СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ СИРОПА МАРЕНЫ КРАСИЛЬНОЙ Российский патент 2020 года по МПК A61K36/74 A61K125/00 B01D11/02 

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности, к производству фармацевтического препарата, обладающего нефролитическим действием, - сиропа, на основе водного экстракта корневищ и корней марены красильной (Rubia tinctorum L.).

Марена красильная обладает нефролитическим действием благодаря наличию значительного количества антраценпроизводных ализаринового ряда, доминирующим веществом является руберитриновая кислота (4, 5, 6).

В Российской Федерации зарегистрированы только твердые лекарственные формы, на основе сырья марены: «Марены красильной экстракт» форма выпуска таблетки, производителя ЗАО «ВИФИТЕХ» (регистрационный номер ЛСР-007798/08), «Марелин» форма выпуска таблетки, производителя ЗАО «ВИФИТЕХ» (регистрационный номер ЛСР-ЛП-003039)(1).

Сироп марены красильной позволяет расширить номенклатуру профилактических препаратов для лечения мочекаменной болезни (2, 3).

В качестве прототипа изобретения нами выбран «Крушины сироп», производителя ЗАО «ВИФИТЕХ», полученный методом мацерации (7, 8) (регистрационный номер ЛС-001203) (1), действующими веществами которого являются антраценпроизводные. Однако прототип обладает некоторыми недостатками, так как в производстве препарата используется соотношение «сырье - экстрагент» 1:1, что приводит к низкому выходу антраценпроизводных на стадии экстракции (20,2%), нерациональному использованию сырья и неоправданным экономическим затратам.

Таким образом, целью изобретения является разработка способа изготовления сиропа марены красильной {Rubia tinctorum L.).

Сырье корневищ и корней марены измельчали до размера частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями диаметром 1 мм. Соотношение «сырье - экстрагент» было 1:10, экстрагентом была вода. Экстрагент делили на 3 части и последовательно настаивали сырье с новой порцией экстрагента, что позволило максимально истощить сырье. Настаивание с первой порцией экстрагента составило 24 ч, со второй 12 ч, с третьей также 12 ч. Общее время настаивания составило 48 ч, затем экстракцию проводили 30 мин на кипящей водяной бане, при температуре 90°С и 15 мин проводили экстракцию с помощью ультразвука при температуре 40°С, мощности ультразвука 60 Вт и частоте 40кГц. Данным способом был достигнут выход антраценпроизводных по отношению к их содержанию в исходном сырье 48,2±0,04%.

Далее извлечение фильтровали. Полученное водное извлечение корневищ и корней марены упаривали до густого экстракта с содержанием влаги не более 25%. Сахарный сироп готовили по фармакопейной методике: 64 г сахара рафинада, отмеривали цилиндром воду 18 мл, заливали сахар и оставляли на 15-20 минут до растворения сахара. После распада сахара добавляли еще 18 мл воды, осторожно нагревали на водяной бане до кипения и дали покипеть 3-5 мин. Горячий сироп процеживали через тройной слой марли в сухой флакон. Густой экстракт и сахарный сироп использовали для получения сиропа. В неостывший густой экстракт первоначально вводили 95% спирт этиловый в соотношении 1:2. После остывания добавляли сахарный сироп до общей массы 43 г.

Способ приводит к увеличению выхода действующих веществ, снижению разовой дозы при усилении фармакологического эффекта, введению в состав сиропа натурального консерванта - этилового спирта, который позволяет увеличить срок годности данного препарата до двух лет.

Способ осуществления предложения. Цель достигали тем, что сырье измельчалось до размера частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями диаметром 1 мм. Соотношение «сырье - экстрагент» (1:10), экстрагент - вода. Экстрагент делили на 3 части и последовательно настаивали сырье с новой порцией экстрагента, что позволило максимально истощить сырье. Настаивание с первой порцией экстрагента составило 24 ч, со второй 12 ч, с третьей 12 ч. Общее время настаивания составило 48 ч, затем экстракцию проводили 30 мин на кипящей водяной бане, при температуре 90°С и 15 мин проводили экстракцию с помощью ультразвука при температуре 40°С, мощности ультразвука 60 Вт и частоте 40кГц. Данным способом был достигнут выход антраценпроизводных по отношению к их содержанию в исходном сырье 48,2±0,04%.

Далее извлечение фильтровали. Полученное водное извлечение марены корневищ и корней упаривали до густого экстракта с содержанием влаги не более 25%. Сахарный сироп готовили по фармакопейной методике: 64 г сахара рафинада, отмеривали цилиндром воду 18 мл, заливали сахар и оставляли на 15-20 минут до растворения сахара. После распада сахара добавляли еще 18 мл воды, осторожно нагревали на водяной бане до кипения и дали покипеть 3-5 мин. Горячий сироп процеживали через тройной слой марли в сухой флакон. Далее густой экстракт и сахарный сироп использовали для получения сиропа следующего состава: густой экстракт корней и корневищ марены красильной 3,5 г, 95% спирт этиловый 7,0 г, сахарный сироп 32,5 г.

Для сравнительной оценки эффективности предлагаемого способа с целью изучения УФ-спектров густого экстракта и сиропа из корневищ и корней марены красильной в щелочно-аммиачной среде и количественного определения антраценпроизводных точную навеску (0,20 г - для густого экстракта, 2 г - для сиропа) помещали в мерную колбу вместимостью 100 мл, добавляли 15 мл 80% этилового спирта. Колбу присоединяли к обратному холодильнику и нагревали на кипящей водяной бане в течение 15 мин. После охлаждения до комнатной температуры раствор фильтровали через бумажный фильтр (марки «красная лента») в мерную колбу вместимостью 50 мл. Процедуру повторяли дважды, каждый раз фильтруя извлечение в ту же мерную колбу через тот же фильтр. Затем доводили объем раствора до метки 80% спиртом и тщательно перемешивали (раствор А).

1,0 мл раствора А помещали в мерную колбу вместимостью 50 мл и доводили объем раствора до метки щелочно-аммиачным раствором, приготовленным в соответствиями с требованиями Государственной фармакопеи РФ XIV издания, и нагревали на кипящей водяной бане в течение 15 мин. После охлаждения измеряли оптическую плотность испытуемого раствора на спектрофотометре при аналитической длине волны 520 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм. В качестве раствора сравнения использовали воду очищенную.

Содержание суммы антраценпроизводных в пересчете на руберитриновую кислоту в густом экстракте, сиропе и водном извлечении корневищ и корней марены в % вычисляли по формуле:

А - оптическая плотность испытуемого раствора;

m - масса навески препарата, г;

520 - удельный показатель поглощения () щелочно-аммиачного раствора РСО руберитриновой кислоты

На первоначальном этапе исследовали способ получения экстракта из корневищ и корней марены красильной (8, 9).

1) фармакопейный метод мацерации - измельченное сырье с предписанным количеством экстрагента настаивали при температуре 15-20°С, периодически перемешивая. Настаивание проводили в течение 2 суток;

2) фармакопейный метод перколяции - проводили три последовательно протекающие стадии: намачивание сырья (набухание сырья), настаивание, собственно перколяция. Экстракция осуществлялась с использованием лабораторного перколятора;

3) фармакопейный метод реперколяции - проводили с использованием батареи из трех лабораторных перколяторов);

4) предложенный нами метод дробной мацерации с ультразвуком - с делением экстрагента на три равные части и последующем настаиванием в течение 24 ч., 12 ч., 12 ч., далее проводили экстракцию на водяной бане 30 мин и 15 мин с использованием ультразвука, сырье отжимали, отфильтровывали.

Сравнительные результаты представлены в Таблицах 1 и 2.

Фармакопейный метод мацерации. Получали водное извлечение из корневищ и корней марены красильной в соотношении «сырье - экстрагент» (1:10) (экстрагент - вода) методом мацерации. Полученное водное извлечение марены упаривали до густого экстракта с содержанием влаги не более 25%.

Содержание суммы антраценпроизводных в водном извлечении марены красильной в пересчете на руберитриновую кислоту составило 1,85±0,02%. В густом экстракте содержание суммы антраценпроизводных составило 7,30±0,02%.

Фармакопейный метод перколяции. Получали водное извлечение из корневищ и корней марены красильной в соотношении «сырье - экстрагент» (1:10) (экстрагент - вода) методом перколяции. Полученное водное извлечение марены красильной упаривали до густого экстракта с содержанием влаги не более 25%.

Содержание суммы антраценпроизводных в водном извлечении марены красильной в пересчете на руберитриновую кислоту составило 1,90±0,02%. В густом экстракте содержание суммы антраценпроизводных составило 7,55±0,02%.

Фармакопейный метод реперколяции. Получали водное извлечение из корневищ и корней марены красильной в соотношении «сырье - экстрагент» (1:10) (экстрагент - вода) методом реперколяции. Полученное водное извлечение корневищ и корней марены красильной упаривали до густого экстракта с содержанием влаги не более 25%.

Содержание суммы антраценпроизводных в водном извлечении марены красильной в пересчете на руберитриновую кислоту составило 2,01±0,02%. В густом экстракте содержание суммы антраценпроизводных составило 8,06±0,02%.

Предложенный нами метод дробной мацерации с ультразвуком. Получали водное извлечение из корневищ и корней марены красильной в соотношении «сырье - экстрагент» (1:10) (экстрагент - вода) методом дробной мацерации с ультразвуком. Полученное водное извлечение марены красильной упаривали до густого экстракта с содержанием влаги не более 25%.

Содержание суммы антраценпроизводных в водном извлечении марены красильной в пересчете на руберитриновую кислоту составило 2,17±0,02%. В густом экстракте содержание суммы антраценпроизводных составило 8,70±0,01%.

Таким образом, наиболее эффективным способом получения густого экстракта марены красильной оказался предложенный нами метод дробной мацерации с ультразвуком, который характеризуется более высоким выходом действующих соединений. Преимущества данного способа получения экстракта корневищ и корней марены красильной с использованием фармакопейного метода дробной мацерации с ультразвуком заключаются в высоком выходе действующих веществ из лекарственного растительного сырья марены красильной по сравнению с остальными методиками из Государственной фармакопеи Российской Федерации XIV издания. Во время прохождения ультразвука через молекулу ее легкая часть колеблется в резонансе с частотой волны, а тяжелая часть отстает. В результате возникают зоны напряженности, значительные силы трения, превосходящие силы химической связи, происходит разрыв цельной молекулы вещества (7, 9). При использовании ультразвука наблюдается, как правило, не только значительное ускорение во времени, но и увеличение по сравнению с другими методами экстрагирования выхода основных действующих веществ. Ультразвук способствует быстрому и более глубокому проникновению экстрагента в клеточные структуры. Содержание суммы антраценпроизводных в густом экстракте корневищ и корней марены красильной в пересчете на руберитриновую кислоту составило 8,70±0,01%.

Заявляемый состав реализуется следующим примером.

Пример. Получали водное извлечение из корневищ и корней марены красильной в соотношении «сырье - экстрагент» 1:10 методом дробной мацерации с ультразвуком: 10,0 г сырья поочередно заливали 1/3 части от 100 мл воды очищенной, настаивание с первой порцией экстрагента составило 24 ч., со второй 12 ч., с третьей 12 ч. Общее время настаивания составило 48 ч, затем экстракцию проводили 30 мин на кипящей водяной бане, при температуре 90°С и 15 мин проводили экстракцию с помощью ультразвука при температуре 40°С, мощности ультразвука 60 Вт и частоте 40кГц. Полученное водное извлечение корневищ и корней марены упаривали до густого экстракта с содержанием влаги не более 25%. Сахарный сироп готовили по фармакопейной методике: 64 г сахара рафинада, отмеривали цилиндром воду 18 мл, заливали сахар и оставляли на 15-20 минут до растворения сахара. После распада сахара добавляли еще 18 мл воды, осторожно нагревали на водяной бане до кипения и давали покипеть 3-5 мин. Горячий сироп процеживали через тройной слой марли в сухой флакон. Далее густой экстракт и сахарный сироп использовали для получения сиропа следующего состава:

густой экстракт марены красильной 3,5 г 95% спирт этиловый 7,0 г сахарный сироп 32,5 г

Содержание суммы антраценпроизводных в сиропе марены красильной в пересчете на руберитриновую кислоту составило 0,75±0,002%.

Содержание суммы антраценпроизводных в пересчете на руберитриновую кислоту в густом экстракте марены красильной, составило 8,70±0,01%.

Таким образом, метод дробной мацерации с ультразвуком для экстракции биологически активных веществ из корневищ и корней марены красильной, обеспечивает высокий выход антраценпроизводных в водном извлечении - 48,2±0,4%, что в 2,4 раза выше, чем в водном извлечении прототипа. Основой сиропа является густой экстракт, для консервации которого вводится этиловый спирт, что увеличивает срок годности данного препарата до двух лет. Сироп марены красильной возможно рекомендовать в качестве вспомогательного средства в комплексной терапии мочекаменной болезни.

ИСТОЧНИКИ ИНФОРМАЦИИ

1. Государственный реестр лекарственных средств. - Т.1. Официальное издание. М., 2008. - 1398 с.

2. Государственная фармакопея Российской Федерации: Вып.2. / МЗ РФ. 14-е изд. - М.: Медицина, 2018. - 3262 с.

3. Государственная фармакопея Российской Федерации: Вып.4. / МЗ РФ. 14-е изд. - М.: Медицина, 2018. - 7019 с.

4. Куркин В.А. Фармакогнозия: Учебник для студентов фармацевтических вузов. - Изд. 2-е, перераб. и доп. - Самара: ООО «Офорт», ГОУ ВПО «СамГМУ», 2007. - 1239 с.

5. Куркин В.А. Основы фитотерапии: Учебное пособие для студентов фармацевтических вузов. - Самара: ООО «Офорт», ГОУ ВПО «СамГМУ Росздрава», 2009. 963 с.

6. Муравьева Д.А., Самылина И.А., Яковлев Г.П. Фармакогнозия: Учебник. - М.: Медицина, 2002. - 656 с.

7. Чуешов В.И., Чернов М.Ю., Хохлова Л.М. и др. Промышленная технология лекарств: Учебник для студентов высших учебных заведений. В 2-х т. - Т. 2 - Харьков: НФАУ МТК - Книга, 1999. - 704 с.

8. Пономарев В.Д. Экстрагирование лекарственного сырья. М., Медицина, 1976, 204 с.

9. Акопян В.Б., Ершов Ю.А. Основы взаимодействия ультразвука с биологическим объектами. МГТУ им. Н.Э. Баумана, 2005.

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности, а именно к способу получения сиропа марены красильной. Способ получения сиропа марены красильной, включающий использование сырья и экстрагента, при этом в качестве сырья используют корни и корневища марены красильной, измельченные до частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями диаметром 1 мм, для получения его водного извлечения в соотношении «сырье-экстрагент» 1:10; экстрагент делят на 3 равные части и последовательно настаивают сырье с новой порцией экстрагента в течение 24 ч, 12 ч, 12 ч; далее экстрагируют 30 мин на водяной бане при температуре 90°С и 15 мин проводят экстракцию с использованием ультразвука при температуре 40°С, мощности ультразвука 60 Вт и частоте 40 кГц; упаривают водное извлечение до густого экстракта с содержанием влаги не более 25%, в неостывший густой экстракт вводят 95%-ный спирт этиловый в соотношении 1:2, после остывания добавляют сахарный сироп, до получения сиропа следующего состава: густой экстракт корней и корневищ марены красильной 3,5 г, 95%-ный спирт этиловый 7,0 г, сахарный сироп 32,5 г. Способ приводит к увеличению выхода действующих веществ, снижению разовой дозы при усилении фармакологического эффекта, увеличению срока годности данного препарата до двух лет. 2 табл., 1 пр.

Способ получения сиропа марены красильной, включающий использование сырья и экстрагента, отличающийся тем, что в качестве сырья используют корни и корневища марены красильной, измельченные до частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями диаметром 1 мм, для получения его водного извлечения в соотношении «сырье-экстрагент» 1:10; экстрагент делят на 3 равные части и последовательно настаивают сырье с новой порцией экстрагента в течение 24 ч, 12 ч, 12 ч; далее экстрагируют 30 мин на водяной бане при температуре 90°С и 15 мин проводят экстракцию с использованием ультразвука при температуре 40°С, мощности ультразвука 60 Вт и частоте 40 кГц; упаривают водное извлечение до густого экстракта с содержанием влаги не более 25%, в неостывший густой экстракт вводят 95%-ный спирт этиловый в соотношении 1:2, после остывания добавляют сахарный сироп, до получения сиропа следующего состава: густой экстракт корней и корневищ марены красильной 3,5 г, 95%-ный спирт этиловый 7,0 г, сахарный сироп 32,5 г.