ТАКСАНОВОЕ СОЕДИНЕНИЕ, А ТАКЖЕ СПОСОБ ЕГО ПОЛУЧЕНИЯ И ЕГО ПРИМЕНЕНИЕ Российский патент 2019 года по МПК C07D493/18 A61K31/365 A61K31/443 A61P35/00 A61P35/02 

ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ, К КОТОРОЙ ОТНОСИТСЯ ИЗОБРЕТЕНИЕ

Настоящее изобретение относится к области фармацевтической химии, и конкретно относится к новому соединению, в частности, к таксановым соединениям. Настоящее изобретение также относится к способу получения таксановых соединений и их применению в качестве активных ингредиентов в производстве противоопухолевых лекарственных препаратов для перорального введения.

ПРЕДПОСЫЛКИ СОЗДАНИЯ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Паклитаксел (РТХ) имеет структуру, представленную следующей формулой:

Паклитаксел был извлечен из коры Taxus brevifolia рода Taxus в 1971 г., он является активным противоопухолевым соединением с уникальным противораковым механизмом и обладает определенным терапевтическим эффектом в отношении ряда типов рака. В настоящее время в клинической практике паклитаксел обычно вводят путем внутривенной инъекции. Однако вследствие его низкой растворимости в воде паклитаксел обычно растворяют в смешанном растворителе из полиоксиэтилированного касторового масла (Chremophor EL) и этанола (1:1, об./об.) с целью получения инъекций паклитаксела, которые реализуют на рынке под торговым наименованием "Taxol" или "Paxene".

Несмотря на то, что в клиническом применении были достигнуты большие успехи, паклитаксел при этом также ограничен многими факторами: (1) во-первых, паклитаксел сам по себе обладает токсическими и побочными действиями, включая дозолимитирующую токсичность и подавление функции костного мозга (клинически необходимо, чтобы он применялся для лечения в комбинации с фактором роста), на нормальных тканях и клетках, и не может пересекать гематоэнцефалический барьер и т.д.; (2) с применением Кремофора EL вытекающей проблемой являются серьезные аллергические реакции, первичная гиперлипидемия, токсичность по отношению к центральной нервной системе (CNS) и изменение фармакокинетики паклитаксела [ten Tije AJ, et al., Clin Pharmacokinet 42, 655-685, 2003; H. Gelderblom, et al., Eur. J. Cancer 37 (13), 1590-1598, 2001; van Zuylen L, et al., Invest New Drugs 19, 125-141, 2001; R.B. Weiss, et al., J. Clin. Oncol. 8 (7), 1263-1268, 1990]; (3) вследствие длительного приема возникает множественная устойчивость к лекарственным препаратам.

С целью решения вышеуказанных проблем многие ученые внутри страны и за рубежом провели фундаментальные исследования взаимосвязи структура-активность паклитаксела, включая изменение лекарственной формы, разработку пролекарства на основе паклитаксела, синтез таксановых производных, лечение в комбинации с ингибитором P-gp и т.п. Постоянно исследуются новые пути улучшения его растворимости в воде, усиления терапевтического эффекта, а также снижения токсических и побочных действий.

Огромное практическое значение имеет проведение исследований таксановых производных для перорального введения, поскольку изменение природы самих таксановых соединений может фундаментально решить проблемы, связанные с ними, такие как низкая растворимость в воде, высокая токсичность и т.п., таким образом, чтобы улучшить биодоступность при пероральном введении, снизить токсические и побочные действия и усилить их терапевтический эффект. Кроме того, это позволит избежать нежелательных реакций, вызванных сорастворителями и способствовать продлению терапевтического эффекта и улучшению переносимости у пациентов путем замены инъекционного введения пероральным введением.

Исследователи обнаружили, что при структурной модификации молекулы паклитаксела варьирование заместителей в положениях С7, С9 и С10 имеет незначительное воздействие на его активность, но эти положения являются активными центрами по отношению к белку P-gp. На сродство молекулы паклитаксела к белку P-gp влияет размер, электронное строение, способность к образованию водородной связи заместителей в этих положениях. Таким образом, модификация по этим группам могла бы преодолеть множественную устойчивость к лекарственным препаратам, вызванную повышенной экспрессией P-gp, и решить проблему низкой биодоступности при пероральном введении и т.п.

14β-Гидроксибаккатин III (14β-OH-DAB) имеет структуру, представленную следующей формулой:

.

Он представляет собой натуральное таксановое производное, извлеченное из хвои Т. wallichiana Zucc. Он обладает хорошей растворимостью в воде, главным образом потому, что в его положение С14 введена гидроксигруппа. Поэтому ожидается, что такие соединения, полученные из 14β-OH-DAB, будут обладать улучшенной растворимостью в воде и повышенной биодоступностью при пероральном введении (Appendino, G. et al., J. Chem. Soc, Perkins Trans, 1, 2925-2929, 1992).

В связи с этим авторы настоящего изобретения занимались исследованиями производных 14β-OH-DAB и в итоге выявили ряд новых соединений с улучшенной биодоступностью при пероральном введении. Как показано в фармакологических экспериментах, по сравнению с предшествующим уровнем техники эти таксановые производные, содержащие структуру 1,14-карбонат-баккатин III, синтезированные в настоящем изобретении, характеризуются сильной цитотоксичностью в отношении ряда линий раковых клеток человека и противоопухолевыми эффектами широкого спектра. Из данных активности in vitro в отношении линии клеток рака молочной железы MCF-7 можно видеть, что цитотоксичность сохраняется, при этом некоторые производные обладают еще лучшей цитотоксичностью, чем у производных предшествующего уровня техники. Поглощение и перенос таксановых производных in vivo предсказаны с применением модели клеточного монослоя выделенной из человека линии клеток колоректальной аденокарциномы Сасо-2. Из экспериментальных результатов можно видеть, что по сравнению с предшествующим уровнем техники большинство этих производных обладают улучшенной биодоступностью при пероральном введении. Поэтому цитотоксичность таких таксановых производных, содержащих структуру 1,14-карбонат-баккатин III, сохраняется (или даже увеличивается), кроме того, их биодоступность при пероральном введении также намного улучшается.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ СУЩНОСТИ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Настоящее изобретение предусматривает таксановые соединения, имеющие структуру, представленную следующей общей формулой I:

где

R₁ представляет собой -COR₆, -COOR₆ или -CONR_7aR_7b;

R₂ представляет собой С1-С6алкильную, С1-С6алкенильную группу, замещенную углеводородную группу, гетероциклическую группу, ароматическую группу или замещенную ароматическую группу;

R₃ представляет собой -OR₆, -OCOOR₆, -OCOSR₆ или -OCONR_7aR_7b;

R₄ представляет собой -OR₆, -OCOOR₆, -OCOSR₆, -OCONR_7aR_7b, H или OH;

где R₆ представляет собой С1-С6алкильную, С1-С6алкенильную, C1-С6алкинильную группу, замещенную углеводородную группу, ароматическую группу или гетероциклическую группу; R_7a и R_7b соответственно представляют собой водород, углеводородную группу, замещенную углеводородную группу или гетероциклическую группу.

Кроме того, настоящее изобретение предусматривает способ получения таксановых соединений в соответствии с настоящим изобретением.

Указанный способ получения таксановых соединений в соответствии с настоящим изобретением включает следующие стадии:

стадия 1 синтеза части таксанового исходного ядра: с применением 10-деацетилбаккатина III (10-DAB) в качестве исходного вещества сначала гидроксильные группы в положениях С7 и С10 части исходного ядра селективно защищают заместителями, затем гидроксигруппу в положении С13 окисляют в кетокарбонильную группу, затем с высокой стереоселективностью вводят гидроксильную группу с β-конфигурацией в положение С14 с применением N-(сульфонил)оксазиридина с образованием 1,14-карбонатной структуры под действием N,N'-карбонилдиимидазола (CDI) и в конце кетокарбонильную группу в положении С13 с высокой стереоселективностью восстанавливают в гидроксильную группу с α-конфигурацией с помощью способа восстановления CBS с получением части таксанового исходного ядра;

стадия 2 синтеза предшественника боковой цепи из кислоты с пятичленным оксазолидиновым кольцом: предшественник боковой цепи из кислоты с пятичленным оксазолидиновым кольцом получают посредством ряда реакций, включающих введение защитных групп, конденсацию с присоединением, кислотный гидролиз, альдольную конденсацию, каталитическое гидрирование и т.п.;

стадия 3 синтеза таксановых производных: предшественник боковой цепи из кислоты с пятичленным оксазолидиновым кольцом присоединяют к части таксанового исходного ядра путем эстерификации и после удаления защитной группы кислотным гидролизом получают ряд таксановых производных.

Более конкретно, способ получения таксановых соединений в соответствии с настоящим изобретением включает следующие стадии:

стадия 1 синтеза части таксанового исходного ядра: с применением 10-деацетилбаккатина III (10-DAB) в качестве исходного вещества сначала гидроксильные группы в положениях С7 и С10 части исходного ядра селективно защищают заместителями, затем гидроксигруппу в положении С13 окисляют в кетокарбонильную группу, затем с высокой стереоселективностью вводят гидроксильную группу с β-конфигурацией в положение С14 с применением N-(сульфонил)оксазиридина с образованием 1,14-карбонатной структуры под действием CDI и в конце кетокарбонильную группу в положении С13 с высокой стереоселективностью восстанавливают в гидроксильную группу с α-конфигурацией с помощью способа восстановления CBS с получением части таксанового исходного ядра;

стадия 2 синтеза предшественника боковой цепи из кислоты с пятичленным оксазолидиновым кольцом: гликолевую кислоту, применяемую в качестве исходного вещества, последовательно защищают бензильной группой и бутилоксикарбонильной группой (Вос-группой) с образованием Вос-защищенного бензилгликолята; различные замещенные альдегиды конденсируют с (S_R)-трет-бутилсульфинамидом с образованием соответствующих енаминных соединений; Вос-защищенный бензилгликолят и енаминное соединение вводят в реакцию присоединения в присутствии соли лития, а затем после кислотного гидролиза получают хиральное промежуточное соединение и вводят полученное промежуточное соединение вместе с 1,1'-(диметоксиметил)-n-метоксибензолом в реакцию альдольной конденсации, катализируемой n-толуолсульфонатом пиридиния (PPTS) с получением соединения-продукта конденсации; при этом аминогруппу соединения-продукта конденсации замещают различными заместителями и после каталитического гидрирования в итоге получают предшественник боковой цепи из кислоты с пятичленным оксазолидиновым кольцом;

стадия 3 синтеза таксановых производных: предшественник боковой цепи из кислоты с пятичленным оксазолидиновым кольцом присоединяют к части таксанового исходного ядра путем эстерификации и после удаления защитной группы кислотным гидролизом получают ряд таксановых производных.

Кроме того, настоящее изобретение предусматривает фармацевтическую композицию, содержащую соединения определенной выше общей формулы (I), их фармацевтически приемлемые соли или сольваты в качестве активных ингредиентов, а также их применение в производстве противоопухолевых лекарственных препаратов для перорального введения.

Настоящее изобретение имеет следующие преимущества.

1. В настоящем изобретении при стереоселективном восстановлении кетокарбонильной группы в положении С13 выбран способ восстановления CBS. По сравнению с традиционным способом восстановления с применением борогидрида металла способ восстановления CBS позволяет проводить восстановление с высокой стереоселективностью с получением гидроксильной группы с α-конфигурацией в положении С13 со значением ее >99,9% и выходом 90% или выше.

2. Ряд таксановых производных, содержащих 1,14-карбонат-баккатин III, синтезировали путем одновременной замены заместителей в нескольких положениях С7, С10, С14, C3'N и С3' паклитаксела. При анализе на цитотоксичность in vitro в ряде линий раковых клеток они проявили хорошие противоопухолевые активности. Биодоступность при пероральном введении таких таксановых производных in vitro была предсказана с применением анализа трансмембранного переноса в монослое клеток Сасо-2, демонстрирующего из экспериментальных результатов, что проницаемость через мембрану для большинства таких производных была выше, чем у паклитаксела, и ожидалось, что их биодоступность при пероральном введении будет улучшена с различными уровнями. Посредством анализа результата коэффициента активного выведения в испытании двунаправленного переноса было показано, что такие производные могут ингибировать эффект активного выведения от P-gp в различных степенях, и дополнительно подтверждено, что всасываемость при пероральном введении таких соединений была улучшена. Кроме того, соединение PCMI-08, проявившее наивысшую проницаемость через мембрану в анализе in vitro, было выбрано для испытания биодоступности при пероральном введении in vivo на крысах. Из экспериментальных результатов было показано, что его абсолютная биодоступность при пероральном введении увеличилась до 65,8%, показывая, что его всасываемость при пероральном введении in vivo улучшилась в значительной степени по сравнению с таковой у паклитаксела. Соответственно, таксановые производные, содержащие 1,14-карбонат-баккатин III в соответствии с настоящим изобретением, являются потенциальными пероральными противоопухолевыми лекарственными препаратами.

ОПИСАНИЕ ГРАФИЧЕСКИХ МАТЕРИАЛОВ

Фиг. 1 представляет собой кривую зависимости концентрации в плазме от времени для PCMI-08.

Фиг. 2 представляет собой спектр ¹Н ЯМР PCMI-01.

Фиг. 3 представляет собой спектр ¹³С ЯМР PCMI-01.

Фиг. 4 представляет собой масс-спектр PCMI-01.

Фиг. 5 представляет собой спектр ¹Н ЯМР PCMI-02.

Фиг. 6 представляет собой спектр ¹³С ЯМР PCMI-02.

Фиг. 7 представляет собой спектр ЯМР ¹Н PCMI-03.

Фиг. 8 представляет собой спектр ¹³С ЯМР PCMI-03.

Фиг. 9 представляет собой спектр ЯМР ¹Н PCMI-04.

Фиг. 10 представляет собой спектр ¹³С ЯМР PCMI-04.

Фиг. 11 представляет собой масс-спектр PCMI-04.

Фиг. 12 представляет собой ИК-спектр PCMI-04.

Фиг. 13 представляет собой спектр ¹Н ЯМР PCMI-05.

Фиг. 14 представляет собой спектр ¹³С ЯМР PCMI-05.

Фиг. 15 представляет собой масс-спектр PCMI-05.

Фиг. 16 представляет собой ИК-спектр PCMI-05.

Фиг. 17 представляет собой спектр ¹Н ЯМР PCMI-06.

Фиг. 18 представляет собой спектр ¹³С ЯМР PCMI-06.

Фиг. 19 представляет собой масс-спектр PCMI-06.

Фиг. 20 представляет собой спектр ¹Н ЯМР PCMI-07.

Фиг. 21 представляет собой спектр ¹³С ЯМР PCMI-07.

Фиг. 22 представляет собой масс-спектр PCMI-07.

Фиг. 23 представляет собой спектр ¹Н ЯМР PCMI-08.

Фиг. 24 представляет собой спектр ¹³С ЯМР PCMI-08.

Фиг. 25 представляет собой масс-спектр PCMI-08.

Фиг.26 представляет собой спектр ¹Н ЯМР PCMI-09.

Фиг. 27 представляет собой спектр ¹³С ЯМР PCMI-09.

Фиг. 28 представляет собой масс-спектр PCMI-09.

Фиг. 29 представляет собой спектр ¹H ЯМР PCMI-10.

Фиг. 30 представляет собой спектр ¹³С ЯМР PCMI-10.

Фиг. 31 представляет собой масс-спектр PCMI-10.

Фиг. 32 представляет собой спектр ¹Н ЯМР PCMI-11.

Фиг. 33 представляет собой спектр ¹³С ЯМР PCMI-11.

Фиг. 34 представляет собой спектр ¹Н ЯМР PCMI-12.

Фиг. 35 представляет собой спектр ¹³С ЯМР PCMI-12.

Фиг. 36 представляет собой масс-спектр PCMI-12.

Фиг. 37 представляет собой спектр ¹H ЯМР PCMI-13.

Фиг. 38 представляет собой спектр ¹³С ЯМР PCMI-13.

Фиг. 39 представляет собой спектр ¹Н ЯМР PCMI-14.

Фиг. 40 представляет собой спектр ¹³С ЯМР PCMI-14.

Фиг. 41 представляет собой масс-спектр PCMI-14.

Фиг. 42 представляет собой спектр ¹Н ЯМР PCMI-15.

Фиг. 43 представляет собой спектр ¹³С ЯМР PCMI-15.

Фиг. 44 представляет собой масс-спектр PCMI-15.

Фиг. 45 представляет собой спектр ¹Н ЯМР PCMI-16.

Фиг.46 представляет собой спектр ¹³С ЯМР PCMI-16.

Фиг. 47 представляет собой масс-спектр PCMI-16.

Фиг. 48 представляет собой спектр ¹Н ЯМР PCMI-17.

Фиг. 49 представляет собой спектр ¹³С ЯМР PCMI-17.

Фиг. 50 представляет собой масс-спектр PCMI-17.

Фиг. 51 представляет собой ИК-спектр PCMI-17.

Фиг. 52 представляет собой спектр ¹H ЯМР PCMI-18.

Фиг. 53 представляет собой спектр ¹³С ЯМР PCMI-18.

Фиг. 54 представляет собой масс-спектр PCMI-18.

Фиг. 55 представляет собой спектр ¹Н ЯМР PCMI-19.

Фиг. 56 представляет собой спектр ¹³С ЯМР PCMI-19.

Фиг. 57 представляет собой масс-спектр PCMI-19.

Фиг. 58 представляет собой спектр ¹Н ЯМР PCMI-20.

Фиг. 59 представляет собой спектр ¹³С ЯМР PCMI-20.

Фиг. 60 представляет собой масс-спектр PCMI-20.

Фиг. 61 представляет собой спектр ¹Н ЯМР PCMI-21.

Фиг. 62 представляет собой спектр ¹³С ЯМР PCMI-21.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Выражение "алкил", применяемое в настоящем документе, относится к группе, состоящей только из атомов углерода и водорода без какой-либо степени ненасыщенности (такой как двойные связи, тройные связи или кольца), при этом оно охватывает все типы ее возможных геометрических изомеров и стереоизомеров. Группы присоединены к остальной части молекулы посредством одинарной связи. Выражение "С1-С6алкил", применяемое в настоящем документе, относится к определенному выше алкилу с количеством атомов углерода 1-6. В качестве неограничивающих примеров С1-С6алкила можно перечислить следующие группы с прямой цепью или разветвленной цепью: метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, изобутил, втор-бутил, трет-бутил, н-пентил и их изомеры, а также н-гексил и его изомеры.

Выражение "алкенил", применяемое в настоящем документе, относится к группе, образованной из вышеуказанной алкильной группы (за исключением метила) путем включения одной или более двойных связей. Выражение "С1-С6алкенил" относится к определенному выше алкенилу с количеством атомов углерода 1-6.

Выражение "алкинил", применяемое в настоящем документе, относится к группе, образованной из вышеуказанной алкильной группы (за исключением метила) путем включения одной или более тройных связей. Выражение "С1-С6алкинил" относится к определенному выше алкинилу с количеством атомов углерода 1-6.

Выражение "углеводородная группа", применяемое в настоящем документе, относится к группе, состоящей только из атомов углерода и водорода. Выражение "замещенная углеводородная группа" относится к определенной выше алкильной, алкенильной или алкинильной группе и т.п., содержащим заместители. Заместитель может представлять собой гидроксильную группу, аминогруппу и т.п.

Выражение "гетероциклическая группа", применяемое в настоящем документе, относится к ароматическому 5-14-членному кольцу или неароматическому 3-15-членному кольцу, включающему атомы углерода и гетероатомы, независимо выбранные из N, О или S. Ароматическое кольцо может быть моноциклическим, бициклическим или полициклическим, при этом бициклические и полициклические группы образованы из моноциклических групп посредством соединения друг с другом через одинарные связи или путем сочленения. В качестве неограничивающих примеров гетероарильных групп можно перечислить следующие группы: оксазолил, изоксазолил, имидазолил, фурил, индолил, изоиндолил, пирролил, триазолил, триазинил, тетразолил, тиенил, тиазолил, изотиазолил, пиридинил, пиримидинил, пиразинил, пиридазинил, бензофуранил, бензотиазолил, бензоксазолил, бензимидазолил, бензотиенил, бензопиранил, карбазолил, хинолинил, изохинолинил, хиназолинил, циннолинил, нафтиридинил, птеридинил, пуринил, хиноксалинил, тиадиазолил, индолизинил, акридинил, феназинил, фталазинил, кумаринил, пиразолопиридинил, пиридинопиридазинил, пирролопиридинил, имидазопиридинил, пиразолопиридазинил и группы, образованные из вышеуказанных гетероарильных групп посредством соединения друг с другом через одинарные связи или путем сочленения. Неароматическое кольцо может представлять собой моноциклическое, бициклическое или полициклическое и конденсированное кольцо, кольцо с внутренним мостиком или спирокольцо, которое может необязательно содержать одну или более двойных связей. В качестве неограничивающих примеров гетероциклических групп можно перечислить следующие группы: азепинил, акридинил, бензодиоксолил, бензодиоксанил, хроманил, диоксоланил, диоксафосфоланил, декагидроизохинолинил, инданил, индолинил, изоиндолинил, изохроманил, изотиазолидинил, изоксазолидинил, морфолинил, оксазолинил, оксазолидинил, оксадиазолил, 2-оксо-пиперазинил, 2-оксо-пиперидинил, 2-оксопирролидинил, 2-оксо-азепинил, окгагидроиндолил, октагидроизоиндолил, пергидроазепинил, пиперазинил, 4-пиперидонил, пиперидинил, фенотиазинил, феноксазинил, хинуклидинил, тетрагидроизохинолинил, тетрагидрофуранил, тетрагидропиранил, тетрагидропирролидинил, тиазолинил, тиазолидинил, тиоморфолинил, тиоморфолинсульфоксид и тиоморфолинилсульфон.

Выражение "арил", применяемое в настоящем документе, относится к ароматическому кольцу, включающему по меньшей мере 6 атомов углерода, которое может быть моноциклическим, бициклическим или полициклическим, в котором бициклические и полициклические кольца могут быть образованы из моноциклических колец посредством соединения друг с другом через одинарные связи или путем сочленения. В качестве неограничивающих примеров арильных групп можно перечислить следующие группы: фенил, нафтил, антрил, фенантрил, инденил, пиренил, периленил, азуленил, аценафтенил, флуоренил, бензоаценафтенил, трифениленил, хризенил, бифенил, бинафтил и т.п.

Выражение "замещенная ароматическая группа", применяемое в настоящем документе, относится к определенной выше ароматической группе, содержащей заместители. Заместитель может представлять собой алкил, алкенил, алкинил, гидроксил, амин и т.п.

Настоящее изобретение предусматривает таксановые соединения, имеющие структуру, представленную следующей общей формулой I:

где

R₁ представляет собой -COR₆, -COOR₆ или -CONR_7aR_7b;

R₂ представляет собой С1-С6алкильную, С1-С6алкенильную группу, замещенную углеводородную группу, гетероциклическую группу, ароматическую группу или замещенную ароматическую группу;

R₃ представляет собой -OR₆,, -OCOOR₆, -OCOSR₆ или -OCONR_7aR_7b;

R₄ представляет собой -OR₆, -OCOOR₆, -OCOSR₆, -OCONR_7aR_7b, H или OH;

где R₆ представляет собой С1-С6алкильную, С1-С6алкенильную, С1-С6алкинильную группу, замещенную углеводородную группу, ароматическую группу или гетероциклическую группу; R_7a и R_7b соответственно представляют собой водород, углеводородную группу, замещенную углеводородную группу или гетероциклическую группу.

Предпочтительно R₁ представляет собой бензоил, трет-бутилоксикарбонил или N,N'-диметилкарбамоил;

R₂ представляет собой фенил, или ;

R₃ представляет собой -ОМе, -ОСООСН₃, -OCON(CH₃)₂ или -OCOSC₂H₅;

R₄ представляет собой -ОМе, -ОСООСН₃, -OCON(CH₃)₂, -OCOSC₂H₅, Н или ОН.

Наиболее предпочтительно таксановые соединения в соответствии с настоящим изобретением выбраны из соединений, имеющих следующие структуры:

Согласно настоящему изобретению соединения, имеющие структуры, представленные общей формулой (I), также включают все изомеры таких соединений и смеси изомеров.

При необходимости соединения, имеющие структуры, представленные общей формулой (I), могут быть превращены в фармацевтически приемлемые нетоксичные соли.

Согласно настоящему изобретению соединения, имеющие структуры, представленные общей формулой (I), могут необязательно существовать в виде сольватов (таких как гидраты). Поэтому такие сольваты (такие как гидраты) также включены в соединения в соответствии с настоящим изобретением.

Кроме того, настоящее изобретение предусматривает фармацевтическую композицию, содержащую соединения, имеющие структуры, представленные определенной выше общей формулой (I), их фармацевтически приемлемые соли или сольваты в качестве активных ингредиентов, а также их применение в производстве противоопухолевых лекарственных препаратов для перорального введения.

В фармацевтической композиции в соответствии с настоящим изобретением весовая доля соединений в соответствии с настоящим изобретением составляет 0,01%-99,99%, при этом остальное представляет собой фармацевтически приемлемые носители. Фармацевтическая композиция представлена в форме подходящих препаратов. Препараты включают: таблетки, капсулы, гранулы, драже, порошки, взвеси, суспензии, инъекционные растворы, порошки для инъекций, суппозитории, кремы, капли или трансдермальные терапевтические системы. При этом таблетки представляют собой таблетки, покрытые сахаром, таблетки, покрытые пленкой, таблетки, покрытые энтеросолюбильной оболочкой, или таблетки с замедленным высвобождением; капсулы представляют собой твердые капсулы, мягкие капсулы или капсулы с замедленным высвобождением; порошки для инъекций представляют собой лиофилизированные порошки для инъекций.

В лекарственной форме фармацевтической композиции в соответствии с настоящим изобретением каждая лекарственная форма содержит эффективное количество 0,1 мг - 1000 мг соединений в соответствии с настоящим изобретением. При этом каждая лекарственная форма относится к каждой ее единице, например, каждой таблетке в таблетках, каждой капсуле в капсулах. В качестве альтернативы, она может также относиться к дозе, вводимой каждый раз (например, доза 100 мг каждый раз).

Могут применяться твердые носители, если фармацевтическую композицию в соответствии с настоящим изобретением преобразуют в твердые или полужидкие препараты, такие как порошки, таблетки, диспергируемые порошки, капсулы, крахмальные облатки, суппозитории и мази. Пригодный твердый носитель предпочтительно выбирают из одного или более веществ из разбавителей, ароматизаторов, солюбилизаторов, смазывающих средств, суспендирующих средств, связующих, объемообразующих средств и т.п., или он может представлять собой инкапсулирующий материал. В порошковых препаратах он содержит 5-70 вес. % тонкодисперсного активного ингредиента в носителях. Подходящие твердые носители включают карбонат магния, стеарат магния, порошок талька, сахарозу, лактозу, пектин, декстрин, крахмал, желатин, метилцеллюлозу, натрий-карбоксиметилцеллюлозу, низкокипящий воск, кокосовое масло и т.п. Поскольку таблетки, порошки, крахмальные облатки и капсулы легко вводить, они представляют наиболее преимущественные твердые препараты для перорального введения.

Жидкие препараты в соответствии с настоящим изобретением включают растворы, суспензии и эмульсии. Например, инъекционные препараты для парентерального введения могут быть в виде водного раствора или водно-пропиленгликолевого раствора, который используется для регулировки изотоничности, рН и т.д., что делает его адаптированным к физиологическим условиям живого тела. В качестве альтернативы, жидкие препараты можно получать в виде полиэтиленгликолевого или водного раствора. Водный раствор для перорального введения можно получать путем растворения активных ингредиентов в воде и добавления к ним необходимых количеств красителей, ароматизаторов, стабилизаторов и загустителей. Кроме того, водные суспензии для перорального введения можно получать диспергированием тонкодисперсных активных ингредиентов в вязких материалах, таких как натуральные и синтетические камеди, метилцеллюлоза, натрий-карбоксиметилцеллюлоза и другие известные суспендирующие средства.

Для удобства приема и равномерности доз особенно выгодно получать вышеуказанные фармацевтические препараты в виде единицы препарата. Единица препарата относится к физически отделяемой единице, содержащей одну дозу. Каждая единица содержит точно рассчитанное предварительно определенное количество активных ингредиентов, которое может обеспечивать необходимые терапевтические эффекты. Данная единица препарата может быть в упакованном виде, например, таблетки, капсулы, порошки в небольших тубах или пузырьках, или мази, гели или крема в тубах или пузырьках.

Несмотря на то, что количество активного ингредиента в единице препарата может варьироваться, в целом оно находится в диапазоне 1 мг - 1000 мг в зависимости от эффективности выбранного активного ингредиента.

Если соединения в соответствии с настоящим изобретением, представленные формулой (I), применяются в качестве противоопухолевых средств, их доза может варьироваться в зависимости от потребностей пациентов, условий заболевания, выбранных соединений и т.п.

Согласно настоящему изобретению, таксановые соединения получают способом, включающим следующие стадии:

стадия 1 синтеза части таксанового исходного ядра: с применением 10-деацетилбаккатина III (10-DAB) в качестве исходного вещества сначала гидроксильные группы в положениях С7 и С10 части исходного ядра селективно защищают заместителями, затем гидроксигруппу в положении С13 окисляют в кетокарбонильную группу, затем с высокой стереоселективностью вводят гидроксильную группу с β-конфигурацией в положение С14 с применением N-(сульфонил)оксазиридина с образованием 1,14-карбонатной структуры под действием CDI и в конце кетокарбонильную группу в положении С13 с высокой стереоселективностью восстанавливают в гидроксильную группу с α-конфигурацией с помощью способа восстановления CBS с получением части таксанового исходного ядра;

стадия 2 синтеза предшественника боковой цепи из кислоты с пятичленным оксазолидиновым кольцом: предшественник боковой цепи из кислоты с пятичленным оксазолидиновым кольцом получают посредством ряда реакций, включающих введение защитных групп, конденсацию с присоединением, кислотный гидролиз, альдольную конденсацию, каталитическое гидрирование и т.п.;

стадия 3 синтеза таксановых производных: предшественник боковой цепи из кислоты с пятичленным оксазолидиновым кольцом присоединяют к части таксанового исходного ядра путем эстерификации и после удаления защитной группы кислотным гидролизом получают ряд таксановых производных.

Предпочтительно способ получения таксановых соединений в соответствии с настоящим изобретением включает следующие стадии.

Стадия 1 синтеза части таксанового исходного ядра: с применением 10-деацетилбаккатина III (10-DAB) в качестве исходного вещества сначала гидроксильные группы в положениях С7 и С10 части исходного ядра селективно защищают заместителями, затем гидроксигруппу в положении С13 окисляют в кетокарбонильную группу, затем с высокой стереоселективностью вводят гидроксильную группу с β-конфигурацией в положение С14 с применением N-(сульфонил)оксазиридина с образованием 1,14-карбонатной структуры под действием CDI и в конце кетокарбонильную группу в положении С13 с высокой стереоселективностью восстанавливают в гидроксильную группу с α-конфигурацией с помощью способа восстановления CBS с получением части таксанового исходного ядра.

Стадия 2 синтеза предшественника боковой цепи из кислоты с пятичленным оксазолидиновым кольцом: гликолевую кислоту, применяемую в качестве исходного вещества, последовательно защищают бензильной группой и трет-бутилоксикарбонильной группой (Вос-группой) с образованием Вос-защищенного бензилгликолята; различные замещенные альдегиды конденсируют с (S_R)-трет-бутилсульфинамидом с образованием соответствующих енаминных соединений; Вос-защищенный бензилгликолят и енаминное соединение вводят в реакцию присоединения в присутствии соли лития, а затем после кислотного гидролиза получают хиральное промежуточное соединение и вводят полученное промежуточное соединение с 1,1'-(диметоксиметил)-n-метоксибензолом в реакцию альдольной конденсации, катализируемой n-толуолсульфонатом пиридиния (PPTS) с получением соединения-продукта конденсации. Аминогруппу соединения-продукта конденсации замещают различными заместителями и после каталитического гидрирования в итоге получают предшественник боковой цепи из кислоты с пятичленным оксазолидиновым кольцом. Путь реакции следующий:

стадия 3 синтеза таксановых производных: предшественник боковой цепи из кислоты с пятичленным оксазолидиновым кольцом присоединяют к части таксанового исходного ядра путем эстерификации и после удаления защитной группы кислотным гидролизом получают ряд таксановых производных.

где на стадии 1 гидроксильные группы в положениях С7 и С10 защищают заместителями:

(1) если R₃ и R₄ представляют собой -OR₆, предусматривают следующую реакцию: сначала гидроксильную группу вводят в реакцию с n-толуолсульфонилхлоридом (TsCl) при температуре от комнатной до 0°С в тетрагидрофуране или дихлорметане в качестве растворителя и пиридине (Ру) в качестве щелочи с получением n-толуолсульфоната, который далее вводят в реакцию с реактивом Гриньяра с получением соответствующего простого эфира -OR₆;

(2) если R₃ и R₄ представляют собой -OCOOR₆ или -OCONR_7aR_7b, предусматривают следующую реакцию: в щелочных условиях гидроксильную группу вводят в реакцию с соответствующим ацилхлоридом в тетрагидрофуране в качестве растворителя при температуре от комнатной до -70°С;

(3) если R₃ и R₄ представляют собой -OCOSR₆, предусматривают следующую реакцию: гидроксильную группу вводят в реакцию с N,N'-карбонилдиимидазолом (CDI) в тетрагидрофуране в качестве растворителя при комнатной температуре и полученный продукт далее вводят с меркаптаном в реакцию замещения.

На стадии 1 стереоселективное восстановление по кетокарбонильной группе в положении С13 способом восстановления CBS включает следующие конкретные стадии: С13-оксо стереоселективно восстанавливают до С13-α-ОН с применением безводного тетрагидрофурана, сухого дихлорметана или спиртов в качестве растворителя, (R)-2-метил-оксазаборолидина в качестве катализатора и боранов в качестве восстановителя при температуре от комнатной до -70°С.

На стадии 2 указанные различные замещенные альдегиды включают С1-С6гидрокарбильные альдегиды, замещенные С1-С6 гидрокарбильные альдегиды, ароматические альдегиды, замещенные ароматические альдегиды и гетероароматические альдегиды и т.п.; реакцию, применяемую для замещения аминогруппы на хиральных промежуточных соединениях, проводят с применением тетрагидрофурана, дихлорметана или диоксана в качестве растворителя для обеспечения реакции с соответствующими ацилхлоридами в щелочных условиях при температуре от комнатной до -70°С; в реакции каталитического гидрирования в качестве катализатора используют палладированный уголь или гидроксид палладия, водород вводят при нормальном давлении или в условиях повышенного давления и реакцию предпочтительно проводят в спиртах, тетрагидрофуране или дихлорметане и т.п. в качестве растворителя.

Предпочтительно

на стадии 1 гидроксильные группы в положениях С7 и С10 защищают заместителями:

(1) если R₃ и R₄ представляют собой -OR₆, в качестве растворителя предпочтительно применяют дихлорметан, температура составляет 0°С, и реактив Гриньяра включает R₆MgBr;

(2) если R₃ и R₄ представляет собой -OCOOR₆ или -OCONR_7aR_7b, в качестве щелочи предпочтительно применяют гексаметилдисилазид лития и температура составляет предпочтительно -40°С; ацилхлорид включает R₆OCOCl и R_7aR_7bNCOCl;

(3) если R₃ и R₄ представляют собой -OCOSR₆, меркаптан включает R₆SH;

На стадии 1 стереоселективное восстановление по кетокарбонильной группе в положении С13 способом восстановления CBS предпочтительно проводят при комнатной температуре с применением в качестве растворителя безводного тетрагидрофурана;

На стадии 2 в реакции, применяемой при замещении аминогруппы промежуточного соединения, в качестве щелочи предпочтительно применяют гексаметилдисилазид лития (LHMDS), а в качестве растворителя применяют тетрагидрофуран; температура составляет предпочтительно - 40°С, ацилхлорид включает R₆COCl, R₆OCOCl и R_7aR_7bNCOCl; в реакции каталитического гидрирования в качестве катализатора предпочтительно применяют гидроксид палладия, водород вводят при 20 фунт/кв.дюйм и реакцию предпочтительно проводят в спиртовом растворе.

Таксановые соединения в соответствии с настоящим изобретением обладают противоопухолевой активностью при пероральном введении, при этом полезные эффекты настоящего изобретения проиллюстрированы ниже экспериментальными данными.

1. Проба на цитотоксичность с применением линий опухолевых клеток человека

Паклитаксел применяли в качестве лекарственного средства положительного контроля. Для изучения степени ингибирования пролиферации таксановых производных, содержащих 1,14-карбонат-баккатин III в соответствии с настоящим изобретением, применяли МТТ-тест на 16 линиях раковых клеток (включая клетки рака молочной железы MCF-7, MDA-MB-436; немелкоклеточного рака легких А549, NCI-H460; рака яичников А2780; меланомы А375, В16; рака толстой кишки НСТ 116, НТ-29; рака шейки матки Hela; лейкемии HL-60, K562; рака предстательной железы LNCaP, Du145; рака желудка LN-18, BGC-823) при концентрации 1 мкмоль/л, и экспериментальные результаты приведены в таблице 1.

Предварительная оценка активности показывает, что такие таксановые производные проявляют близкую или более сильную цитотоксичность в отношении большинства линий раковых клеток по сравнению с лекарственным средством положительного контрольного. Только на линиях раковых клеток как А549, так и В16 цитотоксичность таксановых производных немного ниже по сравнению с лекарственным средством положительного контрольного. Экспериментальные результаты показывают, что такие таксановые производные в соответствии с настоящим изобретением обладают исключительной активностью ингибирования опухолей.

Из данных оценки активности вышеуказанного предварительного скрининга можно видеть, что ряд таксановых производных, синтезированных в настоящем изобретении, обладают активностью. После этого соединения исследовали для определения их значения IC₅₀ в отношении линий клеток рака молочной железы MCF-7. В качестве лекарственного средства положительного контроля применяли паклитаксел. Эксперименты для каждого соединения независимо повторяли три раза и в каждом эксперименте использовали несколько ячеек. Время воздействия лекарственных средств составляло 72 часа. Доза половинной смертности (IC₅₀) выражена как среднее ± SD, и экспериментальные данные приведены в таблице 2.

Как показано из данных таблицы 2, значение IC₅₀ лекарственного средства положительного контроля паклитаксела составляет 7,05 нМ. Значения IC₅₀ для таксановых производных, содержащих структуру 1,14-карбонат-баккатин III в соответствии с настоящим изобретением, почти равны таковому для паклитаксела при сохранении на таком же порядке величины. При этом значения IC₅₀ для некоторых производных лучше, чем у паклитаксела. Так, можно видеть, что активность in vitro производных в соответствии с настоящим изобретением остается неизменной или даже улучшается по сравнению с паклитакселом.

2. Испытания мембранного переноса в монослое клеток Сасо-2

Для изучения двунаправленного переноса целевых соединений с апикальной (АР) стороны на базолатеральную (BL) сторону и с BL стороны на АР сторону использовали модель клеточного монослоя выделенной из человека линии клеток колоректальной аденокарциномы Сасо-2. Для количественного анализа с целью расчета параметров переноса, предполагаемого коэффициента проницаемости (Рарр) и коэффициента активного выведения использовали ВЭЖХ. В качестве лекарственного средства положительного контроля использовали паклитаксел и субстраты P-gp, в качестве образца для сравнения с целью теоретической оценки биодоступности при пероральном введении in vivo таких таксановых производных и их сродства к P-gp использовали эритромицин.

Экспериментальные результаты приведены в Таблице 3. Можно видеть, что значения Рарр А-к-В большинства таких таксановых производных в соответствии с настоящим изобретением выше, чем у паклитаксела (Рарр А-к-В=0,97), в частности, для PCMI-08 его значение Рарр А-к-В>10×10^-6 см/с, что относится субстрату с высокой проницаемостью. Эти данные показывают, что такие таксановые производные, содержащие структуру 1,14-карбонат-баккатин III, имеют хорошую трансмембранную способность, поэтому предполагалось, что они будут лучше поглощаться in vivo, чем паклитаксел.

Степени трансмембранного выделения таких таксановых производных приведены в таблице 4. Оценены двунаправленные переносы 10 соединений, выбранных из 21 таксановых производных, при этом результаты приведены в таблице 5. Из коэффициентов активного выведения можно видеть, что по сравнению с паклитакселом коэффициенты активного выведения таких производных в соответствии с настоящим изобретением снижены до различных уровней. Соответственно, предполагается, что поглощение при пероральном введении in vivo подлежит улучшению.

3. Испытания биодоступности при пероралыюм введении in vivo

Материалы

Соединение PCMI-08 синтезировали и идентифицировали в соответствии со способами, предусмотренными в настоящем изобретении. Внутренний стандарт, паклитаксел, приобретали у China's National Institute for Control of Pharmaceutical and Biological Products (NICPBP). Ацетонитрил хроматографической чистоты приобретали у Sigma-Aldrich Inc. Tween 80 и этилацетат приобретали у Aladdin reagent Inc. Самцов крыс Спрег-Доули приобретали у Beijing Weitonglihua Inc. и разводили в виварии в течение двух недель.

Аппаратура

Установка ВЭЖХ серии Agilent 1100, автоматический дозатор Agilent G1313A, квадрупольный масс-спектрометр Thermo Finnigan TSQ (San Jose, Калифорния, США), программное обеспечение для анализа данных Xcalibur® (версия 1.3) (Thermo Finnigan).

Процедура эксперимента

Растворяли 200 мг PCMI-08 в 4 мл смешанного раствора Tween 80 и безводного этанола (1:1) с получением исходного раствора с концентрацией 50 мг/мл и добавляли изотонический раствор хлорида натрия для доведения до подходящей концентрации. Брали 12 самцов крыс Спрег-Доули (с массой тела 300 г) и разделяли на две группы после голодной паузы в течение ночи. Одну группу обрабатывали внутривенной инъекцией (5 мг/кг), а другую группу обрабатывали посредством перорального введения (60 мг/кг). Отбирали пробы крови в группе внутривенного введения на 0^й мин., 5^й мин., 10^й мин., 20^й мин., 40^й мин., 1^й ч., 2^й ч., 4^й ч., 6^й ч., 8^й ч., 12^й ч., 24^й ч., при этом для пероральной группы отбирали пробы на 5^й мин., 15^й мин., 30^й мин., 45^й мин., 1^й ч., 2^й ч., 4^й ч., 6^й ч., 8^й ч., 12^й ч., 24^й ч. После 10 мин. центрифугирования плазмы при 4500 об./мин. отбирали верхнюю сыворотку и переносили в соответствующую пробирку Eppendorf, помещали в морозильную камеру с температурой -40°С для испытаний.

Построение стандартной кривой для PCMI-08

Конфигурация устройства серии Agilent 1100: устройство автоматического дозатора ВЭЖХ Agilent G1313A, колонка для обращенно-фазовой хроматографии 150 мм × 2,1 мм С18 Thermo column (размер частиц 3 мкм),

длина волны детектора 230 нм, температура колонки 30°С, подвижная фаза ацетонитрил/вода (7:3), расход 0,2 мл/мин., объем пробы 20 мкл. Комбинированную масс-спектрометрию (MS) проводили на тройном квадрупольном спектрометре Thermo Finnigan TSQ, выполненном с возможностью ионизации электрораспылением (ESI) в режиме определения положительных ионов. Параметры MS анализа были следующими: напряжение в камере распыления, 4,0 кВ; температура нагретого капилляра, 350°С; защитный газ (азот); 20 фунт/кв.дюйм; вспомогательный газ (азот): 5 фунт/кв. дюйм; газ для соударений (аргон); давление: 1,5 мм.рт.ст.; энергия соударений: СА 17 эВ; FA и IFA составляли 19 эВ; IS составлял 15 эВ.

В качестве внутреннего стандарта был выбран паклитаксел со временем удерживания 3,07 мин. Время удерживания PCMI-08 составляло 5,13 мин. Условия детектирования MS для PCMI-08 устанавливали следующими: масса/заряд 957→901; паклитаксел в качестве внутреннего стандарта.

Условия детектирования: масса/заряд 876→308. Диапазон концентраций стандартной кривой PCMI-08 составлял 5-10000 нг/мл (γ²>0,99), и минимальный предел определения составлял 5 нг/мл.

Экстракция и анализ образцов плазмы

Отбирали 100-мкл образцы плазмы, в которые добавляли 100 мкл внутреннего стандарта (паклитаксел, раствор в ацетонитриле 500 нг/мл), с последующим добавлением 3 мл этилацетата после тщательной гомогенизации с помощью вихревой мешалки, через 5 мин. встряхивания центрифугировали в течение 8 мин. при скорости вращения 4500 об./мин. Надосадочную жидкость переносили в чистую пробирку Eppendorf с продувкой азотом для высушивания в условиях подогрева. После повторного разбавления 120 мкл подвижной фазы (CH₂CN/H₂O=7:3) раствор центрифугировали при 12000 об./мин. в течение 3 мин., отбирали 100 мкл надосадочной жидкости и переносили в ампулу автоматический дозатора. После анализа LC-MS/MS статистические данные и параметры фармакокинетики обрабатывали с помощью программного обеспечения Xcalibur® (версия 1.3) (Thermo Finnigan).

Результаты

Кривая зависимости концентрации лекарственного средства от времени для соединения PCMI-08 при пероральном или внутривенном введении показана на фиг. 1. Связанные с этим параметры фармакокинетики PCMI-08 приведены в следующей таблице. Период полувыведения PCMI-08 является относительно длительным, обычно 10 ч., при этом среднее время его удерживания также относительно увеличивается вплоть до 10 ч. или более. Абсолютная биодоступность при пероральном введении (F%) составляет не более 65,8%. По сравнению с приведенной абсолютной биодоступностью при пероральном введении паклитаксела, составляющей менее 6%, биодоступность при пероральном введении PCMI-08 у животных в значительной степени улучшилась.

ПРИМЕРЫ

Следующие примеры предоставлены для дополнительной иллюстрации настоящего изобретения и не предназначены для ограничения настоящего изобретения каким-либо образом.

Пример 1. Получение PCMI-01

1) Получение (4S,5R)-3-трет-бутилоксикарбонил-2-(4-метоксифенил)-4-фенил-5-оксазолидинкарбоновой кислоты

a. Получение бензилгликолята

Гликолевую кислоту (7,60 г, 0,10 моль) растворяли в 10 мл ацетонитрила, в который добавляли бензилбромид (13,60 г, 0,08 моль), и равномерно перемешивали. В реакционную жидкость медленно добавляли по каплям DBU (12,16 г, 0,08 моль) при 0°С. После этого реакционную жидкость перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную жидкость выливали в ледяную воду, экстрагировали этилацетатом, полученную объединенную органическую фазу последовательно промывали 1 М раствором соляной кислоты и насыщенным водным раствором соли, высушивали с применением безводного сульфата натрия и концентрировали с помощью роторного испарителя с получением соединения в виде желтого масла (12,50 г, 94%).

b. Получение Вос-защищенного бензилгликолята

Бензилгликолят (30 г, 0,25 моль) и Вос-ангидрид (39,1 г, 0,19 моль) растворяли в 30 мл дихлорметана. По каплям добавляли 5 мл DMAP (4,62 г, 0,038 моль) в растворе дихлорметана в полученную реакционную жидкость при 80°С. После этого реакционную жидкость вводили в реакцию при 15°С в течение 0,5 ч. После завершения реакции реакционную жидкость выливали в ледяную воду, экстрагировали этилацетатом, полученную объединенную органическую фазу промывали последовательно водой и насыщенным водным раствором соли. Органическую фазу концентрировали и перекристаллизовывали с применением петролейного эфира/этилацетата при соотношении 10:1 с получением белого твердого вещества (32,5 г, 66%).

c. Получение N-трет-бутилсульфинилбензиленамина

Растворяли (S_R)-трет-бутилсульфинамид (5,22 г, 0,043 моль) и бензальдегид (5,51 г, 0,052 моль) в 20 мл дихлорметана и к раствору добавляли сульфат магния (25,90 г, 0,22 моль) и PPTS (0,54 г, 2,20 ммоль). Реакционную жидкость перемешивали при комнатной температуре в течение 24 ч., фильтровали и полученный осадок на фильтре промывали дихлорметаном 3 раза (20 мл × 3) с получением неочищенного продукта после концентрирования. Неочищенный продукт очищали с помощью колоночной хроматографии (петролейный эфир/этилацетат = 15:1) с получением бесцветного масла (7,71 г, 85,8%).

d. Получение бензил-2R-трет-бутилоксикарбонил-3S-трет-бутилсульфинамид-фенилпропионата

Растворяли Вос-защищенный бензилгликолят (32,5 г, 0,12 моль) в 15 мл тетрагидрофурана и в реакционную жидкость медленно по каплям добавляли LHMDS (120 мл, 0,12 моль) при -70°С. После этого реакционную жидкость перемешивали в течение 0,5 ч. с последующим медленным добавлением по каплям N-трет-бутилсульфинилбензиленамина в растворе THF (5,02 г, раствор 0,024 моль в 8 мл THF) и через 4 часа реакцию завершали. Реакционную жидкость выливали в 50 мл насыщенного раствора хлорида аммония и экстрагировали этилацетатом 3 раза (30 мл × 3). Объединенные органические фазы высушивали, концентрировали с помощью роторного испарителя и очищали с помощью колоночной хроматографии (петролейный эфир/этилацетат = 10:1) с получением белого твердого вещества (5,25 г, 46%).

e. Получение бензил-2R-гидрокси-3S-аминофенилпропионата

Продукт, полученный на предыдущей стадии (5,25 г, 0,011 моль), растворяли в 20 мл 2 н. раствора HCl/EtOAc и вводили в реакцию при комнатной температуре в течение 10 часов. После завершения реакции реакционную жидкость концентрировали и полученный концентрат экстрагировали смесью дихлорметан/вода (50 мл/100 мл). Водную фазу собирали, экстрагировали дихлорметаном и регулировали ее значение рН 28% водным раствором аммиака до 9-10. Наконец, водную фазу экстрагировали дихлорметаном 3 раза (20 мл × 3). Объединенную органическую фазу высушивали, фильтровали и концентрировали с получением белого твердого вещества (2,85 г, 95,7%).

f. Получение бензил-(4S,5R)-2-(4-метоксифенил)-4-фенил-5-оксазолидинкарбоксилата

Растворяли бензил-2R-гидрокси-3S-амино-фенилпропионат (2,66 г, 9,84 ммоль) и катализатор PPTS (0,24 г, 0,93 ммоль) в 10 мл толуола и в реакционную жидкость медленно добавляли по каплям 1,1-диметоксиметил-4-метоксибензол (2,15 г, 11,79 ммоль) при 100°С. После этого реакцию поддерживали при температуре 90-100°С в течение 2 часов, что продолжили добавлением 2,4 г 1-диметоксиметил-4-метоксибензола и затем обеспечением протекания реакции в течение приблизительно 2 часов до завершения реакции. Полученную реакционную жидкость концентрировали, разделяли и очищали с помощью колоночной хроматографии (петролейный эфир/этилацетат = 10:1) с получением желтого масла (3,52 г, 92%). Желтое масло содержало небольшое количество n-метоксибензальдегида.

g. Получение бензил-(4S,5R)-3-трет-бутоксикарбонил-2-(4-метоксифенил)-4-фенил-5-оксазолидинкарбоксилата

Растворяли масло, полученное на предыдущей стадии (4,07 г, 10,47 ммоль), трет-бутилоксиформилхлорид (1,56 г, 12,57 ммоль) и триэтиламин (2,64 г, 26,17 моль) в 10 мл дихлорметана и перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную жидкость концентрировали, разделяли и очищали с помощью колоночной хроматографии (петролейный эфир/этилацетат = 10:1) с получением желтого масла (4,83 г, 94,4%).

h. Получение (4S,5R)-3-трет-бутоксикарбонил-2-(4-метоксифенил)-4-фенил-5-оксазолидинкарбоновой кислоты

Продукт, полученный на предыдущей стадии (4,83 г, 9,88 ммоль), растворяли в 10 мл метанола, в который добавляли 1,0 г гидроксида палладия. Вводили водород (20 фунт/кв.дюйм) при комнатной температуре и проводили реакцию в течение приблизительно 1 ч., завершение реакции контролировали с помощью TLC. Реакционную жидкость фильтровали, концентрировали, разделяли и очищали с помощью колоночной хроматографии (петролейный эфир/этилацетат = 5:1) с получением конечного продукта в виде белого твердого вещества (2,68 г, 67,9%).

2) Получение 7,10-диметоксил-1,14-карбонат-баккатина III

В качестве исходного вещества использовали 10-DAB (1 экв.), растворяли в дихлорметане, который использовали в качестве растворителя, и добавляли 3 эквивалента пиридина при 0°С. Затем к полученной реакционной жидкости добавляли по каплям 3 эквивалента n-толуолсульфонилхлорида с реакцией в течение 4 часов. С помощью дополнительной обработки посредством очистки колоночной хроматографией получали соединение 1 с выходом 85-90%.

Соединение 1 (1 экв.) растворяли в безводном тетрагидрофуране и вводили в реакцию с метилмагнийбромидом (2,5 экв.) в течение 3 часов при комнатной температуре в защитной атмосфере азота. После дополнительной обработки получали неочищенное соединение 2 после высушивания.

Соединение 2 (1 экв.) растворяли в растворе ацетона, в который добавляли 10 эквивалентов диоксида марганца, при комнатной температуре с последующим введением в реакцию в течение 4 часов. С помощью дополнительной обработки посредством очистки колоночной хроматографией получали соединение 3 с выходом 85%.

Соединение 3 (1 экв.) растворяли в сухом растворе THF/DMPU (4:1), в который добавляли 1,2 эквивалента трет-бутоксида калия при -70°С с последующим проведением реакции в течение 20 мин. К полученной реакционной жидкости медленно добавляли по каплям 2 эквивалента N-(сульфонил)оксазиридина с последующим проведением реакции в течение 2 часов. С помощью дополнительной обработки посредством очистки колоночной хроматографией получали соединение 4 с выходом 75%.

Соединение 4 (1 экв.) вводили в реакцию с 2 эквивалентами N,N'-карбонилдиимидазола (CDI) в сухом тетрагидрофуране с получением соединения 5 с выходом 95%.

Соединение 5 (1 экв.) растворяли в сухом тетрагидрофуране, в который в качестве катализатора добавляли 0,2 эквивалента (R)-2-метил-оксазаборолидина, с последующим добавлением 5 эквивалентов раствора борана/THF с проведением реакции в течение 8 часов при комнатной температуре. После завершения реакции с помощью дополнительной обработки посредством очистки колоночной хроматографией получали соединение 6 7,10-диметоксил-1,14-карбонат-баккатин III в качестве конечного продукта с выходом 86%.

3) Получение PCMI-01

Растворяли 7,10-диметоксил-1,14-карбонат-баккатин III (1 экв.) и (4S,5R)-3-трет-бутоксикарбонил-2-(4-метоксифенил)-4-фенил-5-оксазолидинкарбоновую кислоту (4 экв.) в дихлорметане, который использовали в качестве растворителя, в который добавляли последовательно 0,5 эквивалента DMAP и 2,0 эквивалента DCC с последующим проведением реакции в течение ночи при комнатной температуре. Полученный продукт вводили в реакцию в 2 эквивалентах раствора ацетилхлорид/метанол с получением таксанового производного PCMI-01 в качестве конечного продукта. Общий выход двух стадий составлял 71%, а чистота конечного продукта составляла 95% или выше.

PCMI-01: Т. пл.: 242-243°С;

MS (масса/заряд) ESI: 900,4 (M+Na)⁺;

¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 8,03 (d, J=7,3 Гц, 2Н), 7,63 (t, J=7,4 Гц, 1Н), 7,50 (t, J=7,7 Гц, 2Н), 7,47-7,33 (m, 5Н), 6,47 (d, J=5,7 Гц, 1Н), 6,09 (d, J=7,5 Гц, 1Н), 5,50 (d, J=9,0 Гц, 1Н), 5,34 (s, 1H), 4,96 (d, J=8,0 Гц, 1Н), 4,78 (d, J=6,8 Гц, 1Н), 4,74 (s, 1H), 4,72 (s, 1Н), 4,30 (d, J=8,5 Гц, 1Н), 4,25 (d, J=8,5 Гц, 1Н), 3,86 (dd, J=10,8, 6,3 Гц, 1Н), 3,71 (d, J=7,5 Гц, 1Н), 3,49 (s, 3Н), 3,32 (s, 3Н), 2,75-2,67 (m, 1Н), 2,45 (s, 3Н), 1,93 (s, 3Н), 1,87-1,78 (m, 1H), 1,77 (s, 3Н), 1,41 (s, 9Н), 1,33 (s, 3Н), 1,31 (s, 3Н).

¹³С ЯМР (101 МГц, CDCl₃) δ 203,51, 171,19, 164,63, 151,96, 135,97, 134,09, 129,92, 128,95, 128,12, 126,67, 88,08, 83,97, 82,17, 81,17, 80,51, 79,69, 75,99, 74,94, 74,42, 69,18, 57,88, 57,08, 46,76, 41,90, 31,83, 29,69, 28,25, 26,06, 22,61, 22,14, 14,56, 10,39.

Пример 2. Получение PCMI-02

1) Получение (4S,5R)-3-бензоил-2-(4-метоксифенил)-4-фенил-5-оксазолидинкарбоновой кислоты

(4S,5R)-3-бензоил-2-(4-метоксифенил)-4-фенил-5-оксазолидинкарбоновую кислоту получали, по сути, тем же способом, который показан в примере 1, за исключением стадии g. Другие стадии можно увидеть в реакциях примера 1.

g. Получение бензил-(4S,5R)-3-бензоил-2-(4-метоксифенил)-4-фенил-5-оксазолидинкарбоксилата

Бензил-(4S,5R)-2-(4-метоксифенил)-4-фенил-5-оксазолидинкарбоксилат (1 экв.) растворяли в сухом тетрагидрофуране, в который добавляли 1,5 эквивалента LHMDS при -40°С. Через 1 час реакции к реакционной жидкости добавляли по каплям 2 эквивалента бензоилхлорида, проводили реакцию в течение 3 часов и завершали реакцию. После дополнительной обработки посредством очистки колоночной хроматографией получали продукт с выходом 85%.

Получение 7,10-диметоксил-1,14-карбонат-баккатина III на стадии 2) и PCMI-02 на стадии 3) проводили в соответствии с теми же процедурами, что и на стадии 2) и стадии 3) в примере 1. В частности, процедуры можно увидеть на стадии 2) и стадии 3) в примере 1, при этом чистота конечного продукта составляла 95% или выше.

PCMI-02: Т. пл.: 234-235°С;

MS (масса/заряд) ESI: 904,3 (M+Na)⁺;

¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 8,14 (d, J=8,0 Гц, 2Н), 7,80 (d, J=7,9 Гц, 2Н), 7,62 (t, J=7,1 Гц, 1Н), 7,53-7,44 (m, 7Н), 7,38 (t, J=7,4 Гц, 3Н), 7,20 (d, J=8,9 Гц, 1Н), 6,49 (d, J=6,6 Гц, 1Н), 6,08 (d, J=7,6 Гц, 1Н), 5,95 (dd, J=8,8, 3,0 Гц, 1Н), 4,97 (d, J=8,8 Гц, 1Н), 4,92-4,88 (m, 2Н, Н-2'), 4,71 (s, 1Н), 4,29 (q, J=8,5 Гц, 2Н), 3,98 (d, J=5,1 Гц, 1Н), 3,86 (m, 1Н), 3,73 (d, J=7,5 Гц, 1Н), 3,48 (s, 3Н), 3,31 (s, 3Н), 2,78-2,65 (m, 1Н), 2,56 (s, 3Н), 1,88 (s, 3Н), 1,85-1,74 (m, 4Н), 1,31 (s, 3Н), 1,28 (s, 3Н).

¹³С ЯМР (101 МГц, CDCl₃) δ 203,54, 172,05, 171,20, 167,55, 164,79, 151,88, 137,66, 136,28, 135,77, 134,10, 133,55, 131,98, 130,12, 129,03, 128,61, 128,30, 128,05, 127,33, 126,86, 88,25, 84,07, 82,08, 81,10, 80,39, 79,82, 76,07, 74,88, 73,97, 69,25, 57,92, 57,08, 55,02, 46,81, 41,86, 31,79, 29,70, 25,98, 24,89, 22,70, 22,28, 14,49, 10,46.

Пример 3. Получение PCMI-03

1) Получение (4S,5R)-3-диметилкарбамоил-2-(4-метоксифенил)-4-фенил-5-оксазолидинкарбоновой кислоты

(4S,5R)-3-диметилкарбамоил-2-(4-метоксифенил)-4-фенил-5-оксазолидинкарбоновую кислоту получали, по сути, тем же способом, который показан в примере 1, за исключением стадии g. Другие стадии можно увидеть в реакциях примера 1.

g. Получение бензил-(4S,5R)-3-диметилкарбамоил-2-(4-метоксифенил)-4-фенил-5-оксазолидинкарбоксилата

Бензил-(4S,5R)-2-(4-метоксифенил)-4-фенил-5-оксазолидинкарбоксилат (1 экв.) растворяли в сухом тетрагидрофуране, в который добавляли 1,5 эквивалента LHMDS при -40°С. Через 1 час реакции к реакционной жидкости добавляли по каплям 2 эквивалента диметилкарбамоилхлорида, проводили реакцию в течение 3 часов и завершали реакцию. После дополнительной обработки посредством очистки колоночной хроматографией получали продукт с выходом 80%.

Получение 7,10-диметоксил-1,14-карбонат-баккатина III на стадии 2) и PCMI-03 на стадии 3) проводили в соответствии с теми же процедурами, что и на стадии 2) и стадии 3) в примере 1. В частности, процедуры можно увидеть на стадии 2) и стадии 3) в примере 1, при этом чистота конечного продукта составляла 95% или выше.

PCMI-03: Т. пл.: 205-206°С;

MS (масса/заряд) ESI: 871,5 (M+Na)⁺;

¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 8,10 (d, J=7,2 Гц, 2Н), 7,63 (t, J=7,4 Гц, 1Н), 7,49 (t, J=1,1 Гц, 2Н), 7,43 (d, J=7,2 Гц, 2Н), 7,38 (t, J=1,4 Гц, 2Н), 7,35-7,29 (m, 1Н), 6,11 (t, J=8,1 Гц, 1Н), 5,97-5,88 (m, 1Н), 5,80 (d, J=6,1 Гц, 1Н), 5,67 (d, J=9,7 Гц, 1H), 5,30 (d, J=9,3 Гц, 1H), 4,93 (d, J=8,7 Гц, 1Н), 4,63 (s, 1H), 4,29 (d, J=8,3 Гц, 1Н), 4,17 (d, J=8,3 Гц, 1Н), 3,97 (t, J=11,1 Гц, 1Н), 3,01 (d, J=6,0 Гц, 1Н), 2,64-2,52 (m, 1Н), 2,38 (dd, J=15,3, 10,0 Гц, 1Н), 2,28 (d, J=11,0 Гц, 5Н), 2,16-2,10 (m, 1H), 2,11 (s, 3Н), 1,88-1,82 (m, 1Н) 1,73 (s, 6Н), 1,42 (s, 12Н), 1,25 (s, 3Н).

¹³С ЯМР (101 МГц, CDCl₃) δ 171,64, 171,21, 170,78, 170,62, 167,10, 155,18, 138,80, 137,60, 136,85, 133,72, 130,09, 129,20, 128,65, 128,58, 127,82, 127,04, 84,73, 82,82, 79,96, 78,61, 76,58, 73,96, 72,18, 70,96, 69,23, 60,42, 55,89, 44,99, 42,98, 42,33, 37,36, 36,66, 35,66, 29,70, 28,30, 22,60, 21,81, 21,40, 16,71, 14,94.

Пример 4. Получение PCMI-04

1) Получение (4S,5R)-3-трет-бутилоксикарбонил-2-(4-метоксифенил)-4-(2-пиридил)-5-оксазолидинкарбоновой кислоты

(4S,5R)-3-трет-бутоксикарбонил-2-(4-метоксифенил)-4-(2-пиридил)-5-оксазолидинкарбоновую кислоту получали, по сути, тем же способом, который показан в примере 1, за исключением стадии с. Другие стадии можно увидеть в реакции примера 1.

с. Получение N-трет-бутилсульфинил-2-пиридинилкарбоксаенамина

Растворяли (S_R)-трет-бутилсульфинамид (5,22 г, 0,043 моль) и пиридин-2-карбальдегид (4,47 г, 0,052 моль) в 20 мл дихлорметана, в который добавляли сульфат магния (25,90 г, 0,22 моль) и PPTS (0,54 г, 2,20 ммоль). Реакционную жидкость перемешивали при комнатной температуре в течение 24 часов, фильтровали и осадок на фильтре промывали дихлорметаном 3 раза (20 мл × 3) и концентрировали с получением неочищенного продукта. Неочищенный продукт очищали с помощью колоночной хроматографии (петролейный эфир/этилацетат = 15:1) с получением бесцветного масла (7,13 г, 80,2%).

Получение 7,10-диметоксил-1,14-карбонат-баккатина III на стадии 2) и PCMI-04 на стадии 3) проводили в соответствии с теми же процедурами, что и на стадии 2) и стадии 3) в примере 1. В частности, процедуры можно увидеть на стадии 2) и стадии 3) в примере 1, при этом чистота конечного продукта составляла 95% или выше.

PCMI-04: Т. пл.: 244-245°С;

MS (масса/заряд) ESI: 901,3 (M+Na)⁺;

¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 8,46 (d, J=4,5 Гц, 1Н), 8,06-7,99 (m, 2Н), 7,83-7,75 (m, 1Н), 7,62 (t, J=7,5 Гц, 1Н), 7,49 (t, J=7,8 Гц, 3Н), 7,29 (m, 1Н), 6,39 (dd, J=6,7, 1,4 Гц, 1Н), 6,08 (d, J=7,4 Гц, 1Н), 5,81 (d, J=10,0 Гц, 1Н), 5,49-5,39 (m, 1Н), 4,99 (d, J=8,2 Гц, 1Н), 4,82 (d, J=6,7 Гц, 1Н), 4,78 (s, 1Н), 4,73 (s, 1Н), 4,30 (d, J=8,3 Гц, 1H), 4,22 (d, J=8,2 Гц, 1H), 3,89 (dd, J=10,8, 6,3 Гц, 1Н), 3,72 (d, J=3,7 Гц, 1Н), 3,45 (s, 3Н), 3,31 (s, 3Н), 2,77-2,67 (m, 1H, Н-6), 2,52 (s, 3Н), 1,92 (d, J=1,0 Гц, 3Н), 1,82-1,77 (dd, J=19,3, 7,9 Гц, 1Н), 1,76 (s, 3Н), 1,48 (s, 9Н), 1,30 (s, 3Н), 1,24 (s, J=8,0 Гц, 3Н).

¹³С ЯМР (101 МГц, CDCl₃) δ 203,62, 171,02, 164,65, 159,41, 152,08, 148,04, 137,91, 136,46, 136,21, 134,12, 129,86, 128,90, 123,04, 122,28, 88,26, 83,97, 82,23, 80,91, 80,40, 80,05, 75,93, 73,92, 69,37, 57,87, 57,10, 57,03, 46,82, 41,85, 31,82, 29,68, 28,34, 26,00, 22,07, 14,55, 10,37.

Пример 5. Получение PCMI-05

1) Получение (4S,5R)-3-трет-бутилоксикарбонил-2-(4-метоксифенил)-4-изобутил-5-оксазолидинкарбоновой кислоты

(4S,5R)-3-трет-бутилоксикарбонил-2-(4-метоксифенил)-4-изобутил-5-оксазолидинкарбоновую кислоту получали, по сути, тем же способом, который показан в примере 1, за исключением стадии с. Другие стадии можно увидеть в реакции примера 1.

с. Получение N-трет-бутилсульфинилизобутилкарбоксаенамина

Растворяли (S_R)-трет-бутилсульфинамид (5,22 г, 0,043 моль) и изовалериановый альдегид (5,51 г, 0,052 моль) в 20 мл дихлорметана, в который добавляли сульфат магния (25,90 г, 0,22 моль) и PPTS (0,54 г, 2,20 ммоль). Реакционную жидкость перемешивали в течение 24 часов при комнатной температуре, фильтровали и осадок на фильтре промывали дихлорметаном 3 раза (20 мл × 3) и концентрировали с получением неочищенного продукта. Неочищенный продукт очищали с помощью колоночной хроматографии (петролейный эфир/этилацетат = 15:1) с получением бесцветного масла (7,26 г, 89,3%).

Получение 7,10-диметоксил-1,14-карбонат-баккатина III на стадии 2) и PCMI-05 на стадии 3) проводили в соответствии с теми же процедурами, что и на стадии 2) и стадии 3) в примере 1. В частности, процедуры можно увидеть на стадии 2) и стадии 3) в примере 1, при этом чистота конечного продукта составляла 95% или выше.

PCMI-05: Т. пл.: 237-238°С;

MS (масса/заряд) ESI: 880,4 (M+Na)⁺;

¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 8,03 (d, J=7,5 Гц, 2Н), 7,61 (t, J=7,4 Гц, 1Н), 7,48 (t, J=7,7 Гц, 2Н), 6,46 (d, J=6,2 Гц, 1Н), 6,08 (d, J=7,5 Гц, 1Н), 4,97 (d, J=7,9 Гц, 1Н), 4,84 (d, J=6,8 Гц, 1H), 4,80 (d, J=9,1 Гц, 1Н), 4,74 (s, 1Н), 4,33 (dd, J=6,2, 3,2 Гц, 1Н), 4,29 (d, J=8,4 Гц, 1Н), 4,23 (d, J=8,4 Гц, 1Н), 4,17-4,07 (m, 1Н), 4,03 (d, J=6,2 Гц, 1Н), 3,86 (dd, J=10,7, 6,4 Гц, 1Н), 3,71 (d, J=7,4 Гц, 1Н), 3,47 (s, 3Н), 3,30 (s, 3Н), 2,70 (ddd, J=14,3, 9,8, 6,3 Гц, 1H), 2,49 (s, 3Н), 1,96 (d, J=1,2 Гц, 3Н), 1,86-1,77 (m, 1Н), 1,76 (s, 3Н), 1,73-1,67 (m, 2Н) 1,521,42 (m, 1Н), 1,39 (s, 9Н), 1,31 (d, J=5,9 Гц, 6Н), 0,99 (t, J=6,5 Гц, 6Н).

¹³С ЯМР (101 МГц, CDCl₃) δ 203,58, 172,84, 170,75, 164,68, 156,23, 152,06, 136,25, 134,08, 129,92, 128,93, 128,06, 88,16, 83,98, 82,17, 81,03, 80,36, 79,73, 75,95, 74,73, 73,81, 69,22, 57,85, 57,09, 57,07, 46,74, 41,92, 31,80, 29,69, 28,24, 26,04, 24,86, 23,25, 22,55, 22,16, 14,66, 10,41.

Пример 6. Получение PCMI-06

1) Получение (4S,5R)-3-трет-бутилоксикарбонил-2-(4-метоксифенил)-4-фенил-5-оксазолидинкарбоновой кислоты

Конкретный способ был представлен в примере 1.

2) Получение 10-метоксил-7-триэтилсилан-1,14-карбонат-баккатина III

В качестве исходного вещества использовали 10-DAB (1 экв.), растворяли в DMF и добавляли последовательно 2,5 эквивалента имидазола и 2,5 эквивалента триэтилхлорсилана. После дополнительной обработки получали неочищенное соединение 7.

Соединение 7 растворяли в дихлорметане, который использовали в качестве растворителя, в который добавляли 2 эквивалента пиридина при 0°С. Затем к реакционной жидкости добавляли по каплям 2 эквивалента n-толуолсульфонилхлорида с введением в реакцию в течение 4 часов. С помощью дополнительной обработки посредством очистки колоночной хроматографией получали соединение 8 с выходом 85-90%.

Соединение 8 (1 экв.) растворяли в безводном тетрагидрофуране с последующим введением в реакцию с метилмагнийбромидом (2 экв.) при комнатной температуре в течение 3 часов в защитной атмосфере азота. После дополнительной обработки получали неочищенное соединение 9 после высушивания.

Соединение 9 (1 экв.) растворяли в растворе ацетона, в который добавляли 10 эквивалентов диоксида марганца, с последующим проведением реакции в течение 4 часов при комнатной температуре. С помощью дополнительной обработки посредством очистки колоночной хроматографией получали соединение 10 с выходом 75%.

Соединение 10 (1 экв.) растворяли в сухом растворе THF/DMPU (4:1), в который добавляли 1,2 эквивалента трет-бутоксида калия при -70°С с последующим проведением реакции в течение 20 мин. К полученной реакционной жидкости медленно добавляли по каплям 2 эквивалента N-(сульфонил)оксазиридина с последующим проведением реакции в течение 2 часов. С помощью дополнительной обработки посредством очистки колоночной хроматографией получали соединение 11 с выходом 75%.

Соединение 11 (1 экв.) вводили в реакцию с 2 эквивалентами N,N'-карбонилдиимидазола (CDI) в сухом тетрагидрофуране с получением соединения 12 с выходом 95%.

Соединение 12 (1 экв.) растворяли в сухом тетрагидрофуране, в который в качестве катализатора добавляли 0,2 эквивалента (R)-2-метилоксазаборолидина при комнатной температуре, с последующим добавлением 5 эквивалентов раствора борана/THF и с последующим проведением реакции в течение 8 часов. После завершения реакции с помощью дополнительной обработки посредством очистки колоночной хроматографией получали соединение 13 10-метоксил-1,14-карбонат-баккатин III в качестве конечного продукта с выходом 80%.

3) Получение PCMI-06

Конкретный способ был представлен на стадии 3) в примере 1, при этом чистота конечного продукта составляла 95% или выше.

PCMI-06: Т. пл.: 233-235°С;

MS (масса/заряд) ESI: 886,3 (M+Na)⁺;

¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 8,02 (d, J=7,5 Гц, 2Н), 7,62 (t, J=7,4 Гц, 1Н), 7,49 (t, J=7,7 Гц, 2Н), 7,46-7,37 (m, 4Н), 7,37-7,30 (m, 1Н), 6,46 (d, J=6,2 Гц, 1Н), 6,10 (d, J=7,6 Гц, 1Н), 5,51 (d, J=7,4 Гц, 1Н), 5,33 (s, 1Н), 4,92 (d, J=7,9 Гц, 1Н), 4,87 (s, 1H), 4,78 (d, J=6,8 Гц, 1H), 4,71 (s, 1H), 4,28 (d, J=8,5 Гц, 1H), 4,22 (t, J=6,8 Гц, 2H), 3,73 (d, J=7,4 Гц, 1H), 3,44 (s, 3H), 2,55 (ddd, J=15,8, 9,6, 6,5 Гц, 1H), 2,43 (s, 3H), 1,91-1,79 (m, 4H), 1,73 (s, 3H), 1,38 (s, 9H), 1,30 (d, 7=2,5 Гц, 6H).

¹³C ЯМР (101 МГц, CDCl₃) δ 205,25, 170,66, 164,75, 151,96, 136,44, 135,77, 134,17, 129,95, 128,98, 128,17, 127,99, 126,66, 88,11, 84,13, 82,19, 80,74, 79,63, 76,07, 74,41, 71,66, 69,34, 60,46, 58,02, 57,36, 46,23, 41,77, 36,79, 28,25, 25,73, 22,54, 22,22, 14,51, 9,83.

Пример 7. Получение PCMI-07

1) Получение (4S,5R)-3-трет-бутилоксикарбонил-2-(4-метоксифенил)-4-фенил-5-оксазолидинкарбоновой кислоты

Конкретный способ был представлен в примере 1.

2) Получение 10-метоксил-7-дигидро-1,14-карбонат-баккатина III

В качестве исходного вещества использовали 10-DAB (1 экв.), растворяли в DMF и добавляли последовательно 2,5 эквивалента имидазола и 2,5 эквивалента триэтилхлорсилана. После дополнительной обработки получали неочищенное соединение 7.

Соединение 7 растворяли в дихлорметане, который использовали в качестве растворителя, в который добавляли 2 эквивалента пиридина при 0°С. Затем к реакционной жидкости добавляли по каплям 2 эквивалента n-толуолсульфонилхлорида с реакцией в течение 4 часов. С помощью дополнительной обработки посредством очистки колоночной хроматографией получали соединение 8 с выходом 85-90%.

Соединение 8 (1 экв.) растворяли в безводном тетрагидрофуране с последующим введением в реакцию с метилмагнийбромидом (2 экв.) при комнатной температуре в течение 3 часов в защитной атмосфере азота. После дополнительной обработки получали неочищенное соединение 9 после высушивания.

Соединение 9 (1 экв.) растворяли в сухом THF, в который добавляли 1,5 эквивалента фторида тетрабутиламмония (в виде раствора в THF) при комнатной температуре. Спустя 1 час протекания реакции реакцию завершали. С помощью дополнительной обработки посредством очистки колоночной хроматографией получали соединение 14 с выходом 92%.

Соединение 14 (1 экв.) растворяли в сухом THF, в который добавляли 8 эквивалентов N,N'-карбонилдиимидазола (CDI) при комнатной температуре. Спустя 2 часа протекания реакции реакцию завершали. С помощью дополнительной обработки посредством очистки колоночной хроматографией получали соединение 15 с выходом 78%.

Соединение 15 (1 экв.) растворяли в растворе диоксана/тетрагидрофурана (10:1). Для инициирования свободнорадикальной реакции добавляли в качестве катализатора 0,2 эквивалента азобисизобутиронитрила при 100°С. После этого к реакционной жидкости добавляли 4 эквивалента гидрида н-бутилолова (Bu₃SnH) с последующим проведением реакции в течение 1 часа, охлаждали при комнатной температуре в течение ночи. После очистки колоночной хроматографией получали соединение 16 с выходом 52%.

Соединение 16 (1 экв.) растворяли в растворе ацетона, в который добавляли 10 эквивалентов диоксида марганца, при комнатной температуре с последующим проведением реакции в течение 4 часов. С помощью дополнительной обработки посредством очистки колоночной хроматографией получали соединение 17 с выходом 75%.

Соединение 17 (1 экв.) растворяли в сухом растворе THF/DMPU (4:1), в который добавляли 1,2 эквивалента трет-бутоксида калия при -70°С с последующим проведением реакции в течение 20 мин. К полученной реакционной жидкости медленно добавляли по каплям 2 эквивалента N-(сульфонил)оксазиридина с последующим проведением реакции в течение 2 часов. С помощью дополнительной обработки посредством очистки колоночной хроматографией получали соединение 18 с выходом 75%.

Соединение 18 (1 экв.) вводили в реакцию с 2 эквивалентами N,N'-карбонилдиимидазола (CDI) в сухом тетрагидрофуране с получением соединения 19 с выходом 95%.

Соединение 19 (1 экв.) растворяли в сухом тетрагидрофуране, в который в качестве катализатора добавляли 0,2 эквивалента (R)-2-метилоксазаборолидина при комнатной температуре, с последующим добавлением 5 эквивалентов раствора борана/THF и с последующим проведением реакции в течение 8 часов. После завершения реакции с помощью дополнительной обработки посредством очистки колоночной хроматографией получали соединение 20 10-метоксил-7-дигидро-1,14-карбонат-баккатин III в качестве конечного продукта с выходом 80%.

3) Получение PCMI-07

Конкретный способ был представлен на стадии 3) в примере 1, при этом чистота конечного продукта составляла 95% или выше.

PCMI-07: Т. пл.: 226-227°С;

MS (масса/заряд) ESI: 870,3 (M+Na)⁺;

¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 8,05 (d, J=7,4 Гц, 2H), 7,61 (t, J=7,4 Гц, 1H), 7,50 (t, J=7,7 Гц, 3Н), 7,47-7,31 (m, 5H), 6,46 (d, J=6,3 Гц, 1H), 6,09 (d, J=7,8 Гц, 1H), 5,43 (d, J=9,0 Гц, 1H,), 5,35 (s, 1H), 4,90 (d, J=8,0 Гц, 1H), 4,86 (s, 1H), 4,82 (d, J=7,0 Гц, 1H), 4,70 (s, 1H), 4,28 (s, 2H), 3,66 (d, J=7,7 Гц, 1H), 3,58 (s, 1H), 3,46 (s, 3H), 2,43 (s, 3H), 2,23 (dd, J=15,0, 6,1 Гц, 1H), 2,04-1,93 (m, 2H), 1,89 (d, J=1,1 Гц, 3Н), 1,80 (s, 3Н), 1,59 (dd, J=11,9, 5,7 Гц, 1H), 1,38 (s, 9H), 1,30 (s, 3H), 1,26 (s, 3H).

¹³C ЯМР (101 МГц, CDCl₃) δ 207,81, 171,18, 164,83, 151,95, 136,00, 134,05, 129,97, 129,01, 128,94, 128,19, 128,16, 126,59, 88,25, 84,31, 81,75, 81,02, 80,67, 79,59, 76,20, 74,43, 70,08, 57,20, 53,30, 41,52, 35,53, 31,93, 29,70, 28,23, 27,02, 25,35, 22,70, 22,10, 14,93, 14,31.

Пример 8. Получение PCMI-08

1) Получение (4S,5R)-3-трет-бутилоксикарбонил-2-(4-метоксифенил)-4-фенил-5-оксазолидинкарбоновой кислоты

Конкретный способ был представлен на стадии 1) в примере 1.

2) Получение 10-диметилкарбамоил-7-метоксил-1,14-карбонат-баккатина III

В качестве исходного вещества использовали 10-DAB (1 экв.), растворяли в DMF и добавляли последовательно 2,5 эквивалента имидазола и 2,5 эквивалента триэтилхлорсилана. После дополнительной обработки получали неочищенное соединение 7.

Соединение 7 (1 экв.) растворяли в сухом THF, который использовали в качестве растворителя, в который добавляли 1,5 эквивалента LHMDS при 0°С. Через 1 час реакции к реакционной жидкости медленно добавляли по каплям 2 эквивалента диметилкарбамоилхлорида и проводили реакцию в течение 2 часов. С помощью дополнительной обработки посредством очистки колоночной хроматографией получали соединение 21 с выходом 87%.

Соединение 21 (1 экв.) растворяли в растворе ацетона, в который добавляли 10 эквивалентов диоксида марганца, при комнатной температуре с последующим введением в реакцию в течение 4 часов. С помощью дополнительной обработки посредством очистки колоночной хроматографией получали соединение 22 с выходом 75%.

Соединение 22 (1 экв.) растворяли в сухом THF, в который добавляли 1,5 эквивалента фторида тетрабутиламмония (в виде раствора в THF) при комнатной температуре. Спустя 1 час протекания реакции реакцию завершали. С помощью дополнительной обработки посредством очистки колоночной хроматографией получали соединение 23 с выходом 90%.

Соединение 23 вводили в реакцию с n-толуолсульфонилхлоридом с получением соединения 24.

Соединение 24 (1 экв.) растворяли в безводном тетрагидрофуране с последующим введением в реакцию с метилмагнийбромидом (2 экв.) при комнатной температуре в течение 3 часов в защитной атмосфере азота. После дополнительной обработки получали неочищенное соединение 25 после высушивания.

Соединение 25 (1 экв.) растворяли в сухом растворе THF/DMPU (4:1), в который добавляли 1,2 эквивалента трет-бутоксида калия при -70°С с последующим проведением реакции в течение 20 мин. К полученной реакционной жидкости медленно добавляли по каплям 2 эквивалента N-(сульфонил)оксазиридина с последующим проведением реакции в течение 2 часов. С помощью дополнительной обработки посредством очистки колоночной хроматографией получали соединение 26 с выходом 75%.

Соединение 26 (1 экв.) вводили в реакцию с 2 эквивалентами N,N'-карбонилдиимидазола (CDI) в сухом тетрагидрофуране с получением соединения 27 с выходом 95%.

Соединение 27 (1 экв.) растворяли в сухом тетрагидрофуране, в который в качестве катализатора добавляли 0,2 эквивалента (R)-2-метилоксазаборолидина при комнатной температуре, с последующим добавлением 5 эквивалентов раствора борана/THF и с последующим проведением реакции в течение 8 часов. После завершения реакции дополнительной обработкой посредством очистки колоночной хроматографией получали соединение 28 10-диметилкарбамоил-7-метокси-1,14-карбонат-баккатин III в качестве конечного продукта с выходом 80%.

3) Получение PCMI-08

Конкретный способ был представлен на стадии 3) в примере 1, при этом чистота конечного продукта составляла 95% или выше.

PCMI-08: Т. пл.: 246-247°С;

MS (масса/заряд) ESI: 957,5 (M+Na)⁺;

¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 8,04 (d, J=7,5 Гц, 2Н), 7,63 (t, J=7,4 Гц, 1Н), 7,50 (t, J=7,7 Гц, 2Н), 7,45-7,31 (m, 5Н), 6,45 (d, J=6,0 Гц, 1Н), 6,39 (s, 1Н), 6,11 (d, J=7,4 Гц, 1Н), 5,55 (d, J=8,7 Гц, 1Н), 5,35 (s, 1Н), 4,96 (d, J=8,2 Гц, 1Н), 4,82 (d, J=6,6 Гц, 1H), 4,71 (s, 1Н), 4,29 (d, J=8,5 Гц, 1Н), 4,22 (d, J=8,4 Гц, 1Н), 3,86 (dd, J=10,6, 6,5 Гц, 1Н), 3,78 (d, J=7,8 Гц, 1Н), 3,35 (s, 3Н), 3,07 (s, 3Н), 2,98 (s, 3Н), 2,72 (ddd, J=14,6, 9,7, 6,5 Гц, 1Н), 2,46 (s, 3Н), 1,98 (d, J=0,9 Гц, 3Н), 1,85-1,74 (m, 4Н), 1,40 (s, 9Н), 1,36 (s, 3Н), 1,32 (s, 3Н).

¹³С ЯМР (101 МГц, CDCl₃) δ 202,12, 171,91, 171,24, 170,81, 164,68, 155,71, 154,81, 151,92, 138,16, 137,39, 134,64, 134,15, 129,93, 128,95, 128,12, 128,01, 126,63, 88,01, 84,02, 81,04, 80,60, 80,16, 79,68, 75,91, 75,00, 74,74, 74,34, 69,12, 57,81, 57,36, 46,68, 41,83, 36,81, 36,21, 32,12, 28,26, 25,87, 22,75, 22,62, 14,55, 10,39.

Пример 9. Получение PCMI-09

1) Получение (4S,5R)-3-трет-бутилоксикарбонил-2-(4-метоксифенил)-4-(2-пиридил)-5-оксазолидинкарбоновой кислоты

Конкретный способ был представлен на стадии 1) в примере 4.

2) Получение 10-диметилкарбамоил-7-метоксил-1,14-карбонат-баккатина III

Конкретный способ был представлен на стадии 2) в примере 8.

3) Получение PCMI-09

Конкретный способ был представлен на стадии 3) в примере 1, при этом чистота конечного продукта составляла 95% или выше.

PCMI-09: Т. пл.: 241-242°С;

MS (масса/заряд) ESI: 958,3 (M+Na)⁺;

¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 8,06 (d, J=7,6 Гц, 2Н), 7,63 (t, J=7,4 Гц, 1H), 7,50 (t, J=7,7 Гц, 2Н), 6,48 (d, J=6,3 Гц, 1Н), 6,42 (s, 1H), 6,14 (d, J=7,4 Гц, 1Н), 4,95 (d, J=8,3 Гц, 1Н), 4,89 (d, J=6,9 Гц, 1Н), 4,77 (d, J=9,0 Гц, 1Н), 4,33 (dd, J=8,9, 5,8 Гц, 2Н), 4,27 (d, J=8,4 Гц, 1Н), 4,22-4,09 (m, 1Н), 3,93-3,83 (m, 2Н, Н-7), 3,77 (d, J=7,3 Гц, 1H), 3,41 (s, 3Н), 2,88 (s, 6Н), 2,60-2,41 (m, 4Н), 2,02 (s, 3Н), 1,96 (dd, J=19,7, 7,7 Гц, 1Н), 1,85 (s, 3Н), 1,75-1,69 (m, 1H), 1,52-1,37 (m, 11Н), 1,30 (s, 3Н), 1,27 (s, 3Н), 1,01 (t, J=6,3 Гц, 6Н).

¹³С ЯМР (101 МГц, CDCl₃) δ 205,08, 172,96, 170,35, 164,81, 154,97, 152,01, 136,39, 134,05, 129,95, 128,94, 128,11, 88,09, 84,03, 80,96, 80,39, 80,16, 79,69, 75,89, 75,02, 74,64, 73,84, 69,17, 57,29, 57,07, 51,49, 45,88, 41,76, 40,57, 36,54, 35,86, 33,76, 29,67, 28,24, 25,57, 24,85, 23,24, 22,46, 22,08, 14,42, 10,90.

Пример 10. Получение PCMI-10

1) Получение (4S,5R)-3-трет-бутилоксикарбонил-2-(4-метоксифенил)-4-изобутил-5-оксазолидинкарбоновой кислоты

Конкретный способ был представлен на стадии 1) в примере 5.

2) Получение 10-диметилкарбамоил-7-метоксил-1,14-карбонат-баккатина III

Конкретный способ был представлен на стадии 2) в примере 8.

3) Получение PCMI-10

Конкретный способ был представлен на стадии 3) в примере 1, при этом чистота конечного продукта составляла 95% или выше.

PCMI-10: Т. пл.: 236-237°С;

MS (масса/заряд) ESI: 937,4 (M+Na)⁺;

¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 8,05 (d, J=7,4 Гц, 2Н), 7,63 (t, J=7,4 Гц, 1Н), 7,50 (t, J=7,7 Гц, 2Н), 6,47 (d, J=6,3 Гц, 1Н), 6,41 (s, 1Н), 6,13 (d, J=7,4 Гц, 1H), 4,98 (d, J=8,0 Гц, 1Н), 4,89 (d, J=6,8 Гц, 1Н), 4,77 (d, J=9,0 Гц, 1Н), 4,37-4,32 (m, 1Н), 4,30 (d, J=8,5 Гц, 1Н), 4,24 (d, J=8,5 Гц, 1Н), 4,17-4,06 (m, 1Н), 4,04 (d, J=6,2 Гц, 1Н), 3,88 (dd, J=10,6, 6,5 Гц, 1Н), 3,77 (d, J=7,3 Гц, 1Н), 3,36 (s, 3Н), 3,08 (s, 3Н), 2,99 (s, 3Н), 2,74 (ddd, J=14,5, 9,7, 6,4 Гц, 1Н), 2,52 (s, 3Н), 2,04 (d, J=1,2 Гц, 3Н), 1,88-1,77 (m, 5Н), 1,77-1,66 (m, 3Н), 1,41 (s, 11Н), 1,37 (s, 3Н), 1,34 (s, 3Н), 1,01 (t, J=6,7 Гц, 6H).

¹³C ЯМР (101 МГц, CDCl₃) δ 202,17, 172,86, 170,75, 164,73, 156,27, 154,81, 151,99, 137,55, 134,58, 134,12, 129,94, 128,96, 128,03, 88,09, 84,03, 80,96, 80,39, 80,16, 79,69, 75,89, 75,02, 74,64, 73,84, 69,17, 57,83, 57,35, 51,68, 46,68, 41,86, 40,30, 36,81, 36,21, 32,10, 29,70, 28,24, 25,87, 24,87, 23,23, 22,56, 22,20, 14,65, 10,41.

Пример 11. Получение PCMI-11

1) Получение (4S,5R)-3-диметилкарбамоил-2-(4-метоксифенил)-4-фенил-5-оксазолидинкарбоновой кислоты

Конкретный способ был представлен на стадии 1) в примере 3.

2) Получение 10-диметилкарбамоил-7-метоксил-1,14-карбонат-баккатина III

Конкретный способ был представлен на стадии 2) в примере 8.

3) Получение PCMI-11

Конкретный способ был представлен на стадии 3) в примере 1, при этом чистота конечного продукта составляла 95% или выше.

PCMI-11: Т. пл.: 241-242°С;

MS (масса/заряд) ESI: 928,5 (M+Na)⁺;

¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 8,03 (d, J=7,3 Гц, 2H), 7,62 (t, J=7,4 Гц, 1H), 7,49 (t, J=7,7 Гц, 2H), 6,08 (d, J=7,2 Гц, 1H), 5,49 (dd, J=10,7, 7,2 Гц, 1H), 5,23 (s, 1H), 5,04 (t, 1H), 4,97 (d, J=8,3 Гц, 1H), 4,80 (d, J=5,8 Гц, 1H), 4,32 (d, J=8,4 Гц, 1H), 4,22 (d, J=8,4 Гц, 1H), 3,87 (d, J=7,2 Гц, 1H), 3,67 (d, J=5,3 Гц, 1H), 3,40 (s, 3H), 2,87 (s, 6H), 2,54 (m, J=14,5, 9,5, 7,3 Гц, 1H), 2,31 (s, 3H), 2,17 (s, 3H), 1,92 (ddd, J=14,2, 8,1, 2,6 Гц, 1H), 1,81 (s, 3H), 1,24 (s, 3H), 1,14 (s, 3H).

¹³C ЯМР (101 МГц, CDCl₃) δ 205,73, 171,28, 170,21, 164,84, 155,01, 152,98, 141,50, 134,17, 133,99, 129,83, 128,91, 128,14, 88,54, 84,21, 83,86, 82,88, 80,06, 75,99, 72,28, 71,79, 69,45, 57,11, 57,00, 46,25, 41,32, 36,53, 35,89, 33,73, 25,62, 22,21, 21,33, 14,91, 10,85.

Пример 12. Получение PCMI-12

1) Получение (4S,5R)-3-трет-бутилоксикарбонил-2-(4-метоксифенил)-4-фенил-5-оксазолидинкарбоновой кислоты

Конкретный способ был представлен на стадии 1) в примере 1.

2) Получение 10-метоксилформил-7-метоксил-1,14-карбонат-баккатина III

В качестве исходного вещества использовали 10-DAB (1 экв.), растворяли в DMF и добавляли последовательно 2,5 эквивалента имидазола и 2,5 эквивалента триэтилхлорсилана. После дополнительной обработки получали неочищенное соединение 7.

Соединение 7 (1 экв.) растворяли в сухом THF, который использовали в качестве растворителя, в который добавляли 1,5 эквивалента LHMDS при 0°С. Через 1 час реакции к реакционной жидкости медленно добавляли по каплям 2 эквивалента метоксилформилхлорида и проводили реакцию в течение 2 часов. С помощью дополнительной обработки посредством очистки колоночной хроматографией получали соединение 29 с выходом 62%.

Соединение 29 (1 экв.) растворяли в растворе ацетона, в который добавляли 10 эквивалентов диоксида марганца, при комнатной температуре с последующим введением в реакцию в течение 4 часов. С помощью дополнительной обработки посредством очистки колоночной хроматографией получали соединение 30 с выходом 75%.

Соединение 30 (1 экв.) растворяли в сухом THF, в который добавляли 1,5 эквивалента фторида тетрабутиламмония (в виде раствора в THF) при комнатной температуре. Спустя 1 час протекания реакции реакцию завершали. С помощью дополнительной обработки посредством очистки колоночной хроматографией получали соединение 31 с выходом 90%.

Соединение 31 вводили в реакцию с n-толуолсульфонилхлоридом с получением соединения 32.

Соединение 32 (1 экв.) растворяли в безводном тетрагидрофуране с последующим введением в реакцию с метилмагнийбромидом (2 экв.) при комнатной температуре в течение 3 часов в защитной атмосфере азота. После дополнительной обработки получали неочищенное соединение 33 после высушивания.

Соединение 33 (1 экв.) растворяли в сухом растворе THF/DMPU (4:1), в который добавляли 1,2 эквивалента трет-бутоксида. калия при -70°С с последующим проведением реакции в течение 20 мин. К полученной реакционной жидкости медленно добавляли по каплям 2 эквивалента N-(сульфонил)оксазиридина с последующим проведением реакции в течение 2 часов. С помощью дополнительной обработки посредством очистки колоночной хроматографией получали соединение 34 с выходом 75%.

Соединение 34 (1 экв.) вводили в реакцию с 2 эквивалентами N,N'-карбонилдиимидазола (CDI) в сухом тетрагидрофуране с получением соединения 35 с выходом 95%.

Соединение 35 (1 экв.) растворяли в сухом тетрагидрофуране, в который в качестве катализатора добавляли 0,2 эквивалента (R)-2-метилоксазаборолидина при комнатной температуре, с последующим добавлением 5 эквивалентов раствора борана/THF и с последующим проведением реакции в течение 8 часов. После завершения реакции с помощью дополнительной обработки посредством очистки колоночной хроматографией получали соединение 36 10-метоксилформил-7-метокси-1,14-карбонат-баккатин III в качестве конечного продукта с выходом 80%.

3) Получение PCMI-12

Конкретный способ был представлен на стадии 3) в примере 1, при этом чистота конечного продукта составляла 95% или выше.

PCMI-12: Т. пл.: 231-232°С;

MS (масса/заряд) ESI: 944,4 (M+Na)⁺;

¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 8,02 (d, J=7,3 Гц, 2Н), 7,61 (t, J=7,4 Гц, 1Н), 7,48 (t, J=7,7 Гц, 2Н), 7,45-7,30 (m, 5Н), 6,44 (d, J=6,1 Гц, 1Н, Н-13), 6,15 (s, 1Н, Н-10), 6,09 (d, J=7,5 Гц, 1Н, Н-2), 5,47 (d, J=9,0 Гц, 1Н, NH-3'), 5,33 (s, 1Н, Н-3'), 4,94 (d, J=7,9 Гц, 1Н, Н-5), 4,78 (d, J=6,7 Гц, 1Н, Н-14), 4,71 (s, 1Н, Н-2'), 4,28 (d, J=8,4 Гц, 1Н, Н-20), 4,21 (d, J=8,3 Гц, 1Н, Н-20), 3,92-3,80 (m, 4Н, ОН-2'), 3,70 (d, J=7,4 Гц, 1Н, Н-3), 3,35 (s, 3Н), 2,72 (ddd, J=14,5, 9,8, 6,4 Гц, 1Н, Н-6), 2,44 (s, 3Н), 1,94 (d, J=1,1 Гц, 3Н), 1,86-1,73 (m, 4Н, Н-6), 1,40 (s, 9Н), 1,32 (s, 6Н).

¹³С ЯМР (101 МГц, CDCl₃) δ 200,44, 171,89, 170,88, 164,62, 154,60, 151,81, 138,29, 134,17, 133,84, 129,94, 129,03, 128,95, 128,23, 127,97, 126,65, 87,92, 83,94, 81,04, 80,72, 80,10, 79,56, 75,91, 74,74, 74,40, 69,00, 57,67, 57,38, 55,41, 46,62, 41,79, 32,06, 29,70, 28,25, 25,74, 22,62, 22,35, 14,71, 10,40.

Пример 13. Получение PCMI-13

1) Получение (4S,5R)-3-трет-бутилоксикарбонил-2-(4-метоксифенил)-4-фенил-5-оксазолидинкарбоновой кислоты

Конкретный способ был представлен на стадии 1) в примере 1.

2) Получение 10-этилтиоформил-7-метоксил-1,14-карбонат-баккатина III

В качестве исходного вещества использовали 10-DAB (1 экв.), растворяли в DMF и добавляли последовательно 2,5 эквивалента имидазола и 2,5 эквивалента триэтилхлорсилана. После дополнительной обработки получали неочищенное соединение 7.

Соединение 7 (1 экв.) растворяли в сухом THF, который использовали в качестве растворителя, и сначала вводили в реакцию с 2 эквивалентами N,N-карбонилдиимидазола при комнатной температуре в течение 2 часов. Затем к реакционной жидкости добавляли 2 эквивалента этантиола. После 4 часов реакции с помощью дополнительной обработки посредством очистки колоночной хроматографией получали соединение 37 с выходом 72%.

Соединение 37 (1 экв.) растворяли в растворе ацетона, в который добавляли 10 эквивалентов диоксида марганца, при комнатной температуре с последующим введением в реакцию в течение 4 часов. С помощью дополнительной обработки посредством очистки колоночной хроматографией получали соединение 38 с выходом 86%.

Соединение 38 (1 экв.) растворяли в сухом THF, в который добавляли 1,5 эквивалента фторида тетрабутиламмония (в виде раствора в THF) при комнатной температуре. Спустя 1 час протекания реакции реакцию завершали. С помощью дополнительной обработки посредством очистки колоночной хроматографией получали соединение 39 с выходом 90%.

Соединение 39 вводили в реакцию с n-толуолсульфонилхлоридом с получением соединения 40.

Соединение 40 (1 экв.) растворяли в безводном тетрагидрофуране с последующим введением в реакцию с метилмагнийбромидом (2 экв.) при комнатной температуре в течение 3 часов в защитной атмосфере азота. После дополнительной обработки получали неочищенное соединение 41 после высушивания.

Соединение 41 (1 экв.) растворяли в сухом растворе THF/DMPU (4:1), в который добавляли 1,2 эквивалента трет-бутоксида калия при -70°С с последующим проведением реакции в течение 20 мин. К полученной реакционной жидкости медленно добавляли по каплям 2 эквивалента N-(сульфонил)оксазиридина с последующим проведением реакции в течение 2 часов. С помощью дополнительной обработки посредством очистки колоночной хроматографией получали соединение 42 с выходом 75%.

Соединение 42 (1 экв.) вводили в реакцию с 2 эквивалентами N,N'-карбонилдиимидазола (CDI) в сухом тетрагидрофуране с получением соединения 43 с выходом 95%.

Соединение 43 (1 экв.) растворяли в сухом тетрагидрофуране, в который в качестве катализатора добавляли 0,2 эквивалента (R)-2-метилоксазаборолидина при комнатной температуре, с последующим добавлением 5 эквивалентов раствора борана/THF и с последующим проведением реакции в течение 8 часов. После завершения реакции с помощью дополнительной обработки посредством очистки колоночной хроматографией получали соединение 44 10-этилтиоформил-7-метокси-1,14-карбонат-баккатин III в качестве конечного продукта с выходом 80%.

3) Получение PCMI-13

Конкретный способ был представлен на стадии 3) в примере 1, при этом чистота конечного продукта составляла 95% или выше.

PCMI-13: Т. пл.: 215-216°С;

MS (масса/заряд) ESI: 974,4 (M+Na)⁺;

¹Н ЯМР (400 МГц, MeOD) δ 8,14 (d, J=7,6 Гц, 2Н), 7,69 (t, J=7,4 Гц, 1Н), 7,58 (t, J=7,7 Гц, 2H), 7,44-7,36 (m, 4H), 7,34-7,27 (m, 1H), 6,39 (d, J=10,7 Гц, 1H), 6,15 (t, J=8,9 Гц, 1H), 5,87 (d, J=6,3 Гц, 1H), 5,23 (d, J=10,7 Гц, 1H), 5,15 (s, 1H), 4,99 (d, J=9,0 Гц, 1H), 4,89 (m, 1H), 4,56 (d, J=2,3 Гц, 1H), 4,25 (d, J=8,3 Гц, 1H), 4,19 (d, J=8,3 Гц, 1H), 3,33 (s, 1H), 3,24 (d, J=6,1 Гц, 1H), 2,77-2,62 (m, 1H), 2,34 (s, 3H), 2,22 (t, J=9,2 Гц, 2H), 2,14 (s, 3H), 1,99-1,88 (m, 4H), 1,78 (s, 3H), 1,66 (s, 3H), 1,39 (s, 9H), 1,27 (s, 3H).

¹³C ЯМР (101 МГц, MeOD) δ 173,20, 171,57, 170,61, 170,09, 166,07, 156,40, 146,86, 141,17, 139,00, 133,34, 129,90, 129,68, 128,29, 127,40, 126,90, 84,25, 83,21, 80,84, 79,21, 79,01, 77,19, 75,68, 73,67, 73,54, 71,10, 70,96, 60,15, 56,99, 45,14, 42,88, 38,23, 34,89, 33,87, 33,37, 27,33, 26,98, 25,37, 24,68, 22,31, 21,85, 19,53, 13,59, 13,12, 12,31.

Пример 14. Получение PCMI-14

1) Получение (4S,5R)-3-трет-бутилоксикарбонил-2-(4-метоксифенил)-4-фенил-5-оксазолидинкарбоновой кислоты

Конкретный способ был представлен на стадии 1) в примере 1.

2) Получение 7-диметилкарбамоил-10-метоксил-1,14-карбонат-баккатина III

В качестве исходного вещества использовали 10-DAB (1 экв.), растворяли в DMF и добавляли последовательно 2,5 эквивалента имидазола и 2,5 эквивалента триэтилхлорсилана. После дополнительной обработки получали неочищенное соединение 7.

Соединение 7 растворяли в дихлорметане, который использовали в качестве растворителя, в который добавляли 2 эквивалента пиридина при 0°С. Затем к реакционной жидкости добавляли по каплям 2 эквивалента n-толуолсульфонилхлорида. После 4 часов реакции с помощью дополнительной обработки посредством очистки колоночной хроматографией получали соединение 8 с выходом 85-90%.

Соединение 8 (1 экв.) растворяли в безводном тетрагидрофуране с последующим введением в реакцию с метилмагнийбромидом (2 экв.) при комнатной температуре в течение 3 часов в защитной атмосфере азота. После дополнительной обработки получали неочищенное соединение 9 после высушивания.

Соединение 9 (1 экв.) растворяли в растворе ацетона, в который добавляли 10 эквивалентов диоксида марганца, при комнатной температуре с последующим введением в реакцию в течение 4 часов. С помощью дополнительной обработки посредством очистки колоночной хроматографией получали соединение 10 с выходом 75%.

Соединение 10 (1 экв.) растворяли в сухом THF, в который добавляли 1,5 эквивалента фторида тетрабутиламмония (в виде раствора в THF) при комнатной температуре. Спустя 1 час протекания реакции реакцию завершали. С помощью дополнительной обработки посредством очистки колоночной хроматографией получали соединение 45 с выходом 90%.

Соединение 45 (1 экв.) растворяли в сухом THF, который использовали в качестве растворителя, в который добавляли 1,5 эквивалента LHMDS при 0°С. Через 1 час реакции к реакционной жидкости медленно добавляли по каплям 2 эквивалента диметилкарбамоилхлорида и проводили реакцию в течение 2 часов. С помощью дополнительной обработки посредством очистки колоночной хроматографией получали соединение 46 с выходом 87%.

Соединение 46 (1 экв.) растворяли в сухом растворе THF/DMPU (4:1), в который добавляли 1,2 эквивалента трет-бутоксида калия при -70°С с последующим проведением реакции в течение 20 мин. К полученной реакционной жидкости медленно добавляли по каплям 2 эквивалента N-(сульфонил)оксазиридина с последующим проведением реакции в течение 2 часов. С помощью дополнительной обработки посредством очистки колоночной хроматографией получали соединение 47 с выходом 75%.

Соединение 47 (1 экв.) вводили в реакцию с 2 эквивалентами N,N'-карбонилдиимидазола (CDI) в сухом тетрагидрофуране с получением соединения 48 с выходом 95%.

Соединение 48 (1 экв.) растворяли в сухом тетрагидрофуране, в который в качестве катализатора добавляли 0,2 эквивалента (R)-2-метилоксазаборолидина при комнатной температуре, с последующим добавлением 5 эквивалентов раствора борана/THF и с последующим проведением реакции в течение 8 часов. После завершения реакции дополнительной обработкой посредством очистки колоночной хроматографией получали соединение 49 7-диметилкарбамоил-10-метоксил-1,14-карбонат-баккатин III в качестве конечного продукта с выходом 80%.

3) Получение PCMI-14

Конкретный способ был представлен на стадии 3) в примере 1, при этом чистота конечного продукта составляла 95% или выше.

PCMI-14: Т. пл.: 236-237°С;

MS (масса/заряд) ESI: 957,3 (M+Na)⁺;

¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 8,05 (d, J=7,3 Гц, 2H), 7,63 (t, J=7,4 Гц, 1H), 7,51 (t, J=7,7 Гц, 2H), 7,47-7,31 (m, 5H), 6,48 (d, J=6,1 Гц, 1H, H-13), 6,12 (d, J=7,4 Гц, 1H, H-2), 5,54 (d, J=9,1 Гц, 1H, NH-3'), 5,46 (dd, J=10,7, 7,2 Гц, 1H, H-7), 5,38 (s, 1H, H-3'), 5,23 (s, 1H, H-10), 4,93 (d, J=8,0 Гц, 1H, H-5), 4,82 (d, J=6,8 Гц, 1H, H-14), 4,73 (d, J=4,1 Гц, 1H, H-2'), 4,31 (d, J=8,4 Гц, 1H, H-20), 4,26 (d, J=8,5 Гц, 1H, H-20), 3,85 (d, J=7,4 Гц, 1H, H-3), 3,68 (s, 1H, OH-2'), 3,40 (s, 3H), 2,88 (s, 6H), 2,59-2,49 (m, 1H, H-6), 2,00-1,94 (m, 4H, H-6), 1,84 (s, 3H), 1,40 (s, 9H), 1,30 (d, J=3,2 Гц, 6H).

¹³C ЯМР (101 МГц, CDCl₃) δ 205,07, 172,08, 170,45, 164,78, 154,96, 151,98, 136,29, 135,82, 134,15, 129,96, 128,97, 128,12, 128,02, 126,64, 88,12, 83,89, 82,34, 80,59, 80,41, 79,67, 76,06, 74,87, 74,27, 71,99, 69,33, 57,30, 57,07, 45,85, 41,72, 36,57, 35,89, 33,90, 33,76, 29,70, 28,25, 25,60, 25,55, 24,94, 22,56, 22,04, 14,38, 10,91.

Пример 15. Получение PCMI-15

1) Получение (4S,5R)-3-трет-бутилоксикарбонил-2-(4-метоксифенил)-4-(2-пиридил)-5-оксазолидинкарбоновой кислоты

Конкретный способ был представлен на стадии 1) в примере 4.

2) Получение 7-диметилкарбамоил-10-метоксил-1,14-карбонат-баккатина III

Конкретный способ был представлен на стадии 2) в примере 14.

3) Получение PCMI-15

Конкретный способ был представлен на стадии 3) в примере 1, при этом чистота конечного продукта составляла 95% или выше.

PCMI-15: Т. пл.: 231-232°С;

MS (масса/заряд) ESI: 958,3 (M+Na)⁺;

¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 8,50 (d, J=4,6 Гц, 1Н), 8,10-8,01 (m, 2Н), 7,80 (td, J=7,8, 1,6 Гц, 1Н), 7,65 (t, J=7,4 Гц, 1Н), 7,51 (dd, J=16,2, 8,2 Гц, 3Н), 7,30 (d, J=9,9 Гц, 1Н), 6,40 (d, J=6,2 Гц, 1Н), 6,13 (d, J=7,4 Гц, 1Н), 5,85 (d, J=10,0 Гц, 1Н), 5,55-5,42 (m, 2Н, Н-7), 5,24 (s, 1Н), 4,98 (d, J=8,2 Гц, 1Н), 4,88 (d, J=6,9 Гц, 1Н), 4,80 (s, 1Н), 4,34 (d, J=8,3 Гц, 1Н), 4,26 (d, J=8,4 Гц, 1Н), 3,87 (d, J=7,5 Гц, 1Н), 3,38 (s, 3Н), 2,88 (t, J=3,5 Гц, 6Н), 2,61-2,51 (m, 4Н), 2,01-1,91 (m, 4Н), 1,85 (s, 3Н), 1,51 (s, 9Н), 1,27 (s, 3Н), 1,25 (s, 3Н).

¹³С ЯМР (101 МГц, CDCl₃) δ 205,25, 172,80, 170,69, 164,80, 159,45, 154,99, 152,14, 148,17, 137,90, 136,87, 135,58, 134,23, 129,89, 128,97, 128,02, 123,07, 122,09, 88,33, 83,89, 82,38, 80,49, 80,10, 80,00, 76,01, 74,20, 72,05, 69,52, 57,24, 57,09, 55,40, 45,87, 41,64, 36,57, 35,92, 33,79, 31,93, 29,70, 28,34, 25,47, 22,70, 22,00, 21,93, 14,36, 14,13, 10,89.

Пример 16. Получение PCMI-16

1) Получение (4S,5R)-3-трет-бутилоксикарбонил-2-(4-метоксифенил)-4-изобутил-5-оксазолидинкарбоновой кислоты

Конкретный способ был представлен на стадии 1) в примере 5.

2) Получение 7-диметилкарбамоил-10-метоксил-1,14-карбонат-баккатина III

Конкретный способ был представлен на стадии 2) в примере 14.

3) Получение PCMI-16

Конкретный способ был представлен на стадии 3) в примере 1, при этом чистота конечного продукта составляла 95% или выше.

PCMI-16: Т. пл.: 227-228°С;

MS (масса/заряд) ESI: 937,2 (M+Na)⁺;

¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 8,06 (d, J=7,6 Гц, 2Н), 7,63 (t, J=7,4 Гц, 1Н), 7,50 (t, J=7,7 Гц, 2H), 6,48 (d, J=6,3 Гц, 1H), 6,13 (d, J=7,4 Гц, 1H), 5,48 (dd, J=10,6, 7,2 Гц, 1H), 5,25 (s, 1H), 4,95 (d, J=8,3 Гц, 1H), 4,89 (d, J=6,9 Гц, 1H), 4,77 (d, J=9,0 Гц, 1H), 4,33 (dd, J=8,9, 5,8 Гц, 2H), 4,27 (d, J=8,4 Гц, 1H), 4,22-4,09 (m, 1H), 3,93-3,83 (m, 2H, H-3), 3,41 (s, 3H), 2,88 (s, 6H), 2,60-2,41 (m, 4H), 2,02 (s, 3H), 1,96 (dd, J=19,7, 7,7 Гц, 1H), 1,85 (s, 3H), 1,75-1,69 (m, 1H), 1,52-1,37 (m, 11H), 1,30 (s, 3H), 1,27 (s, 3H), 1,01 (t, J=6,3 Гц, 6H).

¹³C ЯМР (101 МГц, CDCl₃) δ 205,08, 172,96, 170,35, 164,81, 154,97, 152,01, 136,39, 134,05, 129,95, 128,94, 128,11, 88,19, 83,90, 82,39, 80,25, 79,67, 76,04, 74,74, 73,71, 71,99, 69,44, 57,29, 57,07, 54,34, 51,49, 45,88, 41,76, 40,57, 36,54, 35,86, 33,76, 29,67, 28,24), 25,57, 24,85, 23,24, 22,46, 22,08, 14,42, 10,90.

Пример 17. Получение PCMI-17

1) Получение (4S,5R)-3-трет-бутилоксикарбонил-2-(4-метоксифенил)-4-фенил-5-оксазолидинкарбоновой кислоты

Конкретный способ был представлен на стадии 1) в примере 1.

2) Получение 7-метоксиформил-10-метоксил-1,14-карбонат-баккатина III

В качестве исходного вещества использовали 10-DAB (1 экв.), растворяли в DMF и добавляли последовательно 2,5 эквивалента имидазола и 2,5 эквивалента триэтилхлорсилана. После дополнительной обработки получали неочищенное соединение 7.

Соединение 7 растворяли в дихлорметане, который использовали в качестве растворителя, в который добавляли 2 эквивалента пиридина при 0°С. Затем к реакционной жидкости добавляли по каплям 2 эквивалента n-толуолсульфонилхлорида. После 4 часов реакции с помощью дополнительной обработки посредством очистки колоночной хроматографией получали соединение 8 с выходом 85-90%.

Соединение 8 (1 экв.) растворяли в безводном тетрагидрофуране с последующим введением в реакцию с метилмагнийбромидом (2 экв.) при комнатной температуре в течение 3 часов в защитной атмосфере азота. После дополнительной обработки получали неочищенное соединение 9 после высушивания.

Соединение 9 (1 экв.) растворяли в растворе ацетона, в который добавляли 10 эквивалентов диоксида марганца, при комнатной температуре с последующим введением в реакцию в течение 4 часов. С помощью дополнительной обработки посредством очистки колоночной хроматографией получали соединение 10 с выходом 75%.

Соединение 10 (1 экв.) растворяли в сухом THF, в который добавляли 1,5 эквивалента фторида тетрабутиламмония (в виде раствора в THF) при комнатной температуре. Спустя 1 час протекания реакции реакцию завершали. С помощью дополнительной обработки посредством очистки колоночной хроматографией получали соединение 45 с выходом 90%.

Соединение 45 (1 экв.) растворяли в сухом THF, который использовали в качестве растворителя, в который добавляли 1,5 эквивалента LHMDS при 0°С.Через 1 час реакции к реакционной жидкости медленно добавляли по каплям 2 эквивалента метоксиформилхлорида и проводили реакцию в течение 2 часов. С помощью дополнительной обработки посредством очистки колоночной хроматографией получали соединение 50 с выходом 71%.

Соединение 50 (1 экв.) растворяли в сухом растворе THF/DMPU (4:1), в который добавляли 1,2 эквивалента трет-бутоксида калия при -70°С с последующим проведением реакции в течение 20 мин. К полученной реакционной жидкости медленно добавляли по каплям 2 эквивалента N-(сульфонил)оксазиридина с последующим проведением реакции в течение 2 часов. С помощью дополнительной обработки посредством очистки колоночной хроматографией получали соединение 51 с выходом 75%.

Соединение 51 (1 экв.) вводили в реакцию с 2 эквивалентами N,N'-карбонилдиимидазола (CDI) в сухом тетрагидрофуране с получением соединения 52 с выходом 95%.

Соединение 52 (1 экв.) растворяли в сухом тетрагидрофуране, в который в качестве катализатора добавляли 0,2 эквивалента (R)-2-метилоксазаборолидина при комнатной температуре, с последующим добавлением 5 эквивалентов раствора борана/THF и с последующим проведением реакции в течение 8 часов. После завершения реакции с помощью дополнительной обработки посредством очистки колоночной хроматографией получали соединение 53 7-метоксиформил-10-метоксил-1,14-карбонат-баккатин III в качестве конечного продукта с выходом 80%.

3) Получение PCMI-17

Конкретный способ был представлен на стадии 3) в примере 1, при этом чистота конечного продукта составляла 95% или выше.

PCMI-17: Т. пл.: 233-234°С;

MS (масса/заряд) ESI: 944,4 (M+Na)⁺;

ИК: 3411, 2979, 2933, 1820, 1731, 1712, 1490, 1367, 1259, 1163, 1085, 713.

¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 8,03 (d, J=7,4 Гц, 2H), 7,62 (t, J=7,4 Гц, 1H), 7,49 (t, J=7,7 Гц, 2H), 7,45-7,37 (m, 4H), 7,37-7,30 (m, 1H), 6,46 (d, J=6,1 Гц, 1H), 6,12 (d, J=7,4 Гц, 1H), 5,58 (d, J=8,6 Гц, 1H), 5,35 (dd, J=10,6, 7,2 Гц, 2H), 5,14 (s, 1H), 4,95-4,86 (m, 1H), 4,80 (d, J=6,8 Гц, 1H), 4,71 (s, 1H), 4,30 (d, J=8,4 Гц, 1H), 4,23 (d, J=8,5 Гц, 1H), 3,89-3,78 (m, 2H), 3,75 (s, 3H), 3,41 (s, 3H), 2,56 (ddd, J=14,6, 9,5, 7,3 Гц, 1H), 2,46 (s, 3H), 2,08-1,98 (m, 1H), 1,95 (d, J=1,1 Гц, 3Н), 1,83 (s, 3Н), 1,39 (s, 9H), 1,29 (s, 3H), 1,28 (s, 3H).

¹³C ЯМР (101 МГц, CDCl₃) δ 204,25, 172,06, 171,24, 170,73, 164,70, 155,73, 155,00, 151,92, 136,31, 135,79, 134,19, 129,95, 128,98, 128,94, 128,10, 127,93, 126,63, 88,09, 83,49, 82,19, 80,58, 80,25, 79,61, 76,01, 75,28, 74,71, 74,36, 69,24, 57,45, 56,89, 55,31, 49,22, 45,77, 41,63, 33,83, 33,25, 29,68, 28,24, 25,57, 25,51, 24,90, 22,48, 22,10, 14,33, 10,78.

Пример 18. Получение PCMI-18

1) Получение (4S,5R)-трет-бутилоксикарбонил-2-(4-метоксифенил)-4-(2-пиридил)-5-оксазолидинкарбоновой кислоты

Конкретный способ был представлен на стадии 1) в примере 4.

2) Получение 7-метоксиформил-10-метоксил-1,14-карбонат-баккатина III

Конкретный способ был представлен на стадии 2) в примере 17.

3) Получение PCMI-18

Конкретный способ был представлен на стадии 3) в примере 1, при этом чистота конечного продукта составляла 95% или выше.

PCMI-18: Т. пл.: 235-236°С;

MS (масса/заряд) ESI: 923,4 (М+Н)⁺;

¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 8,50 (d, J=4,6 Гц, 1Н), 8,10-8,01 (m, 2Н), 7,80 (td, J=7,8, 1,6 Гц, 1Н), 7,65 (t, J=7,4 Гц, 1Н), 7,51 (dd, J=16,2, 8,2 Гц, 3Н), 7,30 (d, J=9,9 Гц, 1H), 6,46 (d, J=6,1 Гц, 1Н), 6,12 (d, J=7,4 Гц, 1Н), 5,58 (d, J=8,6 Гц, 1Н), 5,35 (dd, J=10,6, 7,2 Гц, 2Н), 5,14 (s, 1Н), 4,95-4,86 (m, 1Н), 4,80 (d, J=6,8 Гц, 1Н), 4,71 (s, 1Н), 4,30 (d, J=8,4 Гц, 1Н), 4,23 (d, J=8,5 Гц, 1Н), 3,89-3,78 (m, 2Н, Н-3), 3,75 (s, 3Н), 3,41 (s, 3Н), 2,56 (ddd, J=14,6, 9,5, 7,3 Гц, 1Н), 2,46 (s, 3Н), 2,08-1,98 (m, 1H), 1,95 (d, J=1,1 Гц, 3Н), 1,83 (s, 3Н), 1,39 (s, 9Н), 1,29 (s, 3Н), 1,28 (s, 3Н).

¹³С ЯМР (101 МГц, CDCl₃) δ 205,25, 172,80, 170,69, 164,80, 159,45, 154,99, 152,14, 148,17, 137,90, 136,87, 135,58, 134,23, 129,89, 128,97, 128,02, 123,07, 122,09, 88,09, 83,49, 82,19, 80,58, 80,25, 79,61, 76,01, 75,28, 74,71, 74,36, 69,24, 57,45, 56,89, 55,31, 49,22, 45,77, 41,63, 33,83, 33,25, 29,68, 28,24, 25,57, 25,51, 24,90, 22,48, 22,10, 14,33, 10,78.

Пример 19. Получение PCMI-19

1) Получение (4S,5R)-3-диметилкарбамоил-2-(4-метоксифенил)-4-фенил-5-оксазолидинкарбоновой кислоты

Конкретный способ был представлен на стадии 1) в примере 3.

2) Получение 7-метоксиформил-10-метоксил-1,14-карбонат-баккатина III

Конкретный способ был представлен на стадии 2) в примере 17.

3) Получение PCMI-19

Конкретный способ был представлен на стадии 3) в примере 1, при этом чистота конечного продукта составляла 95% или выше.

PCMI-19: Т. пл.: 213-214°С;

MS (масса/заряд) ESI: 894,3 (М+Н)⁺;

¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 8,04 (d, J=7,5 Гц, 2Н), 7,62 (t, J=7,4 Гц, 1Н), 7,49 (t, J=7,7 Гц, 2Н), 6,47 (d, J=6,1 Гц, 1Н), 6,27 (s, 1Н), 6,11 (d, J=7,5 Гц, 1Н), 4,94 (d, J=7,9 Гц, 1Н), 4,87 (d, J=6,9 Гц, 1Н), 4,75 (d, J=8,9 Гц, 1Н), 4,39 (dd, J=10,0, 5,2 Гц, 1Н), 4,36-4,31 (m, 1H), 4,30 (d, J=8,6 Гц, 1Н), 4,24 (d, J=8,4 Гц, 1H), 4,14-4,06 (m, 1Н), 4,00 (d, J=6,0 Гц, 1H), 3,71 (d, J=7,4 Гц, 1Н), 2,61-2,43 (m, 4Н), 2,38 (d, J=3,7 Гц, 1H), 2,26 (s, 3Н), 1,95-1,84 (m, 4Н), 1,71 (d, J=12,4 Гц, 4Н), 1,52-1,37 (m, 11Н), 1,34 (s, 3Н), 1,28 (s, 3Н), 0,99 (t, J=6,8 Гц, 6H).

¹³C ЯМР (101 МГц, CDCl₃) δ 202,19, 172,97, 170,93, 170,65, 164,76, 156,27, 151,87, 139,79, 134,15, 133,52, 129,97, 129,00, 127,95, 88,19, 84,23, 80,46, 79,63, 75,94, 74,79, 74,59, 73,87, 71,73, 69,45, 58,71, 51,67, 45,05, 41,78, 40,42, 35,46, 29,70, 28,24, 25,98, 24,85, 23,23, 22,50, 22,15, 20,76, 15,01, 9,70.

Пример 20. Получение PCMI-20

1) Получение (4S,5R)-3-трет-бутилоксикарбонил-2-(4-метоксифенил)-4-изобутил-5-оксазолидинкарбоновой кислоты

Конкретный способ был представлен на стадии 1) в примере 5.

2) Получение 7-метоксиформил-10-метоксил-1,14-карбонат-баккатина III

Конкретный способ был представлен на стадии 2) в примере 17.

3) Получение PCMI-20

Конкретный способ был представлен на стадии 3) в примере 1, при этом чистота конечного продукта составляла 95% или выше.

PCMI-20: Т. пл.: 229-230°С;

MS (масса/заряд) ESI: 924,4 (M+Na)⁺;

¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 8,04 (d, J=7,5 Гц, 2Н), 7,62 (t, J=7,4 Гц, 1Н), 7,49 (t, J=7,7 Гц, 2Н), 6,47 (d, J=6,3 Гц, 1H), 6,13 (d, J=7,4 Гц, 1Н), 5,36 (dd, J=10,6, 7,2 Гц, 1Н), 5,15 (s, 1H), 4,93 (d, J=7,8 Гц, 1Н), 4,88 (d, J=6,9 Гц, 1Н), 4,80 (d, J=9,3 Гц, 1Н), 4,39-4,28 (m, 2Н), 4,25 (d, J=8,5 Гц, 1H), 4,13 (m, 1Н), 4,01 (d, J=5,4 Гц, 1H), 3,84 (d, J=7,3 Гц, 1Н), 3,75 (s, 3Н), 3,41 (s, 3Н), 2,62-2,47 (m, 4Н), 2,10-2,03 (m, 1Н), 1,99 (d, J=1,1 Гц, 3Н), 1,83 (s, 3Н), 1,71 (dd, J=11,2, 4,6 Гц, 1Н), 1,44 (dd, J=10,1, 3,6 Гц, 2Н), 1,41 (d, J=14,4 Гц, 9Н), 1,30 (s, 3Н), 1,29 (s, 3Н), 0,99 (t, J=6,4 Гц, 6Н).

¹³С ЯМР (101 МГц, CDCl₃) δ 204,27, 172,97, 171,21, 170,71, 164,75, 156,21, 155,00, 151,99, 136,46, 134,15, 129,96, 128,99, 127,95, 88,18, 83,51, 82,20, 80,34, 80,19,79,63, 76,73, 76,01, 75,27, 74,61, 73,82, 69,29, 57,43, 56,89, 55,30, 51,61, 45,76, 41,66, 40,44, 33,25, 29,69, 28,24, 25,51, 24,85, 23,25, 22,44, 22,16, 14,41, 10,81.

Пример 21. Получение PCMI-21

1) Получение (4S,5R)-3-трет-бутилоксикарбонил-2-(4-метоксифенил)-4-фенил-5-оксазолидинкарбоновой кислоты

Конкретный способ был представлен на стадии 1) в примере 1.

2) Получение 7-этилтиоформил-10-метокси-1,14-карбонат-баккатина III

В качестве исходного вещества использовали 10-DAB (1 экв.), растворяли в DMF и добавляли последовательно 2,5 эквивалента имидазола и 2,5 эквивалента триэтилхлорсилана. После дополнительной обработки получали неочищенное соединение 7.

Соединение 7 растворяли в дихлорметане, который использовали в качестве растворителя, в который добавляли 2 эквивалента пиридина при 0°С. Затем к реакционной жидкости добавляли по каплям 2 эквивалента n-толуолсульфонилхлорида. После 4 часов реакции с помощью дополнительной обработки посредством очистки колоночной хроматографией получали соединение 8 с выходом 90%.

Соединение 8 (1 экв.) растворяли в безводном тетрагидрофуране с последующим введением в реакцию с метилмагнийбромидом (2 экв.) при комнатной температуре в течение 3 часов в защитной атмосфере азота. После дополнительной обработки получали неочищенное соединение 9 после высушивания.

Соединение 9 (1 экв.) растворяли в растворе ацетона, в который добавляли 10 эквивалентов диоксида марганца, при комнатной температуре с последующим введением в реакцию в течение 4 часов. С помощью дополнительной обработки посредством очистки колоночной хроматографией получали соединение 10 с выходом 75%.

Соединение 10 (1 экв.) растворяли в сухом THF, в который добавляли 1,5 эквивалента фторида тетрабутиламмония (в виде раствора в THF) при комнатной температуре. Спустя 1 час протекания реакции реакцию завершали. С помощью дополнительной обработки посредством очистки колоночной хроматографией получали соединение 45 с выходом 90%.

Соединение 45 (1 экв.) растворяли в сухом THF, который использовали в качестве растворителя, и сначала вводили в реакцию с 2 эквивалентами N,N-карбонилдиимидазола при комнатной температуре в течение 2 часов. Затем к реакционной жидкости добавляли 2 эквивалента этантиола. После 4 часов реакции с помощью дополнительной обработки посредством очистки колоночной хроматографией получали соединение 54 с выходом 78%.

Соединение 54 (1 экв.) растворяли в сухом растворе THF/DMPU (4:1), в который добавляли 1,2 эквивалента трет-бутоксида калия при -70°С с последующим проведением реакции в течение 20 мин. К полученной реакционной жидкости медленно добавляли по каплям 2 эквивалента N-(сульфонил)оксазиридина с последующим проведением реакции в течение 2 часов. С помощью дополнительной обработки посредством очистки колоночной хроматографией получали соединение 55 с выходом 75%.

Соединение 55 (1 экв.) вводили в реакцию с 2 эквивалентами N,N'-карбонилдиимидазола (CDI) в сухом тетрагидрофуране с получением соединения 56 с выходом 95%.

Соединение 56 (1 экв.) растворяли в сухом тетрагидрофуране, в который в качестве катализатора добавляли 0,2 эквивалента (R)-2-метилоксазаборолидина при комнатной температуре, с последующим добавлением 5 эквивалентов раствора борана/THF и с последующим проведением реакции в течение 8 часов. После завершения реакции с помощью дополнительной обработки посредством очистки колоночной хроматографией получали соединение 57 7-этилтиоформил-10-метокси-1,14-карбонат-баккатин III в качестве конечного продукта с выходом 80%.

3) Получение PCMI-21

Конкретный способ был представлен на стадии 3) в примере 1, при этом чистота конечного продукта составляла 95% или выше.

PCMI-21: Т. пл.: 238-239°С;

MS (масса/заряд) ESI: 974,4 (M+Na)⁺;

¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 8,03 (d, J=7,4 Гц, 2Н), 7,62 (t, J=7,4 Гц, 1Н), 7,49 (t, J=7,7 Гц, 2Н), 7,45-7,37 (m, 4Н), 7,37-7,30 (m, 1Н), 6,46 (d, J=6,1 Гц, 1Н), 6,12 (d, J=7,4 Гц, 1Н), 5,58 (d, J=8,6 Гц, 1Н), 5,35 (dd, J=10,6, 7,2 Гц, 2Н), 5,14 (s, 1Н), 4,95-4,86 (m, 1Н), 4,80 (d, J=6,8 Гц, 1Н), 4,71 (s, 1Н), 4,30 (d, J=8,4 Гц, 1Н), 4,23 (d, J=8,5 Гц, 1Н), 3,89-3,78 (m, 2Н), 3,75 (s, 3Н), 3,41 (s, 3Н), 2,56 (ddd, J=14,6, 9,5, 7,3 Гц, 1Н), 2,46 (s, 3Н), 2,08-1,98 (m, 1H), 1,95 (d, J=1,1 Гц, 3Н), 1,83 (s, 3Н), 1,39 (s, 9Н), 1,29 (s, 3Н), 1,28 (s, 3Н).

¹³С ЯМР (101 МГц, CDCl₃) δ 204,25, 172,06, 171,24, 170,73, 164,70, 155,73, 155,00, 151,92, 136,31, 135,79, 134,19, 129,95, 128,98, 128,94, 128,10, 127,93, 126,63, 88,09, 83,49, 82,19, 80,58, 80,25, 79,61, 76,01, 75,28, 74,71, 74,36, 69,24, 57,45, 56,89, 55,31, 49,22, 45,77, 41,63, 33,83, 33,25, 29,68, 28,24, 25,57, 25,51, 24,90, 22,48, 22,10, 14,33, 10,78.

Изобретение относится к таксановым соединениям, имеющим структуру, представленную следующей общей формулой I:

где R₁ представляет собой бензоил, трет-бутилоксикарбонил или N,N'-диметилкарбамоил; R₂ представляет собой фенил, или R₃ представляет собой -ОМе, -ОСООСН₃, -OCON(CH₃)₂ или -OCOSC₂H₅; R₄ представляет собой -ОМе, -ОСООСН₃, -OCON(CH₃)₂, -OCOSC₂H₅, Н или ОН, или их фармацевтически приемлемым нетоксичным солям или изомерам. Также предложены противоопухолевая фармацевтическая композиция, применение таксановых соединений и фармацевтической композиции, способ получения таксановых соединений. Предложенные соединения обладают улучшенной биодоступностью при пероральном введении и характеризуются сильной цитотоксичностью в отношении ряда линий раковых клеток человека и противоопухолевыми эффектами широкого спектра. 62 ил., 6 табл., 21 пр.

1. Таксановые соединения, имеющие структуру, представленную следующей общей формулой I:

где

R₁ представляет собой бензоил, трет-бутилоксикарбонил или N,N'-диметилкарбамоил;

R₂ представляет собой фенил, или R₃ представляет собой -ОМе, -ОСООСН₃, -OCON(CH₃)₂ или -OCOSC₂H₅; R₄ представляет собой -ОМе, -ОСООСН₃, -OCON(CH₃)₂, -OCOSC₂H₅, Н или ОН, или их фармацевтически приемлемые нетоксичные соли или изомеры.

2. Таксановые соединения или их фармацевтически приемлемые нетоксичные соли или изомеры по п. 1, причем соединения выбраны из соединений, имеющих следующую структуру:

3. Противоопухолевая фармацевтическая композиция, где композиция содержит таксановые соединения с формулой I или их фармацевтически приемлемые соли или изомеры по п. 1 или 2 в качестве активных ингредиентов.

4. Композиция по п. 3, где фармацевтическая композиция содержит таксановые соединения с формулой I или их фармацевтически приемлемые соли или изомеры при весовой доле от 0,01 до 99,99%, при этом остальное представляет собой фармацевтически приемлемые носители.

5. Применение таксановых соединений или их фармацевтически приемлемых солей или изомеров по п. 1 или 2 и фармацевтических композиций по п. 3 или 4 при изготовлении противоопухолевых лекарственных препаратов для перорального введения.

6. Способ получения таксановых соединений по п. 1 или 2, отличающийся тем, что способ включает следующие стадии:

стадию 1 синтеза части таксанового исходного ядра: с применением 10-деацетилбаккатина III (10-DAB) в качестве исходного вещества сначала гидроксильные группы в положениях С7 и C10 части исходного ядра селективно защищают заместителями, затем гидроксигруппу в положении С13 окисляют в кетокарбонильную группу, затем с высокой стереоселективностью вводят гидроксильную группу с β-конфигурацией в положение С14 с применением N-(сульфонил)оксазиридина с образованием 1,14-карбонатной структуры под действием N,N'-карбонилдиимидазола и в конце кетокарбонильную группу в положении С13 с высокой стереоселективностью восстанавливают в гидроксильную группу с α-конфигурацией с помощью способа восстановления Кори-Бакши-Шибата (CBS) с получением части таксанового исходного ядра;

стадию 2 синтеза предшественника боковой цепи из кислоты с пятичленным оксазолидиновым кольцом: гликолевую кислоту, применяемую в качестве исходного вещества, последовательно защищают бензильной группой и бутилоксикарбонильной группой (Вос-группой) с образованием Вос-защищенного бензилгликолята; различные замещенные альдегиды конденсируют с (S_R)-трет-бутилсульфинамидом с образованием соответствующих енаминных соединений; Вос-защищенный бензилгликолят и енаминное соединение вводят в реакцию присоединения в присутствии соли лития, а затем после кислотного гидролиза получают хиральное промежуточное соединение и вводят полученное промежуточное соединение вместе с 1,1'-(диметоксиметил)-n-метоксибензолом в реакцию альдольной конденсации, катализируемой n-толуолсульфонатом пиридиния (PPTS), с получением соединения-продукта конденсации; при этом аминогруппу соединения-продукта конденсации замещают различными заместителями и после каталитического гидрирования в итоге получают предшественник боковой цепи из кислоты с пятичленным оксазолидиновым кольцом;

стадию 3 синтеза таксановых производных: предшественник боковой цепи из кислоты с пятичленным оксазолидиновым кольцом присоединяют к части таксанового исходного ядра путем эстерификации и после удаления защитной группы кислотным гидролизом получают ряд таксановых производных.

7. Способ получения таксановых соединений по п. 6, отличающийся тем, что на стадии 1 С7- и С10-гидроксильные группы защищают заместителями:

(1) если R₃ и R₄ представляют собой -ОМе, предусматривают следующую реакцию: сначала гидроксильную группу вводят в реакцию с n-толуолсульфонилхлоридом (TsCl) при температуре от комнатной до 0°С в тетрагидрофуране или дихлорметане в качестве растворителя и пиридине (Ру) в качестве щелочи с получением n-толуолсульфоната, который далее вводят в реакцию с реактивом Гриньяра с получением соответствующего простого эфира -ОМе;

(2) если R₃ и R₄ представляют собой -ОСООСН₃ или -OCON(CH₃)₂, предусматривают следующую реакцию: в щелочных условиях гидроксильную группу вводят в реакцию с соответствующим ацилхлоридом в тетрагидрофуране в качестве растворителя при температуре от комнатной до -70°С;

(3) если R₃ и R₄ представляют собой -OCOSC₂H₅, предусматривают следующую реакцию: гидроксильную группу вводят в реакцию с N,N'-карбонилдиимидазолом (CDI) в тетрагидрофуране в качестве растворителя при комнатной температуре и полученный продукт далее вводят с меркаптаном в реакцию замещения;

на стадии 1 стереоселективное восстановление по кетокарбонильной группе в положении С13 с помощью способа восстановления CBS включает следующие конкретные стадии: С13-оксо стереоселективно восстанавливают до С13-α-ОН с применением безводного тетрагидрофурана, сухого дихлорметана или спиртов в качестве растворителя, (R)-2-метилоксазаборолидина в качестве катализатора и боранов в качестве восстановителя при температуре от комнатной до -70°С;

на стадии 2 указанные различные замещенные альдегиды включают С1-С6 гидрокарбильные альдегиды, замещенные С1-С6 гидрокарбильные альдегиды, ароматические альдегиды, замещенные ароматические альдегиды и гетероароматические альдегиды; при этом реакцию, применяемую для замещения аминогруппы соединения-продукта конденсации, проводят с применением тетрагидрофурана, дихлорметана или диоксана в качестве растворителя для обеспечения реакции с соответствующими ацилхлоридами в щелочных условиях при температуре от комнатной до -70°С; при этом в реакции каталитического гидрирования в качестве катализатора используют палладированный уголь или гидроксид палладия, водород вводят при нормальном давлении или в условиях повышенного давления и реакцию проводят в спиртах, тетрагидрофуране или дихлорметане в качестве растворителя.

8. Способ получения таксановых соединений по п. 7, отличающийся тем, что на стадии 1 С7- и С10-гидроксильные группы защищают заместителями:

(1) если R₃ и R₄ представляют собой -ОМе, в качестве растворителя применяют дихлорметан, при этом температура составляет 0°С, и реактив Гриньяра включает MeMgBr;

(2) если R₃ и R₄ представляют собой -ОСООСН₃ или -OCON(CH₃)₂, в качестве щелочи применяют гексаметилдисилазид лития, и температура составляет -40°С; при этом ацилхлорид включает CH₃OCOCl и (CH₃)₂NCOCl;

(3) если R₃ и R₄ представляют собой -OCOSC₂H₅, меркаптан включает C₂H₅SH;

на стадии 1 стереоселективное восстановление по кетокарбонильной группе в положении С13 с помощью способа восстановления CBS проводят при комнатной температуре с применением безводного тетрагидрофурана в качестве растворителя;

на стадии 2 в реакции, применяемой для замещения аминогруппы соединения-продукта конденсации, в качестве щелочи применяют гексаметилдисилазид лития, а в качестве растворителя применяют тетрагидрофуран; при этом температура составляет -40°С, ацилхлорид включает PhCOCl, (СН₃)₃COCOCl и (CH₃)₂NCOCl; при этом в реакции каталитического гидрирования в качестве катализатора применяют гидроксид палладия, водород вводят при 20 фунт/кв. дюйм и реакцию проводят в спиртовом растворе.