклическое 5-8-членное двухвалентное кольцо, являющееся насыщенным, ненасыщенным или ароматическим, содержащим от 1 до 3 гетероатомов, независимо выбранных из N, О и S, и или группу СО, и по выбору замещенное посредством от 1 до 5 групп, независимо выбранных из Hal, CN, -CF₃, -OCF₃, О-алкил, SO₂-алкил, COOR, -СО-алкил, O-фенил, SO₂-фенил, SO₂-CF₃, O-(CH₂)_n-алкил, X,

X означает разветвленный или линейный алкил, имеющий от 1 до 12 атомов углерода, в котором один или больше, например, от 1 до 7, атомов Н могут быть заменены посредством Hal, OR, COOR, CN или NR₂ и причем одна или больше, предпочтительно от 1 до 5 групп CH₂ могут быть заменены посредством O, СО, NR или S, SO, SO₂, 1,2-, 1,3- или 1,4-фенилен, -CH=CH- или -С≡C-,

и

Hal означает F, Cl, Br, I

и его фармацевтически приемлемые производные, сольваты, соли и стереоизомеры, включая их смеси во всех соотношениях.

Настоящее изобретение охватывает, в частности, таутомерную форму:

Если не указано иное, алкил означает углеродную цепь, имеющую от 1 до 12 атомов углерода, предпочтительно от 1 до 8 атомов углерода и наиболее предпочтительно от 1 до 6 атомов углерода. Алкил весьма предпочтительно означает метил, кроме того этил, пропил, изопропил, бутил, изобутил, втор-бутил или трет-бутил, кроме того также пентил, 1, 2 или 3 метилбутил, 1,1, 1,2- или 2,2-диметилпропил, 1-этилпропил, гексил, 1, 2, 3 или 4 метилпентил, 1,1, 1,2, 1,3, 2,2, 2,3- или 3,3-диметилбутил, 1 или 2 этилбутил, 1 этил-1-метилпропил, 1 этил-2-метилпропил, 1,1,2- или 1,2,2-триметилпропил.

Группа Оалкил предпочтительно означает метокси и этокси.

Ar предпочтительно означает 1,3-фенилен, который может быть незамещенным или монозамещенным, дизамещенным или тризамещенным посредством заместителя, выбранного из группы, упомянутой под определением для Ar. Наиболее предпочтительно Ar является незамещенным или замещенным посредством алкил, Hal или CN.

R означает предпочтительно метил, этил, н-пропил или н-бутил.

Ra означает предпочтительно Н, Hal, Оалкил или алкил.

Rb означает предпочтительно Н, алкил, Hal, Оалкил или (CH₂)_nCONHR или (CH₂)_nCOOR, причем n означает 0, 1, 2, 3, 4, 5, или 6 и R является таким, как определено выше.

Z означает предпочтительно Ar и наиболее предпочтительно 1,3-фенилен.

L означает предпочтительно (CH₂)_n или (CH₂)_nО(CH₂)_n или (CH₂)_nО, причем n означает 0, 1, 2, 3, 4, 5, или 6. В другом предпочтительном варианте осуществления L означает алкилен, в котором один атом Н заменен посредством ОН.

Het предпочтительно означает, несмотря на дополнительные заместители, например, двухвалентную группу пиримидина или пиридина.

Выше и ниже, все радикалы и индексы имеют значения, указанные под общей структурной формулой, если специально не указано иное.

Как правило, соединения формулы I являются более предпочтительными, если более предпочтительны заместители, которые они несут.

По всему описанию изобретения, все радикалы, которые встречаются более чем один раз, могут быть одинаковыми или отличаться, т.е. не зависят один от другого.

Соединения формулы I могут иметь один или большее количество хиральных центров и поэтому могут встречаться в различных стереоизомерных формах. Формула I охватывает все эти формы.

Следовательно, изобретение относится, в частности, к соединениям формулы I, в которой по меньшей мере один из указанных радикалов имеет одно из предпочтительных значений, указанных выше.

Предпочтительные соединения № от 1 до 42 формулы (I) приведены ниже вместе с их активностями (значения IC₅₀ были получены в соответствии с ферментативными анализами IRAK 1 и IRAK 4, описанными в Примере 42):

Фармацевтические соли и другие формы

Указанные соединения в соответствии с изобретением могут применяться в их конечной несолевой форме. С другой стороны, настоящее изобретение также охватывает применение таких соединений в форме их фармацевтически приемлемых солей, которые могут быть получены из различных органических и неорганических кислот и оснований в соответствии со способами, известными в данной области техники. Фармацевтически приемлемые солевые формы соединений формулы I в большинстве случаев получают общепринятыми способами. В случае, если соединение формулы I содержит карбоксильную группу, то его приемлемые соли могут быть образованы с помощью реакции соединения с приемлемым основанием, чтобы получить соответствующую соль присоединения основания. Такими основаниями являются, например, гидроксиды щелочных металлов, включая гидроксид калия, гидроксид натрия и гидроксид лития; гидроксиды щелочноземельных металлов, такие, как гидроксид бария и гидроксид кальция; алкоксиды щелочных металлов, например, этилат калия и пропилат натрия; и различные органические основания, такие, как пиперидин, диэтаноламин и N-метилглутамин. Равным образом также включены соли алюминия соединений формулы I. Для некоторых соединений формулы I соли присоединения кислоты могут быть образованы путем обработки указанных соединений фармацевтически приемлемыми органическими и неорганическими кислотами, например, галогенидами водорода, такими, как гидрохлорид, гидробромид или гидройодид, другими минеральными кислотами, и их соответствующими солями, такими как сульфат, нитрат или фосфат и т.п., и алкил- и моноарилсульфонатами, такими, как этансульфонат, толуолсульфонат и бензолсульфонат; и другими органическими кислотами и их соответствующими солями, такими, как ацетат, трифторацетат, тартрат, малеат, сукцинат, цитрат, бензоат, салицилат, аскорбат и т.п. Таким образом, фармацевтически приемлемые соли присоединения кислоты соединений формулы I охватывают следующие: ацетат, адипат, альгинат, аргинат, аспартат, бензоат, бензолсульфонат (безилат), бисульфат, бисульфит, бромид, бутират, камфорат, камфорсульфонат, каприлат, хлорид, хлорбензоат, цитрат, циклопентанпропионат, диглюконат, дигидрофосфат, динитробензоат, додецилсульфат, этансульфонат, фумарат, галактерат (из муциновой кислоты), галактуронат, глюкогептаноат, глюконат, глутамат, глицерофосфат, гемисукцинат, гемисульфат, гептаноат, гексаноат, гиппурат, гидрохлорид, гидробромид, гидройодид, 2-гидроксиэтансульфонат, йодид, изетионат, изобутират, лактат, лактобионат, малат, малеат, малонат, манделат, метафосфат, метансульфонат, метилбензоат, моногидрофосфат, 2-нафталинсульфонат, никотинат, нитрат, оксалат, олеат, пальмоат, пектинат, персульфат, фенилацетат, 3-фенилпропионат, фосфат, фосфонат, фталат, но не ограничиваются только ними.

Кроме того, основные соли соединений в соответствии с изобретением включают соли алюминия, аммония, кальция, меди, железа(III), железа(II), лития, магния, марганца(III), марганца(II), калия, натрия и цинка, но их не следует рассматривать в качестве ограничения. Из перечисленных выше солей предпочтение отдается аммонию; солям щелочных металлов - натрия и калия; и солям щелочноземельных металлов - кальция и магния. Соли соединений формулы I, которые являются производными от фармацевтически приемлемых органических нетоксических оснований, включают, но не ограничиваются только ними, соли первичных, вторичных и третичных аминов, замещенных аминов, также включая встречающиеся в природе замещенные амины, циклические амины и основные ионообменные смолы, например, аргинин, бетаин, кофеин, хлорпрокаин, холин, N,N'-дибензилэтилендиамин (бензатин), дициклогексиламин, диэтаноламин, диэтиламин, 2-диэтиламиноэтанол, 2-диметиламиноэтанол, этаноламин, этилендиамин, N-этилморфолин, N-этилпиперидин, глюкамин, глюкозамин, гистидин, гидрабамин, изопропиламин, лидокаин, лизин, меглумин, N-метил-D-глюкамин, морфолин, пиперазин, пиперидин, полиаминные смолы, прокаин, пурины, теобромин, триэтаноламин, триэтиламин, триметиламин, трипропиламин и трис-(гидроксиметил)метиламин (трометамин).

Соединения в соответствии с настоящим изобретением, которые содержат основные азотсодержащие группы, могут быть кватернизированы с помощью таких агентов, как (С₁-С₄-алкилгалогениды, например, метил-, этил-, изопропил- и трет-бутилхлорид, бромид и йодид; ди(С₁-С₄)-алкил сульфаты, например, диметил-, диэтил- и диамилсульфат; (С₁₀-С₁₈)-алкилгалогениды, например, децил-, додецил-, лаурил-, миристил- и стеарилхлорид, бромид и йодид; и арил(С₁-С₄)-алкилгалогениды, например, бензилхлорид и фенетилбромид. Применение подобных солей позволяет получать как растворимые в воде, так и растворимые в масле соединения в соответствии с изобретением.

Указанные выше предпочтительные фармацевтические соли включают ацетат, трифторацетат, безилат, цитрат, фумарат, глюконат, гемисукцинат, гиппурат, гидрохлорид, гидробромид, изетионат, манделат, меглумин, нитрат, олеат, фосфонат, пивалат, фосфат натрия, стеарат, сульфат, сульфосалицилат, тартрат, тиомалат, тозилат и трометамин, но их не следует рассматривать в качестве ограничения.

Особое предпочтение отдают гидрохлориду, дигидрохлориду, гидробромиду, малеату, мезилату, фосфату, сульфату и сукцинату.

Соли присоединения кислоты основных соединений формулы I получают путем введения в контакт формы свободного основания с достаточным количеством желаемой кислоты с получением соли традиционным способом. Свободное основание можно регенерировать путем введения в контакт солевой формы с основанием и выделения свободного основания общепринятым способом. Формы свободного основания в некоторой степени отличаются от своих соответствующих солевых форм своими определенными физическими свойствами, такими как растворимость в полярных растворителях, однако во всем остальном для целей настоящего изобретения соли являются эквивалентными своим соответствующим формам свободных оснований.

Как было указано, фармацевтически приемлемые соли присоединения основания соединений формулы I образованы с металлами или аминами, такими как щелочные металлы и щелочноземельные металлы или органические амины. Предпочтительные металлы представляют собой натрий, калий, магний и кальций. Предпочтительные органические амины представляют собой N,N'-дибензилэтилендиамин, хлорпрокаин, холин, диэтаноламин, этилендиамин, N-метил-D-глюкамин и прокаин.

Соли присоединения основания кислотных соединений в соответствии с изобретением получают путем ведения в контакт формы свободной кислоты с достаточным количеством желаемого основания для получения соли традиционным способом. Форма свободной кислоты может быть регенерирована путем введения в контакт солевой формы с кислотой и выделения формы свободной кислоты известным способом. Формы свободной кислоты в некоторой степени отличаются от своих соответствующих солевых форм определенными физическими свойствами, такими как растворимость в полярных растворителях, однако во всем остальном для целей настоящего изобретения соли являются эквивалентными своим соответствующим формам свободных кислот.

Если соединение в соответствии с изобретением содержит более, чем одну группу, способную к образованию фармацевтически приемлемых солей этого типа, то изобретение также охватывает комплексные соли. Примерами типичных комплексных солевых форм являются, но не ограничиваются только ними, битартрат, диацетат, дифумарат, димеглумин, дифосфат, динатрий и тригидрохлорид.

Принимая во внимание описанное выше, можно увидеть, что выражение "фармацевтически приемлемая соль" в контексте данной заявки предназначено для обозначения действующего вещества, которое содержит соединение формулы I в форме одной из его солей, особенно в том случае, если указанная солевая форма придает указанному действующему веществу улучшенные фармакокинетические свойства по сравнению со свободной формой указанного действующего вещества или любой другой солевой формой указанного действующего вещества, которые использовались ранее. Фармацевтически приемлемая солевая форма действующего вещества также может впервые придавать желаемое фармакокинетическое свойство указанному действующему веществу, которым оно ранее не обладало, а также может даже оказывать положительное влияние на фармакодинамику указанного действующего вещества в отношении его терапевтической активности в организме.

Нижеследующие сокращения относятся к применяемым ниже сокращениям:

Ас (ацетил), BINAP (2,2'-бис(дисфенилфосфино)-1',1'-бинафталин), dba (дибензилиден acetone), Bu (бутил), tBu (трет-бутил), ДХЭ (дихлорэтан), ДХМ (дихлорметан), DIEA (ди-изопропил этиламин), ДМА (диметилацетамид), ДМСО (диметилсульфоксид), ДМФА (N,N-диметилформамид), Dppf (1,1'-бис(дифенил фосфин ферроцен)), EtOAc (этилацетат), EtOH (этанол), г (грамм), сНех (циклогексан), HATU (N-[(диметиламино)(3Н-[1,2,3]триазоло[4,5-b]пиридин-3-илокси)метилен]-N-метилметанаминия гексафторфосфат), HBTU (N,N,N',N'-тетраметил-O-(1Н-бензотриазол-1-ил)урония гексафторфосфат), ВЭЖХ (высокоэффективная жидкостная хроматография), ч (час), ЖХ (жидкостная хроматография), LDA (диизопропиламин лития), LiHMDS (бис(триметилсилил)амид лития), МГц (мегагерц), МеОН (метанол), мин (минута), мл (миллилитр), ммоль (миллимоль), мМ (милимолярный), т.п. (точка плавления кипения), МС (масс-спектрометрия), MB (микроволны), NMM (N-метилморфолин), ЯМР (ядерный магнитный резонанс), O/N (в течение ночи), PBS (фосфатнобуфферный солевой раствор), PPh3 (трифенилфосфин), КТ (комнатная температура), ТЭА (триэтиламин), ТФУ (трифторуксусная кислота), ТГФ (тетрагидрофуран), ТСХ (тонкослойная хроматография), oTol (орто-толил), Т3Р (ангидрид пропилфосфоновой кислоты), УФ (ультрафиолет).

В общем, соединения в соответствии с формулой (I) и связанных формул настоящего изобретения могут быть получены из легкодоступных исходных веществ. Если такие исходные вещества не являются коммерчески доступными, они могут быть получены стандартными методами синтеза. Как правило, пути синтеза для любого отдельного соединения формулы (I) и связанных формул будут зависеть от конкретных заместителей каждой молекулы, такие факторы являются понятными обычным специалистам в данной области. Следующие общие способы и методики, описанные далее в примерах, могут быть использованы для получения соединений формулы (I) и связанных формул.

Условия реакций, показанные на следующих схемах, такие как температуры, растворители, или совместные реагенты, приведены только в качестве примеров и не являются ограничивающими. Следует понимать, что там, где приведены типичные или предпочтительные экспериментальные условия (т.е. температуры реакции, время, моли реагентов, растворители и т.д.), также могут быть использованы другие экспериментальные условия, если не указано иное. Оптимальные реакционные условия могут варьироваться в зависимости от конкретных реагентов или растворителей, которые применяют, и такие условия могут быть определены специалистом в данной области техники, с использованием типовых методик оптимизации. Для всех методик защиты и снятия защиты, см. Philip J. Kocienski, in "Protecting Groups", Georg Thieme Verlag Stuttgart, New York, 1994 and, Theodora W. Greene and Peter G.M. Wuts in "Protective Groups in Organic Synthesis", Wiley Interscience, 3-е издание 1999.

В зависимости от природы заместителей (R1, Z и L и т.д.) для синтеза соединений в соответствии с изобретением могут быть выбраны различные синтетические стратегии. В способе, показанном на следующих схемах заместители (R1, Z и L и т.д.) являются такими, как определено выше в описании, если не указано иное.

Соединения формулы (I) могут быть получены путем внутримолекулярного сочетания карбоновой кислоты соединения общей формулы (II), в которой A1 означает Н, Li, Na или K, как указано на схеме 1. Общие протоколы для такой реакции приведены ниже в примерах, используя условия и методы хорошо известные специалистам в данной области.

Стандартный агент реакции сочетания, такой как HBTU, EDC, Т3Р или изобутилхлороформиат можно использовать в присутствии или без добавки, такой как HOBt и основания, такого как DIEA, TEA или NMM в приемлемом растворителе, таком как ДМФ, ацетонитрил, ТГФ или ДХМ при температуре, повышающейся от приблизительно 0°C до 50°C. В качестве альтернативы, производное карбоновой кислоты (такое как хлорангидрид) может вступать в реакцию с применением условий и способов, хорошо известных специалисту в данной области техники, в присутствии основания, такого как пиридин или DIEA в приемлемом растворителе, таком как толуол, ДХМ, ТГФ или ДМФ, при температуре, повышающейся от приблизительно 0°C до КТ, предпочтительно при КТ, в течение нескольких часов. В этом шаге циклизации обычная концентрация соединения общей формулы (II) колеблется от 0.01 до 1 М.

Схема 1

Соединения формулы (II), в которой А1 означает Н или Li, Na или K могут быть получены в две стадии алкилированием аминобензимидазольного соединения общей формулы (IV) с соединением общей формулы (V), в которой R означает алкильную группу и LG1 означает уходящую группу, такую как бром, хлор, йод, алкилсульфонат или любую другую пригодную уходящую группу, известную специалисту в данной области техники, с последующим гидролизом промежуточного сложного эфира общей формулы (III), в которой R означает алкильную группу как приведено на схеме 2а. В качестве альтернативы, промежуточные соединения общей формулы (III) могут быть получены алкилированием аминобензимидазольного соединения общей формулы (IV) с эпоксидом общей формулы (V'), в которой R означает алкильную группу и L' означает (CH₂)_n-1, как приведено на схеме 2b. Общие протоколы для такой реакции приведены ниже в примерах, с применением условий и способов хорошо известных специалисту в данной области техники. В типичной процедуре соединение формулы (V), в которой LG1 является таким, как определено выше обрабатывают основанием, таким как, но не ограничиваясь только ним, NaH, K₂CO₃, Cs₂CO₃, КОН, LDA, LiHMDS, предпочтительно NaH, и с аминобензимидазолом общей формулы (IV) в приемлемом растворителе, таком как ТГФ, диоксан, ДМФ, ДМА, при температуре между -20°C до приблизительно 150°C, в течение времени от нескольких минут до нескольких часов. Гидролиз сложного эфира (III), в которой R является таким, как определено выше может быть осуществлен, например, с применением HCl, H₂SO₄, или с применением LiOH, NaOH или KOH в воде, вода/ТГФ, вода/ТГФ/этанол или вода/диоксан, при температурах между 0 и 100°C. Кислотную или соляную форму получают в зависимости от выбранной реакционной обработки (основные или кислотные условия).

Схема 2а

Схема 2b

Аминобензимидазолы общей формулы (IV) могут быть получены из коммерческих источников или могут быть синтезированы следуя методикам, хорошо известным специалисту в данной области техники таким как, но не ограничиваясь только ними, описаны в J. Org. Chem. 1977, 42, 542 или Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters 2006, 16, 2842-2845.

Соединения формулы (V), в которой LG1 означает уходящую группу, такую как бром, хлор, йод, алкилсульфонат или любую другую пригодную уходящую группу, известную специалисту в данной области техники могут быть получены из спирта общей формулы (VI), в которой R является таким, как определено выше с применением условий и способов хорошо известных специалисту в данной области техники как приведено на схеме 3. При стандартной процедуре, для получения соединения общей формулы (V), в которой R является таким, как определено выше и LG1 означает галоген, соединение формулы (VI), в которой R является таким, как определено выше, может быть обработано галогенирующим агентом, таким как SOCl₂, POCl₃, PCl₃, PBr₃ в растворителе, таком как ДХМ при температуре, повышающейся от 0°C до 60°C, предпочтительно при КТ в течение нескольких часов. Для получения соединения общей формулы (V), в которой LG1 означает алкилсульфонат, в типичных условиях сульфонилирования применяют соответствующий сульфонилхлорид в присутствии основания, такого как TEA, DIEA или пиридин, по выбору, каталитическое количество 4-DMAP в растворителе, таком как ДХМ или ТГФ при температуре, повышающейся от 0°C до 50°C, предпочтительно при КТ.

Схема 3

Соединения формулы (VI), в которой R является таким, как определено выше могут быть получены при помощи реакции сочетания Сузуки-Мияуры между пиридазиноном общей формулы (VIII), в которой LG2 означает галоген или группу трифторметансульфоната и R является таким, как определено выше и бороновой кислотой или сложным эфиром формулы (VII), в которой R является таким, как определено выше как изображено на схеме 4. Общие протоколы для реакции сочетания Сузуки-Мияура приведены ниже в примерах, с применением условий и способов, хорошо известных специалисту в данной области техники, чтобы осуществить такое сочетание (см. например, Miyaura, N.; Suzuki, A. Chem. Rev. 1995, 95, 2457; Takahiro I. и Toshiaki M., Tetpahedron Lett. 2005, 46, 3573-3577). При стандартной процедуре, пиридазинон общей формулы (VIII) и бороновую кислоту или сложный эфир формулы (VII) нагревают в приемлемом растворителе, таком как ТГФ, толуол, ДМФ или диоксан, в присутствии или отсутствии воды в качестве сорастворителя, в присутствии основания, такого как Cs₂CO₃, Na₂CO₃, K₂CO₃, CsF, и с приемлемым катализатором, таким как, но не ограничиваясь только ним дихлорбис(трифенилфосфин)палладий(II), Pd(PPh₃)₄ или 1,l'-бис(дифенилфосфино)ферроцендихлор палладий(II), Pd(OAc)₂, Pd₂(dba)₃, Pd(Cl)₂(PPh₃)₂ или Pd/C в присутствии или отсутствии дополнительного лиганда, такого как, но не ограничиваясь только ним P(tBu)₃, Р(oTol)₃, PPh₃, BINAP. Эта реакция сочетания может быть осуществлена при температуре между приблизительно 20°C и приблизительно 150°C, предпочтительно приблизительно при 120°C, в течение от нескольких минут до нескольких часов, возможно под действием микроволнового излучения.

Схема 4

Бороновая кислота и сложные эфиры общей формулы (VII), в которой R является таким, как определено выше, могут быть получены из коммерческих источников или могут быть синтезированы следуя методикам, хорошо известным специалисту в данной области техники таким как, но не ограничиваясь только ними, описаны в Boronic Acids, Edited by Dennis G. Hall 2005 WILEY-VCH Verlag GmbH & Co. KGaA, Weinheim J. Chem. Soc., 60, 1995, 7508-7510.

В качестве альтернативы, соединения формулы (VI), в которой R является таким, как определено выше могут быть получены при помощи реакции сочетания Сузуки-Мияуры между пиридазиноном сложным эфиром бороновой кислоты общей формулы (X), в которой R является таким, как определено выше и соединением общей формулы (IX), в которой LG2 означает галоген или группу трифторметансульфоната, как приведено на схеме 5. Типичные процедуры для таких превращений являются такими же, как и описано выше.

Схема 5

Сложные эфиры бороновой кислоты общей формулы (X), в которой R является таким, как определено выше могут быть получены из пиридазинона общей формулы (VIII), в которой LG2 означает галоген или группу трифторметансульфоната и R является таким, как определено выше в ходе реакции с соответствующим дибороновым производным, таким как, но не ограничиваясь только ним бис(пинаколато)диборон, бис(катехолат)диборон, бис(диэтил-D-тартрат гликолато)диборон, бис(гексиленгликолато)диборон, бис(неопентилгликолато)диборон, предпочтительно бис(пинаколато)диборон, в присутствии пригодного катализатора, такого как, но не ограничиваясь только ним 1,1'бис(дифенилфосфино)ферроцендихлор палладий(II), дихлорбис(трифенилфосфин)палладий(II), Pd(PPh₃)₄, Pd(OAc)₂, Pd₂(dba)₃, Pd(Cl)₂(PPh₃)₂, предпочтительно 1,1'бис(дифенилфосфино)ферроцендихлор палладий(II), в присутствии пригодного основания, такого как, но не ограничиваясь только ним, ацетат калия, фторид цезия, карбонат калия, предпочтительно ацетат калия, в присутствии растворителя, такого как, но не ограничиваясь только ним ТГФ, диоксан, ДХЭ, ДМФ, предпочтительно ТГФ или диоксан, при температуре между приблизительно 20°C до приблизительно 150°C, предпочтительно приблизительно при 120°C, в течение нескольких минут до нескольких часов, возможно под действием микроволнового излучения.

Соединения формулы (VIII), в которой LG2 означает галоген или группу трифторметансульфоната и R является таким, как определено выше, могут быть получены алкилированием пиридазинона общей формулы (XI), в которой LG2 является таким, как определено выше с соединением общей формулы (XII), в которой R является таким, как определено выше и LG1 означает уходящую группу, такую как бром, хлор, йод, алкилсульфонат или любую другую пригодную уходящую группу, известную специалисту в данной области техники или группу ОН, как показано на схеме 6. Общие протоколы для такого превращения приведены ниже в примерах, с применением условий и способов, хорошо известных специалисту в данной области техники. При стандартной процедуре, пиридазинон общей формулы (XI), в которой LG2 является таким, как определено выше обрабатывают основанием, таким как, но не ограничиваясь только ним NaH, K₂СО₃, Cs₂CO₃, LDA, LiHMDS, предпочтительно NaH, и с соединением общей формулы (XII), в которой R является таким, как определено выше и LG1 означает уходящую группу, такую как бром, хлор, йод, алкилсульфонат или любую другую пригодную уходящую группу, известную специалисту в данной области техники, в приемлемом растворителе, таком как ТГФ, диоксан, ДМФ, ДМА, при температуре между -20°C и приблизительно 150°C, в течение периода времени от нескольких минут до нескольких часов. В качестве альтернативы, соединения формулы (VIII), в которой R и LG2 являются такими, как определены выше, могут быть получены в ходе реакции соединения формулы (XII), в которой L1 означает группу ОН с пиридазиноном формулы (XI), в которой LG2 является таким, как определено выше с применением условий, хорошо известных специалисту в данной области техники для реакции Митсунобу (см., например, Hughes, D.L. Organic Reactions (New York), 1992, 42, 335-656; Reynolds, A. J.; Kassiou, M. Current Organic Chemistry, 2009, 13 (16); 1610-1632). Как правило, реакция происходит в присутствии фосфина, такого как, но не ограничиваясь только ним P(tBu)₃, PPBu₃, P(oTol)₃, PPh₃, в присутствии азадикарбоксилата, такого как, но не ограничиваясь только ним диэтилазадикарбоксилат, диизопропилазадикарбоксилат, тетраметилазодикарбоксамид, в растворителе, таком как ТГФ, диоксан, ДХМ, ДХЭ, при температуре между -20°C до приблизительно 150°C, предпочтительно при комнатной температуре, в течение периода времени от нескольких минут до нескольких часов.

Схема 6

Соединения согласно настоящему изобретению могут быть выделены совместно с молекулами растворителей путем кристаллизации из соответствующего растворителя или упариванием соответствующего растворителя.

Фармацевтически приемлемые анионные соли соединений формулы (I), содержащие основный центр, могут быть получены стандартным способом. Например, раствор свободного основания может быть обработан с помощью приемлемой кислоты или в чистом виде, или в приемлемом растворе, и полученную соль выделяют или фильтрацией, или выпариванием под вакуумом реакционного растворителя.

Фармацевтически приемлемые катионные соли соединений формулы (I), содержащие кислотный центр, могут быть получены традиционным способом. Например, раствор свободной кислоты может быть обработан с помощью приемлемого основания или в чистом виде, или в пригодном растворе, и полученную соль выделяют или фильтрацией, или упариванием под вакуумом реакционного растворителя. В некоторых случаях, соли могут быть получены смешиванием раствора кислоты с раствором соли щелочного или щелочноземельного металла (такого как, этилгексаноат натрия, олеат магния), используя растворитель, в котором требуемая соль щелочного или щелочноземельного металла соединения формулы (I) осаждается, или может быть иным образом выделена путем концентрации и добавления осадителя.

Оба типа солей могут быть образованы или взаимопревращены с применением методик ионообменной смолы.

В зависимости от применяемых условий время реакции, как правило, составляет от нескольких минут до 14 дней. Температура реакций находится в диапазоне от приблизительно -3°C до приблизительно 140°C, обычно от -10°C до 90°C, в частности от приблизительно 0°C до 70°C.

Соединения формулы (I) и связанных формул также охватывают оптически активные формы (стереоизомеры), энантиомеры, рацематы, диастереомеры и гидраты и сольваты этих соединений. Понятие "сольваты соединений" следует понимать как аддукции молекул инертного растворителя на соединениях, которые образуются благодаря их взаимной силе притяжения. Сольваты, например, представляют собой моно- или дигидраты или алкоголяты.

Стратегии синтеза и способы, описанные выше можно применять для получения всех соединений в соответствии с настоящим изобретением. В частности, все описанные стратегии синтеза и способы могут быть применены для синтеза следующих соединений:

Понятие "фармацевтически приемлемые производные" означает, например, соли соединений формулы I и так называемых пролекарственных соединений.

Понятие "пролекарственные производные" следует понимать как соединения формулы I, которые были модифицированы с помощью, например, алкильных или ацильных групп, сахаров или олигопептидов и которые быстро расщепляются в организме с образованием действующих соединений. Предпочтительно "пролекарство", в отношении соединений формулы I, относится к производным соединений, которые быстро превращаются in vivo с получением исходного соединения формулы I, как например, путем гидролиза в крови. У Т. Higuchi and V. Stella представлено исчерпывающее обсуждение концепции пролекарств в "Prodrugs as Novel Delivery Systems", том 14 Symposium Series, American Chemical Society (1975). Примеры эфиров, пригодных в качестве пролекарств для соединений, содержащих карбоксильные группы можно найти на страницах 14-21 в "Bioreversible Carriers in Drug Design: Theory and Application", под редакцией E.В. Roche, Pergamon Press: New York (1987). Предполагается, что эти ссылки, и любые другие приведенные в данном описании, включены в данное описание посредством ссылки.

Они также охватывают производные поддающихся биологическому разложению полимеров соединений в соответствии с изобретением, как описано, например, в Int. J. Pharm. 115, 61-67 (1995).

Формула (I) и связанные формулы также охватывают смеси соединений формулы I, например, смеси двух диастереомеров, например, в соотношении 1:1, 1:2, 1:3, 1:4, 1:5, 1:10, 1:100 или 1:1000.

В особенности предпочтительно они представляют собой смеси стереоизомерных соединений.

Фармацевтические составы могут быть введены в виде лекарственных дозированных форм, содержащих предопределенное количество действующего вещества на дозированную единицу. Такая дозированная единица может содержать, например, от 0,5 мг до 1 г, предпочтительно от 1 мг до 700 мг, предпочтительно в особенности от 5 мг до 100 мг соединения в соответствии с изобретением, в зависимости от состояния заболевания, которое подвергают лечению, способа введения и возраста, веса и состояния пациента, или же фармацевтические композиции можно вводить в виде дозированных единиц, которые содержат предопределенное количество действующего вещества на дозированную единицу. Предпочтительными композициями дозированных единиц являются составы, содержащие суточную дозу или часть суточной дозы, как указано выше, или соответствующую ей порцию действующего вещества. Кроме того, фармацевтические композиции этого типа могут быть получены с применением способа, который в общем известен в области фармацевтики.

Фармацевтические составы могут быть адаптированы для введения посредством любого пригодного способа, например, путем перорального (включая буккальное или подъязычное), ректального, назального, местного (включая буккальное, подъязычное или трансдермальное), вагинального или парентерального (включая подкожное, внутримышечное, внутривенное или внутрикожное) введения. Такие составы могут быть приготовлены с помощью любого способа, известного в области фармацевтики, например, путем соединения действующего вещества с наполнителем(ями) или вспомогательным(ыми) веществом(ами).

Фармацевтические составы, приспособленные для перорального введения, могут быть введены в виде отдельных единиц, таких как, например, капсулы или таблетки; порошки или гранулы; растворы или суспензии в водных или неводных жидкостях; съедобных пенок или пенистых пищевых продуктов; или жидких эмульсий масло-в-воде или жидких эмульсий вода-в-масле.

Так, например, в случае перорального введения в виде таблетки или капсулы, действующее вещество может быть соединено с пероральным, нетоксичным и фармацевтически приемлемым инертным наполнителем, таким как, например, этанол, глицерин, вода и т.п. Порошки получают путем измельчения соединения до приемлемого мелкого размера и смешивания его с фармацевтическим наполнителем, измельченным аналогичным способом, таким как, например, пищевой углевод, такой как, например, крахмал или маннит. Равным образом можно добавлять ароматизатор, консервант, диспергирующее вещество и краситель.

Капсулы получают путем приготовления порошковой смеси, как описано выше и заполнения ею желатиновых оболочек. Вещества, способствующие скольжению и смазывающие вещества, такие как, например, высокодисперсная кремниевая кислота, тальк, стеарат магния, стеарат кальция или полиэтиленгликоль в твердой форме, могут быть добавлены к порошковой смеси перед процессом наполнения. В целях улучшения доступности лекарственного средства после того, как капсула была принята, также может быть добавлен разрыхлитель или солюбилизатор, такой как, например, агар-агар, карбонат кальция или карбонат натрия.

К тому же, при желании или необходимости, в смесь также могут быть добавлены пригодные связующие вещества, смазывающие средства и дезинтеграторы, а также красители. Пригодные связующие вещества охватывают крахмал, желатин, природные сахара, такие как, например, глюкоза или бета-лактоза, подсластители, полученные из кукурузы, природных и синтетических смол, такие как, например, аравийская камедь, трагакантовая камедь или альгинат натрия, карбоксиметилцеллюлоза, полиэтиленгликоль, воски и т.п. Смазывающие средства, которые могут быть применены в таких дозированных формах, включают олеат натрия, стеарат натрия, стеарат магния, бензоат натрия, ацетат натрия, хлорид натрия и т.п. Дезинтеграторы включают, но не ограничиваются только ними, крахмал, метилцеллюлозу, агар, бентонит, ксантановую камедь и т.п. Таблетки изготавливают, например, путем приготовления порошковой смеси, гранулирования или сухого прессования смеси, добавления смазывающего вещества и дезинтегратора и прессования полученной смеси в таблетки. Порошковую смесь готовят путем смешивания соединения, измельченного пригодным образом, с разбавителем или основанием, как описано выше, и необязательно со связующим веществом, таким как, например, карбоксиметилцеллюлоза, альгинат, желатин или поливинилпирролидон, замедлителем растворения, таким как, например, парафин, усилителем поглощения, таким как, например, четвертичная соль, и/или абсорбентом, таким как, например, бентонит, каолин или фосфат дикальция. Порошковую смесь можно гранулировать путем ее смачивания связующим веществом, таким как, например, сироп, крахмальная паста, клейкое вещество акации или растворы целлюлозы или полимерных веществ, и ее прессования через сито. В качестве альтернативы грануляции, порошковую смесь можно пропускать через таблетировочную машину, получая крупные куски неправильной формы, которые разрушаются, образуя гранулы. Гранулы можно замасливать путем добавления стеариновой кислоты, стеарата, талька или минерального масла для предотвращения слипания в таблетировочной литейной форме. После этого смазанную смесь спрессовывают, получая таблетки. Соединения в соответствии с изобретением также можно объединять с сыпучим инертным наполнителем и затем подвергать прямому прессованию, получая таблетки без осуществления стадий грануляции или сухого прессования. Таблетки также можно покрывать прозрачным или светонепроницаемым защитным слоем, состоящим из шеллакового герметизирующего слоя, слоя сахара или полимерного вещества и глянцевого слоя воска. В эти покрытия также можно добавлять красители для возможности различения между разными дозированными единицами.

Жидкости для перорального введения, такие как, например, раствор, сиропы и эликсиры, могут быть приготовлены в виде дозированных единиц таким образом, чтобы они содержали заранее предопределенное количество соединения. Сиропы могут быть получены путем растворения соединений в водном растворе с пригодным ароматизатором, тогда как эликсиры готовят с применением нетоксичного спиртового наполнителя. Суспензии могут быть приготовлены путем диспергирования соединений в нетоксичном наполнителе. Равным образом можно добавлять солюбилизаторы и эмульгирующие вещества, такие как, например, этоксилированные изостеариловые спирты и полиоксиэтиленовые эфиры сорбита, консерванты, ароматические добавки, такие как, например, масло мяты перечной, или натуральные заменители сахара или сахарин, или другие искусственные заменители сахара и т.п.

Составы для перорального введения в виде дозированных единиц, при желании, могут быть инкапсулированы в микрокапсулы. Также состав может быть приготовлен таким образом, чтобы пролонгировать или замедлить высвобождение, например, путем применения покрытий или заделывания требуемого вещества в полимеры, воск и т.п.

Соединения формулы (I) и связанных формул и их соли, сольваты, таутомеры и стереоизомеры также могут быть введены в виде липосомных систем доставки, таких как, например, небольшие однослойные пузырьки, большие однослойные пузырьки и многослойные пузырьки. Липосомы могут быть образованы с помощью различных фосфолипидов, таких как, например, холестерин, стеариламин или фосфатидилхолины.

Соединения формулы (I) и связанных формул и их соли, сольваты, таутомеры и стереоизомеры также могут быть доставлены с применением моноклональных антител в качестве индивидуальных носителей, с которым соединены молекулы соединения. Соединения также могут быть соединены с растворимыми полимерами в качестве нацеливающих носителей лекарственных средств. Такие полимеры могут охватывать поливинилпирролидон, сополимер пирана, полигидроксипропилметакриламидофенол, полигидроксиэтиласпартамидофенол или полиэтиленоксидполилизин, замещенный пальмитоиловыми радикалами. Кроме того, соединения могут быть соединены с классом способных к биологическому разложению полимеров, которые пригодны для обеспечения контролируемого высвобождения лекарственного средства, например полимолочной кислотой, поли-эпсилон-капролактоном, полигидроксимасляной кислотой, полиортоэфирами, полиацеталями, полидигидроксипиранами, полицианоакрилатами и перекрестно-сшитыми или амфипатическими блок-сополимерами гидрогелей.

Фармацевтические составы, приспособленные для трансдермального введения, могут быть введены в виде независимых пластырей для пролонгированного, непосредственного контакта с эпидермисом реципиента. Таким образом, например, действующее вещество может быть доставлено из пластыря посредством ионтофореза, как, в общем, описано в Pharmaceutical Research, 3 (6), 318 (1986).

Фармацевтические соединения, приспособленные для местного введения, могут быть приготовлены в виде мазей, кремов, суспензий, лосьонов, порошков, растворов, паст, гелей, спреев, аэрозолей или масел.

Для лечения глаз или других наружных тканей, например рта и кожи, предпочтительно применяются составы в виде местной мази или крема. Для приготовления состава в виде мази, действующее вещество можно применять с парафиновым или смешиваемым с водой основанием для крема. В качестве альтернативы для получения крема действующее вещество может быть приготовлено с основой для крема типа масло-в-воде или основой вода-в-масле.

Фармацевтические составы, приспособленные для местного введения в глаза, включают глазные капли, в которых действующее вещество растворено или суспендировано в пригодном носителе, предпочтительно в водном растворителе.

Фармацевтические составы, приспособленные для местного введения в полость рта, включают лепешки, пастилки и жидкости для полоскания рта.

Фармацевтические составы, приспособленные для ректального введения, могут быть введены в виде суппозиториев или клизм.

Фармацевтические составы, приспособленные для назального введения, в которых носитель представляет собой твердое вещество, включают крупный порошок, имеющий размер частичек, например, в диапазоне 20-500 микрон, который вводится путем вдыхания, то есть путем быстрого вдоха через нос из контейнера, содержащего порошок, который придерживают возле носа. Пригодные составы для введения в виде назального спрея или носовых капель с жидкостью в качестве носителя включают растворы активного вещества в воде или в масле.

Фармацевтические составы, приспособленные для введения путем ингаляции, включают тонкоизмельченные частички в виде пыли или аэрозоля, которые могут быть получены с помощью различных диспергирующих устройств под давлением с аэрозолями, распылителей или инсуффляторов.

Фармацевтические составы, адаптированные для вагинального введения, могут вводиться в виде пессариев, тампонов, кремов, гелей, паст, пен или аэрозолей.

Фармацевтические составы, приспособленные для парентерального введения, включают водные или неводные стерильные растворы для инъекций, содержащие антиоксиданты, буферы, бактериостатические вещества и растворенные вещества, с помощью которых состав поддерживается изотоническим по отношению к крови реципиента, подвергаемого лечению; и водные или неводные стерильные суспензии, которые могут содержать суспензионную среду и загустители. Составы могут быть введены с помощью емкостей для однократного или многократного введения, например, запечатанных ампул и флаконов, и храниться в вымороженном (лиофилизированном) состоянии, при этом непосредственно перед введением необходимо только добавить стерильную жидкость-носитель, например, воду для инъекций.

Растворы и суспензии для инъекций, приготовленные согласно рецептуре, могут быть приготовлены из стерильных порошков, гранул и таблеток.

Само собой разумеется, что дополнительно к предпочтительным вышеописанным составляющим, составы также могут содержать другие вещества, которые используются в данной области для конкретных типов составов; например, составы, пригодные для перорального введения, могут содержать ароматизаторы.

Терапевтически эффективное количество соединения формулы (I) и связанных формул зависит от многих факторов, включая, например, возраст и вес животного, определенное состояние, которое необходимо лечить, и его тяжесть, природу лекарственного средства и способ введения, и в конечном счете оно может быть определено лечащим врачом или ветеринаром. Тем не менее, эффективное количество соединения, как правило, находится в пределах от 0,1 до 100 мг/кг веса тела реципиента (млекопитающего) в сутки и предпочтительно обычно находится в пределах от 1 до 10 мг/кг веса тела в сутки. Таким образом, действующее суточное количество для взрослого млекопитающего весом 70 кг обычно может составлять от 70 до 700 мг, причем это количество может быть введено в виде отдельной дозы один раз в день или обычно в виде циклов частичных доз (таких как, например, два, три, четыре, пять или шесть раз) в сутки, таким образом, что общая суточная доза является одинаковой. Эффективное количество его соли, сольвата, таутомера и стереоизомера может быть определено в виде доли эффективного количества соединения как такового.

Кроме того, настоящее изобретение относится к способу лечения пациента, страдающего от связанных с IRAK расстройств, включающий введение указанному субъекту эффективное количество соединения формулы I и связанных формул. Настоящее изобретение предпочтительно относится к способу, где связанное с IRAK расстройство представляет собой аутоиммунное заболевание или состояние, связанное с гиперактивностью иммунной реакции или раком. Настоящее изобретение, кроме того, относится к способу лечения пациента, страдающего от иммунорегуляторного нарушения, включающему введение указанному субъекту соединения формулы (I), и связанных формул в количестве, эффективном для лечения указанного иммунорегуляторного нарушения. Настоящее изобретение предпочтительно относится к способу, в котором иммунорегуляторное нарушение представляет собой аутоиммунное или хроническое воспалительное заболевание, выбранное из группы, состоящей из: аллергических заболеваний, бокового амиотрофического склероза (ALS), системной красной волчанки, хронического ревматоидного артрита, сахарного диабета I типа, воспалительного заболевания кишечника, билиарного цирроза печени, увеита, множественного склероза, болезни Крона, язвенного колита, буллезного пемфигоида, саркоидоза, псориаза, аутоиммунного миозита, гранулематоза Вегенера, ихтиоза, офтальмопатии Грейвса и астмы. Настоящее изобретение, кроме того, относится к способу, в котором иммунорегуляторное нарушение представляет собой патологию костного мозга или отторжение пересаженного органа или реакцию «трансплантат против хозяина». Помимо этого, настоящее изобретение относится к способу, в котором иммунорегуляторное нарушение выбрано из группы, которая включает: трансплантацию органов или тканей, реакцию «трансплантат против хозяина», вызванную пересадкой, аутоиммунные синдромы, в том числе ревматоидный артрит, системную красную волчанку, тиреоидит Хашимото, рассеянный склероз, системную склеродермию, миастению, сахарный диабет I типа, увеит, задний увеит, аллергический энцефаломиелит, гломерулонефрит, послеинфекционные аутоиммунные заболевания, включая ревматизм и послеинфекционный гломерулонефрит, воспалительные и гиперпролиферативные кожные заболевания, псориаз, атопический дерматит, контактный дерматит, экзематозный дерматит, себорейный дерматит, красный плоский лишай, пузырчатка, буллезный пемфигоид, буллезный эпидермолиз, крапивницу, ангионевротический отек, васкулит, эритему, кожную эозинофилию, красную волчанку, акне, алопецию, кератоконъюнктивит, весенний конъюнктивит, увеит, связанный с болезнью Бехчета, кератит, герпетический кератит, коническую роговицу, дистрофию эпителия роговицы, роговичную лейкому, глазную пузырчатку, язву Мурена, склерит, офтальмопатию Грейвса, синдром Фогта-Коянаги-Харада, саркоидоз, аллергию на пыльцу, обратимые обструктивные заболевания дыхательных путей, бронхиальную астму, аллергическая астма, внутренняя астма, внешняя астма и астма из-за пыли, хроническая или запущенная астма, поздняя астма и гиперчувствительность дыхательных путей, бронхит, язва желудка, повреждение сосудов, вызванное ишемическими заболеваниями и тромбозами, ишемические заболевания кишечника, воспалительные заболевания кишечника, некротический энтероколит, кишечные повреждения, связанные с термическими ожогами, целиакические заболевания, проктит, эозинофильный гастроэнтерит, мастоцитоз, болезнь Крона, язвенный колит, мигрень, ринит, экзема, интерстициальный нефрит, синдром Гудпасчера, гемолитико-уремический синдром, диабетическая нефропатия, дерматомиозит, синдрома Гийена-Барре, болезнь Меньера, полиневрит, множественный неврит, мононеврит, радикулопатию, гипертиреоз, базедову болезнь, чистую красноклеточную аплазию, апластическую анемию, гипопластическую анемию, идиопатическую тромбоцитопеническую пурпуру, аутоиммунную гемолитическую анемию, агранулоцитоза, злокачественной анемии, мегалобластной анемии, анэритроплазии, остеопороза, саркоидоза, миомы легких, идиопатической интерстициальной пневмонии, дерматомиозита, обычной лейкодермы, обычного ихтиоза, фотоаллергической чувствительности, кожной Т-клеточной лимфомы, хронического лимфоцитарного лейкоза, артериосклероза, атеросклероза, синдрома аортита, узелкового полиартериита, миокардоза, склеродермии, гранулематоза Вегенера, синдрома Шегрена, ожирения, эозинофильного фасцита, поражения десен, периодонта, альвеолярной кости, костного вещества зуба, гломерулонефрита, алопеции по мужскому типу или старческой плешивости, посредством предотвращения выпадения волос или обеспечивая прорастание волос и/или стимулирование восстановления волос и роста волос, мышечной дистрофии, пиодермии и синдрома Сезари, болезни Аддисона, ишемически-реперфузионного повреждения органов, которое происходит при консервировании, трансплантации или ишемической болезни, эндотоксического шока, псевдомембранозного колита, колита, вызванного применением лекарственных средств или радиацией, ишемической острой почечной недостаточности, хронической почечной недостаточности, токсичности, вызванной кислородным отравлением или лекарственными средствами, рака легких, эмфиземы легких, катаракты, сидероза, пигментного ретинита, старческой дегенерации желтого пятна, витреального рубцевания, ожога роговицы щелочью, дерматита, многоформной эритемы, линейного IgA буллезного дерматита и цементного дерматита, гингивита, периодонтита, сепсиса, панкреатита, заболеваний, вызванных загрязнением окружающей среды, старения, канцерогенеза, метастазов рака и гипобаропатии, заболевания, вызванного высвобождением гистамина или лейкотриена-С4, болезни Бехчета, аутоиммунного гепатита, первичного билиарного цирроза печени, склерозирующего холангита, частичной резекции печени, острого некроза печени, некроза, вызванного токсинами, вирусного гепатита, шока или гипоксии, гепатита B, гепатита C, цирроза печени, алкогольного цирроза, печеночной недостаточности, молниеносной печеночной недостаточности, печеночной недостаточности с поздним началом, обострения хронической печеночной недостаточности, увеличения химиотерапевтического эффекта, цитомегаловирусной инфекции, ЦМВ инфекции, СПИДа, рака, старческого слабоумия, болезни Паркинсона, травм, а также хронических бактериальных инфекций.

Предпочтительно, расстройства, связанные с IRAK, выбраны из ревматоидного артрита, псориатического артрита, остеоартрита, системной красной волчанки, волчаночного нефрита, анкилозирующего спондилоартрита, остеопороза, системного склероза, множественного склероза, псориаза, сахарного диабета I типа, сахарного диабета II типа, воспалительного заболевания кишечника (болезнь Крона и язвенный колит), гипериммуноглобулинемии D и синдрома периодической лихорадки, криопирин-связанных периодических синдромов, синдрома Шницлера, системного ювенильного идиопатического артрита, приобретенной болезни Стилла, подагры, псевдоподагры, синдрома САПГО, болезни Кастлемана, сепсиса, инсульта, атеросклероза, целиакии, DIRA (дефицит антагониста рецептора IL-1), болезнь Альцгеймера, болезни Паркинсона, рака.

Предпочтительные соединения формулы (I) и связанных формул проявляют IC50 для связывания с IRAK менее чем приблизительно 5 мкМ, предпочтительно менее чем приблизительно 1 мкМ и еще более предпочтительно менее чем приблизительно 0,100 мкМ.

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

В дальнейшем настоящее изобретение будет проиллюстрировано посредством некоторых примеров, которые не следует истолковывать как ограничивающие объем притязаний изобретения.

Общая часть:

Предоставленные данные ВЭЖХ и ЖХ в примерах, описанных ниже, были получены следующим образом.

Метод A: колонка Waters XbridgeTM С8 50 мм × 4.6 мм при производительности 2 мл/мин; 8 мин градиент H₂O:CH₃CN:ТФУ от 100:0:0.1% до 0:100:0.1%

Метод B: колонка Waters XbridgeTM С8 50 мм × 4.6 мм при производительности 1 мл/мин; 8 мин градиент H₂O:CH₃CN:NH₄HCO₃ от 100:0:0.1% до 0:100:0.1%

Метод C: колонка Waters XbridgeTM С8 50 мм × 4.6 мм при производительности 1 мл/мин; 8 мин градиент H₂O:CH₃CN:NH₄OAC от 100:0:0.1% до 0:100:0.1%

УФ обнаружение: макс, площадь или определенная длина волны.

Масс-спектр:

Представленные данные ЯМР в примерах, описанных ниже, были получены с применением Bruker AV-400 МГц.

Предлагаемые в изобретении соединения получили названия в соответствии со стандартами, применяемыми в программе Autonom или IUPAC Name от Chemaxon.

Соединения в соответствии с формулой (I) могут быть получены из легко доступных исходных веществ при помощи некоторых синтетических подходов, с применением химических протоколов, как в растворах, так и в твердых фазах, или смешанных химических протоколов в растворах и в твердых фазах. Примеры способов синтеза описаны в примерах ниже. Если не указано иное, соединения формулы (I), и связанных формул, полученные в виде рацемической смеси могут быть выделены с получением энантиомерно обогащенной смеси или чистого энантиомера.

Коммерчески доступные исходные вещества, используемые в следующем экспериментальном описании, были приобретены у Aldrich или Sigma или ABCR, если не указано иное.

Промежуточное соединение 1: метиловый эфир 3-(3-хлор-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил)-бензойной кислоты

Раствор из метилового эфира 3-бромметил-бензойной кислоты (9.6, 41.9 ммоль), 6-хлор-2Н-пиридазин-3-она (5.4 г, 41.9 ммоль) и карбоната цезия (13.6 г, 41.9 ммоль) в НМП (10 мл) перемешивали при КТ в течение ночи. Затем реакционную смесь обрабатывали ледяной водой и образовавшееся твердое вещество отфильтровывали. Очищение флеш-хроматографией на силикагеле данного сырого продукта обеспечило указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества не совсем белого цвета (9.8 г, 94%). ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆): δ 7.90-7.88 (m, 2Н), 7.58 (dd, J=5.88, 5.64 Гц, 2Н), 7.53-7.49 (m, 1Н), 7.11 (d, J=9.72 Гц, 1Н), 5.27 (s, 2Н), 3.84 (s, 3Н). ЖХ/МС: (метод А) 279.0 (М+Н), КТ. 3.7 мин, 93.8% (макс), 93.9% (254 нм).

Промежуточное соединение 2: Метил 3-((3-(3-(бромметил)фенил)-6-оксопиридазин-1(6Н)-ил)метил)бензоат

Стадия 1: Образование метилового эфира 3-[3-(3-гидроксиметил-фенил)-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил]-бензойной кислоты

Смесь из метилового эфира 3-(3-хлор-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил)-бензойной кислоты (2 г, 7.1 ммоль) и [3-(4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)-фенил]-метанола (1.64 г, 10.7 ммоль) в ДМФ/Н₂О (9 мл/1 мл) дегазировали под N₂ атмосферой в течение 10 мин Затем добавляли Na₂CO₃ (10.5 мл, 2 М раствор, 21.1 ммоль) и дихлорид бис(трифенилфосфин)палладия(II) (250 мг, 0.35 ммоль) и смесь нагревали при 100°C в течение 3 ч. Реакционный растворитель удаляли под сниженным давлением и остаток разбавляли с водой и экстрагировали при помощи EtOAc (2×150 мл). Объединенные органические фазы промывали водой, рассолом, высушивали над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали. Очищение флеш-хроматографией на силикагеле (EtOAc: н-гексан; 70:30) полученного сырого продукта обеспечило указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества желтого цвета (1.5 г, 60%). ¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆): 400 МГц, ДМСО-d6: δ 8.06 (d, J=9.76 Гц, 1Н), 7.96 (s, 1Н), 7.88 (d, J=7.72 Гц, 1Н), 7.82 (s, 1Н), 7.74 (d, J=7.52 Гц, 1Н), 7.63 (d, J=7.68 Гц, 1Н), 7.51 (t, J=7.64 Гц, 1Н), 7.46-7.39 (m, 2Н), 7.10 (d, J=9.72 Гц, 1Н), 5.40 (s, 2Н), 5.28 (t, J=5.68 Гц, 1Н), 4.56 (d, J=4.40 Гц, 2Н), 3.83 (s, 3Н). ЖХ/МС: (метод А) 351.2 (М+Н), КТ.3.63 мин, 77.7% (макс).

Стадия 2: Образование метил 3-((3-(3-(бромметил)фенил)-6-оксопиридазин-1(6Н)-ил)метил)бензоата

Трибромид фосфора (0.5 мл, 4.7 ммоль) медленно добавляли к раствору из метил 3-[3-(3-нидроксиметил-фенил)-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил]-бензойной кислоты метилового эфира (1.5 г, 4.2 ммоль) в ДХМ (10 мл) поддерживаемый при 0°C. Затем реакционную смесь оставляли нагреться до КТ и перемешивали в течение 1 ч. Ее гасили добавлением воды и экстрагировали при помощи ДХМ (3×10 мл). Объединенные органические фазы высушивали над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением указанного в заголовке соединения в виде твердого вещества желтого цвета (1.5 г, 88%). ¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆): δ 8.08 (dd, J=9.76, 2.32 Гц, 1Н), 8.06-7.97 (m, 2Н), 7.88 (d, J=7.76 Гц, 1Н), 7.83 (d, J=7.60 Гц, 1Н), 7.65-7.61 (m, 1Н), 7.56-7.49 (m, 3Н), 7.12 (d, J=9.72 Гц, 1Н), 5.41 (s, 2Н), 4.76 (s, 2Н), 3.83 (s, 3Н). ЖХ/МС: (метод А) 415.0 (М+Н), КТ. 4.8 мин, 72.3% (макс.).

Промежуточное соединение 3: метиловый эфир 3-(6-оксо-3-{3-[2-(толуол-4-сульфонилокси)-этил]-фенил}-6Н-пиридазин-1-илметил)-бензойной кислоты

Стадия 1: Образование метилового эфира 3-{3-[3-(2-гидрокси-этил)-фенил]-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил}-бензойной кислоты

Указанное в заголовке соединение получали, следуя методике, описанной для промежуточного соединения 2, стадия 2 в виде твердого вещества желтого цвета (3 г, 60%). ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆): δ 8.07 (d, J=9.72 Гц, 1H), 7.97 (s, 1Н), 7.88 (d, J=7.76 Гц, 1H), 7.72-7.68 (m, 2Н), 7.64 (d, J=7.76 Гц, 1Н), 7.51 (t, J=7.64 Гц, 1Н), 7.39 (t, J=7.64 Гц, 1H), 7.30 (d, J=7.64 Гц, 1Н), 7.10 (d, J=9.76 Гц, 1Н), 5.40 (s, 2Н), 4.66 (t, J=5.20 Гц, 1Н), 3.83 (s, 3Н), 3.65-3.61 (m, 2Н), 2.78 (t, J=6.96 Гц, 2Н). ЖХ/МС: (метод А) 365.2 (М+Н), КТ.3.72 мин, 95.91% (макс.), 97.6% (254 нм).

Стадия 2: Образование метилового эфира 3-(6-оксо-3-{3-[2-(толуол-4-сульфонилокси)-этил]-фенил}-6Н-пиридазин-1-илметил)-бензойной кислоты

4-Диметиламинопиридин (0.01 г, 0.08 ммоль), за которым следовал пара-толуолсульфонилхлорид (0.5 г, 2.6 ммоль) медленно добавляли к раствору из метилового эфира 3-{3-[3-(2-гидрокси-этил)-фенил]-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил}-бензойной кислоты (1.0 г, 2.7 ммоль) и TEA (0.47 мл, 3.3 ммоль) в ДМХ (10 мл), поддерживаемый при 0°С. Затем реакционную смесь оставляли нагреться до КТ и перемешивали в течение 1 ч. Ее гасили добавлением воды и экстрагировали при помощи ДХМ (3×10 мл). Объединенные органические фазы высушивали над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением указанного в заголовке соединения в виде твердого вещества желтого цвета (4.3 г, 98%). ЖХ/МС: (метод А) 519.0 (М+Н), КТ 5.20 мин, 62.6% (макс.).

Промежуточное соединение 4: 2-(2-амино-1Н-бензо[d]имидазол-5-ил)-N,N-диметилацетамид

Стадия 1: Образование 2-(бензо[с][1,2,5]тиадиазол-5-ил)-N,N-диметилацетамида

Т₃Р (50% вес/объем раствор в этилацетате, 49 мл, 77.2 ммоль) добавляли к раствору из бензо[1,2,5]тиадиазол-5-ил-уксусной кислоты (5 г, 25.7 ммоль), N,N-диметиламина (15.4 мл, 30.8 ммоль) и триэтиламина (0.1 мл, 0.8 ммоль) в ТГФ (50 мл), поддерживаемый при 0°С. Реакционную смесь оставляли нагреваться до КТ. Через 12 ч., 10% раствор двууглекислого натрия (15 мл) добавляли к реакционной смеси, которую затем экстрагировали при помощи дихлорметана (3×10 мл). Объединенные органические фазы промывали 10%-ым раствором лимонной кислоты, высушивали над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали в вакууме с получением указанного в заголовке соединения в виде твердого вещества желтого цвета (3 г, 53%). ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d_б): δ 8.00 (d, J=9.00 Гц, 1Н), 7.88 (d, J=0.68 Гц, 1Н), 7.58-7.56 (m, 1Н), 3.93 (s, 2Н), 3.06 (s, 3Н), 2.85 (s, 3Н). ЖХ/МС: (метод А) 222.0 (М+Н), КТ. 2.4 мин, 96.1% (макс.), 96.5% (220 нм).

Стадия 2: Образование 2-(3,4-диаминофенил)-N,N-диметилацетамида

Суспензию из 2-(бензо[с][1,2,5]тиадиазол-5-ил)-N,N-диметилацетамида (3 г, 13.5 ммоль) и никеля Ренея (9 г, 40.5 ммоль) в метаноле (100 мл) нагревали при 45°C в автоклаве (давление = 2 кг/см²) в течение 12 ч. После этого горячую суспензию фильтровали через прокладку из целита, которую промывали метанолом. Фильтрат концентрировали под сниженным давлением с получением указанного в заголовке соединения в виде твердого вещества коричневого цвета (2 г, 76%). ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆): δ 6.72-6.35 (m, 2Н), 6.29-6.16 (m, 1Н), 4.39 (brs, 2Н), 4.29 (brs, 2Н), 3.32 (s, 2Н), 2.92 (s, 3Н), 2.78 (s, 3Н). ЖХ/МС: (метод В) 194.3 (М+Н), КТ. 2.4 мин, 92.9% (макс.).

Стадия 3: Образование 2-(2-амино-1Н-бензо[d]имидазол-5-ил)-N,N-диметилацетамида

Раствор из 2-(3,4-диаминофенил)-N,N-диметилацетамида (3.0 г, 15.5 ммоль) в этаноле (15 мл) добавляли в течение периода времени в 30 мин к перемешанному раствору бромистого циана (1.8 г, 17.0 ммоль) в воде (100 мл). Через 20 ч. этанол удаляли под сниженным давлением, и полученный водный раствор промывали этилацетатом (3×50 мл). Слой этилацетата снова экстрагировали при помощи воды. Объединенные водные слои подщелачивали насыщенным раствором NaHCO₃ и экстрагировали при помощи этилацетата (2×50 мл). Объединенные органические фазы высушивали над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали в вакууме с получением указанного в заголовке соединения в виде твердого вещества коричневого цвета (1.0 г, 45%). ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆): δ 10.58 (s, 1Н), 6.99-6.95 (m, 1Н), 6.95-6.90 (m, 1Н), 6.70 (d, m, 1Н), 6.05 (brs, 2Н), 3.62 (s, 2Н), 2.95 (s, 3Н), 2.81 (s, 3Н). ЖХ/МС: (метод А) 219.2 (М+Н), КТ. 1.5 мин, 97.0% (макс.), 97.0% (220 нм).

Промежуточное соединение 5: метиловый эфир 3-(3-хлор-4-метил-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил)-бензойной кислоты

Указанное в заголовке соединение получали, следуя методике, описанной для промежуточного соединения 1 из метилового эфира 3-бромметил-бензойной кислоты и 6-хлор-5-метил-2Н-пиридазин-3-она (приобретен у Combi-blocks) в виде твердого вещества не совсем белого цвета (3.8 г, 94%). ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆): δ 7.89-7.87 (m, 2Н), 7.57 (t, J=6.44 Гц, 1Н), 7.50 (t, J=7.68 Гц, 1Н), 7.04 (d, J=1.20 Гц, 1Н), 5.25 (s, 2Н), 3.84 (s, 3Н), 2.19 (s, 3Н). ЖХ/МС: (метод А) 293.0 (М+Н), КТ. 4.4 мин, 90.1% (макс.).

Промежуточное соединение 6: метиловый эфир 3-[3-(3-бромметил-фенил)-4-метил-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил]-бензойной кислоты

Стадия 1: Образование метилового эфира 3-[3-(3-гидроксиметил-фенил)-4-метил-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил]-бензойной кислоты

Указанное в заголовке соединение получали, следуя методике, описанной для промежуточного соединения 2, стадия 1 из метилового эфира 3-(3-Хлор-4-метил-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил)-бензойной кислоты и 3-гидроксиметил фенилбороновой кислоты, в виде твердого вещества желтого цвета (1.0 г, 55%). ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆): δ 7.98 (s, 1Н), 7.94 (s, 1Н), 7.88 (d, J=1.24 Гц, 1Н), 7.49 (t, J=7.64 Гц, 1Н), 7.42-7.39 (m, 3Н), 7.36-7.33 (m, 1H), 6.95 (d, J=1.16 Гц, 1Н), 5.33 (s, 2Н), 5.26 (t, J=5.72 Гц, 1Н), 4.53 (d, J=5.76 Гц, 2Н), 3.84 (s, 3Н), 2.12 (s, 3Н). ЖХ/МС: (метод А) 365.2 (М+Н), КТ.3.65 мин, 87.40% (макс.), 95.3% (254 нм).

Стадия 2: Образование метилового эфира 3-[3-(3-бромметил-фенил)-4-метил-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил]-бензойной кислоты

Указанное в заголовке соединение получали, следуя методике, описанной для промежуточного соединения 2, стадия 2 из метилового эфира 3-[3-(3-гидроксиметил-фенил)-4-метил-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил]-бензойной кислоты в виде твердого вещества желтого цвета (1.0 г, 90%). ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆): δ 8.11 (s, 1Н), 7.94 (d, J=1.32 Гц, 1Н), 7.60-7.53 (m, 3Н), 7.46-7.42 (m, 3Н), 6.96 (d, J=1.20 Гц, 1Н), 5.35 (s, 2Н), 4.75 (s, 2Н), 3.84 (s, 3Н), 2.13 (s, 3Н). ЖХ/МС: (метод А) 429.0 (М+2), КТ.4.99 мин, 81.5% (макс.).

Промежуточное соединение 7: [4-Метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2] диоксаборолан-2-ил)-фенил]-метанол

Смесь из (3-бром-4-метил-фенил)-метанола (8.5 г, 42.2 ммоль) и бис(пинаколато)диборона (11.8 г, 46.50 ммоль) в 1,4-диоксане (50 мл) дегазировали под атмосферой N₂ в течение 10 мин. Ацетат калия (8.2 г, 84.55 ммоль) добавляли к указанной выше смеси с последующим добавлением [1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен]дихлорпалладия(II). CH₂Cl₂ (1.54 г, 2.11 ммоль) и реакционную смесь нагревали при 100°C в течение 15 ч. Растворители удаляли под сниженным давлением, полученный остаток разбавляли с водой и экстрагировали при помощи EtOAc (2×150 мл). Объединенные органические фазы промывали водой, рассолом, высушивали над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали. Очищение данного сырого продукта флеш-хроматографией на силикагеле (EtOAc: н-гексан; 70:30) обеспечивало указанное в заголовке соединение в виде жидкости коричневого цвета (5.0 г, 84%). ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆): δ 7.59 (d, J=1.72 Гц, 1Н), 7.25 (dd, J=7.76, 1.88 Гц, 1Н), 7.11 (d, J=7.76 Гц, 1H), 5.10 (t, J=5.72 Гц, 1Н), 4.43 (d, J=5.72 Гц, 2Н), 2.42 (s, 3Н), 1.29 (s, 12Н).

Промежуточное соединение 8: метиловый эфир 3-[3-(5-бромметил-2-метил-фенил)-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил]-бензойной кислоты

Стадия 1: Образование метилового эфира 3-[3-(5-Гидроксиметил-2-метил-фенил)-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил]-бензойной кислоты

Указанное в заголовке соединение получали, следуя методике, описанной для промежуточного соединения 2, стадия 1 из метилового эфира 3-(3-хлор-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил)-бензойной кислоты и [4-Метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)-фенил]-метанола в виде твердого вещества желтого цвета (1.8 г, 69%). ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆): δ 7.94 (s, 1Н), 7.90-7.87 (m, 1Н), 7.67-7.61 (m, 3Н), 7.53-7.49 (m, 1Н), 7.30-7.24 (m, 2Н), 7.07 (d, J=9.60 Гц, 1Н), 5.37 (s, 2Н), 5.19 (t, J=5.60 Гц, 1Н), 4.49 (d, J=5.72 Гц, 2Н), 3.84 (s, 3Н), 2.24 (s, 3Н). ЖХ/МС: (метод А) 365.0 (М+Н), КТ.3.75 мин, 76.8% (макс.).

Стадия 2: метиловый эфир 3-[3-(5-бромметил-2-метил-фенил)-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил]-бензойной кислоты

Указанное в заголовке соединение получали, следуя методике, описанной для промежуточного соединения 2, стадия 2 из метилового эфира 3-[3-(5-гидроксиметил-2-метил-фенил)-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил]-бензойной кислоты в виде твердого вещества желтого цвета (1.9 г, 90%). ЖХ/МС: (метод А) 429.0 (М+2), КТ.5.02 мин, 60.8% (макс.).

Промежуточное соединение 9: метиловый эфир 3-{6-оксо-3-[5-(толуол-4-сульфонилоксиметил)-пиридин-3-ил]-6Н-пиридазин-1-илметил}-бензойной кислоты

Стадия 1: Образование метиловый эфир 3-[3-(5-гидроксиметил-пиридин-3-ил)-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил]-бензойной кислоты

Указанное в заголовке соединение получали, следуя методике, описанной для промежуточного соединения 2, стадия 1 из метилового эфира 3-(3-хлор-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил)-бензойной кислоты (2 г, 7.1 ммоль) и (5-(гидроксиметил)пиридин-3-ил)бороновой кислоты (2.5 г, 10.7 ммоль) в виде твердого вещества коричневого цвета (1.0 г, 84%). ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆): δ 8.96 (d, J=2.16 Гц, 1Н), 8.59 (d, J=1.80 Гц, 1Н), 8.18-8.13 (m, 2Н), 7.98 (s, 1Н), 7.89 (d, J=1.20 Гц, 1Н), 7.65 (d, J=7.76 Гц, 1Н), 7.51 (t, J=7.72 Гц, 1Н), 7.15 (d, J=9.72 Гц, 1Н), 5.43-5.42 (m, 3Н), 4.60 (d, J=5.64 Гц, 2Н), 3.83 (s, 3Н). ЖХ/МС: (метод А) 352.0 (М+Н), КТ.2.32 мин, 93.68% (макс.), 92.1% (254 нм).

Стадия 2: Образование метилового эфира 3-{6-оксо-3-[5-(толуол-4-сульфонилоксиметил)-пиридин-3-ил]-6Н-пиридазин-1-илметил}-бензойной кислоты

Указанное в заголовке соединение получали, следуя методике, описанной для промежуточного соединения 3, стадия 2 из метилового эфира метил 3-[3-(5-гидроксиметил-пиридин-3-ил)-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил]-бензойной кислоты в виде твердого вещества бежевого цвета (1.5 г, 98%).¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆): δ 9.11 (t, J=2.20 Гц, 1Н), 8.78 (dd, J=6.00, 1.96 Гц, 1Н), 8.48-8.46 (m, 1Н), 8.16-8.14 (m, 1Н), 7.98 (d, J=8.44 Гц, 1Н), 7.89 (d, J=7.72 Гц, 1Н), 7.66 (d, J=7.68 Гц, 1Н), 7.51 (t, J=7.68 Гц, 1Н), 7.46 (d, J=8.08 Гц, 2Н), 7.19 (dd, J=9.68, 5.60 Гц, 1Н), 7.08-6.99 (m, 2Н), 5.43 (s, 2Н), 4.91 (s, 2Н), 3.83 (s, 3Н), 2.27 (s, 3Н).

Промежуточное соединение 10: 2-[3-(4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)-фенокси]-этанол

Смесь из 2-(3-бром-фенокси)-этанола (6 г, 27.64 ммоль), 4 бис(пинаколато)диборона (7.7 г, 30.40 ммоль) и ацетата калия (5.4 г, 55.2 ммоль) в 1,4-диоксане (50 мл) дегазировали при помощи азота в течение 20 мин прежде чем добавить 1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен]дихлорпалладий(II). CH₂Cl₂ (1.01 г, 1.38 ммоль). Реакционную смесь затем нагревали при 100°C в течение 14 ч. Ее отфильтровывали через прокладку из целита. Прокладку тщательно промывали дихлорметан/метанолом и фильтрат концентрировали под сниженным давлением. Очищение колоночной флеш-хроматографией на силикагеле сырого продукта обеспечивало указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества коричневого цвета (3.0 г, 42%). ¹Н ЯМР (400 МГц, ДMCO-d6): δ 7.23 (t, J=8.08 Гц, 1Н), 7.14-7.09 (m, 2H), 6.95 (dd, J=8.08, 2.28 Гц, 1H), 4.85-4.82 (m, 1H), 3.98-3.93 (m, 2H), 3.71-3.67 (m, 2H), 1.28 (s, 9H). ЖХ/МС: (метод A) 265.3 (M+H), KT. 2.8 мин, 72.0% (макс.).

Промежуточное соединение 11: метиловый эфир 3-(6-оксо-3-{3-[2-(толуол-4-сульфонилокси)-этокси]-фенил}-6Н-пиридазин-1-илметил)-бензойной кислоты

Стадия 1: Образование метилового эфира 3-{3-[3-(2-гидрокси-этокси)-фенил]-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил}-бензойной кислоты:

Смесь из метилового эфира 3-(3-хлор-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил)-бензойной кислоты (2 г, 7.91 ммоль), 2-[3-(4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)-фенокси]-этанола (2.8 г, 10.79 ммоль) и раствор из 2 М Na₂CO₃ (10.5 мл, 21.57 ммоль) в диметилформамид/вода (9:1; 30 мл) дегазировали при помощи азота в течение 20 мин, прежде чем добавить бис(трифенилфосфин)палладий(II) дихлорид (0.25 г, 0.35 ммоль). Реакционную смесь затем нагревали при 100°C в течение 4 ч. Ее отфильтровывали через прокладку из целита, прокладку тщательно промывали при помощи дихлорметан/метанола, и фильтрат концентрировали под сниженным давлением. Очищение колоночной флеш-хроматографией на силикагеле обеспечивало указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества желтого цвета (2.0 г, 75%). ЖХ/МС: (метод А) 381.2 (М+Н), КТ. 3.7 мин, 64.9% (макс.).

Стадия 2: Образование метилового эфира 3-(6-оксо-3-{3-[2-(толуол-4-сульфонилокси)-этокси]-фенил}-6Н-пиридазин-1-илметил)-бензойной кислоты

Указанное в заголовке соединение получали, следуя методике, описанной для промежуточного соединения 3, стадия 2 из метилового эфира 3-{3-[3-(2-гидрокси-этокси)-фенил]-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил} -бензойной кислоты в виде коричневой смолы (2.5 г, 89%). ЖХ/МС: (метод А) 535.0 (М+Н), КТ. 5.2 мин.

Промежуточное соединение 12: Метил 3-((3-(5-(бромметил)-2-фторфенил)-6-оксопиридазин-1(6Н)-ил)метил)бензоат

Стадия 1: Образование метил 3-((3-(2-фтор-5-(гидроксиметил)фенил)-6-оксопиридазин-1(6Н)-ил)метил)бензоата

Указанное в заголовке соединение получали, следуя методике, описанной для промежуточного соединения 2, стадия 1 из метилового эфира 3-(3-хлор-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил)-бензойной кислоты и (4-фтор-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)метанола в виде твердого вещества не совсем белого цвета (2.21 г, 56%). ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆): δ 7.96 (s, 1Н), 7.90-7.87 (m, 1Н), 7.79 (dd, J=9.7, 2.5 Гц, 1Н), 7.64-7.42 (m, 4Н), 7.33-7.28 (m, 1Н), 7.10 (d, J=9.7 Гц, 1Н), 5.40 (s, 2Н), 5.33 (t, J=5.8 Гц, 1H), 4.52 (d, J=4.0 Гц, 2Н), 3.84 (s, 3Н). ЖХ/МС: (метод А) 369.2 (М+Н), КТ. 3.7 мин, 65% (макс.).

Стадия 2: Образование метил 3-((3-(5-(бромметил)-2-фторфенил)-6-оксопиридазин-1(6Н)-ил)метил)бензоата

Указанное в заголовке соединение получали, следуя методике, описанной для промежуточного соединения 2, стадия 2 из метил 3-((3-(2-фтор-5-(гидроксиметил)фенил)-6-оксопиридазин-1(6Н)-ил)метил)бензоата (2.21 г, 6 ммоль) в виде твердого вещества не совсем белого цвета (2.0 г, 78%). ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆): δ 7.96 (s, 1Н), 7.90-7.87 (m, 1Н), 7.79 (dd, J=9.7, 2.5 Гц, 1Н), 7.64-7.42 (m, 4Н), 7.33-7.28 (m, 1Н), 7.10 (d, J=9.7 Гц, 1Н), 5.75 (s, 2Н), 4.77 (s, 2Н), 3.84 (s, 3Н). ЖХ/МС: (метод А) 431.0 (М+Н), КТ. 4.9 мин.

Промежуточное соединение 13: 6-[3-(2-гидрокси-этил)-фенил]-5-метил-2Н-пиридазин-3-он

Указанное в заголовке соединение получали, следуя методике, описанной для промежуточного соединения 11, стадия 1 из 6-хлор-5-метил-2Н-пиридазин-3-она и 2-[3-(4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)-фенил]-этанола в виде твердого вещества белого цвета (800 мг, 50%). ЖХ/МС: (метод А) 231.0 (М+Н), КТ. 2.1 мин.

Промежуточное соединение 14: метиловый эфир 3-(4-Метил-6-оксо-3-{3-[2-(толуол-4-сульфонилокси)-этил]-фенил}-6Н-пиридазин-1-илметил)-бензойной кислоты

Стадия 1: Образование метилового эфира 3-{3-[3-(2-гидрокси-этил)-фенил]-4-метил-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил}-бензойной кислоты

Раствор из метилового эфира 3-бромметил-бензойной кислоты (0.79 г, 3.47 ммоль), 6-[3-(2-гидрокси-этил)-фенил]-5-метил-2Н-пиридазин-3-она (0.8 г, 3.47 ммоль) и карбонат цезия (1.12, 3.47 ммоль) в N-метилпирролидине (10 мл) перемешивали при КТ в течение 14 ч. По завершении реакцию гасили кубиками льда и экстрагировали при помощи дихлорметана. Объединенные органические фазы концентрировали под сниженным давлением и очищали флеш-хроматографией на силикагеле с получением указанного в заголовке соединения в виде твердого вещества белого цвета (2.4 г, 92%). ЖХ/МС: (метод А) 379.0 (М+Н), КТ. 3.7 мин, 67.6% (макс.).

Стадия 2: Образование метилового эфира 3-(4-Метил-6-оксо-3-{3-[2-(толуол-4-сульфонилокси)-этил]-фенил}-6Н-пиридазин-1-илметил)-бензойной кислоты

Указанное в заголовке соединение получали, следуя методике, описанной для промежуточного соединения 3, стадия 2 из метилового эфира 3-{3-[3-(2-гидрокси-этил)-фенил]-4-метил-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил}-бензойной кислоты в виде коричневой смолы (3.3 г, 99%). ЖХ/МС: (метод А) 533.0 (М+Н), КТ. 5.2 мин.

Промежуточное соединение 15: [4-Метоксиметокси-3-(4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)-фенил]-метанол

Смесь из (3-бром-4-метоксиметокси-фенил)-метанола (5 г, 20.2 ммоль) и бис(пинаколато)диборона (5.6 г, 22.2 ммоль) в 1,4-диоксане (50 мл) дегазировали под атмосферой N₂ в течение 10 мин, ацетат калия (3.9 г, 40.4 ммоль) добавляли к указанной выше смеси с последующим добавлением [1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен]дихлорпалладия(II). CH₂Cl₂ (0.74 г, 1.01 ммоль). После этого реакционную смесь нагревали при 100°C в течение 15 ч. Растворитель удаляли под сниженным давлением. Полученный остаток разбавляли с водой и экстрагировали в этилацетате (2×150 мл). Объединенные органические фазы промывали водой, рассолом, высушивали над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали. Очищение флеш-хроматографией на силикагеле (EtOAc:н-гексан, 70:30) обеспечило указанное в заголовке соединение в виде жидкости коричневого цвета. (4 г, 67%). ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆): δ 7.52 (d, J=1.92 Гц, 1Н), 7.31 (dd, J=8.48, 2.36 Hz, 1Н), 7.01-6.95 (m, 1H), 5.15 (s, 2H), 5.07 (t, J=2.08 Гц, 1H), 4.40 (d, J=5.64 Гц, 2H), 3.93 (s, 3H), 1.16 (s, 12H).

Промежуточное соединение 16: метиловый эфир 3-{3-[2-метоксиметокси-5-(толуол-4-сульфонилоксиметил)-фенил]-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил}-бензойной кислоты

Стадия 1: Образование метилового эфира 3-[3-(5-гидроксиметил-2-метоксиметокси-фенил)-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил]-бензойной кислоты

Указанное в заголовке соединение получали, следуя методике, описанной для промежуточного соединения 11, стадия 1 из метилового эфира 3-(3-Хлор-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил)-бензойной кислоты и [4-метоксиметокси-3-(4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)-фенил]-метанола в виде твердого вещества желтого цвета (2.5 г, 56%). ЖХ/МС: (метод А) 411.2 (М+Н), КТ. 3.59 мин.

Стадия 2: Образование метилового эфира 3-{3-[2-метоксиметокси-5-(толуол-4-сульфонилоксиметил)-фенил]-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил}-бензойной кислоты

Указанное в заголовке соединение получали, следуя методике, описанной для промежуточного соединения 3, стадия 2 из метилового эфира 3-[3-(5-гидроксиметил-2-метоксиметокси-фенил)-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил]-бензойной кислоты в виде коричневой смолы (2.5 г, 73%). ЖХ/МС: (метод В) 564.0 (М-Н), КТ. 4.71 мин.

Промежуточное соединение 17: метиловый эфир 3-[6-оксо-3-(4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)-6Н-пиридазин-1-илметил]-бензойной кислоты

Указанное в заголовке соединение получали, следуя методике, описанной для промежуточного соединения 10 (без флеш-хроматографии) из метилового эфира 3-(3-хлор-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил)-бензойной кислоты в виде коричневой смолы (2.0 г, 75%). ЖХ/МС: (метод А) 289.0 (М-82), КТ. 2.5 мин, 75.5% (макс.).

Промежуточное соединение 18: метиловый эфир 3-{3-[2-хлор-5-(толуол-4-сульфонилоксиметил)-фенил]-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил}-бензойной кислоты

Стадия 1: Образование метиловый эфир 3-[3-(2-хлор-5-гидроксиметил-фенил)-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил]-бензойной кислоты

Смесь из метилового эфира 3-[6-оксо-3-(4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)-6Н-пиридазин-1-илметил]-бензойной кислоты (2 г, 5.40 ммоль), (3-бром-4-хлор-фенил)-метанола (1.19 г, 5.40 ммоль) и карбоната калия (2.2 г, 16.2 ммоль) в диметилформамид/вода (9:1) (50 мл) дегазировали при помощи азота в течение 20 мин Добавляли тетракис(трифенилфосфин) палладий (0) (0.31 г, 0.27 ммоль), реакционную смесь нагревали при 100°C в течение 5 ч. Затем ее отфильтровывали через целит, прокладку из целита промывали при помощи дихлорметан/метанола, и фильтрат концентрировали под сниженным давлением с получением указанного в заголовке соединения в виде твердого вещества не совсем белого цвета (1.9 г, 915). ЖХ/МС: (метод А) 385.0 (М+Н), КТ. 3.8 мин, 67.0% (макс.).

Стадия 2: Образование метилового эфира 3-{3-[2-Хлор-5-(толуол-4-сульфонилоксиметил)-фенил]-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил}-бензойной кислоты

Указанное в заголовке соединение получали, следуя методике, описанной для промежуточного соединения 3, стадия 2 из метилового эфира 3-[3-(2-хлор-5-гидроксиметил-фенил)-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил]-бензойной кислоты в виде твердого вещества коричневого цвета (2.5 г, 93%). ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆): δ 7.97 (s, 1Н), 7.94-7.90 (m, 1Н), 7.77-7.73 (m, 1Н), 7.66-7.64 (m, 4Н), 7.50-7.45 (m, 2Н), 7.15 (d, J=1.68 Гц, 1H), 7.13-7.09 (m, 3Н), 5.38 (s, 2Н), 4.82 (s, 2Н), 3.83 (s, 3Н), 2.27 (s, 3Н).

Промежуточное соединение 19: метиловый эфир 3-(6-оксо-3-{1-[2-(толуол-4-сульфонилокси)-этил]-1Н-пиразол-4-ил}-6Н-пиридазин-1-илметил)-бензойной кислоты

Стадия 1: Образование метилового эфира 3-{3-[1-(2-гидрокси-этил)-1Н-пиразол-4-ил]-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил}бензойной кислоты

Указанное в заголовке соединение получали, следуя методике, описанной для промежуточного соединения 11, стадия 1 из метилового эфира 3-(3-хлор-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил)-бензойной кислоты и 2-[4-(4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)-пиразол-1-ил]-этанола (приобретен у Ark Pharma) в виде твердого вещества бледно-желтого цвета (2.5 г, 65%). ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆): δ 8.22 (s, 1Н), 7.94-7.88 (m, 2Н), 7.86-7.82 (m, 2Н), 7.61 (d, J=7.76 Гц, 1H), 7.50 (t, J=7.68 Гц, 1Н), 7.04 (d, J=9.64 Гц, 1Н), 5.31 (s, 2Н), 4.93 (s, 1Н), 4.16 (t, J=5.52 Гц, 2Н), 3.89 (s, 3Н), 3.74-3.72 (m, 2Н). ЖХ/МС: (метод А) 355.2 (М+Н), КТ. 2.89 мин, 69.8% (макс.).

Стадия 2: Образование метилового эфира 3-(6-оксо-3-{1-[2-(толуол-4-сульфонилокси)-этил]-1Н-пиразол-4-ил}-6Н-пиридазин-1-илметил)-бензойной кислоты

Указанное в заголовке соединение получали, следуя методике, описанной для промежуточного соединения 3, стадия 2 из метилового эфира 3-{3-[1-(2-гидрокси-этил)-1Н-пиразол-4-ил]-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил}-бензойной кислоты в виде коричневой смолы (3 г, 70%). ЖХ/МС: (метод А) 509.2 (М+Н), КТ. 4.38 мин.

Промежуточное соединение 20: [4-Метокси-3-(4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)-фенил]-метанол

Указанное в заголовке соединение получали, следуя методике, описанной для промежуточного соединения 10 (без флеш-хроматографии) из (3-бром-4-метокси-фенил)-метанола в виде коричневой смолы (2.0 г, 35%). Соединение применяли в следующей стадии без дополнительной очистки.

Промежуточное соединение 21: метиловый эфир 3-[3-(5-бромметил-2-метокси-фенил)-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил]-бензойной кислоты

Стадия 1: метиловый эфир 3-[3-(5-гидроксиметил-2-метокси-фенил)-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил]-бензойной кислоты

Указанное в заголовке соединение получали, следуя методике, описанной для промежуточного соединения 11, стадия 1 из метилового эфира 3-(3-хлор-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил)-бензойной кислоты (2.1 г, 7.57 ммоль) и [4-метокси-3-(4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)-фенил]-метанола в виде твердого вещества желтого цвета (2.6 г, 92%). ЖХ/МС: (метод А) 381.0(М+Н), КТ. 3.5 мин, 73.8% (макс.).

Стадия 2: метиловый эфир 3-[3-(5-бромметил-2-метокси-фенил)-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил]-бензойной кислоты

Указанное в заголовке соединение получали, следуя методике, описанной для промежуточного соединения 2, стадия 2 из метилового эфира 3-[3-(5-гидроксиметил-2-метокси-фенил)-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил]-бензойной кислоты в виде твердого вещества желтого цвета (1.5 г, 51%). ЖХ/МС: (метод А) 443.0 (М+Н), КТ. 4.9 мин, 69.5% (макс.).

Промежуточное соединение 22: метиловый эфир 3-[3-(2-оксиранил-этокси)-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил]-бензойной кислоты

Стадия 1: метиловый эфир 3-(3-бут-3-енилокси-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил)-бензойной кислоты

Раствор из метилового эфира 3-(3-хлор-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил)-бензойной кислоты (0.75 г, 2.69 ммоль), бут-3-ен-1-ола (0.3 г, 4.04 ммоль), ацетата палладия (30 мг, 0.13 ммоль) и карбоната цезия (1.3 г, 4.04 ммоль) в толуол/ацетонитриле (8:2, 10 мл) в запечатанной пробирке промывали струей при помощи азота в течение 20 мин, прежде чем добавить рацемический-2-ди-t-бутилфосфино-1,1'-бинафтил, TrixiePhos (0.10 г, 0.26 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 100°C в течение 10 ч., охлаждали до КТ и фильтровали через прокладку из целита. Целит промывали при помощи дихлорметан/метанола, и фильтрат концентрировали под сниженным давлением. Очищение колоночной флеш-хроматографией на силикагеле обеспечивало указанное в заголовке соединение в виде масла желтого цвета (650 мг, 77%). ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 7.91 (s, 1Н), 7.88 (d, J=7.68 Гц, 1Н), 7.58 (d, J=7.72 Гц, 1Н), 7.50 (t, J=7.64 Гц, 1Н), 7.19 (d, J=9.76 Гц, 1Н), 6.99 (d, J=9.76 Гц, 1Н), 5.84-5.77 (m, 1Н), 5.16 (s, 2Н), 5.11-5.02 (m, 2Н), 4.12 (t, J=6.64 Гц, 2Н), 3.83 (s, 3Н), 2.44-2.39 (m, 2Н). ЖХ/МС: (метод А) 315 (М+Н), КТ. 4.4 мин, 91.5% (макс.), 91.7% (220 нм).

Стадия 2: 3-[3-(2-оксиранил-этокси)-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил]-бензойной кислоты метиловый эфир

3-Хлорпероксибензойную кислоту (892 мг, 3.10 ммоль) добавляли к раствору метилового эфира 3-(3-бут-3-енилокси-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил)-бензойной кислоты (650 мг, 2.06 ммоль) в сухом ДХМ (10 мл), поддерживаемом при 0°С. Реакционную смесь нагревали до КТ и перемешивали в течение 14 ч. Ее разбавляли и промывали посредством 10%-ного раствора двууглекислого натрия (2×10 мл), водой (2×10 мл) и рассолом (2×10 мл). Объединенные органические слои высушивали над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали. Очищение колоночной флеш-хроматографией на силикагеле обеспечивало указанное в заголовке соединение в виде масла бежевого цвета (550 мг, 80%). ¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 7.91 (s, 1Н), 7.89-7.87 (m, 1Н), 7.58 (d, J=7.72 Гц, 1H), 7.50 (t, J=7.60 Гц, 1Н), 7.21 (d, J=9.76 Гц, 1Н), 7.00 (d, J=9.72 Гц, 1H), 5.16 (s, 2Н), 4.18 (t, J=6.24 Гц, 2Н), 3.82 (s, 3Н), 3.01-2.98 (m, 1Н), 2.69-2.66 (m, 1Н), 2.47-2.45 (m, 1Н), 1.94-1.93 (m, 1Н), 1.92-1.91 (m, 1Н). ЖХ/МС: (метод А) 331.0 (М+Н), КТ. 4.7 мин, 71.2% (макс.).

Промежуточное соединение 23: (2-метокси-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)метанол

Указанное в заголовке соединение получали, следуя методике, описанной для промежуточного соединения 10 из (5-бром-2-метокси-фенил)-метанола в виде жидкости коричневого цвета (5g, 81%). ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆): δ 7.72 (s, 1Н), 7.54 (dd, J=8.1, 1.5 Гц, 1Н), 6.93 (d, J=8.2 Гц, 1Н), 5.01 (t, J=5.5 Гц, 1Н), 4.46 (d, J=4.7 Гц, 2Н), 3.78 (s, 3Н), 1.27 (s, 12Н).

Промежуточное соединение 24: метиловый эфир 3-{3-[4-метокси-3-(толуол-4-сульфонилоксиметил)-фенил]-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил}-бензойной кислоты

Стадия 1: метиловый эфир 3-[3-(3-гидроксиметил-4-метокси-фенил)-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил]-бензойной кислоты

Указанное в заголовке соединение получали, следуя методике, описанной для промежуточного соединения 2, стадия 1 из метилового эфира 3-(3-хлор-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил)-бензойной кислоты и (2-метокси-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)метанола в виде твердого вещества бежевого цвета (1.5 г, 37%). ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆): δ 8.02 (d, J=9.8 Гц, 1H), 7.95 (s, 1Н), 7.91-7.87 (m, 2Н), 7.75 (dd, J=5.4, 2.4 Гц, 1Н), 7.62 (d, J=7.7 Гц, 1H), 7.51 (t, J=7.7 Гц, 1H), 7.09-7.03 (m, 2Н), 5.38 (s, 2Н), 5.11 (t, J=5.7 Гц, 1Н), 4.51 (d, J=5.6 Гц, 2Н), 3.83 (s, 6Н). ЖХ/МС: (метод А) 381.0 (М+Н), КТ. 3.7 мин, 92.1% (макс.), 96.8% (254 нм).

Стадия 2: метиловый эфир 3-{3-[4-метокси-3-(толуол-4-сульфонилоксиметил)-фенил]-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил}-бензойной кислоты

Указанное в заголовке соединение получали, следуя методике, описанной для промежуточного соединения 3, стадия 2 из метилового эфира 3-[3-(3-Гидроксиметил-4-метокси-фенил)-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил]-бензойной кислоты в виде твердого вещества коричневого цвета (1.5 г, 75%). ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСO-d₆): δ 8.09-8.01 (m, 2Н), 7.96-7.90 (m, 2Н), 7.88 (d, J=10.3 Гц, 1Н), 7.66 (d, J=10.3 Гц, 1Н), 7.52 (d, J=10.3 Гц, 1Н), 7.48-7.44 (m, 2Н), 7.28 (d, J=11.8 Гц, 1Н), 7.14-7.07 (m, 3Н), 5.38 (s, 2Н), 4.45 (s, 2Н), 3.90 (s, 3Н), 3.83 (s, 3Н), 2.26 (s, 3Н).

Промежуточное соединение 25: 6-(3-Гидроксиметил-пиперидин-1-ил)-2Н-пиридазин-3-он

Смесь из [1-(6-хлор-пиридазин-3-ил)-пиперидин-3-ил]-метанола (приобретен у Activate Scientific; 25 г; 0.11 моль; 1.00 экв.) и ацетата калия (33 г; 0.33 моль; 3.00 экв.) в уксусной кислоте (75 мл) нагревали в микроволновом реакторе в течение 10 мин при 200°C (примечание: 3 г × 10 партий). После завершения реакции, растворитель удаляли под сниженным давлением. Полученный остаток разбавляли с водой (500 мл) и экстрагировали при помощи дихлорметан (10×200 мл). Объединенные экстракты промывали водой (200 мл), раствором рассола (200 мл) и высушивали над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением промежуточного соединения 6-(3-(гидроксиметил)пиперидин-1-ил)пиридазин-3-ил ацетат. Его растворяли в ТГФ (75 мл), МеОН (50.00 мл) и добавляли воду (25.00 мл), гидроксид натрия (13.2 г; 0.33 моль; 3.00 экв.), и реакционную смесь нагревали при 70°C в течение 1 ч. Растворитель удаляли под сниженным давлением и остаток разбавляли с водой (200 мл), подкисляли лимонной кислотой (10% раствор) до рН=2-3 и экстрагировали в дихлорметане (5×200 мл). Объединенные органические фазы промывали раствором рассола (200 мл), высушивали над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением указанного в заголовке соединения в виде коричневой смолы (20 г, 87%). ЖХ/МС: (метод А) 210.2 (М+Н), КТ.2.5 мин, 79.3% (макс.).

Промежуточное соединение 26: метиловый эфир 3-[3-(3-оксиранил-пиперидин-1-ил)-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил]-бензойной кислоты

Стадия 1: метиловый эфир 3-[3-(3-гидроксиметил-пиперидин-1-ил)-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил]-бензойной кислоты

Раствор из 6-(3-гидроксиметил-пиперидин-1-ил)-2Н-пиридазин-3-она (20 г; 95.58 ммоль; 1.00 экв.), карбоната цезия (31.5 г; 95.6 ммоль; 1.00 экв.) и метилового эфира 3-бромметил-бензойной кислоты (21.9 г; 95.6 ммоль; 1.00 экв.) в 1-метил-пирролидин-2-оне (100 мл) перемешивали при КТ в течение 16 ч. Затем реакционную смесь обрабатывали ледяной холодной водой (500 мл) и экстрагировали при помощи этилацетата (4×250 мл). Объединенные органические фазы промывали водой (3×200 мл), раствором рассола (2×100 мл), высушивали над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали. Очищение флеш-хроматографией на силикагеле (EtOAc:МеОН, 99:1) обеспечивало указанное в заголовке соединение в виде желтой смолы (16 г, 41%). ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆): δ 7.90 (s, 1Н), 7.86 (dd, J=10.5, Гц, 1Н), 7.57 (d, J=7.8 Гц, 1Н), 7.49-6.50 (m, 2Н), 5.13 (s, 2Н), 4.30 (s, 1H), 3.80-3.77 (m, 4Н), 3.73-3.54 (m, 1Н), 3.29-3.16 (m, 2Н), 2.69-2.40 (m, 1H), 2.16 (t, J=8.12 Гц, 1H), 1.94-1.82 (m, 1Н), 1.70-1.62 (m, 3Н), 1.55-1.40 (m, 1Н), 1.18-1.09 (m, 1Н). ЖХ/МС: (метод А) 358.3 (М+Н), КТ.3.4 мин, 88.2% (макс.). 88.6% (254 нм).

Стадия 2: метиловый эфир 3-[3-(3-формил-пиперидин-1-ил)-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил]-бензойной кислоты

К перемешанному раствору из метилового эфира 33-(3-гидроксиметил-пиперидин-1-ил)-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил]-бензойной кислоты (16 г; 39.39 ммоль; 1.00 экв.) в ДМХ (320 мл) медленно добавляли 1,1,1-трис(ацетилокси)-1,1-дигидро-1,2-бензйодоксол-3-(1Н)-он (25.8 г; 59.1 ммоль; 1.50 экв.). Реакционную смесь затем перемешивали в течение 2 ч. при КТ и гасили при помощи нас. раствора тиосульфата натрия (100 мл). Водную фазу экстрагировали при помощи ДХМ (3×250 мл). Объединенные органические фазы промывали водой (2×200 мл), раствором рассола (2×100 мл), высушивали над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали. Очищение флеш-хроматографией на силикагеле (ДХМ: МеОН, 99:1) обеспечивало указанное в заголовке соединение в виде желтого масла (16 г, 36%). ЖХ/МС: (метод А) 356.0 (М+Н), КТ.3.5 мин, 71.9% (макс.), 80.2% (254 нм).

Стадия 3: метиловый эфир 3-[3-(3-оксиранил-пиперидин-1-ил)-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил]-бензойной кислоты

Триметилсульфоксония йодид (5.05 г; 22.4754 ммоль; 1.50 экв.) добавляли к суспензии гидрида натрия (0.90 г; 22.48 ммоль; 1.50 экв.) в ДМСО (112.5 мл) при 0°С. Реакционную смесь перемешивали в течение 1 ч., прежде чем добавить раствор из метилового эфира 3-[3-(3-формил-пиперидин-1-ил)-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил]-бензойной кислоты (7.50 г; 15 ммоль; 1.00 экв.) в ДМСО (37.5 мл). Полученную смесь перемешивали при КТ в течение 4 ч. и гасили при помощи холодной воды (250 мл). Затем ее экстрагировали при помощи этилацетата (5×250 мл). Объединенные органические фазы промывали водой (3×200 мл), раствором рассола (2×100 мл), высушивали над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали. Очищение флеш-хроматографией на силикагеле (ДХМ : МеОН, 99:1) обеспечивало указанное в заголовке соединение в виде смолы коричневого цвета (2 г, 13%). ЖХ/МС: (метод А) 370.0 (М+Н), КТ.5.2 мин, 36.0% (макс.).

Промежуточное соединение 27: метиловый эфир 3-[1-(3-хлор-6-оксо-6Н-пиридазин-1-ил)-пропил]-бензойной кислоты

Стадия 1: метиловый эфир 3-(1-гидрокси-пропил)-бензойной кислоты

Боргидрид натрия (1.49 г; 38.5 ммоль; 1.30 экв.) добавляли к перемешанному раствору из метилового эфира 3-пропионил-бензойной кислоты (5.70 г; 29.65 ммоль; 1.00 экв.) в сухом метаноле (114 мл) при 0°C, реакционную смесь доводили снова до КТ и перемешивали в течение 16 ч. Ее гасили добавлением воды (50 мл), метанол удаляли под сниженным давлением и остаток растворяли дихлорметане (100 мл). Органическую фазу промывали водой (3×50 мл), рассолом (2×50 мл), высушивали над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали. Очищение флеш-хроматографией на силикагеле (EtOAc : петр. эфир, 20:80) обеспечивало указанное в заголовке соединение в виде масла желтого цвета (3.0 г, 52%). ¹Н ЯМР:(400 МГц, ДМСО-d6): δ 7.93 (s, 1Н), 7.82-7.80 (m, 1H), 7.57 (d, J=7.7 Гц, 1H), 7.45 (t, J=7.6 Гц, 1H), 5.28 (d, J=4.4 Гц, 1H), 4.52 (q, J=6.2 Гц, 1H), 3.84 (s, 3H), 1.64-1.57 (m, 2H), 0.80 (t, J=7.3 Гц, 3Н).

Стадия 2: метиловый эфир 3-(1-бром-пропил)-бензойной кислоты

Трибромид фосфора (1.32 мл; 13.9 ммоль; 0.90 экв.) добавляли к перемешанному раствору из метилового эфира 3-(1-гидрокси-пропил)-бензойной кислоты (3.0 г; 15.44 ммоль; 1.00 экв.) в сухом ДХМ (30 мл) при 0°C под атмосферой N₂. Реакционную смесь перемешивали при КТ в течение 2 ч., затем выливали на холодный нас. раствор NaHCO₃ (100 мл), нагревали до КТ и экстрагировали при помощи ДХМ (3×50 мл). Объединенные органические слои промывали рассолом (2×50 мл), высушивали над безводн. Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали под сниженным давлением с получением указанного в заголовке соединения в виде масла коричневого цвета (2.62 г, 66%). 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 8.02 (s, 1Н), 7.90-7.88 (m, 1H), 7.76 (dd, Jl=7.8, J2=1.2 Гц, 1H), 7.53 (t, J=7.8 Гц, 1H), 5.32 (t, J=6.8 Гц, 1H), 3.86 (s, 3H), 2.25-2.20 (m, 1H), 2.16-2.09 (m, 1H), 0.92 (t, J=7.2 Гц, 3Н).

Стадия 3: метиловый эфир 3-[1-(3-хлор-6-оксо-6Н-пиридазин-1-ил)-пропил]-бензойной кислоты

Указанное в заголовке соединение получали, следуя методике, описанной для промежуточного соединения 26, стадия 1 из метилового эфира 6хлор-пиридазин-3-ола (1.34 г; 10.19 ммоль; 1.00 экв.) и 3-(1-бром-пропил)-бензойной кислоты (2.62 г; 10.2 ммоль; 1.00 экв.) в виде смолы коричневого цвета. (2.50 г, 77%). 1Н ЯМР (400 МГц, ДMCO-d6): δ 7.93 (s, 1Н), 7.90-7.87 (m, 1H), 7.63 (d, J=7.8 Гц, 1H), 7.56-7.50 (m, 2H), 7.06 (d, J=9.7 Гц, 1H), 5.95-5.91 (m, 1H), 3.84 (s, 3H), 2.23-2.17 (m, 1H), 2.11-2.04 (m, 1H), 0.81 (t, J=7.2 Гц, 3Н). ЖХ/МС: (метод А) 307.0 (М+Н), КТ. 4.5 мин, 97.0% (макс.), 98.0% (254 нм).

Промежуточное соединение 28: метиловый эфир 3-{1-[3-(3-бромметил-фенил)-6-оксо-6Н-пиридазин-1-ил]-пропил}-бензойной кислоты

Стадия 1: метиловый эфир 3-{1-[3-(3-гидроксиметил-фенил)-6-оксо-6Н-пиридазин-1-ил]-пропил}-бензойной кислоты:

К быстро дегазированному раствору из метилового эфира 3-[1-(3-Хлор-6-оксо-6Н-пиридазин-1-ил)-пропил]-бензойной кислоты (2.50 г; 7.91 ммоль; 1.00 экв.) в смеси из 1,2-диметокси-этана (25 мл) и воды (5 мл) добавляли 3-(гидроксиметил)фенилбороновую кислоту (1.44 г; 9.49 ммоль; 1.20 экв.), карбонат натрия (2.57 г; 23.7 ммоль; 3.00 экв.) и дихлорид бис(трифенилфосфин)палладия(II) (2.83 г; 3.95 ммоль; 0.50 экв.). После этого реакционную смесь нагревали при 110°C в течение 5 ч. в запечатанной пробирке. Затем ее охлаждали до КТ и фильтровали через прокладку из целита. Целит промывали при помощи МеОН/CHCl3 (1:1, 50 мл). Фильтрат концентрировали под сниженным давлением, разбавляли с ДХМ (100 мл), промывали водой (3×50 мл) и (2×50 мл) раствором рассола, высушивали над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением указанного в заголовке соединения в виде коричневой смолы (3.2 г, 82%). ЖХ/МС: (метод А) 379.0 (М+Н), КТ. 4.1 мин, 77.0% (макс.), 88.0% (254 нм).

Стадия 2: метиловый эфир 3-{1-[3-(3-бромметил-фенил)-6-оксо-6Н-пиридазин-1-ил]-пропил}-бензойной кислоты

Указанное в заголовке соединение получали, следуя методике, описанной для промежуточного соединения 27, стадия 2 из метилового эфира 3-{1-[3-(3-гидроксиметил-фенил)-6-оксо-6Н-пиридазин-1-ил]-пропил}-бензойной кислоты (3.20 г; 6.5 ммоль; 1.00 экв) в виде твердого вещества не совсем белого цвета (1.90 г, 64%). 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 8.10 (s, 1Н), 8.04 (t, J=9.7 Гц, 2Н), 7.89 (d, J=7.7 Гц, 2Н), 7.75 (d, J=7.8 Гц, 1H), 7.57-7.51 (m, 3Н), 7.08 (d, J=9.8 Гц, 1Н), 6.10 (t, J=6.7 Гц, 1Н), 4.80 (s, 2Н), 3.85 (s, 3Н), 2.42-2.33 (m, 1Н), 2.23-2.16 (m, 1H), 0.86 (t, J=7.20 Гц, 3Н). ЖХ/МС: (метод А) 441.0 (М+Н), КТ. 5.3 мин, 97.0% (макс.), 98.0% (254 нм).

Пример 1: 8,15,17,25,29-пентаазагексацикло[23.3.1.1^2,61^19,230^8,160^9,14]гентриаконта-1(29),2(31),3,5,9(14),10,12,15,19(30),20,22,27-додекаен-18,26-дион

Стадия 1: Метил 3-((3-(3-((2-амино-1Н-бензо[d]имидазол-1-ил)метил)фенил)-6-оксопиридазин-1(6Н)-ил)метил)бензоат

Раствор из метил 3-((3-(3-(бромметил)фенил)-6-оксопиридазин-1(6Н)-ил)метил)бензоата (0.5 г, 1.2 ммоль), карбоната калия (0.5 г, 3.6 ммоль) и 2-амино-банзимидазола (0.05 г, 0.3 ммоль) в ДМФ (10 мл) нагревали при 75°C в течение 12 ч. Растворитель удаляли под сниженным давлением и остаток обрабатывали водой. Водную фазу экстрагировали при помощи этилацетат (3×15 мл) и объединенные органические фазы высушивали над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали. Очищение флеш-хроматографией на силикагеле полученного твердого вещества обеспечивало указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества коричневого цвета (200 мг, 35%). ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆): δ 8.00 (d, J=9.76 Гц, 1Н), 7.97 (s, 1Н), 7.89 (td, J=7.64, 1.52 Гц, 1Н), 7.84 (s, 1Н), 7.75 (d, J=8.08 Гц, 1Н), 7.60-7.58 (m, 1H), 7.53 (t, J=7.68 Гц, 1Н), 7.42 (t, J=7.76 Гц, 1H), 7.19-7.07 (m, 4Н), 6.92 (dt, J=7.66, 1.08 Гц, 1Н), 6.84-6.80 (m, 1Н), 6.62 (br s, 2Н), 5.40 (s, 2Н), 5.32 (s, 2Н), 3.83 (s, 3Н). ЖХ/МС: (метод А) 466.2 (М+Н), КТ. 3.6 мин, 88.0% (макс.).

Стадия 2: 3-((3-(3-((2-амино-1Н-бензо[d]имидазол-1-ил)метил)фенил)-6-оксопиридазин-1(6Н)-ил)метил)бензоат лития

Раствор из метил 3-((3-(3-((2-амино-1Н-бензо[d]имидазол-1-ил)метил)фенил)-6-оксопиридазин-1(6Н)-ил)метил)бензоата (195 мг, 0.4 ммоль) и моногидрата гидроксида лития (34 мг, 0.8 ммоль) в ТГФ : вода (10 мл, 1:2) перемешивали при КТ в течение 12 ч. Растворители удаляли под сниженным давлением и остаток подвергали азеотропной перегонке с толуолом с получением указанного в заголовке соединения в виде твердого вещества не совсем белого цвета (150 мг, 78%). ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆): δ 7.99-7.92 (m, 3Н), 7.74 (t, J=8.36 Гц, 2Н), 7.40 (t, J=7.80 Гц, 1Н), 7.27-7.18 (m, 3Н), 7.14-7.06 (m, 2Н), 6.91 (t, J=7.12 Гц, 1Н), 6.81 (t, J=7.60 Гц, 1H), 6.73 (s, 1H), 6.63 (br s, 2Н), 5.33 (s, 2Н), 5.26 (s, 2Н). ЖХ/МС: (метод А) 452.2 (М+Н), КТ. 3.1 мин, 85.6% (макс.).

Стадия 3: Образование 8,15,17,25,29-пентаазагексацикло [23.3.1.1^2,61^19,230^8,160^9,14]гентриаконта-1(29),2(31),3,5,9(14),10,12,15,19(30),20,22,27-додекаен-18,26-диона

N-метилморфолин (0.34 мл, 13.4 ммоль) добавляли к раствору из 3-((3-(3-((2-амино-1Н-бензо[d]имидазол-1-ил)метил)фенил)-6-оксопиридазин-1(6Н)-ил)метил)бензоата лития (150 мг, 0.33 ммоль) в ДМФ (33 мл), поддерживаемый при 0°С. Затем добавляли 1-гидрокси бензотриазол (49 мг, 0.36 ммоль) и HBTU (144 мг, 0.38 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 15 ч. Ее гасили добавлением воды и растворитель удаляли под сниженным давлением. Полученное твердое вещество отфильтровывали, промывали водой и очищали колоночной хроматографией на силикагеле с получением указанного в заголовке соединения в виде твердого вещества не совсем белого цвета (22 мг, 26%). ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆): δ 12.65 (br s, 1H), 9.44 (s, 2H), 8.01-7.85 (m, 3Н), 7.84 (d, J=7.2 Гц, 1H), 7.66 (d, J=6.8 Гц, 1H), 7.57 (d, J=7.1 Гц, 1H), 7.49-7.42 (m, 3H), 7.31 (t, J=7.9 Гц, 1H), 7.21 (t, J=7.8 Гц, 1H), 6.99 (d, J=9.6 Гц, 1H), 5.41 (s, 4H). ЖХ/МС: (метод A) 434.2 (M+H), KT. 4.1 мин, 95.7% (макс.), 95.7% (254 нм). ВЭЖХ: (метод А) КТ 4.3 мин, 94.8% (макс.), 95.7% (254 нм).

Пример 2: 6,14,16,23,32-пентаазагексацикло[24.3.1.1^2,6.1^8,12.0^15,23.0^17,22]дотриаконта-1(30),2(32),3,8,10,12(31),15,17(22),18,20,26,28-додекаен-5,13-дион

Стадия 1: метиловый эфир 3-(3-{3-[2-(2-амино-бензимидазол-1-ил)-этил]-фенил}-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил)-бензойной кислоты

2-Аминобензимидазол (0.385 г, 2.89 ммоль) добавляли поверх суспензии гидрида натрия (60% дисперсия в минеральном масле, 138 мг, 3.47 ммоль) в ДМФ (10 мл). Реакционную смесь нагревали при 60°C в течение 30 мин. В это время по каплям добавляли раствор из метилового эфира 3-(6-оксо-3-{3-[2-(толуол-4-сульфонилокси)-этил]-фенил}-6Н-пиридазин-1-илметил)-бензойной кислоты (1.5 г, 2.89 ммоль) в ДМФ (10 мл), и реакционную смесь нагревали при 100°C в течение 12 ч. ДМФ удаляли под сниженным давлением, полученный остаток обрабатывали водой и экстрагировали при помощи этилацетата (3×15 мл). Объединенные органические фазы высушивали над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали. Очищение данного сырого продукта флеш-хроматографией на силикагеле обеспечивало указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества желтого цвета (1.5 г, 41%). ЖХ/МС: (метод А) 480.3 (М+Н), КТ.3.75 мин.

Стадия 2: Образование 3-(3-{3-[2-(2-Амино-бензимидазол-1-ил)-этил]-фенил}-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил)-бензоата лития

Указанное в заголовке соединение получали, следуя методике, описанной для примера 1, стадия 2 в виде твердого вещества желтого цвета (1.4 г, 98%). ЖХ/МС: (метод А) 466.2 (М+Н), КТ.3.28 мин.

Стадия 3: Образование 6,14,16,23,32-пентаазагексацикло [24.3.1.^12,6.1^8,12.0^15,23.0^17,22]дотриаконта-1(30),2(32),3,8,10,12(31),15,17(22),18,20,26,28-додекаен-5,13-диона

Указанное в заголовке соединение получали, следуя методике, описанной для примера 1, стадия 3 в виде твердого вещества не совсем белого цвета (300 мг, 33%). ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆): δ 12.78 (s, 1Н), 9.10 (s, 1H), 8.46 (s, 1Н), 8.04 (d, J=8.1 Гц, 1Н), 7.95 (d, J=9.6 Гц, 1Н), 7.71(t, J=7.6 Гц, 2Н), 7.56 (d, J=7.9 Гц, 2Н), 7.47-7.36 (m, 3Н), 7.32-7.25 (m, 2Н), 7.05 (d, J=9.8 Hz, 1Н), 5.38 (s, 2H), 4.68 (d, J=6.9 Гц, 2H) 3.04 (s, 2H). ЖХ/МС: (метод A) 448.2 (M+H), KT.4.52 мин, 95.94% (макс.), 93.93% (254 нм). ВЭЖХ: (метод А) КТ. 4.53 мин, 94.06% (макс.), 94.0% (254 нм).

Пример 3а и 3b: 2-{18,26-диоксо-8,15,17,25,29-пентаазагексацикло[23.3.1.1^2,6.1^19,23.0^8,16.0^9,14]гентриаконта-1(29),2(31),3,5,9(14),10,12,15,19(30),20,22,27-додекаен-11-ил}-N,N-диметилацетамид и 2-{18,26-диоксо-8,15,17,25,29-пентаазагексацикло[23.3.1.1^2,6.1^19,23.0^8,16.0^9,14]гентриаконта-1(29),2(31),3,5,9(14),10,12,15,19(30),20,22,27-додекаен-12-ил}-N,N-диметилацетамид

Стадия 1: Образование метилового эфира 3-{3-[3-(2-амино-6-диметилкарбамоилметил-бензимидазол-1-илметил)-фенил]-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил}-бензойной кислоты и метилового эфира 3-{3-[3-(2-амино-5-диметилкарбамоилметил-бензимидазол-1-илметил)-фенил]-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил}-бензойной кислоты

Указанные в заголовке соединения получали из метил 3-((3-(3-(бромметил)фенил)-6-оксопиридазин-1(6Н)-ил)метил)бензоата и 2-(2-амино-1Н-бензо[d]имидазол-5-ил)-N,N-диметилацетамида в виде смеси из региоизомеров следуя процедуре, описанной для примера 1, стадия 1 в виде твердого вещества коричневого цвета (500 мг, 34%). ЖХ/МС: (метод А) 551.2 (М+Н), КТ.3.31,3.39 мин.

Стадия 2: Образование 3-{3-[3-(2-амино-6-диметилкарбамоилметил-бензимидазол-1-илметил)-фенил]-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил}-бензоата лития и 3-{3-[3-(2-амино-5-диметилкарбамоилметил-бензимидазол-1-илметил)-фенил]-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил}-бензоата лития

Указанные в заголовке соединения получали из смеси метилового эфира 3-{3-[3-(2-амино-6-диметилкарбамоилметил-бензимидазол-1-илметил)-фенил]-6-оксо 6Н-пиридазин-1-илметил}-бензойной кислоты и метилового эфира 3-{3-[3-(2-амино-5-диметилкарбамоилметил-бензимидазол-1-илметил)-фенил]-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил}-бензойной кислоты в виде смеси из региоизомеров следуя процедуре, описанной для примера 1, стадия 2 в виде твердого вещества желтого цвета (500 мг, 98%). ЖХ/МС: (метод А) 537.3 (М+Н), КТ.2.81, 2.90 мин.

Стадия 3: Образование 2-{18,26-диоксо-8,15,17,25,29-пентаазагексацикло[23.3.1.1^2,6.1^19,23.0^8,16.0^9,14]гентриаконта-1(29),2(31),3,5,9(14),10,12,15,19(30),20,22,27-додекаен-11-ил}-N,N-диметилацетамид и 2-{18,26-диоксо-8,15,17,25,29-пентаазагексацикло[23.3.1.1^2,6.1^19,23.0^8,16.0^9,14]гентриаконта-1(29),2(31),3,5,9(14),10,12,15,19(30),20,22,27-додекаен-12-ил}-N,N-диметилацетамида

Указанные в заголовке соединения получали из смеси 3-{3-[3-(2-Амино-6-диметилкарбамоилметил-бензимидазол-1-илметил)-фенил]-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил}-бензоата лития и 3-{3-[3-(2-амино-5-диметилкарбамоилметил-бензимидазол-1-илметил)-фенил]-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил}-бензоат лития в виде смеси из региоизомеров, следуя процедуре, описанной для примера 1, стадия 3 в виде твердого вещества не совсем белого цвета (57 мг, 15%).¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆): 400 МГц, ДМСО-d6: δ 12.59 (s, 1Н), 9.42 (s, 2H), 8.04-8.00 (m, 2H), 7.91-7.82 (m, 2H), 7.66-7.55 (m, 2H), 7.45-7.32 (m, 3Н), 7.10 (m, 1H), 6.99 (d, J=9.72 Гц, 1H), 5.42-5.38 (m, 4H), 3.84 (s, 2H), 3.08 (s, 3H), 2.87 (s, 3Н). ЖХ/МС: (метод A) 519.2 (M+H), KT.3.56,3.62 мин, ВЭЖХ: (метод A) КТ. 3.54,3.60 мин, 51.8,46.3% (макс.), 53.5,44.6% % (254 нм).

Два изомера разделяли посредством преп. ВЭЖХ с применением колонки Chiralpak (250×20 мм; 5u) с MeOH:ТГФ:DEA 80:20:0.1 в качестве элюента. Первое элюируемое соединение: 14.37 мин (экс. 3а); второе элюируемое соединение: 17.49 мин (экс. 3b).

Пример 4: 28-Метил-8,15,17,25,29-пентаазагексацикло [23.3.1.1^2,61^19,230^8,160^9,14]гентриаконта-1(29),2(31),3,5,9(14),10,12,15,19(30),20,22,27-додекаен-18,26-дион

Стадия 1: метиловый эфир 3-{3-[3-(2-амино-бензимидазол-1-илметил)-фенил]-4-метил-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил}-бензойной кислоты

Указанное в заголовке соединение получали, следуя методике, описанной для примера 1, стадия 1 из метилового эфира 3-[3-(3-бромметил-фенил)-4-метил-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил]-бензойной кислоты и 2-аминобензимидазола в виде твердого вещества коричневого цвета (300 мг, 27%). ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆): δ 7.93 (s, 1Н), 7.88 (d, J=1.60 Гц, 1Н), 7.55-7.52 (m, 2Н), 7.44-7.40 (m, 1Н), 7.36 (d, J=7.72 Гц, 1H), 7.30 (s, 1Н), 7.26 (d, J=7.60 Гц, 1H), 7.15 (d, J=7.72 Гц, 1Н), 7.11 (d, J=7.60 Гц, 1Н), 6.96-6.92 (m, 2Н), 6.84 (t, J=6.76 Гц, 1H), 6.69 (br s, 2Н), 5.32 (s, 2Н), 5.28 (s, 2Н), 3.83 (s, 3Н), 2.02 (s, 3Н). ЖХ/МС: (метод А) 480.2 (М+Н), КТ.3.62 мин, 90.12% (макс.).

Стадия 2: Образование 3-{3-[3-(2-амино-бензимидазол-1-илметил)-фенил]-4-метил-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил}-бензоата лития

Указанное в заголовке соединение получали, следуя методике, описанной для примера 1, стадия 2 в виде твердого вещества желтого цвета (300 мг, 98%). ЖХ/МС: (метод А) 466.2 (М+Н), КТ.3.24 мин.

Стадия 3: Образование 28-Метил-8,15,17,25,29-пентаазагексацикло[23.3.1.1^2,61^19,230^8.160^9,14]гентриаконта-1(29),2(31),3,5,9(14),10,12,15,19(30),20,22,27-додекаен-18,26-диона

Указанное в заголовке соединение получали, следуя методике, описанной для примера 2, стадия 3 из 3-{3-[3-(2-амино-бензимидазол-1-илметил)-фенил]-4-метил-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил}-бензоата лития в виде твердого вещества коричневого цвета (79 мг, 29%). ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆): δ 12.54 (s, 1Н), 9.30 (s, 1Н), 9.18 (s, 1Н), 8.00 (d, J=7.76 Гц, 1Н), 7.83-7.80 (m, 2Н), 7.73 (d, J=7.96 Гц, 1Н), 7.56 (d, J=7.36 Гц, 1Н), 7.47-7.43 (m, 3Н), 7.26 (t, J=7.52 Гц, 1Н), 7.19 (t, J=7.44 Гц, 1Н), 6.78 (s, 1Н), 5.36 (s, 4Н), 2.24 (s, 3Н). ЖХ/МС: (метод А) 448.2 (М+Н), КТ.3.94 мин, 94.78% (макс.), 95.53% (254 нм). ВЭЖХ: (метод А) КТ. 4.15 мин, 98.18% (макс.), 98.47% (254 нм).

Пример 5: 11,12-диметокси-8,15,17,25,29-пентаазагексацикло[23.3.1.1^2,6.1^19,23.0^8,16.0^9,14]гентриаконта-1(29),2(31),3,5,9(14),10,12,15,19(30),20,22,27-додекаен-18,26-дион

Стадия 1: Образование метилового эфира 3-{3-[3-(2-Амино-5,6-диметокси-бензимидазол-1-илметил)-фенил]-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил}-бензойной кислоты

Указанное в заголовке соединение получали, следуя методике, описанной для примера 1, стадия 1 из метил 3-((3-(3-(бромметил)фенил)-6-оксопиридазин-1(6Н)-ил)метил)бензоата и 5,6-диметокси-1Н-бензимидазол-2-амина в виде твердого вещества коричневого цвета (500 мг, 44%). ЖХ/МС: (метод А) 526.2 (М+Н), КТ.3.54 мин.

Стадия 2: Образование 3-{3-[3-(2-амино-5,6-диметокси-бензимидазол-1-илметил)-фенил]-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил}-бензоата лития

Указанное в заголовке соединение получали, следуя методике, описанной для примера 1, стадия 2 из метилового эфира 3-{3-[3-(2-амино-5,6-диметокси-бензимидазол-1-илметил)-фенил]-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил}-бензойной кислоты в виде твердого вещества коричневого цвета (500 мг, 98%). ЖХ/МС: (метод А) 512.3 (М+Н), КТ.3.05 мин.

Стадия 3: Образование 11,12-диметокси-8,15,17,25,29-пентаазагексацикло[23.3.1.1^2,6.1^19,23.0^8,16.0^9,14]гентриаконта-1(29),2(31),3,5,9(14),10,12,15,19(30),20,22,27-додекаен-18,26-диона

Указанное в заголовке соединение получали, следуя методике, описанной для примера 1, стадия 3 из 3-{3-[3-(2-амино-5,6-диметокси-бензимидазол-1-илметил)-фенил]-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил}-бензоата лития в виде твердого вещества желтого цвета (33 мг, 13%). ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆): δ 12.54 (s, 1Н), 9.41 (s, 2Н), 8.04-7.98 (m, 2Н), 7.83 (d, J=7.5 Гц, 1Н), 7.69 (d, J=5.9 Гц, 2Н), 7.54 (d, J=7.3 Гц, 1Н), 7.44-7.37 (m, 2Н), 7.14 (s, 1Н), 6.99 (d, J=9.7 Гц, 1Н), 5.40 (s, 4Н), 3.93 (s, 3Н), 3.74 (s, 3Н). ЖХ/МС: (метод А) 494.0 (М+Н), КТ. 3.63 мин, 95.04% (макс.), 95.74% (254 нм). ВЭЖХ: (метод А) КТ. 3.61 мин, 94.62% (макс.), 95.67% (254 нм).

Пример 6: 11,12-дифтор-8,15,17,25,29-пентаазагексацикло[23.3.1.1^2,6.1^19,23.0^8,16.0^9,14]гентриаконта-1(29),2(31),3,5,9(14),10,12,15,19(30),20,22,27-додекаен-18,26-дион

Стадия 1: метиловый эфир 3-{3-[3-(2-амино-5,6-дифтор-бензимидазол-1-илметил)-фенил]-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил}-бензойной кислоты

Указанное в заголовке соединение получали, следуя методике, описанной для примера 1, стадия 1 из метил 3-((3-(3-(бромметил)фенил)-6-оксопиридазин-1(6Н)-ил)метил)бензоата в виде твердого вещества коричневого цвета (400 мг, 24%). ЖХ/МС: (метод А) 502.3 (М+Н), КТ.4.13 мин.

Стадия 2: Образование 3-{3-[3-(2-амино-5,6-дифтор-бензимидазол-1-илметил)-фенил]-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил}-бензоата лития

Указанное в заголовке соединение получали, следуя методике, описанной для примера 1, стадия 2 из метилового эфира 3-{3-[3-(2-амино-5,6-дифтор-бензимидазол-1-илметил)-фенил]-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил}-бензойной кислоты (400 мг, 98%). ЖХ/МС: (метод А) 488.3 (М+Н), КТ.3.40 мин.

Стадия 3: Образование 11,12-дифтор-8,15,17,25,29-пентаазагексацикло [23.3.1.1^2,6.1^19,23.0^8,16.0^9,14]гентриаконта-1(29),2(31),3,5,9(14),10,12,15,19(30),20,22,27-додекаен-18,26-диона

Указанное в заголовке соединение получали, следуя методике, описанной для примера 1, стадия 3 из 3-{3-[3-(2-амино-5,6-дифтор-бензимидазол-1-илметил)-фенил]-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил}-бензоата лития в виде твердого вещества не совсем белого цвета (65 мг, 24%). ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆): δ 12.75 (s, 1Н), 9.41 (d, J=4.5 Гц, 2Н), 8.32 (m, 1Н), 8.04-7.99 (m, 2Н), 7.85 (d, J=7.7 Гц, 1H), 7.72 (d, J=7.5 Гц, 1H), 7.58 (d, J=7.5 Гц, 1Н), 7.46-7.40 (m, 3Н), 7.00 (d, J=9.6 Гц, 1H), 5.37 (s, 4Н). ЖХ/МС: (метод А) 470.0 (М+Н), КТ. 4.61 мин, 93.16% (макс.), 91.23% (254 нм). ВЭЖХ: (метод А) КТ. 4.53 мин, 93.7% (макс.), 93.2% (254 нм).

Пример 7: 4,8,15,17,25,29-гексаазагексацикло [23.3.1.1^2,6.1^19,23.0^8,16.0^9,14]гентриаконта-1(29),2(31),3,5,9(14),10,12,15,19(30),20,22,27-додекаен-18,26-дион

Стадия 1: метиловый эфир 3-{3-[5-(2-амино-бензимидазол-1-илметил)-пиридин-3-ил]-6-оксо-6Н-пиридазин-лилметил}-бензойной кислоты

Указанное в заголовке соединение получали, следуя методике, описанной для примера 2, стадия 1 из 2-аминобензимидазола и метилового эфира 3-{6-оксо-3-[5-(толуол-4-сульфонилоксиметил)-пиридин-3-ил]-6Н-пиридазин-1-илметил}-бензойной кислоты в виде твердого вещества бежевого цвета (400 мг, 30%). ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆): δ 8.97 (d, J=2.08 Гц, 1Н), 8.49 (d, J=1.96 Гц, 1Н), 8.13 (d, J=2.04 Гц, 1Н), 8.07 (d, J=9.80 Гц, 1Н), 7.96 (s, 1Н), 7.89 (d, J=7.60 Гц, 1H), 7.56-7.54 (m, 1H), 7.52-7.50 (m, 1Н), 7.21-7.15 (m, 3Н), 7.13 (s, 1Н), 7.01-6.97 (m, 1H), 6.90-6.86 (m, 2H), 5.39 (s, 2H), 5.34 (s, 2H), 3.83 (s, 3Н). ЖХ/МС: (метод A) 467.2 (М+Н), KT.3.03 мин, 80.03% (макс.), 84.1% (254 нм).

Стадия 2: Образование 3-{3-[5-(2-амино-бензимидазол-1-илметил)-пиридин-3-ил]-6-оксо-6Н-пиридазин-лилметил}-бензоата лития

Указанное в заголовке соединение получали, следуя методике, описанной для примера 1, стадия 2 из метилового эфира 3-{3-[5-(2-амино-бензимидазол-1-илметил)-пиридин-3-ил]-6-оксо-6Н-пиридазин-лилметил}-бензойной кислоты в виде твердого вещества бежевого цвета (400 мг, 98%). ЖХ/МС: (метод А) 453.3 (М+Н), КТ.2.63 мин, 83.32% (макс.), 69.3% (254 нм).

Стадия 3: Образование 4,8,15,17,25,29-гексаазагексацикло[23.3.1.1^2,6.1^19,23.0^8,16.0^9,14]гентриаконта-1(29),2(31),3,5,9(14),10,12,15,19(30),20,22,27-додекаен-18,26-диона

Указанное в заголовке соединение получали, следуя методике, описанной для примера 1, стадия 3 из 3-{3-[5-(2-амино-бензимидазол-1-илметил)-пиридин-3-ил]-6-оксо-6Н-пиридазин-лилметил}-бензоата лития в виде твердого вещества не совсем белого цвета (129 мг, 25%). ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆): δ 12.69 (s, 1Н), 9.78 (s, 1Н), 9.33 (s, 1Н), 9.07 (d, J=1.76 Гц, 1Н), 8.87 (s, 1H), 8.14 (d, J=9.72 Гц, 1Н), 8.05-8.00 (m, 2Н), 7.57 (d, J=7.24 Гц, 1Н), 7.48 (d, J=7.80 Гц, 1H), 7.42 (t, J=7.48 Гц, 1Н), 7.33 (t, J=7.84 Гц, 1Н), 7.22 (t, J=7.68 Гц, 1Н), 7.04 (d, J=9.68 Гц, 1Н), 5.47 (s, 4Н). ЖХ/МС: (метод А) 435.0 (М+Н), КТ.4.48 мин, 98.26% (макс.), 98.94% (254 нм). ВЭЖХ: (метод А) КТ. 3.00 мин, 97.8% (макс.), 97.8% (254 нм).

Пример 8: 3-Метил-8,15,17,25,29-пентаазагексацикло [23.3.1.1^2,61^19,230^8,160^9,14]гентриаконта-1(29),2(31),3,5,9(14),10,12,15,19(30),20,22,27-додекаен-18,26-дион

Стадия 1: Образование метилового эфира 3-{3-[5-(2-амино-бензимидазол-1-илметил)-2-метил-фенил]-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил}-бензойной кислоты

Указанное в заголовке соединение получали, следуя методике, описанной для примера 1, стадия 1 из метилового эфира -[3-(5-бромметил-2-метил-фенил)-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил]-бензойной кислоты и 2-амино-бензимидазола в виде твердого вещества желтого цвета (1.0 г, 47%). ЖХ/МС: (метод А) 480.2 (М+Н), КТ.3.79 мин.

Стадия 2: Образование 3-{3-[5-(2-амино-бензимидазол-1-илметил)-2-метил-фенил]-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил}-бензоата лития

Указанное в заголовке соединение получали, следуя методике, описанной для примера 1, стадия 2 из метилового эфира 3-{3-[5-(2-амино-бензимидазол-1-илметил)-2-метил-фенил]-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил}-бензойной кислоты в виде твердого вещества желтого цвета (100 мг, 98%). ЖХ/МС: (метод А) 466.3 (М+Н), КТ.3.32 мин.

Стадия 3: Образование 3-Метил-8,15,17,25,29-пентаазагексацикло [23.3.1.1^2,61^19,230^8,160^9,14]гентриаконта-1(29),2(31),3,5,9(14),10,12,15,19(30),20,22,27-додекаен-18,26-диона

Указанное в заголовке соединение получали, следуя методике, описанной для примера 1, стадия 3 из 3-{3-[5-(2-Амино-бензимидазол-1-илметил)-2-метил-фенил]-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил}-бензоата лития в виде твердого вещества не совсем белого цвета (19 мг, 13%). ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆): δ 12.52 (s, 1Н), 9.20 (s, 1Н), 9.09 (s, 1Н), 7.98 (d, J=7.84 Гц, 1Н), 7.80 (d, J=7.76 Гц, 1Н), 7.74 (d, J=9.60 Гц, 2Н), 7.59 (d, J=7.32 Гц, 1Н), 7.47-7.42 (m, 2Н), 7.31-7.23 (m, 2Н), 7.18 (t, J=7.48 Гц, 1H), 6.91 (d, J=9.68 Гц, 1Н), 5.38 (s, 4Н), 2.42 (s, 3Н). ЖХ/МС: (метод А) 448.0 (М+Н), КТ. 4.19 мин, 94.2% (макс.), 95.2% (254 нм).

Пример 9: 26-окса-6,14,16,23,33-пентаазагексацикло[25.3.1.1^2,6.1^8,12}0^15,23.0^17,22]тритриаконта-1(31),2(33),3,8,10,12(32),15,17,19,21,27,29-додекаен-5,13-дион

Стадия 1: Образование метилового эфира 3-(3-{3-[2-(2-амино-бензимидазол-1-ил)-этокси]-фенил}-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил)-бензойной кислоты

Указанное в заголовке соединение получали, следуя методике, описанной для примера 2, стадия 1 из 2-аминобензимидазола и метилового эфира 3-(6-оксо-3-{3-[2-(толуол-4-сульфонилокси)-этокси]-фенил}-6Н-пиридазин-1-илметил)-бензойной кислоты в виде твердого вещества коричневого цвета (1 г, 40%). ЖХ/МС: (метод А) 496.2 (М+Н), КТ. 3.8 мин.

Стадия 2: Образование 3-(3-{3-[2-(2-амино-бензимидазол-1-ил)-этокси]-фенил}-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил)-бензоата лития

Указанное в заголовке соединение получали, следуя методике, описанной для примера 1, стадия 2 из метилового эфира 3-(3-{3-[2-(2-амино-бензимидазол-1-ил)-этокси]-фенил}-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил)-бензойной кислоты в виде твердого вещества коричневого цвета (450 мг, 94/). ЖХ/МС: (метод А) 482.2 (М+Н), КТ. 3.3 мин.

Стадия 3: Образование 26-олкса-6,14,16,23,33-пентаазагексацикло [25.3.1.1^2,6.1^8,12}0^15,23.0^17,22]тритриаконта-1(31),2(33),3,8,10,12(32),15,17,19,21,27,29-додекаен-5,13-диона

Указанное в заголовке соединение получали, следуя методике, описанной для примера 1, стадия 3 из 3-(3-{3-[2-(2-амино-бензимидазол-1-ил)-этокси]-фенил}-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил)-бензоата лития в виде твердого вещества не совсем белого цвета (46 мг, 20%). ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 12.89 (s, 1Н), 8.89 (s, 1Н), 8.05 (d, J=7.76 Гц, 1Н), 7.95 (d, J=9.72 Гц, 1Н), 7.80 (s, 1Н), 7.66-7.63 (m, 2Н), 7.56 (d, J=6.72 Гц, 1Н), 7.50-7.42 (m, 3Н), 7.32-7.24 (m, 2Н), 7.11-7.04 (m, 2Н), 5.35 (s, 2Н), 4.64-4.60 (m, 2Н), 4.46-4.42 (m, 2Н). ЖХ/МС: (метод А) 464.0 (М+Н), КТ. 4.4 мин, 95.4% (макс.), 96.8% (254 нм). ВЭЖХ: (метод А) КТ 4.4 мин, 96.5% (макс.), 96.6% (254 нм).

Пример 10: 3-Фтор-8,15,17,25,29-пентаазагексацикло [23.3.1.1^2,61^19,230^8,160^9,14]гентриаконта-1(29),2(31),3,5,9(14),10,12,15,19(30),20,22,27-додекаен-18,26-дион

Стадия 1: Образование метил 3-((3-(5-((2-амино-1Н-бензо[d]имидазол-1-ил)метил)-2-фторфенил)-6-оксопиридазин-1(6Н)-ил)метил)бензоата

Раствор из метил 3-((3-(5-(бромметил)-2-фторфенил)-6-оксопиридазин-1(6Н)-ил)метил)бензоата (2 г, 4.65 ммоль), карбоната цезия (1.16 г, 3.6 ммоль) и 3-амино-бензимидазола (475 мг, 3.6 ммоль) в ДМФ (15 мл) нагревали при 120°C в течение 1 ч. ДМФ удаляли под сниженным давлением и реакционную смесь обрабатывали водой. Водную фазу экстрагировали при помощи этилацетат (3×15 мл), Объединенные органические фазы высушивали над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали. Очищение флеш-хроматографией на силикагеле полученного сырого продукта обеспечивало указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества не совсем белого цвета (600 мг, 27%). ЖХ/МС: (метод А) 484.0 (М+Н), КТ. 3.7 мин.

Стадия 2: Образование 3-{3-[5-(2-амино-бензимидазол-1-илметил)-2-фтор-фенил]-6-оксо-6-пиридазин-1-илметил}-бензоата лития

Указанное в заголовке соединение получали, следуя методике, описанной для примера 1, стадия 2 из метил 3-((3-(5-((2-амино-1Н-бензо[d]имидазол-1-ил)метил)-2-фторфенил)-6-оксопиридазин-1(6Н)-ил)метил)бензоата в виде твердого вещества не совсем белого цвета (600 мг, количественно). ЖХ/МС: (метод А) 470.0 (М+Н), КТ. 3.2 мин.

Стадия 3: Образование 3-фтор-8,15,17,25,29-пентаазагексацикло[23.3.1.1^2,61^9,230^8,160^9,14]гентриаконта-1(29),2(31),3,5,9(14),10,12,15,19(30),20,22,27-додекаен-18,26-диона

Указанное в заголовке соединение получали, следуя методике, описанной для примера 1, стадия 3 из 3-{3-[5-(2-Амино-бензимидазол-1-илметил)-2-фтор-фенил]-6-оксо-6-пиридазин-1-илметил}-бензоата лития в виде твердого вещества не совсем белого цвета (38 мг, 10%). ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆): δ 12.63 (s, 1H), 9.42 (d, J=7.1 Гц, 1Н), 9.31 (s, 1H), 8.01 (d, J=7.7 Гц, 1Н), 7.95 (d, J=7.9 Гц, 1Н), 7.79-7.77 (m, 2Н), 7.58 (d, J=7.6 Гц, 1H), 7.47-7.42 (m, 2Н), 7.34-7.27 (m, 2Н), 7.22-7.19 (m, 1Н), 6.98 (d, J=9.7 Гц, 1Н)5.39 (s, 4Н). ЖХ/МС: (метод А) 452.2 (М+Н), КТ. 4.4 мин, 97.5% (макс.), 97.6% (254 нм). ВЭЖХ: (метод А) КТ 4.4 мин, 98.1% (макс.), 97.9% (254 нм).

Пример 11: 3-метил-6,14,16,23,32-пентаазагексацикло[24.3.1.1^2,6.1^8,12.0^15,23.0^17,22]дотриаконта-1(30),2(32),3,8,10,12(31),15,17,19,21,26,28-додекаен-5,13-дион

Стадия 1: Образование метилового эфира 3-(3-{3-[2-(2-амино-бензимидазол-1-ил)-этил]-фенил}-4-метил-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил)-бензойной кислоты

Указанное в заголовке соединение получали, следуя методике, описанной для примера 2, стадия 1 из 2-аминобензимидазола и метилового эфира 3-(4-метил-6-оксо-3-{3-[2-(толуол-4-сульфонилокси)-этил]-фенил}-6Н-пиридазин-1-илметил)-бензойной кислоты в виде коричневой смолы (600 мг, 60%). ЖХ/МС: (метод А) 494.0 (М+Н), КТ. 3.7 мин, 68.0% (макс.).

Стадия 2: Образование 3-(3-{3-[2-(2-амино-бензимидазол-1-ил)-этил]-фенил}-4-метил-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил)-бензоат лития

Указанное в заголовке соединение получали, следуя методике, описанной для примера 1, стадия 2 из метилового эфира 3-(3-{3-[2-(2-амино-бензимидазол-1-ил)-этил]-фенил}-4-метил-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил)-бензойной кислоты в виде твердого вещества коричневого цвета (300 мг, 50%). ЖХ/МС: (метод А) 480.0 (М+Н), КТ. 3.3 мин.

Стадия 3: Образование 3-метил-6,14,16,23,32-пентаазагексацикло[24.3.1.1^2,61^8,120^15,230^17,22]дотриаконта-1(30),2(32),3,8,10,12(31),15,17,19,21,26,28-додекаен-5,13-диона

Указанное в заголовке соединение получали, следуя методике, описанной для примера 1, стадия 3 из 3-(3-{3-[2-(2-амино-бензимидазол-1-ил)-этил]-фенил}-4-метил-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил)-бензоата лития в виде твердого вещества не совсем белого цвета (51 мг, 21%). ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 12.83 (s, 1H), 9.00 (s, 1Н), 8.07 (d, J=7.84 Гц, 1H), 7.88 (s, 1Н), 7.72 (d, J=7.76 Гц, 1H), 7.62-7.55 (m, 3Н), 7.48-7.41 (m, 3Н), 7.33-7.23 (m, 2Н), 6.86 (d, J=1.16 Гц, 1Н), 5.33 (s, 2Н), 4.61-4.57 (m, 2Н), 3.03-2.99 (m, 2Н), 2.21 (s, 3Н). ЖХ/МС: (метод С) 462.3 (М+Н), КТ. 9.3 мин, 97.6% (макс.), 95.9% (254 нм). ВЭЖХ: (метод С) КТ 9.1 мин, 97.5% (макс.), 96.2% (254 нм).

Пример 12: 3-гидрокси-8,15,17,25,29-пентаазагексацикло [23.3.1.1^2,6.1^19,23.0^8,16.0^9,14]гентриаконта-1(29),2(31),3,5,9(14),10,12,15,19(30),20,22,27-додекаен-18,26-дион

Стадия 1: Образование метилового эфира 3-{3-[5-(2-амино-бензимидазол-1-илметил)-2-метоксиметокси-фенил]-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил}-бензойной кислоты

Указанное в заголовке соединение получали, следуя методике, описанной для примера 2, стадия 1 из 2-аминобензимидазола и метилового эфира 3-{3-[2-метоксиметокси-5-(толуол-4-сульфонилоксиметил)-фенил]-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил}-бензойной кислоты в виде коричневой смолы (500 мг, 27%). ЖХ/МС: (метод А) 526.0 (М+Н), КТ. 3.68 мин.

Стадия 2: Образование 3-{3-[5-(2-амино-бензимидазол-1-илметил)-2-метоксиметокси-фенил]-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил}бензоата лития

Указанное в заголовке соединение получали, следуя методике, описанной для примера 1, стадия 2 из метилового эфира 3-{3-[5-(2-амино-бензимидазол-1-илметил)-2-метоксиметокси-фенил]-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил}-бензойной кислоты в виде твердого вещества желтого цвета (400 мг, 83%). ЖХ/МС: (метод А) 512.0 (М+Н), КТ. 3.24 мин.

Стадия 3: Образование 3-(метоксиметокси)-8,15,17,25,29-пентаазагексацикло[23.3.1.1^2,6.1^19,23.0^8,16.0^9,14]гентриаконта-1(29),2(31),3,5,9(14),10,12,15,19(30),20,22,27-додекаен-18,26-диона

Указанное в заголовке соединение получали, следуя методике, описанной для примера 1, стадия 3 из 3-{3-[5-(2-амино-бензимидазол-1-илметил)-2-метоксиметокси-фенил]-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил}-бензоата лития в виде твердого вещества не совсем белого цвета (50 мг, 13%). ЖХ/МС: (метод А) 494.0 (М+Н), КТ.4.23 мин, 85.5% (макс.).

Стадия 4: Образование 3-гидрокси-8,15,17,25,29-пентаазагексацикло [23.3.1.1^2,6.1^19,23.0^8,16.0^9,14]гентриаконта-1(29),2(31),3,5,9(14),10,12,15,19(30),20,22,27-додекаен-18,26-диона

Концентрированную серную кислоту (5 мл) медленно добавляли к раствору из 3-(метоксиметокси)-8,15,17,25,29-пентаазагексацикло[23.3.1.12,6.119,23.08,16.09,14]гентриаконта-1(29),2(31),3,5,9(14),10,12,15,19(30),20,22,27-додекаен-18,26-диона (50 мг) в ТГФ (7 мл) поддерживаемого при 0°С. Затем реакционную смесь оставляли нагреваться до КТ и перемешивали в течение 1 ч. Добавляли воду, диоксан удаляли под сниженным давлением и полученную фазу экстрагировали при помощи ДХМ (3×25 мл). Объединенные органические фазы высушивали над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали. Очищение флеш-хроматографией на силикагеле обеспечивало указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества бежевого цвета (6 мг, 8%). ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆): δ 12.59 (s, 1Н), 10.39 (s, 1Н), 9.32 (s, 1Н), 9.23 (s, 1H), 8.06-7.99 (m, 2Н), 7.87 (d, J=6.72 Гц, 1Н), 7.56 (s, 2Н), 7.43 (d, J=10.8 Гц, 2Н), 7.24 (m, 2Н), 6.89 (d, J=8.8 Гц, 2Н), 5.94 (s, 4Н). ЖХ/МС: (метод А) 450.0 (М+Н), КТ.3.65 мин, 92.87% (макс.), 93.11% (254 нм). ВЭЖХ: (метод А) КТ. 3.65 мин, 93.4% (макс.), 94.5% (254 нм).

Пример 13: 3-хлор-8,15,17,25,29-пентаазагексацикло[23.3.1.1^2,6.1^19,23.0^8,16.0^9,14]гентриаконта-1(29),2(31),3,5,9(14),10,12,15,19(30),20,22,27-додекаен-18,26-дион

Стадия 1: Образование метилового эфира 3-{3-[5-(2-амино-бензимидазол-1-илметил)-2-хлор-фенил]-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил}-бензойной кислоты

Указанное в заголовке соединение получали, следуя методике, описанной для примера 2, стадия 1 из метилового эфира 3-{3-[2-Хлор-5-(толуол-4-сульфонилоксиметил)-фенил]-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил }-бензойной кислоты в виде коричневой смолы (1.3 г, 56%). ЖХ/МС: (метод А) 500.0 (М+Н), КТ. 3.8 мин, 22.0% (макс.).

Стадия 2: Образование 3-{3-[5-(2-амино-бензимидазол-1-илметил)-2-хлор-фенил]-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил}-бензоата лития

Указанное в заголовке соединение получали, следуя методике, описанной для примера 1, стадия 2 из метилового эфира 3-{3-[5-(2-амино-бензимидазол-1-илметил)-2-хлор-фенил]-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил}-бензойной кислоты в виде твердого вещества бежевого цвета (1.0 г, 79%). ЖХ/МС: (метод А) 486.0 (М+Н), КТ. 3.8 мин.

Стадия 3: Образование 3-хлор-8,15,17,25,29-пентаазагексацикло [23.3.1.1^2,6.1^19,23.0^8,16.0^9,14]гентриаконта-1(29),2(31),3,5,9(14),10,12,15,19(30),20,22,27-додекаен-18,26-диона

Указанное в заголовке соединение получали, следуя методике, описанной для примера 1, стадия 3 из 3-{3-[5-(2-амино-бензимидазол-1-илметил)-2-хлор-фенил]-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил}-бензоата лития в виде твердого вещества не совсем белого цвета (38 мг, 24%). ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆): δ 12.55 (s, 1Н), 9.27 (d, J=2.08 Гц, 1Н), 9.15 (s, 1Н), 7.99 (d, J=7.84 Гц, 1Н), 7.91-7.83 (m, 3Н), 7.59 (d, J=8.12 Гц, 2Н), 7.48-7.42 (m, 2Н), 7.28-7.17 (m, 2Н), 6.95 (d, J=9.68 Гц, 1Н), 5.60-5.21 (m, 4Н). ЖХ/МС: (метод А) 468.0 (М+Н), КТ. 4.4 мин, 96.8% (макс.), 97.6% (254 нм). ВЭЖХ: (метод А) КТ 4.31 мин, 92.6% (макс.), 94.5% (254 нм).

Пример 14: 4,5,8,15,17,25,29-гептаазагексацикло[23.3.1.12,5.119,23.08,16.09,14]гентриаконта-1(29),2(31),3,9(14),10,12,15,19(30),20,22,27-ундекаен-18,26-дион

Стадия 1: Образование метилового эфира 3-(3-{1-[2-(2-Амино-бензимидазол-1-ил)-этил]-1Н-пиразол-4-ил}-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил)-бензойной кислоты

Указанное в заголовке соединение получали, следуя методике, описанной для примера 2, стадия 1 из метилового эфира 3-(6-оксо-3-{1-[2-(толуол-4-сульфонилокси)-этил]-1Н-пиразол-4-ил}-6Н-пиридазин-1-илметил)-бензойной кислоты в виде твердого вещества коричневого цвета (0.95 г, 37%). ЖХ/МС: (метод А) 470.2 (М+Н), КТ. 3.17 мин.

Стадия 2 Образование 3-(3-{1-[2-(2-амино-бензимидазол-1-ил)-этил]-1Н-пиразол-4-ил}-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил)бензоата лития

Указанное в заголовке соединение получали, следуя методике, описанной для примера 1, стадия 2 из метилового эфира 3-(3-{1-[2-(2-амино-бензимидазол-1-ил)-этил]-1Н-пиразол-4-ил}-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил)-бензойной кислоты в виде твердого вещества коричневого цвета (0.4 г, 83%). ЖХ/МС: (метод А) 456.2 (М+Н), КТ. 2.75 мин.

Стадия 3: Образование 4,5,8,15,17,25,29-гептаазагексацикло[23.3.1.1^2,5.1^19,23.0^8,16.0^9,14]гентриаконта-1(29),2(31),3,9(14),10,12,15,19(30),20,22,27-ундекаен-18,26-диона

Указанное в заголовке соединение получали, следуя методике, описанной для примера 1, стадия 3 из 3-(3-{1-[2-(2-амино-бензимидазол-1-ил)-этил]-1Н-пиразол-4-ил}-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил)бензоата лития в виде твердого вещества не совсем белого цвета. (7.8 мг, 8%). ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆): δ 12.75 (s, 1Н), 9.28 (s, 1H), 9.00 (s, 1H), 8.00 (d, J=7.76 Гц, 1Н), 7.84 (s, 1Н), 7.71 (d, J=9.20 Гц, 2Н), 7.51 (dd, J=10.72, 7.28 Гц, 2Н), 7.41 (t, J=7.60 Гц, 1Н), 7.31-7.23 (m, 2Н), 6.91 (d, J=9.52 Гц, 1Н), 5.33 (s, 2Н), 4.97 (s, 2Н), 4.71 (s, 2Н). ЖХ/МС: (метод А) 438.0 (М+Н), КТ.3.22 мин, 95.83% (макс.), 95.99% (254 нм). ВЭЖХ: (метод А) КТ. 3.29 мин, 96.2% (макс.), 95.7% (254 нм).

Пример 15: 3-метокси-8,15,17,25,29-пентаазагексацикло[23.3.1.1^2,6.1^19,23.0^8,16.0^9,14]гентриаконта-1(29),2(31),3,5,9(14),10,12,15,19(30),20,22,27-додекаен-18,26-дион

Стадия 1: Образование метилового эфира 3-{3-[5-(2-амино-бензимидазол-1-илметил)-2-метокси-фенил]-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил}-бензойной кислоты

Указанное в заголовке соединение получали, следуя методике, описанной для примера 10, стадия 1 из метилового эфира 3-[3-(5-бромметил-2-метокси-фенил)-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил]-бензойной кислоты в виде твердого вещества коричневого цвета (1.0 г, 59%). ЖХ/МС: (метод А) 496.2 (М+Н), КТ. 3.7 мин.

Стадия 2: Образование 3-{3-[5-(2-амино-бензимидазол-1-илметил)-2-метокси-фенил]-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил}-бензоата лития

Указанное в заголовке соединение получали, следуя методике, описанной для примера 1, стадия 2 из метилового эфира 3-{3-[5-(2-амино-бензимидазол-1-илметил)-2-метокси-фенил]-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил}-бензойной кислоты в виде твердого вещества не совсем белого цвета (400 мг, 40%). ЖХ/МС: (метод А) 482.0 (М+Н), КТ. 3.2 мин.

Стадия 3: Образование 3-метокси-8,15,17,25,29-пентаазагексацикло [23.3.1.1^2,6.1^19,23.0^8,16.0^9,14]гентриаконта-1(29),2(31),3,5,9(14),10,12,15,19(30),20,22,27-додекаен-18,26-диона

Указанное в заголовке соединение получали, следуя методике, описанной для примера 1, стадия 3 из 3-{3-[5-(2-амино-бензимидазол-1-илметил)-2-метокси-фенил]-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил}-бензоата лития в виде твердого вещества не совсем белого цвета (37 мг, 23%). ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 12.57 (s, 1Н), 9.28 (d, J=7.08 Гц, 2Н), 8.00 (d, J=7.76 Гц, 1Н), 7.91-7.88 (m, 2Н), 7.78 (d, J=8.44 Гц, 1Н), 7.58 (d, J=7.24 Гц, 1Н), 7.46-7.42 (m, 2Н), 7.29-7.26 (m, 1Н), 7.21-7.17 (m, 1Н), 7.11 (d, J=8.48 Гц, 1Н), 6.89 (d, J=9.72 Гц, 1Н), 5.70-5.10 (m, 4Н), 3.86 (s, 3Н). ЖХ/МС: (метод А) 464.0 (М+Н), КТ. 4.1 мин, 98.8% (макс.), 99.2% (254 нм). ВЭЖХ: (метод А) КТ 4.2 мин, 97.1% (макс.), 97.3% (254 нм).

Пример 18: 20-гидрокси-23-окса-1,9,11,18,28-пентаазапентацикло[22.3.1.1^3,7.0^10,18.0^12,17]нонакоза-3,5,7(29),10,12(17),13,15,24(28),25-нонаен-8,27-дион

Стадия 1: Образование 3-{3-[4-(2-амино-бензимидазол-1-ил)-3-гидрокси-бутокси]-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил}-бензоата калия

Шарики гидроксила калия добавляли к перемешанному раствору из метилового эфира 3-[3-(2-оксиранил-этокси)-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил]-бензойной кислоты (0.45 г, 1.36 ммоль) и 2-аминобензимидазола (0.18 г, 1.36 ммоль) в метанол/вода (7:3, 10 мл). Реакционную смесь нагревали в MB при 100°C в течение 1 ч. и концентрировали под сниженным давлением. Остаточную воду удаляли из полученного твердого вещества посредством совместной дистилляции с толуолом. Указанное в заголовке соединение получали в виде твердого вещества бежевого цвета (600 мг, 98%). ЖХ/МС: (метод А) 450.0 (М+Н).

Стадия 2: Образование 20-гидрокси-23-окса-1,9,11,18,28-пентаазапентацикло[22.3.1.1^3,7.0^10,18.0^12,17]нонакоза-3,5,7(29),10,12(17),13,15,24(28),25-нонаен-8,27-диона

Раствор из 3-{3-[4-(2-амино-бензимидазол-1-ил)-3-гидрокси-бутокси]-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил}-бензоата калия (200 мг, 0.44 ммоль) в ДМФ (20 мл) добавляли медленно к раствору из HATU (0.51 г, 1.33 ммоль), 1-гидрокси-7-азабензотриазола (0.18 г, 1.33 ммоль), 4-диметиламинопиридина (0.05 г, 0.44 ммоль) N,N-диизопропилэтиламина (0.6 мл, 3.5 ммоль) в сухом ДМФ (160 мл). Реакционную смесь перемешивали при КТ в течение 14 ч, концентрировали под сниженным давлением и экстрагировали при помощи дихлорметана. Объединенные органические слои промывали водным раствором лимонной кислоты (10% вес/объем), за которым следовал NaHCO₃, вода и рассолом, концентрировали, фильтровали и концентрировали. Очищение колоночной флеш-хроматографией на силикагеле обеспечивало указанное в заголовке соединение в виде бледно-желтого твердого вещества (13 мг, 7%) ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 12.71 (s, 1Н), 8.70 (s, 1Н), 7.94 (d, J=7.72 Гц, 1Н), 7.55 (d, J=7.44 Гц, 1Н), 7.52-7.48 (m, 2Н), 7.41 (t, J=7.52 Гц, 1Н), 7.24-7.16 (m, 3Н), 6.92 (d, J=9.76 Гц, 1Н), 5.31 (d, J=13.96 Гц, 1Н), 5.25 (d, J=4.92 Гц, 1Н), 4.97 (d, J=13.92 Гц, 1Н), 4.70-4.64 (m, 1Н), 4.43-4.33 (m, 2Н), 3.99-3.95 (m, 2Н), 2.32-2.27 (m, 1Н), 1.96-1.92 (m, 1Н). ЖХ/МС: (метод А) 432.0 (М+Н), КТ. 2.9 мин, 94.7% (макс.), 94.8% (254 нм). ВЭЖХ: (метод А) КТ 3.1 мин, 96.8% (макс.), 96.5% (254 нм).

Пример 19: 5-метокси-8,15,17,25,29-пентаазагексацикло[23.3.1.1^2,6.1^19,23.0^8,16.0^9,14]гентриаконта-1(29),2(31),3,5,9(14),10,12,15,19(30),20,22,27-додекаен-18,26-дион

Стадия 1: Образование метилового эфира 3-{3-[3-(2-амино-бензимидазол-1-илметил)-4-метокси-фенил]-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил}-бензойной кислоты

Указанное в заголовке соединение получали, следуя методике, описанной для примера 1, стадия 1 в виде твердого вещества коричневого цвета (1 г, 76%). ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆): δ 7.92-7.92 (m, 1H), 7.88-7.81 (m, 2Н), 7.76 (dd, J=8.6, 2.2 Hz, 1Н), 7.53 (t, J=7.7 Гц, 1H), 7.44-7.40 (m, 1H), 7.32-7.31 (m, 1H), 7.18-7.13 (m, 2H), 7.02-6.80 (m, 3H), 6.79 (t, J=6.6 Гц, 1H), 6.58 (br s, 2H), 5.22 (s, 2H), 5.19 (s, 2H), 3.91 (s, 3H), 3.83 (s, 3Н). ЖХ/МС: (метод A) 496.0 (М+Н), KT. 3.7 мин.

Стадия 2: Образование 3-{3-[3-(2-амино-бензимидазол-1-илметил)-4-метокси-фенил]-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил}-бензоата лития

Указанное в заголовке соединение получали, следуя методике, описанной для примера 2, стадия 2 в виде бледно-коричневого твердого вещества (800 мг). ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСO-d₆): δ 8.51 (s, 1Н), 7.91 (s, 1H), 7.84 (d, J=9.8 Гц, 1H), 7.78-7.72 (m, 2H), 7.47-7.47 (m, 1H), 7.25-7.17 (m, 2H), 7.12 (d, J=8.7 Гц, 1H), 7.00-6.96 (m, 2H), 6.93-6.89 (m, 1H), 6.85-6.80 (m, 1H), 6.75 (brs, 2H), 5.23 (s, 2H), 5.11 (s, 2H), 3.91 (s, 3Н). ЖХ/МС: (метод A) 482.0 (M+H).

Стадия 3: Образование 5-метокси-8,15,17,25,29-пентаазагексацикло[23.3.1.1^2,6.1^19,23.0^8,16.0^9,14]гентриаконта-1(29),2(31),3,5,9(14),10,12,15,19(30),20,22,27-додекаен-18,26-диона

Указанное в заголовке соединение получали, следуя методике, описанной для примера 1, стадия 3 в виде твердого вещества не совсем белого цвета (200 мг, 28%). 1HNMR (400 МГц, ДМСО-d6): 12.75 (s, 1Н), 9.38 (m, 2Н), 8.00 (m, 2Н), 7.82 (dd, J=6.24, 2.36 Гц, 1Н), 7.77 (d, J=8.04 Гц, 1H), 7.54 (d, J=7.68 Гц, 1Н), 7.49 (d, J=7.68 Гц, 1Н), 7.40 (t, J=7.56 Гц, 1Н), 7.32 (t, J=8.20 Гц, 1H), 7.20 (t, J=7.52 Гц, 1Н), 6.99 (d, J=8.48 Гц, 1Н), 6.95 (d, J=9.56 Гц, 1Н), 5.87 (m, 1Н), 5.38 (m, 2Н), 4.87 (m, 1Н), 3.83 (s, 3Н). ВЭЖХ (макс, площадь) 96.87%; (254 nm) 96.29%; Rt (мин) 4.48; МС: (ESI+) 464.2.

Пример 20: 5-гидрокси-8,15,17,25,29-пентаазагексацикло [23.3.1.1^2,6.1^19,23.0^8,16.0^9,14]гентриаконта-1(29),2(31),3,5,9(14),10,12,15,19(30),20,22,27-додекаен-18,26-дион

К перемешанному раствору из 5-метокси-8,15,17,25,29-пентаазагексацикло[23.3.1.1^2,6.1^19,23.0^8,16.0^9,14]гентриаконта-1(29),2(31),3,5,9(14),10,12,15,19(30),20,22,27-додекаен-18,26-диона (0.1 г, 0.21 ммоль) в сухом дихлорметане (30 мл) добавляли трибромид бора (0.64 мл,0.64 ммоль) при 0°С. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 48 ч. Затем ее гасили насыщенным раствором хлорида аммония. Полученное твердое вещество отфильтровывали и очищали флеш-хроматографией на силикагеле с получением указанного в заголовке соединения в виде твердого вещества белого цвета (20 мг, 22%). ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆): δ 12.74 (s, 1Н), 10.42 (s, 1H), 9.42-9.38 (m, 2Н), 8.01-7.86 (m, 3Н), 7.65-7.20 (m, 6H), 6.94-6.83 (m, 2H), 6.01-5.93 (m, 1H), 5.48-5.31 (m, 2H), 5.01-4.96 (m, 1H). ЖХ/МС: (метод A) 450.2 (М+Н), KT.3.8 мин, 93.3% (макс.), 93.3% (254 нм). ВЭЖХ: (метод А) КТ. 3.7 мин, 94.1% (макс.), 93.0% (254 нм).

Пример 32а и 32b: Цис- и транс- 25-гидрокси-1,6,14,16,23,32-гексаазагексацикло[24.3.1.1^2,6.1^8,12.0^15,23.0^17,22]дотриаконта-2(32),3,8(31),9,11,15,17(22),18,20-нонаен-5,13-дион

Стадия 1: Образование 3-(3-{3-[2-(2-амино-бензимидазол-1-ил)-1-гидрокси-этил]-пиперидин-1-ил}-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил)-бензоата калия

Указанное в заголовке соединение получали, следуя методике, описанной для примера 18, стадия 1 из метилового эфира 3-[3-(3-оксиранил-пиперидин-1-ил)-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил]-бензойной кислоты (2.00 г; 1.95 ммоль; 1.00 экв.) и 1Н-бензимидазол-2-иламина (259 мг; 1.95 ммоль; 1.00 экв.) в виде твердого вещества коричневого цвета. (1.2 г, 78%). ЖХ/МС: (метод А) 489.2 (М+Н), КТ.2.8+3.0 мин, 25.9+37.4% (макс.), 29.0+41.0% (254 нм).

Стадия 2: Образование цис- и транс- 25-гидрокси-1,6,14,16,23,32-гексаазагексацикло[24.3.1.1^2,6.1^8,12.0^15,23.0^17,22]дотриаконта-2(32),3,8(31),9,11,15,17(22),18,20-нонаен-5,13-диона

Раствор из 3-(3-{3-[2-(2-амино-бензимидазол-1-ил)-1-гидрокси-этил]-пиперидин-1-ил}-6-оксо-6Н-пиридазин-1-илметил)-бензоата калия MF (60 мл) добавляли по каплям в течение периода времени в 5 ч. к перемешанному раствору из 1-гидрокси-7-азабензотриазола (1.06 г; 7.61 ммоль; 5.00 экв.), HATU (2.90 г; 7.61 ммоль; 5.00 экв.), N,N-диизопропилэтиламина (2.69 мл; 15.2 ммоль; 10.00 экв.) и DMAP (0.19 г; 1.52 ммоль; 1.00 экв.), в ДМФ (1140 мл). Реакционную смесь затем перемешивали в течение 16 ч. при КТ и концентрировали под сниженным давлением. Твердый остаток промывали водой (3×50 мл) и фильтровали. Очищение флеш-хроматографией на силикагеле (МеОН : ДХМ, градиент от 2 до 4%) обеспечивало указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества не совсем белого цвета. (180 мг, 16%, смесь из цис- и транс-изомеров). ЖХ/МС: (метод А) 471.0 (М+Н), КТ.3.2+3.4 мин, 27.0+38.0% (макс.), 31.0+40.0% (254 нм). Затем два изомера разделяли преп. ВЭЖХ (метод: Kromosil с 18 (19×250) мм, 10 микрон подвижная фаза:0.1% ТФУ в воде В: поток метанола: 12 мл/мин):

Первый элюируемый изомер: коричневая смола, (8 мг, 6%) ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆): δ 12.69 (s, 1Н), 8.85 (brs, 1Н), 7.92 (d, J=7.6 Гц, 1H), 7.51-7.46 (m, 2Н), 7.45-7.43 (m, 2Н), 7.38 (t, J=7.6 Гц, 1Н), 7.26-7.19 (m, 2Н), 6.71 (d, J=10.0 Гц, 1Н), 5.52-5.30 (m, 1Н), 5.27 (d, J=4.9 Гц, 1H), 4.74-4.48 (m, 2Н), 4.38 (s, 1H), 4.11 (t, J=5.2 Гц, 1H), 3.88-3.83 (m, 1H), 3.63 (s, 1Н), 3.06 (s, 1Н), 2.77 (s, 1Н), 1.79-1.72 (m, 1Н), 1.70-1.52 (m, 3Н), 1.50-1.38 (m, 1H). ЖХ/МС: (метод А) 471.0 (М+Н), КТ. 4.8 мин, 93.3% (макс.), 93.5% (254 нм). ВЭЖХ: (метод А) КТ. 4.7 мин, 92.7% (макс.), 93.9% (254 нм).

Второй элюируемый изомер: белое твердое вещество, (16 мг, 12%). ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆): δ 12.70 (s, 1Н), 7.93 (d, J=7.6 Гц, 1Н), 7.60 (d, J=7.4 Гц, 1H), 7.52-7.46 (m, 3Н), 7.39 (t, J=7.5 Гц, 1Н), 7.24-7.16 (m, 2Н), 6.79 (d, J=10.0 Гц, 1Н), 5.49-5.21 (m, 1Н), 5.15-5.01 (m, 1H), 4.72-4.68 (m, 1Н), 4.64-4.21 (m, 1H), 4.03 (d, J=10.3 Гц, 1Н), 3.95-3.89 (m, 1H), 3.61-3.57 (m, 1Н), 3.54-3.44 (m, 1Н), 2.97-2.89 (m, 2Н), 1.81-1.81 (m, 2Н), 1.77-1.72 (m, 2Н), 1.60-1.42 (m, 1H), 1.41-1.25 (m, 1Н). ЖХ/МС: (метод А) 471.0 (М+Н), КТ. 4.8 мин, 91.8% (макс.), 91.8% (254 нм). ВЭЖХ: (метод А) КТ. 4.7 мин, 91.0% (макс.), 91.8% (254 нм).

Пример 36а и 36b: R и S 24-этил-8,15,17,25,29-пентаазагексацикло[23.3.1.1^2,6.1^19,23.0^8,16.0^9,14]гентриаконта-1(29),2(31),3,5,9(14),10,12,15,19,21,23(30),27-додекаен-18,26-дион

Стадия 1: Образование 3-(1-{3-[3-(2-амино-бензимидазол-1-илметил)-фенил]-6-оксо-6Н-

Раствор из метилового эфира 3-{1-[3-(3-бромметил-фенил)-6-оксо-6Н-пиридазин-1-ил]-пропил}-бензойной кислоты (1.90 г; 4.1761 ммоль; 1.00 экв.), карбоната цезия (4.12 г; 12.5284 ммоль; 3.00 экв.) и 1Н-бензимидазол-2-иламина (0.56 г; 4.1761 ммоль; 1.00 экв.) в ДМФ (13.3 мл) нагревали в MB при 120°C в течение 1 ч. Реакционную смесь выпаривали до сухости и остаток растворяли в этилацетате (100 мл), промывали водой (2×50 мл), высушивали над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали. Очищение флеш-хроматографией на силикагеле (МеОН : ДХМ, 5:95) обеспечивало указанное в заголовке соединение в виде пены не совсем белого цвета. (600 мг, 27%). 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 8.15-7.92 (m, 2Н), 7.85 (t, J=1.4 Гц, 1Н), 7.77 (d, J=2.0 Гц, 2H), 7.58-7.50 (m, 2H), 7.46 (t, J=7.8 Гц, 1H), 7.30 (d, J=7.8 Гц, 1H), 7.15 (t, J=7.7 Гц, 2H), 7.03 (d, J=9.7 Гц, 1H), 6.94-6.90 (m, 1H), 6.85-6.81 (m, 1H), 6.63 (s, 2H), 6.02 (t, J=6.68 Гц, 1H), 5.36 (s, 2H), 3.83 (s, 3H), 2.22-2.15 (m, 1H), 2.06-1.98 (m, 1H), 0.8 (t, J=7.2 Гц, 3Н). ЖХ/МС: (метод А) 494.2 (М+Н), КТ. 4.0 мин, 94.2% (макс.), 94.5% (254 нм).

Стадия 2: Образование 3-(1-{3-[3-(2-амино-бензимидазол-1-илметил)-фенил]-6-оксо-6Н-пиридазин-1-ил}-пропил)-бензоата лития

Указанное в заголовке соединение получали, следуя методике, описанной для примера 3, стадия 2 из метилового эфира 3-(1-{3-[3-(2-амино-бензимидазол-1-илметил)-фенил]-6-оксо-6Н-пиридазин-1-ил}-пропил)-бензойной кислоты (600 мг; 1.15 ммоль; 1.00 экв.) в виде твердого вещества белого цвета (500 мг, 84%). 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): δ 8.14 (s, 1Н), 7.99-7.93 (m, 2Н), 7.77-7.73 (m, 2Н), 7.73-7.39 (m, 1Н), 7.31-7.26 (m, 2Н), 7.24-7.19 (m, 2Н), 7.12 (d, J=7.2 Гц, 1Н), 6.99 (d, J=9.7 Гц, 1Н), 6.91-6.88 (m, 1Н), 6.83-6.81 (m, 1Н), 5.98 (t, J=8.56 Гц, 1Н), 5.45-5.32 (m, 2Н), 2.26-2.19 (m, 1Н), 2.09-2.02 (m, 1Н), 0.77 (t, J=7.20 Гц, 3Н). ЖХ/МС: (метод А) 480.2 (М+Н), КТ.3.5 мин, 93.7% (макс.), 92.6% (254 нм).

Стадия 3: Образование 24-этил-8,15,17,25,29-пентаазагексацикло[23.3.1.1^2,6.1^19,23.0^8,16.0^9,14]гентриаконта-1(29),2(31),3,5,9(14),10,12,15,19,21,23(30),27-додекаен-18,26-диона

Указанное в заголовке соединение получали, следуя методике, описанной для примера 32, стадия 2 из 3-(1-{3-[3-(2-амино-бензимидазол-1-илметил)-фенил]-6-оксо-6Н-пиридазин-1-ил}-пропил)-бензоата лития (0.50 г; 0.97 ммоль; 1.00 экв.) в виде твердого вещества не совсем белого цвета (150 мг; 33%). 1Н ЯМР:(400 МГц, ДMCO-d6): δ 12.66 (s, 1Н), 9.45 (d, J=13.6 Гц, 2H), 8.07-7.99 (m, 3Н), 7.83 (d, J=8.4 Гц, 1H), 7.62 (d, J=8.0 Гц, 1H), 7.54 (d, J=7.6 Гц, 1H), 7.48 (d, J=7.6 Гц, 1H), 7.44-7.38 (m, 2H), 7.33-7.29 (m, 1H), 7.21 (t, J=8.3 Гц, 1H), 6.99 (d, J=9.68 Гц, 1H), 6.17 (t, J=6.96 Гц, 1H), 5.50-5.38 (m, 2H), 2.39-2.31 (m, 1H), 2.23-2.16 (m, 1H), 0.9 (t, J=7.2 Гц, 3Н). ЖХ/МС: (метод А) 462.3 (М+Н), КТ.4.6 мин, 95.6% (макс.), 97.7% (254 нм). ВЭЖХ: (метод А) КТ 4.5 мин, 98.5% (макс.), 98.2% (254 нм).

Стадия 4: Хиральное разделение 24-этил-8,15,17,25,29-пентаазагексацикло [23.3.1.1^2,6.1^19,23.0^8,16.0^9,14]гентриаконта-1(29),2(31),3,5,9(14),10,12,15,19,21,23(30),27-додекаен-18,26-диона

Два энантиомера разделяли хиральной преп. ВЭЖХ (метод: подвижная фаза: 0.1% DEA в гексан:этанол:60:40; колонка Chiralpak 1С (250×4.6)мм, 5 мкм. ПОТОК: 1 мл\мин):

Первый элюируемый энантиомер: не совсем белое твердое вещество (8 мг, 16%). ЖХ/МС: (метод А) 462.0 (М+Н), КТ.4.6 мин, 99.8% (макс.), 99.7% (254 нм). ВЭЖХ: (метод А) КТ 4.5 мин, 99.4% (макс.), 99.6% (254 нм).

Второй элюируемый энантиомер: не совсем белое твердое вещество (8 мг, 16%). ЖХ/МС: (метод А) 462.0 (М+Н), КТ.4.6 мин, 99.4% (макс.), 99.6% (254 нм). ВЭЖХ: (метод А) КТ 4.5 мин, 99.2% (макс.), 99.8% (254 нм).

Примеры, описанные в таблице 1, получали, следуя подобным протоколам.

Пример 43: ферментативные анализы IRAK1 и IRAK4

Ферментативный анализ IRAK1:

IRAK1 является очищенным рекомбинантным ферментом человека (His-TEV-IRAK1 (194-712))

В этом анализе IRAK-1 гидролизует АТФ и аутофосфорилирует.

Измерения ингибирования IRAK-1 осуществляют на покрытом стрептавидином 384-луночном планшете FlashPlate (PerkinElmer #SMP410A).

His-TEV-IRAK-1 (15 нг/лунку), АТФ (1 мкМ, [³³Р] АТФ 0.25 мкСi/лунку) и соединения в ДМСО (диапазон концентраций от 20 мкМ до 1 нМ) или контрольные образцы (2% ДМСО) инкубировали в течение 3 часов при 30°C в буфере для анализа: Hepes pH 7.0 50 мМ, не содержащий жирных кислот БСА 0,1%, дитиотреитол DTT 2 мМ, MgCl₂, 10 мМ, EGTA 0,5 мМ, Triton-X-100 0,01%. Киназную реакцию останавливали путем добавления EDTA. Супернатант отбрасывали, планшеты промывали три раза с помощью 150 мМ NaCl и затем измеряли радиоактивность в считывающем устройстве Microbeta Trilux.

Ферментативный анализ IRAK4:

IRAK4 является очищенным рекомбинантным ферментом человека (His-TEV-IRAK1 (194-712)

IRAK4 гидролизует АТФ, аутофосфорилирует и фосфорилирует генерический пептидный субстрат серин/треонин (STK: 61ST1BLC от CisBio International находящийся в Bagnols/Ceze FR).

Измерения ингибирования IRAK-4 осуществляют на покрытом стрептавидином 384-луночном планшете FlashPlate (PerkinElmer #SMP410A). His-TEV-IRAK4 (20 нг/лунку), АТФ (2 мкМ, [³³P]АТФ 0.25 мкCi/лунку), STK1-биотин пептид (300 нМ) и соединения в ДМСО (диапазон концентраций от 20 мкМ до 1 нМ) или контрольные образцы (2% ДМСО) инкубировали в течение 3 часов при 30°C в буфере для анализа: Hepes pH 7.0 50 мМ, не содержащий жирных кислот БСА 0.1%, дитиотреитол DTT 2 мМ, MgCl2 10 мМ, EGTA 0.5 мМ, Tween-20 0.01%, MnCl₂ 5 мМ.

Киназную реакцию останавливали добавлением EDTA. Супернатант отбрасывали, планшеты промывали три раза с помощью 150 мМ NaCl и затем измеряли радиоактивность в считывающем устройстве Microbeta Trilux.

Результаты приведены на стр.10 и др. сс.

Пример 44: Клеточный анализ

TLR7 вызванный IL-6 в МКПК человека

Анализ МКПК применяют как один из функциональных анализов для наблюдения за активностью низкомолекулярных ингибиторов IRAK 1 и IRAK4 на TLR7, вызванной секрецией IL-6 в мононуклеарных клетках человека (МКПК). МКПК человека подготавливают из лейкоцитарных клеток (цельная кровь, обогащенная лейкоцитами и тромбоцитами), полученных от здоровых добровольцев, применяемых или свежими, или замороженными, высевают в среду для анализа (RPMI+2%P/S/L-glu+10% HI-FBS) и предварительно обрабатывают соединениями в ДМСО/среда (диапазон концентраций от 25 уМ до 4 нМ) или контрольные образцы (0,25% ДМСО) в течение 30 минут при 37°C в среде для анализа. В дальнейшем после предварительной обработки ингибиторами IRAK1 и IRAK4, МКПК стимулируют при помощи TLR7 специфического лиганда (2 уМ) в течение ночи (16-18 часов) при 37°С. После окончания инкубации супернатант переносят в 384-луночный планшет РЕ AlphaPlate-384 (6005350) и IL-6 определяют количественно с применением набора Perkin Elmer IL-6 Alpha LISA (AL223C). Планшеты считывают на считывающем устройстве для планшетов Envision® с Alpha Technology®.

Были получены следующие результаты:

Пример 45: Получение фармацевтического состава

Состав 1 - Таблетки

Соединение формулы (I) смешивают в виде сухого порошка с сухим желатиновым связующим веществом в весовом соотношении приблизительно 1:2. В качестве смазывающего вещества добавляют незначительное количество стеарата магния. В таблеточном прессе смеси придают форму таблеток массой 240-270 мг (80-90 мг действующего соединения в соответствии с изобретением на таблетку).

Состав 2 - Капсулы

Соединение формулы (I) смешивают в виде сухого порошка с крахмальным разбавителем в весовом соотношении приблизительно 1:1. Смесь наполняют в 250 мг капсулы (125 мг действующего соединения в соответствии с изобретением на капсулу).

Состав 3 - Жидкость

Смешивают соединение формулы (I) (1250 мг), сахарозу (1.75 г) и ксантановую камедь (4 мг), пропускают через сито №10 меш U.S., и затем смешивают в воде с заранее подготовленным раствором микрокристаллической целлюлозы и натрий-карбоксиметилцеллюлозы (11:89, 50 мг). Бензоат натрия (10 мг), ароматизатор и краситель разбавляют с водой и добавляют при помешивании. Затем добавляют необходимое количество воды для получения общего объема в 5 мл.

Состав 4 - Таблетки

Соединение формулы (I) смешивают в виде сухого порошка с сухим желатиновым связующим веществом в весовом соотношении приблизительно 1:2. В качестве смазывающего вещества добавляют незначительное количество стеарата магния. В таблеточном прессе смеси придают форму таблеток массой 450-900 мг (80-90 мг действующего соединения в соответствии с изобретением на таблетку).

Состав 5 - Инъекционный раствор

Соединение формулы (I) растворяют в стерильной буферизованной солевой водной среде для инъекций до концентрации приблизительно 5 мг/мл.

Изобретение относится к соединениям формулы (I) и их фармацевтически приемлемым солям и стереоизомерам, которые являются ингибиторами IRAK. В формуле (I) R1 и R3 каждый независимо друг от друга означают Н, (CH₂)_pCON(R5)₂, OA, Hal, СООН, СООА, (CH₂)_pNHCOA, (CH₂)_PHet1, (CH₂)_pNR2R5 или ОН; R2 означает Н или линейный или разветвленный алкил с 1, 2 или 3 атомами углерода; R4 означает Н или А; R5 означает Н или линейный или разветвленный алкил с 1, 2 или 3 атомами углерода; Z отсутствует или означает Ar-диил или Het-диил; L означает (СН₂)_n, где одна или две группы СН₂ могут быть заменены посредством О и/или группы СН=СН и/или где один или два Н атома могут быть заменены посредством OR2 или NR2R5; Ar-диил означает 1,2-, 1,3- или 1,4-фенилен, необязательно замещенный посредством от 1 до 5 групп, независимо выбранных из Hal, ОН, О-A, Het2 и/или А; Het-диил означает ненасыщенный, насыщенный или ароматический 5- или 6-членный гетероцикл, имеющий от 1 до 2 атомов N, О и/или S, который может быть незамещенным или моно-, ди- или тризамещенным посредством О-А и/или А; А означает неразветвленный или разветвленный алкил, имеющий от 1 до 10 атомов углерода, в котором одна или две несмежных СН₂ группы могут быть заменены посредством О; Het1 означает морфолинил; Het2 означает морфолинил; Hal означает F, Cl, Br, I; n означает 1, 2, 3, 4, 5 или 6; р означает 0, 1 или 2. Изобретение относится также к конкретным соединениям формулы (I), фармацевтической композиции, содержащей указанные соединения, и способу их синтеза. 4 н. и 9 з.п. ф-лы, 1 табл., 45 пр.

1. Соединение формулы (I)

,

в которой

R1, R3 каждый независимо друг от друга означают Н, (CH₂)_pCON(R5)₂, OA, Hal, СООН, СООА, (CH₂)_pNHCOA, (CH₂)_PHet1, (CH₂)_pNR2R5 или ОН;

R2 означает Н или линейный или разветвленный алкил с 1, 2 или 3 атомами углерода;

R4 означает Н или А;

R5 означает Н или линейный или разветвленный алкил с 1, 2 или 3 атомами углерода;

Z отсутствует или означает Ar-диил или Het-диил;

L означает (СН₂)_n, где одна или две группы СН₂ могут быть заменены посредством О и/или группы СН=СН и/или где один или два Н атома могут быть заменены посредством OR2 или NR2R5;

Ar-диил означает 1,2-, 1,3- или 1,4-фенилен, необязательно замещенный посредством от 1 до 5 групп, независимо выбранных из Hal, ОН, О-A, Het2 и/или А;

Het-диил означает ненасыщенный, насыщенный или ароматический 5- или 6-членный гетероцикл, имеющий от 1 до 2 атомов N, О и/или S, который может быть незамещенным или моно-, ди- или тризамещенным посредством О-А и/или А;

А означает неразветвленный или разветвленный алкил, имеющий от 1 до 10 атомов углерода, в котором одна или две несмежных СН₂ группы могут быть заменены посредством О;

Het1 означает морфолинил;

Het2 означает морфолинил;

Hal означает F, Cl, Br, I;

n означает 1, 2, 3, 4, 5 или 6;

р означает 0, 1 или 2;

и его фармацевтически приемлемые соли и стереоизомеры, включая их смеси во всех соотношениях.

2. Соединение формулы (I) по п.1, где R4 означает Н или метил.

3. Соединение формулы (I) по п.1 или 2, где Het-диил означает пиридин-диил, пиримидин-диил, пиридазин-диил, пиразол-диил, имидазол-диил, пиперидин-диил или пирролидин-диил, каждый из которых является незамещенным или дизамещенным посредством А.

4. Соединение формулы (I) по п.1 или 2, где Z означает 1,3-фенилен, который является незамещенным или монозамещенным посредством A, Hal, ОН или OA.

5. Соединение формулы (I), выбранное из следующей группы:

и его фармацевтически приемлемые соли и стереоизомеры, включая их смеси во всех соотношениях.

6. Соединение формулы (I) по пп.1, 2 или 5 и его фармацевтически приемлемые соли и стереоизомеры, включая их смеси во всех соотношениях, для применения в качестве лекарственного средства, ингибирующего IRAK.

7. Соединение по п.6 для применения в лечении или предупреждения воспалительного заболевания, аутоиммунного заболевания, рака или множественного склероза и связанных заболеваний.

8. Соединение по п.7, где аутоиммунное заболевание выбирают из группы, состоящей из астмы, ревматоидного артрита, острого множественного энцефаломиелита (ОМЭМ), болезни Аддисона, очаговой алопеции, анкилозирующего спондилита, синдрома антифосфолипидных антител (АФС), аутоиммунной гемолитической анемии, аутоиммунного гепатита, аутоиммунного заболевания внутреннего уха, буллезного пемфигоида, болезни Бехчета, целиакии, антитрансглутаминазы, болезни Чагаса, хронического обструктивного заболевания легких, болезни Крона, дерматомиозита, сахарного диабета 1 типа, эндометриоза, синдрома Гудпасчера, болезни Грейвса, синдрома Гийена-Барре (СГБ), тиреоидита Хашимото, гнойного гидраденита, синдрома Кавасаки, нефропатии IgA, идиопатической тромбоцитопенической пурпуры, интерстициального цистита, эритематозной волчанки, смешанной болезни соединительной ткани, кольцевидной склеродермии, множественного склероза (МС), тяжелой миастении, нарколепсии, нейромиотомии, обыкновенной пузырчатки, злокачественной анемии, псориаза, псориатического артрита, полимиозита, билиарного первичного цирроза печени, ревматоидного артрита, шизофрении, склеродермии, синдрома Шегрена, синдрома скованного человека, системного склероза, височного артериита, язвенного колита, васкулита, витилиго, гранулематоза Вегенера.

9. Соединение по п.7, где заболевание выбирают из ревматоидного артрита, псориатического артрита, остеоартрита, системной красной волчанки, волчаночного нефрита, анкилозирующего спондилоартрита, остеопороза, системного склероза, множественного склероза, псориаза, сахарного диабета I типа, сахарного диабета II типа, воспалительного заболевания кишечника (болезнь Крона и язвенный колит), гипериммуноглобулинемии D и синдрома периодической лихорадки, криопирин-связанных периодических синдромов, синдрома Шницлера, системного ювенильного идиопатического артрита, приобретенной болезни Стилла, подагры, псевдоподагры, синдрома САПГО, болезни Кастлемана, сепсиса, инсульта, атеросклероза, целиакии, DIRA (дефицит антагониста рецептора IL-1), болезни Альцгеймера, болезни Паркинсона, рака.

10. Соединение по п.7, где заболевание выбирают из ревматоидного артрита, волчаночного нефрита, системной красной волчанки.

11. Соединение формулы (I) по п.1 для предотвращения и/или лечения заболеваний, связанных с повышенной экспрессией IRAK.

12. Фармацевтическая композиция, ингибирующая IRAK, содержащая эффективное количество по меньшей мере одного из соединений формулы (I) по любому из пп.1-5 и/или его фармацевтически приемлемой соли и стереоизомера, включая их смеси во всех соотношениях.

13. Способ синтеза соединения формулы (I) по п.1, в котором соединение формулы (I) получают макроциклизацией соединения формулы (II), в которой R1, R2, R3, R4, Z и L являются такими, как определены в п.1, и А1 означает Н, Li, Na или K