Область техники, к которой относится изобретение
Настоящее изобретение относится к ацилированным соединениям, обладающим агонистической активностью в отношении рецепторов GLP-1 (глюкагоноподобного пептида 1) и GLP-2 (глюкагоноподобного пептида 2). Соединения находят применение, среди прочего, в профилактике или лечении повреждения и дисфункции кишечника, регуляции массы тела и профилактике или лечении метаболической дисфункции.
Уровень техники
Ткань кишечника человека отвечает за выработку как глюкагоноподобного пептида 1 (GLP-1 (7-36)), так и глюкагоноподобного пептида 2 (GLP-2 (1-33)), поскольку они продуцируются одними и теми же клетками. GLP-2 человека представляет собой 33-аминокислотный пептид со следующей последовательностью: Hy-His-Ala-Asp-Gly-Ser-Phe-Ser-Asp-Glu-Met-Asn-Thr-Ile-Leu-Asp-Asn-Leu-Ala-Ala-Arg-Asp-Phe-Ile-Asn-Trp-Leu-Ile-Gln-Thr-Lys-Ile-Thr-Asp-OH (SEQ ID NO 1). Он образуется в результате специфического посттрансляционного процессинга проглюкагона в энтероэндокринных L-клетках кишечника и в определенных областях ствола мозга. GLP-2 связывается с одним сопряженным с G-белковым рецептором, относящимся к семейству глюкагон-секретиновых рецепторов класса II. GLP-2 секретируется совместно с GLP-1, оксинтомодулином и глицинтином в ответ на прием питательных веществ. GLP-1 человека продуцируется в виде 30-аминокислотного пептида со следующей последовательностью: Hy-His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly-NH2 (SEQ ID NO 2).
Было опубликовано, что GLP-2 индуцирует значительный рост эпителия слизистой оболочки тонкого кишечника за счет стимуляции пролиферации стволовых клеток в криптах и ингибирования апоптоза в ворсинках ((Drucker et al., 1996, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 93: 7911-7916). GLP-2 также оказывает ростовые эффекты на клетки толстого кишечника. Кроме того, GLP-2 ингибирует опорожнение желудка и секрецию желудочной кислоты (Wojdemann et al., 1999, J. Clin. Endocrinol. Metab. 84: 2513-2517), усиливает барьерную функцию кишечника (Benjamin et al., 2000, Gut 47: 112-119), стимулирует транспорт гексозы в кишечнике путем повышения количества переносчиков глюкозы (Cheeseman, 1997, Am. J. Physiol. R1965-71) и увеличивает кишечный кровоток (Guan et al., 2003, Gastroenterology, 125: 136-147).
GLP-1 был описан как физиологический инкретиновый гормон и, поэтому в основном опубликовано, что он увеличивает инсулиновый ответ после перорального приема глюкозы или жира. Однако в общем известно, что GLP-1 снижает концентрацию глюкагона, оказывает благоприятное влияние на ингибирование быстрых движений кишечника (Tolessa et al., 1998, Dig. Dis. Sci. 43 (10): 2284-90) и замедляет опорожнение желудка.
В WO 2013/164484 раскрыты аналоги GLP-2, которые содержат одну или несколько замен по сравнению с h[Gly2]GLP-2, и которые могут иметь измененную активность GLP-1, и раскрыто их медицинское применение.
В WO 2016/066818 описаны пептиды, обладающие двойной агонистической активностью в отношении рецепторов GLP-1 и GLP-2, и предлагается их медицинское применение. Однако остается потребность в дополнительных соединениях, которые объединяют эффективную агонистическую активность обоих рецепторов с приемлемым уровнем стабильности.
Сущность изобретения
В широком смысле настоящее изобретение относится к соединениям, которые обладают агонистической активностью в отношении рецепторов GLP-1 (глюкагоноподобного пептида 1) и GLP-2 (глюкагоноподобного пептида 2), например, оцениваемую in vitro в анализе силы действия. Такие соединения упоминаются в данном описании как «двойные агонисты GLP-1/GLP-2» или просто «двойные агонисты». Таким образом, соединения по настоящему изобретению обладают активностью как GLP-1 (7-36), так и GLP-2 (1-33).
В первом аспекте предложен двойной агонист GLP-1/GLP-2, представленный формулой:
R1-X*-U-R2
в которой:
R1 представляет собой водород (Hy), C1-4-алкил (например, метил), ацетил, формил, бензоил или трифторацетил;
R2 представляет собой NH2 или OH;
Х* представляет собой пептид по формуле I:
H-X2-EG-X5-F-X7-X8-E-X10-X11-TIL-X15-X16-X17-A-X19-X20-X21-FI-X24-WL-X27-X28-X29-KIT-X33 (I)
в которой:
X2 представляет собой Aib или G
X5 представляет собой T или S;
X7 представляет собой T или S;
X8 представляет собой S, E или D;
X10 представляет собой L, M, V или Ψ;
X11 представляет собой A, N или S;
X15 представляет собой D или E;
X16 представляет собой G, E, A или Ψ;
X17 представляет собой Q, E, K, L или Ψ;
X19 представляет собой A, V или S;
X20 представляет собой R, K или Ψ;
X21 представляет собой D, L или E;
X24 представляет собой A, N или S;
X27 представляет собой I, Q, K, H или Y;
X28 представляет собой Q, E, A, H, Y, L, K, R или S;
X29 представляет собой H, Y, K или Q;
X33 представляет собой D или E;
U отсутствует или представляет собой последовательность из 1-15 остатков, каждый из которых независимо выбран из K, k, E, A, T, I, L и Ψ;
молекула содержит один и только один Ψ, где Ψ представляет собой остаток K, k, R, Orn, Dap или Dab, в котором боковая цепь конъюгирована с заместителем, имеющим формулу Z1- or Z1 Z2-, в которой
Z1- представляет собой CH3-(CH2)10-22-(CO)- или HOOC-(CH2)10-22-(CO)-; и
-Z2- выбирают из -ZS1-, -ZS1-ZS2-, -ZS2-ZS1, -ZS2-, -ZS3-, -ZS1ZS3-, -ZS2ZS3-, -ZS3ZS1-, -ZS3ZS2-, -ZS1ZS2ZS3-, -ZS1ZS3ZS2-, -ZS2ZS1ZS3-, -ZS2ZS3ZS1-, -ZS3ZS1ZS2-, -ZS3ZS2ZS1-, -ZS2ZS3ZS2-, где
ZS1 представляет собой isoGlu, β-Ala, isoLys или 4-аминобутаноил;
ZS2 представляет собой - (Peg3)m-, где m равно 1, 2 или 3; и
-ZS3 представляет собой пептидную последовательность из 1-6 аминокислот, независимо выбранных из группы, состоящей из A, L, S, Т, Y, Q, D, E, K, k, R, H, F и G;
и где по меньшей мере один из Х5 и Х7 представляет собой Т;
или его фармацевтически приемлемая соль или сольват.
Положения различных аминокислот в пептиде X* из формулы, представленной в данном документе, пронумерованы в соответствии с их линейным положением с N- до C-конца в аминокислотной цепи.
В контексте настоящего описания β-Ala и 3-аминопропаноил используются взаимозаменяемо.
Двойные агонисты, имеющие аспарагиновую кислоту (Asp, D) в положении 3 и глицин (Gly) в положении 4, могут являться очень сильными агонистами рецепторов GLP-1 и GLP-2. Однако эта комбинация замен приводит к получению соединений, которые являются нестабильными и могут не подходить для длительного хранения в водном растворе. Без какого-либо теоретического обоснования считается, что Asp в положении 3 может изомеризоваться в изо-Asp через циклическое промежуточное соединение, образованное между функциональной группой карбоновой кислоты в его боковой цепи и каркасным атомом азота остатка в положении 4.
К настоящему времени стало известно, что молекулы, имеющие в положении 3 глутаминовую кислоту (Glu, E) вместо Asp, гораздо менее восприимчивы к таким реакциям и, следовательно, могут являться значительно более стабильными при хранении в водном растворе. Однако замена Asp на Glu в положении 3 в молекулах, имеющих липофильный заместитель в средней части пептида (например, в положениях 16 и 17 или рядом с ними), имеет тенденцию снижать эффективность в отношении одного или обоих рецепторов GLP-2 и GLP-1, даже если Glu присутствует в положении 3 нативной молекулы GLP-1. Одновременное включение остатка Thr в одно или оба положения 5 и 7, по-видимому, компенсирует часть или всю потерянную эффективность. Считается, что дальнейшее повышение эффективности также обеспечивается включением His (H), Tyr (Y), Lys (K) или Gln (Q) в положении 29 вместо присутствующих остатков Gly (G) и Thr (T) у дикого типа GLP-1 и 2 человека, соответственно.
В некоторых вариантах осуществления формулы I:
X2 представляет собой Aib или G
X5 представляет собой T или S;
X7 представляет собой T или S;
X8 представляет собой S;
X10 представляет собой L или Ψ;
X11 представляет собой A или S;
X15 представляет собой D или E;
X16 представляет собой G, E, A или Ψ;
X17 представляет собой Q, E, K, L или Ψ;
X19 представляет собой A или S;
X20 представляет собой R или Ψ;
X21 представляет собой D, L или E;
X24 представляет собой A;
X27 представляет собой I, Q, K, или Y;
X28 представляет собой Q, E, A, H, Y, L, K, R или S;
X29 представляет собой H, Y или Q; и
X33 представляет собой D или E.
Когда Ψ не находится в положении X16 или X17, может быть желательно, чтобы X16 представлял собой E, а X17 представлял собой Q.
В некоторых вариантах осуществления X11 представляет собой A, и X15 представляет собой D. В других вариантах осуществления X11 представляет собой S, и X15 представляет собой E. В дополнительных вариантах осуществления X11 представляет собой A, и X15 представляет собой E.
В некоторых вариантах осуществления X27 представляет собой I.
В некоторых вариантах осуществления X29 представляет собой H. В некоторых из этих вариантов осуществления X28 представляет собой A, и X29 представляет собой H; или X28 представляет собой E, и X29 представляет собой H.
В некоторых вариантах осуществления X29 представляет собой Q, и, необязательно, X27 представляет собой Q.
В некоторых вариантах осуществления остатки в положениях X27-X29 имеют последовательность, выбранную из:
IQH;
IEH
IAH;
IHH;
IYH;
ILH;
IKH;
IRH;
ISH;
QQH;
YQH;
KQH;
IQQ;
IQY;
IQT; и
IAY.
В некоторых вариантах осуществления Х* представляет собой пептид по формуле II:
H-X2-EG-X5-F-X7-SELATILD-X16-X17-AAR-X21-FIAWLI-X28-X29-KITD (II)
в которой:
X2 представляет собой Aib или G
X5 представляет собой T или S;
X7 представляет собой T или S;
X16 представляет собой G или Ψ;
X17 представляет собой Q, E, K, L или Ψ;
X21 представляет собой D или L;
X28 представляет собой Q, E, A, H, Y, L, K, R или S;
X29 представляет собой H, Y или Q;
В некоторых вариантах осуществления формулы I или формулы II, X16 представляет собой Ψ, и X17 представляет собой Q, E, K или L. Например, X17 может представлять собой Q, или X17 может быть выбран из E, K и L. В других вариантах осуществления X16 представляет собой G, и X17 представляет собой Ψ.
Может быть желательно, чтобы Х21 представлял собой D.
X28 может быть выбран из Q, E и A, например, это может быть Q или E. В некоторых комбинациях остатков Q может быть предпочтительным. При других комбинациях, E может быть предпочтительным, включая, но не ограничиваясь этим, когда X16 представляет собой G, и X17 представляет собой Ψ. В альтернативном варианте X28 может быть выбран из A, H, Y, L, K, R и S.
Х* может представлять собой пептид по формуле III
H[Aib]EG-X5-F-X7-SE-X10-ATILD-X16-X17-AA-X20-X21-FIAWLI-X28-X29-KITD (III)
в которой:
X5 представляет собой T или S;
X7 представляет собой T или S;
X10 представляет собой L или Ψ;
X16 представляет собой G, E, A или Ψ;
X17 представляет собой Q, E, K, L или Ψ;
X20 представляет собой R или Ψ;
X21 представляет собой D или L;
X28 представляет собой E, A или Q;
X29 представляет собой H, Y или Q;
и по меньшей мере один из X5 и X7 представляет собой T.
Х* может представлять собой пептид по формуле IV:
H[Aib]EG-X5-F-X7-SELATILD-X16-X17-AAR-X21-FIAWLI-X28-X29-KITD (IV)
в которой:
X5 представляет собой T или S;
X7 представляет собой T или S;
X16 представляет собой G или Ψ;
X17 представляет собой E, K, L или Ψ;
X21 представляет собой D или L;
X28 представляет собой E или A;
X29 представляет собой H, Y или Q;
и по меньшей мере один из X5 и X7 представляет собой T.
В некоторых вариантах осуществления любой из формул I-IV X16 представляет собой Ψ, и X17 представляет собой E, K или L.
В других вариантах осуществления формулы I-IV X16 представляет собой G, и X17 представляет собой Ψ.
В любом случае также могут быть включены следующие комбинации остатков:
X21 представляет собой D, и X28 представляет собой E;
X21 представляет собой D, и X28 представляет собой A;
X21 представляет собой L, и X28 представляет собой E;
X21 представляет собой L, и X28 представляет собой A.
Х* может представлять собой пептид по формуле IV:
H[Aib]EG-X5-F-X7-SELATILD-Ψ-QAARDFIAWLI-X28-X29-KITD (V)
в которой:
X5 представляет собой T или S;
X7 представляет собой T или S;
X28 представляет собой Q, E, A, H, Y, L, K, R или S, например, Q, E, A, H, Y или L;
X29 представляет собой H, Y или Q;
и по меньшей мере один из X5 и X7 представляет собой T.
В некоторых вариантах осуществления формулы III X28 представляет собой Q или E. В некоторых вариантах осуществления формулы III X28 представляет собой Q. В других вариантах осуществления X28 представляет собой A, H, Y, L, K, R или S, например, A, H, Y или L.
В любой из формул или вариантов осуществления, описанных выше, двойной агонист содержит одну из следующих комбинаций остатков:
Х5 представляет собой S, и Х7 представляет собой Т;
Х5 представляет собой Т, и Х7 представляет собой S;
Х5 представляет собой Т, а Х7 представляет собой Т.
Может быть предпочтительным, чтобы Х5 представлял собой S, и Х7 представлял собой Т, или Х5 представлял собой Т, а Х7 представлял собой Т.
В любой из формул или вариантов осуществления, описанных выше, может быть желательно, чтобы Х29 представлял собой Н.
В некоторых вариантах осуществления Ψ представляет собой остаток Lys, боковая цепь которого конъюгирована с заместителем Z1- или Z1-Z2-.
В некоторых вариантах осуществления Z1-, один или в сочетании с -Z2-, представляет собой додеканоил, тетрадеканоил, гексадеканоил, октадеканоил или эйкозаноил.
В некоторых вариантах осуществления Z1-, один или в сочетании с -Z2-, представляет собой:
13-карбокситридеканоил, то есть HOOC-(CH2)12-(CO)-;
15-карбоксипентадеканоил, то есть HOOC-(CH2)14-(CO)-;
17-карбоксигептадеканоил, то есть HOOC-(CH2)16-(CO)-;
19-карбоксинонадеканоил, то есть HOOC-(CH2)18-(CO)-; или
21-карбоксигенейкозаноил, то есть HOOC-(CH2)20-(CO)-.
В некоторых вариантах Z2 отсутствует.
В некоторых вариантах осуществления Z2 содержит ZS1 отдельно или в комбинации с ZS2 и/или ZS3.
В таких вариантах осуществления:
-ZS1- представляет собой isoGlu, β-Ala, isoLys или 4-аминобутаноил;
-ZS2-, если присутствует, представляет собой -(Peg3)m-, где m равно 1, 2 или 3; и
-ZS3- представляет собой пептидную последовательность из 1-6 аминокислотных единиц, независимо выбранную из группы, состоящей из A, L, S, Т, Y, Q, D, E, K, k, R, H, F и G, таких как пептидная последовательность KEK.
Z2 может иметь формулу -ZS1-ZS3-ZS2-, где ZS1 связан с Z1, а ZS2 связан с боковой цепью аминокислотного компонента Ψ.
Таким образом, в некоторых вариантах -Z2- представляет собой:
isoGlu(Peg 3)0-3;
β-Ala(Peg 3)0-3;
isoLys(Peg3)0-3; или
4-аминобутаноил(Peg3)0-3.
В других вариантах осуществления -Z2- представляет собой
isoGlu-KEK-(Peg3)0-3.
Конкретные примеры заместителя Z1-Z2- приведены ниже. В некоторых вариантах осуществления Z1-Z2- представляет собой [17-карбокси-гептадеканоил]-isoGlu. Например, Ψ может представлять собой K([17-карбокси-гептадеканоил]-isoGlu). В некоторых вариантах осуществления Z1-Z2 - представляет собой:
[17-карбокси-гептадеканоил]-isoGlu-KEK-Peg3-;
[17-карбокси-гептадеканоил]-isoGlu-Peg3-;
[19-карбокси-нонадеканоил]-isoGlu-;
[19-карбокси-нонадеканоил]-isoGlu-KEK-;
[19-карбокси-нонадеканоил]-isoGlu-KEK-Peg3-;
[19-карбокси-нонадеканоил]-isoGlu-KEK-Peg3-Peg3-;
[19-карбокси-нонадеканоил]-isoGlu-Peg3-Peg3-;
[19-карбокси-нонадеканоил]-isoLys-Peg3-Peg3-Peg3-;
[гексадеканоил]-βAla-;
[гексадеканоил]-isoGlu-; или
октадеканоил-.
Например, Ψ может представлять собой:
K([17-карбокси-гептадеканоил]-isoGlu-KEK-Peg3);
K([17-карбокси-гептадеканоил]-isoGlu-Peg3);
K([19-карбокси-нонадеканоил]-isoGlu);
K([19-карбокси-нонадеканоил]-isoGlu-KEK);
K([19-карбокси-нонадеканоил]-isoGlu-KEK-Peg3);
K([19-карбокси-нонадеканоил]-isoGlu-KEK-Peg3-Peg3);
K([19-карбокси-нонадеканоил]-isoGlu-Peg3-Peg3);
K([19-карбокси-нонадеканоил]-isoLys-Peg3-Peg3-Peg3);
K([гексадеканоил]-βAla-;
K([гексадеканоил]-isoGlu); или
K(октадеканоил).
Если присутствует, то U представляет собой пептидную последовательность из 1-15 остатков, каждый из которых независимо выбран из K (т.е. L-лизина), k (т.е. D-лизина) E (Glu), A (Ala), T (Thr), I (Ile), L (Leu) и Ψ. Например, U может состоять из 1-10 аминокислот в длину, состоять из 1-7 аминокислот в длину, состоять из 3-7 аминокислот в длину, состоять из 1-6 аминокислот в длину или состоять из 3-6 аминокислот в длину.
Как правило, U включает по меньшей мере одну заряженную аминокислоту (K, k или E) и, предпочтительно, две или несколько заряженных аминокислот. В некоторых вариантах осуществления U включает по меньшей мере 2 положительно заряженные аминокислоты (K или k) или по меньшей мере 1 положительно заряженную аминокислоту (K или k), и по меньшей мере одну отрицательно заряженную аминокислоту (E). В некоторых вариантах осуществления все аминокислотные остатки U являются заряженными (за исключением Ψ, если присутствует). Например, U может представлять собой цепочку из чередующихся положительно и отрицательно заряженных аминокислот.
В некоторых вариантах осуществления U содержит остатки, выбранные только из K, k, E и Ψ.
В некоторых вариантах осуществления U содержит остатки, выбранные только из K, k и Ψ.
Когда U содержит только остатки лизина (будь то K или k), все остатки могут иметь L-конфигурацию, или все могут иметь D-конфигурацию. Примеры включают K1-15, K1-10 и K1-7, например, K3, K4, K5, K6 и K7, в частности, K5 и K6. Дополнительные примеры включают в себя k1-15, k1-10 и k1-7, например, k3, k4, k5, k6 и k7, в частности, k5 и k6.
Дополнительные примеры пептидных последовательностей U включают KEK, EKEKEK, EkEkEk, AKAAEK, AKEKEK и ATILEK.
В любом случае, один из этих остатков может быть заменен на Ψ. Когда последовательность U содержит остаток Ψ, может быть желательно, чтобы С-концевой остаток U являлся Ψ. Таким образом, дополнительные примеры последовательностей U включают K1-14-Ψ, K1-9-Ψ и K1-6-Ψ, например, K2-Ψ, K3-Ψ, K4-Ψ, K5-Ψ и K6-Ψ, в частности, K4-Ψ и K5-Ψ. Дополнительные примеры включают в себя k1-14-Ψ, k1-9-Ψ и k1-6-Ψ, например, k2-Ψ, k3-Ψ, k4-Ψ, k5-Ψ и k6-Ψ, в частности, k4-Ψ и k5-Ψ. Другие дополнительные примеры включают KEΨ, EKEKEΨ, EkEkEΨ AKAAEΨ, AKEKEΨ и ATILEΨ.
В некоторых вариантах осуществления U отсутствует.
В некоторых вариантах осуществления R1 представляет собой Hy, и/или R2 представляет собой OH.
Пептид X* или пептид X*-U может иметь последовательность:
Пептид X* или пептид X*-U может иметь последовательность:
где K* или k* обозначает остаток L- или D-лизина, соответственно, где боковая цепь конъюгирована с заместителем Z1- или Z1Z2-.
Например, пептид X* или пептид X*-U может иметь последовательность:
Двойной агонист может представлять собой:
Двойной агонист может находиться в форме фармацевтически приемлемой соли или сольвата, такого как фармацевтически приемлемая соль присоединения кислоты.
Изобретение также относится к композиции, содержащей двойной агонист по изобретению или его фармацевтически приемлемую соль или сольват вместе с носителем, вспомогательным веществом или средством доставки. Носитель может представлять собой фармацевтически приемлемый носитель. Композиция может представлять собой фармацевтическую композицию. Фармацевтическая композиция может быть составлена в виде жидкости, подходящей для введения путем инъекции или инфузии. Она может быть составлена для достижения медленного высвобождения двойного агониста.
Настоящее изобретение также относится к двойному агонисту по изобретению для применения в терапии. В еще одном аспекте предложен двойной агонист по настоящему изобретению для применения в качестве лекарственного средства. Также предложен двойной агонист по изобретению для применения в способе медицинского лечения.
Изобретение также относится к двойному агонисту по изобретению для применения в способе увеличения массы кишечника, улучшения кишечной функции (особенно кишечной барьерной функции), увеличения кишечного кровотока или восстановления повреждения или дисфункции кишечника, например, повреждения кишечного эпителия.
Изобретение также относится к двойному агонисту по изобретению для применения в способе профилактики или лечения мальабсорбции, язв (например, пептической язвы, синдрома Золлингера-Эллисона, язв, вызванных лекарственными средствами, и язв, связанных с инфекциями или другими патогенами), синдрома короткого кишечника, синдрома слепой кишечной петли, воспалительного заболевания кишечника (болезни Крона и язвенного колита), синдрома раздраженного кишечника (СРК), поушита, нетропической спру (например, вызванной глютен-индуцированной энтеропатией или целиакией), тропической спру, гипогаммаглобулинемической спру, мукозита, вызванного химиотерапией или лучевой терапией, диареи, вызванной химиотерапией или лучевой терапией, неспецифического воспаления, метаболической эндотоксемии, некротизирующего энтероколита, первичного билиарного цирроза печени, гепатита, ожирения печени (включая атрофию кишечника, связанную с парентеральным питанием, PNALD (заболевание печени, связанное с парентеральным питанием), NAFLD (неалкогольная жировая болезнь печени) и NASH (неалкогольный стеатогепатит)) или желудочно-кишечных побочных эффектов при воспалительных заболеваниях, таких как панкреатит или болезнь трансплантат против хозяина (GVHD).
Изобретение также относится к двойному агонисту по изобретению для применения в способе уменьшения или ингибирования увеличения веса, уменьшения опорожнения желудка или кишечного транзита, уменьшения потребления пищи, снижения аппетита или содействия снижению веса.
Изобретение также относится к двойному агонисту по изобретению для применения в способе профилактики или лечения ожирения, патологического ожирения, связанного с ожирением заболевания желчного пузыря, вызванного ожирением апноэ во сне, неадекватного контроля глюкозы, толерантности к глюкозе, дислипидемии (например, повышенных уровней LDL) или пониженного соотношения HDL/LDL), диабета (например, диабета 2 типа, гестационного диабета), предиабета, метаболического синдрома или гипертонии.
Изобретение также относится к способу увеличения массы кишечника, улучшения кишечной функции (особенно кишечной барьерной функции), увеличения кишечного кровотока или восстановления повреждения или дисфункции кишечника у нуждающегося в этом субъекта, способ, включающий введение субъекту двойного агониста по изобретению.
Изобретение также относится к способу профилактики или лечения мальабсорбции, язв (например, пептической язвы, синдрома Золлингера-Эллисона, язв, вызванных лекарственными средствами, и язв, связанных с инфекциями или другими патогенами), синдрома короткого кишечника, синдрома слепой кишечной петли, воспалительного заболевания кишечника (болезни Крона и язвенного колита), синдрома раздраженного кишечника (СРК), поушита, нетропической спру (например, вызванной глютен-индуцированной энтеропатией или целиакией), тропической спру, гипогаммаглобулинемической спру, мукозита, вызванного химиотерапией или лучевой терапией, диареи, вызванной химиотерапией или лучевой терапией, неспецифического воспаления, метаболической эндотоксемии, некротизирующего энтероколита, первичного билиарного цирроза печени, гепатита, ожирения печени (включая атрофию кишечника, связанную с парэнтеральным питанием, PNALD (заболевание печени, связанное с парентеральным питанием), NAFLD (неалкогольная жировая болезнь печени) и NASH (неалкогольный стеатогепатит)) или желудочно-кишечных побочных эффектов при воспалительных заболеваниях, таких как панкреатит или болезнь трансплантат против хозяина (GVHD) у нуждающегося в этом субъекта, причем способ включает введение субъекту двойного агониста по изобретению.
Изобретение также относится к способу уменьшения или ингибирования увеличения веса, уменьшения опорожнения желудка или кишечного транзита, уменьшения потребления пищи, снижения аппетита или содействия снижению веса у нуждающегося в этом субъекта, причем способ включает введение субъекту двойного агониста по изобретению.
Изобретение также относится к способу профилактики или лечения ожирения, патологического ожирения, связанного с ожирением заболевания желчного пузыря, вызванного ожирением апноэ во сне, неадекватного контроля глюкозы, толерантности к глюкозе, дислипидемии (например, повышенных уровней LDL) или пониженного соотношения HDL/LDL), диабета (например, диабета 2 типа, гестационного диабета), предиабета, метаболического синдрома или гипертонии у нуждающегося в этом субъекта, причем способ включает введение субъекту двойного агониста по изобретению.
Изобретение также относится к применению двойного агониста по изобретению в изготовлении лекарственного средства для увеличения массы кишечника, улучшения кишечной функции (особенно кишечной барьерной функции), увеличения кишечного кровотока или восстановления повреждения или дисфункции кишечника, например, повреждения кишечного эпителия.
Изобретение также относится к применению двойного агониста по изобретению в изготовлении лекарственного средства для профилактики или лечения мальабсорбции, язв (например, пептической язвы, синдрома Золлингера-Эллисона, язв, вызванных лекарственными средствами, и язв, связанных с инфекциями или другими патогенами), синдрома короткого кишечника, синдрома слепой кишечной петли, воспалительного заболевания кишечника (болезни Крона и язвенного колита), синдрома раздраженного кишечника (СРК), поушита, нетропической спру (например, вызванной глютен-индуцированной энтеропатией или целиакией), тропической спру, гипогаммаглобулинемической спру, мукозита, вызванного химиотерапией или лучевой терапией, диареи, вызванной химиотерапией или лучевой терапией, неспецифического воспаления, метаболической эндотоксемии, некротизирующего энтероколита, первичного билиарного цирроза печени, гепатита, ожирения печени (включая атрофию кишечника, связанную с парэнтеральным питанием, PNALD (заболевание печени, связанное с парентеральным питанием), NAFLD (неалкогольная жировая болезнь печени) и NASH (неалкогольный стеатогепатит)) или желудочно-кишечных побочных эффектов при воспалительных заболеваниях, таких как панкреатит или болезнь трансплантат против хозяина (GVHD).
Изобретение также относится к применению двойного агониста по изобретению в изготовлении лекарственного средства для уменьшения или ингибирования увеличения веса, уменьшения опорожнения желудка или кишечного транзита, уменьшения потребления пищи, снижения аппетита или содействия снижению веса.
Изобретение также относится к применению двойного агониста по изобретению в изготовлении лекарственного средства для профилактики или лечения ожирения, патологического ожирения, связанного с ожирением заболевания желчного пузыря, вызванного ожирением апноэ во сне, неадекватного контроля глюкозы, толерантности к глюкозе, дислипидемии (например, повышенных уровней LDL) или пониженного соотношения HDL/LDL), диабета (например, диабета 2 типа, гестационного диабета), предиабета, метаболического синдрома или гипертонии.
В дополнительном аспекте изобретение относится к терапевтическому набору, содержащему двойной агонист или его фармацевтически приемлемую соль или сольват по изобретению.
Подробное описание изобретения
Если в данном документе не указано иное, то научные и технические термины, используемые в данной заявке, должны иметь значения, которые обычно понятны специалистам в данной области техники. В общем, номенклатура и методики, относящиеся к химии, молекулярной биологии, клеточной биологии и биологии рака, иммунологии, микробиологии, фармакологии и химии белка и нуклеиновых кислот, описанные в настоящем документе, хорошо известны специалистам и широко применяются в данной области техники.
Все публикации и патенты, указанные в настоящей заявке, полностью включены в данное описание в виде ссылки, как если бы каждая отдельная публикация или патент были конкретно и индивидуально указаны как включенные в виде ссылки. В случае конфликта преимущество будет иметь настоящее описание изобретения, в том числе определения.
Все патенты, опубликованные патентные заявки и непатентные публикации, указанные в этой заявке, прямо включены в настоящий документ путем ссылки. В случае конфликта настоящее описание, включая его конкретные определения, будет иметь преимущественную силу.
Каждый вариант осуществления изобретения, описанный в настоящем документе, может быть осуществлен отдельно или в комбинации с одним или несколькими другими вариантами осуществления изобретения.
Определения
Если не указано иное, для конкретных терминов, которые используются в настоящем письменном описании, приведены следующие определения.
В данном описании слово «содержать» и его грамматические варианты, такие как «содержит» или «содержащий», будут пониматься как подразумевающие включение указанного целого числа или компонента, или группы целых чисел или компонентов, но не исключение любого другого целого числа или компонента, или группы целых чисел или компонентов.
Форма единственного числа также подразумевает множественное число, если контекстом в явном виде не подразумевается иное.
Термин «включая» используется для обозначения «включая, но не ограничиваясь». «Включая» и «включая, но не ограничиваясь» могут использоваться взаимозаменяемо.
Термины «пациент», «субъект» и «индивидуум» могут использоваться взаимозаменяемо и относиться либо к человеку, либо к животному. Эти термины включают млекопитающих, таких как люди, приматы, домашние животные (например, коровы и свиньи), домашние животные (например, собаки и кошки) и грызуны (например, мыши и крысы).
Термин «сольват» в контексте настоящего изобретения относится к комплексу определенной стехиометрии, образованному растворенным веществом (в частности, пептидом или его фармацевтически приемлемой солью по изобретению) и растворителем. Растворителем в данном случае может являться, например, вода, этанол или другие фармацевтически приемлемые, как правило, низкомолекулярные органические вещества, такие как, но не ограниченные этим, уксусная кислота или молочная кислота. Когда рассматриваемым растворителем является вода, такой сольват обычно называют гидратом.
Термин «агонист», используемый в контексте изобретения, относится к веществу (лиганду), которое активирует данный тип рецептора.
В настоящем описании и формуле изобретения используются обычные трехбуквенные и однобуквенные коды для природных аминокислот, т.е.
A (Ala), G (Gly), L (Leu), I (Ile), V (Val), F (Phe), W (Trp), S (Ser), T (Thr), Y (Tyr), N (Asn), Q (Gln), D (Asp), E (Glu), K (Lys), R (Arg), H (His), M (Met), C (Cys) и P (Pro);
а также общепринятые трехбуквенные коды для других α-аминокислот, таких как саркозин (Sar), норлейцин (Nle), α-аминоизомасляная кислота (Aib), 2,3-диаминопропановая кислота (Dap), 2,4-диаминобутановая кислота (Dab) и 2,5-диаминопентановая кислота (орнитин; Orn). Такие другие α-аминокислоты могут быть указаны в квадратных скобках «[]» (например, «[Aib]») при использовании в общей формуле или последовательности в настоящем описании, особенно когда остальная часть формулы или последовательности приведена с использованием однобуквенного кода. Если не указано иное, аминокислотные остатки в пептидах по изобретению имеют L-конфигурацию. Однако аминокислоты D-конфигурации могут быть включены. В данном контексте обозначение аминокислоты, написанное строчной буквой, представляет D-конфигурацию указанной аминокислоты, например, «k» представляет собой D-конфигурацию лизина (K).
Среди последовательностей, раскрытых в данном документе, есть последовательности, включающие фрагмент «Hy-» на аминоконце (N-конце) последовательности и либо фрагмент «-OH», либо фрагмент «-NH2» на карбоксильном конце (C-конце) последовательности. В таких случаях, и если не указано иное, «Hy-» фрагмент на N-конце рассматриваемой последовательности указывает атом водорода [т.е. R1=водород=Hy в общих формулах, соответствуя наличию свободной первичной или вторичной аминогруппы на N-конце], тогда как фрагмент «-ОН» или «-NH2» на С-конце последовательности указывает гидроксильную группу [например, R2=OH в общих формулах, соответствуя присутствию карбоксильной (COOH) группы на С-конце] или аминогруппы [например, R2=[NH2] в общих формулах, соответствуя наличию амидной (CONH2) группы на С-конце], соответственно. В каждой последовательности по изобретению С-концевой фрагмент -ОН может быть заменен на С-концевой фрагмент -NH2, и наоборот.
«Процент (%) идентичности аминокислотных последовательностей» по отношению к полипептидным последовательностям GLP-2 определяется как процент аминокислотных остатков в последовательности-кандидате, которые идентичны аминокислотным остаткам в последовательности GLP-2 дикого типа (человека) после выравнивания последовательностей и введения разрывов при необходимости для достижения максимальной процентной идентичности последовательности, и без учета каких-либо консервативных замен как части идентичности последовательности. Выравнивание последовательностей может быть выполнено специалистом с использованием методик, хорошо известных в данной области техники, например с использованием общедоступного программного обеспечения, такого как BLAST, BLAST2 или программного обеспечения Align. Например, см. Altschul et al., Methods in Enzymology 266: 460-480 (1996) или Pearson et al., Genomics 46: 24-36, 1997.
Процент идентичности последовательностей, используемый в данном документе в контексте настоящего изобретения, может быть определен с использованием этих программ с их настройками по умолчанию. В более общем смысле, квалифицированный специалист может легко определить соответствующие параметры для проведения выравнивания, включая любые алгоритмы, необходимые для достижения максимального выравнивания по всей длине сравниваемых последовательностей.
Соединения двойных агонистов
В соответствии с настоящим изобретением двойной агонист обладает по меньшей мере одной биологической активностью GLP-1 и по меньшей мере одной биологической активностью GLP-2. Типичная физиологическая активность GLP-1 включает снижение скорости кишечного транзита, снижение скорости опорожнения желудка, снижение аппетита, потребления пищи или массы тела, а также улучшение контроля глюкозы и толерантности к глюкозе. Типичная физиологическая активность GLP-2 включает увеличение массы кишечника (например, тонкого или толстого кишечника), восстановление кишечника и улучшение барьерной функции кишечника (то есть снижение проницаемости кишечника). Эти параметры могут быть оценены в анализах in vivo, в которых масса и проницаемость кишечника или его части определяются после того, как тестируемое животное получило двойной агонист.
Двойные агонисты обладают агонистической активностью в отношении рецепторов GLP-1 и GLP-2, например рецепторов GLP-1 и GLP-2 человека. Величины EC50 для активности агониста рецептора in vitro можно использовать в качестве численной меры активности агониста для данного рецептора. Величина EC50 представляет собой концентрацию (например, моль/л) соединения, необходимую для достижения половины максимальной активности этого соединения в конкретном анализе. Можно считать, что соединение, имеющее величину EC50 для конкретного рецептора ниже величины EC50 эталонного соединения в том же анализе, обладает более высокой активностью в отношении этого рецептора, чем эталонное соединение.
Активность GLP-1
В некоторых вариантах осуществления двойной агонист имеет EC50 в отношении рецептора GLP-1 (например, рецептора GLP-1 человека), которая составляет менее 2,0 нМ, менее 1,5 нМ, менее 1,0 нМ, менее 0,9 нМ, менее 0,8 нМ, менее 0,7 нМ, менее 0,6 нМ, менее 0,5 нМ, менее 0,4 нМ, менее 0,3 нМ, менее 0,2 нМ, менее 0,1 нМ, менее 0,09 нМ, менее 0,08 нМ, менее 0,07 нМ, менее 0,06 нМ, менее 0,05 нМ, менее 0,04 нМ, например, при оценке с использованием анализа активности рецептора GLP-1, описанного в примерах ниже.
В некоторых вариантах осуществления двойной агонист имеет EC50 в отношении рецептора GLP-1, которая составляет от 0,005 до 2,5 нМ, от 0,01 до 2,5 нМ, от 0,025 до 2,5 нМ, от 0,005 до 2,0 нМ, от 0,01 до 2,0 нМ, от 0,025 до 2,0 нМ, от 0,005 до 1,5 нМ, от 0,01 до 1,5 нМ, от 0,025 до 1,5 нМ, от 0,005 до 1,0 нМ, от 0,01 до 1,0 нМ, от 0,025 до 1,0 нМ, от 0,005 до 0,5 нМ, от 0,01 до 0,5 нМ, от 0,025 до 0,5 нМ, от 0,005 до 0,25 нМ, от 0,01 до 0,25 нМ, от 0,025 до 0,25 нМ, например, при оценке с использованием анализа активности рецептора GLP-1, описанного в примерах ниже.
Альтернативное измерение активности агониста GLP-1 может быть осуществлено путем сравнения активности двойного агониста с активностью известного (или эталонного) агониста GLP-1 при измерении в одном и том же анализе. Таким образом, относительная активность в отношении рецептора GLP-1 может быть определена как:
[EC50(эталонный агонист)]/[EC50(двойной агонист)].
Таким образом, значение 1 указывает на то, что двойной агонист и эталонный агонист имеют одинаковую активность, значение >1 указывает, что двойной агонист обладает более высокой эффективностью (то есть меньшей EC50), чем эталонный агонист, а значение <1 указывает на то, что двойной агонист имеет более низкую активность (т.е. более высокую EC50), чем эталонный агонист.
Эталонным агонистом GLP-1 может являться, например, GLP-1 (7-37) человека, лираглутид (NN2211; Victoza) или эксендин-4, но предпочтительно, чтобы им являлся лираглутид.
Как правило, относительная активность будет иметь значения между 0,001 и 100, например,
от 0,001 до 10, от 0,001 до 5, от 0,001 до 1, от 0,001 до 0,5, от 0,001 до 0,1, от 0,001 до 0,05 или от 0,001 до 0,01;
от 0,01 до 10, от 0,01 до 5, от 0,01 до 1, от 0,01 до 0,5, от 0,01 до 0,1 или от 0,01 до 0,05;
от 0,05 до 10, от 0,05 до 5, от 0,05 до 1, от 0,05 до 0,5 или от 0,05 до 0,1;
от 0,1 до 10, от 0,1 до 5, от 0,1 до 1 или от 0,1 до 0,5;
от 0,5 до 10, от 0,5 до 5 или от 0,5 до 1;
от 1 до 10 или от 1 до 5;
или от 5 до 10.
Двойные агонисты, описанные в приведенных ниже примерах, имеют немного более низкую активность GLP-1, чем лираглутид, и поэтому могут, например, иметь относительную активность от 0,01 до 1, от 0,01 до 0,5 или от 0,01 до 0,1.
Напротив, двойные агонисты по изобретению обладают более высокой активностью в отношении рецептора GLP-1 (например, рецептора GLP-1 человека), чем человеческий GLP-2 дикого типа (hGLP-2 (1-33)) или [Gly2]-hGLP-2 (1-33) (т.е. GLP-2 человека, имеющий глицин в положении 2, также известный как тедуглутид). Таким образом, относительная активность двойных агонистов в отношении рецептора GLP-1 по сравнению с hGLP-2 (1-33) или тедуглутидом является выше 1, обычно, выше 5 или выше 10, и может подниматься до 100, до 500 или даже выше.
Активность GLP-2
В некоторых вариантах осуществления двойной агонист имеет EC50 в отношении рецептора GLP-2 (например, рецептора GLP-2 человека), которая составляет менее 2,0 нМ, менее 1,5 нМ, менее 1,0 нМ, менее 0,9 нМ, менее 0,8 нМ, менее 0,7 нМ, менее 0,6 нМ, менее 0,5 нМ, менее 0,4 нМ, менее 0,3 нМ, менее 0,2 нМ, менее 0,1 нМ, менее 0,09 нМ, менее 0,08 нМ, менее 0,07 нМ, менее 0,06 нМ, менее 0,05 нМ, менее 0,04 нМ, менее 0,03 нМ, менее 0,02 нМ или менее 0,01 нМ, например, при оценке с использованием анализа активности рецептора GLP-1, описанного в примерах ниже.
В некоторых вариантах осуществления двойной агонист имеет EC50 в отношении рецептора GLP-2, которая составляет от 0,005 до 2,0 нМ, от 0,01 до 2,0 нМ, от 0,025 до 2,0 нМ, от 0,005 до 1,5 нМ, от 0,01 до 1,5 нМ, от 0,025 до 1,5 нМ, от 0,005 до 1,0 нМ, от 0,01 до 1,0 нМ, от 0,025 до 1,0 нМ, от 0,005 до 0,5 нМ, от 0,01 до 0,5 нМ, от 0,025 до 0,5 нМ, от 0,005 до 0,25 нМ, от 0,01 до 0,25 нМ, от 0,025 до 0,25 нМ, например, при оценке с использованием анализа активности рецептора GLP-2, описанного в примерах менее.
Альтернативное измерение активности агониста GLP-2 может быть осуществлено путем сравнения активности двойного агониста с активностью известного (или эталонного) агониста GLP-2 при измерении в одном и том же анализе. Таким образом, относительная активность в отношении рецептора GLP-2 может быть определена как:
[EC50(эталонный агонист)]/[EC50(двойной агонист)].
Таким образом, значение 1 указывает на то, что двойной агонист и эталонный агонист имеют одинаковую активность, значение >1 указывает, что двойной агонист обладает более высокой эффективностью (то есть меньшей EC50), чем эталонный агонист, а значение <1 указывает на то, что двойной агонист имеет более низкую активность (т.е. более высокую EC50), чем эталонный агонист.
Эталонным агонистом GLP-2 может являться, например, GLP-2 (1-33) человека или тедуглутид ([Gly2]-hGLP-2 (1-33)), но предпочтительно, чтобы им являлся тедуглутид. Как правило, относительная активность будет находиться между 0,001 и 100, например,
от 0,001 до 10, от 0,001 до 5, от 0,001 до 1, от 0,001 до 0,5, от 0,001 до 0,1, от 0,001 до 0,05 или от 0,001 до 0,01;
от 0,01 до 10, от 0,01 до 5, от 0,01 до 1, от 0,01 до 0,5, от 0,01 до 0,1 или от 0,01 до 0,05;
от 0,05 до 10, от 0,05 до 5, от 0,05 до 1, от 0,05 до 0,5 или от 0,05 до 0,1;
от 0,1 до 10, от 0,1 до 5, от 0,1 до 1 или от 0,1 до 0,5;
от 0,5 до 10, от 0,5 до 5 или от 0,5 до 1;
от 1 до 10 или от 1 до 5;
или от 5 до 10.
Двойные агонисты, описанные в приведенных ниже примерах, имеют немного более низкую активность GLP-2, чем тедуглутид, и поэтому могут, например, иметь относительную активность от 0,01 до 1, от 0,01 до 0,5 или от 0,01 до 0,1.
Напротив, двойные агонисты по настоящему изобретению обладают более высокой эффективностью в отношении рецептора GLP-2 (например, рецептора GLP-2 человека), чем GLP-1 человека (7-37), лираглутид (NN2211; Victoza) или эксендин-4. Таким образом, относительная активность двойных агонистов рецептора GLP-2 по сравнению с GLP-1 (7-37) человека, лираглутидом (NN2211; Victoza) или эксендином-4 является выше 1, обычно выше 5 или выше 10, и может повышаться до 100, до 500 или даже выше (если эталонный агонист GLP-1 даже проявляет детектируемую активность в отношении рецептора GLP-2).
Понятно, что абсолютные величины силы действия двойных агонистов в отношении каждого рецептора гораздо менее важны, чем баланс между силой действия агонистов GLP-1 и GLP-2. Таким образом, вполне приемлемо, чтобы абсолютная GLP-1- или GLP-2-сила действия была ниже, чем у известных агонистов этих рецепторов, при условии, что двойное агонистическое соединение проявляет приемлемую относительную силу действия в отношении обоих рецепторов. Любой очевидный дефицит абсолютной силы действия может быть компенсирован повышенной дозой при необходимости.
Заместители
Двойной агонист по настоящему изобретению содержит остаток Ψ, который содержит остаток Lys, Arg, Orn, Dap или Dab, где боковая цепь конъюгирована с заместителем Z1- или Z1-Z2-, где Z1 представляет собой группу CH3-(CH2)10-22-(CO)- или HOOC-(CH2)10-22-(CO)-, и Z2, если присутствует, представляет собой спейсер.
Спейсер -Z2- выбирают из -ZS1-, -ZS1-ZS2-, -ZS2-ZS1, -ZS2-, -ZS3-, -ZS1ZS3-, -ZS2ZS3-, -ZS3ZS1-, -ZS3ZS2-, -ZS1ZS2ZS3-, -ZS1ZS3ZS2-, -ZS2ZS1ZS3-, -ZS2ZS3ZS1-, -ZS3ZS1ZS2-, -ZS3ZS2ZS1-, -ZS2ZS3ZS2-, где
ZS1 представляет собой isoGlu, β-Ala, isoLys или 4-аминобутаноил;
ZS2 представляет собой - (Peg3)m-, где m равно 1, 2 или 3; и
-ZS3 представляет собой пептидную последовательность из 1-6 аминокислот, выбранных из группы, состоящей из A, L, S, Т, Y, Q, D, E, K, k, R, H, F и G.
В некоторых вариантах осуществления Z2 представляет собой спейсер, имеющий формулу -ZS1-, -ZS1-ZS2-, -ZS2-ZS1 или ZS2, где -ZS1- представляет собой isoGlu, -Ala, isoLys или 4-аминобутаноил; а -ZS2- представляет собой -(Peg3)m-, где m равно 1, 2 или 3.
Не желая быть связанными какой-либо теорией, авторы полагают, что углеводородная цепь Z1 связывает альбумин в кровотоке, защищая таким образом двойные агонисты по настоящему изобретению от ферментативного расщепления, что может увеличить время жизни двойных агонистов.
Заместитель также может модулировать активность двойных агонистов в отношении рецептора GLP-2 и/или рецептора GLP-1.
Заместитель Z1- или Z1-Z2- конъюгирован с функциональной группой на дистальном конце боковой цепи от альфа-углерода соответствующего аминокислотного остатка. Поэтому обычная способность боковой цепи рассматриваемой аминокислоты (Lys, Arg, Orn, Dab, Dap) участвовать во взаимодействиях, опосредованных этой функциональной группой (например, внутри- и межмолекулярных взаимодействиях), может быть снижена или полностью устранена в результате присутствия заместителя. Таким образом, общие свойства двойного агониста могут быть относительно нечувствительными к изменению фактической аминокислоты, конъюгированной с заместителем. Следовательно, считается, что любой из остатков Lys, Arg, Orn, Dab или Dap может присутствовать в любом положении, где допускается Ψ. Однако в определенных вариантах осуществления может быть выгодным, чтобы аминокислота, с которой конъюгирован заместитель, представляла собой Lys или Orn.
Фрагмент Z1 может быть ковалентно связан с функциональной группой в боковой цепи аминокислоты или, в альтернативном варианте, может быть конъюгирован с функциональной группой боковой цепи аминокислоты через спейсер Z2.
Термин «конъюгированный» используется в данном документе для описания ковалентного присоединения одного идентифицируемого химического фрагмента к другому и структурных связей между такими фрагментами. Не следует понимать, что подразумевается какой-либо конкретный метод синтеза.
Связи между Z1, ZS1, ZS2, ZS3 и аминокислотной боковой цепью, с которой связан заместитель (в совокупности обозначаемый в настоящем описании как Ψ), являются пептидными. Другими словами, звенья могут быть объединены путем реакции амидной конденсации.
Z1 содержит углеводородную цепь, имеющую от 10 до 24 атомов углерода (С), например от 10 до 22 атомов С, например от 10 до 20 атомов С. Предпочтительно, чтобы он имел, по меньшей мере 10 или по меньшей мере 11 атомов углерода, и, предпочтительно, чтобы он имел 20 атомов углерода или меньше, например, 18 атомов углерода или меньше. Например, углеводородная цепь может содержать 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 или 20 атомов углерода. Например, она может содержать 18 или 20 атомов углерода.
В некоторых вариантах осуществления изобретения Z1 представляет собой группу, выбранную из додеканоила, тетрадеканоила, гексадеканоила, октадеканоила и эйкозаноила, предпочтительно, гексадеканоила, октадеканоила или эйкозаноила, более предпочтительно, октадеканоила или эйкозаноила.
Альтернативные группы Z1 получают из длинноцепочечных насыщенных α,ω-дикарбоновых кислот с формулой HOOC- (CH2)12 22-COOH, предпочтительно, из длинноцепочечных насыщенных α,ω-дикарбоновых кислот, имеющих четное число атомов углерода в алифатической цепи. Например, Z1 может представлять собой:
13-карбокситридеканоил, то есть HOOC- (CH2)12- (CO)-;
15-карбоксипентадеканоил, то есть HOOC- (CH2)14- (CO)-;
17-карбоксигептадеканоил, то есть HOOC- (CH2)16- (CO)-;
19-карбоксинонадеканоил, то есть HOOC- (CH2)18- (CO)- или
21-карбоксигенейкозаноил, то есть HOOC- (CH2)20- (CO)-.
Как указано выше, Z1 может быть конъюгирован с боковой цепью аминокислоты с помощью спейсера Z2. Если спейсер присутствует, то он присоединен к Z1 и боковой цепи аминокислоты.
Спейсер -Z2- имеет -ZS1-, -ZS1-ZS2-, -ZS2-ZS1, -ZS2-, -ZS3-, -ZS1ZS3-, -ZS2ZS3-, -ZS3ZS1-, -ZS3ZS2-, -ZS1ZS2ZS3-, -ZS1ZS3ZS2-, -ZS2ZS1ZS3-, -ZS2ZS3ZS1-, -ZS3ZS1ZS2-, -ZS3ZS2ZS1-, -ZS2ZS3ZS2-; где
-ZS1 представляет собой isoGlu, β-Ala, isoLys или 4-аминобутаноил;
-ZS2 представляет собой - (Peg3)m-, где m равно 1, 2 или 3; и
-ZS3 представляет собой пептидную последовательность из 1-6 аминокислот, независимо выбранных из группы, состоящей из A (Ala), L (Leu), S (Ser), T (Thr), Y (Tyr), Q (Gln), D (Asp), E (Glu), K (L-Lys), k (D-Lys), R (Arg), H (His), F (Phe) and G (Gly).
Термины «isoGlu» и «isoLys» означают остатки аминокислот, которые участвуют в связях через свои боковые карбоксильные или аминные функциональные группы. Таким образом, isoGlu участвует в связях через свою альфа-аминогруппу и боковую карбоксильную группу, тогда как isoLys участвует через свою карбоксильную и боковую аминогруппу. В контексте настоящего описания термины «γ-Glu» и «isoGlu» используются взаимозаменяемо.
Термин Peg3 используется для обозначения 8-амино-3,6-диоксаоктаноильной группы.
ZS3 может составлять, например, от 3 до 6 аминокислот в длину, то есть 3, 4, 5 или 6 аминокислот.
В некоторых вариантах осуществления аминокислоты ZS3 независимо выбраны из K, k, E, A, T, I и L, например, из K, k, E и A, например, из К, k и Е.
Как правило, ZS3 включает по меньшей мере одну заряженную аминокислоту (K, k, R или E, например, K, k или E) и, предпочтительно, две или несколько заряженных аминокислот. В некоторых вариантах осуществления он включает по меньшей мере 2 положительно заряженные аминокислоты (K, k или R, в частности, K или k) или по меньшей мере 1 положительно заряженную аминокислоту (K, k или R, в частности, K или k) и по меньшей мере одну отрицательно заряженную аминокислоту (E). В некоторых вариантах осуществления все аминокислотные остатки ZS3 являются заряженными. Например, ZS3 может представлять собой цепочку из чередующихся положительно и отрицательно заряженных аминокислот.
Примеры фрагментов ZS3 включают в себя KEK, EKEKEK, kkkkkk, EkEkEk, AKAAEK, AKEKEK и ATILEK.
Не ограничиваясь какой-либо теорией, авторы полагают, что включение ZS3 в линкер между цепью жирной кислоты и пептидным остовом может увеличить время полужизни двойного агониста за счет повышения его сродства к сывороточному альбумину.
В некоторых вариантах -Z2- представляет собой -ZS1- или -ZS1-ZS2-, другими словами, -Z2- выбирают из:
isoGlu(Peg3)0-3;
β-Ala(Peg3)0-3;
isoLys(Peg3)0-3; и
4-аминобутаноил(Peg3)0-3.
Таким образом, некоторые примеры заместителей Z1- включают [додеканоил], [тетрадеканоил], [гексадеканоил], [октадеканоил], [эйкозаноил], [13-карбокситридеканоил], [15-карбоксипентадеканоил], [17-карбоксигептадеканоил], [19-карбокси-нонадеканоил], [21-карбокси-генейкозаноил].
В более широком смысле -Z2- может представлять собой -ZS1-, -ZS1-ZS2-, -ZS3-ZS1-, -ZS1-ZS3-, -ZS1-ZS3-ZS2-, -ZS3-ZS2-ZS1- или ZS3-. Таким образом, -Z2- может быть выбран из группы, состоящей из:
isoGlu(Peg3)0-3;
β-Ala(Peg3)0-3;
isoLys(Peg3)0-3; и
4-аминобутаноил(Peg3)0-3;
isoGlu(KEK)(Peg3)0-3;
β-Ala(KEK)(Peg3)0-3;
isoLys(KEK)(Peg3)0-3;
4-аминобутаноил(KEK)(Peg3)0-3;
KEK(isoGlu);
KEK(β-Ala);
KEK(isoLys);
KEK(4-аминобутаноил);
isoGlu(KEK);
β-Ala(KEK);
isoLys(KEK);
4-аминобутаноил(KEK);
KEK(isoGlu)(Peg3)0-3;
KEK(β-Ala)(Prg3)0-3;
KEK(isoLys)(Peg3)0-3; и
KEK(4-аминобутаноил)(Peg3)0-3;
Некоторые примеры заместителей Z1-Z2- включают:
[додеканоил]-isoGlu, [тетрадеканоил]-isoGlu, [гексадеканоил]-isoGlu, [октадеканоил]-isoGlu, [эйкозаноил]-isoGlu,
[гексадеканоил]-βAla, [октадеканоил]-βAla, [эйкозаноил]-βAla, [тетрадеканоил]-βAla, [додеканоил]-βAla,
[додеканоил]-isoGlu-Peg3, [тетрадеканоил]-isoGlu-Peg3, [гексадеканоил]-isoGlu-Peg3, [октадеканоил]-isoGlu-Peg3, [эйкозаноил]-isoGlu-Peg3,
[додеканоил]- βAla-Peg3, [тетрадеканоил]- βAla-Peg3, [гексадеканоил]- βAla-Peg3, [октадеканоил]- βAla-Peg3, [эйкозаноил]- βAla-Peg3,
[додеканоил]-isoGlu-Peg3-Peg3, [тетрадеканоил]-isoGlu-Peg3-Peg3, [гексадеканоил]-isoGlu-Peg3-Peg3, [октадеканоил]-isoGlu-Peg3-Peg3, [эйкозаноил]-isoGlu-Peg3-Peg3,
[додеканоил]- βAla-Peg3-Peg3, [тетрадеканоил]- βAla-Peg3-Peg3, [гексадеканоил]- βAla-Peg3-Peg3, [октадеканоил]- βAla-Peg3-Peg3, [эйкозаноил]- βAla-Peg3-Peg3,
[додеканоил]-isoGlu-Peg3-Peg3-Peg3, [тетрадеканоил]-isoGlu-Peg3-Peg3-Peg3, [гексадеканоил]-isoGlu-Peg3-Peg3-Peg3, [октадеканоил]-isoGlu-Peg3-Peg3-Peg3, [эйкозаноил]-isoGlu-Peg3-Peg3-Peg3,
[додеканоил]- βAla-Peg3-Peg3-Peg3, [тетрадеканоил]- βAla-Peg3-Peg3-Peg3, [гексадеканоил]- βAla-Peg3-Peg3-Peg3, [октадеканоил]- βAla-Peg3-Peg3-Peg3, [эйкозаноил]- βAla-Peg3-Peg3-Peg3,
[додеканоил]-isoLys, [тетрадеканоил]-isoLys, [гексадеканоил]-isoLys, [октадеканоил]-isoLys, [эйкозаноил]-isoLys,
[гексадеканоил]-[4-аминобутаноил], [октадеканоил]-[4-аминобутаноил], [эйкозаноил]-[4-аминобутаноил], [тетрадеканоил]-[4-аминобутаноил], [додеканоил]-[4-аминобутаноил],
[додеканоил]-isoLys-Peg3, [тетрадеканоил]-isoLys-Peg3, [гексадеканоил]-isoLys-Peg3, [октадеканоил]-isoLys-Peg3, [эйкозаноил]-isoLys-Peg3,
[додеканоил]-[4-аминобутаноил]-Peg3, [тетрадеканоил]- [4-аминобутаноил]-Peg3, [гексадеканоил]-[4-аминобутаноил]-Peg3,
[октадеканоил]-[4-аминобутаноил]-Peg3, [эйкозаноил]-[4-аминобутаноил]-Peg3,
[додеканоил]-isoLys-Peg3-Peg3, [тетрадеканоил]-isoLys-Peg3-Peg3, [гексадеканоил]-isoLys-Peg3-Peg3, [октадеканоил]-isoLys-Peg3-Peg3, [эйкозаноил]-isoLys-Peg3-Peg3,
[додеканоил]-[4-аминобутаноил]-Peg3-Peg3, [тетрадеканоил]-[4-аминобутаноил]-Peg3-Peg3, [гексадеканоил]-[4-аминобутаноил]-Peg3-Peg3, [октадеканоил]-[4-аминобутаноил]-Peg3-Peg3, [эйкозаноил]-[4-аминобутаноил]-Peg3-Peg3,
[додеканоил]-isoLys-Peg3-Peg3-Peg3, [тетрадеканоил]-isoLys-Peg3-Peg3-Peg3, [гексадеканоил]-isoLys-Peg3-Peg3-Peg3, [октадеканоил]-isoLys-Peg3-Peg3-Peg3, [эйкозаноил]-isoLys-Peg3-Peg3-Peg3,
[додеканоил]-[4-аминобутаноил]-Peg3-Peg3-Peg3, [тетрадеканоил]-[4-аминобутаноил]-Peg3-Peg3-Peg3, [гексадеканоил]-[4-аминобутаноил]-Peg3-Peg3-Peg3, [октадеканоил]-[4-аминобутаноил]-Peg3-Peg3-Peg3, [эйкозаноил]-[4-аминобутаноил]-Peg3-Peg3-Peg3,
[13-карбокси-тридеканоил]-isoGlu, [15-карбокси-пентадеканоил]-isoGlu, [17-карбокси-гептадеканоил]-isoGlu, [19-карбокси-нонадеканоил]-isoGlu, [21-карбокси-генейкозаноил]-isoGlu,
[17-карбокси-гептадеканоил]-βAla, [19-карбокси-нонадеканоил]-βAla, [21-карбокси-генейкозаноил]-βAla, [15-карбокси-пентадеканоил]-βAla, [13-карбокси-тридеканоил]-βAla,
[13-карбокси-тридеканоил]-isoGlu-Peg3, [15-карбокси-пентадеканоил]-isoGlu-Peg3, [17-карбокси-гептадеканоил]-isoGlu-Peg3, [19-карбокси-нонадеканоил]-isoGlu-Peg3, [21-карбокси-генейкозаноил]-isoGlu-Peg3,
[13-карбокси-тридеканоил]- βAla-Peg3, [15-карбокси-пентадеканоил]- βAla-Peg3, [17-карбокси-гептадеканоил]- βAla-Peg3, [19-карбокси-нонадеканоил]- βAla-Peg3, [21-карбокси-генейкозаноил]- βAla-Peg3,
[13-карбокси-тридеканоил]-isoGlu-Peg3-Peg3, [15-карбокси-пентадеканоил]-isoGlu-Peg3-Peg3, [17-карбокси-гептадеканоил]-isoGlu-Peg3-Peg3, [19-карбокси-нонадеканоил]-isoGlu-Peg3-Peg3, [21-карбокси-генейкозаноил]-isoGlu-Peg3-Peg3,
[13-карбокси-тридеканоил]- βAla-Peg3-Peg3, [15-карбокси-пентадеканоил]- βAla-Peg3-Peg3, [17-карбокси-гептадеканоил]- βAla-Peg3-Peg3, [19-карбокси-нонадеканоил]- βAla-Peg3-Peg3, [21-карбокси-генейкозаноил]- βAla-Peg3-Peg3,
[13-карбокси-тридеканоил]-isoGlu-Peg3-Peg3-Peg3, [15-карбокси-пентадеканоил]-isoGlu-Peg3-Peg3-Peg3, [17-карбокси-гептадеканоил]-isoGlu-Peg3-Peg3-Peg3, [19-карбокси-нонадеканоил]-isoGlu-Peg3-Peg3-Peg3, [21-карбокси-генейкозаноил]-isoGlu-Peg3-Peg3-Peg3,
[13-карбокси-тридеканоил]- βAla-Peg3-Peg3-Peg3, [15-карбокси-пентадеканоил]- βAla-Peg3-Peg3-Peg3, [17-карбокси-гептадеканоил]- βAla-Peg3-Peg3-Peg3, [19-карбокси-нонадеканоил]- βAla-Peg3-Peg3-Peg3, [21-карбокси-генейкозаноил]- βAla-Peg3-Peg3-Peg3,
[13-карбокси-тридеканоил]-isoLys, [15-карбокси-пентадеканоил]-isoLys, [17-карбокси-гептадеканоил]-isoLys, [19-карбокси-нонадеканоил]-isoLys, [21-карбокси-генейкозаноил]-isoLys,
[17-карбокси-гептадеканоил]-[4-аминобутаноил], [19-карбокси-нонадеканоил]-[4-аминобутаноил], [21-карбокси-генейкозаноил]-[4-аминобутаноил], [15-карбокси-пентадеканоил]-[4-аминобутаноил], [13-карбокси-тридеканоил]-[4-аминобутаноил],
[13-карбокси-тридеканоил]-isoLys-Peg3, [15-карбокси-пентадеканоил]-isoLys-Peg3, [17-карбокси-гептадеканоил]-isoLys-Peg3, [19-карбокси-нонадеканоил]-isoLys-Peg3, [21-карбокси-генейкозаноил]-isoLys-Peg3,
[13-карбокси-тридеканоил]-[4-аминобутаноил]-Peg3, [15-карбокси-пентадеканоил]- [4-аминобутаноил]-Peg3, [17-карбокси-гептадеканоил]-[4-аминобутаноил]-Peg3,
[19-карбокси-нонадеканоил]- βAla-Peg3, [21-карбокси-генейкозаноил]- βAla-Peg3,
[13-карбокси-тридеканоил]-isoLys-Peg3-Peg3, [15-карбокси-пентадеканоил]-isoLys-Peg3-Peg3, [17-карбокси-гептадеканоил]-isoLys-Peg3-Peg3, [19-карбокси-нонадеканоил]-isoLys-Peg3-Peg3, [21-карбокси-генейкозаноил]-isoLys-Peg3-Peg3,
[13-карбокси-тридеканоил]-[4-аминобутаноил]-Peg3-Peg3, [15-карбокси-пентадеканоил]-[4-аминобутаноил]-Peg3-Peg3, [17-карбокси-гептадеканоил]-[4-аминобутаноил]-Peg3-Peg3, [19-карбокси-нонадеканоил]-[4-аминобутаноил]-Peg3-Peg3, [21-карбокси-генейкозаноил]-[4-аминобутаноил]-Peg3-Peg3,
[13-карбокси-тридеканоил]-isoLys-Peg3-Peg3-Peg3, [15-карбокси-пентадеканоил]-isoLys-Peg3-Peg3-Peg3, [17-карбокси-гептадеканоил]-isoLys-Peg3-Peg3-Peg3, [19-карбокси-нонадеканоил]-isoLys-Peg3-Peg3-Peg3, [21-карбокси-генейкозаноил]-isoLys-Peg3-Peg3-Peg3,
[13-карбокси-тридеканоил]-[4-аминобутаноил]-Peg3-Peg3-Peg3, [15-карбокси-пентадеканоил]-[4-аминобутаноил]-Peg3-Peg3-Peg3, [17-карбокси-гептадеканоил]-[4-аминобутаноил]-Peg3-Peg3-Peg3, [19-карбокси-нонадеканоил]-[4-аминобутаноил]-Peg3-Peg3-Peg3 and [21-карбокси-генейкозаноил]-[4-аминобутаноил]-Peg3-Peg3-Peg3.
Дополнительные примеры заместителей Z1-Z2- включают:
[додеканоил]-isoLys, [тетрадеканоил]-isoLys, [гексадеканоил]-isoLys, [октадеканоил]-isoLys, [эйкозаноил]-isoLys,
[гексадеканоил]-[4-аминобутаноил], [октадеканоил]-[4-аминобутаноил], [эйкозаноил]-[4-аминобутаноил], [тетрадеканоил]-[4-аминобутаноил], [додеканоил]-[4-аминобутаноил],
[гексадеканоил]-KEK, [октадеканоил]-KEK, [эйкозаноил]-KEK, [тетрадеканоил]-KEK, [додеканоил]-KEK,
[додеканоил]-Peg3, [тетрадеканоил]-Peg3, [гексадеканоил]-Peg3,
[октадеканоил]-Peg3, [эйкозаноил]-Peg3,
[додеканоил]-Peg3-Peg3, [тетрадеканоил]-Peg3-Peg3,
[гексадеканоил]-Peg3-Peg3, [октадеканоил]-Peg3-Peg3, [эйкозаноил]-Peg3-Peg3,
[додеканоил]-Peg3-Peg3-Peg3, [тетрадеканоил]-Peg3-
Peg3-Peg3, [гексадеканоил]-Peg3-Peg3-Peg3, [октадеканоил]-
Peg3-Peg3-Peg3, [эйкозаноил]-Peg3-Peg3-Peg3,
додеканоил]-isoLys-Peg3, [тетрадеканоил]-isoLys-Peg3, [гексадеканоил]-isoLys-Peg3, [октадеканоил]-isoLys-Peg3, [эйкозаноил]-isoLys-Peg3,
[додеканоил]-[4-аминобутаноил]-Peg3, [тетрадеканоил]- [4-аминобутаноил]-Peg3, [гексадеканоил]-[4-аминобутаноил]-Peg3, [октадеканоил]-[4-аминобутаноил]-Peg3, [эйкозаноил]-[4-аминобутаноил]-Peg3,
[додеканоил]-KEK-Peg3, [тетрадеканоил]-KEK-Peg3, [гексадеканоил]-KEK-Peg3, [октадеканоил]-KEK-Peg3, [эйкозаноил]-KEK-Peg3,
[додеканоил]-isoLys-Peg3-Peg3, [тетрадеканоил]-isoLys-Peg3-Peg3, [гексадеканоил]-isoLys-Peg3-Peg3, [октадеканоил]-isoLys-Peg3-Peg3, [эйкозаноил]-isoLys-Peg3-Peg3,
[додеканоил]-[4-аминобутаноил]-Peg3-Peg3, [тетрадеканоил]-[4-аминобутаноил]-Peg3-Peg3, [гексадеканоил]-[4-аминобутаноил]-Peg3-Peg3, [октадеканоил]-[4-аминобутаноил]-Peg3-Peg3, [эйкозаноил]-[4-аминобутаноил]-Peg3-Peg3,
[додеканоил]-KEK-Peg3-Peg3, [тетрадеканоил]-KEK-Peg3-Peg3, [гексадеканоил]-KEK-Peg3-Peg3, [октадеканоил]-KEK -Peg3-Peg3, [эйкозаноил]-KEK-Peg3-Peg3,
[додеканоил]-isoLys-Peg3-Peg3-Peg3, [тетрадеканоил]-isoLys-Peg3-Peg3-Peg3, [гексадеканоил]-isoLys-Peg3-Peg3-Peg3, [октадеканоил]-isoLys-Peg3-Peg3-Peg3, [эйкозаноил]-isoLys-Peg3-Peg3-Peg3,
[додеканоил]-[4-аминобутаноил]-Peg3-Peg3-Peg3, [тетрадеканоил]-[4-аминобутаноил]-Peg3-Peg3-Peg3, [гексадеканоил]-[4-аминобутаноил]-Peg3-Peg3-Peg3, [октадеканоил]-[4-аминобутаноил]-Peg3-Peg3-Peg3, [эйкозаноил]-[4-аминобутаноил]-Peg3-Peg3-Peg3,
[додеканоил]-KEK-Peg3-Peg3-Peg3, [тетрадеканоил]-KEK-Peg3-Peg3-Peg3, [гексадеканоил]-KEK-Peg3-Peg3-Peg3, [октадеканоил]-KEK-Peg3-Peg3-Peg3, [эйкозаноил]-KEK-Peg3-Peg3-Peg3,
[додеканоил]-isoGlu-KEK-Peg3, [тетрадеканоил]-isoGlu-KEK-Peg3, [гексадеканоил]-isoGlu-KEK-Peg3, [октадеканоил]-isoGlu-KEK-Peg3, [эйкозаноил]-isoGlu-KEK-Peg3,
[додеканоил]-[4-аминобутаноил]-KEK-Peg3, [тетрадеканоил]-[4-аминобутаноил]-KEK-Peg3, [гексадеканоил]-[4-аминобутаноил]-KEK-Peg3, [октадеканоил]-[4-аминобутаноил]-KEK-Peg3, [эйкозаноил]-[4-аминобутаноил]-KEK-Peg3,
[додеканоил]-isoLys-KEK-Peg3, [тетрадеканоил]-isoLys-KEK-Peg3, [гексадеканоил]-isoLys-KEK-Peg3, [октадеканоил]-isoLys-KEK-Peg3, [эйкозаноил]-isoLys-KEK-Peg3,
[додеканоил]-βAla-KEK-Peg3, [тетрадеканоил]-βAla-KEK-Peg3, [гексадеканоил]-βAla-KEK-Peg3, [октадеканоил]-βAla-KEK-Peg3, [эйкозаноил]-βAla-KEK-Peg3,
[додеканоил]-isoGlu-KEK-Peg3-Peg3, [тетрадеканоил]-isoGlu-KEK-Peg3-Peg3, [гексадеканоил]-isoGlu-KEK-Peg3-Peg3, [октадеканоил]-isoGlu-KEK-Peg3-Peg3, [эйкозаноил]-isoGlu-KEK-Peg3-Peg3,
[додеканоил]-βAla-KEK-Peg3-Peg3, [тетрадеканоил]-βAla-KEK-Peg3-Peg3, [гексадеканоил]-βAla-KEK-Peg3-Peg3, [октадеканоил]-βAla-KEK-Peg3-Peg3, [эйкозаноил]-βAla-KEK-Peg3-Peg3,
[додеканоил]-isoLys-KEK-Peg3-Peg3, [тетрадеканоил]-isoLys-KEK-Peg3-Peg3, [гексадеканоил]-isoLys-KEK-Peg3-Peg3, [октадеканоил]-isoLys-KEK-Peg3-Peg3, [эйкозаноил]-isoLys-KEK-Peg3-Peg3,
[додеканоил]-[4-аминобутаноил]-KEK-Peg3-Peg3, [тетрадеканоил]-[4-аминобутаноил]-KEK-Peg3-Peg3, [гексадеканоил]-[4-аминобутаноил]-KEK-Peg3-Peg3, [октадеканоил]-[4-аминобутаноил]-KEK-Peg3-Peg3, [эйкозаноил]-[4-аминобутаноил]-KEK-Peg3-Peg3,
[додеканоил]-isoGlu-KEK-Peg3-Peg3-Peg3, [тетрадеканоил]-isoGlu-KEK-Peg3-Peg3-Peg3, [гексадеканоил]-isoGlu-KEK-Peg3-Peg3-Peg3, [октадеканоил]-isoGlu-KEK-Peg3-Peg3-Peg3, [эйкозаноил]-isoGlu-KEK-Peg3-Peg3-Peg3,
[додеканоил]- βAla-KEK-Peg3-Peg3-Peg3, [тетрадеканоил]- βAla-KEK-Peg3-Peg3-Peg3, [гексадеканоил]- βAla-KEK-Peg3-Peg3-Peg3, [октадеканоил]- βAla-KEK-Peg3-Peg3-Peg3, [эйкозаноил]- βAla-KEK-Peg3-Peg3-Peg3,
[додеканоил]-isoLys-KEK-Peg3-Peg3-Peg3, [тетрадеканоил]-isoLys-KEK-Peg3-Peg3-Peg3, [гексадеканоил]-isoLys-KEK-Peg3-Peg3-Peg3, [октадеканоил]-isoLys-KEK-Peg3-Peg3-Peg3, [эйкозаноил]-isoLys-KEK-Peg3-Peg3-Peg3,
[додеканоил]-[4-аминобутаноил]-KEK-Peg3-Peg3-Peg3, [тетрадеканоил]-[4-аминобутаноил]-KEK-Peg3-Peg3-Peg3, [гексадеканоил]-[4-аминобутаноил]-KEK-Peg3-Peg3-Peg3, [октадеканоил]-[4-аминобутаноил]-KEK-Peg3-Peg3-Peg3, [эйкозаноил]-[4-аминобутаноил]-KEK-Peg3-Peg3-Peg3,
[додеканоил]-KEK-isoGlu-Peg3, [тетрадеканоил]-KEK-isoGlu-Peg3, [гексадеканоил]-KEK-isoGlu-Peg3, [октадеканоил]-KEK-isoGlu-Peg3, [эйкозаноил]-KEK-isoGlu-Peg3,
[додеканоил]-KEK-βAla-Peg3, [тетрадеканоил]-KEK-βAla-Peg3, [гексадеканоил]-KEK-βAla-Peg3, [октадеканоил]-KEK-βAla-Peg3, [эйкозаноил]-KEK-βAla-Peg3,
[додеканоил]-KEK-[4-аминобутаноил]-Peg3, [тетрадеканоил]-KEK-[4-аминобутаноил]-Peg3, [гексадеканоил]-KEK-[4-аминобутаноил]-Peg3, [октадеканоил]-KEK-[4-аминобутаноил]-Peg3, [эйкозаноил]-KEK-[4-аминобутаноил]-Peg3,
[додеканоил]-KEK-isoLys-Peg3, [тетрадеканоил]-KEK-isoLys-Peg3, [гексадеканоил]-KEK-isoLys-Peg3, [октадеканоил]-KEK-isoLys-Peg3, [эйкозаноил]-KEK-isoLys-Peg3,
[додеканоил]-KEK-isoGlu-Peg3-Peg3, [тетрадеканоил]-KEK-isoGlu-Peg3-Peg3, [гексадеканоил]-KEK-isoGlu-Peg3-Peg3, [октадеканоил]-KEK-isoGlu-Peg3-Peg3, [эйкозаноил]-KEK-isoGlu-Peg3-Peg3,
[додеканоил]-KEK-βAla-Peg3-Peg3, [тетрадеканоил]-KEK-βAla-Peg3-Peg3, [гексадеканоил]-KEK-βAla-Peg3-Peg3, [октадеканоил]-KEK-βAla-Peg3-Peg3, [эйкозаноил]-βAla-KEK-Peg3-Peg3,
[додеканоил]-KEK-[4-аминобутаноил]-Peg3-Peg3, [тетрадеканоил]-KEK-[4-аминобутаноил]-Peg3-Peg3, [гексадеканоил]-KEK-[4-аминобутаноил]-Peg3-Peg3, [октадеканоил]-KEK-[4-аминобутаноил]-Peg3-Peg3, [эйкозаноил]-KEK-[4-аминобутаноил]-Peg3-Peg3,
[додеканоил]-KEK-isoLys-Peg3-Peg3, [тетрадеканоил]-KEK-isoLys-Peg3-Peg3, [гексадеканоил]-KEK-isoLys-Peg3-Peg3, [октадеканоил]-KEK-isoLys-Peg3-Peg3, [эйкозаноил]-KEK-isoLys-Peg3-Peg3,
[додеканоил]-KEK-isoGlu-Peg3-Peg3-Peg3, [тетрадеканоил]-KEK-isoGlu-Peg3-Peg3-Peg3, [гексадеканоил]-KEK-isoGlu-Peg3-Peg3-Peg3, [октадеканоил]-KEK-isoGlu-Peg3-Peg3-Peg3, [эйкозаноил]-KEK-isoGlu-Peg3-Peg3-Peg3,
[додеканоил]-KEK-βAla-Peg3-Peg3-Peg3, [тетрадеканоил]KEK-βAla-Peg3-Peg3-Peg3, [гексадеканоил]- βAla-KEK-Peg3-Peg3-Peg3, [октадеканоил]-KEK-βAla-Peg3-Peg3-Peg3, [эйкозаноил]-KEK-βAla-Peg3-Peg3-Peg3,
[додеканоил]-KEK-[4-аминобутаноил]-Peg3-Peg3-Peg3, [тетрадеканоил]-KEK-[4-аминобутаноил]-Peg3-Peg3-Peg3, [гексадеканоил]-KEK-[4-аминобутаноил]-Peg3-Peg3-Peg3, [октадеканоил]-KEK-[4-аминобутаноил]-Peg3-Peg3-Peg3, [эйкозаноил]-KEK-[4-аминобутаноил]-Peg3-Peg3-Peg3,
[додеканоил]-KEK-isoLys-Peg3-Peg3-Peg3, [тетрадеканоил]-KEK-isoLys-Peg3-Peg3-Peg3, [гексадеканоил]-KEK-isoLys-Peg3-Peg3-Peg3, [октадеканоил]-KEK-isoLys-Peg3-Peg3-Peg3, [эйкозаноил]-KEK-isoLys-Peg3-Peg3-Peg3,
[13-карбокси-тридеканоил]-isoGlu, [15-карбокси-пентадеканоил]-isoGlu, [17-карбокси-гептадеканоил]-isoGlu, [19-карбокси-нонадеканоил]-isoGlu, [21-карбокси-hen21-карбокси-генейкозаноил]-isoGlu,
[17-карбокси-гептадеканоил]-βAla, [19-карбокси-нонадеканоил]-βAla, [21-карбокси-генейкозаноил]-βAla, [15-карбокси-пентадеканоил]-βAla, [13-карбокси-тридеканоил]-βAla,
[13-карбокси-тридеканоил]-isoLys, [15-карбокси-пентадеканоил]-isoLys, [17-карбокси-гептадеканоил]-isoLys, [19-карбокси-нонадеканоил]-isoLys, [21-карбокси-генейкозаноил]-isoLys,
[17-карбокси-гептадеканоил]-[4-аминобутаноил], [19-карбокси-нонадеканоил]-[4-аминобутаноил], [21-карбокси-генейкозаноил]-[4-аминобутаноил], [15-карбокси-пентадеканоил]-[4-аминобутаноил], [13-карбокси-тридеканоил]-[4-аминобутаноил],
[17-карбокси-гептадеканоил]-KEK, [19-карбокси-нонадеканоил]-KEK, [21-карбокси-генейкозаноил]-KEK, [15-карбокси-пентадеканоил]-KEK, [13-карбокси-тридеканоил]-KEK,
[13-карбокси-тридеканоил]-Peg3, [15-карбокси-пентадеканоил]-Peg3, [17-карбокси-гептадеканоил]-Peg3, [19-карбокси-нонадеканоил]-Peg3, [21-карбокси-генейкозаноил]-Peg3,
[13-карбокси-тридеканоил]-Peg3-Peg3, [15-карбокси-пентадеканоил]-Peg3-Peg3,
[17-карбокси-гептадеканоил]-Peg3-Peg3, [19-карбокси-нонадеканоил]-Peg3-Peg3, [21-карбокси-генейкозаноил]-Peg3-Peg3,
[13-карбокси-тридеканоил]-Peg3-Peg3-Peg3, [15-карбокси-пентадеканоил]-Peg3-Peg3-Peg3, [17-карбокси-гептадеканоил]-Peg3-Peg3-Peg3, [19-карбокси-нонадеканоил]-Peg3-Peg3-Peg3, [21-карбокси-генейкозаноил]-Peg3-Peg3-Peg3,
[13-карбокси-тридеканоил]-isoGlu-Peg3, [15-карбокси-пентадеканоил]-isoGlu-Peg3, [17-карбокси-гептадеканоил]-isoGlu-Peg3, [19-карбокси-нонадеканоил]-isoGlu-Peg3, [21-карбокси-генейкозаноил]-isoGlu-Peg3,
[13-карбокси-тридеканоил]- βAla-Peg3, [15-карбокси-пентадеканоил]- βAla-Peg3, [17-карбокси-гептадеканоил]- βAla-Peg3, [19-карбокси-нонадеканоил]- βAla-Peg3, [21-карбокси-генейкозаноил]- βAla-Peg3,
[13-карбокси-тридеканоил]-isoLys-Peg3, [15-карбокси-пентадеканоил]-isoLys-Peg3, [17-карбокси-гептадеканоил]-isoLys-Peg3, [19-карбокси-нонадеканоил]-isoLys-Peg3, [21-карбокси-генейкозаноил]-isoLys-Peg3,
[13-карбокси-тридеканоил]-[4-аминобутаноил]-Peg3, [15-карбокси-пентадеканоил]- [4-аминобутаноил]-Peg3, [17-карбокси-гептадеканоил]-[4-аминобутаноил]-Peg3, [19-карбокси-нонадеканоил]-[4-аминобутаноил]-Peg3, [21-карбокси-генейкозаноил]-[4-аминобутаноил]-Peg3,
[13-карбокси-тридеканоил]-KEK-Peg3, [15-карбокси-пентадеканоил]-KEK-Peg3, [17-карбокси-гептадеканоил]-KEK-Peg3, [19-карбокси-нонадеканоил]-KEK-Peg3, [21-карбокси-генейкозаноил]-KEK-Peg3,
[13-карбокси-тридеканоил]-isoGlu-Peg3-Peg3, [15-карбокси-пентадеканоил]-isoGlu-Peg3-Peg3, [17-карбокси-гептадеканоил]-isoGlu-Peg3-Peg3, [19-карбокси-нонадеканоил]-isoGlu-Peg3-Peg3, [21-карбокси-генейкозаноил]-isoGlu-Peg3-Peg3,
[13-карбокси-тридеканоил]- βAla-Peg3-Peg3, [15-карбокси-пентадеканоил]- βAla-Peg3-Peg3, [17-карбокси-гептадеканоил]- βAla-Peg3-Peg3, [19-карбокси-нонадеканоил]- βAla-Peg3-Peg3, [21-карбокси-генейкозаноил]- βAla-Peg3-Peg3,
[13-карбокси-тридеканоил]-isoLys-Peg3-Peg3, [15-карбокси-пентадеканоил]-isoLys-Peg3-Peg3, [17-карбокси-гептадеканоил]-isoLys-Peg3-Peg3, [19-карбокси-нонадеканоил]-isoLys-Peg3-Peg3, [21-карбокси-генейкозаноил]-isoLys-Peg3-Peg3,
[13-карбокси-тридеканоил]-[4-аминобутаноил]-Peg3-Peg3, [15-карбокси-пентадеканоил]-[4-аминобутаноил]-Peg3-Peg3, [17-карбокси-гептадеканоил]-[4-аминобутаноил]-Peg3-Peg3, [19-карбокси-нонадеканоил]-[4-аминобутаноил]-Peg3-Peg3, [21-карбокси-генейкозаноил]-[4-аминобутаноил]-Peg3-Peg3,
[13-карбокси-тридеканоил]-KEK-Peg3-Peg3, [15-карбокси-пентадеканоил]-KEK-Peg3-Peg3, [17-карбокси-гептадеканоил]-KEK-Peg3-Peg3, [19-карбокси-нонадеканоил]-KEK -Peg3-Peg3, [21-карбокси-генейкозаноил]-KEK -Peg3-Peg3,
[13-карбокси-тридеканоил]-isoGlu-Peg3-Peg3-Peg3, [15-карбокси-пентадеканоил]-isoGlu-Peg3-Peg3-Peg3, [17-карбокси-гептадеканоил]-isoGlu-Peg3-Peg3-Peg3, [19-карбокси-нонадеканоил]-isoGlu-Peg3-Peg3-Peg3, [21-карбокси-генейкозаноил]-isoGlu-Peg3-Peg3-Peg3,
[13-карбокси-тридеканоил]- βAla-Peg3-Peg3-Peg3, [15-карбокси-пентадеканоил]- βAla-Peg3-Peg3-Peg3, [17-карбокси-гептадеканоил]- βAla-Peg3-Peg3-Peg3, [19-карбокси-нонадеканоил]- βAla-Peg3-Peg3-Peg3, [21-карбокси-генейкозаноил]- βAla-Peg3-Peg3-Peg3,
[13-карбокси-тридеканоил]-isoLys-Peg3-Peg3-Peg3, [15-карбокси-пентадеканоил]-isoLys-Peg3-Peg3-Peg3, [17-карбокси-гептадеканоил]-isoLys-Peg3-Peg3-Peg3, [19-карбокси-нонадеканоил]-isoLys-Peg3-Peg3-Peg3, [21-карбокси-генейкозаноил]-isoLys-Peg3-Peg3-Peg3,
[13-карбокси-тридеканоил]-[4-аминобутаноил]-Peg3-Peg3-Peg3, [15-карбокси-пентадеканоил]-[4-аминобутаноил]-Peg3-Peg3-Peg3, [17-карбокси-гептадеканоил]-[4-аминобутаноил]-Peg3-Peg3-Peg3, [19-карбокси-нонадеканоил]-[4-аминобутаноил]-Peg3-Peg3-Peg3, [21-карбокси-генейкозаноил]-[4-аминобутаноил]-Peg3-Peg3-Peg3,
[13-карбокси-тридеканоил]-KEK-Peg3-Peg3-Peg3, [15-карбокси-пентадеканоил]-KEK-Peg3-Peg3-Peg3, [17-карбокси-гептадеканоил]-KEK-Peg3-Peg3-Peg3, [19-карбокси-нонадеканоил]-KEK-Peg3-Peg3-Peg3, [21-карбокси-генейкозаноил]-KEK-Peg3-Peg3-Peg3,
[13-карбокси-тридеканоил]-isoGlu-KEK-Peg3, [15-карбокси-пентадеканоил]-isoGlu-KEK-Peg3, [17-карбокси-гептадеканоил]-isoGlu-KEK-Peg3, [19-карбокси-нонадеканоил]-isoGlu-KEK-Peg3, [21-карбокси-генейкозаноил]-isoGlu-KEK-Peg3,
[13-карбокси-тридеканоил]-[4-аминобутаноил]-KEK-Peg3, [15-карбокси-пентадеканоил]-[4-аминобутаноил]-KEK-Peg3, [17-карбокси-гептадеканоил]-[4-аминобутаноил]-KEK-Peg3, [19-карбокси-нонадеканоил]-[4-аминобутаноил]-KEK-Peg3, [21-карбокси-генейкозаноил]-[4-аминобутаноил]-KEK-Peg3,
[13-карбокси-тридеканоил]-isoLys-KEK-Peg3, [15-карбокси-пентадеканоил]-isoLys-KEK-Peg3, [17-карбокси-гептадеканоил]-isoLys-KEK-Peg3, [19-карбокси-нонадеканоил]-isoLys-KEK-Peg3, [21-карбокси-генейкозаноил]-isoLys-KEK-Peg3,
[13-карбокси-тридеканоил]-βAla-KEK-Peg3, [15-карбокси-пентадеканоил]-βAla-KEK-Peg3, [17-карбокси-гептадеканоил]-βAla-KEK-Peg3, [19-карбокси-нонадеканоил]-βAla-KEK-Peg3, [21-карбокси-генейкозаноил]-βAla-KEK-Peg3,
[13-карбокси-тридеканоил]-isoGlu-KEK-Peg3-Peg3, [15-карбокси-пентадеканоил]-isoGlu-KEK-Peg3-Peg3, [17-карбокси-гептадеканоил]-isoGlu-KEK-Peg3-Peg3, [19-карбокси-нонадеканоил]-isoGlu-KEK-Peg3-Peg3, [21-карбокси-генейкозаноил]-isoGlu-KEK-Peg3-Peg3,
[13-карбокси-тридеканоил]-βAla-KEK-Peg3-Peg3, [15-карбокси-пентадеканоил]-βAla-KEK-Peg3-Peg3, [17-карбокси-гептадеканоил]-βAla-KEK-Peg3-Peg3, [19-карбокси-нонадеканоил]-βAla-KEK-Peg3-Peg3, [21-карбокси-генейкозаноил]-βAla-KEK-Peg3-Peg3,
[13-карбокси-тридеканоил]-isoLys-KEK-Peg3-Peg3, [15-карбокси-пентадеканоил]-isoLys-KEK-Peg3-Peg3, [17-карбокси-гептадеканоил]-isoLys-KEK-Peg3-Peg3, [19-карбокси-нонадеканоил]-isoLys-KEK-Peg3-Peg3, [21-карбокси-генейкозаноил]-isoLys-KEK-Peg3-Peg3,
[13-карбокси-тридеканоил]-[4-аминобутаноил]-KEK-Peg3-Peg3, [15-карбокси-пентадеканоил]-[4-аминобутаноил]-KEK-Peg3-Peg3, [17-карбокси-гептадеканоил]-[4-аминобутаноил]-KEK-Peg3-Peg3, [19-карбокси-нонадеканоил]-[4-аминобутаноил]-KEK-Peg3-Peg3, [21-карбокси-генейкозаноил]-[4-аминобутаноил]-KEK-Peg3-Peg3,
[13-карбокси-тридеканоил]-isoGlu-KEK-Peg3-Peg3-Peg3, [15-карбокси-пентадеканоил]-isoGlu-KEK-Peg3-Peg3-Peg3, [17-карбокси-гептадеканоил]-isoGlu-KEK-Peg3-Peg3-Peg3, [19-карбокси-нонадеканоил]-isoGlu-KEK-Peg3-Peg3-Peg3, [21-карбокси-генейкозаноил]-isoGlu-KEK-Peg3-Peg3-Peg3,
[13-карбокси-тридеканоил]- βAla-KEK-Peg3-Peg3-Peg3, [15-карбокси-пентадеканоил]- βAla-KEK-Peg3-Peg3-Peg3, [17-карбокси-гептадеканоил]- βAla-KEK-Peg3-Peg3-Peg3, [19-карбокси-нонадеканоил]- βAla-KEK-Peg3-Peg3-Peg3, [21-карбокси-генейкозаноил]- βAla-KEK-Peg3-Peg3-Peg3,
[13-карбокси-тридеканоил]-isoLys-KEK-Peg3-Peg3-Peg3, [15-карбокси-пентадеканоил]-isoLys-KEK-Peg3-Peg3-Peg3, [17-карбокси-гептадеканоил]-isoLys-KEK-Peg3-Peg3-Peg3, [19-карбокси-нонадеканоил]-isoLys-KEK-Peg3-Peg3-Peg3, [21-карбокси-генейкозаноил]-isoLys-KEK-Peg3-Peg3-Peg3,
[13-карбокси-тридеканоил]-[4-аминобутаноил]-KEK-Peg3-Peg3-Peg3, [15-карбокси-пентадеканоил]-[4-аминобутаноил]-KEK-Peg3-Peg3-Peg3, [17-карбокси-гептадеканоил]-[4-аминобутаноил]-KEK-Peg3-Peg3-Peg3, [19-карбокси-нонадеканоил]-[4-аминобутаноил]-KEK-Peg3-Peg3-Peg3, [21-карбокси-генейкозаноил]-[4-аминобутаноил]-KEK-Peg3-Peg3-Peg3,
[13-карбокси-тридеканоил]-KEK-isoGlu-Peg3, [15-карбокси-пентадеканоил]-KEK-isoGlu-Peg3, [17-карбокси-гептадеканоил]-KEK-isoGlu-Peg3, [19-карбокси-нонадеканоил]-KEK-isoGlu-Peg3, [21-карбокси-генейкозаноил]-KEK-isoGlu-Peg3,
[13-карбокси-тридеканоил]-KEK-βAla-Peg3, [15-карбокси-пентадеканоил]-KEK-βAla-Peg3, [17-карбокси-гептадеканоил]-KEK-βAla-Peg3, [19-карбокси-нонадеканоил]-KEK-βAla-Peg3, [21-карбокси-генейкозаноил]-KEK-βAla-Peg3,
[13-карбокси-тридеканоил]-KEK-[4-аминобутаноил]-Peg3, [15-карбокси-пентадеканоил]-KEK-[4-аминобутаноил]-Peg3, [17-карбокси-гептадеканоил]-KEK-[4-аминобутаноил]-Peg3, [19-карбокси-нонадеканоил]-KEK-[4-аминобутаноил]-Peg3, [21-карбокси-генейкозаноил]-KEK-[4-аминобутаноил]-Peg3,
[13-карбокси-тридеканоил]-KEK-isoLys-Peg3, [15-карбокси-пентадеканоил]-KEK-isoLys-Peg3, [17-карбокси-гептадеканоил]-KEK-isoLys-Peg3, [19-карбокси-нонадеканоил]-KEK-isoLys-Peg3, [21-карбокси-генейкозаноил]-KEK-isoLys-Peg3,
[13-карбокси-тридеканоил]-KEK-isoGlu-Peg3-Peg3, [15-карбокси-пентадеканоил]-KEK-isoGlu-Peg3-Peg3, [17-карбокси-гептадеканоил]-KEK-isoGlu-Peg3-Peg3, [19-карбокси-нонадеканоил]-KEK-isoGlu-Peg3-Peg3, [21-карбокси-генейкозаноил]-KEK-isoGlu-Peg3-Peg3,
[13-карбокси-тридеканоил]-KEK-βAla-Peg3-Peg3, [15-карбокси-пентадеканоил]-KEK-βAla-Peg3-Peg3, [17-карбокси-гептадеканоил]-KEK-βAla-Peg3-Peg3, [19-карбокси-нонадеканоил]-KEK-βAla-Peg3-Peg3, [21-карбокси-генейкозаноил]-βAla-KEK-Peg3-Peg3,
[13-карбокси-тридеканоил]-KEK-[4-аминобутаноил]-Peg3-Peg3, [15-карбокси-пентадеканоил]-KEK-[4-аминобутаноил]-Peg3-Peg3, [17-карбокси-гептадеканоил]-KEK-[4-аминобутаноил]-Peg3-Peg3, [19-карбокси-нонадеканоил]-KEK-[4-аминобутаноил]-Peg3-Peg3, [21-карбокси-генейкозаноил]-KEK-[4-аминобутаноил]-Peg3-Peg3,
[13-карбокси-тридеканоил]-KEK-isoLys-Peg3-Peg3, [15-карбокси-пентадеканоил]-KEK-isoLys-Peg3-Peg3, [17-карбокси-гептадеканоил]-KEK-isoLys-Peg3-Peg3, [19-карбокси-нонадеканоил]-KEK-isoLys-Peg3-Peg3, [21-карбокси-генейкозаноил]-KEK-isoLys-Peg3-Peg3,
[13-карбокси-тридеканоил]-KEK-isoGlu-Peg3-Peg3-Peg3, [15-карбокси-пентадеканоил]-KEK-isoGlu-Peg3-Peg3-Peg3, [17-карбокси-гептадеканоил]-KEK-isoGlu-Peg3-Peg3-Peg3, [19-карбокси-нонадеканоил]-KEK-isoGlu-Peg3-Peg3-Peg3, [21-карбокси-генейкозаноил]-KEK-isoGlu-Peg3-Peg3-Peg3,
[13-карбокси-тридеканоил]-KEK-βAla-Peg3-Peg3-Peg3, [15-карбокси-пентадеканоил]KEK-βAla-Peg3-Peg3-Peg3, [17-карбокси-гептадеканоил]- βAla-KEK-Peg3-Peg3-Peg3, [19-карбокси-нонадеканоил]-KEK-βAla-Peg3-Peg3-Peg3, [21-карбокси-генейкозаноил]-KEK-βAla-Peg3-Peg3-Peg3,
[13-карбокси-тридеканоил]-KEK-[4-аминобутаноил]-Peg3-Peg3-Peg3, [15-карбокси-пентадеканоил]-KEK-[4-аминобутаноил]-Peg3-Peg3-Peg3, [17-карбокси-гептадеканоил]-KEK-[4-аминобутаноил]-Peg3-Peg3-Peg3, [19-карбокси-нонадеканоил]-KEK-[4-аминобутаноил]-Peg3-Peg3-Peg3, [21-карбокси-генейкозаноил]-KEK-[4-аминобутаноил]-Peg3-Peg3-Peg3,
[13-карбокси-тридеканоил]-KEK-isoLys-Peg3-Peg3-Peg3, [15-карбокси-пентадеканоил]-KEK-isoLys-Peg3-Peg3-Peg3, [17-карбокси-гептадеканоил]-KEK-isoLys-Peg3-Peg3-Peg3, [19-карбокси-нонадеканоил]-KEK-isoLys-Peg3-Peg3-Peg3, [21-карбокси-генейкозаноил]-KEK-isoLys-Peg3-Peg3-Peg3.
Некоторые предпочтительные заместители Z1- и Z1-Z2- включают:
[гексадеканоил], [октадеканоил], [17-карбокси-гептадеканоил], [19-карбокси-нонадеканоил],
[гексадеканоил]-isoGlu, [октадеканоил]-isoGlu,
[гексадеканоил]-βAla, [октадеканоил]-βAla,
[гексадеканоил]-isoGlu-Peg3,
[гексадеканоил]-βAla-Peg3,
[гексадеканоил]-isoGlu-Peg3-Peg3,
[гексадеканоил]-βAla-Peg3-Peg3,
[гексадеканоил]-βAla-Peg3-Peg3-Peg3,
[гексадеканоил]-isoLys,
[гексадеканоил]-[4-аминобутаноил],
[гексадеканоил]-isoLys-Peg3,
[гексадеканоил]-[4-аминобутаноил]-Peg3,
[гексадеканоил]-isoLys-Peg3-Peg3,
[гексадеканоил]-[4-аминобутаноил]-Peg3-Peg3,
[гексадеканоил]-isoLys-Peg3-Peg3-Peg3,
[гексадеканоил]-[4-аминобутаноил]-Peg3-Peg3-Peg3,
[17-карбокси-гептадеканоил]-isoGlu,
[19-карбокси-нонадеканоил]-isoGlu,
[17-карбокси-гептадеканоил]-βAla,
[19-карбокси-нонадеканоил]-βAla,
[17-карбокси-гептадеканоил]-isoGlu-Peg3,
[19-карбокси-нонадеканоил]-isoGlu-Peg3,
[17-карбокси-гептадеканоил]-βAla-Peg3,
[19-карбокси-нонадеканоил]-βAla-Peg3,
[17-карбокси-гептадеканоил]-isoGlu-Peg3-Peg3,
[19-карбокси-нонадеканоил]-isoGlu-Peg3-Peg3,
[17-карбокси-гептадеканоил]-βAla-Peg3-Peg3,
[19-карбокси-нонадеканоил]-βAla-Peg3-Peg3,
[17-карбокси-гептадеканоил]-isoGlu-Peg3-Peg3-Peg3,
[19-карбокси-нонадеканоил]-isoGlu-Peg3-Peg3-Peg3,
[17-карбокси-гептадеканоил]-βAla-Peg3-Peg3-Peg3,
[19-карбокси-нонадеканоил]-βAla-Peg3-Peg3-Peg3,
[17-карбокси-гептадеканоил]-isoLys,
[19-карбокси-нонадеканоил]-isoLys,
[17-карбокси-гептадеканоил]-[4-аминобутаноил],
[19-карбокси-нонадеканоил]-[4-аминобутаноил],
[17-карбокси-гептадеканоил]-isoLys-Peg3,
[19-карбокси-нонадеканоил]-isoLys-Peg3,
[17-карбокси-гептадеканоил]-[4-аминобутаноил]-Peg3,
[19-карбокси-нонадеканоил]- [4-аминобутаноил]-Peg3,
[17-карбокси-гептадеканоил]-isoLys-Peg3-Peg3,
[19-карбокси-нонадеканоил]-isoLys-Peg3-Peg3,
[17-карбокси-гептадеканоил]-[4-аминобутаноил]-Peg3-Peg3,
[19-карбокси-нонадеканоил]-[4-аминобутаноил]-Peg3-Peg3,
[17-карбокси-гептадеканоил]-isoLys-Peg3-Peg3-Peg3,
[19-карбокси-нонадеканоил]-isoLys-Peg3-Peg3-Peg3,
[17-карбокси-гептадеканоил]-[4-аминобутаноил]-Peg3-Peg3-Peg3,
[19-карбокси-нонадеканоил]-[4-аминобутаноил]-Peg3-Peg3-Peg3.
Более предпочтительные заместители Z1-Z2- включают:
[гексадеканоил]-isoGlu,
[гексадеканоил]-βAla,
[гексадеканоил]-isoGlu-Peg3,
[гексадеканоил]-βAla-Peg3,
[гексадеканоил]-isoGlu-Peg3-Peg3,
[гексадеканоил]-isoLys,
[гексадеканоил]-isoLys-Peg3,
[гексадеканоил]-isoLys-Peg3-Peg3,
[17-карбокси-гептадеканоил]-isoGlu,
[19-карбокси-нонадеканоил]-isoGlu,
[17-карбокси-гептадеканоил]-isoGlu-Peg3,
[19-карбокси-нонадеканоил]-isoGlu-Peg3,
[17-карбокси-гептадеканоил]-isoGlu-Peg3-Peg3,
[19-карбокси-нонадеканоил]-isoGlu-Peg3-Peg3,
[17-карбокси-гептадеканоил]-isoGlu-Peg3-Peg3-Peg3,
[19-карбокси-нонадеканоил]-isoGlu-Peg3-Peg3-Peg3,
[17-карбокси-гептадеканоил]-isoLys,
[19-карбокси-нонадеканоил]-isoLys,
[17-карбокси-гептадеканоил]-isoLys-Peg3,
[19-карбокси-нонадеканоил]-isoLys-Peg3,
[17-карбокси-гептадеканоил]-isoLys-Peg3-Peg3,
[19-карбокси-нонадеканоил]-isoLys-Peg3-Peg3,
[17-карбокси-гептадеканоил]-isoLys-Peg3-Peg3-Peg3,
[19-карбокси-нонадеканоил]-isoLys-Peg3-Peg3-Peg3.
Еще более предпочтительные заместители Z1-Z2- включают:
[гексадеканоил]-KEK, [октадеканоил]-KEK,
[гексадеканоил]-βAla-Peg3,
[гексадеканоил]-KEK-Peg3,
[гексадеканоил]-KEK-Peg3-Peg3,
[гексадеканоил]-KEK-Peg3-Peg3-Peg3,
[17-карбокси-гептадеканоил]-KEK,
[19-карбокси-нонадеканоил]-KEK,
[17-карбокси-гептадеканоил]-KEK-Peg3,
[19-карбокси-нонадеканоил]-KEK-Peg3,
[17-карбокси-гептадеканоил]-KEK-Peg3-Peg3,
[19-карбокси-нонадеканоил]-KEK-Peg3-Peg3,
[17-карбокси-гептадеканоил]-isoGlu-KEK
[19-карбокси-нонадеканоил]-isoGlu-KEK,
[17-карбокси-гептадеканоил]-isoLys-KEK
[19-карбокси-нонадеканоил]-isoLys-KEK,
[17-карбокси-гептадеканоил]-βAla-KEK
[19-карбокси-нонадеканоил]-βAla-KEK, [17-карбокси-гептадеканоил]-KEK-Peg3-Peg3-Peg3,
[19-карбокси-нонадеканоил]-KEK-Peg3-Peg3-Peg3,
[17-карбокси-гептадеканоил]-[4-аминобутаноил]-KEK,
[19-карбокси-нонадеканоил]-[4-аминобутаноил]-KEK,
[17-карбокси-гептадеканоил]-[4-аминобутаноил]-KEK-Peg3-Peg3-Peg3,
[19-карбокси-нонадеканоил]-[4-аминобутаноил]-KEK-Peg3-Peg3-Peg3,
[17-карбокси-гептадеканоил]-[4-аминобутаноил]-KEK-Peg3-Peg3,
[19-карбокси-нонадеканоил]-[4-аминобутаноил]-KEK-Peg3-Peg3,
[гексадеканоил]-isoGlu-KEK-Peg3,
[гексадеканоил]-isoGlu-KEK-Peg3-Peg3,
[19-карбокси-нонадеканоил]-isoGlu-KEK,
[19-карбокси-нонадеканоил]-[4-аминобутаноил]-KEK,
[17-карбокси-гептадеканоил]-[4-аминобутаноил]-KEK-Peg3-Peg3-Peg3,
[17-карбокси-гептадеканоил]-[4-аминобутаноил]-KEK-Peg3-Peg3,
[19-карбокси-нонадеканоил]-[4-аминобутаноил]-KEK-Peg3-Peg3,
[17-карбокси-гептадеканоил]-KEK-Peg3-Peg3,
[19-карбокси-нонадеканоил]-KEK-Peg3-Peg3,
[17-карбокси-гептадеканоил]-isoGlu-KEK-Peg3,
[19-карбокси-нонадеканоил]-isoGlu-KEK-Peg3,
[17-карбокси-гептадеканоил]-isoGlu-KEK-Peg3-Peg3,
[19-карбокси-нонадеканоил]-isoGlu-KEK-Peg3-Peg3.
Примеры Ψ, содержащего различные заместители (жирные кислоты, жирные кислоты), конъюгированные с боковой цепью аминокислоты, необязательно спейсером, проиллюстрированы ниже:
Кроме того, заместитель [гексадеканоил]-isoGlu, конъюгированный с боковой цепью остатка лизина, проиллюстрирован ниже:
Таким образом, боковая цепь остатка Lys ковалентно связана с карбоксильной группой боковой цепи спейсера isoGlu-Z2-(-ZS1-) через амидную связь. Гексадеканоильная группа (Z1) ковалентно присоединена к аминогруппе спейсера isoGlu через амидную связь.
Заместитель [гексадеканоил]-[4-аминобутаноил]-, конъюгированный с боковой цепью остатка лизина, проиллюстрирован ниже:
Заместитель [(гексадеканоил)-isoLys]-, конъюгированный с боковой цепью остатка лизина, показан ниже:
Заместитель [(гексадеканоил)-β-Ala], конъюгированный с боковой цепью остатка лизина, показан ниже:
Некоторые дополнительные конкретные примеры комбинаций -Z2-Z1 проиллюстрированы ниже. В каждом случае --- указывает точку присоединения к боковой цепи аминокислотного компонента Ψ:
[17-карбокси-гептадеканоил]-isoGlu-Peg3-Peg3
[17-карбокси-гептадеканоил]-isoGlu
[17-карбокси-гептадеканоил]-isoLys-Peg3
[17-карбокси-гептадеканоил]-β-Ala-Peg3
4-[17-карбокси-гептадеканоил]-аминобутаноил-Peg3
[17-карбокси-гептадеканоил]-KEK-isoGlu-Peg3-Peg3
[17-карбокси-гептадеканоил]-isoGlu-KEK-Peg3-Peg3
Специалист в данной области техники будет хорошо осведомлен о подходящих способах получения заместителей, используемых в контексте изобретения, и конъюгации их с боковой цепью соответствующей аминокислоты в пептиде-двойном агонисте. Примеры подходящих химических реакций см. в WO 98/08871, WO 00/55184, WO 00/55119, Madsen et al., J. Med. Chem. 50:6126-32 (2007), and Knudsen et al., J. Med Chem. 43:1664-1669 (2000), включенных в настоящий документ посредством ссылки.
Синтез двойных агонистов
Предпочтительно синтезировать двойные агонисты по изобретению с помощью методики твердофазного или жидкофазного пептидного синтеза. В этом контексте можно сослаться на WO 98/11125 и, среди многих других, на Fields, G.B. et al., 2002, ʺPrinciples and practice of solid-phase peptide synthesisʺ. In: Synthetic Peptides (2nd Edition), и приведенные в настоящем документе примеры.
Согласно настоящему изобретению, двойной агонист по изобретению может быть синтезирован или получен различными способами, включая, например, способ, который включает в себя:
(а) синтез двойного агониста с помощью методики твердофазного или жидкофазного пептидного синтеза и выделение полученного таким образом синтезированного двойного агониста; или
(b) экспрессию пептидной последовательности-предшественника с конструкции нуклеиновой кислоты, которая кодирует пептид-предшественник, выделение продукта экспрессии и модификацию пептида-предшественника с получением соединения по изобретению.
Пептид-предшественник может быть модифицирован введением одной или нескольких непротеиногенных аминокислот, например, Aib, Orn, Dap или Dab, введением липофильного заместителя Z1 или Z1-Z2- по остатку Ψ, введением соответствующих концевых групп R1 и R2 и т.п.
Экспрессия обычно осуществляется с нуклеиновой кислоты, кодирующей пептид-предшественник, что может быть осуществлено в клетке или в бесклеточной системе экспрессии, содержащих такую нуклеиновую кислоту.
Предпочтительно синтезировать аналоги по изобретению с помощью твердофазного или жидкофазного пептидного синтеза. В этом контексте дана ссылка на WO 98/11125 и, среди многих других, на Fields, GB et al., 2002, ʺPrinciples and practice of solid-phase peptide synthesisʺ. In: Synthetic Peptides (2nd Edition), и приведенные здесь примеры.
Для рекомбинантной экспрессии фрагменты нуклеиновой кислоты, кодирующие пептид-предшественник, обычно будут вставлены в подходящие векторы, чтобы векторы для клонирования или экспрессии. Векторы могут, в зависимости от цели и типа применения, иметь форму плазмид, фагов, космид, мини-хромосом или вируса, но также чистая ДНК, которая только временно экспрессируется в определенных клетках, представляет собой важный вектор. Предпочтительные клонирующие и экспрессирующие векторы (плазмидные векторы) способны к автономной репликации, тем самым обеспечивая высокое число копий для экспрессии на высоком уровне или репликации на высоком уровне для последующего клонирования.
В общем, экспрессирующий вектор содержит следующие элементы в 5'→3'направлении и связанные функционально: промотор для управления экспрессией фрагмента нуклеиновой кислоты, необязательно, последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующая лидерный пептид, обеспечивающий секрецию (во внеклеточное пространство или, где это применимо, в периплазму), фрагмент нуклеиновой кислоты, кодирующий пептид-предшественник, и, необязательно, последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующая терминатор. Векторы могут содержать дополнительные элементы, такие как селективные маркеры и точки инициации репликации. При работе с экспрессирующими векторами в штаммах-продуцентах или клеточных линиях может быть предпочтительным, чтобы вектор был способен интегрироваться в геном клетки-хозяина. Специалист в данной области хорошо знаком с подходящими векторами и способен использовать их в соответствии с их конкретными признаками.
Векторы по изобретению используются для трансформации клеток-хозяев для продукции пептида-предшественника. Такими трансформированными клетками могут быть культивируемые клетки или клеточные линии, используемые для размножения нуклеотидных фрагментов и векторов и/или используемые для рекомбинантной продукции пептидов-предшественников.
Предпочтительными трансформированными клетками являются микроорганизмы, такие как бактерии [такие как виды Escherichia (например, E.coli), Bacillus (например, Bacillus subtilis), Salmonella или Mycobacterium (предпочтительно непатогенные, например, M. bovis BCG), дрожжи (например, Saccharomyces cerevisiae и Pichia pastoris) и простейшие. В альтернативном варианте трансформированные клетки могут быть получены из многоклеточного организма, то есть это могут быть клетки грибов, клетки насекомых, клетки водорослей, клетки растений или клетки животных, такие как клетки млекопитающих. Для клонирования и/или оптимизированной экспрессии предпочтительно, чтобы трансформированная клетка была способна реплицировать фрагмент нуклеиновой кислоты по изобретению. Клетки, экспрессирующие нуклеотидный фрагмент, можно использовать для получения пептидов по изобретению в малом или крупном масштабе.
При получении пептида-предшественника с помощью трансформированных клеток удобно, хотя вовсе и не обязательно, секретировать продукт экспрессии в культуральную среду.
Фармацевтические композиции и введение
Аспект настоящего изобретения относится к композиции, содержащей двойной агонист по изобретению или его фармацевтически приемлемую соль или сольват вместе с носителем. В одном варианте осуществления изобретения композиция представляет собой фармацевтическую композицию, а носитель представляет собой фармацевтически приемлемый носитель. Настоящее изобретение также относится к фармацевтической композиции, содержащей двойной агонист по изобретению или его соль или сольват вместе с носителем, вспомогательным веществом или средством доставки. Соответственно, двойной агонист по настоящему изобретению или его соли или сольваты, особенно их фармацевтически приемлемые соли или сольваты, могут быть представлены в виде композиций или фармацевтических композиций, приготовленных для хранения или введения и содержащих терапевтически эффективное количество двойного агониста по настоящему изобретению, или его соли или сольвата.
Подходящие соли, образованные с основаниями, включают соли металлов, такие как соли щелочных металлов или щелочноземельных металлов, например соли натрия, калия или магния; соли аммиака и соли органических аминов, такие как соли морфолина, тиоморфолина, пиперидина, пирролидина, низших моно-, ди- или триалкиламинов (например, этил-трет-бутил, диэтил-, диизопропил-, триэтил-, трибутил- или диметилпропиламин) или низших моно-, ди- или три-(гидроксиалкил)аминов (например, моно-, ди- или триэтаноламин). Также могут образовываться внутренние соли. Аналогичным образом, когда соединение по настоящему изобретению содержит основную часть, соли могут быть образованы с использованием органических или неорганических кислот. Например, соли могут быть образованы из следующих кислот: муравьиная, уксусная, пропионовая, масляная, валериановая, капроновая, щавелевая, молочная, лимонная, винная, янтарная, фумаровая, малеиновая, малоновая, миндальная, яблочная, фталевая, соляная, бромистоводородная, фосфорная, азотная, серная, бензойная, углекислая, мочевая, метансульфоновая, нафталинсульфоновая, бензолсульфоновая, толуолсульфоновая, п-толуолсульфоновая (то есть 4-метилбензолсульфоновая), камфорсульфоновая, 2-аминоэтансульфоновая, трифторметансульфоновая (последняя известна также как трифлатная кислота), а также другие известные фармацевтически приемлемые кислоты. Соли присоединения аминокислот также могут быть образованы с аминокислотами, такими как лизин, глицин или фенилаланин.
В одном варианте осуществления фармацевтическая композиция по изобретению представляет собой композицию, в которой двойной агонист находится в форме фармацевтически приемлемой соли присоединения кислоты.
Как будет очевидно для специалиста в области медицины, «терапевтически эффективное количество» соединения двойного агониста или его фармацевтической композиции по настоящему изобретению будет варьировать в зависимости, среди прочего, от возраста, веса и/или пола субъекта (пациента), подлежащего лечению. Другие факторы, которые могут приниматься во внимание, включают физические характеристики конкретного пациента, подлежащего лечению, диету пациента, природу любого принимаемого одновременно лекарственного средства, конкретное используемое(ые) соединение(я), конкретный способ введения, желаемый(ые) фармакологический(ие) эффект(ы) и конкретные терапевтические показания. Поскольку эти факторы и их взаимосвязь при определении этого количества хорошо известны в медицине, определение терапевтически эффективных уровней дозировки, количества, необходимого для достижения желаемого результата лечения и/или предотвращения, и/или лечения мальабсорбции и/или неспецифического воспаления, описанных в настоящем документе, а также других медицинских показаний, раскрытых в настоящем документе, входит в пределы компетенции специалиста в данной области.
Используемый в настоящем документе термин «терапевтически эффективное количество» относится к количеству, которое уменьшает симптомы данного состояния или патологии и, предпочтительно, нормализует физиологические реакции у индивидуума с этим состоянием или патологией. Уменьшение симптомов или нормализация физиологических реакций могут быть определены с использованием рутинных методов в данной области и могут варьироваться в зависимости от конкретного состояния или патологии. В одном аспекте терапевтически эффективное количество одного или нескольких двойных агонистов или их фармацевтических композиций представляет собой количество, которое восстанавливает измеряемый физиологический параметр по существу до того же значения (предпочтительно в пределах 30%, более предпочтительно, в пределах 20% и, еще более предпочтительно, в пределах 10% от значения) параметра у индивидуума без рассматриваемого состояния или патологии.
В одном варианте осуществления изобретения введение соединения или фармацевтической композиции по настоящему изобретению начинают при более низких уровнях дозировок, причем уровни дозировок увеличивают до тех пор, пока не будет достигнут желаемый эффект предотвращения/лечения соответствующих медицинских показаний. Это будет определять терапевтически эффективное количество. Для двойных агонистов по настоящему изобретению, по отдельности или как части фармацевтической композиции, такие дозы двойного агониста для человека могут составлять от примерно 0,01 пмоль/кг до 500 мкмоль/кг массы тела, от примерно 0,01 пмоль/кг до 300 мкмоль/кг массы тела, от 0,01 пмоль/кг до 100 мкмоль/кг массы тела, от 0,1 пмоль/кг до 50 мкмоль/кг массы тела, от 1 пмоль/кг до 10 мкмоль/кг массы тела, от 5 пмоль/кг до 5 мкмоль/кг массы тела, от 10 пмоль/кг до 1 мкмоль/кг массы тела, от 50 пмоль/кг до 0,1 мкмоль/кг массы тела, от 100 пмоль/кг до 0,01 мкмоль/кг массы тела, от 0,001 мкмоль/кг до 0,5 мкмоль/кг массы тела, от 0,05 мкмоль/кг до 0,1 мкмоль/кг массы тела.
Терапевтическая дозировка и схема лечения, наиболее подходящие для лечения пациента, конечно, будут варьировать в зависимости от заболевания или состояния, подлежащего лечению, и в зависимости от веса пациента и других параметров. Не желая быть связанными какой-либо конкретной теорией, авторы ожидают, что дозы в диапазоне мкг/кг и более короткое или более продолжительное время или частота лечения могут привести к терапевтически эффективным результатам, таким как статистически значимое увеличение, особенно в отношении массы тонкого кишечника. В некоторых случаях терапевтический режим может включать введение поддерживающих доз, подходящих для предотвращения регрессии ткани, которая происходит после прекращения первоначального лечения. Размеры дозировки и схема введения, наиболее подходящие для применения у человека, могут основываться на результатах, полученных в настоящем изобретении, и могут быть подтверждены в правильно спланированных клинических испытаниях.
Эффективную дозировку и протокол лечения можно определить обычными способами, начиная с низкой дозы у лабораторных животных, а затем увеличивая дозировку при мониторинге эффектов, а также систематически изменяя режим дозирования. При определении оптимальной дозы для данного субъекта клиницист может учитывать множество факторов. Специалисту в данной области известны эти факторы.
Медицинские показания
В широком аспекте настоящее изобретение относится к двойному агонисту по изобретению для применения в качестве лекарственного средства.
В дополнительном аспекте настоящее изобретение относится к двойному агонисту по изобретению для применения в терапии.
Двойные агонисты, описанные в настоящей спецификации, обладают биологической активностью как GLP-1, так и GLP-2.
GLP-2 индуцирует значительный рост эпителия слизистой оболочки тонкого кишечника посредством стимуляции пролиферации стволовых клеток в криптах и ингибирования апоптоза на ворсинках (Drucker et al. Proc Natl Acad Sci U S. A. 1996, 93: 7911-6). GLP-2 также оказывает влияние на рост толстой кишки. GLP-2 также ингибирует опорожнение желудка и секрецию желудочной кислоты (Wojdemann et al. J Clin Endocrinol Metab. 1999, 84: 2513-7), усиливает барьерную функцию кишечника (Benjamin et al.Gut. 2000, 47: 112-9), стимулирует транспорт гексозы в кишечнике посредством повышения синтеза переносчиков глюкозы (Cheeseman, Am J Physiol. 1997, R1965-71) и увеличивает кишечный кровоток (Guan et al. Gastroenterology. 2003, 125, 136-47).
Полезные эффекты GLP-2 в тонком кишечнике обусловили значительный интерес к применению GLP-2 для лечения кишечных заболеваний или травм (Sinclair and Drucker, Physiology 2005: 357-65). Кроме того, было показано, что GLP-2 предотвращает или уменьшает повреждение эпителия слизистой оболочки во многих доклинических моделях повреждения кишечника, включая энтерит, вызванный химиотерапией, ишемически-реперфузионное повреждение, декстрансульфат-индуцированный колит и генетические модели воспалительного заболевания кишечника (Sinclair and Drucker Physiology 2005: 357-65). Аналог GLP-2, тедуглутид (Gly2-hGLP-2), одобрен для лечения синдрома короткой кишки под торговыми названиями Gattex и Revestive.
GLP-1 представляет собой пептидный гормон, известный своей важной ролью в гомеостазе глюкозы. При секреции из желудочно-кишечного тракта в ответ на прием питательных веществ GLP-1 усиливает стимулированную глюкозой секрецию инсулина из β-клеток (Kim and Egan, 2008, Pharmacol.Rev. 470-512). Кроме того, было показано, что GLP-1 или его аналоги усиливают секрецию соматостатина и подавляют секрецию глюкагона (Holst JJ, 2007, Physiol Rev. 1409-1439).
Помимо основного действия GLP-1 на стимулированную глюкозой секрецию инсулина, GLP-1 также известен как ключевой регулятор аппетита, потребления пищи и массы тела. Кроме того, GLP-1 может ингибировать опорожнение желудка и моторику желудочно-кишечного тракта как у грызунов, так и у людей, скорее всего, через рецепторы GLP-1, присутствующие в желудочно-кишечном тракте (Holst JJ, 2007, Physiol Rev. 1409-1439; Hellström et al., 2008, Neurogastroenterol Motil. Jun; 20 (6): 649-659). Кроме того, GLP-1, по-видимому, обладает инсулиноподобными эффектами в основных экстрапанкреатических тканях, участвуя в гомеостазе глюкозы и липидном обмене в тканях, таких как мышцы, печень и жировые ткани (Kim and Egan, 2008, Pharmacol.Rev. 470-512).
Таким образом, соединения двойных агонистов по настоящему изобретению могут быть использованы для увеличения массы кишечника, улучшения кишечной функции (особенно кишечной барьерной функции), увеличения кишечного кровотока или восстановления повреждения или дисфункции кишечника (структурной или функциональной), например, повреждения кишечного эпителия. Они также могут быть использованы для профилактики или лечения заболеваний, которые могут быть облегчены благодаря этому действию, и для снижения смертности, связанной с повреждением желудочно-кишечного тракта.
Поэтому, двойные агонисты находят применение при многих желудочно-кишечных заболеваниях. Термин «желудочно-кишечный» используется в настоящем документе для включения всего желудочно-кишечного тракта, включая пищевод, желудок, тонкий кишечник (двенадцатиперстную кишку, тощую кишку, подвздошную кишку) и толстый кишечник (слепую кишку, толстую кишку, прямую кишку), но, в особенности, тонкий и толстый кишечник.
Таким образом, заболевания, при которых двойные агонисты могут быть полезными, включают мальабсорбцию, язвы (которые могут иметь любую этиологию, например пептическую язву, синдром Золлингера-Эллисона, язвы, вызванных лекарственными средствами, и язвы, связанных с инфекциями или другими патогенами), синдром короткого кишечника, синдром слепой кишечной петли, воспалительного заболевания кишечника (болезни Крона и язвенного колита), синдром раздраженного кишечника (СРК), поушит, нетропическую спру (например, вызванной глютен-индуцированной энтеропатией или целиакией), тропическую спру, гипогаммаглобулинемическую спру, и мукозит или диарею, вызванные химиотерапией или лучевой терапией.
Двойные агонисты могут также найти применение при определенных заболеваниях, которые не затрагивают главным образом желудочно-кишечную ткань, но могут быть вызваны или усугублены факторами, возникающими из-за дисфункции кишечника. Например, нарушение барьерной функции кишечника (которую можно назвать «утечкой» кишечника или кишки) может привести к переносу веществ из просвета кишечника непосредственно в кровоток и, таким образом, в почки, легкие и/или печень. Эти вещества могут включать пищевые молекулы, такие как жиры, которые способствуют гепатиту и/или заболеваниям печени, включая атрофию кишечника, связанную с парентеральным питанием, PNALD (заболевание печени, связанное с парентеральным питанием), NAFLD (неалкогольная жировая болезнь печени) и NASH (неалкогольный стеатогепатит). Вещества, попадающие в кровоток, могут также включать патогены, такие как бактерии, и токсины, такие как бактериальный липополисахарид (LPS), которые могут способствовать системному воспалению (например, сосудистому воспалению). Такое воспаление часто называют «неспецифическим воспалением» и является фактором, способствующим патогенезу метаболической эндотоксемии (состояния, наблюдаемого как при диабете, так и при ожирении, которое обсуждается ниже), первичном билиарном циррозе и гепатите. Попадание патогенных микроорганизмов в кровоток также может привести к таким состояниям, как некротический энтероколит.
Неспецифическое воспаление не имеет обычных симптомов острого воспаления, таких как боль, лихорадка и покраснение, но может быть выявлено по наличию маркеров воспаления в крови, таких как С-реактивный белок и провоспалительные цитокины, включая TNF-альфа (фактор некроза опухолей-альфа).
Двойные агонисты могут также найти применение при заболеваниях, которые в первую очередь влияют на другие ткани, но имеют желудочно-кишечные побочные эффекты. Например, воспалительные заболевания, такие как панкреатит, приводят к повышенным уровням циркулирующих медиаторов воспаления, которые могут, в свою очередь, вызывать повреждение кишечника или дисфункцию кишечника, такую как нарушение барьерной функции. В некоторых случаях это может привести к более серьезным системным воспалительным состояниям, таким как сепсис, или к хирургическим процедурам или механическим травмам (заворот), когда кровоснабжение кишечника прерывается, что в конечном итоге приводит к ишемически-реперфузионным повреждениям.
Аналогичным образом, заболевание «трансплантат против хозяина (GVHD)» может привести к значительному повреждению тканей желудочно-кишечного тракта, что приведет к нарушению барьерной функции и другим побочным эффектам, таким как диарея. Таким образом, описанные двойные агонисты могут быть полезны для профилактики или лечения кишечной дисфункции или повреждения, вызванного GVHD или связанного с ним, а также для профилактики или лечения побочных эффектов, таких как диарея, вызванная или связанная с GVHD.
Соединения двойных агонистов, описанные в настоящем документе, также подходят, среди прочего, для уменьшения или ингибирования увеличения веса, уменьшения скорости опорожнения желудка или кишечного транзита, уменьшения потребления пищи, снижения аппетита или содействия потере веса. Влияние на массу тела может быть опосредовано частично или полностью за счет снижения потребления пищи, аппетита или кишечного транзита.
Таким образом, двойные агонисты по настоящему изобретению могут быть использованы для профилактики или лечения ожирения, патологического ожирения, связанного с ожирением заболевания желчного пузыря и вызванного ожирением апноэ во сне.
Независимо от их влияния на массу тела, двойные агонисты по изобретению могут оказывать благоприятное влияние на толерантность к глюкозе и/или контроль глюкозы. Их также можно использовать для модуляции (например, улучшения) уровней циркулирующего холестерина, способных снижать уровни циркулирующего триглицерида или LDL и увеличивать соотношение HDL/LDL.
Таким образом, они могут использоваться для профилактики или лечения недостаточного контроля глюкозы, толерантности к глюкозе или дислипидемии (например, повышенных уровней LDL или снижения соотношения HDL/LDL) и связанных с ними заболеваний, включая диабет (например, диабет 2 типа, гестационный диабет), предиабет, метаболический синдром и гипертонию.
Многие из этих заболеваний также связаны с ожирением или избыточным весом. Поэтому воздействие двойных агонистов на эти состояния может следовать из их влияния на массу тела, полностью или частично, или может быть независимым от них.
Воздействие на массу тела может быть терапевтическим или косметическим.
Двойная агонистическая активность соединений, описанных в настоящем документе, может быть особенно полезной при многих описанных заболеваниях, поскольку эти две активности могут дополнять друг друга.
Например, мальабсорбция представляет собой состояние, возникающее в результате нарушения поглощения воды и/или пищевых питательных веществ, таких как аминокислоты, сахара, жиры, витамины или минералы, через желудочно-кишечный тракт (ЖКТ), что приводит к недоеданию и/или обезвоживанию. Нарушение всасывания может быть результатом физического (например, травматического) или химического повреждения кишечного тракта. Двойные агонисты, описанные в данной спецификации, могут быть способны улучшить барьерную функцию кишечника, уменьшить опорожнение желудка и увеличить всасывание в кишечнике при одновременной нормализации времени прохождения через кишечник. Это не только поможет пациентам повысить усвоение питательных веществ и жидкости, но и облегчит социальные проблемы пациентов, связанные с стимулированной приемом пищи кишечной перистальтикой.
Кроме того, кишечная функция и метаболические нарушения могут быть тесно взаимосвязаны, причем каждое из них способствует развитию или симптомам другого.
Как указано выше, ожирение связано с неспецифическим воспалением (иногда указываемым как «воспаление, связанное с ожирением»). Также общепризнанно, что ожирение (наряду с другими синдромами) вызывает повышенную проницаемость сосудов, которая позволяет патогенам и токсинам, таким как LPS, проникать в клеточную стенку кишечного тракта и тем самым инициировать воспаление. Изменения, возникающие в результате воспалительного ответа, по существу являются одинаковыми, независимо от причины и независимо от того, где возникает повреждение. Воспалительный ответ может быть острым (кратковременным) или хроническим (продолжительным).
Например, было продемонстрировано, что мыши с ожирением (мыши ob/ob и db/db) имеют нарушенную барьерную функцию слизистой оболочки и демонстрируют повышенное неспецифическое воспаление (Brun et al., 2007, Am. J. Physiol. Gastrointest. Liver Physiol., 292: G518-G525, Epub 5 Oct 2006). Эти наблюдения были далее подтверждены на мышах C57BL6/J, которые содержались на диете с высоким содержанием жира (Cani et al., 2008, Diabetes, vol. 57, 1470-1481), и на мышах без диабета с ожирением (Hadjiyanni et al., 2009, Endocrinology, 150 (2): 592-599).
Cani и коллеги (Gut; 2009, 58: 1091-1103) опубликовали, что у мышей ob/ob модуляция кишечной микробиоты приводила к снижению дисфункции кишечного барьера и уменьшению системного воспаления по GLP-2-зависимому пути. Кроме того, повышенная проницаемость кишечника, наблюдаемая у пациентов с ожирением и диабетом, вероятно, будет играть более важную роль в прогрессировании заболевания, чем предполагалось ранее. Повышенная проницаемость кишечника приводит к увеличению транспорта бактериального липополисахарида (LPS) через кишечный барьер. Это увеличение LPS активирует иммунные клетки, такие как циркулирующие макрофаги и макрофаги, находящиеся в органах тела, вызывая неспецифическое хроническое воспаление, которое может участвовать в патогенезе многих заболеваний. Это явление называется метаболической эндотоксемией (МЭ).
Воспалительный процесс также может играть роль в возникновении метаболической дисфункции у людей с ожирением, такой как резистентность к инсулину и другие метаболические нарушения.
Таким образом, соединения двойных агонистов по изобретению могут быть особенно полезны для профилактики или лечения неспецифического воспаления, особенно, у людей с ожирением или с избыточным весом, оказывая полезные эффекты через GLP-1-агонистический компонент их активности и/или GLP-2-компонент их активности.
Терапевтическую эффективность лечения двойным агонистом по настоящему изобретению можно контролировать с помощью кишечной биопсии для изучения морфологии ворсинок, биохимической оценки всасывания питательных веществ, неинвазивного определения кишечной проницаемости, по увеличению массы тела пациента или по ослаблению симптомов, связанные с этими заболеваниями.
В дополнительном аспекте предложен терапевтический набор, содержащий двойной агонист по изобретению или его фармацевтически приемлемую соль или сольват.
Следующие ниже примеры приведены для иллюстрации предпочтительных аспектов изобретения и никоим образом не предназначены для ограничения объема изобретения.
Примеры
Следующие примеры приведены для иллюстрации предпочтительных аспектов изобретения и не предназначены для ограничения объема изобретения.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
Общий пептидный синтез
Список сокращений и поставщиков приведен в таблице ниже.
Приборы и стратегия синтеза
Пептиды синтезировали партиями на пептидном синтезаторе, таком как пептидный синтезатор CEM Liberty или синтезатор Symphony X, в соответствии с процедурами твердофазного пептидного синтеза, используя 9-флуоренилметилоксикарбонил (Fmoc) в качестве N-α-аминозащитной группы и подходящие стандартные защитные группы для функциональных групп боковых цепей.
В качестве смол на основе полимерного носителя использовали, например, TentaGel™. Синтезатор загружали смолой, которую перед использованием оставляли набухать в ДМФА.
Реакция связывания
Пептидный синтезатор CEM Liberty
Раствор защищенной Fmoc аминокислоты (4 экв.) добавляли к смоле вместе с раствором реагента для связывания (4 экв.) и раствором основания (8 экв.). Смесь либо нагревали с помощью микроволновой печи до 70-75°С, и реакцию связывания проводили в течение 5 минут, либо реакцию связывания проводили без нагревания в течение 60 минут. Во время реакции связывания через смесь барботировали азот.
Синтезатор Symphony X
Растворы для реакции связывания переносили в реакционные сосуды в следующем порядке: аминокислота (4 экв.), HATU (4 экв.) И DIPEA (8 экв.). Время связывания составляло 10 минут при комнатной температуре (RT), если не указано иное. Смолу промывали ДМФА (5×0,5 мин). В случае повторных реакций связывания время связывания во всех случаях составляло 45 мин при комнатной температуре.
Снятие защиты
Пептидный синтезатор CEM Liberty
Fmoc-защитную группу снимали с использованием пиперидина в ДМФА или других подходящих растворителях. Раствор для снятия защиты добавляли в реакционный сосуд и смесь нагревали в течение 30 с, достигая около 40°С. Жидкость удаляли из реакционной смеси, добавляли свежий раствор для снятия защиты и затем нагревали до 70-75°С в течение 3 минут. После удаления жидкости из реакционного сосуда смолу промывали ДМФА или другими подходящими растворителями.
Синтезатор Symphony X
Удаление Fmoc-защиты проводили в течение 2,5 минут, используя 40%-й пиперидин в ДМФА, и повторяли, используя те же условия. Смолу промывали ДМФА (5×0,5 мин).
Ацилирование боковой цепи
Подходящая трифункциональная аминокислота с ортогональной защитной группой боковой цепи в соответствии с методологией Fmoc вводится в положении ацилирования. Затем N-конец растущей пептидной цепи защищают Boc-группой с использованием Boc2O или, в альтернативном варианте, с использованием N-β-Boc-защищенной аминокислоты в последней реакции связывания. Пока пептид все еще прикреплен к смоле, ортогональная защитная группа боковой цепи селективно отщепляется с использованием подходящего реагента для снятия защиты. Затем липофильный фрагмент присоединяют непосредственно к свободной функциональной группе боковой цепи или, в альтернативном варианте, через промежуточный линкер в соответствии с подходящими протоколами связывания.
Снятие пептида со смолы
Высушенную пептидную смолу обрабатывали TFA и подходящими поглотителями в течение приблизительно 2 часов. Объем фильтрата уменьшали, и неочищенный пептид осаждали после добавления диэтилового эфира. Осадок неочищенного пептида несколько раз промывали диэтиловым эфиром и после этого высушивали.
ВЭЖХ-очистка неочищенного пептида
Неочищенный пептид очищали препаративной обращенно-фазовой ВЭЖХ с использованием обычного устройства для ВЭЖХ, такого как Gilson GX-281 с комбинацией насосов 331/332 для бинарного градиента, оборудованного колонкой, такой как 5×25 см колонка Gemini NX 5u C18 110A, и коллектором фракций, с использованием скорости потока 20-40 мл/мин с подходящим градиентом буфера A (0,1% муравьиная кислота, водн.) или A (0,1% ТФУ, водн.) и буфера B (0,1% муравьиной кислоты, 90% MeCN, водн.) или B (0,1% ТФУ, 90% MeCN, водн.). Фракции анализировали с помощью аналитической ВЭЖХ и МС, и отобранные фракции объединяли и лиофилизировали. Конечный продукт характеризовали с помощью ВЭЖХ и МС.
Аналитическая ВЭЖХ
Конечную чистоту определяли аналитической ВЭЖХ (на хроматографе серии Agilent 1100/1200), снабженном автоматическим пробоотборником, дегазатором, проточной ячейкой на 20 мкл и программным обеспечением Chromeleon. ВЭЖХ проводили при скорости потока 1,2 мл/мин при 40°С, используя аналитическую колонку, такую как колонка Kinetex 2,6 мкм XB-C18 100A 100×4,6 мм. Соединение было обнаружено и количественно определено при 215 нм. Использовали буферы: A (0,1% ТФУ, водн.) и буфер B (0,1% ТФУ, 90% MeCN, водн.).
Масс-спектроскопия
Финальный МС-анализ осуществляли с помощью обычной масс-спектроскопии, например, с использованием Waters Xevo G2 Tof, оборудованного электрораспылительным детектором с калибровкой фиксированной массы и программным обеспечением MassLynx. Масс-спектрометрический анализ проводили в положительном режиме с использованием прямого впрыска и напряжения на конусе 15 В (1 TOF), 30 В (2 TOF) или 45 В (3 TOF), как указано на хроматограмме. Точность составляла 5 частей на миллион (ppm) с типичным разрешением 15000-20000.
Анализы эффективности действия на рецепторы GLP-1 и GLP-2
Пептиды по настоящему изобретению действуют как агонисты обоих GLP-1 и GLP-2 и, таким образом, активируют рецептор GLP-1 и рецептор GLP-2, соответственно. Одним подходящим анализом in vitro измерения активности рецепторов GLP-1 и GLP-2 является количественное определение цАМФ, то есть 3'-5'-циклического аденозинмонофосфата, который является вторичным мессенджером, необходимым во многих биологических процессах, и одним из наиболее распространенных механизмов регуляции клеточных функций. Примером является анализ цАМФ AlphaScreen® от Perkin Elmer, который был использован для количественной оценки цАМФ-ответа на активацию рецепторов GLP-1 и GLP-2 в клетках HEK293, стабильно экспрессирующих GLP-1 R или GLP-2 R. Тестируемые соединения, вызывающие увеличение внутриклеточного уровня цАМФ, могут быть проанализированы этим методом, а ответ нормализуется по отношению к положительному и отрицательному контролю (носителю) для расчета ЕС50 и максимального ответа из кривой концентрационной зависимости с использованием 4-параметрической логистической нелинейной модели (4PL) для подгонки кривой.
Пример 1: Синтез соединений
Синтезированные соединения
Следующие соединения из таблицы 1 были синтезированы с использованием вышеуказанных методик.
Таблица 1: синтезированные соединения
Также были синтезированы следующие эталонные соединения A и B:
Только для иллюстративных целей ниже подробно описан синтез двух выбранных соединений.
Синтез соединения 17
Н-Н[Aib]EGTFSSELATILD[К([17-карбокси-гептадеканоил]-isoGlu)]QAARDFIAWLIQHKITD-ОН
Твердофазный пептидный синтез проводили на синтезаторе Symphony X с использованием стандартной Fmoc-химии. TentaGel S PHB Asp (tBu) Fmoc (1,15 г; 0,23 ммоль/г) перед использованием оставляли набухать в ДМФА (10 мл), и Fmoc-защитные группы снимали в соответствии с процедурой, описанной выше.
Реакция связывания
Подходящие защищенные Fmoc-аминокислоты в соответствии с последовательностью связывали, как описано выше, используя HATU в качестве реагента для связывания. Все реакции связывания проводили при RT. Чтобы облегчить синтез, использовали псевдопролин в положении 6 и 7 Fmoc-Phe-Ser(psi Me, Mepro)-OH. Ацилирование в положении 16 осуществляли в соответствии с процедурой ацилирования боковой цепи, описанной выше. Псевдопролин присоединяли в соответствии со стандартной процедурой, описанной выше для Fmoc-аминокислот.
Снятие защиты
Снятие Fmoc-защиты проводили в соответствии с процедурой, описанной выше.
Отщепление пептида от твердой подложки
Смолу с пептидом промывали EtOH (3×10 мл) и Et2O (3×10 мл) и сушили до постоянного веса при комнатной температуре (RT). Пептид отщепляли от смолы обработкой ТФУ/TIS/H2O (95/2,5/2,5; 40 мл, 2 часа; RT). Объем фильтрата уменьшали, и неочищенный пептид осаждали после добавления диэтилового эфира. Осадок неочищенного пептида несколько раз промывали диэтиловым эфиром и, наконец, сушили до постоянного веса при комнатной температуре, получая 1100 мг неочищенного пептидного продукта (с чистотой ~ 40%).
ВЭЖХ-очистка неочищенного пептида
Неочищенный пептид очищали препаративной обращенно-фазовой ВЭЖХ с использованием Gilson GX-281 с комбинацией насосов 331/332 для бинарного градиента, снабженного колонкой 5×25 см Gemini NX 5u C18 110A и коллектором фракций, и очистку проводили со скоростью 35 мл/мин с градиентом буфера A (0,1% ТФУ, водн.) и буфера B (0,1% ТФУ, 90% MeCN, водн.) с градиентом от 25% B до 60% B за 47 мин. Фракции анализировали с помощью аналитической ВЭЖХ и МС, и соответствующие фракции объединяли и лиофилизировали, получая 105,7 мг соединения с чистотой 91% согласно ВЭЖХ и МС-анализу, как описано выше. Расчетная моноизотопная молекулярная масса составляла 4164,21, найденная - 4164,23.
Синтез соединения 4
Н-Н[Aib]EGTFSSELATILD[К([17-карбокси-гептадеканоил]-isoGlu)]KAARDFIAWLIEHKITD-ОН
Твердофазный пептидный синтез проводили на синтезаторе Symphony X с использованием стандартной Fmoc-химии. TentaGel S PHB Asp (tBu) Fmoc (1,20 г; 0,23 ммоль/г) перед использованием оставляли набухать в ДМФА (10 мл), и Fmoc-защитные группы снимали в соответствии с процедурой, описанной выше.
Реакция связывания
Подходящие защищенные Fmoc-аминокислоты в соответствии с последовательностью связывали, как описано выше, используя HATU в качестве реагента для связывания. Все реакции связывания проводили при RT. Чтобы облегчить синтез, использовали псевдопролин в положении 6 и 7 Fmoc-Phe-Ser(psi Me, Mepro)-OH. Ацилирование в положении 16 осуществляли в соответствии с процедурой ацилирования боковой цепи, описанной выше. Псевдопролин присоединяли в соответствии со стандартной процедурой, описанной выше для Fmoc-аминокислот.
Снятие защиты
Снятие Fmoc-защиты проводили в соответствии с процедурой, описанной выше.
Отщепление пептида от твердой подложки
Смолу с пептидом промывали EtOH (3×10 мл) и Et2O (3×10 мл) и сушили до постоянного веса при комнатной температуре (RT). Пептид отщепляли от смолы обработкой ТФУ/TIS/H2O (95/2,5/2,5; 40 мл, 2 часа; RT). Объем фильтрата уменьшали, и неочищенный пептид осаждали после добавления диэтилового эфира. Осадок неочищенного пептида несколько раз промывали диэтиловым эфиром и, наконец, сушили до постоянного веса при комнатной температуре, получая 900 мг неочищенного пептидного продукта (с чистотой ~ 35%).
ВЭЖХ-очистка неочищенного пептида
Неочищенный пептид очищали препаративной обращенно-фазовой ВЭЖХ с использованием Gilson GX-281 с комбинацией насосов 331/332 для бинарного градиента, снабженного колонкой 5×25 см Gemini NX 5u C18 110A и коллектором фракций, и очистку проводили со скоростью 35 мл/мин с градиентом буфера A (0,1% ТФУ, водн.) и буфера B (0,1% ТФУ, 90% MeCN, водн.) с градиентом от 30% B до 65% B за 47 мин. Фракции анализировали с помощью аналитической ВЭЖХ и МС, и соответствующие фракции объединяли и лиофилизировали, получая 100,7 мг соединения с чистотой 91% согласно ВЭЖХ и МС-анализу, как описано выше. Расчетная моноизотопная молекулярная масса составляла 4165,23, найденная - 4165,26.
Пример 2: измерения EC50 в отношении GLP-1R и GLP-2R
Создание клеточной линии, экспрессирующей рецепторы GLP-1 человека
кДНК, кодирующая рецептор глюкагоноподобного пептида 1 (GLP-1R) человека (первичный номер доступа P43220), была клонирована из кДНК BC112126 (MGC: 138331/IMAGE: 8327594). ДНК, кодирующая GLP-1-R, была амплифицирована с помощью ПЦР с использованием праймеров, кодирующих терминальные сайты рестрикции для субклонирования. 5'-концевые праймеры дополнительно кодировали консенсусную последовательность, близкую к последовательности Козака, чтобы обеспечить эффективную трансляцию. Правильность ДНК, кодирующей GLP-1-R, была подтверждена ДНК-секвенированием. Продукты ПЦР, кодирующие GLP-1-R, субклонировали в вектор для экспрессии в клетках млекопитающих, содержащий маркер устойчивости к неомицину (G418). Кодирующими GLP-1-R векторами для экспрессии в клетках млекопитающих трансфицировали клетки HEK293 стандартным методом трансфекции с использованием фосфата кальция. Через 48 часов после трансфекции клетки высевали для клонирования методом лимитированных разведений и отбирали на 1 мг/мл G418 в культуральной среде. После 3 недель отбора на G418 клоны отбирали и тестировали в функциональном анализе активности рецептора GLP-1, как описано ниже. Один клон был выбран для использования в профилировании соединений.
Создание клеточной линии, экспрессирующей рецепторы GLP-2 человека
hGLP2-R был приобретен у MRC-geneservice, Babraham, Cambridge в качестве Image-клона: 5363415 (11924-I17). Для субклонирования в вектор для экспрессии в клетках млекопитающих праймеры для субклонирования были получены от DNA-Technology, Risskov, Denmark. 5'- и 3'-праймеры, используемые для реакции ПЦР, включают концевые сайты рестрикции для клонирования, и последовательность 5'-праймера меняют, чтобы ввести консенсусную последовательность Козака без изменения последовательности продукта, кодируемой открытой рамкой считывания (ORF). Стандартную реакцию ПЦР проводили с использованием Image clone 5363415 (11924-I17) в качестве матрицы с указанными выше праймерами и Polymerase Herculase II Fusion в общем объеме 50 мкл. Полученный продукт ПЦР очищали с использованием набора GFX™ PCR DNA and Gel Band Purification Kit, расщепляли рестрикционными ферментами и клонировали в вектор дл экспрессии в клетках млекопитающих с использованием набора для быстрого лигирования ДНК. Лигазную реакцию трансформировали в ультракомпетентные клетки XL10 Gold, и отбирали колонии для получения ДНК с использованием набора Endofree Plasmid maxi. Последующий анализ последовательности проводился компанией MWG Eurofins, Германия. Было подтверждено, что клон является рецептором hGLP-2 (1-33), вариант сплайсинга rs17681684.
Клетки HEK293 трансфицировали с использованием реагента Lipofectamine PLUS. За день до трансфекции клетки НЕК293 высевали в два флакона Т75 с плотностью 2×106 клеток/флакон Т75 в среде для культивирования клеток без антибиотиков. В день трансфекции клетки промывали 1×DPBS и среду заменяли на Optimem до объема 5 мл/флакон T75, после чего осторожно и по каплям комплексы липофектамина с плазмидой добавляли к клеткам в флаконах T75, и среду заменяли на ростовую среду через 3 часа, и повторно на ростовую среду с добавлением 500 мкг/мл G418 через 24 часа. После 4 недель отбора на G418 клоны отбирали и тестировали в функциональном анализе активности рецептора GLP-2, как описано ниже. Один клон был выбран для использования в профилировании соединений.
Анализы активности рецепторов GLP-1R и GLP-2
Анализ сАМР AlphaScreen® от Perkin Elmer использовали для количественной оценки цАМФ-ответа на активацию рецепторов GLP1 и GLP2, соответственно. Эксендин-4 использовали в качестве контрольного соединения для активации рецептора GLP1, а тедуглутид в качестве контрольного соединения для активации рецептора GLP2. Данные по тестируемым соединениям, вызывающим повышение внутриклеточного уровня цАМФ, были нормализованы относительно положительного и отрицательного контроля (носитель) для расчета ЕС50 и максимального ответа из кривой концентрационной зависимости. Результаты приведены в таблице 2.
Таблица 2: измерения EC50
н/а=нет детектируемой активности
Пример 3: оценка растворимости
Приготавливали исходный раствор тестируемого пептида (2 мг/мл; определяемый по взвешенному количеству пептида) в деминерализованной воде, доведенной до рН 2,5 с помощью HCl, и аликвоты разбавляли 1:1 в 100 мМ ацетатном буфере (рН 4,0 и рН 5,0), 100 мМ гистидиновом буфере (рН 6,0 и рН 7,0) и 100 мМ фосфатном буфере (рН 6,0, рН 7,0 и рН 7,5), соответственно, и вносили в стандартный нестерильный 96-луночный УФ-микропланшет с плоским дном. Поглощение образцов (одиночные образцы, n=1) при 280 и 325 нм измеряли в планшетном спектрофотометре, который предварительно был прогрет до температуры окружающей среды (обычно 25°C). Критерий поглощения мутного образца для оценки растворимости пептида ≥ 1 мг/мл представлял собой поглощение при 325 нм ≤ 0,025 AU (что в 5-6 раз превышает стандартное отклонение 8 образцов буфера в планшете). Данные по растворимости для пептидов по изобретению приведены в таблице 3 ниже.
Таблица 3: данные по растворимости.
pH 4
pH 5
pH 6
pH 7
pH 6
pH 7
pH 7.5
* SS указывает на растворимость ≥1 мг/мл
** II указывает на растворимость <1 мг/мл
Пример 4: Химическая стабильность
Образцы каждого тестируемого пептида растворяли в воде MilliQ™, и рН раствора доводили до рН 6, 7, 7,5 или 9, используя либо HCl, либо NaOH. Конечная концентрация пептида составляла 0,2 мг/мл. Образцы помещали в стеклянные флаконы и инкубировали при 40°С. Образцы анализировали с помощью ОФ-ВЭЖХ на колонке С18 с градиентным элюированием с использованием системы элюентов ацетонитрил/ТФУ/вода. Площадь в процентах (площадь в %) основного пика после времени инкубации T=t (относительно времени T=0) определяли с помощью УФ-спектроскопии при 220 нм.
Чистота была сначала определена следующим образом:
Чистота (площадь в %)=(площадь основного пика/общая площадь всех пиков) × 100.
Затем чистоту нормализовали между временными точками, устанавливая чистоту в момент времени от 0 (Т=0) до 100 для каждого значения рН для данного пептида, следующим образом:
Нормализованная площадь в % в момент времени t (T=t)=[площадь в % (T=t)/площадь в % (T=0)] × 100.
Результаты оценки химической стабильности после 14-дневной инкубации (в виде нормализированных значений чистоты) суммированы в таблице 4.
Таблица 4: данные по химической стабильности.
Расшифровка: A - >90% нормализированной стабильности; B - >80% стабильности; С - <80% нормализированной стабильности.
Пример 5: влияние на уровень глюкозы натощак и вес кишечника у здоровых мышей
Использовали самцов мышей C57B L/6J при кормлении стандартным кормом. Мышей содержали в стандартных условиях содержания, в помещении с контролируемой освещенностью, температурой и влажностью (12:12-часовой цикл свет-темнота, с освещением, включаемым с 06:00 до 18:00; при 20-22°C и относительной влажности 50-80%). Каждая группа для введения состояла из 6 животных. Мышам вводили один раз в день по 100 нмоль/кг тестируемых соединений или носителя в течение 4 дней посредством подкожного введения.
В день 0 мышей не кормили и измеряли уровень глюкозы в крови после однократного подкожного введения пептидов. Животных умерщвляли через 24 часа после последней дозы на 3-й день и измеряли влажную массу тонкого кишечника.
Все тестируемые соединения (100 нмоль/кг) снижали уровень глюкозы в крови натощак по сравнению с группой носителя (таблица 5).
Все тестируемые соединения (100 нмоль/кг) увеличивали влажную массу тонкого кишечника по сравнению с мышами, получавшими носитель (таблица 5).
Таблица 5: влияние на уровень глюкозы натощак в крови и вес тонкого кишечника
--->
СПИСКИ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ
<110> Zealand Pharma A/S
<120> АЦИЛИРОВАННЫЕ ДВОЙНЫЕ АГОНИСТЫ GLP-1/GLP-2
<130> GRF/FP7327588
<140> PCT/EP2017/082290
<141> 2017-12-11
<150> DK PA201600757
<151> 2016-12-09
<160> 189
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 33
<212> Белок
<213> Глюкагон-подобный пептид (GLP-2) человека (Homo sapiens)
<400> 1
His Ala Asp Gly Ser Phe Ser Asp Glu Met Asn Thr Ile Leu Asp Asn
1 5 10 15
Leu Ala Ala Arg Asp Phe Ile Asn Trp Leu Ile Gln Thr Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 2
<211> 31
<212> Белок
<213> Глюкагон-подобный пептид (GLP-1) человека (Homo sapiens)
<400> 2
His Ala Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Gly
1 5 10 15
Gln Ala Ala Lys Glu Phe Ile Ala Trp Leu Val Lys Gly Arg Gly
20 25 30
<210> 3
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-1
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (2)..(2)
<223> Xaa представляет собой Aib или G
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (5)..(5)
<223> Xaa представляет собой T или S
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (7)..(7)
<223> Xaa представляет собой T или S
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (8)..(8)
<223> Xaa представляет собой S, E или D
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (10)..(10)
<223> Xaa представляет собой L, M, V или остаток K, k (D-lys), R, Orn,
Dap или Dab,
где боковая цепь конъюгирована с заместителем
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (11)..(11)
<223> Xaa представляет собой A, N или S
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (15)..(15)
<223> Xaa представляет собой D или E
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa представляет собой G, E, A или остаток K, k (D-lys), R, Orn,
Dap или Dab,
где боковая цепь конъюгирована с заместителем
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (17)..(17)
<223> Xaa представляет собой Q, E, K, L или остаток K, k (D-lys), R,
Orn, Dap или Dab,
где боковая цепь конъюгирована с заместителем
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (19)..(19)
<223> Xaa представляет собой A, V или S
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (20)..(20)
<223> Xaa представляет собой R, K или остаток K, k (D-lys), R, Orn,
Dap или Dab,
где боковая цепь конъюгирована с заместителем
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (21)..(21)
<223> Xaa представляет собой D, L или E
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (24)..(24)
<223> Xaa представляет собой A, N или S
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (27)..(27)
<223> Xaa представляет собой I, Q, K, H или Y
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (28)..(28)
<223> Xaa представляет собой Q, E, A, H, Y, L, K, R или S
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (29)..(29)
<223> Xaa представляет собой H, Y, K или Q
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (33)..(33)
<223> Xaa представляет собой D или E
<400> 3
His Xaa Glu Gly Xaa Phe Xaa Xaa Glu Xaa Xaa Thr Ile Leu Xaa Xaa
1 5 10 15
Xaa Ala Xaa Xaa Xaa Phe Ile Xaa Trp Leu Xaa Xaa Xaa Lys Ile Thr
20 25 30
Xaa
<210> 4
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (2)..(2)
<223> Xaa представляет собой Aib или G
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (5)..(5)
<223> Xaa представляет собой T или S
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (7)..(7)
<223> Xaa представляет собой T или S
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa представляет собой G или остаток K, k (D-lys), R, Orn,
Dap или Dab,
где боковая цепь конъюгирована с заместителем
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (17)..(17)
<223> Xaa представляет собой Q, E, K, L или остаток K, k (D-lys), R,
Orn, Dap или
Dab, где боковая цепь конъюгирована с заместителем
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (21)..(21)
<223> Xaa представляет собой D или L
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (28)..(28)
<223> Xaa представляет собой Q, E, A, H, Y, L, K, R или S
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (29)..(29)
<223> Xaa представляет собой H, Y или Q
<400> 4
His Xaa Glu Gly Xaa Phe Xaa Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Xaa Ala Ala Arg Xaa Phe Ile Ala Trp Leu Ile Xaa Xaa Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 5
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (5)..(5)
<223> Xaa представляет собой T или S, причем по меньшей мере один из
Хаа в положении 5 или 7 представляет собой Т
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (7)..(7)
<223> Xaa представляет собой T или S, причем по меньшей мере один
из Хаа в положении 5 или 7 представляет собой Т
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (10)..(10)
<223> Xaa представляет собой L или остаток K, k (D-lys), R, Orn,
Dap или Dab,
где боковая цепь конъюгирована с заместителем
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa представляет собой G, E, A или остаток K, k (D-lys), R,
Orn, Dap или Dab,
где боковая цепь конъюгирована с заместителем
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (17)..(17)
<223> Xaa представляет собой Q, E, K, L или остаток K, k (D-lys),
R, Orn, Dap или
Dab, где боковая цепь конъюгирована с заместителем
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (20)..(20)
<223> Xaa представляет собой R или остаток K, k (D-lys), R, Orn,
Dap или Dab,
где боковая цепь конъюгирована с заместителем
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (21)..(21)
<223> Xaa представляет собой D или L
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (28)..(28)
<223> Xaa представляет собой E, A или Q
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (29)..(29)
<223> Xaa представляет собой H, Y или Q
<400> 5
His Xaa Glu Gly Xaa Phe Xaa Ser Glu Xaa Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Xaa Ala Ala Xaa Xaa Phe Ile Ala Trp Leu Ile Xaa Xaa Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 6
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (5)..(5)
<223> Xaa представляет собой T или S, причем по меньшей мере один
из Хаа в положении 5 или 7 представляет собой Т
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (7)..(7)
<223> Xaa представляет собой T или S, причем по меньшей мере один
из Хаа в положении 5 или 7 представляет собой Т
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa представляет собой G или остаток K, k (D-lys), R, Orn,
Dap или Dab,
где боковая цепь конъюгирована с заместителем
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (17)..(17)
<223> Xaa представляет собой E, K, L или остаток K, k (D-lys), R,
Orn, Dap или Dab,
где боковая цепь конъюгирована с заместителем
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (21)..(21)
<223> Xaa представляет собой D или L
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (28)..(28)
<223> Xaa представляет собой E или A
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (29)..(29)
<223> Xaa представляет собой H, Y или Q
<400> 6
His Xaa Glu Gly Xaa Phe Xaa Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Xaa Ala Ala Arg Xaa Phe Ile Ala Trp Leu Ile Xaa Xaa Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 7
<211> 32
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (5)..(5)
<223> Xaa представляет собой T или S, где по меньшей мере один из Хаа
в позиции 5 или 7 представляет собой T
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (7)..(7)
<223> Xaa представляет собой T или S, где по меньшей мере один из Хаа
в позиции 5 или 7 представляет собой T
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (27)..(27)
<223> Xaa представляет собой остаток K, k (D-lys), R, Orn, Dap или Dab,
где боковая цепь конъюгирована с заместителем
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (28)..(28)
<223> Xaa представляет собой Q, E, A, H, Y, L, K, R или S, например,
Q, E, A, H, Y или L
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (29)..(29)
<223> Xaa представляет собой H, Y или Q
<400> 7
His Xaa Glu Gly Xaa Phe Xaa Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Gln
1 5 10 15
Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Xaa Xaa Lys Ile Thr Asp
20 25 30
<210> 8
<211> 4
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (1)..(1)
<223> Xaa представляет собой isoGlu
<400> 8
Xaa Lys Glu Lys
1
<210> 9
<211> 5
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (2)..(2)
<223> Xaa представляет собой [17-карбокси-гептадеканоил]-isoGlu
<400> 9
Lys Xaa Lys Glu Lys
1 5
<210> 10
<211> 5
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (2)..(2)
<223> Xaa представляет собой [19-карбокси-нонадеканоил]-isoGlu
<400> 10
Lys Xaa Lys Glu Lys
1 5
<210> 11
<211> 6
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<400> 11
Glu Lys Glu Lys Glu Lys
1 5
<210> 12
<211> 6
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (2)..(2)
<223> Xaa представляет собой D-lys
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (4)..(4)
<223> Xaa представляет собой D-lys
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (6)..(6)
<223> Xaa представляет собой D-lys
<400> 12
Glu Xaa Glu Xaa Glu Xaa
1 5
<210> 13
<211> 6
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<400> 13
Ala Lys Ala Ala Glu Lys
1 5
<210> 14
<211> 6
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<400> 14
Ala Lys Glu Lys Glu Lys
1 5
<210> 15
<211> 6
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<400> 15
Ala Thr Ile Leu Glu Lys
1 5
<210> 16
<211> 6
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (6)..(6)
<223> Xaa представляет собой остаток K, k (D-lys), R, Orn, Dap или Dab,
где боковая цепь конъюгирована с заместителем
<400> 16
Glu Lys Glu Lys Glu Xaa
1 5
<210> 17
<211> 6
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (2)..(2)
<223> Xaa представляет собой D-lys
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (4)..(4)
<223> Xaa представляет собой D-lys
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (6)..(6)
<223> Xaa представляет собой остаток K, k (D-lys), R, Orn, Dap или Dab,
где боковая цепь конъюгирована с заместителем
<400> 17
Glu Xaa Glu Xaa Glu Xaa
1 5
<210> 18
<211> 6
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (6)..(6)
<223> Xaa представляет собой остаток K, k (D-lys), R, Orn, Dap или Dab,
где боковая цепь конъюгирована с заместителем
<400> 18
Ala Lys Ala Ala Glu Xaa
1 5
<210> 19
<211> 6
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (6)..(6)
<223> Xaa представляет собой остаток K, k (D-lys), R, Orn, Dap или Dab,
где боковая цепь конъюгирована с заместителем
<400> 19
Ala Lys Glu Lys Glu Xaa
1 5
<210> 20
<211> 6
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (6)..(6)
<223> Xaa представляет собой остаток K, k (D-lys), R, Orn, Dap или Dab,
где боковая цепь конъюгирована с заместителем
<400> 20
Ala Thr Ile Leu Glu Xaa
1 5
<210> 21
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa представляет собой остаток K, k (D-lys), R, Orn, Dap или Dab,
где боковая цепь конъюгирована с заместителем
<400> 21
His Xaa Glu Gly Thr Phe Ser Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Glu Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Glu His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 22
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa представляет собой остаток K, k (D-lys), R, Orn, Dap или Dab,
где боковая цепь конъюгирована с заместителем
<400> 22
His Xaa Glu Gly Ser Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Glu Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Glu His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 23
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa представляет собой остаток K, k (D-lys), R, Orn, Dap или Dab,
где боковая цепь конъюгирована с заместителем
<400> 23
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Glu Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Glu His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 24
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa представляет собой остаток K, k (D-lys), R, Orn, Dap или Dab,
где боковая цепь конъюгирована с заместителем
<400> 24
His Xaa Glu Gly Thr Phe Ser Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Lys Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Glu His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 25
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa представляет собой остаток K, k (D-lys), R, Orn, Dap или Dab,
где боковая цепь конъюгирована с заместителем
<400> 25
His Xaa Glu Gly Ser Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Lys Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Glu His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 26
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa представляет собой остаток K, k (D-lys), R, Orn, Dap или Dab,
где боковая цепь конъюгирована с заместителем
<400> 26
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Lys Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Glu His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 27
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (17)..(17)
<223> Xaa представляет собой остаток K, k (D-lys), R, Orn, Dap или Dab,
где боковая цепь конъюгирована с заместителем
<400> 27
His Xaa Glu Gly Thr Phe Ser Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Gly
1 5 10 15
Xaa Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Glu His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 28
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (17)..(17)
<223> Xaa представляет собой остаток K, k (D-lys), R, Orn, Dap или Dab,
где боковая цепь конъюгирована с заместителем
<400> 28
His Xaa Glu Gly Ser Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Gly
1 5 10 15
Xaa Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Glu His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 29
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (17)..(17)
<223> Xaa представляет собой остаток K, k (D-lys), R, Orn, Dap или Dab,
где боковая цепь конъюгирована с заместителем
<400> 29
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Gly
1 5 10 15
Xaa Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Glu His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 30
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa представляет собой остаток K, k (D-lys), R, Orn, Dap или Dab,
где боковая цепь конъюгирована с заместителем
<400> 30
His Xaa Glu Gly Thr Phe Ser Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Leu Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Glu His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 31
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa представляет собой остаток K, k (D-lys), R, Orn, Dap или Dab,
где боковая цепь конъюгирована с заместителем
<400> 31
His Xaa Glu Gly Ser Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Leu Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Glu His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 32
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa представляет собой остаток K, k (D-lys), R, Orn, Dap или Dab,
где боковая цепь конъюгирована с заместителем
<400> 32
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Leu Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Glu His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 33
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa представляет собой остаток K, k (D-lys), R, Orn, Dap или Dab,
где боковая цепь конъюгирована с заместителем
<400> 33
His Xaa Glu Gly Thr Phe Ser Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Leu Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Ala His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 34
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa представляет собой остаток K, k (D-lys), R, Orn, Dap или Dab,
где боковая цепь конъюгирована с заместителем
<400> 34
His Xaa Glu Gly Ser Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Leu Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Ala His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 35
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa представляет собой остаток K, k (D-lys), R, Orn, Dap или Dab,
где боковая цепь конъюгирована с заместителем
<400> 35
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Leu Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Ala His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 36
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa представляет собой остаток K, k (D-lys), R, Orn, Dap или Dab,
где боковая цепь конъюгирована с заместителем
<400> 36
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Glu Ala Ala Arg Leu Phe Ile Ala Trp Leu Ile Glu His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 37
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa представляет собой остаток K, k (D-lys), R, Orn, Dap или Dab,
где боковая цепь конъюгирована с заместителем
<400> 37
His Xaa Glu Gly Thr Phe Ser Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Gln Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Gln His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 38
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa представляет собой остаток K, k (D-lys), R, Orn, Dap или Dab,
где боковая цепь конъюгирована с заместителем
<400> 38
His Xaa Glu Gly Ser Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Gln Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Gln His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 39
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa представляет собой остаток K, k (D-lys), R, Orn, Dap или Dab,
где боковая цепь конъюгирована с заместителем
<400> 39
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Gln Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Gln His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 40
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa представляет собой остаток K, k (D-lys), R, Orn, Dap или Dab,
где боковая цепь конъюгирована с заместителем
<400> 40
His Xaa Glu Gly Thr Phe Ser Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Gln Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Glu His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 41
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa представляет собой остаток K, k (D-lys), R, Orn, Dap или Dab,
где боковая цепь конъюгирована с заместителем
<400> 41
His Xaa Glu Gly Thr Phe Ser Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Gln Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Ala His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 42
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa представляет собой остаток K, k (D-lys), R, Orn, Dap или Dab,
где боковая цепь конъюгирована с заместителем
<400> 42
His Xaa Glu Gly Ser Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Gln Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Ala His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 43
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa представляет собой остаток K, k (D-lys), R, Orn, Dap или Dab,
где боковая цепь конъюгирована с заместителем
<400> 43
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Gln Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Ala His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 44
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa представляет собой остаток K, k (D-lys), R, Orn, Dap или Dab,
где боковая цепь конъюгирована с заместителем
<400> 44
His Xaa Glu Gly Ser Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Gln Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Glu His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 45
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa представляет собой остаток K, k (D-lys), R, Orn, Dap или Dab,
где боковая цепь конъюгирована с заместителем
<400> 45
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Gln Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Glu His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 46
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa представляет собой остаток K, k (D-lys), R, Orn, Dap или Dab,
где боковая цепь конъюгирована с заместителем
<400> 46
His Xaa Glu Gly Ser Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Gln Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile His His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 47
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa представляет собой остаток K, k (D-lys), R, Orn, Dap или Dab,
где боковая цепь конъюгирована с заместителем
<400> 47
His Xaa Glu Gly Ser Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Gln Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Tyr His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 48
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa представляет собой остаток K, k (D-lys), R, Orn, Dap или Dab,
где боковая цепь конъюгирована с заместителем
<400> 48
His Xaa Glu Gly Ser Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Gln Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Leu His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 49
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa представляет собой остаток K, k (D-lys), R, Orn, Dap или Dab,
где боковая цепь конъюгирована с заместителем
<400> 49
His Xaa Glu Gly Ser Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Gln Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Lys His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 50
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa представляет собой остаток K, k (D-lys), R, Orn, Dap или Dab,
где боковая цепь конъюгирована с заместителем
<400> 50
His Xaa Glu Gly Ser Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Gln Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Arg His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 51
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa представляет собой остаток K, k (D-lys), R, Orn, Dap или Dab,
где боковая цепь конъюгирована с заместителем
<400> 51
His Xaa Glu Gly Ser Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Gln Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Ser His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 52
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa представляет собой остаток K, k (D-lys), R, Orn, Dap или Dab,
где боковая цепь конъюгирована с заместителем
<400> 52
His Xaa Glu Gly Ser Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Gln Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Gln Gln His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 53
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa представляет собой остаток K, k (D-lys), R, Orn, Dap или Dab,
где боковая цепь конъюгирована с заместителем
<400> 53
His Xaa Glu Gly Ser Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Gln Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Tyr Gln His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 54
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa представляет собой остаток K, k (D-lys), R, Orn, Dap или Dab,
где боковая цепь конъюгирована с заместителем
<400> 54
His Xaa Glu Gly Ser Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Gln Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Lys Gln His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 55
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa представляет собой остаток K, k (D-lys), R, Orn, Dap или Dab,
где боковая цепь конъюгирована с заместителем
<400> 55
His Xaa Glu Gly Ser Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Gln Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Gln Gln Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 56
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa представляет собой остаток K, k (D-lys), R, Orn, Dap или Dab,
где боковая цепь конъюгирована с заместителем
<400> 56
His Xaa Glu Gly Ser Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Gln Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Gln Tyr Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 57
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa представляет собой остаток K, k (D-lys), R, Orn, Dap или Dab,
где боковая цепь конъюгирована с заместителем
<400> 57
His Xaa Glu Gly Thr Phe Ser Ser Glu Leu Ser Thr Ile Leu Glu Xaa
1 5 10 15
Gln Ala Ser Arg Glu Phe Ile Ala Trp Leu Ile Ala Tyr Lys Ile Thr
20 25 30
Glu
<210> 58
<211> 39
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (34)..(38)
<223> Xaa в позициях 34-38 представляет собой D-Lys
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (39)..(39)
<223> Xaa представляет собой остаток K, k (D-lys), R, Orn, Dap или Dab,
где боковая цепь конъюгирована с заместителем
<400> 58
His Xaa Glu Gly Thr Phe Ser Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Glu
1 5 10 15
Gln Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Ala His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
35
<210> 59
<211> 39
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (34)..(38)
<223> Xaa в позициях 34-38 представляет собой D-Lys
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (39)..(39)
<223> Xaa представляет собой остаток K, k (D-lys), R, Orn, Dap или Dab,
где боковая цепь конъюгирована с заместителем
<400> 59
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Glu
1 5 10 15
Gln Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Ala His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
35
<210> 60
<211> 39
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (34)..(38)
<223> Xaa в позициях 34-38 представляет собой D-Lys
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (39)..(39)
<223> Xaa представляет собой остаток K, k (D-lys), R, Orn, Dap или Dab,
где боковая цепь конъюгирована с заместителем
<400> 60
His Xaa Glu Gly Ser Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Glu
1 5 10 15
Gln Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Glu His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
35
<210> 61
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (10)..(10)
<223> Xaa представляет собой остаток K, k (D-lys), R, Orn, Dap или Dab,
где боковая цепь конъюгирована с заместителем
<400> 61
His Xaa Glu Gly Ser Phe Thr Ser Glu Xaa Ala Thr Ile Leu Asp Glu
1 5 10 15
Gln Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Glu His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 62
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (17)..(17)
<223> Xaa представляет собой остаток K, k (D-lys), R, Orn, Dap или Dab,
где боковая цепь конъюгирована с заместителем
<400> 62
His Xaa Glu Gly Ser Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Glu Gly
1 5 10 15
Xaa Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Glu His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 63
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (20)..(20)
<223> Xaa представляет собой остаток K, k (D-lys), R, Orn, Dap или Dab,
где боковая цепь конъюгирована с заместителем
<400> 63
His Xaa Glu Gly Ser Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Glu
1 5 10 15
Gln Ala Ala Xaa Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Glu His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 64
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (20)..(20)
<223> Xaa представляет собой остаток K, k (D-lys), R, Orn, Dap или Dab,
где боковая цепь конъюгирована с заместителем
<400> 64
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Glu
1 5 10 15
Gln Ala Ala Xaa Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Glu His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 65
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (10)..(10)
<223> Xaa представляет собой остаток K, k (D-lys), R, Orn, Dap или Dab,
где боковая цепь конъюгирована с заместителем
<400> 65
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Glu Xaa Ala Thr Ile Leu Asp Glu
1 5 10 15
Gln Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Glu His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 66
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (17)..(17)
<223> Xaa представляет собой остаток K, k (D-lys), R, Orn, Dap или Dab,
где боковая цепь конъюгирована с заместителем
<400> 66
His Xaa Glu Gly Ser Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Ala
1 5 10 15
Xaa Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Glu His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 67
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (20)..(20)
<223> Xaa представляет собой остаток K, k (D-lys), R, Orn, Dap или Dab,
где боковая цепь конъюгирована с заместителем
<400> 67
His Xaa Glu Gly Ser Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Ala
1 5 10 15
Lys Ala Ala Xaa Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Glu His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 68
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa указывает остаток L-лизина, в котором боковая цепь
конъюгирована с заместителем Z1- или Z1Z2
<400> 68
His Xaa Glu Gly Thr Phe Ser Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Glu Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Glu His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 69
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa указывает остаток L-лизина, в котором боковая цепь
конъюгирована с заместителем Z1- или Z1Z2
<400> 69
His Xaa Glu Gly Ser Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Glu Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Glu His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 70
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa указывает остаток L-лизина, в котором боковая цепь
конъюгирована с заместителем Z1- или Z1Z2
<400> 70
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Glu Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Glu His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 71
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa указывает остаток L-лизина, в котором боковая цепь
конъюгирована с заместителем Z1- или Z1Z2
<400> 71
His Xaa Glu Gly Thr Phe Ser Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Lys Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Glu His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 72
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa указывает остаток L-лизина, в котором боковая цепь
конъюгирована с заместителем Z1- или Z1Z2
<400> 72
His Xaa Glu Gly Ser Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Lys Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Glu His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 73
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa указывает остаток L-лизина, в котором боковая цепь
конъюгирована с заместителем Z1- или Z1Z2
<400> 73
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Lys Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Glu His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 74
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (17)..(17)
<223> Xaa указывает остаток L-лизина, в котором боковая цепь
конъюгирована с заместителем Z1- или Z1Z2
<400> 74
His Xaa Glu Gly Thr Phe Ser Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Gly
1 5 10 15
Xaa Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Glu His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 75
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (17)..(17)
<223> Xaa указывает остаток L-лизина, в котором боковая цепь
конъюгирована с заместителем Z1- или Z1Z2
<400> 75
His Xaa Glu Gly Ser Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Gly
1 5 10 15
Xaa Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Glu His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 76
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (17)..(17)
<223> Xaa указывает остаток L-лизина, в котором боковая цепь
конъюгирована с заместителем Z1- или Z1Z2
<400> 76
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Gly
1 5 10 15
Xaa Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Glu His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 77
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa может представлять собой любую природную аминокислоту
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (17)..(17)
<223> Xaa указывает остаток L-лизина, в котором боковая цепь
конъюгирована с заместителем Z1- или Z1Z2
<400> 77
His Xaa Glu Gly Thr Phe Ser Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Leu Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Glu His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 78
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa указывает остаток L-лизина, в котором боковая цепь
конъюгирована с заместителем Z1- или Z1Z2
<400> 78
His Xaa Glu Gly Ser Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Leu Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Glu His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 79
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa указывает остаток L-лизина, в котором боковая цепь
конъюгирована с заместителем Z1- или Z1Z2
<400> 79
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Leu Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Glu His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 80
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa указывает остаток L-лизина, в котором боковая цепь
конъюгирована с заместителем Z1- или Z1Z2
<400> 80
His Xaa Glu Gly Thr Phe Ser Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Leu Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Ala His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 81
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa указывает остаток L-лизина, в котором боковая цепь
конъюгирована с заместителем Z1- или Z1Z2
<400> 81
His Xaa Glu Gly Ser Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Leu Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Ala His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 82
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa указывает остаток L-лизина, в котором боковая цепь
конъюгирована с заместителем Z1- или Z1Z2
<400> 82
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Leu Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Ala His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 83
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa указывает остаток L-лизина, в котором боковая цепь
конъюгирована с заместителем Z1- или Z1Z2
<400> 83
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Glu Ala Ala Arg Leu Phe Ile Ala Trp Leu Ile Glu His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 84
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa указывает остаток L-лизина, в котором боковая цепь
конъюгирована с заместителем Z1- или Z1Z2
<400> 84
His Xaa Glu Gly Thr Phe Ser Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Gln Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Gln His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 85
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa указывает остаток L-лизина, в котором боковая цепь
конъюгирована с заместителем Z1- или Z1Z2
<400> 85
His Xaa Glu Gly Ser Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Gln Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Gln His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 86
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa указывает остаток L-лизина, в котором боковая цепь
конъюгирована с заместителем Z1- или Z1Z2
<400> 86
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Gln Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Gln His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 87
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa указывает остаток L-лизина, в котором боковая цепь
конъюгирована с заместителем Z1- или Z1Z2
<400> 87
His Xaa Glu Gly Thr Phe Ser Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Gln Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Glu His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 88
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa указывает остаток L-лизина, в котором боковая цепь
конъюгирована с заместителем Z1- или Z1Z2
<400> 88
His Xaa Glu Gly Thr Phe Ser Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Gln Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Ala His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 89
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa указывает остаток L-лизина, соответственно, в котором боковая
цепь конъюгирована с заместителем Z1- или Z1Z2
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa указывает остаток L-лизина, в котором боковая цепь
конъюгирована с заместителем Z1- или Z1Z2
<400> 89
His Xaa Glu Gly Ser Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Gln Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Ala His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 90
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa указывает остаток L-лизина, в котором боковая цепь
конъюгирована с заместителем Z1- или Z1Z2
<400> 90
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Gln Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Ala His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 91
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa указывает остаток L-лизина, в котором боковая цепь
конъюгирована с заместителем Z1- или Z1Z2
<400> 91
His Xaa Glu Gly Ser Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Gln Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Glu His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 92
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa указывает остаток L-лизина, в котором боковая цепь
конъюгирована с заместителем Z1- или Z1Z2
<400> 92
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Gln Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Glu His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 93
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa указывает остаток L-лизина, в котором боковая цепь
конъюгирована с заместителем Z1- или Z1Z2
<400> 93
His Xaa Glu Gly Ser Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Gln Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile His His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 94
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa указывает остаток L-лизина, в котором боковая цепь
конъюгирована с заместителем Z1- или Z1Z2
<400> 94
His Xaa Glu Gly Ser Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Gln Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Tyr His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 95
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa указывает остаток L-лизина, в котором боковая цепь
конъюгирована с заместителем Z1- или Z1Z2
<400> 95
His Xaa Glu Gly Ser Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Gln Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Leu His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 96
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa указывает остаток L-лизина, в котором боковая цепь
конъюгирована с заместителем Z1- или Z1Z2
<400> 96
His Xaa Glu Gly Ser Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Gln Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Lys His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 97
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa указывает остаток L-лизина, в котором боковая цепь
конъюгирована с заместителем Z1- или Z1Z2
<400> 97
His Xaa Glu Gly Ser Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Gln Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Arg His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 98
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa указывает остаток L-лизина, в котором боковая цепь
конъюгирована с заместителем Z1- или Z1Z2
<400> 98
His Xaa Glu Gly Ser Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Gln Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Ser His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 99
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa указывает остаток L-лизина, в котором боковая цепь
конъюгирована с заместителем Z1- или Z1Z2
<400> 99
His Xaa Glu Gly Ser Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Gln Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Gln Gln His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 100
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa указывает остаток L-лизина, в котором боковая цепь
конъюгирована с заместителем Z1- или Z1Z2
<400> 100
His Xaa Glu Gly Ser Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Gln Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Tyr Gln His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 101
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa указывает остаток L-лизина, в котором боковая цепь
конъюгирована с заместителем Z1- или Z1Z2
<400> 101
His Xaa Glu Gly Ser Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Gln Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Lys Gln His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 102
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa указывает остаток L-лизина, в котором боковая цепь
конъюгирована с заместителем Z1- или Z1Z2
<400> 102
His Xaa Glu Gly Ser Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Gln Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Gln Gln Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 103
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa указывает остаток L-лизина, в котором боковая цепь
конъюгирована с заместителем Z1- или Z1Z2
<400> 103
His Xaa Glu Gly Ser Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Gln Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Gln Tyr Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 104
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa указывает остаток L-лизина, в котором боковая цепь
конъюгирована с заместителем Z1- или Z1Z2
<400> 104
His Xaa Glu Gly Thr Phe Ser Ser Glu Leu Ser Thr Ile Leu Glu Xaa
1 5 10 15
Gln Ala Ser Arg Glu Phe Ile Ala Trp Leu Ile Ala Tyr Lys Ile Thr
20 25 30
Glu
<210> 105
<211> 39
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (34)..(38)
<223> Xaa в позициях 34-38 представляет собой D-Lys
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (39)..(39)
<223> Xaa указывает остаток D-лизина, в котором боковая цепь
конъюгирована с заместителем Z1- или Z1Z2
<400> 105
His Xaa Glu Gly Thr Phe Ser Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Glu
1 5 10 15
Gln Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Ala His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
35
<210> 106
<211> 39
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (34)..(38)
<223> Xaa в позициях 34-38 представляет собой D-Lys
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (39)..(39)
<223> Xaa указывает остаток D-лизина, в котором боковая цепь
конъюгирована с заместителем Z1- или Z1Z2
<400> 106
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Glu
1 5 10 15
Gln Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Ala His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
35
<210> 107
<211> 39
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (34)..(38)
<223> Xaa в позициях 34-38 представляет собой D-Lys
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (39)..(39)
<223> Xaa указывает остаток D-лизина, в котором боковая цепь
конъюгирована с заместителем Z1- или Z1Z2
<400> 107
His Xaa Glu Gly Ser Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Glu
1 5 10 15
Gln Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Glu His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
35
<210> 108
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (10)..(10)
<223> Xaa указывает остаток L-лизина, в котором боковая цепь
конъюгирована с заместителем Z1- или Z1Z2
<400> 108
His Xaa Glu Gly Ser Phe Thr Ser Glu Xaa Ala Thr Ile Leu Asp Glu
1 5 10 15
Gln Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Glu His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 109
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (17)..(17)
<223> Xaa указывает остаток L-лизина, в котором боковая цепь
конъюгирована с заместителем Z1- или Z1Z2
<400> 109
His Xaa Glu Gly Ser Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Glu Gly
1 5 10 15
Xaa Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Glu His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 110
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (20)..(20)
<223> Xaa указывает остаток L-лизина, в котором боковая цепь
конъюгирована с заместителем Z1- или Z1Z2
<400> 110
His Xaa Glu Gly Ser Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Glu
1 5 10 15
Gln Ala Ala Xaa Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Glu His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 111
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (20)..(20)
<223> Xaa указывает остаток L-лизина, в котором боковая цепь
конъюгирована с заместителем Z1- или Z1Z2
<400> 111
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Glu
1 5 10 15
Gln Ala Ala Xaa Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Glu His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 112
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (10)..(10)
<223> Xaa указывает остаток L-лизина, в котором боковая цепь
конъюгирована с заместителем Z1- или Z1Z2
<400> 112
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Glu Xaa Ala Thr Ile Leu Asp Glu
1 5 10 15
Gln Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Glu His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 113
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (17)..(17)
<223> Xaa указывает остаток L-лизина, в котором боковая цепь
конъюгирована с заместителем Z1- или Z1Z2
<400> 113
His Xaa Glu Gly Ser Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Ala
1 5 10 15
Xaa Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Glu His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 114
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (20)..(20)
<223> Xaa указывает остаток L-лизина, в котором боковая цепь
конъюгирована с заместителем Z1- или Z1Z2
<400> 114
His Xaa Glu Gly Ser Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Ala
1 5 10 15
Lys Ala Ala Xaa Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Glu His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 115
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa представляет собой K([17-карбокси-гептадеканоил]-isoGlu)
<400> 115
His Xaa Glu Gly Thr Phe Ser Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Glu Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Glu His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 116
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa представляет собой K([17-карбокси-гептадеканоил]-isoGlu)
<400> 116
His Xaa Glu Gly Ser Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Glu Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Glu His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 117
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa представляет собой K([17-карбокси-гептадеканоил]-isoGlu)
<400> 117
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Glu Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Glu His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 118
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa представляет собой K([17-карбокси-гептадеканоил]-isoGlu)
<400> 118
His Xaa Glu Gly Thr Phe Ser Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Lys Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Glu His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 119
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa представляет собой K([17-карбокси-гептадеканоил]-isoGlu)
<400> 119
His Xaa Glu Gly Ser Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Lys Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Glu His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 120
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa представляет собой K([17-карбокси-гептадеканоил]-isoGlu)
<400> 120
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Lys Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Glu His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 121
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (17)..(17)
<223> Xaa представляет собой K([17-карбокси-гептадеканоил]-isoGlu)
<400> 121
His Xaa Glu Gly Thr Phe Ser Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Gly
1 5 10 15
Xaa Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Glu His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 122
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (17)..(17)
<223> Xaa представляет собой K([17-карбокси-гептадеканоил]-isoGlu)
<400> 122
His Xaa Glu Gly Ser Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Gly
1 5 10 15
Xaa Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Glu His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 123
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (17)..(17)
<223> Xaa представляет собой K([17-карбокси-гептадеканоил]-isoGlu)
<400> 123
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Gly
1 5 10 15
Xaa Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Glu His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 124
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa представляет собой K([17-карбокси-гептадеканоил]-isoGlu)
<400> 124
His Xaa Glu Gly Thr Phe Ser Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Leu Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Glu His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 125
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa представляет собой K([17-карбокси-гептадеканоил]-isoGlu)
<400> 125
His Xaa Glu Gly Ser Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Leu Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Glu His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 126
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa представляет собой K([17-карбокси-гептадеканоил]-isoGlu)
<400> 126
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Leu Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Glu His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 127
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa представляет собой K([17-карбокси-гептадеканоил]-isoGlu)
<400> 127
His Xaa Glu Gly Thr Phe Ser Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Leu Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Ala His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 128
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa представляет собой K([17-карбокси-гептадеканоил]-isoGlu)
<400> 128
His Xaa Glu Gly Ser Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Leu Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Ala His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 129
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa представляет собой K([17-карбокси-гептадеканоил]-isoGlu)
<400> 129
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Leu Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Ala His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 130
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa представляет собой K([17-карбокси-гептадеканоил]-isoGlu)
<400> 130
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Glu Ala Ala Arg Leu Phe Ile Ala Trp Leu Ile Glu His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 131
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa представляет собой K([17-карбокси-гептадеканоил]-isoGlu)
<400> 131
His Xaa Glu Gly Thr Phe Ser Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Gln Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Gln His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 132
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa представляет собой K([17-карбокси-гептадеканоил]-isoGlu)
<400> 132
His Xaa Glu Gly Ser Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Gln Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Gln His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 133
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa представляет собой K([17-карбокси-гептадеканоил]-isoGlu)
<400> 133
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Gln Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Gln His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 134
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa представляет собой K([17-карбокси-гептадеканоил]-isoGlu)
<400> 134
His Xaa Glu Gly Thr Phe Ser Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Gln Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Glu His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 135
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa представляет собой K([17-карбокси-гептадеканоил]-isoGlu)
<400> 135
His Xaa Glu Gly Thr Phe Ser Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Gln Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Ala His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 136
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa представляет собой K([17-карбокси-гептадеканоил]-isoGlu)
<400> 136
His Xaa Glu Gly Ser Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Gln Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Ala His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 137
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa представляет собой K([17-карбокси-гептадеканоил]-isoGlu)
<400> 137
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Gln Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Ala His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 138
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa представляет собой K([17-карбокси-гептадеканоил]-isoGlu)
<400> 138
His Xaa Glu Gly Ser Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Gln Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Glu His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 139
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa представляет собой K([17-карбокси-гептадеканоил]-isoGlu)
<400> 139
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Gln Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Glu His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 140
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa представляет собой K([17-карбокси-гептадеканоил]-isoGlu)
<400> 140
His Xaa Glu Gly Ser Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Gln Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile His His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 141
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa представляет собой K([17-карбокси-гептадеканоил]-isoGlu)
<400> 141
His Xaa Glu Gly Ser Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Gln Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Tyr His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 142
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa представляет собой K([17-карбокси-гептадеканоил]-isoGlu)
<400> 142
His Xaa Glu Gly Ser Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Gln Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Leu His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 143
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa представляет собой K([17-карбокси-гептадеканоил]-isoGlu)
<400> 143
His Xaa Glu Gly Ser Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Gln Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Lys His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 144
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa представляет собой K([17-карбокси-гептадеканоил]-isoGlu)
<400> 144
His Xaa Glu Gly Ser Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Gln Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Arg His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 145
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa представляет собой K([17-карбокси-гептадеканоил]-isoGlu)
<400> 145
His Xaa Glu Gly Ser Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Gln Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Ser His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 146
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa представляет собой K([гексадеканоил]- betaAla)
<400> 146
His Xaa Glu Gly Ser Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Gln Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Gln Gln His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 147
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa представляет собой K([17-карбокси-гептадеканоил]iso-Glu-Peg3)
<400> 147
His Xaa Glu Gly Ser Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Gln Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Tyr Gln His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 148
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa представляет собой K([19-карбокси-нонадеканоил]iso-Glu
-Peg3-Peg3)
<400> 148
His Xaa Glu Gly Ser Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Gln Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Lys Gln His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 149
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa представляет собой K([19-карбокси-нонадеканоил]iso-Lys
-Peg3-Peg3-Peg3)
<400> 149
His Xaa Glu Gly Ser Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Gln Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Gln Gln Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 150
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa представляет собой K(Octadecanoyl)
<400> 150
His Xaa Glu Gly Ser Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Gln Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Gln Tyr Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 151
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa представляет собой K(гексадеканоил-isoGlu)
<400> 151
His Xaa Glu Gly Thr Phe Ser Ser Glu Leu Ser Thr Ile Leu Glu Xaa
1 5 10 15
Gln Ala Ser Arg Glu Phe Ile Ala Trp Leu Ile Ala Tyr Lys Ile Thr
20 25 30
Glu
<210> 152
<211> 40
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (34)..(34)
<223> Xaa может представлять собой любую природную аминокислоту
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (35)..(39)
<223> Xaa в позициях 35-39 представляет собой D-Lys
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (40)..(40)
<223> Xaa представляет собой ([17-карбокси-гептадеканоил]-isoGlu)
<400> 152
His Xaa Glu Gly Thr Phe Ser Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Glu
1 5 10 15
Gln Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Ala His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
35 40
<210> 153
<211> 40
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (34)..(39)
<223> Xaa в позициях 34-39 представляет собой D-Lys
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (40)..(40)
<223> Xaa представляет собой ([17-карбокси-гептадеканоил]-isoGlu)
<400> 153
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Glu
1 5 10 15
Gln Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Ala His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
35 40
<210> 154
<211> 40
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (34)..(39)
<223> Xaa в позициях 34-39 представляет собой D-Lys
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (40)..(40)
<223> Xaa представляет собой ([17-карбокси-гептадеканоил]-isoGlu)
<400> 154
His Xaa Glu Gly Ser Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Glu
1 5 10 15
Gln Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Glu His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
35 40
<210> 155
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa представляет собой K([19-карбокси-нонадеканоил]-isoGlu)
<400> 155
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Gln Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Gln His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 156
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (10)..(10)
<223> Xaa представляет собой K([19-карбокси-нонадеканоил]iso-Glu
-Peg3-Peg3)
<400> 156
His Xaa Glu Gly Ser Phe Thr Ser Glu Xaa Ala Thr Ile Leu Asp Glu
1 5 10 15
Gln Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Glu His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 157
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa представляет собой K([19-карбокси-нонадеканоил]iso-Glu
-Peg3-Peg3)
<400> 157
His Xaa Glu Gly Ser Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Lys Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Glu His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 158
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (17)..(17)
<223> Xaa представляет собой K([19-карбокси-нонадеканоил]iso-Glu
-Peg3-Peg3)
<400> 158
His Xaa Glu Gly Ser Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Glu Gly
1 5 10 15
Xaa Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Glu His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 159
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (20)..(20)
<223> Xaa представляет собой K([19-карбокси-нонадеканоил]iso-Glu
-Peg3-Peg3)
<400> 159
His Xaa Glu Gly Ser Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Glu
1 5 10 15
Gln Ala Ala Xaa Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Glu His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 160
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (20)..(20)
<223> Xaa представляет собой K([19-карбокси-нонадеканоил]iso-Glu
-Peg3-Peg3)
<400> 160
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Glu
1 5 10 15
Gln Ala Ala Xaa Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Glu His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 161
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa представляет собой K([17-карбокси-гептадеканоил]-isoGlu
-KEK-Peg3)
<400> 161
His Xaa Glu Gly Thr Phe Ser Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Gln Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Gln His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 162
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa представляет собой K([19-карбокси-нонадеканоил]-isoGlu
-KEK-Peg3)
<400> 162
His Xaa Glu Gly Thr Phe Ser Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Gln Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Gln His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 163
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa представляет собой K([17-карбокси-гептадеканоил]-isoGlu
-KEK-Peg3)
<400> 163
His Xaa Glu Gly Thr Phe Ser Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Gln Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Glu His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 164
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa представляет собой K([19-карбокси-нонадеканоил]-isoGlu
-KEK-Peg3)
<400> 164
His Xaa Glu Gly Thr Phe Ser Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Gln Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Glu His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 165
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa представляет собой K([19-карбокси-нонадеканоил]-isoGlu-KEK)
<400> 165
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Gln Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Gln His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 166
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa представляет собой K([19-карбокси-нонадеканоил]-isoGlu
-KEK-Peg3)
<400> 166
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Gln Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Gln His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 167
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (10)..(10)
<223> Xaa представляет собой K([19-карбокси-нонадеканоил]-isoGlu
-KEK-Peg3)
<400> 167
His Xaa Glu Gly Ser Phe Thr Ser Glu Xaa Ala Thr Ile Leu Asp Glu
1 5 10 15
Gln Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Glu His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 168
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (10)..(10)
<223> Xaa представляет собой K([19-карбокси-нонадеканоил]-isoGlu
-KEK-Peg3)
<400> 168
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Glu Xaa Ala Thr Ile Leu Asp Glu
1 5 10 15
Gln Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Glu His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 169
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (10)..(10)
<223> Xaa представляет собой K([19-карбокси-нонадеканоил]iso-Glu
-KEK-Peg3-Peg3)
<400> 169
His Xaa Glu Gly Ser Phe Thr Ser Glu Xaa Ala Thr Ile Leu Asp Glu
1 5 10 15
Gln Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Glu His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 170
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa представляет собой K([19-карбокси-нонадеканоил]-isoGlu
-KEK-Peg3)
<400> 170
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Gln Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Glu His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 171
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa представляет собой K([19-карбокси-нонадеканоил]-isoGlu
-KEK-Peg3)
<400> 171
His Xaa Glu Gly Ser Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Gln Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Glu His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 172
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa представляет собой K([19-карбокси-нонадеканоил]-isoGlu
-KEK-Peg3)
<400> 172
His Xaa Glu Gly Ser Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Gln Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Ala His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 173
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa представляет собой K([19-карбокси-нонадеканоил]-isoGlu
-KEK-Peg3)
<400> 173
His Xaa Glu Gly Ser Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Lys Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Glu His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 174
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa представляет собой K([19-карбокси-нонадеканоил]iso-Glu
-KEK-Peg3-Peg3)
<400> 174
His Xaa Glu Gly Ser Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Gln Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Glu His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 175
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (17)..(17)
<223> Xaa представляет собой K([19-карбокси-нонадеканоил]-isoGlu
-KEK-Peg3)
<400> 175
His Xaa Glu Gly Ser Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Glu Gly
1 5 10 15
Xaa Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Glu His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 176
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (17)..(17)
<223> Xaa представляет собой K([19-карбокси-нонадеканоил]-isoGlu
-KEK-Peg3)
<400> 176
His Xaa Glu Gly Ser Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Ala
1 5 10 15
Xaa Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Glu His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 177
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (17)..(17)
<223> Xaa представляет собой K([19-карбокси-нонадеканоил]iso-Glu
-KEK-Peg3-Peg3)
<400> 177
His Xaa Glu Gly Ser Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Ala
1 5 10 15
Xaa Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Glu His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 178
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (20)..(20)
<223> Xaa представляет собой K([19-карбокси-нонадеканоил]-isoGlu
-KEK-Peg3)
<400> 178
His Xaa Glu Gly Ser Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Glu
1 5 10 15
Gln Ala Ala Xaa Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Glu His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 179
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (20)..(20)
<223> Xaa представляет собой K([19-карбокси-нонадеканоил]-isoGlu
-KEK-Peg3)
<400> 179
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Glu
1 5 10 15
Gln Ala Ala Xaa Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Glu His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 180
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (20)..(20)
<223> Xaa представляет собой K([19-карбокси-нонадеканоил]iso-Glu
-KEK-Peg3-Peg3)
<400> 180
His Xaa Glu Gly Ser Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Glu
1 5 10 15
Gln Ala Ala Xaa Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Glu His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 181
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (20)..(20)
<223> Xaa представляет собой K([19-карбокси-нонадеканоил]iso-Glu
-KEK-Peg3-Peg3)
<400> 181
His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Glu
1 5 10 15
Gln Ala Ala Xaa Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Glu His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 182
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (20)..(20)
<223> Xaa представляет собой K([19-карбокси-нонадеканоил]-isoGlu
-KEK-Peg3)
<400> 182
His Xaa Glu Gly Ser Phe Thr Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Ala
1 5 10 15
Lys Ala Ala Xaa Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Glu His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 183
<211> 4
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (1)..(1)
<223> Xaa представляет собой betaAla
<400> 183
Xaa Lys Glu Lys
1
<210> 184
<211> 4
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (1)..(1)
<223> Xaa представляет собой isoLys
<400> 184
Xaa Lys Glu Lys
1
<210> 185
<211> 4
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (4)..(4)
<223> Xaa представляет собой isoGlu
<400> 185
Lys Glu Lys Xaa
1
<210> 186
<211> 4
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (4)..(4)
<223> Xaa представляет собой betaAla
<400> 186
Lys Glu Lys Xaa
1
<210> 187
<211> 4
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (4)..(4)
<223> Xaa представляет собой isoLys
<400> 187
Lys Glu Lys Xaa
1
<210> 188
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa представляет собой K([17-карбокси-гептадеканоил]-isoGlu)
<400> 188
His Xaa Asp Gly Ser Phe Ser Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Gln Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Gln His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<210> 189
<211> 33
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Пептид-двойной агонист GLP-1/GLP-2
<220>
<221> Модифицированные остатки
<222> (2)..(2)
<223> Aib
<220>
<221> Прочие признаки
<222> (16)..(16)
<223> Xaa представляет собой K([17-карбокси-гептадеканоил]-isoGlu)
<400> 189
His Xaa Glu Gly Ser Phe Ser Ser Glu Leu Ala Thr Ile Leu Asp Xaa
1 5 10 15
Gln Ala Ala Arg Asp Phe Ile Ala Trp Leu Ile Gln His Lys Ile Thr
20 25 30
Asp
<---
| название | год | авторы | номер документа |
|---|---|---|---|
| СОЕДИНЕНИЯ-АГОНИСТЫ GIP И СПОСОБЫ | 2015 |
|
RU2716985C2 |
| КОАГОНИСТЫ РЕЦЕПТОРОВ ГЛЮКАГОНА И GLP-1 ДЛИТЕЛЬНОГО ДЕЙСТВИЯ | 2018 |
|
RU2779314C2 |
| МУЛЬТИРЕЦЕПТОРНЫЙ АГОНИСТ И ЕГО МЕДИЦИНСКОЕ ПРИМЕНЕНИЕ | 2020 |
|
RU2816492C2 |
| УЛУЧШЕННЫЕ ПЕПТИДНЫЕ ЛЕКАРСТВЕННЫЕ СРЕДСТВА ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ NASH И ДРУГИХ РАССТРОЙСТВ | 2019 |
|
RU2790209C2 |
| Модифицированные аналоги GIP пептида | 2019 |
|
RU2817673C2 |
| Ацилированное производное GLP-1 | 2019 |
|
RU2773242C2 |
| Новые производные оксинтомодулина и содержащая их фармацевтическая композиция для лечения ожирения | 2012 |
|
RU2739209C2 |
| ПЕПТИДНЫЕ ИНГИБИТОРЫ РЕЦЕПТОРА ИНТЕРЛЕЙКИНА-23 ДЛЯ ПЕРОРАЛЬНОГО ПРИЕМА И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ КИШЕЧНИКА | 2015 |
|
RU2736637C2 |
| ПЕПТИДНЫЙ АНАЛОГ АЦИЛИРОВАННОГО ОКСИНТОМОДУЛИНА | 2018 |
|
RU2752787C1 |
| Композиция для лечения гиперлипидемии, содержащая производное оксинтомодулина | 2013 |
|
RU2768853C1 |
Изобретение относится к области биотехнологии, конкрентно к с соединениям, обладающим двойной агонистической активностью как в отношении рецепторов GLP-1 (глюкагоноподобный пептид 1), так и в отношении GLP-2 (глюкагоноподобный пептид 2). Ацилированные агонисты GLP-1/GLP-2 по настоящему изобретению могут применяться в медицине, в частности в профилактике или лечении повреждения и дисфункции кишечника, регуляции массы тела и профилактике или лечении метаболической дисфункции у человека. 3 н. и 16 з.п. ф-лы, 5 табл., 5 пр.
1. Двойной агонист GLP-1/GLP-2, представленный формулой
R1-X*-U-R2,
в которой R1 представляет собой водород (Hy), C1-4-алкил, ацетил, формил, бензоил или трифторацетил, предпочтительно, чтобы R1 представлял собой Hy;
R2 представляет собой NH2 или OH, предпочтительно, чтобы R2 представлял собой OH;
Х* представляет собой пептид по формуле I
H-X2-EG-X5-F-X7-X8-E-X10-X11-TIL-X15-X16-X17-A-X19-X20-X21-FI-X24-WL-X27-X28-X29-KIT-X33, (I)
в которой X2 представляет собой Aib или G;
X5 представляет собой T или S;
X7 представляет собой T или S;
X8 представляет собой S, E или D;
X10 представляет собой L, M, V или Ψ;
X11 представляет собой A, N или S;
X15 представляет собой D или E;
X16 представляет собой G, E, A или Ψ;
X17 представляет собой Q, E, K, L или Ψ;
X19 представляет собой A, V или S;
X20 представляет собой R, K или Ψ;
X21 представляет собой D, L или E;
X24 представляет собой A, N или S;
X27 представляет собой I, Q, K, H или Y;
X28 представляет собой Q, E, A, H, Y, L, K, R или S;
X29 представляет собой H, Y, K или Q;
X33 представляет собой D или E;
U отсутствует или представляет собой последовательность из 1-15 остатков, каждый из которых независимо выбран из K, k, E, A, T, I, L и Ψ;
молекула содержит один и только один Ψ, где Ψ представляет собой остаток K, k, R, Orn, Dap или Dab, в котором боковая цепь конъюгирована с заместителем, имеющим формулу Z1- или Z1-Z2-, в которой
Z1- представляет собой CH3-(CH2)10-22-(CO)- или HOOC-(CH2)10-22-(CO)-; и
-Z2- выбирают из -ZS1-, -ZS1-ZS2-, -ZS2-ZS1, -ZS2-, -ZS3-, -ZS1ZS3-, -ZS2ZS3-, -ZS3ZS1-, -ZS3ZS2-, -ZS1ZS2ZS3-, -ZS1ZS3ZS2-, -ZS2ZS1ZS3-, -ZS2ZS3ZS1-, -ZS3ZS1ZS2-, -ZS3ZS2ZS1-, ZS2ZS3ZS2-, где
ZS1 представляет собой isoGlu, β-Ala, isoLys или 4-аминобутаноил;
ZS2 представляет собой - (Peg3)m-, где m равно 1, 2 или 3; и
-ZS3 представляет собой пептидную последовательность из 1-6 аминокислот, независимо выбранных из группы, состоящей из A, L, S, Т, Y, Q, D, E, K, k, R, H, F и G;
и где по меньшей мере один из Х5 и Х7 представляет собой Т;
дополнительно, где K представляет собой L-конфигурацию лизина, а k представляет собой D-конфигурацию лизина;
или его фармацевтически приемлемая соль или сольват.
2. Двойной агонист или его фармацевтически приемлемая соль или сольват по п.1, где
X2 представляет собой Aib или G;
Х5 представляет собой Т или S;
X7 представляет собой T или S;
X8 представляет собой S;
X10 представляет собой это L или Ψ;
X11 представляет собой A или S;
X15 представляет собой D или E;
X16 представляет собой G, E, A или Ψ;
X17 представляет собой Q, E, K, L или Ψ;
X19 представляет собой A или S;
X20 представляет собой R или Ψ;
X21 представляет собой D, L или E;
X24 представляет собой А;
X27 представляет собой I, Q, K или Y;
X28 представляет собой Q, E, A, H, Y, L, K, R или S;
X29 представляет собой H, Y или Q; и
X33 представляет собой D или E;
при этом, необязательно,
(i) X16 представляет собой E и X17 представляет собой Q; и/или
(ii) X11 представляет собой A и X15 представляет собой D;
X11 представляет собой S и X15 представляет собой E;
X11 представляет собой A и X15 представляет собой E; и/или
(iii) X27 представляет собой I; и/или
(iv) X29 представляет собой H, где необязательно X28 представляет собой A или X28 представляет собой E; и/или
(v) X29 представляет собой Q, где X27 необязательно представляет собой Q; и/или
(vi) остатки в X27-X29 имеют последовательность, выбранную из:
IQH;
IEH
IAH;
IHH;
IYH;
ILH;
ИХ;
IRH;
ISH;
QQH;
YQH;
KQH;
IQQ;
IQY;
IQT; и
IAY.
3. Двойной агонист или его фармацевтически приемлемая соль или сольват по п.1, где X* представляет собой пептид по формуле II
H-X2-EG-X5-F-X7-SELATILD-X16-X17-AAR-X21-FIAWLI-X28-X29-KITD, (II)
в которой Х2 представляет собой Aib или G;
Х5 представляет собой Т или S;
Х7 представляет собой Т или S;
Х16 представляет собой G или Ψ;
X17 представляет собой Q, E, K, L или Ψ;
Х21 представляет собой D или L;
X28 представляет собой Q, E, A, H, Y, L, K, R или S; и
X29 представляет собой H, Y или Q.
4. Двойной агонист или его фармацевтически приемлемая соль или сольват по п.1 или 3, где
X16 представляет собой Ψ и X17 представляет собой Q, E, K или L или
X16 представляет собой G и X17 представляет собой Ψ
и где X21 необязательно представляет собой D.
5. Двойной агонист или его фармацевтически приемлемая соль или сольват по п.1, где X* представляет собой пептид формулы III
H[Aib]EG-X5-F-X7-SE-X10-ATILD-X16-X17-AA-X20-X21-FIAWLI-X28-X29-KITD, (III)
где Х5 представляет собой Т или S;
X7 - T или S;
X10 представляет собой L или Ψ;
X16 представляет собой G, E, A или Ψ;
X17 представляет собой Q, E, K, L или Ψ;
X20 представляет собой R или Ψ;
X21 представляет собой D или L;
X28 представляет собой E, A или Q;
X29 представляет собой H, Y или Q;
и по меньшей мере один из X5 и X7 представляет собой T.
6. Двойной агонист или его фармацевтически приемлемая соль или сольват по п.1, где X* представляет собой пептид формулы IV
H[Aib]EG-X5-F-X7-SELATILD-X16-X17-AAR-X21-FIAWLI-X28-X29-KITD, (IV)
где Х5 представляет собой Т или S;
Х7 представляет собой Т или S;
X16 представляет собой G или Ψ;
X17 представляет собой E, K, L или Ψ;
X21 представляет собой D или L;
X28 представляет собой E или A;
X29 представляет собой H, Y или Q;
и по меньшей мере один из X5 и X7 представляет собой T.
7. Двойной агонист или его фармацевтически приемлемая соль или сольват по любому из предшествующих пунктов, где
(а) X16 представляет собой Ψ и X17 представляет собой E, K или L; или
(b) X16 представляет собой G и X17 представляет собой Ψ,
при этом, необязательно,
X21 представляет собой D и X28 представляет собой E;
X21 представляет собой D и X28 представляет собой A;
X21 представляет собой L и X28 представляет собой E;
X21 представляет собой L и X28 представляет собой A.
8. Двойной агонист или его фармацевтически приемлемая соль или сольват по п.1, где X* представляет собой пептид по формуле V
H[Aib]EG-X5-F-X7-SELATILD-Ψ-QAARDFIAWLI-X28-X29-KITD, (V)
в которой Х5 представляет собой Т или S;
Х7 представляет собой Т или S;
X28 представляет собой Q, E, A, H, Y, L, K, R или S;
Х29 представляет собой Н, Y или Q; и
по меньшей мере один из X5 и X7 является Т.
9. Двойной агонист или его фармацевтически приемлемая соль или сольват по любому из предшествующих пунктов, где
Х5 представляет собой S и Х7 представляет собой Т;
Х5 представляет собой Т и Х7 представляет собой S; или
Х5 представляет собой Т и Х7 представляет собой Т;
где, необязательно, X5 представляет собой S и X7 представляет собой T или X5 представляет собой T и X7 представляет собой T.
10. Двойной агонист или его фармацевтически приемлемая соль или сольват по любому из предшествующих пунктов, где
(a) Ψ представляет собой остаток Lys, боковая цепь которого конъюгирована с заместителем Z1- или Z1-Z2-; и/или
(b) Z1- представляет собой
(i) додеканоил, тетрадеканоил, гексадеканоил, октадеканоил или эйкозаноил; или
(ii) 13-карбокситридеканоил, т.е. HOOC–(CH2)12–(CO)-;
15-карбоксипентадеканоил, т.е. HOOC–(CH2)14–(CO)-;
17-карбоксигептадеканоил, т.е. HOOC–(CH2)16–(CO)-;
19-карбоксинонадеканоил, т.е. HOOC–(CH2)18–(CO)-; или
21-карбоксигеникозаноил, т.е. HOOC–(CH2)20–(CO)-.
11. Двойной агонист или его фармацевтически приемлемая соль или сольват по любому из предшествующих пунктов, где
(а) Z2 отсутствует;
(b) Z2 содержит ZS1 отдельно или в комбинации с ZS2 и/или ZS3, где, необязательно,
-ZS1- представляет собой isoGlu, β-Ala, isoLys или 4-аминобутаноил;
-ZS2-, если присутствует, представляет собой -(Peg3)m-, где m равно 1, 2 или 3; и
-ZS3- представляет собой пептидную последовательность из 1-6 аминокислотных единиц, независимо выбранных из группы, состоящей из A, L, S, T, Y, Q, D, E, K, k, R, H, F и G, такую как пептидная последовательность КЕК;
или
(c) Z2 имеет формулу -ZS1-ZS3-ZS2-, где ZS1 связан с Z1 и ZS2 связан с боковой цепью аминокислотного компонента Ψ, где, необязательно, -Z2- представляет собой:
isoGlu(Peg3)0-3;
β-Ala(Peg3)0-3;
isoLys(Peg3)0-3;
4-аминобутаноил(Peg3)0-3; или
isoGlu-KEK-(Peg3)0-3.
12. Двойной агонист или его фармацевтически приемлемая соль или сольват по любому из пп.1-10, где Z1- или Z1-Z2- представляет собой:
[17-карбокси-гептадеканоил]-isoGlu;
[17-карбокси-гептадеканоил]-isoGlu-KEK-Peg3-;
[17-карбокси-гептадеканоил]-isoGlu-Peg3-;
[19-карбокси-нонадеканоил]-isoGlu-;
[19-карбокси-нонадеканоил]-isoGlu-KEK-;
[19-карбокси-нонадеканоил]-isoGlu-KEK-Peg3-;
[19-карбокси-нонадеканоил]-isoGlu-KEK-Peg3-Peg3-;
[19-карбокси-нонадеканоил]-isoGlu-Peg3-Peg3-;
[19-карбокси-нонадеканоил]-isoLys-Peg3-Peg3-Peg3-;
[гексадеканоил]-βAla-;
[гексадеканоил]-isoGlu-; или
октадеканоил-
где, необязательно, Ψ представляет собой:
К([17-карбокси-гептадеканоил]-isoGlu).
К([17-карбокси-гептадеканоил]-isoGlu-KEK-Peg3);
К([17-карбокси-гептадеканоил]-isoGlu-Peg3);
К([19-карбокси-нонадеканоил]-isoGlu);
К([19-карбокси-нонадеканоил]-iso-Glu-KEK);
К([19-карбокси-нонадеканоил]-iso-Glu-KEK-Peg3);
К([19-карбокси-нонадеканоил]-iso-Glu-KEK-Peg3-Peg3);
К([19-карбокси-нонадеканоил]-isoGlu-Peg3-Peg3);
К([19-карбокси-нонадеканоил]-isoLys-Peg3-Peg3-Peg3);
К([гексадеканоил]-βAla-;
К([гексадеканоил]-isoGlu); или
К(октадеканоил).
13. Двойной агонист или его фармацевтически приемлемая соль или сольват по любому одному из предшествующих пунктов, где
(a) U имеет 1-10 аминокислот в длину, 1-7 аминокислот в длину, 3-7 аминокислот в длину, 1-6 аминокислот в длину или 3-6 аминокислот в длину;
(b) U включает по меньшей мере одну заряженную аминокислоту, например две или более заряженных аминокислот;
где необязательно U включает по меньшей мере 1 положительно заряженную аминокислоту и по меньшей мере одну отрицательно заряженную аминокислоту;
(c) U представляет собой цепь чередующихся положительно и отрицательно заряженных аминокислот;
(d) U содержит остатки, выбранные только из K, k, E и Ψ, где, необязательно, U представляет собой K3, K4, K5, K6, K7, k3, k4, k5, k6 или k7;
(e) U представляет собой:
(i) KEK, EKEKEK, EkEkEk, AKAAEK, AKEKEK или ATILEK или
(ii) K1-14-Ψ, K1-9-Ψ, K1-6-Ψ, k1-14-Ψ, k1-9-Ψ, k1-6-Ψ, KEΨ, EKEKEΨ, EkEkEΨ AKAAEΨ, AKEKEΨ или ATILEΨ;
или
(f) U отсутствует.
14. Двойной агонист или его фармацевтически приемлемая соль или сольват по любому из предшествующих пунктов, где R1 представляет собой Hy и/или R2 представляет собой ОН.
15. Двойной агонист или его фармацевтически приемлемая соль или сольват по любому одному из предшествующих пунктов, где X* или X*-U имеет последовательность:
или
где X* или X*-U имеет последовательность:
где K* или k* обозначают остаток L- или D-лизина соответственно, в котором боковая цепь конъюгирована с заместителем Z1- или Z1Z2-, где, необязательно,
X* или X*-U имеет последовательность:
16. Двойной агонист или его фармацевтически приемлемая соль или сольват по п.15, который представляет собой:
17. Композиция, содержащая двойной агонист по любому одному из пп.1-16 или его фармацевтически приемлемую соль или сольват в смеси с носителем, где, предпочтительно, композиция представляет собой фармацевтическую композицию и носитель представляет собой фармацевтически приемлемый носитель, для применения при профилактике или лечении:
(а) мальабсорбции, язв, синдрома короткого кишечника, синдрома слепой кишечной петли, воспалительного заболевания кишечника, синдрома раздраженного кишечника, поушита, нетропической спру, тропической спру, гипогаммаглобулинемической спру, мукозита, вызванного химиотерапией или лучевой терапией, диареи, вызванной химиотерапией или лучевой терапией, неспецифического воспаления, метаболической эндотоксемии, некротизирующего энтероколита, первичного билиарного цирроза печени, гепатита, ожирения печени или желудочно-кишечных побочных эффектов при воспалительных заболеваниях; и/или
(b) ожирения, патологического ожирения, связанного с ожирением заболевания желчного пузыря, вызванного ожирением апноэ во сне, неадекватного контроля глюкозы, толерантности к глюкозе, дислипидемии, диабета, предиабета, метаболического синдрома или гипертонии.
18. Фармацевтическая композиция, содержащая двойной агонист по любому из пп.1-16 или его фармацевтически приемлемую соль или сольват в смеси с фармацевтически приемлемым наполнителем, эксципиентом или носителем для применения при профилактике или лечении:
(а) мальабсорбции, язв, синдрома короткого кишечника, синдрома слепой кишечной петли, воспалительного заболевания кишечника, синдрома раздраженного кишечника, поушита, нетропической спру, тропической спру, гипогаммаглобулинемической спру, мукозита, вызванного химиотерапией или лучевой терапией, диареи, вызванной химиотерапией или лучевой терапией, неспецифического воспаления, метаболической эндотоксемии, некротизирующего энтероколита, первичного билиарного цирроза печени, гепатита, ожирения печени или желудочно-кишечных побочных эффектов при воспалительных заболеваниях; и/или
(b) ожирения, патологического ожирения, связанного с ожирением заболевания желчного пузыря, вызванного ожирением апноэ во сне, неадекватного контроля глюкозы, толерантности к глюкозе, дислипидемии, диабета, предиабета, метаболического синдрома или гипертонии.
19. Двойной агонист по любому одному из пп.1-16 для применения при профилактики или лечении:
(a) мальабсорбции, язв, синдрома короткого кишечника, синдрома слепой кишечной петли, воспалительного заболевания кишечника, синдрома раздраженного кишечника, поушита, нетропической спру, тропической спру, гипогаммаглобулинемической спру, мукозита, вызванного химиотерапией или лучевой терапией, диареи, вызванной химиотерапией или лучевой терапией, неспецифического воспаления, метаболической эндотоксемии, некротизирующего энтероколита, первичного билиарного цирроза печени, гепатита, ожирения печени или желудочно-кишечных побочных эффектов при воспалительных заболеваниях; и/или
(b) ожирения, патологического ожирения, связанного с ожирением заболевания желчного пузыря, вызванного ожирением апноэ во сне, неадекватного контроля глюкозы, толерантности к глюкозе, дислипидемии, диабета, предиабета, метаболического синдрома или гипертонии.
| WO 2016066818 A1, 06.05.2016 | |||
| DACAMBRA M.P | |||
| Аппарат для очищения воды при помощи химических реактивов | 1917 |
|
SU2A1 |
| WO 2013164484 A1, 07.11.2013 | |||
| Способ приготовления лака | 1924 |
|
SU2011A1 |
| Прибор для сигнализации о появлении рудничных газов | 1929 |
|
SU20497A1 |
