Данная заявка испрашивает приоритет и преимущество по предварительной заявке на патент США №62/744236, поданной 11 октября 2018 г., которая включена в данный документ во всей своей полноте посредством ссылки.

Список последовательностей

Данная заявка содержит перечень последовательностей, поданный в электронном виде в формате ASCII и включенный в данный документ в полном объеме посредством ссылки. Указанная копия в формате ASCII, созданная 10 октября 2019 г., называется 616782_102487-055PC_SL-10-10-2019.txt и имеет размер 123647 байт.

ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ

Данное изобретение относится к выделенным полипептидам, которые являются аналогами амилина человека. Раскрытые полипептиды аналога амилина обладают полезными физико-химическими свойствами относительно эндогенного амилина, такими как более длительные периоды полужизни (t_1/2) и улучшенная растворимость и термическая стабильность. Данное изобретение также относится к способам применения раскрытых в данном документе полипептидов аналога амилина в различных терапевтических показаниях, а также способам их получения. Как объяснено более подробно ниже, раскрытые полипептиды аналога амилина особенно полезны в способах лечения метаболических заболеваний или расстройств, таких как диабет 1-го и 2-го типа, а также в обеспечении потери массы.

УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ

Амилин человека, или островковый амилоидный полипептид (IAPP), представляет собой полипептидный гормон из 37 остатков. Амилин совместно секретируется с инсулином из β-клеток поджелудочной железы в соотношении приблизительно 100:1 (инсулин: амилин). Про-островковый амилоидный полипептид (т.е., pro-IApp) продуцируется в β-клетках поджелудочной железы как про-пептид размером 67 аминокислот, и массой 7404 дальтона, который подвергается посттрансляционным модификациям, включая расщепление протеазой для получения амилина размером 37 остатков. Потеря функции β-клеток, которая происходит в начале диабета 1-го типа и может проявится в конце диабета 2-го типа, она приводит к недостаточной секреции инсулина и амилина.

Амилин функционирует как часть эндокринной поджелудочной железы, тех клеток в поджелудочной железе, которые синтезируют и секретируют гормоны. Амилин способствует гликемическому контролю; он секретируется из островков поджелудочной железы в кровообращение и очищается пептидазами в почках. Метаболическая функция амилина хорошо характеризуется как ингибитор проявления питательных веществ, таких как глюкоза, в плазме. Таким образом, он функционирует как синергетический партнер к инсулину - пептиду, который регулирует уровень глюкозы в крови и координирует поглощение глюкозы и ее распределение в организме. Роль инсулина в организме является, среди прочего, в предотвращении слишком высокого повышения уровня глюкозы в крови, особенно после приема пищи.

Считается, что амилин играет роль в гликемическом регулировании путем замедления опорожнения желудка и способствования сытости (то есть, чувства наполненности), тем самым предотвращая послеобеденные (то есть, после приема пищи) пики уровней глюкозы в крови. Общий эффект представляет собой замедление скорости появления глюкозы в крови после еды. Амилин также снижает секрецию глюкагона поджелудочной железой. Роль глюкагона в организме представляет собой, помимо прочего, предотвращение слишком низкого уровня глюкозы в крови. Это важно, потому что определенные диабетики 1-го типа, например, подвержены выделению избыточных количеств глюкагона, поднимающего глюкозу в крови сразу после приема пищи.

По многочисленным причинам, амилин человека, имеющий период полужизни в сыворотке около 13 минут, не поддается применению в качестве терапевтического агента. Скорее, прамлинтид (Symlin®, разработанный Amylin Pharmaceuticals, Inc., Сан-Диего, штат Калифорния, США, и продается AstraZeneca plc, Кембридж, Соединенное Королевство), был разработан в виде синтетического аналога амилина человека для лечения пациентов с диабетом 1-го или 2-го типа, который использует инсулин при приеме еды, но не может достичь желаемого гликемического контроля, несмотря на оптимальную инсулиновую терапию. Прамлинтид отличается от амилина человека в 3 из 37 аминокислот. Эти модификации обеспечивают прамлинтиду более длительные периоды полужизни в течение приблизительно 48 минут и снижают его способность к агрегации, характерной для амилина человека.

Для лечения диабета 1-го типа прамлинтид вводят до четырех раз в сутки, посредством подкожной инъекции перед приемом пищи, в качестве добавки к инсулиновой терапии, вводимой после приема пищи. Прамлинтид не может быть смешан с инсулином; при этом используются отдельные шприцы. Сообщенные побочные эффекты прамлинтида включают тошноту и рвоту. Нежелательные реакции могут включать серьезную гипогликемию, особенно для диабета 1-го типа. Следовательно, дозировка инсулина во время приема пищи снижается для пациентов, которые инициируют введение прамлинтида.

Для лечения диабета 2-го типа прамлинтид вводят перед каждым приемом пищи посредством подкожной инъекции при рекомендованной исходной дозе, которая постепенно увеличивается до целевой технической дозы. Еще один исследовательский аналог амилина человека - давалинтид (АС2307; также разработанный Amylin Pharmaceuticals, Inc.), имеет период полужизни около 26 минут.

Соответственно, существует потребность в улучшении полипептидов аналога амилина, которые имитируют активность амилина, еще представляют собой больший терапевтический потенциал, чем эндогенный амилин человека, так и существующие аналоги амилина, такие как прималинтид и давалинтид.

СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Было обнаружено, что полипептиды по данному изобретению и их фармацевтически приемлемые композиции эффективны в качестве аналогов амилина. Такие полипептиды имеют общую формулу SEQ ID NO: 199:

X₁CX₃TX₅X₆CX₈TX₁₀RX₁₂X₁₃X₁₄X₁₅X₁₆X₁₇X₁₈X₁₉X₂₀NX₂₂FGPILPX₂₉TX₃₁VGSX₃₅TX₃₇-(OH/NH₂) (SEQ ID NO: 199), или его фармацевтически приемлемая соль, где:

X₁ представляет собой S, K, k, Н или I; Х₃ представляет собой N или S; Х₅ представляет собой S или А; Х₆ представляет собой Т или S; X₈ представляет собой А или K; Х₁₀ представляет собой Q или S; Х₁₂ представляет собой L или K; Х₁₃ представляет собой A, S, Е или K; Х₁₄ представляет собой N, n, d, Y или Q; Х₁₅ представляет собой Е, F, f, Y, I, k, K или α-аминоизомасляную кислоту (Aib); X₁₆ представляет собой k, K, L, Aib, N-метил лейцин (N-MeL) или 1; Х₁₇ представляет собой Н, V, Q, R, k, K или Aib; X₁₈ представляет собой K, Н, или R; Х₁₉ представляет собой S или Aib; Х₂₀ представляет собой S или Aib; Х₂₂ представляет собой N или Е; Х₂₉ представляет собой Р, R или K; Х₃₁ представляет собой k, K, N или Н; Х₃₅ представляет собой е, Е, N, K, G, A, Y или Р, а Х₃₇ представляет собой Y или Р;

каждый K независимо представляет собой L-лизин необязательно, ковалентно связанный с липофильным заместителем, необязательно через спейсер;

каждый k независимо представляет собой D-лизин необязательно, ковалентно связанный с липофильным заместителем, необязательно через спейсер;

при этом два остатка цистеина Х₁СХ₃ТХ₅Х₆С необязательно дополнительно связаны дисульфидным мостиком;

при условии, что если Х₃₁ представляет собой N, тогда Х₃₅ представляет собой Е, или если Х₃₅ представляет собой N, тогда Х₃₁ представляет собой K.

Краткое описание графических материалов

Фиг. 1 представляет собой таблицу, иллюстрирующую сравнительные выравнивания последовательностей для определенных эталонных полипептидов: амилин человека, SEQ ID NO: 300; амилин крысы, SEQ ID NO: 301; прамлинтид, SEQ ID NO: 302; давалинтид, SEQ ID NO: 303; hCT (кальцитонин человека), SEQ ID NO: 304; sCT (кальцитонин лосося), SEQ ID NO: 305 и пептид, связанный с геном бета-кальцитонина (β-CGRP), SEQ ID NO: 306.

На фиг. 2А, 2В, 2С и 2D приведены кривые дозы-ответа для ацилированного аналога амилина А73 на hAMY3R (фиг. 2А), ацилированного аналога амилина А73 на hCTR (фиг. 2В), прамлинтида на hAMY3R (фиг. 2С) и кальцитонина человека (hCalcitonin) на hCTR (фиг. 2D). Термин «ацилированный», используемый в данном документе, в отношении раскрытых полипептидов означает, что раскрытый полипептид замещен одним или более липофильными заместителями, которые каждый необязательно присоединен через спейсер, в котором «липофильный заместитель» и «спейсер» определены в данном документе.

На фиг. 3А и 3В приведены данные фармакокинетических исследований для оценки клиренса полипептида из почек (CL) после внутривенной инфузии линейных, то есть неацилированных, полипептидов (фиг. 3А) и конъюгированных, то есть ацилированных, полипептидов (фиг. 3В).

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ СУЩНОСТИ ИЗОБРЕТЕНИЯ

1. Общее описание определенных вариантов осуществления изобретения

Данное изобретение относится к выделенным полипептидам, которые являются аналогами амилина, а также фармацевтическим композициям, содержащим эти полипептиды. Данное изобретение также относится к способам получения и применения таких полипептидов аналога амилина. Эти полипептиды аналога амилина особенно полезны в способах лечения метаболических заболеваний или расстройств, таких как диабет 1-го и 2-го типа, ожирение и в способах обеспечения потери массы.

2. Определения

Понятно, что использованная в данном документе терминология предназначена исключительно для описания конкретных вариантов осуществления изобретения, и не предназначена для ограничения объема описания. Использование в данном описании и в прилагаемой формуле изобретения форм единственного числа включает ссылку на множественное число, если в контексте явно не указано иное. Так, например, ссылка на «растворитель» включает в себя комбинацию из двух или большего количества таких растворителей, ссылка на «пептид» включает в себя один или несколько пептидов или смесь пептидов, ссылка на «лекарственное средство» включает в себя один или несколько препаратов, ссылка на «осмотическое устройство доставки» включает в себя одно или более осмотических устройств доставки, и тому подобное. Если специально не оговорено или не очевидно из контекста, при использовании в данном документе термин «или» понимается как включающий и охватывает как «или», так и «и».

Если специально не оговорено или не очевидно из контекста, при использовании в данном документе термин «около» понимается как «в пределах диапазона нормального допуска» в данной области техники, например, в пределах 2 стандартных отклонений от среднего значения. «Около» или «приблизительно» можно понимать как в пределах 10%, 9%, 8%, 7%, 6%, 5%, 4%, 3%, 2%, 1%, 0,5%, 0,1%, 0,05%, или 0,01% от указанного значения. Если иное ясно из контекста, все числовые значения, представленные в данном документе, модифицированы термином «около» или «приблизительно».

Если явно не оговорено или не очевидно из контекста, при использовании в данном документе термин «по существу» понимается как «в узком диапазоне изменения» или иным образом в пределах нормального допуска в данной области техники. По существу, можно понимать как в пределах 5%, 4%, 3%, 2%, 1%, 0,5%, 0,1%, 0,05%, 0,01% или 0,001% от указанного значения.

Если не определено иное, все технические и научные термины, используемые в настоящем документе, имеют такое же значение, которое обычно понимается обычным специалистом в области техники, к которой относится изобретение. Хотя в практике данного изобретения могут быть использованы другие способы и материалы, аналогичные или эквивалентные описанным в данном документе, описанные в данном документе материалы и способы являются предпочтительными.

В описании и формуле данного изобретения будет использоваться следующая терминология в соответствии с определениями, изложенными ниже.

Термины «лекарственное средство», «терапевтический агент» и «полезное вещество» используются взаимозаменяемо для обозначения любого терапевтически активного вещества, которое доставляется субъекту для получения желаемого положительного эффекта. В одном из вариантов осуществления данного изобретения лекарственное средство представляет собой полипептид. В другом варианте осуществления данного изобретения лекарственное средство представляет собой малую молекулу, например, гормоны, такие как андрогены или эстрогены. Устройства и способы по данному изобретению хорошо подходят для доставки белков, малых молекул и их комбинаций.

Термины «пептид», «полипептид» и «белок» используются в данном документе взаимозаменяемо и обычно относятся к молекуле, содержащей цепь из двух или более аминокислот (например, наиболее типично, L-аминокислот, но также включая, например, D-аминокислоты, модифицированные аминокислоты, аналоги аминокислот и миметики аминокислот).

В некоторых вариантах осуществления, природные L-аминокислоты, представлены либо обычным трехбуквенным, либо заглавным однобуквенным обозначением аминокислот из таблицы 1. В других вариантах осуществления, природные L-аминокислоты и D-аминокислоты, представляют собой обычные трехбуквенные или заглавные однобуквенные обозначения аминокислот из таблицы 1. В других вариантах осуществления D-аминокислоты, представлены однобуквенным обозначением в нижнем регистре, соответствующие однобуквенным обозначениям из таблицы 1, т.е., g, а, 1, m, f, w, k, q, e, s, p, v, i, с, y, h, r, n, d и t.

Пептиды могут быть встречающимися в природе, синтетическими или рекомбинантно экспрессироваными. Пептиды также могут содержать дополнительные группы, модифицирующие цепи аминокислот, например, функциональные группы, добавленные посредством посттрансляционной модификации. Примеры посттрансляционных модификаций включают, но не ограничиваются ими, ацетилирование, алкилирование (в том числе метилирование), биотинилирования, глутамилирование, глицилирование, гликозилирование, изопренилирование, липоилирование, фосфопантетеинилирование, фосфорилирование, селенирование и С-концевое амидирование. Термин «пептид» также включает пептиды, содержащие модификации амино-конца и/или карбокси-конца. Модификации концевой аминогруппы включают, но не ограничиваются ими, дезаминирование, модификации с завлечением N- низшего алкила, N-ди-низшего алкила и N-ацила. Модификации карбоксильной группы терминала включают в себя, но не ограничиваются ими, модификации с завлечением амида, низшего алкиламида, диалкиламида и сложного эфира низшего алкила (например, где низший алкил представляет собой С1-С4-алкил). Термин «пептид» также включает модификации, такие как, не ограничиваясь ими, описанные выше, аминокислот, расположенных между амино- и карбокси-концами. В одном варианте осуществления, пептид может быть модифицирован добавлением низкомолекулярного лекарственного средства.

Концевая аминокислота на одном конце пептидной цепи, как правило, имеет свободную аминогруппу (например, амино-конец). Концевая аминокислота на другом конце цепи, как правило, имеет свободную карбоксильную группу (например, карбокси-конец). Как правило, аминокислоты, образующие пептид, пронумерованы в порядке начиная с амино-конца с увеличением значений в направлении карбокси-конца пептида.

Фраза «аминокислотный остаток», используемая в данном описании, относится к аминокислоте, которая включена в пептид посредством амидной связи или миметика амидной связи.

Термин «инсулинотропный», используемый в данном описании, как правило, относится к способности соединения, например, пептида, стимулировать или влиять на производство и/или активность инсулина (например, инсулинотропное гормон). Такие соединения, как правило, стимулируют или иным образом влияют на секрецию или биосинтез инсулина у субъекта. Таким образом, «инсулинотропный пептид» представляет собой молекулу, содержащую аминокислоту, способную стимулировать или иным образом влияет на секрецию или биосинтез инсулина.

Термин «инсулинотропный пептид», используемый в данном документе, включает, но не ограничиваясь ими, глюкагон-подобный пептид 1 (GLP-1), а также его производные и аналоги, агонисты рецептора GLP-1, такие как эксенатид, эксенатид с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 307, а также их производные и аналоги.

Термин «ацилированный», используемый в данном документе, в отношении раскрытых полипептидов означает, что раскрытый полипептид замещен одним или более липофильными заместителями, которые каждый необязательно присоединен через спейсер, в котором «липофильный заместитель» и «спейсер» определены в данном документе. Определенные липофильные заместители, каждый, необязательно через спейсер, могут связывать альбумин и проявляют аффинность к альбумину с полученным ацилированным полипептидом. Степень представляет собой переменную, и в зависимости от многочисленных факторов, к которым липофильные заместители, каждый, необязательно через спейсер, связывают альбумин и проявляют аффинность к альбумину с полученным ацилированным полипептидом. Многочисленные факторы включают особенности липофильного заместителя, необязательный спейсера, полипептида и место ковалентного присоединения к полипептиду.

Термины «линейный» или « линейный полипептид», используемые в данном документе, относятся к «неацилированному» полипептиду, другими словами, к раскрытым аналогам полипептида амилина без липофильных заместителей, каждый из которых необязательно присоединен через спейсер, причем «липофильный заместитель» и «спейсер» определены в данном документе.

Термины «конъюгированный» или «конъюгированный полипептид» в контексте данного документа, относятся к «ацилированному» полипептиду, другими словами, раскрытый аналог полипептида амилина, имеющий один или более липофильных заместителей, каждый необязательно присоединен через спейсер, причем «липофильный заместитель» и «спейсер» определены в данном документе.

Используемый в данном документе термин «фармацевтически приемлемая соль» относится к тем солям, которые, в рамках здравого медицинского заключения, подходят для использования в контакте с тканями людей и низших животных без чрезмерной токсичности, раздражения, аллергической реакции и т.п., и соизмеримы разумному соотношению польза/риск. Фармацевтически приемлемые соли хорошо известны в данной области техники. Например, S.М. Berge et al., подробно описывает фармацевтически приемлемые соли в J. Pharmaceutical Sciences, 1977, 66, 1-19, включенной в данный документ посредством ссылки. Фармацевтически приемлемые соли соединений согласно этому изобретению включают соли, полученные из подходящих неорганических и органических кислот и оснований. Примерами фармацевтически приемлемых кислотно-аддитивных солей являются соли аминогруппы, образуемые с неорганическими кислотами, такими как хлористоводородная кислота, бромистоводородная кислота, фосфорная кислота, серная кислота и перхлорная кислота, или с органическими кислотами, такими как уксусная кислота, трифторуксусная кислота (TFA), щавелевая кислота, малеиновая кислота, винная кислота, лимонная кислота, янтарная кислота или малоновая кислота, или с помощью других использованных в данной области методов, таких как ионный обмен. Другие фармацевтически приемлемые соли включают адипат, альгинат, аскорбат, аспартат, бензенсульфонат, бензоат, бисульфат, борат, бутират, камфорат, камфорсульфонат, цитран, циклопентанпропионат, диглюконат, додецилсульфат, этансульфонат, формат, фумарат, глюкогептонат, глицерофосфат, глюконат, гемисульфат, гептаноат, гексаноат, гидройодид, 2-гидроксиэтансульфонат, лактобионат, лактат, лаурат, лаурилсульфат, малат, малеат, малонат, метансульфонат, 2-нафталенсульфонат, никотинат, нитрат, олеат, оксалат, пальмитат, памоат, пектинат, персульфат, 3 фенилпропионат, фосфат, пивалат, пропионат, стеарат, сукцинат, сульфат, тартрат, тиоцианат, п-толуолсульфонат, ундеканоат, валерат и т.д.

Соли, полученные из соответствующих оснований, включают соли щелочных металлов, щелочноземельных металлов, аммония и N+(C1-4 алкилов)4. Типовые соли щелочных или щелочноземельных металлов включают соли натрия, лития, калия, кальция, магния и т.д. Дополнительные фармацевтически приемлемые соли включают, в соответствующих случаях, нетоксичные катионы аммония, четвертичного аммония и аминов, образуемые с участием противоионов, такие как галид, гидроксид, карбоксилат, сульфат, фосфат, нитрат, низший алкилсульфонат и арилсульфонат.

Фраза «миметики инкретина», используемые в данном документе, включают, без ограничения пептид GLP-1, агонист рецептора GLP-1, производные пептида GLP-1, аналоги пептида GLP-1; эксенатид, эксенатид, имеющий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 307, пептид эксенатида, производные пептида эксенатида и аналоги пептида эксенатида. Примеры предпочтительных инкретиновых миметиков включают эксенатид, эксенатид с аминокислотной последовательностью эксендина-4 (природная форма эксенатида, эксенатид-LAR, ликсисенатид, GLP-1 (7-36), лираглютид, семаглютид, дулаглютид, алюиглютид и таспоглютид. Инкретиновые миметики также упоминаются в данном документе как « инсулинотропное пептиды». Инкретиновые миметики, нацеленные на рецепторы GLP-1, также известны в литературе как «агонисты рецептора GLP-1» или «агонисты GLP-1», причем оба термина используются в данном документе взаимозаменяемо.

Термин «эксенатид», в контексте данного документа, включает, без ограничения, эксенатид, эксенатид, имеющий аминокислотную последовательность (HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-NH₂), SEQ ID NO: 307, природный эксендин-4, пептид эксенатида, пептидные аналоги эксенатида и пептидные производные эксенатида.

Термин «GLP-1» относится к полипептиду, который вырабатывается L-клетками, расположенными в основном в подвздошной кишке и ободочной кишке, и в меньшей степени L-клетками в двенадцатиперстной кишке и тощей кишке. GLP-1 представляет собой регуляторный пептид, который связывается с внеклеточной областью рецептора GLP-1 (GLP-1R), рецептора, сопряженного с G-белком на β-клетке и через активность аденилсациклазы и продуцирование с AMP стимулирует реакцию инсулина на питательные вещества, которые поглощаются из кишечника [Baggio 2007, "Biology of incretins: GLP-1 and GIP," Gastroenterology, vol. 132(6):2131-57; Hoist 2008, "The incretin system and its role in type 2 diabetes mellitus," Mol Cell Endocrinology, vol. 297(1-2): 127-36]. Эффекты агонизма GLP-1R является множественным. GLP-1 поддерживает гомеостаз глюкозы путем усиления эндогенной глюкозозависимой секреции инсулина, рендеринг р-клеток, глюкозокомпетентных и чувствительных к GLP-1, подавления выделения глюкагона, восстановления первой и второй фаз секреции инсулина, замедления опорожнения желудка, уменьшения потребления пищи и увеличения сытости [Hoist 2008 Mol. Cell Endocrinology; Kjems 2003 "The influence of GLP-1 on glucose-stimulated insulin secretion: effects on beta-cell sensitivity in type 2 and nondiabetic subjects," Diabetes, vol. 52(2): 380-86; Hoist 2013 "Incretin hormones and the satiation signal," Int J Obes (Lond), vol. 37(9): 1161-69; Seufert 2014, "The extra-pancreatic effects of GLP-1 receptor agonists: a focus on the cardiovascular, gastrointestinal and central nervous systems," Diabetes Obes Metab, vol. 16(8): 673-88]. Риск гипогликемии минимален, учитывая способ действия GLP-1.

Как более подробно описано ниже, в некоторых вариантах осуществления полипептиды аналога амилина, раскрытые в данном документе, предложены в способах лечения диабета 1-го типа, в качестве дополнения к лечению инсулином. Термин «инсулин», используемый в данном документе, относится к инсулину человека или любым аналогам инсулина. Иллюстративные неограничивающие аналоги инсулина включают приведенные в таблице 2:

В контексте данного документа термин «инсулин для применения при приеме пищи», относится к составу быстродействующего инсулина, который достигает пиковой концентрации в крови через приблизительно 45-90 минут и пиковую активность приблизительно от 1 до 3 часов после введения, и его вводят во время приема пищи или в ближайшее время с ним.

Термин «носитель», используемый в данном документе, относится к среде, используемой для несения соединения, например, лекарственного средства или частицы, содержащей лекарственное средство. Носители по настоящему изобретению, как правило, содержат такие компоненты как полимеры и растворители. Носители в виде суспензий по настоящему изобретению обычно содержат растворители и полимеры, которые используются для приготовления суспензионных композиций, дополнительно содержащих составы на основе частиц лекарственного средства.

Фраза «разделение фаз», используемая в данном описании, относится к образованию нескольких фаз (например, жидкой и гелевой фазы) в носителе для суспензии, например, при контакте носителя для суспензии с водной средой. В некоторых вариантах осуществления данного изобретения, носитель для суспензии изготовлен таким образом, что он демонстрирует разделение фаз при контакте с водной средой, содержащей менее чем около 10% воды.

Фраза «однофазный», используемая в данном описании, относится к твердой, полутвердой или жидкой гомогенной системе, которая физически и химически равномерна по всему объему.

Термин «диспергированный», используемый в данном описании, относится к растворению, диспергированию, суспендированию или иным образом распределению соединения, например лекарственного средства, в носителе для суспензии.

Фраза «химически стабильная», используемая в данном описании, относится к образованию в составе приемлемого процента продуктов разложения, продуцируемых в течение определенного периода времени химическими путями, такими как дезамидированне (обычно путем гидролиза), агрегация или окисление.

Фраза «физически стабильный», используемая в данном описании, относится к формированию в композиции приемлемого процент агрегатов (например, димеров и других продуктов с более высокой молекулярной массой). Кроме того, физически стабильная композиция не изменяет своего физического состояния, например, от жидкости до твердого вещества или от аморфной до кристаллической формы.

Термин «вязкость», используемый в данном описании, как правило, относится к значению, определенному на основе отношения напряжения сдвига к скорости сдвига (см., например, Considine, D.М. & Considine, G.D., Encyclopedia of Chemistry, 4th Edition, Van Nostrand, Reinhold, N.Y., 1984), по существу следующим образом:

где F/A = напряжение сдвига (сила на единицу площади),

μ = коэффициент пропорциональности (вязкость), и

V/L = скорость в зависимости от толщины слоя (скорость сдвига).

На основе данного соотношения отношение напряжения сдвига к скорости сдвига определяет вязкость. Измерения напряжения сдвига и скорости сдвига, как правило, определяется с использованием реометра с параллельными пластинами, реометрия была выполнена при выбранных условиях (например, при температуре около 37°С). Другие способы определения вязкости включают в себя измерение кинематической вязкости с использованием вискозиметров, например, вискозиметра Кэннон-Фенске, вискозиметра Уббелоде в непрозрачном растворе Кэннон-Фенске или вискозиметра Оствальда. Как правило, носители для суспензии по настоящему изобретению имеют вязкость, достаточную для предотвращения осаждения взвешенных в ней частиц во время хранения и использования при способе доставки, например, в имплантируемом устройстве доставки лекарственного средства.

Термин «неводный», используемый в данном описании, относится к общему содержанию влаги, например, в композиции в виде суспензии, как правило, менее или равному около 10% масс., например, менее или равному около 7% масс., менее или равному около 5% масс., и/или менее чем около 4% мас. Кроме того, композиция частиц по настоящему изобретению, содержит менее чем около 10% масс., например, менее чем около 5% масс., остаточной влаги.

Термин «субъект», используемый в данном документе, относится к любому члену подтипа Хордовых, в том числе, без ограничения, людям и других приматам, включая отличных от человека приматов, таких как макак резус и других видов обезьян, шимпанзе и других видов человекообразных обезьян; сельскохозяйственным животным, таким как крупный рогатый скот, овцы, свиньи, козы и лошади; домашние животные, такие как собаки и кошка; лабораторные животные, включая грызунов, таких как мыши, крысы и морские свинки; птицы, включая домашних, диких и промысловых птиц, таких как куры, индейки и других представители отряда курообразных, утки, гуси и тому подобное. Этот термин не обозначает конкретный возраст или пол. Таким образом, предполагается охватить как взрослых, так и новорожденных.

В контексте данного документа термины «лечение», «лечить» и «процесс лечения» относятся к обращению, облегчению, задержке начала или ингибированию прогресса заболевания или расстройства или их нескольких симптомов, описанных в данном документе. В некоторых вариантах реализации лечение можно применять после развития одного или более симптомов. В других вариантах реализации лечение можно применять в отсутствие симптомов. Например, лечение можно применять в отношении пациента с предрасположенностью до начала симптомов (например, с учетом анамнеза симптомов и/или с учетом генетических или других факторов предрасположенности). Лечение также можно продолжать после устранения симптомов, например, для предотвращения или замедления их рецидива.

Термин «осмотическое устройство доставки», используемый в данном документе, как правило, относится к устройству, используемому для доставки лекарственного средства (например, раскрытого полипептида аналога амилина) субъекту, причем устройство включает в себя, например, резервуар (изготовленный, например, из титанового сплава), имеющий просвет, который содержит состав в виде суспензии, содержащий лекарственное средство (например, раскрытый полипептид аналога амилина) и состав осмотического вещества. Поршневой узел, расположенный в просвете, изолирует состав в виде суспензии от состава осмотического вещества. Полупроницаемая мембрана, расположенная на первом дистальном конце резервуара, примыкает к составу осмотического вещества; замедлитель диффузии (который определяет отверстие доставки, через которое состав в виде суспензии выходит из устройства) расположен на втором дистальном конце резервуара и примыкает к составу в виде суспензии. Как правило, осмотическое устройство доставки имплантируется субъекту, например, субдермально или подкожно (например, во внутреннюю часть, наружную часть или заднюю часть верхней плеча и в области живота). Примером осмотического устройства доставки является устройство доставки DUROS® (ALZA Corporation, Mountain View, СА). Примеры синонимов терминов «осмотическое устройство доставки» включают, но не ограничиваются ими, «осмотическое устройство доставки лекарственного средства», «осмотическая системой доставки лекарственного средства», «осмотическое устройство», «осмотическое устройство доставки», «осмотическая система доставки», «осмотический насос» «имплантируемое устройство для доставки препаратов», «система доставки препаратов», «устройство для доставки препаратов», « имплантируемый осмотический насос», «имплантируемая система доставки препаратов» и «имплантируемая система доставки». Другие термины для «осмотического устройства доставки» известны в данной области техники.

Термин «непрерывная доставка», используемый в данном документе, как правило, относится к по существу, непрерывному высвобождению лекарственного средства из осмотического устройства доставки в ткань вблизи места имплантации, например, в субдермальной и подкожной ткани. Например, осмотическое устройство доставки высвобождает лекарственное средство по существу при заданной скорости на основании принципа осмоса. Внеклеточная жидкость поступает в осмотическое устройство доставки через полупроницаемую мембрану непосредственно в осмотический двигатель, который расширяется, приводя в действие поршень при низкой и стабильной скорости движения. Движение поршня выталкивает состав лекарственного средства, через отверстие замедлителя диффузии. Таким образом, высвобождение лекарственного средства из осмотического устройства доставки происходит с низкой, контролируемой и стабильной скоростью.

Термин «по существу стабильная доставка», используемый в данном документе, как правило, относится к доставке лекарственного средства в целевой концентрации или приближенной к целевой концентрации в течение определенного периода времени, при этом количество лекарственного средства которое доставляется из осмотического устройства доставки, по существу соответствует доставке нулевого порядка. Доставка активного вещества по существу нулевого порядка (например, раскрытого полипептида аналога амилина) означает, что скорость поставки лекарственного средства постоянна и не зависит от лекарственного средства, доступного в системе доставки; например, для доставки нулевого порядка, если скорость поставки лекарственного средства по отношению ко времени изобразить на графике и изображенная линия соответствует данным, то линия имеет наклон около нуля в соответствии с определением с помощью стандартных методов (например, линейной регрессии).

Фраза «период полураспада лекарственного средства», используемая в данном документе, относится к тому, сколько времени понадобится для выведения лекарственного средства из плазмы крови до половины его концентрации. Период полураспада лекарственного средства обычно измеряется путем мониторинга снижения уровня лекарственного средства при его введении посредством инъекций или внутривенно. Лекарственное средство обычно определяют с использованием, например, радиоиммуноанализ (РИА), хроматографического способа анализа, электрохемилюминесцентного (ECL) анализа, иммуноферментного твердофазного анализа (ИФА) или иммуноферментного сэндвич-анализа (сэндвич-ИФА).

Термин «мкг» следует понимать как «микрограммы». Аналогичным образом, термин «мкл» следует понимать как «микролитр», а термин «мкМ»следует понимать как «мкмоль/л».

Термин «сыворотка» предназначен для обозначения любого продукта крови, в котором может быть обнаружено вещество. Таким образом, термин «сыворотка» включает по меньшей мере цельную кровь, сыворотку и плазму. Например, «количество [вещества] в сыворотке субъекта» будет охватывать «количество [вещества] в плазме субъекта».

Исходный уровень определяются как последняя оценка в день первичного размещения осмотического устройства доставки (содержащего лекарственное средство или плацебо) или до дня первичного размещения.

3. Эндогенный амилин, связанные пептиды и рецепторы амилина

Амилин человека - полипептидный гормон размером 37 остатков, совместно секретируется с инсулином из β-клеток поджелудочной железы. Потеря функции β-клеток, которая происходит в начале диабета 1-го типа и может проявится в конце диабета 2-го типа, она приводит к недостаточной секреции инсулина и амилина. Считается, что амилин играет роль в гликемическом регулировании путем замедления опорожнения желудка и способствования сытости, тем самым предотвращая послеобеденные пики уровней глюкозы в крови. Общий эффект представляет собой замедление скорости появления глюкозы в крови после еды.

Аминокислотная последовательность амилина наиболее тесно связана с таковой у пептида, связанного с геном кальцитонина (CGRP). CGRP также имеет одинаково расположенную дисульфидную связь и амидированный С-конец. Это также характерно для кальцитонина, адреномедуллина и адреномедулина 2. Вместе эти пептиды образуют небольшое семейство, объединенное этими характерными чертами. Следовательно, существует степень перекрытия в связывании родственных рецепторов для каждого пептида и фармакологической активности. Таблица на фиг. 1 иллюстрирует сравнительные выравнивания последовательности для амилина и определенных родственных эталонных полипептидов.

Пептиды, как правило, обозначены как пептиды члены семейства кальцитонина (СТ), включают пептид, связанный с геном кальцитонина (CGRP), кальцитонин (СТ), амилин (AMY), адреномедуллин 1 и адреномедуллин 2/интермедин (ADM1, ADM2 соответственно). Два белка рецептора, сопряженных с G-белком, (рецептор кальцитонина; CTR и рецептор кальцитонин-подобного рецептора; CALCRL) и три белка, модифицирующие активность рецептора, (RAMP1, RAMP2, RAMP3) составляют фармакологически различные рецепторы для всего семейства пептидов (CTR, AMY1, AMY2, AMY3, CGRPR, AM1, АМ2). Похоже, что есть по меньшей мере пять различных рецепторов, с которыми амилин связывается со значительной аффинностью (AMY1, AMY2, AMY3, CTR, CGRPR). CTR димеризирует с RAMP 1, 2 или 3 для восстановления рецепторов AMY1, AMY2 или AMY3 с фармакологией избирательной для амилина по сравнению с кальцитонином. При отсутствии RAMP, фармакология CTR становится кальцитонин селективной по сравнению с амилином. CALCRL, димеризованный с RAMP1, создает CGRPR с высокой аффинностью к CGRP и уменьшенной аффинностью для всех других членов семейства пептидов, включая амилин. CALCRL и RAMP2 или RAMP3, восстанавливают фармакологию AM1 и АМ2 соответственно с очень низкой аффинностью к амилину или без нее.

Были разработаны аналоги полипептида амилина, имеющие аффинность связывания с комплексами рецептора амилина. Прамлинтид, например, был разработан Amylin Pharmaceuticals, и утвержден Управлением по надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов США (FDA), в качестве синтетического аналога амилина человека для лечения диабета типов 1 и 2, которые используют инсулин во время при приема пищи, но не могут достичь желаемого гликемического контроля несмотря на оптимальную инсулиновую терапию. Прамлинтид представляет собой амилиномиметичный агент, который имеет по меньшей мере сопоставимую активность с амилином человека. Он также представляет собой полипептид размером 37 аминокислот, и отличается аминокислотной последовательностью от амилина человека путем замены аминокислот на пролин в положениях 25 (аланин), 28 (серин) и 29 (серин). В результате этих замен, прамлинтид растворим, не прилипающий и неагрегирующий, тем самым преодолевается ряд физико-химических недостатков нативного амилина человека. Период полужизни прамлинтида составляет около 48 минут у людей, дольше, чем у нативного амилина человека (около 13 минут). Прамлинтид требует частого и неудобного введения.

Для лечения диабета 1-го типа прамлинтид вводят до четырех раз в сутки, посредством подкожной инъекции в бедро или область живота перед приемом пищи, в качестве добавки к инсулиновой терапии, вводимой после приема пищи. Прамлинтид не может быть смешан с инсулином; при этом используются отдельные шприцы. Прамлинтид вводят или перед каждым приемом пищи или перекусом, состоит не менее 250 калорий или 30 г углеводов. Типичная исходная доза для диабета 1-го типа составляет 15 мкг прамлинтида подкожно перед каждым приемом пищи, с последующим титрованием до целевой дозы 60 мкг до каждого приема пищи. Сообщенные побочные эффекты прамлинтида включают тошноту и рвоту. Нежелательные явления, особенно для диабета 1-го типа, могут включать тяжелую гипогликемию. Следовательно, дозировка инсулина во время приема пищи снижается для пациентов с диабетом, которые инициируют введение прамлинтида.

Для лечения диабета 2-го типа прамлинтид вводят посредством подкожной инъекции при рекомендованной начальной дозе 60 мкг, с целевой поддерживающей дозе 120 мкг до каждого приема пищи.

Давалинтид (АС2307) представляет собой еще один аналог амилина человека. Давалинтид является экспериментальным соединением с периодом полужизни около 26 минут. Как и прамлинтид, давалинтид также требует частого введения посредством инъекции.

Определенные раскрытые полипептиды аналога амилина, включая приведенные в таблице 3 ниже, демонстрируют одно или более из: превосходной растворимости, стабильности, биологической активности и специфичности и более длительного периода полужизни, чем эндогенный амилин человека и известные синтетических полипептиды аналога амилина. Определенные раскрытые полипептиды аналога амилина были разработаны для осуществления менее частых введений, чем требуется для прамлинтида. Определенные раскрытые полипептиды аналога амилина были разработаны для введения посредством еженедельных или ежемесячных инъекций. Определенные раскрытые полипептиды аналога амилина были разработаны для введения посредством имплантации устройства доставки, содержащего полипептид аналога амилина, причем устройство доставки содержит дозу полипептида аналога амилина на 3 месяца, 6 месяцев, 9 месяцев, один год, 18 месяцев или два года.

4. Описание иллюстративных вариантов осуществления

В определенных вариантах осуществления данное изобретение относится к выделенным полипептидам, которые являются аналогами амилина.

В некоторых вариантах осуществления выделенный полипептид по данному изобретению содержит аминокислотную последовательность, или ее фармацевтически приемлемую соль, выбранную из группы, состоящей из аминокислотных последовательностей, представленных консенсусной последовательностью SEQ ID NO: 199:

X₁CX₃TX₅X₆CX₈TX₁₀RX₁₂X₁₃X₁₄X₁₅X₁₆X₁₇X₁₈X₁₉X₂₀NX₂₂FGPILPX₂₉TX₃₁VGSX₃₅TX₃₇-(OH/NH₂) (SEQ ID NO: 199), или его фармацевтически приемлемая соль, где:

X₁ представляет собой S, K, k, Н или I;

Х₃ представляет собой N или S;

Х₅ представляет собой S или А;

Х₆ представляет собой Т или S;

Х₈ представляет собой А или K;

Х₁₀ представляет собой Q или S;

Х₁₂ представляет собой L или K;

Х₁₃ представляет собой A, S, Е или K;

Х₁₄ представляет собой N, n, d, Y или Q;

Х₁₅ представляет собой Е, F, f, Y, I, k, K или α-аминоизомасляную кислоту (Aib);

X₁₆ представляет собой k, K, L, Aib, N-метиллейцин (N-MeL), или 1;

Х₁₇ представляет собой Н, V, Q, R, k, K или Aib;

X₁₈ представляет собой K, Н, или R;

Х₁₉ представляет собой S или Aib;

Х₂₀ представляет собой S или Aib;

Х₂₂ представляет собой N или Е;

Х₂₉ представляет собой Р, R или K;

Х₃₁ представляет собой k, K, N, или Н;

Х₃₅ представляет собой е, Е, N, K, G, A, Y, или Р, и

Х₃₇ представляет собой Y или Р;

каждый K независимо представляет собой L-лизин необязательно, ковалентно связанный с липофильным заместителем, необязательно через спейсер;

каждый k независимо представляет собой D-лизин необязательно, ковалентно связанный с липофильным заместителем, необязательно через спейсер;

при этом два остатка цистеина Х₁СХ₃ТХ₅Х₆С необязательно дополнительно связаны дисульфидным мостиком;

при условии, что если Х₃₁ представляет собой N, тогда Х₃₅ представляет собой Е, или если Х₃₅ представляет собой N, тогда Х₃₁ представляет собой K.

В некоторых вариантах осуществления Х₃₁ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления Х₃₁ представляет собой N.

В некоторых вариантах осуществления Х₃₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления Х₃₅ представляет собой N.

В некоторых вариантах осуществления, определенные аминокислоты, представленные консенсусной последовательностью SEQ ID NO: 199, включают следующие:

В некоторых вариантах осуществления карбоксиконцевой Х₃₇ представляет собой Y-(NH₂). В некоторых вариантах осуществления карбоксиконцевой Х₃₇ представляет собой Y-(OH). В некоторых вариантах осуществления карбоксиконцевой Х₃₇ представляет Р-(NH₂). В некоторых вариантах осуществления карбоксиконцевой Х₃₇ представляет собой Р-(ОН).

В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой S. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой k. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой I.

В контексте данного документа k обозначает D-лизин.

В некоторых вариантах осуществления Х₃ представляет собой N. В некоторых вариантах осуществления Х₃ представляет собой S.

В некоторых вариантах осуществления Х₅ представляет собой S. В некоторых вариантах осуществления Х₅ представляет собой А.

В некоторых вариантах осуществления Х₆ представляет собой Т. В некоторых вариантах осуществления Х₆ представляет собой S.

В некоторых вариантах осуществления X₈ представляет собой А. В некоторых вариантах осуществления X₈ представляет собой K.

В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой Q. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой S.

В некоторых вариантах осуществления Х₁₂ представляет собой L. В некоторых вариантах осуществления Х₁₂ представляет собой K.

В некоторых вариантах осуществления Х₁₃ представляет собой А. В некоторых вариантах осуществления Х₁₃ представляет собой S. В некоторых вариантах осуществления Х₁₃ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления Х₁₃ представляет собой K.

В некоторых вариантах осуществления Х₁₄ представляет собой N. В некоторых вариантах осуществления Х₁₄ представляет собой п. В некоторых вариантах осуществления Х₁₄ представляет собой d. В некоторых вариантах осуществления Х₁₄ представляет собой Y. В некоторых вариантах осуществления Х₁₄ представляет собой Q.

В контексте данного документа n обозначает D-аспарагин.

В контексте данного документа d обозначает D-аспарагиновую кислоту.

В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой F. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой f. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой Y. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой I. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой k. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой Aib.

В контексте данного документа f обозначает D-фенилаланин.

В контексте данного документа, Aib означает альтернативно 2-аминоизомасляную кислоту, α-аминоизомасляную кислоту, α-метилаланин или 2-метилаланин.

В некоторых вариантах осуществления Х₁₆ представляет собой L. В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой I. В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой k. В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой Aib. В некоторых вариантах осуществления изобретения X₁₆ представляет собой N-MeL.

В контексте данного документа 1 обозначает D-лейцин.

В контексте данного документа N-MeL обозначает N-метиллейцин.

В некоторых вариантах осуществления Х₁₇ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления Х₁₇ представляет собой V. В некоторых вариантах осуществления Х₁₇ представляет собой Q. В некоторых вариантах осуществления Х₁₇ представляет собой R. В некоторых вариантах осуществления Х₁₇ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления Х₁₇ представляет собой k. В некоторых вариантах осуществления Х₁₇ представляет собой Aib.

В некоторых вариантах осуществления X₁₈ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления X₁₈ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления X₁₈ представляет собой R.

В некоторых вариантах осуществления Х₁₉ представляет собой S. В некоторых вариантах осуществления Х₁₉ представляет собой Aib.

В некоторых вариантах осуществления Х₂₀ представляет собой S. В некоторых вариантах осуществления Х₂₀ представляет собой Aib.

В некоторых вариантах осуществления Х₂₂ представляет собой N. В некоторых вариантах осуществления Х₂₂ представляет собой Е.

В некоторых вариантах осуществления Х₂₉ представляет собой Р. В некоторых вариантах осуществления Х₂₉ представляет собой R. В некоторых вариантах осуществления Х₂₉ представляет собой K.

В некоторых вариантах осуществления Х₃₁ представляет собой k. В некоторых вариантах осуществления Х₃₁ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления Х₃₁ представляет собой N. В некоторых вариантах осуществления Х₃₁ представляет собой Н.

В некоторых вариантах осуществления Х₃₅ представляет собой е. В некоторых вариантах осуществления Х₃₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления Х₃₅ представляет собой N. В некоторых вариантах осуществления Х₃₅ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления Х₃₅ представляет собой G. В некоторых вариантах осуществления Х₃₅ представляет собой А. В некоторых вариантах осуществления Х₃₅ представляет собой Y. В некоторых вариантах осуществления Х₃₅ представляет собой Р.

В контексте данного документа е обозначает D-глутаминовую кислоту.

В некоторых вариантах осуществления определенные аминокислоты, представленные консенсусной последовательностью SEQ ID NO: 199, включают следующие:

В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой S, а Х₅ представляет собой S. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой S, а Х₁₀ представляет собой Q. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой S, а Х₁₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой S, a X₁₆ представляет собой L. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой S, a X₁₆ представляет собой k. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой S, а Х₁₇ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой S, a X₁₈ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой S, а Х₃₁ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой S, а Х₃₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой S, а Х₃₇ представляет собой Y.

В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой K, а Х₅ представляет собой S. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой K, а Х₁₀ представляет собой Q. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой K, а Х₁₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой K, a X₁₆ представляет собой L. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой K, a X₁₆ представляет собой k. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой K, а Х₁₇ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой K, a X₁₈ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой K, а Х₃₁ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой K, а Х₃₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой K, а Х₃₇ представляет собой Y.

В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой k, а Х₅ представляет собой S. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой k, а Х₁₀ представляет собой Q. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой k, а Х₁₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой k, а X₁₆ представляет собой L. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой k, a X₁₆ представляет собой k. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой k, а Х₁₇ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой k, a X₁₈ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой k, а Х₃₁ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой k, а Х₃₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой k, а Х₃₇ представляет собой Y.

В некоторых вариантах осуществления Х₅ представляет собой S, а Х₁₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления Х₅ представляет собой S, а Х₁₀ представляет собой Q. В некоторых вариантах осуществления Х₅ представляет собой S, а X₁₆ представляет собой L. В некоторых вариантах осуществления Х₅ представляет собой S, a X₁₆ представляет собой k. В некоторых вариантах осуществления Х₅ представляет собой S, а Х₁₇ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления Х₅ представляет собой S, a X₁₈ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления Х₅ представляет собой S, а Х₃₁ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления Х₅ представляет собой S, а Х₃₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления Х₅ представляет собой S, а Х₃₇ представляет собой Y.

В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой Q, а Х₁₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой Q, а Х₁₆ представляет собой L. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой Q, а X₁₆ представляет собой k. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой Q, а Х₁₇ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой Q, a X₁₈ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой Q, а Х₃₁ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой Q, а Х₃₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой Q, а Х₃₇ представляет собой Y.

В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой Е, a X₁₆ представляет собой L. В некоторых вариантах осуществления, Х₁₅ представляет собой Е, а Х₁₆ представляет собой k. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой Е, а Х₁₇ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой Е, a X₁₈ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой Е, а Х₃₁ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой Е, а Х₃₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой Е, а Х₃₇ представляет собой Y.

В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой L, а Х₁₇ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой L, a X₁₈ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой L, а Х₃₁ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой L, а Х₃₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой L, а Х₃₇ представляет собой Y.

В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой k, а X₁₇ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой k, a X₁₈ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой k, а Х₃₁ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой k, а Х₃₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой k, а Х₃₇ представляет собой Y.

В некоторых вариантах осуществления Х₁₇ представляет собой Н, a X₁₈ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления Х₁₇ представляет собой Н, а Х₃₁ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления Х₁₇ представляет собой Н, а Х₃₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления Х₁₇ представляет собой Н, а Х₃₇ представляет собой Y.

В некоторых вариантах осуществления X₁₈ представляет собой K, а Х₃₁ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления X₁₈ представляет собой K, а Х₃₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления X₁₈ представляет собой K, а Х₃₇ представляет собой Y.

В некоторых вариантах осуществления Х₃₁ представляет собой K, а Х₃₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления, Х₃₁ представляет собой K, а Х₃₇ представляет собой Y.

В некоторых вариантах осуществления Х₃₅ представляет собой Е, а Х₃₇ представляет собой Y.

В некоторых вариантах осуществления определенные аминокислоты, представленные консенсусной последовательностью SEQ ID NO: 199, включают следующие:

В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой S, Х₅ представляет собой S, а Х₁₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой S, Х₅ представляет собой S, a X₁₆ представляет собой L. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой S, Х₅ представляет собой S, а Х₁₆ представляет собой k. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой S, Х₅ представляет собой S, а Х₁₇ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой S, Х₅ представляет собой S, a X₁₈ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой S, Х₅ представляет собой S, а Х₃₁ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой S, а Х₃₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой S, Х₅ представляет собой S, а Х₃₇ представляет собой Y.

В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой K, Х₅ представляет собой S, а Х₁₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой K, Х₅ представляет собой S, a X₁₆ представляет собой L. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой K, Х₅ представляет собой S, а Х₁₆ представляет собой k. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой K, Х₅ представляет собой S, а Х₁₇ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой K, Х₅ представляет собой S, a X₁₈ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой K, Х₅ представляет собой S, а Х₃₁ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой K, Х₅ представляет собой S, а Х₃₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой K, Х₅ представляет собой S, а Х₃₇ представляет собой Y.

В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой k, Х₅ представляет собой S, а Х₁₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой k, Х₅ представляет собой S, a X₁₆ представляет собой L. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой k, Х₅ представляет собой S, а Х₁₆ представляет собой k. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой k, Х₅ представляет собой S, а Х₁₇ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой k, Х₅ представляет собой S, a X₁₈ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой k, Х₅ представляет собой S, а Х₃₁ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой k, Х₅ представляет собой S, а Х₃₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой k, Х₅ представляет собой S, а Х₃₇ представляет собой Y.

В некоторых вариантах осуществления Х₅ представляет собой S, Х₁₅ представляет собой Е, a X₁₆ представляет собой L. В некоторых вариантах осуществления Х₅ представляет собой S, Х₁₅ представляет собой Е, a X₁₆ представляет собой k. В некоторых вариантах осуществления Х₅ представляет собой S, Х₁₅ представляет собой Е, а Х₁₇ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления Х₅ представляет собой S, Х₁₅ представляет собой Е, a X₁₈ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления Х₅ представляет собой S, Х₁₅ представляет собой Е, а Х₃₁ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления Х₅ представляет собой S, Х₁₅ представляет собой Е, а Х₃₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления Х₅ представляет собой S, Х₁₅ представляет собой Е, а Х₃₇ представляет собой Y.

В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой Q, Х₁₅ представляет собой Е, a X₁₆ представляет собой L. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой Q, a X₁₆ представляет собой k, а Х₁₇ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой Q, X₁₈ представляет собой K, а Х₃₁ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой Q, Х₃₁ представляет собой K, а Х₃₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой Q, Х₃₁ представляет собой K, а Х₃₇ представляет собой Y.

В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой Е, X₁₆ представляет собой L, а Х₁₇ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой Е, X₁₆ представляет собой L, a X₁₈ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой Е, X₁₆ представляет собой L, а Х₃₁ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой Е, X₁₆ представляет собой L, а Х₃₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой Е, X₁₆ представляет собой L, а Х₃₇ представляет собой Y.

В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой Е, X₁₆ представляет собой k, а Х₁₇ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой Е, X₁₆ представляет собой k, a X₁₈ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой Е, X₁₆ представляет собой k, а Х₃₁ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой Е, X₁₆ представляет собой k, а Х₃₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой Е, X₁₆ представляет собой k, а Х₃₇ представляет собой Y.

В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой L, Х₁₇ представляет собой Н, a X₁₈ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой L, Х₁₇ представляет собой Н, а Х₃₁ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой L, Х₁₇ представляет собой Н, а Х₃₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой L, Х₁₇ представляет собой Н, а Х₃₇ представляет собой Y.

В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой k, Х₁₇ представляет собой Н, a X₁₈ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления Х₁₆ представляет собой k, Х₁₇ представляет собой Н, а Х₃₁ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой k, Х₁₇ представляет собой Н, а Х₃₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой k, Х₁₇ представляет собой Н, а Х₃₇ представляет собой Y.

В некоторых вариантах осуществления Х₁₇ представляет собой Н, X₁₈ представляет собой K, а Х₃₁ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления Х₁₇ представляет собой Н, X₁₈ представляет собой K, а Х₃₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления Х₁₇ представляет собой Н, X₁₈ представляет собой K, а Х₃₇ представляет собой Y.

В некоторых вариантах осуществления X₁₈ представляет собой K, Х₃₁ представляет собой K, а Х₃₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления X₁₈ представляет собой K, Х₃₁ представляет собой K, а Х₃₇ представляет собой Y.

В некоторых вариантах осуществления Х₃₁ представляет собой K, Х₃₅ представляет собой Е, а Х₃₇ представляет собой Y.

В некоторых вариантах осуществления карбоксиконцевая аминокислота 37 представляет собой Y-(NH₂). В некоторых вариантах осуществления карбоксиконцевая аминокислота 37 представляет собой Y-(OH). В некоторых вариантах осуществления карбоксиконцевая аминокислота 37 представляет собой P-(NH₂). В некоторых вариантах осуществления карбоксиконцевая аминокислота 37 представляет собой Р-(ОН).

В некоторых вариантах осуществления выделенный полипептид по данному изобретению содержит аминокислотную последовательность, или ее фармацевтически приемлемую соль, выбранную из группы, состоящей из аминокислотных последовательностей, представленных консенсусной последовательностью SEQ ID NO: 200:

X₁CX₃TX₅X₆CX₈TX₁₀RX₁₂X₁₃X₁₄X₁₅X₁₆X₁₇X₁₈X₁₉X₂₀NX₂₂FGPILPX₂₉TX₃₁VGSX₃₅TY-(OH/NH₂) (SEQ ID NO: 200), или его фармацевтически приемлемая соль, где:

X₁ представляет собой S, K, k, Н или I;

Х₃ представляет собой N или S;

Х₅ представляет собой S или А;

Х₆ представляет собой Т или S;

Х₈ представляет собой А или K;

Х₁₀ представляет собой Q или S;

Х₁₂ представляет собой L или K;

Х₁₃ представляет собой A, S, Е или K;

Х₁₄ представляет собой N, n, d, Y или Q;

Х₁₅ представляет собой Е, F, f, Y, I, k, K или α-аминоизомасляную кислоту (Aib);

Х₁₆ представляет собой k, K, L, Aib, N-метиллейцин (N-MeL), или 1;

Х₁₇ представляет собой Н, V, Q, R, k, K или Aib;

X₁₈ представляет собой K, Н, или R;

Х₁₉ представляет собой S или Aib;

Х₂₀ представляет собой S или Aib;

Х₂₂ представляет собой N или Е;

Х₂₉ представляет собой Р, R или K;

Х₃₁ представляет собой k, K или N; и

Х₃₅ представляет собой е, Е или N;

каждый K независимо представляет собой L-лизин необязательно, ковалентно связанный с липофильным заместителем, необязательно через спейсер;

каждый k независимо представляет собой D-лизин необязательно, ковалентно связанный с липофильным заместителем, необязательно через спейсер;

при этом два остатка цистеина Х₁СХ₃ТХ₅Х₆С необязательно дополнительно связаны дисульфидным мостиком;

при условии, что если Х₃₁ представляет собой N, тогда Х₃₅ представляет собой Е, или если Х₃₅ представляет собой N, тогда Х₃₁ представляет собой K.

В некоторых вариантах осуществления Х₃₁ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления Х₃₁ представляет собой N.

В некоторых вариантах осуществления Х₃₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления Х₃₅ представляет собой N.

В некоторых вариантах осуществления выделенный полипептид по данному изобретению содержит аминокислотную последовательность, или ее фармацевтически приемлемую соль, выбранную из группы, состоящей из аминокислотных последовательностей, представленных консенсусной последовательностью SEQ ID NO: 201: X₁CX₃TX₅X₆CX₈TX₁₀RX₁₂X₁₃X₁₄X₁₅X₁₆X₁₇X₁₈X₁₉X₂₀NX₂₂FGPILPX₂₉TKVGSETY-(OH/NH₂) (SEQ ID NO: 201), где:

X₁ представляет собой S, K, k, H или I;

Х₃ представляет собой N или S;

Х₅ представляет собой S или А;

Х₆ представляет собой Т или S;

Х₈ представляет собой А или К;

Х₁₀ представляет собой Q или S;

Х₁₂ представляет собой L или K;

Х₁₃ представляет собой A, S, Е или K;

Х₁₄ представляет собой N, n, d, Y или Q;

X15 представляет собой Е, F, f, Y, I, k, К или Aib;

X₁₆ представляет собой k, K, L, Aib, N-MeL или 1;

Х₁₇ представляет собой Н, V, Q, R, k, K или Aib;

X₁₈ представляет собой K, Н, или R;

Х₁₉ представляет собой S или Aib;

Х₂₀ представляет собой S или Aib;

Х₂₂ представляет собой N или Е, и

Х₂₉ представляет собой Р, R или К;

каждый K независимо представляет собой L-лизин необязательно, ковалентно связанный с липофильным заместителем, необязательно через спейсер;

каждый k независимо представляет собой D-лизин необязательно, ковалентно связанный с липофильным заместителем, необязательно через спейсер;

при этом два остатка цистеина Х₁СХ₃ТХ₅Х₆С необязательно дополнительно связаны дисульфидным мостиком.

В некоторых вариантах осуществления определенные аминокислоты, представленные консенсусной последовательностью SEQ ID NO: 200 или SEQ ID NO: 201, включают следующие:

В некоторых вариантах осуществления карбоксиконцевая аминокислота 37 представляет собой Y-(NH₂). В некоторых вариантах осуществления карбоксиконцевая аминокислота 37 представляет собой Y-(OH).

В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой S. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой k. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой I.

В контексте данного документа k обозначает D-лизин.

В некоторых вариантах осуществления Х₃ представляет собой N. В некоторых вариантах осуществления Х₃ представляет собой S.

В некоторых вариантах осуществления Х₅ представляет собой S. В некоторых вариантах осуществления Х₅ представляет собой А.

В некоторых вариантах осуществления Х₆ представляет собой Т. В некоторых вариантах осуществления Х₆ представляет собой S.

В некоторых вариантах осуществления Х₈ представляет собой А. В некоторых вариантах осуществления X₈ представляет собой K.

В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой Q. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой S.

В некоторых вариантах осуществления Х₁₂ представляет собой L. В некоторых вариантах осуществления Х₁₂ представляет собой K.

В некоторых вариантах осуществления Х₁₃ представляет собой А. В некоторых вариантах осуществления Х₁₃ представляет собой S. В некоторых вариантах осуществления Х₁₃ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления Х₁₃ представляет собой K.

В некоторых вариантах осуществления Х₁₄ представляет собой N. В некоторых вариантах осуществления Х₁₄ представляет собой n. В некоторых вариантах осуществления Х₁₄ представляет собой d. В некоторых вариантах осуществления Х₁₄ представляет собой Y. В некоторых вариантах осуществления Х₁₄ представляет собой Q.

В контексте данного документа n обозначает D-аспарагин.

В контексте данного документа d обозначает D-аспарагиновую кислоту.

В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой F. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой f. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой Y. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой I. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой k. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой Aib.

В контексте данного документа f обозначает D-фенилаланин.

В контексте данного документа, Aib означает альтернативно 2-аминоизомасляную кислоту, α-аминоизомасляную кислоту, α-метилаланин или 2-метилаланин.

В некоторых вариантах осуществления Х₁₆ представляет собой L. В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой I. В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой k. В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой Aib. В некоторых вариантах осуществления изобретения X₁₆ представляет собой N-MeL.

В контексте данного документа 1 обозначает D-лейцин.

В контексте данного документа N-MeL обозначает N-метиллейцин.

В некоторых вариантах осуществления Х₁₇ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления Х₁₇ представляет собой V. В некоторых вариантах осуществления Х₁₇ представляет собой Q. В некоторых вариантах осуществления Х₁₇ представляет собой R. В некоторых вариантах осуществления Х₁₇ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления Х₁₇ представляет собой k. В некоторых вариантах осуществления Х₁₇ представляет собой Aib.

В некоторых вариантах осуществления X₁₈ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления X₁₈ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления X₁₈ представляет собой R.

В некоторых вариантах осуществления Х₁₉ представляет собой S. В некоторых вариантах осуществления Х₁₉ представляет собой Aib.

В некоторых вариантах осуществления Х₂₀ представляет собой S. В некоторых вариантах осуществления Х₂₀ представляет собой Aib.

В некоторых вариантах осуществления Х₂₂ представляет собой N. В некоторых вариантах осуществления Х₂₂ представляет собой Е.

В некоторых вариантах осуществления Х₂₉ представляет собой Р. В некоторых вариантах осуществления Х₂₉ представляет собой R. В некоторых вариантах осуществления Х₂₉ представляет собой K.

В некоторых вариантах осуществления Х₃₁ представляет собой k. В некоторых вариантах осуществления Х₃₁ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления Х₃₁ представляет собой N.

В некоторых вариантах осуществления Х₃₅ представляет собой е. В некоторых вариантах осуществления Х₃₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления Х₃₅ представляет собой N.

В контексте данного документа е обозначает D-глутаминовую кислоту.

В некоторых вариантах осуществления определенные аминокислоты, представленные консенсусной последовательностью SEQ ID NO: 200 или SEQ ID NO: 201, включают следующие:

В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой S, а Х₅ представляет собой S. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой S, а Х₁₀ представляет собой Q. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой S, а Х₁₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой S, а Х₁₀ представляет собой L. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой S, а Х₁₀ представляет собой k. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой S, а Х₁₇ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой S, а Х₁₀ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой S, а Х₃₁ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой S, а Х₃₅ представляет собой Е.

В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой K, а Х₅ представляет собой S. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой K, а Х₁₀ представляет собой Q. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой K, а Х₁₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой K, a X₁₆ представляет собой L. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой K, a X₁₆ представляет собой k. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой k, а Х₁₇ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой k, a X₁₈ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой K, а Х₃₁ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой K, а Х₃₅ представляет собой Е.

В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой k, а Х₅ представляет собой S. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой k, аХ₁₀ представляет собой Q. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой k, а Х₁₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой k, а X₁₆ представляет собой L. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой k, a X₁₆ представляет собой k. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой k, а Х₁₇ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой k, a X₁₈ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой k, а Х₃₁ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой k, а Х₃₅ представляет собой Е.

В некоторых вариантах осуществления Х₅ представляет собой S, а Х₁₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления Х₅ представляет собой S, а Х₁₀ представляет собой Q. В некоторых вариантах осуществления Х₅ представляет собой S, а X₁₆ представляет собой L. В некоторых вариантах осуществления Х₅ представляет собой S, a X₁₆ представляет собой k. В некоторых вариантах осуществления Х₅ представляет собой S, а Х₁₇ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления Х₅ представляет собой S, a X₁₈ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления Х₅ представляет собой S, а Х₃₁ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления Х₅ представляет собой S, а Х₃₅ представляет собой Е.

В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой Q, а Х₁₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой Q, a X₁₆ представляет собой L. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой Q, а X₁₆ представляет собой k. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой Q, а Х₁₇ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой Q, a X₁₈ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой Q, а Х₃₁ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой Q, а Х₃₅ представляет собой Е.

В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой Е, a X₁₆ представляет собой L. В некоторых вариантах осуществления, Х₁₅ представляет собой Е, a X₁₆ представляет собой k. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой Е, а Х₁₇ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой Е, a X₁₈ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой Е, а Х₃₁ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой Е, а Х₃₅ представляет собой Е.

В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой L, а Х₁₇ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой L, a X₁₈ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой L, а Х₃₁ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой L, а Х₃₅ представляет собой Е.

В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой k, а Х₁₇ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой k, a X₁₈ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой k, а Х₃₁ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой k, а Х₃₅ представляет собой Е.

В некоторых вариантах осуществления Х₁₇ представляет собой Н, a X₁₈ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления Х₁₇ представляет собой Н, а Х₃₁ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления Х₁₇ представляет собой Н, а Х₃₅ представляет собой Е.

В некоторых вариантах осуществления X₁₈ представляет собой K, а Х₃₁ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления, X₁₈ представляет собой K, а Х₃₅ представляет собой Е.

В некоторых вариантах осуществления Х₃₁ представляет собой K, а Х₃₅ представляет собой Е.

В некоторых вариантах осуществления определенные аминокислоты, представленные консенсусной последовательностью SEQ ID NO: 200 или SEQ ID NO: 201, включают следующие:

В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой S, Х₅ представляет собой S, а Х₁₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой S, Х₅ представляет собой S, a X₁₆ представляет собой L. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой S, Х₅ представляет собой S, а Х₁₆ представляет собой k. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой S, Х₅ представляет собой S, а Х₁₇ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой S, Х₅ представляет собой S, a X₁₈ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой S, Х₅ представляет собой S, а Х₃₁ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой S, а Х₃₅ представляет собой Е.

В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой K, Х₅ представляет собой S, а Х₁₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой K, Х₅ представляет собой S, a X₁₆ представляет собой L. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой K, Х₅ представляет собой S, a X₁₆ представляет собой k. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой K, Х₅ представляет собой S, а Х₁₇ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой K, Х₅ представляет собой S, a X₁₈ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой K, Х₅ представляет собой S, а Х₃₁ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой K, Х₅ представляет собой S, а Х₃₅ представляет собой Е.

В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой k, Х₅ представляет собой S, а Х₁₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой k, Х₅ представляет собой S, a X₁₆ представляет собой L. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой k, Х₅ представляет собой S, a X₁₆ представляет собой k. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой k, Х₅ представляет собой S, а Х₁₇ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой k, Х₅ представляет собой S, a X₁₈ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой k, Х₅ представляет собой S, а Х₃₁ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой k, Х₅ представляет собой S, а Х₃₅ представляет собой Е.

В некоторых вариантах осуществления Х₅ представляет собой S, Х₁₅ представляет собой Е, a X₁₆ представляет собой L. В некоторых вариантах осуществления Х₅ представляет собой S, Х₁₅ представляет собой Е, a X₁₆ представляет собой k. В некоторых вариантах осуществления Х₅ представляет собой S, Х₁₅ представляет собой Е, а Х₁₇ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления Х₅ представляет собой S, Х₁₅ представляет собой Е, a X₁₈ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления Х₅ представляет собой S, Х₁₅ представляет собой Е, а Х₃₁ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления Х₅ представляет собой S, Х₁₅ представляет собой Е, а Х₃₅ представляет собой Е.

В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой Q, Х₁₅ представляет собой Е, a X₁₆ представляет собой L. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой Q, a X₁₆ представляет собой k, а Х₁₇ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой Q, X₁₈ представляет собой K, а Х₃₁ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой Q, Х₃₁ представляет собой K, а Х₃₅ представляет собой Е.

В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой Е, X₁₆ представляет собой L, а Х₁₇ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой Е, X₁₆ представляет собой L, a X₁₈ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой Е, X₁₆ представляет собой L, а Х₃₁ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой Е, X₁₆ представляет собой L, а Х₃₅ представляет собой Е.

В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой Е, X₁₆ представляет собой k, а Х₁₇ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой Е, X₁₆ представляет собой k, a X₁₈ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой Е, X₁₆ представляет собой k, а Х₃₁ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой Е, X₁₆ представляет собой k, а Х₃₅ представляет собой Е.

В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой L, Х₁₇ представляет собой Н, a X₁₈ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой L, Х₁₇ представляет собой Н, а Х₃₁ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой L, Х₁₇ представляет собой Н, а Х₃₅ представляет собой Е.

В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой k, Х₁₇ представляет собой Н, a X₁₈ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления Х₁₆ представляет собой k, Х₁₇ представляет собой Н, а Х₃₁ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой k, Х₁₇ представляет собой Н, а Х₃₅ представляет собой Е.

В некоторых вариантах осуществления Х₁₇ представляет собой Н, X₁₈ представляет собой K, а Х₃₁ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления Х₁₇ представляет собой Н, X₁₈ представляет собой K, а Х₃₅ представляет собой Е.

В некоторых вариантах осуществления, X₁₈ представляет собой K, Х₃₁ представляет собой K, а Х₃₅ представляет собой Е.

В некоторых вариантах осуществления выделенный полипептид по данному изобретению содержит аминокислотную последовательность, или ее фармацевтически приемлемую соль, выбранную из группы, состоящей из аминокислотных последовательностей, представленных консенсусной последовательностью SEQ ID NO: 202 X₁CNTX₅TCATX₁₀RLANX₁₅X₁₆X₁₇X₁₈SSNNFGPILPPTX₃₁VGSX₃₅TY-(OH/NH₂) (SEQ ID NO: 202), где:

X₁ представляет собой S, k или K;

X₅ представляет собой S или А;

Х₁₀ представляет собой Q или S;

Х₁₅ представляет собой Е или F;

X₁₆ представляет собой k, K или L;

Х₁₇ представляет собой Н, V и Q;

X₁₈ представляет собой K, Н, или R;

Х₃₁ представляет собой K или N; и

Х₃₅ представляет собой Е или N;

каждый K независимо представляет собой L-лизин необязательно, ковалентно связанный с липофильным заместителем, необязательно через спейсер;

каждый k независимо представляет собой D-лизин необязательно, ковалентно связанный с липофильным заместителем, необязательно через спейсер;

при этом два остатка цистеина X₁CNTX₅TC (SEQ ID NO: 308) необязательно дополнительно связаны дисульфидным мостиком; и

при условии, что если Х₃₁ представляет собой N, тогда Х₃₅ представляет собой Е, или если Х₃₅ представляет собой N, тогда Х₃₁ представляет собой K.

В некоторых вариантах осуществления Х₃₁ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления Х₃₁ представляет собой N.

В некоторых вариантах осуществления Х₃₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления Х₃₅ представляет собой N.

В некоторых вариантах осуществления выделенный полипептид по данному изобретению содержит аминокислотную последовательность, или ее фармацевтически приемлемую соль, выбранную из группы, состоящей из аминокислотных последовательностей, представленных консенсусной последовательностью SEQ ID NO: 203: X₁CNTX₅TCATX₁₀RLANX₁₅X₁₆X₁₇X₁₈SSNNFGPILPPTKVGSETY-(OH/NH₂) (SEQ ID NO: 203), где:

X₁ представляет собой S, k или K;

X₅ представляет собой S или А;

Х₁₀ представляет собой Q или S;

Х₁₅ представляет собой Е или F;

X₁₆ представляет собой k, K или L;

Х₁₇ представляет собой Н, V и Q; и

X₁₈ представляет собой K, Н, или R;

каждый K независимо представляет собой L-лизин необязательно, ковалентно связанный с липофильным заместителем, необязательно через спейсер;

каждый k независимо представляет собой D-лизин необязательно, ковалентно связанный с липофильным заместителем, необязательно через спейсер;

при этом два остатка цистеина X₁CNTX₅TC (SEQ ID NO: 308) необязательно дополнительно связаны дисульфидным мостиком.

В некоторых вариантах осуществления определенные аминокислоты, представленные консенсусной последовательностью SEQ ID NO: 202 или SEQ ID NO: 203, включают следующие:

В некоторых вариантах осуществления карбоксиконцевая аминокислота 37 представляет собой Y-(NH₂). В некоторых вариантах осуществления карбоксиконцевая аминокислота 37 представляет собой Y-(OH).

В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой S. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой k.

В некоторых вариантах осуществления Х₅ представляет собой S. В некоторых вариантах осуществления Х₅ представляет собой А.

В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой Q. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой S.

В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой F.

В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой L. В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой k.

В некоторых вариантах осуществления Х₁₇ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления Х₁₇ представляет собой V. В некоторых вариантах осуществления Х₁₇ представляет собой Q.

В некоторых вариантах осуществления X₁₈ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления X₁₈ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления X₁₈ представляет собой R.

В некоторых вариантах осуществления Х₃₁ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления Х₃₁ представляет собой N.

В некоторых вариантах осуществления Х₃₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления Х₃₅ представляет собой N.

В некоторых вариантах осуществления определенные аминокислоты, представленные консенсусной последовательностью SEQ ID NO: 202 или SEQ ID NO: 203, включают следующие:

В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой S, а Х₅ представляет собой S. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой S, а Х₁₀ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой S, а X₁₆ представляет собой L. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой S, a X₁₆ представляет собой k. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой S, а Х₁₇ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой S, a X₁₈ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой S, а Х₃₁ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой S, а Х₃₅ представляет собой Е.

В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой K, а Х₅ представляет собой S. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой K, а Х₁₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой K, а X₁₆ представляет собой L. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой K, a X₁₆ представляет собой k. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой K, а Х₁₇ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой k, a X₁₈ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой K, а Х₃₁ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой K, а Х₃₅ представляет собой Е.

В некоторых вариантах осуществления Х₅ представляет собой S, а Х₁₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления Х₅ представляет собой S, a Х₁₆ представляет собой L. В некоторых вариантах осуществления Х₅ представляет собой S, а X₁₆ представляет собой k. В некоторых вариантах осуществления Х₅ представляет собой S, а Х₁₇ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления Х₅ представляет собой S, a X₁₈ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления Х₅ представляет собой S, а Х₃₁ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления Х₅ представляет собой S, а Х₃₅ представляет собой Е.

В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой Q, а Х₁₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой Q, а Х₁₆ представляет собой L. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой Q, а X₁₇ представляет собой k. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой Q, а Х₁₇ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой Q, a X₁₈ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой Q, а Х₃₁ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой Q, а Х₃₅ представляет собой Е.

В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой Е, а Х₁₀ представляет собой L. В некоторых вариантах осуществления, Х₁₅ представляет собой Е, a X₁₆ представляет собой k. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой Е, а Х₁₇ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой Е, a X₁₈ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой Е, а Х₃₁ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой Е, а Х₃₅ представляет собой Е.

В некоторых вариантах осуществления Х₁₆ представляет собой L, а Х₁₇ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления Х₁₆ представляет собой L, a X₁₈ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления Х₁₆ представляет собой L, а Х₃₁ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой L, а Х₃₅ представляет собой Е.

В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой k, а Х₁₇ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления Х₁₆ представляет собой k, a X₁₈ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления Х₁₆ представляет собой k, а Х₃₁ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой k, а Х₃₅ представляет собой Е.

В некоторых вариантах осуществления Х₁₇ представляет собой Н, a X₁₈ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления Х₁₇ представляет собой Н, а Х₃₁ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления Х₁₇ представляет собой Н, а Х₃₅ представляет собой Е.

В некоторых вариантах осуществления X₁₈ представляет собой K, а Х₃₁ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления, X₁₈ представляет собой K, а Х₃₅ представляет собой Е.

В некоторых вариантах осуществления Х₃₁ представляет собой K, а Х₃₅ представляет собой Е.

В некоторых вариантах осуществления определенные аминокислоты, представленные консенсусной последовательностью SEQ ID NO: 202 или SEQ ID NO: 203, включают следующие:

В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой S, Х₅ представляет собой S, а Х₁₀ представляет собой Q. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой S, Х₅ представляет собой S, а Х₁₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой S, Х₅ представляет собой S, a X₁₆ представляет собой L. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой S, Х₅ представляет собой S, a X₁₈ представляет собой k. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой S, Х₅ представляет собой S, а Х₁₇ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой S, Х₅ представляет собой S, a X₁₈ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой S, Х₅ представляет собой S, а Х₃₁ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой S, а Х₃₅ представляет собой Е.

В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой K, Х₅ представляет собой S, а Х₁₀ представляет собой Q. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой K, Х₅ представляет собой S, а Х₁₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой K, Х₅ представляет собой S, а Х₁₆ представляет собой L. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой K, Х₅ представляет собой S, a X₁e представляет собой k. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой K, Х₅ представляет собой S, аХ₁₇ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой K, Х₅ представляет собой S, a X₁₈ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой K, Х₅ представляет собой S, а Х₃₁ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой K, Х₅ представляет собой S, а Х₃₅ представляет собой Е.

В некоторых вариантах осуществления Х₅ представляет собой S, Х₁₀ представляет собой Q, а Х₁₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления Х₅ представляет собой S, Х₁₀ представляет собой Q, a X₁₆ представляет собой L. В некоторых вариантах осуществления Х₅ представляет собой S, Х₁₀ представляет собой Q, a Х₁₀ представляет собой k. В некоторых вариантах осуществления Х₅ представляет собой S, Х₁₀ представляет собой Q, а Х₁₇ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления Х₅ представляет собой S, Х₁₀ представляет собой Q, a Х₁₀ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления Х₅ представляет собой S, Х₁₀ представляет собой Q, а Х₃₁ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления Х₅ представляет собой S, Х₁₀ представляет собой Q, а Х₃₅ представляет собой Е.

В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой Q, Х₁₅ представляет собой Е, a X₁₆ представляет собой L. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой Q, Х₁₅ представляет собой Е, а Х₁₀ представляет собой k. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой Q, Х₁₅ представляет собой Е, а Х₁₇ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой Q, Х₁₅ представляет собой Е, a X₁₈ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой Q, Х₁₅ представляет собой Е, а Х₃₁ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой Q, Х₁₅ представляет собой Е, а Х₃₅ представляет собой Е.

В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой Е, X₁₆ представляет собой L, а Х₁₇ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой Е, Х₁₀ представляет собой L, a X₁₈ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой Е, Х₁₀ представляет собой L, а Х₃₁ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой Е, Х₁₀ представляет собой L, а Х₃₅ представляет собой Е.

В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой Е, Х₁₀ представляет собой k, а Х₁₇ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой Е, Х₁₀ представляет собой k, a X₁₈ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой Е, Х₁₀ представляет собой k, а Х₃₁ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой Е, Х₁₀ представляет собой k, а Х₃₅ представляет собой Е.

В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой L, Х₁₇ представляет собой Н, a X₁₈ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой L, Х₁₇ представляет собой Н, а Х₃₁ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой L, Х₁₇ представляет собой Н, а Х₃₅ представляет собой Е.

В некоторых вариантах осуществления X₁e представляет собой k, Х₁₇ представляет собой Н, a X₁₈ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления Х₁₆ представляет собой k, Х₁₇ представляет собой Н, а Х₃₁ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой k, Х₁₇ представляет собой Н, а Х₃₅ представляет собой Е.

В некоторых вариантах осуществления Х₁₇ представляет собой Н, X₁₈ представляет собой K, а Х₃₁ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления Х₁₇ представляет собой Н, X₁₈ представляет собой K, а Х₃₅ представляет собой Е.

В некоторых вариантах осуществления, X₁₈ представляет собой K, Х₃₁ представляет собой K, а Х₃₅ представляет собой Е.

В некоторых вариантах осуществления выделенный полипептид по данному изобретению содержит аминокислотную последовательность, или ее фармацевтически приемлемую соль, выбранную из группы, состоящей из аминокислотных последовательностей, представленных консенсусной последовательностью SEQ ID NO: 204: X₁CNTSTCATX₁₀RLANX₁₅X₁₆X₁₇KSSNNFGPILPPTKVGSX₃₅TY-(OH/NH₂) (SEQ ID NO: 204), где:

X₁ представляет собой S, K или k;

Х₁₀ представляет собой Q или S;

X₁₅ представляет собой E или F;

X₁₆ представляет собой L, K или k;

Х₁₇ представляет собой Н, V или Q; и

Х₃₅ представляет собой Е или N;

каждый K независимо представляет собой L-лизин необязательно, ковалентно связанный с липофильным заместителем, необязательно через спейсер;

каждый k независимо представляет собой D-лизин необязательно, ковалентно связанный с липофильным заместителем, необязательно через спейсер;

при этом два остатка цистеина X₁CNTSTC (SEQ ID NO: 309) необязательно дополнительно связаны дисульфидным мостиком.

В некоторых вариантах осуществления Х₃₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления Х₃₅ представляет собой N.

В некоторых вариантах осуществления выделенный полипептид по данному изобретению содержит аминокислотную последовательность, или ее фармацевтически приемлемую соль, выбранную из группы, состоящей из аминокислотных последовательностей, представленных консенсусной последовательностью SEQ ID NO: 205: X₁CNTSTCATX₁₀RLANX₁₅X₁₆X₁₇KSSNNFGPILPPTKVGSETY-(OH/NH₂) (SEQ ID NO: 205), где:

X₁ представляет собой S, K или k;

Х₁₀ представляет собой Q или S;

Х₁₅ представляет собой Е или F;

Х₁₀ представляет собой L, K или k; и

Х₁₇ представляет собой Н, V или Q;

каждый K независимо представляет собой L-лизин необязательно, ковалентно связанный с липофильным заместителем, необязательно через спейсер;

каждый к независимо представляет собой D-лизин необязательно, ковалентно связанный с липофильным заместителем, необязательно через спейсер; и

при этом два остатка цистеина X₁CNTSTC (SEQ ID NO: 309) необязательно дополнительно связаны дисульфидным мостиком.

В некоторых вариантах осуществления определенные аминокислоты, представленные консенсусной последовательностью SEQ ID NO: 204 или SEQ ID NO: 205, включают следующие:

В некоторых вариантах осуществления карбоксиконцевая аминокислота 37 представляет собой Y-(NH₂). В некоторых вариантах осуществления карбоксиконцевая аминокислота 37 представляет собой Y-(OH).

В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой S. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой k.

В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой Q. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой S.

В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой F.

В некоторых вариантах осуществления Х₁₆ представляет собой L. В некоторых вариантах осуществления Х₁₆ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления Х₁₆ представляет собой k.

В некоторых вариантах осуществления Х₁₇ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления Х₁₇ представляет собой V. В некоторых вариантах осуществления Х₁₇ представляет собой Q.

В некоторых вариантах осуществления Х₃₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления Х₃₅ представляет собой N.

В некоторых вариантах осуществления определенные аминокислоты, представленные консенсусной последовательностью SEQ ID NO: 204 или SEQ ID NO: 205, включают следующие:

В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой S, а Х₁₀ представляет собой Q. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой S, а Х₁₀ представляет собой S. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой S, а Х₁₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой S, а Х₁₅ представляет собой F. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой S, a X₁₆ представляет собой L. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой S, a X₁₆ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой S, a X₁₆ представляет собой k. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой S, а Х₁₇ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой S, а Х₁₇ представляет собой V. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой S, а Х₁₇ представляет собой Q. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой S, а Х₃₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой S, а Х₃₅ представляет собой N.

В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой K, а Х₁₀ представляет собой Q. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой K, а Х₁₀ представляет собой S. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой K, а Х₁₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой K, а Х₁₅ представляет собой F. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой K, a X₁₆ представляет собой L. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой K, a X₁₆ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой K, a X₁₆ представляет собой k. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой K, а Х₁₇ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой K, а Х₁₇ представляет собой V. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой K, а Х₁₇ представляет собой Q. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой K, а Х₃₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой K, а Х₃₅ представляет собой N.

В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой k, а Х₁₀ представляет собой Q. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой k, а Х₁₀ представляет собой S. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой k, а Х₁₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой k, а Х₁₅ представляет собой F. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой k, a X₁₆ представляет собой L. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой k, a X₁₆ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой k, a X₁₆ представляет собой k. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой k, а Х₁₇ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой k, а Х₁₇ представляет собой V. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой k, а Х₁₇ представляет собой Q. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой k, а Х₃₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой k, а Х₃₅ представляет собой N.

В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой Q, а Х₁₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой Q, а Х₁₅ представляет собой F. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой Q, а X₁₆ представляет собой L. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой Q, а Х₁₆ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой Q, a X₁₆ представляет собой k. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой Q, а Х₁₇ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой Q, а Х₁₇ представляет собой V. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой Q, а Х₁₇ представляет собой Q. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой Q, а Х₃₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой Q, а Х₃₅ представляет собой N.

В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой S, а Х₁₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой S, а Х₁₅ представляет собой F. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой S, а Х₁₆ представляет собой L. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой S, a X₁₆ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой S, а Х₁₆ представляет собой k. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой S, а Х₁₇ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой S, а Х₁₇ представляет собой V. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой S, а Х₁₇ представляет собой Q. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой S, а Х₃₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой S, а Х₃₅ представляет собой N.

В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой Е, а Х₁₆ представляет собой L. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой Е, а Х₁₆ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой Е, а Х₁₇ представляет собой k. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой E, а Х₁₇ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой Е, а Х₁₇ представляет собой V. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой Е, а Х₁₇ представляет собой Q. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой Е, а Х₃₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой Е, а Х₃₅ представляет собой N.

В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой F, а Х₁₆ представляет собой L. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой F, а Х₁₆ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой F, а Х₁₆ представляет собой k. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой F, а Х₁₇ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой F, а Х₁₇ представляет собой V. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой F, а Х₁₇ представляет собой Q. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой F, а Х₃₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой F, а Х₃₅ представляет собой N.

В некоторых вариантах осуществления Х₁₆ представляет собой L, а Х₁₇ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления Х₁₆ представляет собой L, а Х₁₇ представляет собой V. В некоторых вариантах осуществления Х₁₆ представляет собой L, а Х₁₇ представляет собой Q. В некоторых вариантах осуществления Х₁₆ представляет собой L, а Х₃₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления Х₁₆ представляет собой L, а Х₃₅ представляет собой N.

В некоторых вариантах осуществления Х₁₆ представляет собой K, а Х₁₇ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления Х₁₆ представляет собой K, а Х₁₇ представляет собой V. В некоторых вариантах осуществления Х₁₆ представляет собой K, а Х₁₇ представляет собой Q. В некоторых вариантах осуществления Х₁₆ представляет собой K, а Х₃₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления Х₁₆ представляет собой K, а Х₃₅ представляет собой N.

В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой k, аХ₁₇ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой k, а Х₁₇ представляет собой V. В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой k, а Х₁₇ представляет собой Q. В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой k, а Х₃₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой k, а Х₃₅ представляет собой N.

В некоторых вариантах осуществления Х₁₇ представляет собой Н, а Х₃₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления, Х₁₇ представляет собой Н, а Х₃₅ представляет собой N.

В некоторых вариантах осуществления Х₁₇ представляет собой V, а Х₃₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления, Х₁₇ представляет собой V, а Х₃₅ представляет собой N.

В некоторых вариантах осуществления Х₁₇ представляет собой Q, а Х₃₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления, Х₁₇ представляет собой Q, а Х₃₅ представляет собой N.

В некоторых вариантах осуществления выделенный полипептид по данному изобретению содержит аминокислотную последовательность, или ее фармацевтически приемлемую соль, выбранную из группы, состоящей из аминокислотных последовательностей, представленных консенсусной последовательностью SEQ ID NO: 206: SCNTSTCATQRLANX₁₅X₁₆X₁₇KSSNNFGPILPPTKVGSX₃₅TY-(OH/NH₂) (SEQ ID NO: 206), где:

Х₁₅ представляет собой E или F;

X₁₆ представляет собой L, K или k;

Х₁₇ представляет собой Н, V или Q; и

Х₃₅ представляет собой Е или N;

каждый K независимо представляет собой L-лизин необязательно, ковалентно связанный с липофильным заместителем, необязательно через спейсер;

каждый к независимо представляет собой D-лизин необязательно, ковалентно связанный с липофильным заместителем, необязательно через спейсер; и

при этом два остатка цистеина SCNTSTC (SEQ ID NO: 310) необязательно дополнительно связаны дисульфидным мостиком.

В некоторых вариантах осуществления Х₃₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления Х₃₅ представляет собой N.

В некоторых вариантах осуществления выделенный полипептид по данному изобретению содержит аминокислотную последовательность, или ее фармацевтически приемлемую соль, выбранную из группы, состоящей из аминокислотных последовательностей, представленных консенсусной последовательностью SEQ ID NO: 207: SCNTSTCATQRLANX₁₅X₁₆X₁₇KSSNNFGPILPPTKVGSETY-OH/NH₂) (SEQ ID NO: 207), где:

X₁₅ представляет собой E или F;

X₁₆ представляет собой L, K или k; и

Х₁₇ представляет собой Н, V или Q;

каждый K независимо представляет собой L-лизин необязательно, ковалентно связанный с липофильным заместителем, необязательно через спейсер;

каждый к независимо представляет собой D-лизин необязательно, ковалентно связанный с липофильным заместителем, необязательно через спейсер; и

при этом два остатка цистеина SC*NTSTC* необязательно дополнительно связаны дисульфидным мостиком.

В некоторых вариантах осуществления определенные аминокислоты, представленные консенсусной последовательностью SEQ ID NO: 206 или SEQ ID NO: 207, включают следующие:

В некоторых вариантах осуществления карбоксиконцевая аминокислота 37 представляет собой Y-(NH₂). В некоторых вариантах осуществления карбоксиконцевая аминокислота 37 представляет собой Y-(OH).

В некоторых вариантах осуществления X₁₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления X₁₅ представляет собой F.

В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой L. В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой k.

В некоторых вариантах осуществления Х₁₇ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления Х₁₇ представляет собой V. В некоторых вариантах осуществления Х₁₇ представляет собой Q.

В некоторых вариантах осуществления X₁₅ представляет собой Е, a X₁₆ представляет собой L. В некоторых вариантах осуществления X₁₅ представляет собой Е, a X₁₆ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления X₁₅ представляет собой Е, а X₁₆ представляет собой k. В некоторых вариантах осуществления X₁₅ представляет собой Е, а Х₁₇ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления X₁₅ представляет собой Е, а Х₁₇ представляет собой V. В некоторых вариантах осуществления Х₁₇ представляет собой Е, а Х₁₇ представляет собой Q. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой Е, а Х₃₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой Е, а Х₃₅ представляет собой N.

В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой F, a X₁₆ представляет собой L. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой F, а Х₁₆ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой F, а X₁₆ представляет собой k. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой F, а Х₁₇ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой F, а Х₁₇ представляет собой V. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой F, а Х₁₇ представляет собой Q. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой F, а Х₃₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой F, а Х₃₅ представляет собой N.

В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой L, а Х₁₇ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой L, а Х₁₇ представляет собой V. В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой L, а Х₁₇ представляет собой Q. В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой L, а Х₃₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой L, а Х₃₅ представляет собой N.

В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой K, а Х₁₇ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой K, а Х₁₇ представляет собой V. В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой K, а Х₁₇ представляет собой Q. В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой K, а Х₃₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой K, а Х₃₅ представляет собой N.

В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой k, аХ₁₇ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой k, а Х₁₇ представляет собой V. В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой k, а Х₁₇ представляет собой Q. В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой k, а Х₃₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой k, а Х₃₅ представляет собой N.

В некоторых вариантах осуществления Х₁₇ представляет собой Н, а Х₃₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления, Х₁₇ представляет собой Н, а Х₃₅ представляет собой N.

В некоторых вариантах осуществления Х₁₇ представляет собой V, а Х₃₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления, Х₁₇ представляет собой V, а Х₃₅ представляет собой N.

В некоторых вариантах осуществления Х₁₇ представляет собой Q, а Х₃₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления, Х₁₇ представляет собой Q, а Х₃₅ представляет собой N.

В некоторых вариантах осуществления выделенный полипептид по данному изобретению содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из:

SC*NTSTC*ATQRLANFkHKSSNNFGPILPPTKVGSETY-(NH₂) (SEQ ID NO: 127), также называемой в данном документе соединением А127;

SC*NTSTC*ATQRLANELHKSSNNFGPILPPTKVGSETY-(NH₂) (SEQ ID NO: 57), также называемой в данном документе соединением А57;

SC*NTSTC*ATQRLANEKHKSSNNFGPILPPTKVGSETY-(NH₂) (SEQ ID NO: 128), также называемой в данном документе соединением А128;

SC*NTSTC*ATQRLANEkHKSSNNFGPILPPTKVGSETY-(NH₂) (SEQ ID NO: 129), также называемой в данном документе соединением А129; и

SC*NTSTC*ATQRLANFLVKSSNEFGPILPPTKVGSETY-(NH₂) (SEQ ID NO: 43), также называемой в данном документе соединением А43.

В некоторых вариантах осуществления выделенный полипептид по данному изобретению содержит аминокислотную последовательность:

SC*NTSTC*ATQRLANELHKSSNNFGPILPPTKVGSETY-(NH₂) (SEQ ID NO: 57), также называемую в данном документе соединением А57.

В некоторых вариантах осуществления выделенный полипептид по данному изобретению содержит аминокислотную последовательность:

SC*NTSTC*ATQRLANFkHKSSNNFGPILPPTKVGSETY-(NH₂) (SEQ ID NO: 127), также называемую в данном документе соединением А127.

В некоторых вариантах осуществления выделенный полипептид по данному изобретению содержит аминокислотную последовательность:

SC*NTSTC*ATQRLANEk*((γGlu)₂-CO(CH₂)₁₄CH₃)HKSSNNFGPILPP TKVGSETY-NH₂ (SEQ ID NO: 27), также называемую в данном документе соединением А27.

В некоторых вариантах осуществления выделенный полипептид по данному изобретению содержит аминокислотную последовательность, или ее фармацевтически приемлемую соль, выбранную из группы, состоящей из аминокислотных последовательностей, представленных консенсусной последовательностью SEQ ID NO: 208: X₁CNTSTCATX₁₀RLANX₁₅X₁₆X₁₇KSSNNFGPILPPTKVGSX₃₅TY-(OH/NH₂) (SEQ ID NO: 208), где:

X₁ представляет собой K или k;

Х₁₀ представляет собой Q или S;

Х₁₅ представляет собой Е или F;

Х₁₆ представляет собой L, K или k;

Х₁₇ представляет собой Н, V или Q; и

Х₃₅ представляет собой Е или N;

каждый K независимо представляет собой L-лизин необязательно, ковалентно связанный с липофильным заместителем, необязательно через спейсер;

каждый к независимо представляет собой D-лизин необязательно, ковалентно связанный с липофильным заместителем, необязательно через спейсер; и

при этом два остатка цистеина X₁CNTSTC (SEQ ID NO: 318) необязательно дополнительно связаны дисульфидным мостиком.

В некоторых вариантах осуществления Х₃₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления Х₃₅ представляет собой N.

В некоторых вариантах осуществления выделенный полипептид по данному изобретению содержит аминокислотную последовательность, или ее фармацевтически приемлемую соль, выбранную из группы, состоящей из аминокислотных последовательностей, представленных консенсусной последовательностью SEQ ID NO: 209: X₁CNTSTCATX₁₀RLANX₁₅X₁₆X₁₇KSSNNFGPILPPTKVGSETY-(OH/NH₂) (SEQ ID NO: 209), где:

X₁ представляет собой K или k;

Х₁₀ представляет собой Q или S;

Х₁₅ представляет собой Е или F;

Х₁₆ представляет собой L, K или k; и

Х₁₇ представляет собой Н, V или Q;

каждый K независимо представляет собой L-лизин необязательно, ковалентно связанный с липофильным заместителем, необязательно через спейсер;

каждый к независимо представляет собой D-лизин необязательно, ковалентно связанный с липофильным заместителем, необязательно через спейсер; и

при этом два остатка цистеина X₁CNTSTC (SEQ ID NO: 318) необязательно дополнительно связаны дисульфидным мостиком.

В некоторых вариантах осуществления определенные аминокислоты, представленные консенсусной последовательностью SEQ ID NO: 208 или SEQ ID NO: 209, включают следующие:

В некоторых вариантах осуществления карбоксиконцевая аминокислота 37 представляет собой Y-(NH₂). В некоторых вариантах осуществления карбоксиконцевая аминокислота 37 представляет собой Y-(OH).

В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой k.

В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой Q. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой S.

В некоторых вариантах осуществления X₁₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления X₁₅ представляет собой F.

В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой L. В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой k.

В некоторых вариантах осуществления Х₁₇ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления Х₁₇ представляет собой V. В некоторых вариантах осуществления Х₁₇ представляет собой Q.

В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой K, а Х₁₀ представляет собой Q. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой K, а Х₁₀ представляет собой S. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой K, а X₁₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой K, a X₁₅ представляет собой F. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой K, a X₁₆ представляет собой L. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой K, a X₁₆ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой K, a X₁₆ представляет собой k. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой K, а Х₁₇ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой K, а Х₁₇ представляет собой V. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой K, а Х₁₇ представляет собой Q. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой K, а Х₃₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой K, а Х₃₅ представляет собой N.

В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой k, а Х₁₀ представляет собой Q. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой k, а Х₁₀представляет собой S. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой k, а Х₁₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой k, а Х₁₅ представляет собой F. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой k, a X₁₆ представляет собой L. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой k, a X₁₆ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой k, a X₁₆ представляет собой k. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой k, а Х₁₇ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой k, а Х₁₇ представляет собой V. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой k, а Х₁₇ представляет собой Q. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой k, а Х₃₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой k, а Х₃₅ представляет собой N.

В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой Q, а Х₁₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой Q, а Х₁₅ представляет собой F. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой Q, а X₁₆ представляет собой L. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой Q, а Х₁₆ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой Q, a X₁₆ представляет собой k. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой Q, а Х₁₇ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой Q, а Х₁₇ представляет собой V. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой Q, а Х₁₇ представляет собой Q. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой Q, а Х₃₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой Q, а Х₃₅ представляет собой N.

В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой S, а Х₁₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой S, а Х₁₅ представляет собой F. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой S, а Х₁₆ представляет собой L. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой S, a X₁₆ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой S, а Х₁₆ представляет собой k. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой S, а Х₁₇ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой S, а Х₁₇ представляет собой V. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой S, а Х₁₇ представляет собой Q. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой S, а Х₃₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой S, а Х₃₅ представляет собой N.

В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой Е, а Х₁₆ представляет собой L. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой Е, а Х₁₆ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой Е, а Х₁₆ представляет собой k. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой E, а Х₁₇ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой Е, а Х₁₇ представляет собой V. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой Е, а Х₁₇ представляет собой Q. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой Е, а Х₃₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой Е, а Х₃₅ представляет собой N.

В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой F, а Х₁₆ представляет собой L. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой F, а Х₁₆ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой F, а Х₁₆ представляет собой k. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой F, а Х₁₇ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой F, а Х₁₇ представляет собой V. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой F, а Х₁₇ представляет собой Q. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой F, а Х₃₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой F, а Х₃₅ представляет собой N.

В некоторых вариантах осуществления Х₁₆ представляет собой L, а Х₁₇ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления Х₁₆ представляет собой L, а Х₁₇ представляет собой V. В некоторых вариантах осуществления Х₁₆ представляет собой L, а Х₁₇ представляет собой Q. В некоторых вариантах осуществления Х₁₆ представляет собой L, а Х₃₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления Х₁₆ представляет собой L, а Х₃₅ представляет собой N.

В некоторых вариантах осуществления Х₁₆ представляет собой K, а Х₁₇ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления Х₁₆ представляет собой K, а Х₁₇ представляет собой V. В некоторых вариантах осуществления Х₁₆ представляет собой K, а Х₁₇ представляет собой Q. В некоторых вариантах осуществления Х₁₆ представляет собой K, а Х₃₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления Х₁₆ представляет собой K, а Х₃₅ представляет собой N.

В некоторых вариантах осуществления Х₁₆ представляет собой K, а Х₁₇ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления Х₁₆ представляет собой K, а Х₁₇ представляет собой V. В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой K, а Х₁₇ представляет собой Q. В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой K, а Х₃₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой K, а Х₃₅ представляет собой N.

В некоторых вариантах осуществления Х₁₇ представляет собой Н, а Х₃₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления, Х₁₇ представляет собой Н, а Х₃₅ представляет собой N.

В некоторых вариантах осуществления Х₁₇ представляет собой V, а Х₃₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления, Х₁₇ представляет собой V, а Х₃₅ представляет собой N.

В некоторых вариантах осуществления Х₁₇ представляет собой Q, а Х₃₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления, Х₁₇ представляет собой Q, а Х₃₅ представляет собой N.

В некоторых вариантах осуществления выделенный полипептид по данному изобретению содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из:

KC*NTSTC*ATQRLANELHKSSNNFGPILPPTKVGSETY-(NH₂) (SEQ ID NO: 130), также называемой в данном документе соединением А130; и

KC*NTSTC*ATQRLANFLQKSSNNFGPILPPTKVGSETY-(NH₂) (SEQ ID NO: 131), также называемой в данном документе соединением А131.

В некоторых вариантах осуществления Х₃₁ представляет собой K. В некоторых вариантах осуществления Х₃₁ представляет собой N.

В некоторых вариантах осуществления Х₃₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления Х₃₅ представляет собой N.

5. Конъюгирование липофильного заместителя с любым из пептидов, необязательно с помощью спейсера

В некоторых вариантах осуществления любой из раскрытых полипептидов необязательно замещен одним или более липофильными заместителями, которые каждый необязательно присоединен через спейсер, в котором «липофильный заместитель» и «спейсер» определены в данном документе. В некоторых вариантах осуществления любой из раскрытых полипептидов, содержащих аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из аминокислотных последовательностей, представленных любой из консенсусных последовательностей SEQ ID NO: 1-SEQ ID NO: 143, либо содержит один или более липофильных заместителей, каждый, необязательно присоединен посредство спейсера, или могут быть изменены или дополнительно модифицированы ковалентным присоединением одного или более липофильных заместителей, каждый из которых необязательно присоединен посредством спейсера. В некоторых вариантах осуществления липофильный заместитель может быть прикреплен к аминогруппе полипептида (например, ε-аминогруппе из остатков лизина) с помощью карбоксильной группы липофильного заместителя или, необязательно, аминогруппы спейсера, при этом карбоксильная группа спейсера образует амидную связь с ε-аминогруппой из остатков лизина.

Липофильный заместитель

Конъюгирование одного или более «липофильных заместителей», каждый из которых необязательно присоединен посредством спейсера, к любому из раскрытых пептидов по данному изобретению предназначено для продления действия полипептида путем облегчения связывания с сывороточным альбумином и замедления выведения конъюгированного полипептида из почек. Используемый в данном документе термин «липофильный заместитель» содержит заместитель, содержащий от 4 до 40 атомов углерода, от 8 до 25 атомов углерода, от 12 до 22 атомов углерода или от 6 до 20 атомов углерода. Липофильный заместитель может быть присоединен к аминогруппе полипептида (например, ε-аминогруппой остатка лизина) посредством карбоксильной группы липофильного заместителя, или, необязательно, аминогруппой спейсера, карбоксильная группа спейсера в свою очередь образует амидную связь с аминогруппой аминокислотного (например, лизина) остатка, к которому он прикреплен. В некоторых вариантах осуществления полипептид содержит три, два, или, предпочтительно, один липофильный заместитель, каждый с необязательным спейсером или без него, который определяется более подробно ниже.

В некоторых вариантах осуществления изобретения липофильный заместитель содержит линейную или разветвленную алкильную группу. В некоторых вариантах осуществления изобретения липофильный заместитель представляет собой ацильную группу неразветвленной или разветвленной жирной кислоты. В некоторых вариантах осуществления изобретения липофильный заместитель представляет собой ацильную группу прямоцепочечной или разветвленной жирной кислоты, далее замещенную одной или более из групп карбоновой кислоты и/или гидроксамовой кислоты.

В некоторых вариантах осуществления полипептид содержит три, два, или, предпочтительно, один липофильный заместитель, каждый с необязательным спейсером или без него. В некоторых вариантах осуществления липофильный заместитель представляет собой моновалентную группу формулы I:

где

Z представляет собой -СН₃ или -СО₂Н; и

m равно от 4 до 24,

указанный липофильный заместитель образует амидную связь между аминогруппой (например, ε-аминогруппой лизина) раскрытого полипептида и группой СО- липофильного заместителя.

В некоторых вариантах осуществления m выбран из группы, состоящей из 4-20, 8-20, 12-20, 14-20, 16-20, 14, 16, 18 и 20.

В некоторых вариантах осуществления Z представляет собой -СО₂Н, а липофильный заместитель имеет формулу -СО-(СН₂)_m-СО₂Н. В некоторых вариантах осуществления -CO-(CH₂)_m-Z выбран из группы, состоящей из -СО-(СН₂)₄-СО₂Н, -СО-(СН₂)₅-СО₂Н, -СО-(СН₂)₆-СО₂Н, -СО-(СН₂)₇-СО₂Н, -СО-(СН₂)₈-СО₂Н, -СО-(СН₂)₉-СО₂Н, -CO-(CH₂)₁₀-CO₂H, -СО-(СН₂)₁₁-СО₂Н, -CO-(CH₂)₁₂-CO₂H, -CO-(CH₂)₁₃-CO₂H, -CO-(CH₂)₁₄-CO₂H, -CO-(CH₂)₁₅-CO₂H, -CO-(CH₂)₁₆-CO₂H, -CO-(CH₂)₁₇-CO₂H, -CO-(CH₂)₁₈-CO₂H, -CO-(CH₂)₁₉-CO₂H, -CO-(CH₂)₂₀-CO₂H.

В некоторых вариантах осуществления изобретения липофильный заместитель представляет собой -CO-(CH₂)₁₈-CO₂H.

В некоторых вариантах осуществления Z представляет собой -СН₃, а липофильный заместитель имеет формулу -СО-(СН₂)_m-СН₃. В некоторых вариантах осуществления -СО-(CH₂)_m-Z выбран из группы, состоящей из -СО-(СН₂)₄-СН₃, -СО-(CH₂)₅-СН₃, -СО-(CH₂)₆-СН₃, -СО-(СН₂)₇-СН₃, -СО-(СН₂)₈-СН₃, -СО-(СН₂)₉-СН₃, -СО-(СН₂)₁₀-СН₃, -СО-(СН₂)₁₁-СН₃, -CO-(CH₂)₁₂-CH₃, -CO-(CH₂)₁₃-CH₃, -CO-(CH₂)₁₄-CH₃, -CO-(CH₂)₁₅-CH₃, -CO-(CH₂)₁₆-СН₃, -CO-(CH₂)₁₇-CH₃, -CO-(CH₂)₁₈-CH₃, -CO-(CH₂)₁₉-CH₃ и -CO-(CH₂)₂₀-CH₃.

Спейсер

В некоторых вариантах осуществления изобретения липофильный заместитель присоединен к исходному пептиду посредством «спейсера». В некоторых вариантах осуществления в документе данном предложены полипептиды, содержащие аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из аминокислотных последовательностей, представленных любой из консенсусных последовательностей SEQ ID NO: 1-SEQ ID NO: 143, содержащих липофильный заместитель, причем липофильный заместитель связан с е-аминогруппой лизина посредством спейсера, при этом спейсер образует мостик между аминогруппой раскрытого полипептида и группой СО- липофильного заместителя.

В некоторых вариантах осуществления спейсер содержит одну или более аминокислот, например, одну аминокислоту, такую как Glu, Asp, Gly или Lys, дипептид, такой как 2(Glu), Glu-Gly или полипептид, такой как 3(Glu), 4(Glu) (SEQ ID NO: 317), 2(Glu)-Gly и т.д. В некоторых вариантах осуществления когда спейсер содержит одну или более аминокислот, например, Glu, Asp, Gly или Lys, одна карбоксильная группа спейсера может образовывать амидную связь с аминогруппой раскрытого полипептида, а аминогруппа спейсера может образовывать амидную связь с карбоксильной группой липофильного заместителя.

В некоторых вариантах осуществления, когда спейсер содержит Glu или Asp, которые дополнительно содержат боковую цепь на концевой карбоновой кислоте, концевая карбоксильная группа боковой цепи Glu или Asp-содержащего спейсера может образовывать амидную связь с аминогруппой раскрытого полипептида, а аминогруппа Glu или Asp-содержащего спейсера может образовывать амидную связь с карбоксильной группой липофильного заместителя, то есть γGlu или βAsp. В некоторых вариантах осуществления спейсер представляет собой γGlu. В некоторых вариантах осуществления спейсер представляет собой 2(γGlu). В некоторых вариантах осуществления спейсер представляет собой 3(γGlu).

В некоторых вариантах осуществления полипептид содержит три, два, или, предпочтительно, один липофильный заместитель, каждый со спейсером. В некоторых вариантах осуществления липофильный заместитель и спейсер представляют собой моновалентную группу формулы II:

где

Y выбран из группы, состоящей из γGlu, Asp, Lys и Gly;

Z представляет собой -СН₃ или -СО₂Н;

m равно от 4 до 24; и

n равно от 1 до 10.

В некоторых вариантах осуществления Y выбран из группы, состоящей из γGlu и Gly. В некоторых вариантах осуществления Y представляет собой γGlu. В некоторых вариантах осуществления Y представляет собой Gly.

В некоторых вариантах осуществления полипептид содержит три, два, или, предпочтительно, один липофильный заместитель, каждый со спейсером. В некоторых вариантах осуществления липофильный заместитель и спейсер представляют собой моновалентную группу формулы III:

где

Z представляет собой -СН₃ или -СО₂Н;

m равно от 4 до 24; и

n равно от 1 до 10.

В некоторых вариантах осуществления Z представляет собой -СН₃. В некоторых вариантах осуществления Z представляет собой -СО₂Н.

В некоторых вариантах осуществления m выбран из группы, состоящей из 4-20, 8-20, 12-20, 14-20, 16-20, 14, 16, 18 и 20.

В некоторых вариантах осуществления n выбран из группы, состоящей из 1,2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 и 10. В некоторых вариантах осуществления n равно 1. В некоторых вариантах осуществления n равно 2. В некоторых вариантах осуществления n равно 3. В некоторых вариантах осуществления n равно 4. В некоторых вариантах осуществления n равно 5.

В некоторых вариантах осуществления полипептид содержит три, два, или, предпочтительно, один липофильный заместитель, каждый со спейсером. В некоторых вариантах осуществления липофильный заместитель и спейсер представляют собой моновалентную группу формулы IV:

где

Z представляет собой -СН₃ или -СО₂Н;

m равно от 4 до 24; и

n равно от 1 до 10.

В некоторых вариантах осуществления (γGlu)n выбран из группы, состоящей из γGlu; 2(γGlu); 3(γGlu); 4(γGlu) (SEQ ID NO: 313) и 5(γGlu) (SEQ ID NO: 314). В некоторых вариантах осуществления -(γGlu)n-(Gly)- («(γGlu)n-(Gly)», раскрытый как SEQ ID NO: 312) выбран из группы, состоящей из 2(γGlu),Gly и 3(γGlu),Gly (SEQ ID NO: 315).

В некоторых вариантах осуществления полипептид содержит три, два, или, предпочтительно, один липофильный заместитель, каждый со спейсером. В некоторых вариантах осуществления липофильный заместитель и спейсер представляют собой моновалентную группу формулы V:

где

Z представляет собой -СН₃ или -СО₂Н;

m равно от 4 до 24; и

n равно от 1 до 10.

В некоторых вариантах осуществления определенные переменные, представленные в формуле II, формуле III, формуле IV или формуле V, включают следующие:

В некоторых вариантах осуществления Z представляет собой -СН₃. В некоторых вариантах осуществления Z представляет собой -СО₂Н.

В некоторых вариантах осуществления m выбран из группы, состоящей из 4-20, 8-20, 12-20, 14-20, 16-20, 14, 16, 18 и 20.

В некоторых вариантах осуществления n выбран из группы, состоящей из 1,2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 и 10. В некоторых вариантах осуществления n равно 1. В некоторых вариантах осуществления n равно 2. В некоторых вариантах осуществления n равно 3. В некоторых вариантах осуществления n равно 4. В некоторых вариантах осуществления n равно 5.

В некоторых вариантах осуществления n равно 1, a Z представляет собой -СО₂Н. В некоторых вариантах осуществления n равно 1, a Z представляет собой -СН₃. В некоторых вариантах осуществления n равно 2, a Z представляет собой -СО₂Н. В некоторых вариантах осуществления n равно 2, a Z представляет собой -СН₃. В некоторых вариантах осуществления n равно 3, a Z представляет собой -СО₂Н. В некоторых вариантах осуществления n равно 3, a Z представляет собой -СН₃. В некоторых вариантах осуществления n равно 4, a Z представляет собой -СО₂Н. В некоторых вариантах осуществления n равно 4, a Z представляет собой -СН₃. В некоторых вариантах осуществления n равно 5, a Z представляет собой -СО₂Н. В некоторых вариантах осуществления n равно 5, a Z представляет собой -СН₃.

В некоторых вариантах осуществления n равно 1, Z представляет собой -СО₂Н, a m равно 14-20. В некоторых вариантах осуществления n равно 1, Z представляет собой -СО₂Н, a m равно 14. В некоторых вариантах осуществления n равно 1, Z представляет собой -СО₂Н, a m равно 16. В некоторых вариантах осуществления n равно 1, Z представляет собой -CO₂H, a m равно 18.

В некоторых вариантах осуществления n равно 1, Z представляет собой -СН₃, a m равно 14-20. В некоторых вариантах осуществления n равно 1, Z представляет собой -СН₃, a m равно 14. В некоторых вариантах осуществления n равно 1, Z представляет собой -СН₃, a m равно 16. В некоторых вариантах осуществления n равно 1, Z представляет собой -СН₃, a m равно 18.

В некоторых вариантах осуществления n равно 2, Z представляет собой -СО₂Н, a m равно 14-20. В некоторых вариантах осуществления n равно 2, Z представляет собой -СО₂Н, a m равно 14. В некоторых вариантах осуществления n равно 2, Z представляет собой -СО₂Н, a m равно 16. В некоторых вариантах осуществления n равно 2, Z представляет собой -СО₂Н, a m равно 18.

В некоторых вариантах осуществления n равно 2, Z представляет собой -СН₃, a m равно 14-20. В некоторых вариантах осуществления n равно 2, Z представляет собой -СН₃, a m равно 14. В некоторых вариантах осуществления n равно 2, Z представляет собой -СН₃, a m равно 16. В некоторых вариантах осуществления n равно 2, Z представляет собой -СН₃, a m равно 18.

В некоторых вариантах осуществления n равно 3, Z представляет собой -СО₂Н, a m равно 14-20. В некоторых вариантах осуществления n равно 3, Z представляет собой -СО₂Н, a m равно 14. В некоторых вариантах осуществления n равно 3, Z представляет собой -СО₂Н, a m равно 16. В некоторых вариантах осуществления n равно 3, Z представляет собой -СО₂Н, a m равно 18.

В некоторых вариантах осуществления n равно 3, Z представляет собой -СН₃, a m равно 14-20. В некоторых вариантах осуществления n равно 3, Z представляет собой -СН₃, a m равно 14. В некоторых вариантах осуществления n равно 3, Z представляет собой -СН₃, a m равно 16. В некоторых вариантах осуществления n равно 3, Z представляет собой -СН₃, a m равно 18.

В некоторых вариантах осуществления n равно 4, Z представляет собой -СО₂Н, a m равно 14-20. В некоторых вариантах осуществления n равно 4, Z представляет собой -СО₂Н, a m равно 14. В некоторых вариантах осуществления n равно 4, Z представляет собой -СО₂Н, a m равно 16. В некоторых вариантах осуществления n равно 4, Z представляет собой -СО₂Н, a m равно 18.

В некоторых вариантах осуществления n равно 4, Z представляет собой -СН₃, a m равно 14-20. В некоторых вариантах осуществления n равно 4, Z представляет собой -СН₃, a m равно 14. В некоторых вариантах осуществления n равно 4, Z представляет собой -СН₃, a m равно 16. В некоторых вариантах осуществления n равно 4, Z представляет собой -СН₃, a m равно 18.

В некоторых вариантах осуществления n равно 5, Z представляет собой -СО₂Н, a m равно 14-20. В некоторых вариантах осуществления n равно 5, Z представляет собой -СО₂Н, a m равно 14. В некоторых вариантах осуществления n равно 5, Z представляет собой -СО₂Н, a m равно 16. В некоторых вариантах осуществления n равно 5, Z представляет собой -СО₂Н, a m равно 18.

В некоторых вариантах осуществления n равно 5, Z представляет собой -СН₃, a m равно 14-20. В некоторых вариантах осуществления n равно 5, Z представляет собой -СН₃, a m равно 14. В некоторых вариантах осуществления n равно 5, Z представляет собой -СН₃, a m равно 16. В некоторых вариантах осуществления n равно 5, Z представляет собой -СН₃, a m равно 18.

В некоторых вариантах осуществления полипептид содержит три, два, или, предпочтительно, один липофильный заместитель, каждый со спейсером. В некоторых вариантах осуществления липофильный заместитель и спейсер представляют собой моновалентную группу формулы VI:

где

Z представляет собой -СН₃ или -СО₂Н;

m равно от 4 до 24;

Y1 выбран из группы, состоящей из γGlu, Asp и Gly;

Y2 выбран из группы, состоящей из γGlu, Asp и Gly;

V представляет собой -[COCH₂(O(CH₂)₂)_tOCH₂NH]-, t равно от 1 до 8;

r равно от 1 до 8;

n1 равно от 0 до 10; и

n2 равно от 0 до 10.

В некоторых вариантах осуществления полипептид содержит три, два, или, предпочтительно, один липофильный заместитель, каждый со спейсером. В некоторых вариантах осуществления липофильный заместитель и спейсер представляют собой моновалентную группу формулы VII:

где

Z представляет собой -СН₃ или -СО₂Н; m равно от 4 до 24;

Y1 выбран из группы, состоящей из γGlu, Asp и Gly;

Y2 выбран из группы, состоящей из γGlu, Asp и Gly;

dpeg представляет собой -[CO(CH₂)O(CH₂)₂O(CH₂)NH]-;

r равно от 1 до 8;

n1 равно от 0 до 10; и

n2 равно от 0 до 10.

В некоторых вариантах осуществления -(Y1)_n1-(dpeg)r-(Y2)_n2- выбран из группы, состоящей из γGlu,dpeg,dpeg,γGlu; γGlu,dpeg,dpeg,2(γGlu); γGlu,dpeg,dpeg,3(γGlu); γGlu,dpeg,dpeg,4(γGlu); 2(γGlu),dpeg,dpeg,γGlu и 2(γGlu),dpeg,γGlu.

В некоторых вариантах осуществления полипептид содержит три, два, или, предпочтительно, один липофильный заместитель, каждый со спейсером. В некоторых вариантах осуществления липофильный заместитель и спейсер представляют собой моновалентную группу формулы VIII:

где

Z представляет собой -СН₃ или -СО₂Н; m равно от 4 до 24;

Y2 выбран из группы, состоящей из γGlu, Asp и Gly;

V представляет собой -[COCH₂(О(CH₂)₂)_tOCH₂NH]-, t равно от 1 до 8;

r равно от 1 до 8; и

n2 равно от 0 до 10.

В некоторых вариантах осуществления полипептид содержит три, два, или, предпочтительно, один липофильный заместитель, каждый со спейсером. В некоторых вариантах осуществления липофильный заместитель и спейсер представляют собой моновалентную группу формулы IX:

где

Z представляет собой -СН₃ или -СО₂Н;

m равно от 4 до 24;

dpeg представляет собой -[CO(CH₂)O(CH₂)₂O(CH₂)NH]-;

Y2 выбран из группы, состоящей из γGlu, Asp и Gly;

r равно от 1 до 8; и

n2 равно от 0 до 10.

В некоторых вариантах осуществления -(dpeg)_r-(Y2)_n2- выбран из группы, состоящей из dpeg,γGlu и dpeg,dpeg,γGlu.

В некоторых вариантах осуществления полипептид содержит три, два, или, предпочтительно, один липофильный заместитель, каждый со спейсером. В некоторых вариантах осуществления липофильный заместитель и спейсер представляют собой моновалентную группу формулы X:

где

Z представляет собой -СН₃ или -СО₂Н;

m равно от 4 до 24;

Y1 выбран из группы, состоящей из γGlu, Asp и Gly;

dpeg представляет собой -[CO(CH₂)O(CH₂)₂О(CH₂)NH]-;

r равно от 1 до 8; и

n1 равно от 0 до 10.

В некоторых вариантах осуществления -(Y1)_n1-(dpeg)_r- представляет собой 2(γGlu),dpeg.

В некоторых вариантах осуществления данного изобретения спейсер содержит бивалентную группу формулы XI:

где

каждый R₁ и R₃ представляет собой водород или С₁-С₄ алкил;

каждый R₂ представляет собой Н или СО₂Н;

р равно 1, 2, 3, 4, 5 или 6;

q равно 1, 2 или 3;

r равно 0 или 1.

данный спейсер образует мостик между аминогруппой раскрытого полипептида и группой СО- липофильного заместителя.

В некоторых вариантах осуществления данного изобретения спейсер содержит бивалентную группу формулы XII:

где

каждый R₃ представляет собой водород или С₁-С₄ алкил;

q равно 1, 2 или 3;

r равно 0 или 1.

данный спейсер образует мостик между аминогруппой раскрытого полипептида и группой СО- липофильного заместителя.

В некоторых вариантах осуществления определенные переменные, представленные в формуле XI или формуле XII, включают следующие:

В некоторых вариантах осуществления каждый R₁ представляет собой водород. В некоторых вариантах осуществления каждый R₃ представляет собой водород. В некоторых вариантах осуществления каждый R₁ и каждый R₃ представляют собой водород.

В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере один R₂ представляет собой СО₂Н. В некоторых вариантах осуществления один R₂ представляет собой СО₂Н.

В некоторых вариантах осуществления р равно 1. В некоторых вариантах осуществления р равно 2. В некоторых вариантах осуществления р равно 3. В некоторых вариантах осуществления р равно 4. В некоторых вариантах осуществления р равно 5. В некоторых вариантах осуществления р равно 6.

В некоторых вариантах осуществления q равно 1. В некоторых вариантах осуществления q равно 2. В некоторых вариантах осуществления q равно 3.

В некоторых вариантах осуществления r равно 0. В некоторых вариантах осуществления г равно 1.

В некоторых вариантах осуществления спейсер представляет собой γ-глутамил, т.е., -NH(CHCO₂H)(CH₂)₂CO--. В некоторых вариантах осуществления спейсер представляет собой γ-аминобутаноил, т.е., -NH(CH₂)₃CO--. В некоторых вариантах осуществления спейсер представляет собой β-аспарагил, т.е., -NH(CHCO₂H)(CH₂)CO--. В некоторых вариантах осуществления изобретения, спейсер представляет собой NH(CH₂)₂CO--. В некоторых вариантах осуществления спейсер представляет собой глицил. В некоторых вариантах осуществления спейсер представляет собой β-аланил.

В некоторых вариантах осуществления спейсер представляет собой -NHCH(CO₂H)(CH₂)₂CO-- [N(R₃)((CH₂)₂O(CH₂)₂О)_q(CH₂)CO-]_r. В некоторых вариантах осуществления спейсер представляет собой -NH(CH₂)₃CO--[N(R₃)((CH₂)₂O(CH₂)₂O)_q(CH₂)CO-]_r. В некоторых вариантах осуществления спейсер представляет собой NHCH(CO₂H)(CH₂)₂CO-NH((CH₂)₂O(CH₂)₂О)₂(CH₂)CO-. В некоторых вариантах осуществления спейсер представляет собой -NH(CH₂)₃CO-NH((CH₂)₂O(CH₂)₂О)₂(CH₂)CO-. В некоторых вариантах осуществления спейсер представляет собой -NHCH(CO₂H)CH₂CO--[N(R₃)((CH₂)₂О(CH₂)₂O)_q(CH₂)CO-]_r. В некоторых вариантах осуществления спейсер представляет собой -NH(CH₂)₂CO-- [N(R₃)((CH₂)₂О(CH₂)₂O)_q(CH₂)CO-]_r.

В некоторых вариантах осуществления данного изобретения спейсер содержит бивалентную группу формулы XIII:

где

Y выбран из группы, состоящей из γGlu, Asp, Lys и Gly; n равно от 1 до 10.

В некоторых вариантах осуществления Y выбран из группы, состоящей из γGlu и Gly. В некоторых вариантах осуществления Y представляет собой γGlu. В некоторых вариантах осуществления Y представляет собой Gly.

В некоторых вариантах осуществления спейсер образует мостик между аминогруппой раскрытого полипептида и группой СО- липофильного заместителя. В некоторых вариантах осуществления один конец спейсера образует ковалентную связь с аминогруппой раскрытого полипептида, а другой конец спейсера образует ковалентную связь с атом водорода или защитной группой.

В некоторых вариантах осуществления данного изобретения спейсер содержит бивалентную группу формулы XIV:

где

n равно от 1 до 10.

В некоторых вариантах осуществления n выбран из группы, состоящей из 1,2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 и 10. В некоторых вариантах осуществления n равно 1. В некоторых вариантах осуществления n равно 2. В некоторых вариантах осуществления n равно 3. В некоторых вариантах осуществления n равно 4. В некоторых вариантах осуществления n равно 5.

В некоторых вариантах осуществления спейсер образует мостик между аминогруппой раскрытого полипептида и группой СО- липофильного заместителя. В некоторых вариантах осуществления один конец спейсера образует ковалентную связь с аминогруппой раскрытого полипептида, а другой конец спейсера образует ковалентную связь с атом водорода или защитной группой.

В некоторых вариантах осуществления данного изобретения спейсер содержит бивалентную группу формулы XV:

где

n равно от 1 до 10.

В некоторых вариантах осуществления (γGlu)n выбран из группы, состоящей из γGlu; 2(γGlu); 3(γGlu); 4(γGlu) (SEQ ID NO: 313) и 5(γGlu) (SEQ ID NO: 314). В некоторых вариантах осуществления -(γGlu)n-(Gly)- («(γGlu)n-(Gly)», раскрытый как SEQ ID NO: 312) выбран из группы, состоящей из 2(γGlu),Gly и 3(γGlu),Gly (SEQ ID NO: 315).

В некоторых вариантах осуществления спейсер образует мостик между аминогруппой раскрытого полипептида и группой СО- липофильного заместителя. В некоторых вариантах осуществления один конец спейсера образует ковалентную связь с аминогруппой раскрытого полипептида, а другой конец спейсера образует ковалентную связь с атом водорода или защитной группой.

В некоторых вариантах осуществления данного изобретения спейсер содержит бивалентную группу формулы XVI:

где

n равно от 1 до 10.

В некоторых вариантах осуществления спейсер образует мостик между аминогруппой раскрытого полипептида и группой СО- липофильного заместителя. В некоторых вариантах осуществления один конец спейсера образует ковалентную связь с аминогруппой раскрытого полипептида, а другой конец спейсера образует ковалентную связь с атом водорода или защитной группой.

В некоторых вариантах осуществления формулы XIII, формулы XIV, формулы XV или формулы XVI, n выбран из группы, состоящей из 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 и 10. В некоторых вариантах осуществления n равно 1. В некоторых вариантах осуществления n равно 2. В некоторых вариантах осуществления n равно 3. В некоторых вариантах осуществления n равно 4. В некоторых вариантах осуществления n равно 5.

В некоторых вариантах осуществления данного изобретения спейсер содержит бивалентную группу формулы XVII:

где

Y1 выбран из группы, состоящей из γGlu, Asp и Gly;

Y2 выбран из группы, состоящей из γGlu, Asp и Gly;

V представляет собой -[COCH₂(O(CH₂)₂)_tOCH₂NH]-, t равно от 1 до 8;

r равно от 1 до 8;

n1 равно от 0 до 10; и

n2 равно от 0 до 10.

В некоторых вариантах осуществления спейсер образует мостик между аминогруппой раскрытого полипептида и группой СО- липофильного заместителя. В некоторых вариантах осуществления один конец спейсера образует ковалентную связь с аминогруппой раскрытого полипептида, а другой конец спейсера образует ковалентную связь с атом водорода или защитной группой.

В некоторых вариантах осуществления данного изобретения спейсер содержит бивалентную группу формулы XVIII:

где

Y1 выбран из группы, состоящей из γGlu, Asp и Gly;

Y2 выбран из группы, состоящей из γGlu, Asp и Gly;

dpeg представляет собой -[CO(CH₂)О(CH₂)₂О(CH₂)NH]-;

r равно от 1 до 8;

n1 равно от 0 до 10; и

n2 равно от 0 до 10.

В некоторых вариантах осуществления -(Y1)_n1-(dpeg)_r-(Y2)_n2- выбран из группы, состоящей из γGlu,dpeg,dpeg,γGlu; γGlu,dpeg,dpeg,2(γGlu); γGlu,dpeg,dpeg,3(γGlu); γGlu,dpeg,dpeg,4(γGlu); 2(γGlu),dpeg,dpeg,γGlu и 2(γGlu),dpeg,γGlu.

В некоторых вариантах осуществления спейсер образует мостик между аминогруппой раскрытого полипептида и группой СО- липофильного заместителя. В некоторых вариантах осуществления один конец спейсера образует ковалентную связь с аминогруппой раскрытого полипептида, а другой конец спейсера образует ковалентную связь с атом водорода или защитной группой.

Соответственно, в некоторых вариантах осуществления, предложенный в данном документе выделенный полипептид, содержит аминокислотную последовательность или его фармацевтически приемлемую соль, выбранную из группы, состоящей из аминокислотных последовательностей, представленных консенсусной

последовательностью, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO: 199, SEQ ID NO: 200, SEQ ID NO: 201, SEQ ID NO: 202, SEQ ID NO: 203, SEQ ID NO: 204, SEQ ID NO: 205, SEQ ID NO: 206, SEQ ID NO: 207, SEQ ID NO: 208 и SEQ ID NO: 209, причем выделенный пептид дополнительно содержит липофильный заместитель, и, необязательно, содержит спейсер.

В одном варианте осуществления выделенный полипептид содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 199, или ее фармацевтически приемлемую соль, дополнительно содержащую липофильный заместитель формулы I. В одном варианте осуществления выделенный полипептид содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 199, или ее фармацевтически приемлемую соль, дополнительно содержащую липофильный заместитель и спейсер, выбранный из группы, состоящей из формулы II, формулы III, формулы IV, формулы V, формулы VI, формулы VII, формулы VIII, формулы ГХ и формулы X. В одном варианте осуществления выделенный полипептид содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 199, или ее фармацевтически приемлемую соль, дополнительно содержащую липофильный заместитель и спейсер формулы III. В одном варианте осуществления выделенный полипептид содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 199 или ее фармацевтически приемлемую соль, дополнительно содержащую липофильный заместитель и спейсер формулы VI. В одном варианте осуществления выделенный полипептид содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 199 или ее фармацевтически приемлемую соль, дополнительно содержащую липофильный заместитель и спейсер формулы VII.

В одном варианте осуществления выделенный полипептид содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 200, или ее фармацевтически приемлемую соль, дополнительно содержащую липофильный заместитель формулы I. В одном варианте осуществления выделенный полипептид содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 200, или ее фармацевтически приемлемую соль, дополнительно содержащую липофильный заместитель и спейсер, выбранный из группы, состоящей из формулы II, формулы III, формулы IV, формулы V, формулы VI, формулы VII, формулы VIII, формулы ГХ и формулы X. В одном варианте осуществления выделенный полипептид содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 200, или ее фармацевтически приемлемую соль, дополнительно содержащую липофильный заместитель и спейсер формулы III. В одном варианте осуществления выделенный полипептид содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 200 или ее фармацевтически приемлемую соль, дополнительно содержащую липофильный заместитель и спейсер формулы VI. В одном варианте осуществления выделенный полипептид содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 200 или ее фармацевтически приемлемую соль, дополнительно содержащую липофильный заместитель и спейсер формулы VII.

В одном варианте осуществления выделенный полипептид содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 204, или ее фармацевтически приемлемую соль, дополнительно содержащую липофильный заместитель формулы I. В одном варианте осуществления выделенный полипептид содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 204, или ее фармацевтически приемлемую соль, дополнительно содержащую липофильный заместитель и спейсер, выбранный из группы, состоящей из формулы II, формулы III, формулы IV, формулы V, формулы VI, формулы VII, формулы VIII, формулы ГХ и формулы X. В одном варианте осуществления выделенный полипептид содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 204, или ее фармацевтически приемлемую соль, дополнительно содержащую липофильный заместитель и спейсер формулы III. В одном варианте осуществления выделенный полипептид содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 204 или ее фармацевтически приемлемую соль, дополнительно содержащую липофильный заместитель и спейсер формулы VI. В одном варианте осуществления выделенный полипептид содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 204 или ее фармацевтически приемлемую соль, дополнительно содержащую липофильный заместитель и спейсер формулы VII.

В одном варианте осуществления выделенный полипептид содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 206, или ее фармацевтически приемлемую соль, дополнительно содержащую липофильный заместитель формулы I. В одном варианте осуществления выделенный полипептид содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 206, или ее фармацевтически приемлемую соль, дополнительно содержащую липофильный заместитель и спейсер, выбранный из группы, состоящей из формулы II, формулы III, формулы IV, формулы V, формулы VI, формулы VII, формулы VIII, формулы ГХ и формулы X. В одном варианте осуществления выделенный полипептид содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 206, или ее фармацевтически приемлемую соль, дополнительно содержащую липофильный заместитель и спейсер формулы III. В одном варианте осуществления выделенный полипептид содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 206 или ее фармацевтически приемлемую соль, дополнительно содержащую липофильный заместитель и спейсер формулы VI. В одном варианте осуществления выделенный полипептид содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 206 или ее фармацевтически приемлемую соль, дополнительно содержащую липофильный заместитель и спейсер формулы VII.

В одном варианте осуществления выделенный полипептид содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 208, или ее фармацевтически приемлемую соль, дополнительно содержащую липофильный заместитель формулы I. В одном варианте осуществления выделенный полипептид содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 208, или ее фармацевтически приемлемую соль, дополнительно содержащую липофильный заместитель и спейсер, выбранный из группы, состоящей из формулы II, формулы III, формулы IV, формулы V, формулы VI, формулы VII, формулы VIII, формулы ГХ и формулы X. В одном варианте осуществления выделенный полипептид содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 208, или ее фармацевтически приемлемую соль, дополнительно содержащую липофильный заместитель и спейсер формулы III. В одном варианте осуществления выделенный полипептид содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 208 или ее фармацевтически приемлемую соль, дополнительно содержащую липофильный заместитель и спейсер формулы VI. В одном варианте осуществления выделенный полипептид содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 208 или ее фармацевтически приемлемую соль, дополнительно содержащую липофильный заместитель и спейсер формулы VII.

В некоторых вариантах осуществления выделенный полипептид по, предложенный в данном документе, содержит аминокислотную последовательность, или ее фармацевтически приемлемую соль, выбранную из группы, состоящей из аминокислотных последовательностей, представленных консенсусной последовательностью SEQ ID NO: 200: X₁CX₃TX₅X₆CX₈TX₁₀RX₁₂X₁₃X₁₄X₁₅X₁₆X₁₇X₁₈X₁₉X₂₀NX₂₂FGPILPX₂₉TX₃₁VGSX₃₅TY-(OH/NH₂) (SEQ ID NO: 200), или его фармацевтически приемлемая соль, где:

X₁ представляет собой S, K, k, Н или I; Х₃ представляет собой N или S; Х₅ представляет собой S или А; Х₆ представляет собой Т или S; X₈ представляет собой А или K; Х₁₀ представляет собой Q или S; Х₁₂ представляет собой L или K; Х₁₃ представляет собой A, S, Е или K; Х₁₄ представляет собой N, n, d, Y или Q; Х₁₅ представляет собой Е, F, f, Y, I, k, K или Aib; Х₁₀ представляет собой k, K, L, Aib, N-MeL или 1; Х₁₇ представляет собой Н, V, Q, R, k, K или Aib; X₁₈ представляет собой K, Н, или R; Х₁₀ представляет собой S или Aib; Х₂₀ представляет собой S или Aib; Х₂₂ представляет собой N или Е; Х₂₉ представляет собой Р, R или K; Х₃₁ представляет собой k, K или N, а Х₃₅ представляет собой е, Е или N; каждый K независимо представляет собой L-лизин, необязательно ковалентно связанный с липофильным заместителем, необязательно посредством спейсера; каждый к независимо представляет собой D-лизин, необязательно ковалентно связанный с липофильным заместителем, необязательно посредством спейсера; где два остатка цистеина Х₁СХ₃ТХ₅Х₆С необязательно дополнительно связаны дисульфидным мостиком, и при условии, что если Х₃₁ представляет собой N, тогда Х₃₅ представляет собой Е, или если Х₃₅ представляет собой N, тогда Х₃₁ представляет собой K; и при этом выделенный пептид дополнительно содержит липофильный заместитель формулы I:

где

Z представляет собой -СН₃ или -СО₂Н; и

m равно от 4 до 24.

В некоторых вариантах осуществления выделенный полипептид по, предложенный в данном документе, содержит аминокислотную последовательность, или ее фармацевтически приемлемую соль, выбранную из группы, состоящей из аминокислотных последовательностей, представленных консенсусной последовательностью SEQ ID NO: 200:

X₁CX₃TX₅X₆CX₈TX₁₀RX₁₂X₁₃X₁₄X₁₅X₁₆X₁7X₁₈X₁₉X₂₀NX₂₂FGPILPX₂₉TX₃₁VGSX₃₅TY-(OH/NH₂) (SEQ ID NO: 200), или его фармацевтически приемлемая соль, где:

X₁ представляет собой S, K, k, Н или I; Х₃ представляет собой N или S; Х₅ представляет собой S или А; Х₆ представляет собой Т или S; X₈ представляет собой А или K; Х₁₀ представляет собой Q или S; Х₁₂ представляет собой L или K; Х₁₃ представляет собой A, S, Е или K; Х₁4 представляет собой N, n, d, Y или Q; Х₁₅ представляет собой Е, F, f, Y, I, k, K или Aib; X₁₆ представляет собой k, K, L, Aib, N-MeL или 1; Х₁₇ представляет собой Н, V, Q, R, k, K или Aib; X₁₈ представляет собой K, Н, или R; Х₁₉ представляет собой S или Aib; Х₂₀ представляет собой S или Aib; Х₂₂ представляет собой N или Е; Х₂₉ представляет собой Р, R или K; Х₃₁ представляет собой k, K или N, а Х₃₅ представляет собой е, Е или N; каждый K независимо представляет собой L-лизин, необязательно ковалентно связанный с липофильным заместителем, необязательно посредством спейсера; каждый к независимо представляет собой D-лизин, необязательно ковалентно связанный с липофильным заместителем, необязательно посредством спейсера; где два остатка цистеина Х₁СХ₃ТХ₅Х₆С необязательно дополнительно связаны дисульфидным мостиком, и при условии, что если Х₃₁ представляет собой N, тогда Х₃₅ представляет собой Е, или если Х₃₅ представляет собой N, тогда Х₃₁ представляет собой K; и при этом выделенный пептид дополнительно содержит липофильный заместитель и спейсер формулы III:

где

Z представляет собой -СН₃ или -СО₂Н;

m равно от 4 до 24; и

n равно от 1 до 10.

В некоторых вариантах осуществления выделенный полипептид по, предложенный в данном документе, содержит аминокислотную последовательность, или ее фармацевтически приемлемую соль, выбранную из группы, состоящей из аминокислотных последовательностей, представленных консенсусной последовательностью SEQ ID NO: 200:

X₁CX₃TX₅X₆CX₈TX₁₀RX₁₂X₁₃X₁₄X₁₅X₁₆X₁₇X₁₈X₁₉X₂₀NX₂₂FGPILPX₂₉TX₃₁VGSX₃₅TY-(OH/NH₂) (SEQ ID NO: 200), или его фармацевтически приемлемая соль, где:

X₁ представляет собой S, K, k, Н или I; Х₃ представляет собой N или S; Х₅ представляет собой S или А; Х₆ представляет собой Т или S; Xs представляет собой А или K; Х₁₀ представляет собой Q или S; Х₁₂ представляет собой L или K; Х₁₃ представляет собой A, S, Е или K; Х₁₄ представляет собой N, n, d, Y или Q; Х₁₅ представляет собой Е, F, f, Y, I, k, K или Aib; X₁₆ представляет собой k, K, L, Aib, N-MeL или 1; Х₁₇ представляет собой Н, V, Q, R, k, K или Aib; X₁₈ представляет собой K, Н, или R; Х₁₉ представляет собой S или Aib; Х₂₀ представляет собой S или Aib; Х₂₂ представляет собой N или Е; Х₂₉ представляет собой Р, R или K; Х₃₁ представляет собой k, K или N, а Х₃₅ представляет собой е, Е или N; каждый K независимо представляет собой L-лизин, необязательно ковалентно связанный с липофильным заместителем, необязательно посредством спейсера; каждый k независимо представляет собой D-лизин, необязательно ковалентно связанный с липофильным заместителем, необязательно посредством спейсера; где два остатка цистеина Х₁СХ₃ТХ₅Х₆С необязательно дополнительно связаны дисульфидным мостиком, и при условии, что если Х₃₁ представляет собой N, тогда Х₃₅ представляет собой Е, или если Х₃₅ представляет собой N, тогда Х₃₁ представляет собой K; и при этом выделенный пептид дополнительно содержит липофильный заместитель и спейсер формулы VI:

где

Z представляет собой -СН₃ или -СО₂Н;

m равно от 4 до 24;

Y1 выбран из группы, состоящей из γGlu, Asp и Gly;

Y2 выбран из группы, состоящей из γGlu, Asp и Gly;

V представляет собой -[COCH₂(O(CH₂)₂)_tOCH₂NH]-, t равно от 1 до 8;

r равно от 1 до 8;

n1 равно от 0 до 10; и

n2 равно от 0 до 10.

В некоторых вариантах осуществления выделенный полипептид по, предложенный в данном документе, содержит аминокислотную последовательность, или ее фармацевтически приемлемую соль, выбранную из группы, состоящей из аминокислотных последовательностей, представленных консенсусной последовательностью SEQ ID NO: 200:

X₁CX₃TX₅X₆CX₈TX₁₀RX₁₂X₁₃X₁₄X₁₅X₁₆X₁7X₁₈X₁₉X₂₀NX₂₂FGPILPX₂₉TX₃₁VGSX₃₅TY-(OH/NH₂) (SEQ ID NO: 200), или его фармацевтически приемлемая соль, где:

X₁ представляет собой S, K, k, Н или I; Х₃ представляет собой N или S; Х₅ представляет собой S или А; Х₆ представляет собой Т или S; Xs представляет собой А или K; Х₁₀ представляет собой Q или S; Х₁₂ представляет собой L или K; Х₁₀ представляет собой A, S, Е или K; Х₁₀ представляет собой N, n, d, Y или Q; Х₁₀ представляет собой Е, F, f, Y, I, k, K или Aib; Х₁₀ представляет собой k, K, L, Aib, N-MeL или 1; Х₁₀ представляет собой Н, V, Q, R, k, K или Aib; Х₁₀ представляет собой K, Н, или R; Х₁₀ представляет собой S или Aib; Х₂₀ представляет собой S или Aib; Х₂₂ представляет собой N или Е; Х₂₉ представляет собой Р, R или K; Х₃₁ представляет собой k, K или N, а Х₃₅ представляет собой е, Е или N; каждый K независимо представляет собой L-лизин, необязательно ковалентно связанный с липофильным заместителем, необязательно посредством спейсера; каждый k независимо представляет собой D-лизин, необязательно ковалентно связанный с липофильным заместителем, необязательно посредством спейсера; где два остатка цистеина Х₁СХ₃ТХ₅Х6С необязательно дополнительно связаны дисульфидным мостиком, и при условии, что если Х₃₁ представляет собой N, тогда Х₃₅ представляет собой Е, или если Х₃₅ представляет собой N, тогда Х₃₁ представляет собой K; и при этом выделенный пептид дополнительно содержит липофильный заместитель и спейсер формулы VII:

где

Z представляет собой -СН₃ или -СО₂Н;

m равно от 4 до 24;

Y1 выбран из группы, состоящей из γGlu, Asp и Gly;

Y2 выбран из группы, состоящей из γGlu, Asp и Gly;

dpeg представляет собой -[CO(CH₂)О(CH₂)₂O(CH₂)NH]-;

r равно от 1 до 8;

n1 равно от 0 до 10; и

n2 равно от 0 до 10.

В некоторых вариантах осуществления выделенный полипептид содержит липофильный заместитель в положении X₁, Х₁₅ или X₁₆.

В некоторых вариантах осуществления выделенный полипептид, содержащий липофильный заместитель в положении X₁, Х₁₅ или X₁₆ конъюгирован посредством лизина в данном положении.

В некоторых вариантах осуществления выделенный полипептид содержит липофильный заместитель в положении Х₁

В некоторых вариантах осуществления выделенный полипептид содержит липофильный заместитель в положении Х₁₅.

В некоторых вариантах осуществления выделенный полипептид содержит липофильный заместитель в положении X₁₆.

В некоторых вариантах осуществления выделенный полипептид, содержащий липофильный заместитель в положении или X₁, конъюгирован посредством лизина в данном положении.

В некоторых вариантах осуществления выделенный полипептид, содержащий липофильный заместитель в положении или Х₁₅, конъюгирован посредством лизина в данном положении.

В некоторых вариантах осуществления выделенный полипептид, содержащий липофильный заместитель в положении или Х₁₀, конъюгирован посредством лизина в данном положении.

В некоторых вариантах осуществления выделенный полипептид по данному изобретению содержит аминокислотную последовательность:

SC*NTSTC*ATQRLANEk*((γGlu)₂-CO(CH₂)₁₄CH₃)HKSSNNFGPILPP TKVGSETY-NH₂ (SEQ ID NO: 27), также называемую в данном документе соединением А27.

В некоторых вариантах осуществления выделенный полипептид по данному изобретению содержит аминокислотную последовательность:

K*((γGlu)₂(CO(CH₂)₁₈CO₂H))C*NTSTC*ATQRLANELHKSSNNFGPILPPTKVGSETY-(NH₂) (SEQ ID NO: 64), также называемую в данном документе соединением А64.

В некоторых вариантах осуществления выделенный полипептид по данному изобретению содержит аминокислотную последовательность:

K*((γGlu)₂(CO(CH₂)₁₆CO₂H))C*NTSTC*ATQRLANELHKSSNNFGPILPPTKVGSETY-(NH₂) (SEQ ID NO: 65), также называемую в данном документе соединением А65.

В некоторых вариантах осуществления выделенный полипептид по данному изобретению содержит аминокислотную последовательность: K*(γGlu-CO(CH₂)₁₆CO₂H)C*NTSTC*ATSRLANFLQKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH₂ (SEQ ID NO: 109), также называемую в данном документе соединением А109.

6. Иллюстративные соединения: полипептиды аналога амилина

В некоторых вариантах осуществления выделенный полипептид по данному изобретению содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из следующих пептидов, приведенных в таблице 3:

Примечания:

• каждый K* независимо представляет собой L-лизин необязательно, ковалентно связанный с липофильным заместителем, необязательно через спейсер;

• каждый k* независимо представляет собой D-лизин необязательно, ковалентно связанный с липофильным заместителем, необязательно через спейсер;

• два остатка цистеина (С*) в положениях 2 и 7 необязательно, дополнительно связаны дисульфидным мостиком;

• в контексте данного документа, (γGlu)₂ and 2(γGlu) оба означают -(γGlu)-(γGlu)-; (γClu)₃ и 3(γGlu) оба означают -(γGlu)-(γGlu)-(γGlu)-; и т.д.; и

• где переменная присутствует более одного раза в данной формуле, каждое возникновение этой переменной независимо определяется. Например, для группы -(Y)₃-, где Y может представлять собой γGlu, Asp, Lys или Gly, каждый Y независимо выбирают так, чтобы он являлся одной из четырех аминокислот. Соответственно, неограничивающим примером, -(Y)₃- может быть -(γGlu)-(γGlu)-(γGlu)-, -(γGlu)-(Asp)-(γGlu)-, -(Gly)-(Asp)-(γGlu)- или -(Gly)-(γGlu)-(γGlu)-.

В некоторых вариантах осуществления в данном изобретении предложено соединение, приведенной в таблице 3, выше, или его фармацевтически приемлемая соль. В некоторых вариантах осуществления фармацевтически приемлемая соль представляет собой ацетатную соль. В некоторых вариантах осуществления фармацевтически приемлемая соль представляет собой трифторацетатную (TFA) соль. В некоторых вариантах осуществления фармацевтически приемлемая соль представляет собой соль соляной кислоты (HCl). В одном варианте осуществления соединение представляет собой А27. В некоторых вариантах осуществления соединение представляет собой ацетатную соль соединения А27. В некоторых вариантах осуществления соединение представляет собой TFA-соль соединения А27. В некоторых вариантах осуществления соединение представляет собой HCl-соль соединения А27. В одном варианте осуществления соединение представляет собой А57. В некоторых вариантах осуществления соединение представляет собой ацетатную соль соединения А57. В некоторых вариантах осуществления соединение представляет собой TFA-соль соединения А57. В некоторых вариантах осуществления соединение представляет собой HCl-соль соединения А57. В одном варианте осуществления соединение представляет собой А64. В некоторых вариантах осуществления соединение представляет собой ацетатную соль соединения А64. В некоторых вариантах осуществления соединение представляет собой TFA-соль соединения А64. В некоторых вариантах осуществления соединение представляет собой HCl-соль соединения А64.

7. Промежуточные продукты полипептидов

В определенных вариантах осуществления в данном изобретении также предложены синтетические промежуточные продукты выделенных полипептидов, которые являются аналогами амилина. В некоторых вариантах осуществления промежуточный продукт полипептида по изобретению представляет собой выделенный полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из аминокислотных последовательностей, представленных консенсусной последовательностью SEQ ID NO: 210:

X₁CX₃TX₅X₆CX₈TX₁₀RX₁₂X₁₃X₁₄X₁₅X₁₆X₁₇X₁₈X₁₉X₂₀NX₂₂FGPILPX₂₉TX₃₁VGSX₃₅TY-(OH/NH₂) (SEQ ID NO: 210), где:

X₁ представляет собой S, К, k, H или I;

X₃ представляет собой N или S;

Х₅ представляет собой S или А;

Х₆ представляет собой Т или S;

Х₈ представляет собой А или К;

Х₁₀ представляет собой Q или S;

Х₁₂ представляет собой L или К;

Х₁₃ представляет собой A, S, Е или К;

Х₁₄ представляет собой N, n, d, Y или Q;

Х₁₅ представляет собой Е, F, f, Y, I, к, К или α-аминоизомасляную кислоту (Aib);

X₁₆ представляет собой k, К, L, Aib, N-метиллейцин (N-MeL), или l;

Х₁₇ представляет собой Н, V, Q, R, k, К или Aib;

X₁₈ представляет собой К, Н, или R;

Х₁₉ представляет собой S или Aib;

Х₂₀ представляет собой S или Aib;

Х₂₂ представляет собой N или Е;

Х₂₉ представляет собой Р, R или К;

Х₃₁ представляет собой k, К или N; и

Х₃₅ представляет собой е, Е или N;

каждый К независимо представляет собой L-лизин, необязательно ковалентно связанный с защитной группой или спейсер, необязательно связанный с защитной группой;

каждый к независимо представляет собой D-лизин, необязательно ковалентно связанный с защитной группой или спейсер, необязательно связанный с защитной группой;

при этом два остатка цистеина Х₁СХ₃ТХ₅Х₆С необязательно дополнительно связаны дисульфидным мостиком;

при условии, что если Х₃₁ представляет собой N, тогда Х₃₅ представляет собой Е, или если Х₃₅ представляет собой N, тогда Х₃₁ представляет собой К.

В некоторых вариантах осуществления Х₃₁ представляет собой К. В некоторых вариантах осуществления Х₃₁ представляет собой N.

В некоторых вариантах осуществления Х₃₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления Х₃₅ представляет собой N.

В некоторых вариантах осуществления Х₃₁ представляет собой К, а Х₃₅ представляет собой Е.

В некоторых вариантах осуществления определенные аминокислоты, представленные консенсусной последовательностью SEQ ID NO: 210, включают следующие:

В некоторых вариантах осуществления карбоксиконцевая аминокислота 37 представляет собой Y-(NH₂). В некоторых вариантах осуществления карбоксиконцевая аминокислота 37 представляет собой Y-(OH).

В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой S. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой К. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой к. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой I.

В некоторых вариантах осуществления Х₃ представляет собой N. В некоторых вариантах осуществления Х₃ представляет собой S.

В некоторых вариантах осуществления Х₅ представляет собой S. В некоторых вариантах осуществления Х₅ представляет собой А.

В некоторых вариантах осуществления Х₆ представляет собой Т. В некоторых вариантах осуществления Х₆ представляет собой S.

В некоторых вариантах осуществления Х₈ представляет собой А. В некоторых вариантах осуществления X₈ представляет собой К.

В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой Q. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой S.

В некоторых вариантах осуществления Х₁₂ представляет собой L. В некоторых вариантах осуществления Х₁₂ представляет собой К.

В некоторых вариантах осуществления Х₁₃ представляет собой А. В некоторых вариантах осуществления Х₁₃ представляет собой S. В некоторых вариантах осуществления Х₁₃ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления Х₁₃ представляет собой К.

В некоторых вариантах осуществления Х₁₃ представляет собой N. В некоторых вариантах осуществления Х₁₄ представляет собой n. В некоторых вариантах осуществления X₁₄ представляет собой d. В некоторых вариантах осуществления X₁₄ представляет собой Y. В некоторых вариантах осуществления Х₁₄ представляет собой Q.

В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой F. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой f. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой Y. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой I. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой К. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой k. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой Aib.

В некоторых вариантах осуществления Х₁₆ представляет собой L. В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой I. В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой К. В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой k. В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой Aib. В некоторых вариантах осуществления изобретения X₁₆ представляет собой N-MeL.

В некоторых вариантах осуществления Х₁₇ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления Х₁₇ представляет собой V. В некоторых вариантах осуществления Х₁₇ представляет собой Q. В некоторых вариантах осуществления Х₁₇ представляет собой R. В некоторых вариантах осуществления Х₁₇ представляет собой К. В некоторых вариантах осуществления Х₁₇ представляет собой k. В некоторых вариантах осуществления Х₁₇ представляет собой Aib.

В некоторых вариантах осуществления X₁₈ представляет собой К. В некоторых вариантах осуществления X₁₈ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления X₁₈ представляет собой R.

В некоторых вариантах осуществления Х₁₉ представляет собой S. В некоторых вариантах осуществления Х₁₉ представляет собой Aib.

В некоторых вариантах осуществления Х₂₀ представляет собой S. В некоторых вариантах осуществления Х₂₀ представляет собой Aib.

В некоторых вариантах осуществления Х₂₂ представляет собой N. В некоторых вариантах осуществления Х₂₂ представляет собой Е.

В некоторых вариантах осуществления Х₂₉ представляет собой Р. В некоторых вариантах осуществления Х₂₉ представляет собой R. В некоторых вариантах осуществления Х₂₉ представляет собой К.

В некоторых вариантах осуществления Х₃₁ представляет собой k. В некоторых вариантах осуществления Х₃₁ представляет собой К. В некоторых вариантах осуществления Х₃₁ представляет собой N.

В некоторых вариантах осуществления Х₃₅ представляет собой е. В некоторых вариантах осуществления Х₃₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления Х₃₅ представляет собой N.

В некоторых вариантах осуществления определенные аминокислоты, представленные консенсусной последовательностью SEQ ID NO: 210, включают следующие:

В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой S, а Х₅ представляет собой S. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой S, а Х₁₀ представляет собой Q. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой S, а Х₁₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой S, a X₁₆ представляет собой L. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой S, a X₁₆ представляет собой k. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой S, а Х₁₇ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой S, a X₁₈ представляет собой К. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой S, а Х₃₁ представляет собой К. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой S, а Х₃₅ представляет собой Е.

В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой К, а Х₅ представляет собой S. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой К, а Х₁₀ представляет собой Q. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой К, а Х₁₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой К, a X₁₆ представляет собой L. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой К, a X₁₆ представляет собой к. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой К, а Х₁₇ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой К, a X₁₈ представляет собой К. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой К, а Х₃₁ представляет собой К. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой k, а Х₃₅ представляет собой Е.

В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой k, а Х₅ представляет собой S. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой k, а Х₁₀ представляет собой Q. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой k, а Х₁₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой k, а X₁₆ представляет собой L. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой k, a X₁₆ представляет собой k. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой k, а Х₁₇ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой k, a X₁₈ представляет собой К. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой k, а Х₃₁ представляет собой К. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой k, а Х₃₅ представляет собой Е.

В некоторых вариантах осуществления Х₅ представляет собой S, а Х₁₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления Х₅ представляет собой S, а Х₁₀ представляет собой Q. В некоторых вариантах осуществления Х₅ представляет собой S, а X₁₆ представляет собой L. В некоторых вариантах осуществления Х₅ представляет собой S, a X₁₆ представляет собой k. В некоторых вариантах осуществления Х₅ представляет собой S, а Х₁₇ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления Х₅ представляет собой S, a X₁₈ представляет собой К. В некоторых вариантах осуществления Х₅ представляет собой S, а Х₃₁ представляет собой К. В некоторых вариантах осуществления Х₅ представляет собой S, а Х₃₅ представляет собой Е.

В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой Q, а Х₁₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой Q, a X₁₆ представляет собой L. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой Q, а X₁₆ представляет собой k. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой Q, а Х₁₇ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой Q, a X₁₈ представляет собой К. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой Q, а Х₃₁ представляет собой К. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой Q, а Х₃₅ представляет собой Е.

В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой Е, а Х₁₀ представляет собой L. В некоторых вариантах осуществления, Х₁₅ представляет собой Е, a X₁₆ представляет собой k. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой Е, а Х₁₇ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой Е, a X₁₆ представляет собой К. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой Е, а Х₃₁ представляет собой К. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой Е, а Х₃₅ представляет собой Е.

В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой L, а Х₁₇ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой L, a X₁₈ представляет собой К. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой L, а Х₃₁ представляет собой К. В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой L, а Х₃₅ представляет собой Е.

В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой k, а Х₁₇ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой k, a X₁₈ представляет собой К. В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой k, а Х₃₁ представляет собой К. В некоторых вариантах осуществления X₁ в представляет собой k, а Х₃₅ представляет собой Е.

В некоторых вариантах осуществления Х₁₇ представляет собой Н, a X₁₈ представляет собой К. В некоторых вариантах осуществления Х₁₇ представляет собой Н, а Х₃₁ представляет собой К. В некоторых вариантах осуществления Х₁₇ представляет собой Н, а Х₃₅ представляет собой Е.

В некоторых вариантах осуществления X₁₈ представляет собой К, а Х₃₁ представляет собой К. В некоторых вариантах осуществления, X₁₈ представляет собой К, а Х₃₅ представляет собой Е.

В некоторых вариантах осуществления Х₃₁ представляет собой К, а Х₃₅ представляет собой Е.

В некоторых вариантах осуществления определенные аминокислоты, представленные консенсусной последовательностью SEQ ID NO: 210, включают следующие:

В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой S, Х₅ представляет собой S, а Х₁₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой S, Х₅ представляет собой S, a X₁₆ представляет собой L. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой S, Х₅ представляет собой S, a X₁₆ представляет собой k. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой S, Х₅ представляет собой S, а Х₁₇ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой S, Х₅ представляет собой S, a X₁₈ представляет собой К. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой S, Х₅ представляет собой S, а Х₃₁ представляет собой К. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой S, а Х₃₅ представляет собой Е.

В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой К, Х₅ представляет собой S, а Х₁₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой К, Х₅ представляет собой S, a X₁₆ представляет собой L. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой К, Х₅ представляет собой S, a X₁₆ представляет собой k. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой К, Х₅ представляет собой S, а Х₁₇ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой К, Х₅ представляет собой S, a X₁s представляет собой К. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой К, Х₅ представляет собой S, а Х₃₁ представляет собой К. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой К, Х₅ представляет собой S, а Х₃₅ представляет собой Е.

В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой k, Х₅ представляет собой S, а Х₁₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой k, Х₅ представляет собой S, a X₁₆ представляет собой L. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой k, Х₅ представляет собой S, a X₁₆ представляет собой k. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой k, Х₅ представляет собой S, а Х₁₇ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой k, Х₅ представляет собой S, a X₁₈ представляет собой К. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой k, Х₅ представляет собой S, а Х₃₁ представляет собой К. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой k, Х₅ представляет собой S, а Х₃₅ представляет собой Е.

В некоторых вариантах осуществления Х₅ представляет собой S, Х₁₅ представляет собой Е, a X₁₆ представляет собой L. В некоторых вариантах осуществления Х₅ представляет собой S, Х₁₅ представляет собой Е, a X₁₆ представляет собой k. В некоторых вариантах осуществления Х₅ представляет собой S, Х₁₅ представляет собой Е, а Х₁₈ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления Х₅ представляет собой S, Х₁₅ представляет собой Е, a X₁₈ представляет собой К. В некоторых вариантах осуществления Х₅ представляет собой S, Х₁₅ представляет собой Е, а Х₃₁ представляет собой К. В некоторых вариантах осуществления Х₅ представляет собой S, Х₁₅ представляет собой Е, а Х₃₅ представляет собой Е.

В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой Q, Х₁₅ представляет собой Е, a X₁₆ представляет собой L. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой Q, a X₁₆ представляет собой k, а Х₁₇ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой Q, X₁₈ представляет собой К, а Х₃₁ представляет собой К. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой Q, Х₃₁ представляет собой К, а Х₃₅ представляет собой Е.

В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой Е, X₁₆ представляет собой L, а Х₁₇ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой Е, X₁₆ представляет собой L, a X₁₈ представляет собой К. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой Е, X₁₆ представляет собой L, а Х₃₁ представляет собой К. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой Е, X₁₆ представляет собой L, а Х₃₅ представляет собой Е.

В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой Е, X₁₆ представляет собой k, а Х₁₇ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой Е, X₁₆ представляет собой k, a X₁₈ представляет собой К. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой Е, X₁₆ представляет собой k, а Х₃₁ представляет собой К. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой Е, X₁₆ представляет собой k, а Х₃₅ представляет собой Е.

В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой L, Х₁₇ представляет собой Н, a X₁₈ представляет собой К. В некоторых вариантах осуществления Х₁₆ представляет собой L, Х₁₇ представляет собой Н, а Х₃₁ представляет собой К. В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой L, Х₁₇ представляет собой Н, а Х₃₅ представляет собой Е.

В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой k, Х₁₇ представляет собой Н, a X₁₈ представляет собой К. В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой k, Х₁₇ представляет собой Н, а Х₃₁ представляет собой К. В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой k, Х₁₇ представляет собой Н, а Х₃₅ представляет собой Е.

В некоторых вариантах осуществления Х₁₇ представляет собой Н, X₁₈ представляет собой К, а Х₃₁ представляет собой К. В некоторых вариантах осуществления Х₁₇ представляет собой Н, X₁₈ представляет собой К, а Х₃₅ представляет собой Е.

В некоторых вариантах осуществления, X₁₈ представляет собой К, Х₃₁ представляет собой К, а Х₃₅ представляет собой Е.

В некоторых вариантах осуществления промежуточный продукт полипептида по изобретению представляет собой выделенный полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из аминокислотных последовательностей, представленных консенсусной последовательностью SEQ ID NO: 211:

X₁CNTSTCAiX₁₀RLANX₁₅X₁₆X₁₇KSSNNFGPILPPTKVGSX₃₅TY-(OH/NH₂) (SEQ ID NO: 211), где:

X₁ представляет собой S, К или k;

Х₁₀ представляет собой Q или S;

Х₁₅ представляет собой Е или F;

X₁₆ представляет собой L, К или k;

Х₁₇ представляет собой Н, V или Q; и

Х₃₅ представляет собой Е или N;

каждый К независимо представляет собой L-лизин, необязательно ковалентно связанный с защитной группой или спейсер, необязательно связанный с защитной группой;

каждый к независимо представляет собой D-лизин, необязательно ковалентно связанный с защитной группой или спейсер, необязательно связанный с защитной группой; и

при этом два остатка цистеина X₁CNTSTC (SEQ ID NO: 309) необязательно дополнительно связаны дисульфидным мостиком.

В некоторых вариантах осуществления Х₃₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления Х₃₅ представляет собой N.

В некоторых вариантах осуществления определенные аминокислоты, представленные консенсусной последовательностью SEQ ID NO: 211, включают следующие:

В некоторых вариантах осуществления карбоксиконцевая аминокислота 37 представляет собой Y-(NH₂). В некоторых вариантах осуществления карбоксиконцевая аминокислота 37 представляет собой Y-(OH).

В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой S. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой К. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой к.

В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой Q. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой S.

В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой F.

В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой L. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой К. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой к.

В некоторых вариантах осуществления Х₁₇ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления Х₁₇ представляет собой V. В некоторых вариантах осуществления Х₁₇ представляет собой Q.

В некоторых вариантах осуществления Х₃₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления Х₃₅ представляет собой N.

В некоторых вариантах осуществления определенные аминокислоты, представленные консенсусной последовательностью SEQ ID NO: 211, включают следующие:

В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой S, а Х₁₀ представляет собой Q. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой S, а Х₁₀ представляет собой S. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой S, а Х₁₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой S, а Х₁₅ представляет собой F. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой S, a X₁₆ представляет собой L. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой S, a X₁₆ представляет собой К. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой S, a X₁₆ представляет собой k. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой S, а Х₁₇ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой S, а Х₁₇ представляет собой V. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой S, а Х₁₇ представляет собой Q. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой S, а Х₃₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой S, а Х₃₅ представляет собой N.

В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой К, а Х₁₀ представляет собой Q. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой К, а Х₁₀ представляет собой S. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой К, а Х₁₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой К, а Х₁₅ представляет собой F. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой К, a X₁₆ представляет собой L. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой К, a X₁₆ представляет собой К. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой К, a X₁₆ представляет собой k. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой К, а Х₁₇ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой К, а Х₁₇ представляет собой V. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой К, а Х₁₇ представляет собой Q. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой К, а Х₃₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой К, а Х₃₅ представляет собой N.

В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой k, а Х₁₀ представляет собой Q. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой k, а Х₁₀ представляет собой S. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой k, а Х₁₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой k, а Х₁₅ представляет собой F. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой k, a X₁₆ представляет собой L. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой k, a X₁₆ представляет собой К. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой k, a X₁₆ представляет собой k. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой k, а Х₁₇ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой k, а Х₁₇ представляет собой V. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой k, а Х₁₇ представляет собой Q. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой k, а Х₃₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления X₁ представляет собой k, а Х₃₅ представляет собой N.

В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой Q, а Х₁₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой Q, а Х₁₅ представляет собой F. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой Q, а X₁₆ представляет собой L. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой Q, a X₁₆ представляет собой К. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой Q, a X₁₆ представляет собой k. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой Q, а Х₁₇ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой Q, а Х₁₇ представляет собой V. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой Q, а Х₁₇ представляет собой Q. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой Q, а Х₃₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой Q, а Х₃₅ представляет собой N.

В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой S, а Х₁₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой S, а Х₁₅ представляет собой F. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой S, а X₁₆ представляет собой L. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой S, a X₁₆ представляет собой К. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой S, а Х₁₀ представляет собой k. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой S, а Х₁₇ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой S, а Х₁₇ представляет собой V. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой S, а Х₁₇ представляет собой Q. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой S, а Х₃₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой S, а Х₃₅ представляет собой N.

В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой Е, a X₁₆ представляет собой L. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой Е, а Х₁₀ представляет собой К. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой Е, а X₁₆ представляет собой k. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой E, а Х₁₇ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой Е, а Х₁₇ представляет собой V. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой Е, а Х₁₇ представляет собой Q. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой Е, а Х₃₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой Е, а Х₃₅ представляет собой N.

В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой F, a X₁₆ представляет собой L. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой F, а Х₁₆ представляет собой К. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой F, а X₁₆ представляет собой k. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой F, а Х₁₇ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой F, а Х₁₇ представляет собой V. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой F, а Х₁₇ представляет собой Q. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой F, а Х₃₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой F, а Х₃₅ представляет собой N.

В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой L, а Х₁₇ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой L, а Х₁₇ представляет собой V. В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой L, а Х₁₇ представляет собой Q. В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой L, а Х₃₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой L, а Х₃₅ представляет собой N.

В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой К, а Х₁₇ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой К, а Х₁₇ представляет собой V. В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой К, а Х₁₇ представляет собой Q. В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой К, а Х₃₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления Х₁₀ представляет собой К, а Х₃₅ представляет собой N.

В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой k, а Х₁₇ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой k, а Х₁₇ представляет собой V. В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой k, а Х₁₇ представляет собой Q. В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой k, а Х₃₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой k, а Х₃₅ представляет собой N.

В некоторых вариантах осуществления Х₁₇ представляет собой Н, а Х₃₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления, Х₁₇ представляет собой Н, а Х₃₅ представляет собой N.

В некоторых вариантах осуществления Х₁₇ представляет собой V, а Х₃₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления, Х₁₇ представляет собой V, а Х₃₅ представляет собой N.

В некоторых вариантах осуществления Х₁₇ представляет собой Q, а Х₃₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления, Х₁₇ представляет собой Q, а Х₃₅ представляет собой N.

В некоторых вариантах осуществления промежуточный продукт полипептида по изобретению представляет собой выделенный полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из аминокислотных последовательностей, представленных консенсусной последовательностью SEQ ID NO: 212:

SCNTSTCATQRLANX₁₅X₁₆X₁₇KSSNNFGPILPPTKVGSX₃₅TY-(OH/NH₂) (SEQ ID NO: 212), где:

X₁₅ представляет собой E или F;

X₁₆ представляет собой L, К или k;

Х₁₇ представляет собой Н, V или Q; и

Х₃₅ представляет собой Е или N;

каждый К независимо представляет собой L-лизин, необязательно ковалентно связанный с защитной группой или спейсер, необязательно связанный с защитной группой;

каждый к независимо представляет собой D-лизин, необязательно ковалентно связанный с защитной группой или спейсер, необязательно связанный с защитной группой; и

при этом два остатка цистеина SCNTSTC (SEQ ID NO: 310) необязательно дополнительно связаны дисульфидным мостиком.

В некоторых вариантах осуществления Х₃₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления Х₃₅ представляет собой N.

В некоторых вариантах осуществления определенные аминокислоты, представленные консенсусной последовательностью SEQ ID NO: 212, включают следующие:

В некоторых вариантах осуществления карбоксиконцевая аминокислота 37 представляет собой Y-(NH₂). В некоторых вариантах осуществления карбоксиконцевая аминокислота 37 представляет собой Y-(OH).

В некоторых вариантах осуществления X₁₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой F.

В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой L. В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой К. В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой k.

В некоторых вариантах осуществления Х₁₇ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления Х₁₇ представляет собой V. В некоторых вариантах осуществления Х₁₇ представляет собой Q.

В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой Е, a X₁₆ представляет собой L. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой Е, a X₁₆ представляет собой К. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой Е, а X₁₆ представляет собой k. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой E, а Х₁₇ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой Е, а Х₁₇ представляет собой V. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой Е, а Х₁₇ представляет собой Q. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой Е, а Х₃₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой Е, а Х₃₅ представляет собой N.

В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой F, a X₁₆ представляет собой L. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой F, a X₁₆ представляет собой К. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой F, а X₁₆ представляет собой k. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой F, а Х₁₇ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой F, а Х₁₇ представляет собой V. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой F, а Х₁₇ представляет собой Q. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой F, а Х₃₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления Х₁₅ представляет собой F, а Х₃₅ представляет собой N.

В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой L, а Х₁₇ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой L, а Х₁₇ представляет собой V. В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой L, а Х₁₇ представляет собой Q. В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой L, a X₃₅ представляет собой E. В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой L, а Х₃₅ представляет собой N.

В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой К, а Х₁₇ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой К, а Х₁₇ представляет собой V. В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой К, а Х₁₇ представляет собой Q. В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой К, а Х₃₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой К, а Х₃₅ представляет собой N.

В некоторых вариантах осуществлениях X₁₆ представляет собой k, а Х₁₇ представляет собой Н. В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой k, а Х₁₇ представляет собой V. В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой k, а Х₁₇ представляет собой Q. В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой k, а Х₃₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления X₁₆ представляет собой k, а Х₃₅ представляет собой N.

В некоторых вариантах осуществления Х₁₇ представляет собой Н, а Х₃₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления, Х₁₇ представляет собой Н, а Х₃₅ представляет собой N.

В некоторых вариантах осуществления Х₁₇ представляет собой V, а Х₃₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления, Х₁₇ представляет собой V, а Х₃₅ представляет собой N.

В некоторых вариантах осуществления Х₁₇ представляет собой Q, а Х₃₅ представляет собой Е. В некоторых вариантах осуществления, Х₁₇ представляет собой Q, а Х₃₅ представляет собой N.

В некоторых вариантах осуществления выделенный пептид, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 210, SEQ ID NO: 211, или SEQ ID NO: 212 дополнительно содержит защитную группу или спейсер, необязательно связанный с защитной группой. В некоторых вариантах осуществления выделенный пептид дополнительно содержит защитную группу. В некоторых вариантах осуществления выделенный пептид дополнительно содержит спейсер. В некоторых вариантах осуществления выделенный пептид дополнительно содержит спейсер, связанный с защитной группой.

В некоторых вариантах осуществления выделенный полипептид содержит защитную группу или спейсер, необязательно связанный с защитной группой в положении X₁, Х₁₅ или X₁₆.

В некоторых вариантах осуществления выделенный полипептид, содержащий защитную группу или спейсер, необязательно связанный с защитной группой в положении X₁, Х₁₅ или X₁₆, конъюгирован посредством лизина в этом положении.

В некоторых вариантах осуществления выделенный полипептид содержит защитную группу или спейсер, необязательно связанный с защитной группой в положении X₁.

В некоторых вариантах осуществления выделенный полипептид содержит защитную группу или спейсер, необязательно связанный с защитной группой в положении X₁₅.

В некоторых вариантах осуществления выделенный полипептид содержит защитную группу или спейсер, необязательно связанный с защитной группой в положении X₁₆.

В некоторых вариантах осуществления выделенный полипептид, содержащий защитную группу или спейсер, необязательно связанный с защитной группой в положении X₁, конъюгирован посредством лизина в этом положении.

В некоторых вариантах осуществления выделенный полипептид, содержащий защитную группу или спейсер, необязательно связанный с защитной группой в положении Х₁₅, конъюгирован посредством лизина в этом положении.

В некоторых вариантах осуществления выделенный полипептид, содержащий защитную группу или спейсер, необязательно связанный с защитной группой в положении X₁₆, конъюгирован посредством лизина в этом положении.

В некоторых вариантах осуществления защитная группа выбрана из группы, состоящей из ацетила, аллилоксикарбонила, бензила, Boc, Cbz, Dmb, (диметил-2,6-дизоксоциклогекс-1-илиден)этила, Fmoc, трет-бутила или тритила. В некоторых вариантах осуществления защитная группа выбрана из ацетила, алилоксикарбонила, диметил-2,6-дизоксоциклогекс-1-илиден)этила, Fmoc, трет-бутила или тритила. В некоторых вариантах осуществления защитная группа представляет собой ацетил, алилоксикарбонил, диметил-2,6-дизоксоциклогекс-1-илиден)этил или Fmoc,

В некоторых вариантах осуществления спейсер выбран из группы, состоящей из формулы XI, формулы XII, формулы XIII, формулы XIV, формулы XV, формулы XVI, формулы XVII и формулы XVIII. В некоторых вариантах осуществления выделенный полипептид дополнительно содержит спейсер формулы XIII. В некоторых вариантах осуществления выделенный полипептид дополнительно содержит спейсер формулы XIV. В некоторых вариантах осуществления выделенный полипептид дополнительно содержит спейсер формулы XVII. В некоторых вариантах осуществления выделенный полипептид дополнительно содержит спейсер формулы XVIII. В некоторых вариантах осуществления спейсер связан с защитной группой. В некоторых вариантах осуществления защитная группа выбрана из группы, состоящей из ацетила, аллилоксикарбонила, бензила, Boc, Cbz, Dmb, (диметил-2,6-дизоксоциклогекс-1-илиден)этила, Fmoc, трет-бутила или тритила. В некоторых вариантах осуществления защитная группа представляет собой ацетил, алилоксикарбонил, диметил-2,6-дизоксоциклогекс-1-илиден)этил, Fmoc, трет-бутил или тритил. В некоторых вариантах осуществления защитная группа представляет собой ацетил, тритил или трет-бутил. В некоторых вариантах осуществления спейсер не связан с защитной группой.

Иллюстративные промежуточные продукты полипептидов

В некоторых вариантах осуществления выделенный полипептид по данному изобретению содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из следующих пептидов, приведенных в таблице 4:

В некоторых вариантах осуществления в данном изобретении предложен промежуточный продукт пептида, приведенный в таблице 4 выше. В некоторых вариантах осуществления промежуточный продукт пептида представляет собой пептид, имеющий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 129, SEQ ID NO: 144, SEQ ID NO: 145 или SEQ ID NO: 156. В некоторых вариантах осуществления промежуточный продукт пептида имеет аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 129. В некоторых вариантах осуществления промежуточный продукт пептида имеет аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 145. В некоторых вариантах осуществления промежуточный продукт пептида представляет собой пептид, имеющий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 129, SEQ ID NO: 147, SEQ ID NO: 148, SEQ ID NO: 149 или SEQ ID NO: 150. В некоторых вариантах осуществления промежуточный продукт пептида имеет аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 147. В некоторых вариантах осуществления промежуточный продукт пептида представляет собой пептид, имеющий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 151, SEQ ID NO: 152, SEQ ID NO: 153 или SEQ ID NO: 154. В некоторых вариантах осуществления промежуточный продукт пептида имеет аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 151.

В некоторых вариантах осуществления промежуточный продукт пептида представляет собой пептид, имеющий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 155 или SEQ ID NO: 156. В некоторых вариантах осуществления промежуточный продукт пептида представляет собой пептид, имеющий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 155. В некоторых вариантах осуществления промежуточный продукт пептида представляет собой пептид, имеющий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 157, SEQ ID NO: 158, SEQ ID NO: 159 или SEQ ID NO: 160. В некоторых вариантах осуществления промежуточный продукт пептида представляет собой пептид, имеющий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 157. В некоторых вариантах осуществления промежуточный продукт пептида представляет собой пептид, имеющий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 161, SEQ ID NO: 162, SEQ ID NO: 163 или SEQ ID NO: 164. В некоторых вариантах осуществления промежуточный продукт пептида представляет собой пептид, имеющий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 164.

8. Применение, состав и введение

Способы применения

Согласно другому варианту осуществления, в данном изобретении предложен способ лечения метаболического заболевания или расстройства у субъекта, нуждающегося в лечении, включающий предоставление субъекту эффективного количества полипептида аналога амилина по изобретению или его фармацевтической композиции. Метаболические заболевания или расстройства включают диабет 1-го типа, диабет 2-го типа и ожирение. Кроме того, изобретение относится к способу увеличения потери массы тела у субъекта, включая субъекта с диабетом, включающий предоставление субъекту эффективного количества полипептида аналога амилина по данному изобретению.

Полипептиды аналога амилина по данному изобретению особенно полезны для лечения диабета, при этом способ, включает предоставление субъекту с диабетом эффективного количества полипептида аналога амилина. В некоторых вариантах осуществления полипептид аналога амилина по данному изобретению применяют для лечения субъекта с диабетом 1-го или 2-го типа для контроля или уменьшения, концентрации сахара в крови субъекта, причем уровень сахара в крови может контролироваться или аппроксимироваться на основе измеренных концентраций гликированного гемоглобина в крови (гемоглобин A1c, HbA1c).

(i) В некоторых вариантах осуществления полипептид аналога амилина по данному изобретению применяют для лечения субъекта с диабетом 1-го типа;

(ii) В некоторых вариантах осуществления полипептид аналога амилина по данному изобретению применяют для лечения субъекта с диабетом 2-го типа;

(iii) В некоторых вариантах осуществления полипептид аналога амилина по данному изобретению применяют для лечения ожирения; и

(iv) В некоторых вариантах осуществления полипептид аналога амилина по данному изобретению применяют для уменьшения весу субъекта, такого как субъект с диабетом,

при этом полипептид аналога амилина по применению (i), (ii), (iii) или (iv) содержит любую аминокислотную последовательность по данному изобретению, включая выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NOS: 199, 200, 204, 206, 127, 57, 128, 129, 43, 209, 130, 64,65, 131, 109 и 27.

В некоторых вариантах осуществления полипептид аналога амилина применяют для лечения субъекта с диабетом 1-го типа, причем полипептид аналога амилина содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO 27. В некоторых вариантах осуществления полипептид аналога амилина применяют для лечения субъекта с диабетом 1-го типа, причем полипептид аналога амилина содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO 64. В некоторых вариантах осуществления полипептид аналога амилина применяют для лечения субъекта с диабетом 1-го типа, причем полипептид аналога амилина содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO 65. В некоторых вариантах осуществления полипептид аналога амилина применяют для лечения субъекта с диабетом 1-го типа, причем полипептид аналога амилина содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO 131.

В некоторых вариантах осуществления полипептид аналога амилина применяют для лечения субъекта с диабетом 2-го типа, причем полипептид аналога амилина содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO 27. В некоторых вариантах осуществления полипептид аналога амилина применяют для лечения субъекта с диабетом 2-го типа, причем полипептид аналога амилина содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO 64. В некоторых вариантах осуществления полипептид аналога амилина применяют для лечения субъекта с диабетом 2-го типа, причем полипептид аналога амилина содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO 65. В некоторых вариантах осуществления полипептид аналога амилина применяют для лечения субъекта с диабетом 2-го типа, причем полипептид аналога амилина содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO 131.

В некоторых вариантах осуществления полипептид аналога амилина применяют для лечения субъекта с ожирением, причем полипептид аналога амилина содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO 27. В некоторых вариантах осуществления полипептид аналога амилина применяют для лечения субъекта с ожирением, причем полипептид аналога амилина содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO 64. В некоторых вариантах осуществления полипептид аналога амилина применяют для лечения субъекта с ожирением, причем полипептид аналога амилина содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO 65. В некоторых вариантах осуществления полипептид аналога амилина применяют для лечения субъекта с ожирением, причем полипептид аналога амилина содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO 131.

В некоторых вариантах осуществления полипептид аналога амилина применяют для снижения массы субъекта, причем полипептид аналога амилина содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO 27. В некоторых вариантах осуществления полипептид аналога амилина применяют для снижения массы субъекта, причем полипептид аналога амилина содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO 64. В некоторых вариантах осуществления полипептид аналога амилина применяют для снижения массы субъекта, причем полипептид аналога амилина содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO 65. В некоторых вариантах осуществления полипептид аналога амилина применяют для снижения массы субъекта, причем полипептид аналога амилина содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO 131.

Предложены полипептиды аналога амилина по изобретению, как инсулин (т.е., вводят) субъекту с диабетом для поддержания, контроля или уменьшения концентрации сахара в крови субъекта. Субъекты с диабетом, которые получают лечение полипептидом аналога амилина по данному изобретению, в качестве дополнения к терапии инсулином, подвергаются риску гипогликемии (т.е., низкому уровню сахара в крови), особенно тяжелой гипогликемии. Соответственно, сокращение дозы инсулина во время приема пищи субъектам с диабетом при лечении полипептидом аналога амилина по изобретению предназначено для уменьшения риска гипогликемии, особенно тяжелой гипогликемии.

Тяжелая гипогликемия, используемая в данном документе, относится к эпизоду гипогликемии, требующему помощи другого человека (включая помощь во введении перорального углевода) или требующему введение глюкагона, внутривенной глюкозы или другого медицинского вмешательства.

Соответственно, введение полипептида аналога амилина по данному изобретению, в качестве дополнения к терапии инсулином, в частности терапии инсулином при приеме пищи, обычно требует снижения дозы инсулина при приеме пищи, необходимого для поддержания правильной концентрации уровня сахара в крови здорового субъекта. Другими словами, диабетики с диабетом 1-го или 2-го типа, которые уже самостоятельно принимают инсулин при приеме пищи в определенной дозе перед началом лечения полипептидом аналога амилина по изобретению, уменьшится (например, до 25%, 50%, 75% или 100%) уменьшат дозу инсулина при приеме пищи, они продолжают самостоятельно принимать полипептид аналога амилина по данному изобретению.

В некоторых вариантах осуществления способ включает обеспечение полипептида аналога амилина по изобретению или его фармацевтической композиции субъекту, нуждающемуся в лечении, посредством инъекции. В некоторых вариантах осуществления способ включает обеспечение полипептида аналога амилина по изобретению или его фармацевтической композиции, предназначенной для перорального введения, субъекту, нуждающемуся в лечении.

В некоторых вариантах осуществления способ включает обеспечение полипептида аналога амилина по изобретению или его фармацевтической композиции субъекту, нуждающемуся в лечении, посредством имплантации. В некоторых вариантах осуществления способ включает обеспечение непрерывной доставки от осмотического устройства доставки полипептида аналога амилина субъекту, нуждающемуся в лечении. Устройство доставки, такое как осмотическое устройство доставки, содержит достаточное количество полипептида аналога амилина по данному изобретению для непрерывного введения до 3 месяцев, 6 месяцев, 9 месяцев, 12 месяцев, 18 месяцев или 24 месяцев. Как таковое, непрерывное введение полипептида аналога амилина по данному изобретению через осмотическое устройство доставки устраняет ежедневно или несколько ежедневных дозировок существующих полипептидов аналогов амилина, таких как прамлинтид. Диабетики, которые получают лечение прамлинтидом, должны координировать дозировку прамлинтида до приема пищи с инсулином при приеме пищи, вводимым после приема пищи. Напротив, диабетики, которые получают полипептид аналога амилина по изобретению через осмотическое доставку, получают непрерывную доставку полипептида аналога амилина и потребность только в управлении инсулином при приеме пищи при пониженных дозах.

По существу стабильная доставка полипептида аналога амилина, являющегося специфическим агонистом глюкагона, из осмотического устройства доставки является непрерывной в течение периода введения. В некоторых вариантах осуществления субъект или пациент является субъектом-человеком или пациентом-человеком.

В некоторых вариантах осуществления данного изобретения период введения составляет, например, по меньшей мере около 3 месяцев, по меньшей мере от около 3 месяцев до около одного года, по меньшей мере от около 4 месяцев до около одного года, по меньшей мере от около 5 месяцев до около одного года, по меньшей мере от около 6 месяцев до около одного года, по меньшей мере от около 8 месяцев до около одного года, по меньшей мере от около 9 месяцев до около одного года, по меньшей мере от около 10 месяцев до около одного года, по меньшей мере от около одного года до около двух лет, по меньшей мере от около двух лет до около трех лет.

В других вариантах осуществления способы лечения по настоящему изобретению обеспечивают значительное снижение концентрации глюкозы в плазме натощак у субъекта после имплантации осмотического устройства доставки субъекту (по отношению к концентрации глюкозы в плазме натощак у субъекта до имплантации осмотического устройства доставки), которое достигается в течение около 7 суток, 6 суток, 5 суток, 4 суток, 3 суток, 2 суток, 1 суток или менее после имплантации субъекту осмотического устройства доставки. Значительное снижение глюкозы в плазме натощак, как правило, является статистически значимым, как показано путем применения соответствующего статистического теста или признано значимым для субъекта практикующим врачом. Значительное снижение глюкозы в плазме натощак по отношению к исходному уровню перед имплантацией, как правило, сохраняется в течение периода введения.

В некоторых вариантах осуществления в данном изобретении предложен способ лечения заболевания или состояния у субъекта, нуждающегося в лечении. Способ включает непрерывную доставку лекарственного средства из осмотического устройства доставки, в котором по существу стабильная доставка лекарственного средства в терапевтических концентрациях достигается у субъекта. По существу стабильная доставки лекарственного средства из осмотического устройства доставки непрерывна в течение периода введения по меньшей мере около 3 месяцев. Лекарственное средство имеет известный или определенный период полужизни у типичного субъекта. Люди являются предпочтительными субъектами для применения данного изобретения на практике. Настоящее изобретение включает лекарственное средство, эффективное для лечения заболевания или состояния, а также осмотическое устройство доставки, содержащее лекарственное средство для применения в настоящих способах лечения заболевания или состояния у субъекта, нуждающегося в лечении. Преимущества данного изобретения включают смягчение токсичности препаратов, связанной с пиками, и ослабление субоптимальной лекарственной терапии, связанной с минимальными остаточными концентрациями.

В некоторых вариантах осуществления существенная устойчивая доставка лекарственного средства при терапевтических концентрациях достигается в течение срока около 1 месяца, 7 суток, 5 суток, 3 суток или 1 суток после имплантации субъекту устройства осмотического доставки.

Изобретение также обеспечивает способ содействия потере массы тела у субъекта, нуждающегося в этом, способ лечения избыточного массы или ожирения у субъекта, нуждающегося в этом и/или способ подавления аппетита у субъекта, нуждающегося в этом. Способ включает обеспечение доставки выделенного полипептида аналога амилина. В некоторых вариантах осуществления выделенный полипептид аналога амилина непрерывно доставляется из имплантируемого осмотического устройства доставки. В некоторых вариантах осуществления достигается значительная устойчивая доставка выделенного полипептида аналога амилина из осмотического устройства доставки, и она является существенно непрерывной в течение периода введения. В некоторых вариантах осуществления субъектом является человек.

Данное изобретение включает выделенный полипептид аналога амилина, а также осмотическое устройство доставки, содержащее выделенный полипептид аналога амилина для применения в данных способах у субъекта, нуждающегося в лечении. Субъект может иметь диабет 2-го типа. Субъект при необходимости может иметь исходный уровень HbA1c % от более чем 10,0%, т.е., может быть субъектом с высоким исходным уровнем (ВБУ). Субъект мог ранее не получать лекарственное средство для лечения сахарного диабета 2-го типа.

В других вариантах осуществления способы лечения по настоящему изобретению обеспечивают значительное снижение концентрации глюкозы в плазме натощак у субъекта после имплантации осмотического устройства доставки субъекту (по отношению к концентрации глюкозы в плазме натощак у субъекта до имплантации осмотического устройства доставки), которое достигается в течение около 7 суток или менее после имплантации осмотического устройства доставки субъекту, в течение около 6 суток или менее после имплантации осмотического устройства доставки субъекту, в течение около 5 суток или менее после имплантации осмотического устройства доставки субъекту, в течение около 4 суток или менее после имплантации осмотического устройства доставки субъекту, в течение около 3 суток или менее после имплантации осмотического устройства доставки субъекту, в течение около 2 суток или менее после имплантации осмотического устройства доставки субъекту, или в течение около 1 суток или менее после имплантации осмотического устройства доставки субъекту. В предпочтительных вариантах осуществления данного изобретения, значительное снижение концентрации глюкозы в плазме натощак у субъекта после имплантации осмотического устройства доставки, по отношению к концентрации глюкозы в плазме натощак субъекта до имплантации, достигается в течение около 2 дней или менее, предпочтительно в течение около 1 дня или менее после имплантации осмотического устройства доставки субъекту, или, более предпочтительно, в пределах около 1 дня после имплантации осмотического устройства доставки субъекту. Значительное снижение глюкозы в плазме натощак, как правило, является статистически значимым, как показано путем применения соответствующего статистического теста или признано значимым для субъекта практикующим врачом. Значительное снижение глюкозы в плазме натощак по отношению к исходному уровню перед имплантацией, как правило, сохраняется в течение периода введения.

В вариантах осуществления всех аспектов данного изобретения, относящегося к способам лечения заболевания или состояния у субъекта, в качестве примера осмотическое устройство доставки включает в себя следующее: непроницаемый резервуар, содержащий внутреннюю и внешнюю поверхности и первый и второй открытые концы; полупроницаемую мембрану, герметично прикрепленную на первом открытом конце резервуара; осмотический двигатель внутри резервуара, прилегающей к полупроницаемой мембране; поршень, примыкающий к осмотическому двигателю, при этом поршень образует подвижное уплотнение с внутренней поверхностью резервуара, поршень делит резервуар на первую камеру и вторую камеру, первая камера содержит осмотический двигатель; лекарственное средство или состав в виде суспензии, содержащий лекарственное средство, при этом вторая камера содержит лекарственное средство или состав в виде суспензии, и лекарственное средство или состав в виде суспензии находятся в жидкой форме; и замедлитель диффузии вставлен во второй открытый конец резервуара, замедлитель диффузии примыкает к составу в виде суспензии. В предпочтительных вариантах воплощения резервуар содержит титан или титановый сплав.

В вариантах осуществления всех аспектов данного изобретения, относящегося к способам лечения заболевания или состояния у субъекта, лекарственное средство может содержать лекарственное средство и состав-носитель. В качестве альтернативы, в способах используются препараты в виде суспензии, они могут, например, включать в себя состав из частиц, содержащий частицы лекарственного средства и состав-носитель. Составы-носители для использования в составе в виде суспензии по настоящему изобретению, могут, например, содержать растворитель и полимер.

Резервуар осмотических устройств доставки может, например, содержать титан или титановый сплав.

В вариантах осуществления всех аспектов данного изобретения имплантированное осмотическое устройство доставки может быть использовано для обеспечения подкожной доставки.

В вариантах осуществления всех аспектов данного изобретения непрерывная доставка может, например, контролируемой непрерывной доставкой нулевого порядка.

Комбинации

В некоторых вариантах осуществления полипептид аналога амилина по данному изобретению объединен со вторым агентом. В некоторых вариантах осуществления полипептид аналога амилина по данному изобретению объединен со вторым агентом, причем второй агент представляет собой инсулинотропный пептид. В некоторых вариантах осуществления полипептид аналога амилина по данному изобретению объединен со вторым агентом, причем второй агент представляет собой агонист рецептора GLP-1. В некоторых вариантах осуществления полипептид аналога амилина по данному изобретению объединен со вторым агентом, причем второй агент представляет собой агонист (GLP-1), такие как эксенадид, производное эксенадида, аналог эксенадида или семаглютид. В некоторых вариантах осуществления агонист рецептора GLP-1 представляет собой эксенадид. В некоторых вариантах осуществления агонист рецептора GLP-1 представляет собой семаглутид.

В некоторых вариантах осуществления полипептид аналога амилина по данному изобретению без объединения со вторым агентом вводят субъекту в комбинации со вторым агентом, причем второй агент представляет собой агонист (GLP-1), такие как эксенадид, производное эксенадид, аналог эксенадид или семаглютид.

В некоторых вариантах осуществления полипептид аналога амилина по данному изобретению объединен с инсулином или производным инсулина. В некоторых вариантах осуществления полипептид аналога амилина по данному изобретению объединен с инсулином долгосрочного действия или производным инсулина долгосрочного действия.

В некоторых вариантах осуществления полипептид аналога амилина по данному изобретению, не будучи объединенным с инсулином или производным инсулина, вводят субъекту в комбинации с инсулином или производным инсулина, то есть в качестве дополнения к терапии инсулина. В некоторых вариантах осуществления пептид аналога амилина по данному изобретению, не будучи объединенным с инсулином или производным инсулина, вводят субъекту в комбинации с инсулином, вводимым при приеме пищи. В некоторых вариантах осуществления субъект имеет диабет 1-го типа. В некоторых вариантах осуществления субъект имеет диабет 2-го типа.

В некоторых вариантах осуществления полипептид аналога амилина по данному изобретению совместно вводят пациенту-человеку с инсулином или производным инсулина для обеспечения так называемого двойной гормональной терапии «искусственной поджелудочной железы». В некоторых вариантах осуществления полипептид аналога амилина по данному изобретению, не будучи объединенным с инсулином или производным инсулина, совместно вводят субъекту в комбинации с инсулином или производным инсулина для обеспечения так называемого двойной гормональной терапии «искусственной поджелудочной железы». В некоторых вариантах осуществления полипептид аналога амилин по данному изобретению объединяют с инсулином или производным инсулина, и вводят субъекту в комбинации с инсулином или производным инсулина для обеспечения так называемого двойной гормональной терапии «искусственной поджелудочной железы». В некоторых вариантах осуществления терапия искусственной поджелудочной железы включает быстродействующий инсулин или быстродействующее производное инсулина. В некоторых вариантах осуществления терапия искусственной поджелудочной железы включает долгосрочный или фоновый инсулин или долгосрочное или фоновое производное инсулина.

В некоторых вариантах осуществления любой из аналогов амилина по изобретению объединен с эксенатидом. В некоторых вариантах осуществления изобретения любой из аналогов амилина по данном изобретению скомбинирован с агонистом рецептора GLP-1.

Некоторые варианты осуществления данного изобретения включают применение полипептида аналога амилина в комбинации со вторым терапевтическим агентом, таким как второй полипептид, такой как, в порядке не ограничивающего примера, инсулинотропные пептиды, пептидные гормоны, например, миметики глюкагона и инкретина (например, агонистом рецептора GLP-1, таким как эксенатид), а также их пептидные аналоги и производные пептидов; PYY (также известный как пептид YY, тирозин-тирозин пептид), а также его пептидные аналоги и производные пептидов, например, PYY (3-36); оксинтомодулин, а также их пептидные аналоги и пептидные производные); и желудочный ингибирующий пептид (GIP), а также его пептидные аналоги и пептидные производные. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция, содержащая полипептид аналога амилина в комбинации с агонистом рецептора GLP-1, используется для лечения диабета 2-го типа.

GLP-1, в том числе три формы пептида, GLP-1 (1-37), GLP-1 (7-37) и GLP-1 (7-36) амид, а также пептидные аналоги GLP-1, как было показано, стимулируют секрецию инсулина (т.е., являются инсулинотропными), который индуцирует поглощение глюкозы клетками и приводит к сокращению концентрации глюкозы в сыворотке крови (см., например, Mojsov, S., Int. J. Peptide Protein Research, 40:333-343 (1992)).

Многочисленные агонисты рецептора GLP-1 (например, производные пептиднов и аналоги пептидов GLP-1), демонстрирующие инсулинотропные действия, известны в данной области техники (см., например, патент США №5118666; 5120712; 5512549; 5545618; 5574008; 5574008; 5614492; 5958909; 6191102; 6268343; 6329336; 6451974; 6458924; 6514500; 6593295; 6703359; 6706689; 6720407; 6821949; 6849708; 6849714; 6887470; 6887849; 6903186; 7022674; 7041646; 7084243; 7101843; 7138486; 7141547; 7144863 и 7199217), как и в клинических испытаниях (например, таспоглютид и албиглютид). Одним из примеров агониста рецептора GLP-1, который может быть использован в практике данного изобретения, является препарат Victoza® (Novo Nordisk A/S, Bagsvaerd D К) (лираглутид; патенты США №6268343, 6458924 и 7235627). Вводимый раз в день инъекционный препарат Victoza® (лираглутид) является коммерчески доступным в соединенных Штатах, Европе и Японии. Другим примером агониста рецептора GLP-1 является Ozempic® (Novo Nordisk A/S, Bagsvaerd D К) (семаглютид). Для простоты ссылки, семейство агонистов рецептора GLP-1, пептидов GLP-1, пептидные производные GLP-1 и пептидные аналоги GLP-1, обладающие инсулинотропной активностью, называют общим термином «GLP-1».

Молекула эксенатида имеет аминокислотную последовательность эксендина-4 (Kolterman О.G., et al., J. Clin. Endocrinol. Metab. 88 (7): 3082-9 (2003)) и ее получают путем химического синтеза или рекомбинантной экспрессии. Для простоты указания ссылки, семейство пептидов эксенатида (например, включая эксендин-3, эксендин-4 и эксендин-4-амид), пептидные производные эксенатида и пептидные аналоги эксенатид упоминаются под общим названием «эксенатид».

Пептид YY (PYY) представляет собой амид пептида, состоящий из 36 аминокислотных остатков. PYY ингибирует моторику и кровоток (Laburthe, М., Trends Endocrinol Metab. 1(3): 168-74 (1990), опосредует кишечную секрецию (Сох, Н.М., et al., Br J Pharmacol 101(2):247-52 (1990); Playford, R.J., et al., Lancet 335(8705): 1555-7 (1990)) и стимулирует чистое поглощение (MacFayden, R.J., et al., Neuropeptides 7(3):219-27 (1986)). Были идентифицированы два основных варианта in vivo, PYY(1-36) и PYY(3-36) (например, Eberlein, G.A., et al., Peptides 10(4), 797-803 (1989)). Последовательность PYY, а также пептидные аналоги и пептидные производные, известны в данной области техники (например, патенты США №5574010 и 5552520).

Оксинтомодулин является естественным пептидным гормоном, состоящим из 37 аминокислот, который содержится в толстой кишке, и, как было обнаружено, способен подавить аппетит и способствуют потере массы тела (Wynne К, et al., Int J Obes (Lond) 30(12): 1729-36(2006)). Последовательность оксинтомодулина, а также его пептидных аналогов и пептидных производных, известны в данной области (например, Bataille D, et al., Peptides 2(Suppl 2):41-44 (1981); и патентные публикации США №№2005/0070469 и 2006/0094652).

Желудочный ингибиторный пептид (GIP) представляет собой инсулинотропный пептидный гормон (Efendic, S., et al., Horm Metab Res. 36: 742-6 (2004)) и секретируется слизистой оболочкой двенадцатиперстной кишки и тощей кишки в ответ на поглощенный жир и углеводы, которые стимулируют поджелудочную железу секретировать инсулин. GIP циркулирует в качестве биологически активного пептида, состоящего из 42 аминокислот. GIP также известен как глюкозо-зависимый инсулинотропный белок. GIP является регуляторным пептидом желудочно-кишечного тракта, состоящим из 42 аминокислот, который стимулирует секрецию инсулина панкреатическими бета-клетками в присутствии глюкозы (Tseng, С., et al., PNAS 90:1992-1996 (1993)). Последовательность GIP, а также его пептидные аналоги и пептидные производные известны в данной области (например, Meier J.J., Diabetes Metab Res Rev. 21(2):91-117 (2005) и Efendic S., Horm Metab Res. 36(ll-12):742-6 (2004)).

Глюкагон является пептидным гормоном, который вырабатывается альфа-клетками поджелудочной железы, который повышает концентрацию глюкозы в крови. Его действие противоположно таковому инсулина, который снижает концентрацию глюкозы. Поджелудочная железа вырабатывает глюкагон, когда концентрация глюкозы в крови падает слишком низко. Глюкагон стимулирует печень преобразовывать запасенный гликоген в глюкозу, которая поступает в кровоток. Уровни глюкозы в крови стимулируют высвобождение инсулина. Инсулин позволяет глюкозе проникать внутрь и использоваться инсулин-зависимыми тканями. Таким образом, глюкагон и инсулин являются частью системы обратной связи, которая удерживает уровень глюкозы в крови на стабильный уровне.

Фармацевтически приемлемые композиции

Согласно другому варианту осуществления изобретение относится к композиции, содержащей соединение, то есть, выделенный полипептид, по данному изобретению или его фармацевтически приемлемое производное, и фармацевтически приемлемый носитель, адъювант или наполнитель. Количество соединения в композициях по данному изобретению является таким, что эффективно для измеримой активации одного или более рецепторов амилина и/или кальцитонина в биологическом образце или у пациента. В определенных вариантах осуществления количество соединения в композициях по данному изобретению является таким, которое эффективно для измерительного активации рецептора амилина 3 человека (hAMY3) и/или кальцитонина человека (hCTR), в отсутствие или наличие человеческого сывороточного альбумина, в биологический образец или у пациента. В определенных вариантах осуществления композиция по данному изобретению приготовлена для введения пациенту, нуждающемуся в такой композиции. В некоторых вариантах осуществления композиция по данному изобретению приготовлена для инъекционного введения пациенту. В некоторых вариантах осуществления композиция по данному изобретению приготовлена для введения пациенту с помощью имплантируемого устройства доставки, такого как осмотическое устройство доставки.

Термины «пациент» или «субъект», используемые в данном документе, относятся к животному, предпочтительно млекопитающему, и наиболее предпочтительно человеку.

«Фармацевтически приемлемое производное» означает любую нетоксичную соль, сложный эфир, соль сложного эфира или иное производное соединения данного изобретения, которые при введении реципиенту способны обеспечить прямо или косвенно, соединение по данному изобретению или ингибиторно активный метаболит или его остаток.

Выделенные полипептиды по раскрытию (также называемые в данном описании «активные соединения») и их производные, фрагменты, аналоги и гомологи, могут быть включены в фармацевтические композиции, подходящие для введения. Такие композиции обычно содержат выделенный полипептид или его фармацевтически приемлемую соль, а также фармацевтически приемлемый носитель. Используемый в данном описании, термин «фармацевтически приемлемый носитель» предназначен для включения любых и всех растворителей, дисперсионных сред, покрытий, антибактериальных и противогрибковых средств, изотонических и задерживающие абсорбцию средств и т.п., совместимых с фармацевтическим введением. Подходящие носители описаны в последнем издании Remington Pharmaceutical Sciences, стандартный справочный текст в данной области, который включен в настоящее описание посредством ссылки. Предпочтительные примеры таких носителей или разбавителей включают, но не ограничиваются ими, воду, солевой раствор, растворы Рингера, раствор декстрозы и 5% сывороточный альбумин человека. Также могут быть использованы липосомы и неводные носители, такие как нелетучие масла. Использование таких сред и агентов для фармацевтически активных веществ известно в данной области техники. За исключением случаев, когда какой-либо обычный носитель или агент несовместим с активным соединением, предполагается его применение в композициях. Также в композиции могут быть включены дополнительные активные соединения.

Фармацевтическая композиция по настоящему изобретению составлена таким образом, чтобы она была совместима с предполагаемым способом введения. Примеры путей введения включают парентеральное, например, внутривенное, внутрикожное, субдермальное, подкожное, пероральное (например, ингаляционное), трансдермальное (т.е., местное), через слизистую оболочку, ректальное или их комбинации. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция или выделенный полипептид по раскрытию изготавливаются для введения местным путем. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция или выделенный полипептид по раскрытию изготавливается для введения путем ингаляции. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция изготавливается для введения с помощью устройства или другого подходящего механизма доставки, подходящего для субдермальной или подкожной имплантации и доставляющего фармацевтическую композицию, подкожно. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция изготовлена для введения с помощью имплантируемого устройства, которое подходит для субдермальной или подкожной имплантации и доставляет фармацевтическую композицию подкожно. В некоторых вариантах осуществления фармацевтической композиция изготовлена для введения с помощью осмотического устройства доставки, например, имплантируемого осмотического устройства доставки, которое подходит для субдермального или подкожного размещения или другой имплантации и доставляет фармацевтическую композицию подкожно. Растворы или суспензии, используемые для парентерального применения, внутрикожного применения, субдермального применения, подкожного применения или их комбинации могут включать следующие компоненты: стерильный разбавитель, такой как вода для инъекций, физиологический раствор, нелетучие масла, полиэтиленгликоли, глицерин, пропиленгликоль или другие синтетические растворители; антибактериальные средства, такие как бензиловый спирт или метилпарабены; антиоксиданты, такие как аскорбиновая кислота или бисульфит натрия; хелатирующие средства, такие как этилендиаминтетрауксусная кислота (ЭДТУ); буферы, такие как ацетаты, цитраты или фосфаты, и средства для регулировки тоничности, такие как хлорид натрия или декстроза. Значение рН можно регулировать с помощью кислот или оснований, таких как соляная кислота или гидроксид натрия. Препарат для парентерального применения может быть заключен в ампулы, одноразовые шприцы или сосуды для нескольких доз из стекла или пластмассы.

Фармацевтические композиции, подходящие для применения в виде инъекций, включают стерильные водные растворы (в случае водорастворимости) или дисперсии и стерильные порошки для приготовления стерильных инъекционных растворов или дисперсий для немедленного приема. Для внутривенного введения подходящие носители включают физиологический раствор, бактериостатическую воду, Cremophor EL (BASF, Parsippany, N.J.) или фосфатно-солевой буфер (PBS). Во всех случаях композиция должна быть стерильной и жидкой до такой степени, чтобы ее можно было легко вводить посредством шприца. Она должна быть стабильной в условиях производства и хранения и должна быть защищена от загрязняющего действия микроорганизмов, таких как бактерии и грибы. Носитель может представлять собой растворитель или дисперсионную среду, содержащую, например, воду, этанол, полиол (например, глицерин, пропиленгликоль и жидкий полиэтиленгликоль и т.д.) и их подходящие смеси. Надлежащую текучесть можно поддерживать, например, путем применения материалов для покрытия, таких как лецитин, путем поддержания необходимого размера частиц в случае дисперсий и путем применения поверхностно-активных веществ. Профилактика действия микроорганизмов может быть достигнута посредством различных антибактериальных и противогрибковых средств, например, парабенов, хлорбутанола, фенола, аскорбиновой кислоты, тиомерсала и т.п. Во многих случаях в композицию предпочтительно включать изотонические вещества, например, сахара, полиспирты, такие как маннит, сорбит, или хлорид натрия. Длительное всасывание инъекционных композиций можно обеспечить путем включения в композицию вещества, которое замедляет всасывание, например, моностеарата алюминия и желатина.

Стерильные растворы для инъекций могут быть приготовлены путем включения активного соединения в необходимом количестве в подходящем растворителе с одним или несколькими ингредиентами, перечисленными выше, по мере необходимости, с последующей стерилизацией фильтрацией. В общем случает дисперсии готовят путем включения активного соединения в стерильный исходный раствор, который содержит основную дисперсионную среду и другие необходимые ингредиенты из перечисленных выше. В случае стерильных порошков для приготовления стерильных инъекционных растворов способами приготовления являются вакуумная сушка и сублимационная сушка, которые приводят к получению порошка активного ингредиента плюс любой дополнительный активный ингредиент из его ранее стерильно-профильтрованного раствора.

Композиции для перорального введения обычно включают инертный разбавитель или съедобный носитель. Их можно заключать в желатиновые капсулы или прессовать в таблетки. Для целей перорального терапевтического введения активное соединение может быть объединено с эксципиентами и использовано в форме таблеток, пастилок или капсул. Пероральные композиции также могут быть получены с использованием жидкости-носителя для использования в качестве жидкости для полоскания рта, при этом соединение в жидком носителе применяют перорально, поласкают им рот и выплевывают или проглатывают. Фармацевтически совместимые связывающие средства и/или вспомогательные материалы могут быть включены в виде части композиции. Таблетки, пилюли, капсулы, пастилки и т.п.могут содержать любой из следующих ингредиентов или соединений аналогичной природы: связующее, такое как микрокристаллическая целлюлоза, трагакантовая камедь или желатин; вспомогательное вещество, такое как крахмал или лактоза, разрыхлитель, такой как альгиновая кислота, Primogel или кукурузный крахмал; смазывающее средство, такое как стеарат магния или Sterotes; вещество, способствующее скольжению, такое как коллоидный диоксид кремния; подсластитель, такой как сахароза или сахарин; или ароматизатор, такой как мята перечная, метилсалицилат или апельсиновый ароматизатор.

Для введения путем ингаляции соединения доставляются в форме аэрозольного спрея из находящегося под давлением контейнера или дозатора, который содержит подходящий пропеллент, например, газ, такой как диоксид углерода, или из распылителя.

Системное введение также может осуществляться через слизистые оболочки или через кожу. Для трансмукозального или чрескожного введения в составе применяют смачивающие средства, подходящие для проницаемого барьера. Такие смачивающие вещества обычно известны в данной области техники, и включают в себя, например, вещества для введения через слизистую, детергенты, соли желчных кислот и производные фусидовой кислоты. Введение через слизистую может быть осуществлено за счет использования назальных спреев или суппозиториев. Для трансдермального введения активные соединения изготавливают в виде мазей, бальзамов, гелей или кремов, как в целом известно в данной области техники.

В некоторых вариантах осуществления активные компоненты объединяют с носителями, которые будут защищать соединение от быстрого выведения из организма, такими как состав с контролируемым высвобождением, включая имплантаты и микрокапсулированные системы доставки. Можно применять биоразлагаемые, биосовместимые полимеры, такие как этиленвинилацетат, полиангидриды, полигликолевая кислота, коллаген, полиортоэфиры и полимолочная кислота. Методы подготовки таких составов будут очевидными для специалистов в данной области техники. Материалы также могут быть получены коммерчески от ALZA Corporation и Nova Pharmaceuticals, Inc. Липосомные суспензии также могут быть использованы в качестве фармацевтически приемлемых носителей. Их можно получить в соответствии со способами, известными специалистам в данной области техники, например, как описано в патенте США №4,522,811.

В частности, может быть выгодным приготовление композиций для перорального или парентерального введения в единичной дозированной форме для удобства введения и однородности дозировки. В контексте данного документа единичная дозированная форма относится к физически дискретным единицам, подходящим в качестве единичных дозировок для подлежащего лечению субъекта; каждая единица содержит предопределенное количество активного соединения, рассчитанное так, чтобы оказывать необходимое терапевтическое действие, в сочетании с необходимым фармацевтическим носителем. Спецификации для единичных дозированных форм согласно изобретению обусловлены и напрямую зависят от уникальных характеристик активного соединения и конкретного достигаемого терапевтического действия, и ограничений, свойственных области техники составления соединений, например, активного соединения для лечения индивидов.

Фармацевтические композиции могут быть включены в контейнер, упаковку или диспенсер вместе с инструкцией по применению.

Составы из частим лекарственного суедстеа

В некоторых вариантах осуществления предложена фармацевтическая композиция, содержащая любой из описанных полипептидов, сформулированных в виде соли трифторуксусной кислоты, соли уксусной кислоты или хлористоводородной соли. В некоторых вариантах осуществления представлена фармацевтическая композиция, содержащая любой из описанных полипептидов, сформулированных в виде соли трифторуксусной кислоты. В некоторых вариантах осуществления представлена фармацевтическая композиция, содержащая любой из описанных полипептидов, сформулированных в виде соли уксусной кислоты. В некоторых вариантах осуществления представлена фармацевтическая композиция, содержащая любой из описанных полипептидов, сформулированных в виде хлористоводородной соли.

Соединения, то есть выделенные полипептиды или их фармацевтически приемлемые соли для применения в практике данного изобретения, как правило, добавляются к составам частиц, которые используются для изготовления частиц, содержащих полипептид, который равномерно суспендируют, растворяют или диспергируют в носителе для суспензии для формирования состава в виде суспензии. В некоторых вариантах осуществления полипептид аналога амилина сформулирован в состав частиц и преобразован (например, высушен распылением) в частицы. В некоторых вариантах осуществления частицы, содержащие полипептид аналога амилина, суспендируются в составе носителя, что приводит к тому, что образованию состава суспензии и суспендированных частиц, содержащих полипептид аналога амилина.

Предпочтительно, составы из частиц могут быть сформированы в виде частиц с использованием способов, таких как сушка распылением, лиофилизация, высыхание, сублимационная сушка, измельчение, гранулирование, распыление ультразвуком, кристаллизация, осаждение, или других методов, доступных в данной области техники для формирования частиц из смеси компонентов. В одном варианте осуществления данного изобретения частицы сушат распылением. Частицы предпочтительно имеют по существу одинаковые форму и размер.

В некоторых вариантах осуществления в данном изобретении предложены составы частиц лекарственного средства для фармацевтического применения. Состав из частиц, как правило, содержит лекарственное средство и включает в себя один или более стабилизирующих компонентов (также называемых в данном документе «вспомогательными веществами»). Примеры стабилизирующих компонентов включают, но не ограничиваются ими, углеводы, антиоксиданты, аминокислоты, буферы, неорганические соединения, а также поверхностно-активные вещества. Количества стабилизаторов в составе из частиц могут быть определены экспериментально на основе активности стабилизаторов и желаемых характеристик композиции в соответствии с идеей настоящего описания.

В любом из вариантов осуществления изобретения состав из частиц может содержать от около 50% масс до около 90% масс, лекарственного средства, от около 50% масс, до около 85% масс, лекарственного средства, от около 55% масс. до% лекарственного средства около 90 мае, от около 60% масс до около 90% масс, лекарственного средства, от около 65% масс, до около 85% масс, лекарственного средства, от около 65% масс, до около 90% масс, лекарственного средства, от около 70% масс, до около 90% масс, лекарственного средства, от около 70% масс, до около 85% масс, лекарственного средства, от около 70% масс, до около 80% масс, лекарственного средства или от около 70% масс, до около 75% масс, лекарственного средства.

Как правило, количество углеводов в составе частиц определяется проблемами агрегации. В общем, количество углеводов не должно быть слишком высоким, чтобы избежать стимулирования роста кристаллов в присутствии воды из-за избытка углеводов, не связанных с препаратом.

Как правило, количество антиоксиданта в составе частиц определяется проблемами окисления, в то время как количество аминокислот в препарате определяются проблемами окисления и/или формуемостью частиц во время сушки посредством распыления.

Как правило, количество буфера в составе частиц определяется проблемами предварительной обработки, проблемами устойчивости и деформируемостью частиц во время сушки посредством распыления. Буфер может потребоваться для стабилизации лекарственного средства в процессе обработки, например, для приготовления раствора и сушки посредством распыления, когда все стабилизаторы солюбилизированы.

Примерами углеводов, которые могут быть включены в состав из частиц, включают в себя, но не ограничиваются ими, моносахариды (например, фруктоза, мальтоза, галактоза, глюкоза, D-манноза и сорбоза), дисахариды (например, лактоза, сахароза, трегалоза и целлобиоза), полисахариды (например, рафиноза, мелезитоза, мальтодекстрины, декстраны и крахмалы) и полиолы (ациклические полиолы, например, маннит, ксилит, мальтит, лактит, ксилит-сорбит, пиранозил сорбит и миоинозит). Подходящие углеводы включают дисахариды и/или нередуцирующие сахара, такие как сахароза, трегалоза и рафиноза.

Примеры антиоксидантов, которые могут быть включены в состав из частиц, включают в себя, но не ограничиваются ими, метионин, аскорбиновую кислоту, тиосульфат натрия, каталазу, платину, этилендиаминтетрауксусную кислоту (ЭДТА), лимонную кислоту, цистеин, тиоглицерин, тиогликолевую кислоту, тиосорбит, бутилгидроксианизол, бутилгидрокситолуол и пропилгаллат.Кроме того, аминокислоты, которые легко окисляются, могут быть использованы в качестве антиоксидантов, например, цистеин, метионин и триптофан.

Примеры аминокислот, которые могут быть включены в состав из частиц, включают в себя, но не ограничиваются ими, аргинин, метионин, глицин, гистидин, аланин, L-лейцин, глутаминовую кислоту, изолейцин, L-треонин, 2-фениламин, валин, норвалин, пролин, фенилаланин, триптофан, серии, аспарагин, цистеин, тирозин, лизин и норлейцин. Подходящие аминокислоты включают в себя те, которые легко окисляются, например, цистеин, метионин и триптофан.

Примеры буферов, которые могут быть включены в состав из частиц включают в себя, но не ограничиваются ими, цитрат, гистидин, сукцинат, фосфат, малеат, ТРИС, ацетат, углеводный буфер и gly-gly. Подходящие буфера включают цитрат, гистидин, сукцинат и ТРИС.

Примеры неорганических соединений, которые могут быть включены в состав из частиц включают, но не ограничиваются ими NaCl, Na₂SO₄, NaHCO₃, KCl, KH₂PO₄, CaCl₂ и MgCl₂.

Кроме того, состав частиц может включать другие стабилизаторы/вспомогательные вещества, такие как поверхностно-активные вещества и соли. Примеры поверхностно-активных веществ включают, но не ограничиваются ими, полисорбат 20, полисорбат 80, PLURONIC® (BASF Corporation, Mount Olive, N.J.) F68 и натрий додецилсульфат (SDS). Примеры солей включают, но не ограничиваются ими, хлорид натрия, хлорид кальция и хлорид магния.

Частицы, как правило, имеют такие размеры, что они могут быть доставлены с помощью имплантируемого осмотического устройства доставки. Сходная форма и размер частиц, как правило, помогают обеспечить последовательную и равномерную скорость высвобождения из такого устройства доставки; однако, может быть также использован препарат, состоящий из частиц, частицы которого имеют ненормальный профиль распределения размеров частиц. Например, в типичном имплантируемом осмотическом устройстве доставки, имеющем отверстие доставки, размер частиц составляет менее чем около 30%, более предпочтительно менее чем около 20%, более предпочтительно менее чем около 10% от диаметра отверстия доставки. В одном варианте осуществления состав из частиц для использования с осмотической системой доставки, в котором диаметр отверстия доставки имплантата составляет около 0,5 мм, размер частиц может составлять, например, от менее чем около 150 микрон до около 50 микрон. В одном варианте осуществления состав из частиц для использования с осмотической системой доставки, в котором диаметр отверстия доставки имплантата составляет около 0,1 мм, размер частиц может составлять, например, от менее чем около 30 микрон до около 10 микрон. В одном варианте осуществления размер отверстия составляет около 0,25 мм (250 микрон), а размер частиц - от около 2 микрон до около 5 микрон.

Специалистам в данной области техники будут понятно, что популяция частиц соответствует принципам распределения частиц по размерам. Широко используемые, в данной области техники способы описания распределения частиц по размерам включают в себя, например, средние диаметры и значения D, такие как значения D50, которое обычно используется для представления среднего диаметра в диапазоне размеров частиц данного образца.

Частицы состава из частиц имеют диаметр от около 2 микрон до около 150 микрон, например, менее 150 микрон в диаметре, менее 100 микрон в диаметре, менее чем 50 микрон в диаметре, менее чем 30 микрон в диаметре, менее чем 10 микрон в диаметре, менее чем 5 микрон в диаметре и около 2 микрон в диаметре, Предпочтительно частицы имеют диаметр от около 2 микрон до около 50 микрон.

Частицы состава частиц, содержащего выделенный полипептид аналога амилина, являющийся аналог имеют средний диаметр в пределах от около 0,3 микрон до около 150 микрон. Частицы состава из частиц, содержащего выделенный полипептид, являющийся полипептидом аналога амилина, имеют средний диаметр в пределах от около 2 микрон до около 150 микрон, например, средний диаметр менее 150 микрон, средний диаметр менее 100 микрон, средний диаметр менее чем 50 микрон, средний диаметр менее 30 микрон, средний диаметр менее чем 10 микрон, средний диаметр менее 5 микрон и средний диаметр около 2 микрон. В некоторых вариантах частица имеет средний диаметр от около 0,3 микрон до 50 микрон, например, от около 2 микрон до около 50 микрон. В некоторых вариантах частицы имеют средний диаметр от 0,3 микрон до 50 микрон, например, между около 2 микрон до около 50 микрон, где каждая частица имеет диаметр менее чем около 50 микрон.

Как правило, частицы составов из частиц при введении в носитель для суспензии не оседают в течение менее чем около 3 месяцев, предпочтительно не оседают в течение менее чем около 6 месяцев, более предпочтительно, не оседает в менее чем около 12 месяцев, более предпочтительно не оседает в течение менее чем 24 месяцев при температуре доставки, и наиболее предпочтительно, не оседает в течение менее чем 36 месяцев при температуре доставки. Носители для суспензий, как правило, имеют вязкость от около 5000 до около 30000 пуаз, предпочтительно от около 8000 до около 25000 пуаз, более предпочтительно от около 10000 до около 20000 пуаз. В одном варианте осуществления носитель для суспензий имеет вязкость около 15000 пуаз, плюс или минус около 3000 пуаз. Вообще говоря, более мелкие частицы, как правило, имеют более низкий уровень оседания в вязких носителях для суспензий, чем более крупные частицы. Соответственно, как правило желательными являются частицы с размерами порядков от микронных до наноразмерных. В вязком носителе для суспензии частицы от около 2 микрон до около 7 микрон по настоящему изобретению не будут оседать в течение по меньшей мере 20 лет при комнатной температуре на основе исследований посредством имитационного моделирования. В одном варианте осуществления состава из частиц по настоящему изобретению для использования в имплантируемом осмотическом устройстве доставки, состав содержит частицы размером менее около 50 микрон, более предпочтительно менее чем около 10 микрон, более предпочтительно в диапазоне от около 2 микрон до около 7 микрон.

Таким образом, раскрытые полипептиды или их фармацевтически приемлемые соли, сформулированные в сухие порошки в твердотельных частицах, которые сохраняют максимальную химическую и биологическую стабильность лекарственного средства. Частицы обеспечивают долговременную стабильность при хранении при высокой температуре, и, следовательно, позволяет доставлять субъекту стабильный и биологически эффективное лекарственное средство в течение длительного периода времени. Частицы суспендированы в носителях для суспензий для введения пациентам.

Частицы суспензии в носителях

В одном аспекте, носитель для суспензии обеспечивает устойчивую среду, в которой диспергируют состав из частиц лекарственного средства. Составы из частиц лекарственного средства являются химически и физически стабильными (как описано выше) в носителе для суспензии. Носитель для суспензии, как правило, включает один или более из полимеров и один или более из растворителей, которые образуют раствор с достаточной вязкостью, чтобы равномерно суспендировать частицы, содержащие лекарственное средство. Носитель для суспензии может включать дополнительные компоненты, в том числе, но не ограничиваясь ими, поверхностно-активные вещества, антиоксиданты и/или другие соединения, растворимые в носителе.

Вязкость носителя для суспензии, как правило, достаточна для предотвращения осаждения состава из частиц лекарственного средства во время хранения и для использования в способе доставки, например, в имплантируемом, осмотическом устройстве доставки. Носители для суспензии является биоразлагаемым, поскольку носитель для суспензии распадается или разрушается в течение определенного периода времени в ответ на биологическую среду, в то время как частицы лекарственного средства растворяются в биологической среде, а активный фармацевтический ингредиент (т.е., лекарственное средство) в частице абсорбируются.

В вариантах осуществления носитель для суспензии является «однофазным» носителем для суспензии, что является твердой, полутвердой или жидкой гомогенной системой, которая физически и химически равномерный по всему объему.

Растворитель, в котором растворен полимер, может повлиять на характеристики композиции в виде суспензии, такие как поведение состава из частиц лекарственного средства во время хранения. Растворитель может быть выбран в комбинации с полимером, так что в результате носитель для суспензии покажет разделение фаз при контакте с водной средой. В некоторых вариантах осуществления данного изобретения растворитель может быть выбран в комбинации с полимером, так что в результате носитель для суспензию покажет разделение фаз при контакте с водной средой, имеющей менее чем около 10% воды.

Растворитель может быть приемлемым растворителем, который не смешивается с водой. Растворитель также может быть выбран таким образом, чтобы полимер был растворим в растворителе в высоких концентрациях, таких как концентрации полимера более чем около 30%. Примеры растворителей, используемых в практике данного изобретения, включают, но не ограничиваются ими, лауриловый спирт, бензилбензоат, бензиловый спирт, лауриллактат, деканол (также называемый дециловый спирт), этилгексиллактат и длинноцепочечные (С8-С24) алифатические спирты, сложные эфиры или их смеси. Растворитель, используемый в носителе для суспензии может быть «сухим», то есть, иметь низкое содержание влаги. Предпочтительные растворители для применения при изготовлении носителя для суспензии включают лауриллактат, лауриловый спирт, бензилбензоат и их смеси.

Примеры полимеров для изготовления носителя для суспензии по настоящему изобретению, включают в себя, но не ограничиваются ими, сложный полиэфир (например, полимолочная кислота и сополимер полимолочной кислоты и полигликолевой кислоты), полимер, содержащий пирролидоны (например, поливинилпирролидон, имеющий молекулярную массу в диапазоне от около 2000 до около 1000000), сложный эфир или простой эфир ненасыщенного спирта (например, винилацетат), блок-сополимер полиоксиэтилена и полиоксипропилена блок-сополимер или их смесь. Поливинилпирролидон можно охарактеризовать по его K-значению (например, K-17), которое является индексом вязкости. В одном варианте осуществления полимер представляет собой поливинилпирролидон, имеющий молекулярную массу от 2000 до 1000000. В предпочтительном варианте осуществления полимер представляет собой поливинилпирролидон K-17 (как правило, имеющий приблизительный диапазон средней молекулярной массы 7900-10800). Полимер, используемый в носителе для суспензии, может включать в себя один или более различных полимеров или могут включать в себя различные типы одного полимера. Полимер, используемый в носителе для суспензии, также может быть сухим или иметь низкое содержание влаги.

Вообще говоря, носитель для суспензии для использования в настоящем изобретении может отличаться по составу на основании требуемых рабочих характеристик. В одном варианте осуществления носитель для суспензии может содержать от около 40% масс. до около 80% масс. полимера(-ов) и от около 20% масс. до 60% масс. полимера(-ов). Предпочтительные варианты осуществления носителя для суспензии включают носители, выполненные из комбинации полимера(-ов) и растворителя(ей) следующих соотношениях: около 25% масс.растворителя и около 75% масс. полимера; около 50% масс. растворителя и около 50% масс. полимера; около 75% масс. растворителя и около 25% масс. полимера. Соответственно, в некоторых вариантах осуществления носитель для суспензии может содержать выбранные компоненты, а в других вариантах осуществления изобретения состоит в основном из выбранных компонентов.

Носители для суспензии может демонстрировать ньютоновскую вязкость. Носители для суспензии, как правило, изготовлены с возможностью обеспечения вязкости, которая поддерживает однородную дисперсию частиц состава в течение предварительно определенного периода времени. Это помогает облегчить изготовление состава в виде суспензии с возможностью обеспечения контролируемой доставки лекарственного средства, содержащегося в составе из частиц лекарственного средства. Вязкость носителя для суспензии может изменяться в зависимости от желаемого применения, размера и типа состава частиц, и нагрузки состава из частиц в носителе для суспензии. Вязкость носителя для суспензии может быть изменена путем изменения типа или относительного количества растворителя или используемого полимера.

Носитель для суспензии может иметь вязкость в диапазоне от около 100 пуаз до 1000000 пуаз, предпочтительно от около 1000 пуаз до 100000 пуаз. В предпочтительных вариантах осуществления данного изобретения носители для суспензий, как правило, имеют вязкость при 33°С от около 5000 до около 30000 пуаз, предпочтительно от около 8000 до около 25000 пуаз, более предпочтительно от около 10000 до около 20000 пуаз. В одном варианте осуществления носитель для суспензии имеет вязкость около 15000 пуаз, плюс или минус около 3000 пуаз, при температуре 33°С. Вязкость может быть измерена при 33°С, при скорости сдвига 10-4/с, с использованием реометра с плоскопараллельным зазором.

Носитель для суспензии может демонстрировать разделение фаз при контакте с водной средой; однако, как правило, носитель для суспензии не показывает по существу никакого разделения фаз в зависимости от температуры. Так, например, при температуре в диапазоне от около 0°С до около 70°С и при циклическом изменении температуры, например, циклическом изменении температуры от 4°С до 37°С до 4°С, носитель для суспензии, как правило, не показывает разделения фаз.

Носитель для суспензии может быть получен путем объединения полимера и растворителя в сухих условиях, например, в сухом боксе. Полимер и растворитель, могут быть объединены при повышенной температуре, например, от около 40°С до около 70°С и оставлены для сжижения и образования единой фазы. Ингредиенты могут быть смешаны в вакууме для удаления пузырьков воздуха, выделившихся из сухих ингредиентов. Ингредиенты могут быть объединены с использованием обычного смесителя, такого как смеситель с двойной спиральной лопаткой, или аналогичного смесителя, с установленной скоростью около 40 оборотов в минуту. Однако для смешивания ингредиентов также могут быть использованы более высокие скорости. После получения жидкого раствора из ингредиентов, носитель для суспензии может быть охлажден до комнатной температуры. Данные дифференциальной сканирующей калориметрии (ДСК) могут быть использованы для подтверждения того, что носитель для суспензии представляет собой одну фазу. Кроме того, компоненты носителя (например, растворитель и/или полимер) могут быть обработаны для существенного снижения количества или по существу удаления пероксидов (например, путем обработки метионином, см, например, публикация заявки на патент США №2007-0027105).

Состав из частиц лекарственного средства добавляют в носитель для суспензии для образования состава в виде суспензии. В некоторых вариантах осуществления изобретения состав в виде суспензии может содержать состав из частиц лекарственного средства и носитель для суспензии, а в других вариантах осуществления изобретения он состоит в основном из состава из частиц лекарственного средства и носителя для суспензии.

Состав в виде суспензии может быть изготовлен путем диспергирования состава из частиц в носителе для суспензии. Носители для суспензии может быть нагрет и состав из частиц добавлен в носитель для суспензии в сухих условиях. Эти ингредиенты могут быть смешаны в вакууме при повышенной температуре, например, от около 40°С до около 70°С. Ингредиенты могут быть смешаны с достаточной скоростью, например, от около 40 об./мин. до около 120 об./мин., а также в течение достаточного количества времени, например, около 15 минут, для достижения однородной дисперсии состава из частиц в носителе для суспензии. Смеситель может быть смесителем с двойной спиральной лопаткой или другим подходящим смесителем. Полученная смесь может быть удалена из смесителя, запечатана в сухом контейнере, чтобы вода не загрязняла состав в виде суспензии, и оставлена для охлаждения до комнатной температуры до дальнейшего использования, например, введения в имплантируемое устройство доставки лекарств, контейнер с одной дозой или контейнер с несколькими дозами.

Состав в виде суспензии обычно имеет общее содержание влаги менее чем около 10% масс, предпочтительно менее чем около 5% масс. и более предпочтительно менее чем около 4% масс.

В предпочтительных вариантах осуществления состав в виде суспензии по настоящему изобретению, является по существу однородным и текучим, чтобы обеспечить доставку состава с частицами лекарственного средства из осмотического устройства доставки субъекту.

Таким образом, компоненты носителя для суспензии обеспечивают биосовместимость. Компоненты носителя для суспензии предлагают соответствующие физико-химические свойства для образования стабильных суспензий составов из частиц лекарственного средства. Такие свойства включают в себя, но не ограничиваются ими, следующие: вязкость суспензии; чистота носителя; остаточная влажность носителя; плотность носителя; совместимость с сухими порошками; совместимость с имплантируемыми устройствами; молекулярная масса полимера; устойчивость носителя; и гидрофобность и гидрофильность носителя. Такими свойствами можно манипулировать и контролировать, например, путем изменения состава носителя и манипуляции с соотношением компонентов, используемых в носителе для суспензии.

Составы в виде суспензии, описанные в данном документе, могут быть использованы в имплантируемом, осмотическом устройстве доставки для обеспечения непрерывной контролируемой и устойчивой доставки нулевого порядка соединения в течение продолжительного периода времени, например, в течение нескольких недель, месяцев, или до около одного года или более. Такое имплантируемое осмотическое устройство для доставки, как правило, способно доставлять состав в виде суспензии, содержащий лекарственное средство, с желаемой скоростью потока в течение требуемого периода времени. Состав в виде суспензии может быть помещен в имплантируемое осмотическое устройство доставки с помощью обычных способов.

Имплантируемая доставка

Доза и скорость доставки могут быть выбрана для достижения желаемой концентрации лекарственного средства в крови, как правило, в течение менее чем около 6 периодов полураспада лекарственного средства в теле субъекта после имплантации устройства. Концентрация лекарственного средства в крови выбрана таким образам, чтобы оказывать оптимальный терапевтический эффект лекарственного средства, избегая при этом нежелательных побочных эффектов, которые могут быть вызваны избыточной концентрацией лекарственного средства, при этом в то же время избегая пиковых и минимальных концентраций, которые могут вызывать побочные эффекты, связанный с пиковыми и минимальными концентрациями лекарственного средства в плазме.

Имплантируемое осмотическое устройство доставки обычно включает в себя резервуар, имеющий по меньшей мере одно отверстие, через которое доставляется состав в виде суспензии. Состав в виде суспензии может храниться в резервуаре. В предпочтительном варианте осуществления имплантируемое устройство доставки лекарственного средства представляет собой осмотическое устройство доставки, в котором доставка лекарственного средства выполняется посредством осмоса. Некоторые осмотические устройства доставки и их составные части были описаны, например, устройство для доставки DUROS® или аналогичные устройства (см., например, патенты США №5609885; 5728396; 5985305; 5997527; 6113938; 6132420; 6156331; 6217906; 6261584; 6270787; 6287295; 6375978; 6395292; 6508808; 6544252; 6635268; 6682522; 6923800; 6939556; 6976981; 6997922; 7014636; 7207982 и 7112335; 7163688; патентные публикации США №2005/0175701, 2007/0281024, 2008/0091176 и 2009/0202608).

Осмотическое устройство доставки, как правило, состоит из цилиндрического резервуара, который содержит осмотический двигатель, поршень и состав, содержащий препарат. Резервуар закрыт с одного конца полупроницаемой мембраной с контролируемой скоростью, а с другого конца - замедлителем диффузии, через который состав в виде суспензии, содержащий лекарственное средство, высвобождается из резервуара с препаратом. Поршень отделяет состав лекарственного средства от осмотического двигателя и использует уплотнение для предотвращения попадания воды из отсека осмотического двигателя в резервуар с препаратом. Замедлитель диффузии предназначен, в сочетании с составом, содержащим состав лекарственного средства, для предотвращения попадания жидкостей организма в резервуар с препаратом через отверстие.

Осмотическое устройство высвобождает лекарственное средство с заранее определенной скоростью на основании принципа осмоса. Внеклеточная жидкость поступает в осмотическое устройстве для доставки через проницаемую мембрану пола непосредственно в солевом двигатель, который расширяется для приведения в действии поршня в медленной и даже доставках скорости. Движение поршня выталкивает лекарственное средство через отверстие или выходное отверстие при заданной скорости сдвига. В одном из вариантов осуществления данного изобретения резервуар осмотического устройства заполняется составом в виде суспензии, при этом устройство способно доставлять суспензионную композицию субъекту в течение длительного периода времени (например, около 1, около 3, около 6, около 9, около 10 и около 12 месяцев) с заранее определенной, терапевтически эффективной скоростью доставки.

Скорость высвобождения лекарственного средства из осмотического устройства для доставки, как правило, доставляет субъекту заранее определенную целевую дозу лекарственного средства, например, терапевтически эффективная суточная доза доставляется в течение суток; то есть, скорость высвобождения лекарственного средства из устройства обеспечивает по существу стабильную доставку субъекту лекарственного средства в терапевтической концентрации.

Как правило, для осмотического устройства доставки, объем полезного камеры для средства, содержащий состав с полезным средством, составляет от около 100 мкл до около 1000 мкл, более предпочтительно от около 120 мкл до 500 мкл, более предпочтительно между около 150 мкл и около 200 мкл.

Как правило, осмотическое устройство доставки имплантируется субъекту, например, субдермально или подкожно, для обеспечения подкожной доставки лекарственного средства. Устройство(-а) могут быть имплантированы субдермально или подкожно в одну или обе руки (например, во внутреннюю часть, наружную часть или заднюю часть плеча) или в брюшную полость. Предпочтительные места в брюшной области находятся под кожей живота в области ниже ребер и выше линии пояса. Для обеспечения количества мест для имплантации одного или более осмотических устройств доставки внутри брюшной полости, брюшная стенка может быть разделена на 4 квадранта следующим образом: верхний правый квадрант расположен по меньшей мере на 2-3 сантиметра ниже правого ребра, например, по меньшей мере на около 5-8 сантиметров ниже правого ребра, и по меньшей мере 2 3 сантиметра вправо от серединной линии живота, например, по меньшей мере на около 5 8 сантиметров вправо от серединной линии живота; нижний правый квадрант расположен по меньшей мере на 2-3 сантиметра выше линии пояса, например, по меньшей мере на около 5-8 сантиметров выше линии пояса, и, по меньшей мере на 2-3 сантиметра вправо от серединной линии живота, например, по меньшей мере на около 5-8 сантиметров вправо от серединной линии живота; верхний левый квадрант расположен по меньшей мере на 2-3 сантиметра ниже левого ребра, например, по меньшей мере на около 5 8 сантиметров ниже левого ребра, и по меньшей мере на 2-3 сантиметра влево от серединной линии живота, например, по меньшей мере на около 5-8 сантиметров влево от серединной линии живота; а нижний левый квадрант расположен по меньшей мере на 2-3 сантиметра выше линии пояса, например, по меньшей мере на около 5 8 сантиметров выше линии пояса, и по меньшей мере на 2 3 сантиметра влево от серединной линии живота, например, по меньшей мере на около 5 8 сантиметров влево от серединной линии живота. Такое деление обеспечивает множество доступных мест для имплантации одного или более устройств за один или более раз. Имплантация и удаление осмотических устройств доставки, как правило, осуществляется медицинскими работниками с использованием местной анестезии (например, лидокаин).

Прекращение лечения пути удаления осмотического устройства доставки из субъекта является простым и обеспечивает важное преимущество немедленного прекращения доставки лекарственного средства субъекту.

Предпочтительно, осмотическое устройство доставки имеет отказоустойчивый механизм для предотвращения непреднамеренной избыточной или болюсной доставки лекарственного средства в такой теоретической ситуации как засорение или закупоривание выходной части (замедлителя диффузии), через которую доставляется лекарственное средство. Для предотвращения непреднамеренной избыточной или болюсной доставки лекарственного средства осмотического устройство для доставки сконструировано и изготовлено таким образом, что давление, необходимое для частичного или полного вытеснения или отделения замедлителя диффузии из резервуара превышает давление, необходимое для частичного или полного вытеснения или отделения полупроницаемой мембраны в объеме, необходимом для снятия давления в резервуаре. В таком случае давление будет нарастать внутри устройства до тех пор, пока оно не вытолкнет полупроницаемую мембрану на другом конце наружу, тем самым сбрасывая осмотическое давление. Осмотическое устройство доставки затем статичным и больше не будет доставить лекарственное средство при условии, что поршень герметично прилегает к резервуару.

Составы в виде суспензии могут быть также использованы в инфузионных насосах, например, осмотических насосах ALZET® (DURECT Corporation, Купертино, Калифорния), которые представляют собой миниатюрные инфузионные насосы для непрерывного дозированного введения лабораторным животным (например, мышам и крысам).

Примеры

Следующие примеры приводятся с тем, чтобы предоставить специалистам в данной области техники полное раскрытие и описание того, как применять на практике настоящее изобретение, однако они не претендуют ни на ограничение объема того, что заявители рассматривают как свое изобретение. Были приняты меры для того, чтобы сохранить точность по отношению к использованным цифрам (например, количествам, концентрациям и процентные изменения), однако следует учитывать некоторые экспериментальные ошибки и отклонения. Если не указано иное, температура указана в градусах по Цельсию, а давление равно атмосферному или близко к нему.

Пример 1: Получение полипептидов аналога амилина

Полипептиды аналога амилина по изобретению, предложенные в таблице 3, были синтезированы на пептидном синтезаторе Prelude (Protein Technologies Inc., Tucson, AZ)) с помощью твердофазных методов с использованием стратегии FMOC с активацией N-[(диметиламино)-1Η-1,2,3-триазол-[4,5-b]пиридин-1-илметилен]-N-метилметанамингексафторфосфат N-оксидом (HATU) или 2-(6-хлор-1-Н-бензотриазол-1-ил)-1,1,3,3-тетраметиламингексафторфосфатом (HCTU) (5-кратный молярный избыток по сравнению аминокислотами) в Ν,Ν-диметилформамиде (ДМФ), a N'N-диизопропилэтиламин (DIEA) был использован в качестве основы. 20% раствор пиперидин/ДМФ был использован для снятия защитной группы Fmoc. В качестве смолы использовали Rink Amide MBHA LL (Novabiochem) с загрузкой (0,30-0,40) ммоль/г по шкале (20-400) мкмоль.

Окончательное снятие защиты и отщепление пептида от твердой подложки осуществляли путем обработки смолы (92,5% TFA, 2,5% фенола, 2,5% воды и 2,5% триизопропилсилана) в течение 2 3 часов. Отщепленный пептид осаждали с помощью холодного диэтилового эфира. Диэтиловый эфир декантировали, и твердые вещества снова растирали с холодным диэтиловым эфиром и осаждали центрифугированием. Неочищенные твердые вещества были затем растворены в растворе 1:1 ACN/вода, 0,01% TFA. Образование дисульфида мостика осуществляли через добавление раствора йода/уксусной кислоты (35 мг/мл) к раствору неочищенного продукта до тех пор, пока раствор не станет неизменно янтарного цвета. Реакционный раствор перемешивали до тех пор, пока анализ посредством ЖХ/МС не указал на окончание реакции. 2% раствор аскорбиновой кислоты в H₂O добавляли до тех пор, пока раствор не становился прозрачным. Конечный раствор неочищенного продукта был лиофилизирован при подготовке к окончательной очистке.

Лиофилизированное твердое вещество повторно растворяли в 1:1 ацетонитриле/в оде с 0,1% TFA (10-15 мл), очищали посредством обратно-фазовой ВЭЖХ на колонке Waters XBridge™ ВЕН 130, CIS, 10 пм, 130 30 X 250 мм ВД, с использованием 30 градиента с диапазонами ацетонит ил/вода 5-75% с 0,1% TFA в течение более 30-45 минут при скорости потока 30 мл/мин, λ - 215 нм.

Пример 2: Очистка и характеристика полипептидов аналога амилина, то есть линейного полипептида, без какого-либо липофильного заместителя и необязательного спейсера

Очищенный продукт лиофилизировали и анализировали с помощью ИЭР-ЖХ/МС и аналитической ВЭЖХ, и было продемонстрировано, что он является чистым (>98%). Все полученные массы соответствовали расчетным значениям.

Характеризации пептидных аналогов проводились посредством С18 ВЭЖХ, анализа ЖХ/МС (Acquity SQD Waters Corp., Milford, MA) и УФ-детектирования, выполненного двойных сигналов поглощения при 215 нм и 280 нм с использованием одного из трех способов: способа А, способа В, способа С или способа D.

Способ А, условия ЖХ/МС: выполняли с использованием колонки Phenomenex УЭЖХ Aeris™ Peptide ХВ CI8 35, 1,7 пм, 2,1 X 100 мм или колонки ACQUiTY ВЕН300 или ВЕН130 СТ8, 1,77 пм. 2,1 X 100 мм с использованием 5-65% ацетонитрила/воды с 0,05% TFA в течение 30 минут со скоростью потока 0,5 мл/мин, λ - 215 нм, 280 нм.

Способ В, условия ВЭЖХ С18: анализ УЭЖХ выполняли на колонке Acquity ВЕН130, С18, 1,7 мкм, 100 X 2,10 мм при температуре 25°С, 5-65% ацетонитрила/воды с 0,05% TFA в течение 30 минут, скорость потока 0,5 мл/мин, 1 215 нм, 1 280 нм.

Способ С, условия УЭЖХ: анализ УЭЖХ выполняли на колонке Acquity ВЕН130, С18, 1,7 мкм, 100 X 2,10 мм при температуре 25°С, 5-65% ацетонитрила/воды с 0,05% TFA в течение 20 минут, скорость потока 0,5 мл/мин, 1 215 нм, 1 280 нм.

Способ D, условия УЭЖХ: анализ УЭЖХ выполняли на колонке Acquity ВЕН130, С18, 1,7 мкм, 100 X 2,10 мм при температуре 25°С, 5-65% ацетонитрила/воды с 0,05% TFA в течение 10 минут, скорость потока 0,5 мл/мин, 1215 нм, 1280 нм 5,0 мкл образца вводили с использованием режима впрыска PLNO (частичный цикл w/переполненная игла).

В таблице 3 приведены иллюстративные полипептиды аналога амилина по изобретению.

Полипептиды аналогов без липофильного заместителя и необязательного спейсера иногда упоминаются в данном документе как «линейные полипептиды». Полипептиды аналогов, имеющие, по меньшей мере, один ковалентно связанный липофильный заместитель и необязательно спейсер, иногда упоминаются в данном документе как «конъюгированные полипептиды».

Пример 3: Синтез промежуточных соединений полипептидов аналога амилина

Синтез полипептидов с модификациями в положениях D-Lysl6 или L-Lysl6, например (соединения В2, А129, В4 и В8)

По завершении синтеза линейного полипептида, описанного в примере 1, смолу промывали дихлорметаном (ДХМ) и сушили под вакуумом в течение 30 минут. Для аналогов, содержащих Alloc-защитную группу, ее удаление облегчали с помощью раствора Рс1(РРпз)з в (хлороформ/уксусная кислота/n-метил-морфолин, 37:2:1). Полученную смолу без защитной группы промывали 2% диэтилдитиодикарбаматом тригидратом натрия/ДМФ (6 x 30 секунд), 2% DIEA/ДМФ (6 х30 секунд) и, наконец, ДМФ (6 x 30 секунд). Удлинение области спейсера проводили в поэтапном порядке с ручным добавлением каждого строительного блока при условиях предварительной активации. В 1 мл 200 ммоль раствора Fmoc-γGlu-(OH)-OtBu в ДМФ добавляли 0,5 мл DIEA (800 ммоль), за которым следует 0,5 мл HCTU (400 ммоль), а полученный реакционный раствор перемешивали в течение 5 минут, где он был добавлен к линейному остатку на линейной последовательности. Реакционную смесь перемешивали в азоте в течение 30 минут. Смолу осушали и промывали ДМФ (6 x 30 секунд). Последующее удаление защитной группы Fmoc было облегчено с использованием 20% пиперидина/ДМФ с последующей конечной промывкой ДМФ (6 χ 30 секунд). Окончательное снятие защиты и отщепление пептида от твердой подложки осуществляли путем обработки смолы (95% TFA, 2% воды, 2% тиоанизола, 1% триизопропилсилана) в течение 2 3 часов. Поскольку каждый строительный блок включен с использованием метода, описанного выше, каждое промежуточное соединение, было выделено и охарактеризовано посредством ВЭЖХ/МС.

Синтез полипептидов с модификациями на N-конце, например, (А130, В22 и В23)

Синтез линейной последовательности проводился, как описано в примере 1. Добавление альбумин-связывающего фрагмента способствовало удалению N-концевой Fmoc-защитной группы с помощью 20% раствора пиперидина/ДМФ. Смолу промывали ДМФ, и включение строительных блоков с боковыми цепями проводили пошагово при условиях предварительной активации. В 1 мл 200 ммоль раствора Fmoc-γGlu-(OH)-OtBu в ДМФ добавляли 0,5 мл DIEA (800 ммоль), а затем 0,5 мл of HCTU (400 ммоль). Полученный реакционный раствор перемешивали в течение 5 минут, при добавлении его к линейной последовательности. Реакционную смесь перемешивали в азоте в течение 30 минут. Смолу осушали и промывали ДМФ (6 x 30 секунд). Окончательное снятие защиты и отщепление пептида от твердой подложки осуществляли путем обработки смолы (95% TFA, 2% воды, 2% тиоанизола, 1% триизопропилсилана) в течение 2-3 часов. Каждое промежуточное соединение, было выделено и охарактеризовано посредством ВЭЖХ/МС. Химические данные для внутренних модифицированных полипептидов и N-концевых модифицированных промежуточных соединений полипептидов приведены в таблице 5 ниже.

Пример 4. Ковалентное присоединение липофильного заместителя и необязательного спейсера к полипептидам аналогов амилина, то есть преобразование линейных полипептидов в конъюгированные полипептиды

Синтез полипептидов аналогов амилина, конъюгированных с одним или более липофильными заместителями связывающимися с альбумином и необязательным спейсером, проводился с модификациями в методе синтеза, описанном в примере 1.

По завершении синтеза линейного полипептида, описанного в примере 1, смолу промывали дихлорметаном (ДХМ) и сушили под вакуумом в течение 30 минут. Для аналогов, содержащих Alloc-защитную группу, ее удаление облегчали с помощью раствора Pd(PPh₃)₃ в (хлороформ/уксусная кислота/n-метил-морфолин, 37:2:1). Для аналогов, содержащих BOC-Lys (Fmoc)-OH, защитная группа Fmoc была удалена с использованием 20% пиперидина/ДМФ. Полученную смолу без защиты промывали ДМФ (6 x 30 секунд). Затем удлинение области спейсера проводили в поэтапном порядке с ручным добавлением каждого строительного блока при условиях предварительной активации. Добавление липофильного заместителя (также называемого «ацильной цепью») проводили при нормальных условиях SPPS без этапа предварительной активации. Окончательное снятие защиты и отщепление пептида от твердой подложки осуществляли путем обработки смолы (95% TFA, 2% воды, 2% тиоанизола, 1% триизопропилсилана) в течение 2-3 часов. Отщепленный пептид осаждали с помощью холодного диэтилового эфира. Диэтиловый эфир декантировали, и твердые вещества снова растирали с холодным диэтиловым эфиром и осаждали центрифугированием.

Неочищенные продукт затем растворяли в растворе ACN/H₂O, 0,1% TFA. Раствор йода/уксусной кислоты (35 мг/мл) добавляли к каждому раствору неочищенного пептида, пока раствор не станет неизменно янтарного цвета. Реакционный раствор перемешивали до тех пор, пока анализ посредством ЖХ/МС не указал, что желаемый дисульфидный мостик сформировался. К реакционному раствору добавляли 2% раствор аскорбиновой кислоты в H₂O до тех пор, пока раствор не становился прозрачным. Раствор замораживали и лиофилизировали. Очистку была осуществляли методами, описанными в примере 1.

Описан иллюстративный синтез конъюгированного пептида. Синтез А109: Синтез линейной последовательности проводился, как описано в примере 1. Добавление альбумин-связывающего фрагмента способствовало удалению N-концевой Fmoc-защитной группы с помощью 20% раствора пиперидина/ДМФ. Затем смолу промывали ДМФ, и включение строительных блоков с боковыми цепями проводили пошагово при условиях предварительной активации. К 1 мл 200 ммоль раствора Fmoc-γGlu-(OH)-OtBu в ДМФ добавляли 0,5 мл DIEA (800 ммоль), а затем 0,5 мл of HCTU (400 ммоль). Полученный реакционный раствор перемешивали в течение 5 минут, при добавлении его к линейной последовательности. Реакционную смесь перемешивали в азоте в течение 30 минут. Затем смолу осушали и промывали ДМФ (6 x 30 секунд). Защитную группу Fmoc γGlu удаляли 20% пиперидином/ДМФ. С последующим соединением с октадеканедиовой кислотой (С18) (200 ммоль) в ДМФ с использованием HATU (400 ммоль) и DIEA (800 ммоль) при нормальных твердофазных условиях.

Расщепление осуществляли с использованием раствора 95% TFA/2% воды/2% тиоанизола/1% TIPS. Неочищенные продукт затем растворяли в растворе ACN/H₂O, 0,1% TFA. Раствор йода/уксусной кислоты (35 мг/мл) добавляли к раствору неочищенного пептида, пока раствор не станет неизменно янтарного цвета. Реакционный раствор перемешивали до тех пор, пока анализ посредством ЖХ/МС не указал, что желаемый дисульфидный мостик сформировался. К реакционному раствору добавляли 2% раствор аскорбиновой кислоты в H₂O до тех пор, пока раствор не становился прозрачным.

В последствии лиофилизации неочищенного продукта получали грязно-белое твердое вещество, которое очищали способами, описанными в примере 2.

Пример 5: Стабильность полипептидов аналога амилина

Несколько полипептидов аналога амилина, описанных в данном документе, тестировали, как ацетатную соль трифторацетата в отношении устойчивости в ДМСО (то есть, сероорганическом растворителе) или водным (то есть, в ДИ воде) при 1 мг/мл. Эти полипептиды аналога инкубировали при 37°С, а образцы были изъяты при различных интервалах времени и проанализированы с помощью ЖХ/МС и ВЭЖХ для определения чистоты и массы родительского пептида и степени любых продуктов деградации. Результаты чистоты этих анализов приведены в таблицах 6А и 6В и считаются указывающими на стабильность.

Пример 6: Растворимость полипептидов аналога амилина

Полипептиды аналога, описанные в данном документе, были протестированы на растворимость в солевом растворе 20% ДМСО в воде (то есть буфере для биоанализов) или в воде (ДИ воде) при комнатной температуре. Образцы визуально осматривали на предмет прозрачности образца и любого проявление мутности или помутнения. Результаты этого анализа представлены в таблице 7.

Пример 7: Функциональные анализы: рецептор кальцитонина человека и рецептор амилина 3

Активация рецептора кальцитонина человека (hCTR) или рецептора амилина 3 человека (hAMY3R), приводит к увеличению клеточного циклического аденозина монофосфата (сАМР). В присутствии неспецифического ингибитора фосфодиэстеразы 3-изобутил-1-метилксантина (IBMX) cAMP/cGMP, накопление сАМР может быть измерено in vitro с использованием общих методов обнаружения. Таким образом, можно оценить активность in vitro (рЕС50) для пептидов, активирующихся каждым из этих рецепторов, использующих кривые дозы-ответа для накопления сАМР.

Клетки, культивирование и анализ сАМР

Клетки HEK293-CNG стабильно экспрессирующие рецептор кальцитонина человека (hCTR) или совместно экспрессипующие рецептор кальцитонина человека и рецептор модифицирующего активность белка 3 человека (hAMY3R) (Codex Biosolutions №СВ-80200-258 и №СВ-80-200-271, соответственно) выращивали в 90% DMEM, 10% ФБС, 250 мкг/мл G418 и 1 мкг/мл пуромицина (клетки hCTR) или 90% DMEM, 10% ФБС, 250 мкг/мл G418, 1 мкг/мл пуромицина, 150 мкг/ил гигромицина В (клетки hAMY3R). Клетки культивировали в ростовых средах в течение не более 10 пассажей до тестирования.

В день анализа клетки, экспрессирующие hCTR или hAMY3R, подсчитывали и разделяли по 500 клеток на лунку в белые 384-луночные планшеты OptiPlates (PerkinElmer №6007299) в 5 мкл буфера стимуляции, состоящего из 1X HBSS, 5 мМ HEPES, 0,5 мМ IBMX и 0,1% бычьего сывороточного альбумина (БСА) или 1X HBSS, 5 мМ HEPES, 0,5 мМ IBMX и 0,1% казеина с 0%, 0,1% или 4% сывороточного альбумина человека (ЧСА).

Пептиды последовательно разбавляли в том же буфере, что и выше для каждого данного условия анализа. Два раствора для контроля анализа, состоящие из 50 мкМ форсколина (максимум сАМР) или только буфера для анализа (минимум сАМР), также были подготовлены в соответствующих буферах стимуляции. Пять микролитов каждой концентрации пептида или контроля анализа добавляли в трех повторностях в лунки и инкубировали в течение тридцати минут при комнатной температуре. Во время этого этапа инкубации с маркированным 4х раствором сАМР и 4х раствором Ulight®-анти-cAMP (состоящего из моноклонального антитела к сАМР,слитого с красителем Ulight™) проводили в соответствии с протоколом производителя (набор PerkinElmer LANCE Ultra сАМР). После этой инкубации в лунки добавляли 5 мкл, сАМР, меченого европием, и 5 мкл антитела к сАМР Ulight. Планшеты покрывали адгезионной крышкой для предотвращения испарения и инкубировали в течение 60 минут при комнатной температуре в темноте. Планшеты считывали на устройстве для считывания планшетов Envision fluorescent (PerkinElmer).

Анализ данных

Тестовые значения сначала были нормализованы для средних системных значений максимума и минимума сАМР, индуцированного форсколином, в программе Excel по формуле: (тестовое значение - системное мин.сред) / (системное макс.сред - системное мин.сред) * 100. Нормализованные тестовые значения представляют собой исходный скорректированный процент системного максимального ответа сАМР, индуцированного форсколином. Были проанализированы нормализованные данные от трех повторностей тестов, и использованы для оценки ЕС50 для каждого пептида на каждом рецепторе. Данные аппроксимировали в программном обеспечении GraphPad Prism (v7.04) с использованием 4-параметрической модели логистической кривой Y=низ+(верх-низ)/(l+10^∧((LogEC50-X))). Угловой коэффициент Хилла был ограничен до 1,0. Значения ЕС50 были преобразованы в значения рЕС50 с использованием формулы: рЕС50=- Log (ЕС50).

Интерпретация данных

Для данного рецептора оценки активности in vitro (рЕС50) в отсутствие ЧСА сопоставимы по всем пептидам, поскольку они отражают альбумин-независимое связывание (свободный пептид) значение (0% ЧСА, таблица 8). Однако в присутствии альбумина (БСА или ЧСА) измерение активности через ацилированные пептиды не являются сопоставимыми (таблица 8). Это связано с вариабельностью эффективности связывания альбумин-ацилпептида, которая зависима в совокупности от аминокислотной последовательности, ацилсивающего мотива, сайта крепления и длины линкера в каждом пептиде. Для данного конъюгированного полипептида, однако, уменьшение активности (уменьшение значения рЕС50) в присутствии по сравнению с отсутствием ЧСА, качественно указывает на альбумин-пептидное взаимодействие (таблица 8, фиг. 2А и 2В). Напротив, линейные полипептиды (прамлинтид, кальцитонин человека) не подвержены влиянию присутствия ЧСА (таблица 8, фиг. 2С и 2D), что отражает их плохую эффективность связывания альбумина.

Пример 8: внутривенная инфузия «линейных» (то есть, неацилированных) полипептидов аналога амилина: фармакокинетические исследования для оценки клиренса в почках (CL) линейных полипептидов аналога амилина

Пептиды растворяли в стерильном физиологическом растворе и вводили в виде 3-часовой внутривенной инфузии не натощак крысам-самцам линии Спрег-Доули (n=3 на группу) через канюлю в бедренного вене в конечной дозе 0,100 мг/кг. Препараты вводили со скоростью 1,67 мл/кг/час. Образцы крови (около 250 мкл) были собраны для фармакокинетического анализа через канюлю в яремной вене через 0,25, 0,5, 1, 2, 3, 3,17, 3,33, 3,5, 4, 4,5, 5 и 6 ч после начала инфузии (долгий способ) или через 1, 1.5, 2, 2,5 и 3 ч после начала инфузии (способ скрининга в спокойном состоянии). Все образцы собирали в пробирки Microtainerb, содержащие K2ЭДTA в качестве антикоагулянта и 25 мкл ингибитора протеазы. Плазму получали центрифугированием и хранили при -80°С до анализа. Результаты этого анализа приведены в таблице 9 и несколько экземпляров на фиг. 3а-3b.

Пример 9: внутривенная инфузия «конъюгированных» (то есть, ацилированных) полипептидов аналога амилина: фармакокинетические исследования для оценки клиренса в почках (CL) конъюгированных полипептидов аналога амилина

Пептиды растворяли в стерильном физиологическом растворе и вводили в виде 1-часовой внутривенной инфузии не натощак крысам-самцам линии Спрег-Доули (n=3 на группу) через канюлю в бедренного вене в конечной дозе 0,033 мг/кг. Препараты вводили со скоростью 1,67 мл/кг/час. Образцы крови (около 250 мкл) были собраны для фармакокинетического анализа через канюлю в яремной вене через 0,25, 0,5, 0,75, 1, 1,17, 1,33, 1,5, 2, 4, 6, 8, 24, 30 и 48 ч после начала инфузии в пробирки Microtainer, содержащие К2ЭДТА в качестве антикоагулянта и 25 мкл ингибитора протеазы. Плазму получали центрифугированием и хранили при -80°С до анализа. Результаты этого анализа приведены в таблице 9 и несколько экземпляров на фиг. 3а-3b.

Пример 10: подкожная инфузия: фармакокинетические исследования для оценки клиренса в почках (CL) полипептидов аналога амилина

Пептиды растворяли в стерильном физиологическом растворе и вводили в виде 1-часовой подкожной инфузии не натощак крысам-самцам крысам линии Спрег-Доули (n=3 на группу) в конечной дозе 0,033 мг/кг через канюлю, помещенную в подкожное пространство между лопатками. Препараты вводили со скоростью 0,145 мл/ ч/кг. Образцы крови (около 250 мкл) были собраны для фармакокинетического анализа через канюлю в яремной вене через 0,25, 0,5, 1, 1,5, 2, 4, 6, 8, 24, 30 и 48 ч после начала инфузии в пробирки Microtainer, содержащие К2ЭДТА в качестве антикоагулянта и 25 мкл ингибитора протеазы. Плазму получали центрифугированием и хранили при -80°С до анализа. Результаты этого анализа представлены в таблице 9.

Пример 11: подкожная болюсная инъекция: фармакокинетические исследования для оценки клиренса в почках (CL) полипептидов аналога амилина

Пептиды растворяли в стерильном физиологическом растворе и вводили не натощак крысам-самцам крысам линии Спрег-Доули (n=3 на группу) в дозе 0,3 мг/кг посредством болюсной инъекции, помещенную в подкожное пространство между лопатками. Образцы крови (около 250 мкл) были собраны для фармакокинетического анализа через канюлю в яремной вене через 0,083, 0,167, 0,25, 0,5, 1, 2, 4, 8, 24, 30 и 48 ч после введения дозы в пробирки Microtainer, содержащие К2ЭДТА в качестве антикоагулянта и 25 мкл ингибитора протеазы. Плазму получали центрифугированием и хранили при -80°С до анализа. Результаты этого анализа представлены в таблице 9.

Пример 12: способ приготовления образца плазмы для фармакокинетических исследований

Осаждение белка

Аликвоту 60 мкл каждого образца плазмы помещали в 96-луночный планшет. К каждую лунку добавляли 6 мкл 0,5% Tween-20. Затем планшеты перемешивали вихревым способом в течение 10 минут при 1200 об/мин до добавления в каждую лунку подходящего внутреннего стандарта, содержащего 180 мкл 0,1% TFA в 2:1 этанол:ацетонитрил. Планшеты перемешивали вихревым способом в течение 5 минут при 1300 об/мин, а затем центрифугировали в течение 10 минут при 2844 x g. Супернатанты (180 мкл) помещали в чистый 96-луночный планшет и испаряли под потоком азота при 45°С. Остатки были восстановлены в 80 мкл 20% ацетонитрила (aq), содержащего 0,1% муравьиной кислоты.

Твердофазная экстракция

Аликвоту 60 мл каждого образец плазмы разбавляли 180 мл 10 мМ ацетата аммония (рН 6,8), содержащего подходящий внутренний стандарт и загружали в микроэлюационный планшет оазис WCX (Waters Corporation, Милфорд, штат Массачусетс), которые были предварительно обработаны 200 мл метанола и 200 мл деионизированной воды. Образцы промывали 200 мл 5% гидроксида аммония (aq), а затем 200 мл 20% ацетонитрила в воде. Аналит элюировали 200 мл 5% муравьиной кислоты в 75:25 ацетонитрил:вода. Элюент сушили под потоком азота. Остатки были восстановлены в 80 мкл 20% ацетонитрила (aq), содержащего 0,1% муравьиной кислоты.

Пример 13: Количественный анализ ЖХ/МС полипептидов аналога амилина в плазме

Все калибровочные стандарты были изготовлены в контрольной крысиной плазме, содержащей смесь К2ЭДТА и ингибитора протеазы.

Образцы и стандарты были проанализированы с помощью TurboIonSpray™ УЭЖХ-МС/МС, с использованием системы, состоящей из автоинжектора СТС HTS PAL (Leap, Каррборо, Северная Каролина), системы Agilent Infinity 1290 с колоночным термостатом (Пало Альто, Калифорния), переключающего клапана Valeo (Хьюстон, Техас), и масс-спектрометра АВ Sciex API 5600 TripleTOF™ или Sciex API 4000QTrap (Фрамингем, Массачусетс). Образцы вводили в аналитическую колонку С18 2,1 x 50 мм с обращенной фазой, как правило, Waters CORTECS UPLC С18+, 1,6 мкМ (Waters Corporation, Милфорд, Массачусетс) или аналогичную. Хроматографическое разделение достигается посредством градиентного метода с использованием воды, содержащей 0,1% муравьиной кислоты (А) и ацетонитрила, содержащего 0,1% муравьиной кислоты (В), в качестве подвижной фазы. Начальные условия состояли из 90% А и 10% В. Органический компонент возрастает до 95% В в течение 3-1 минут в зависимости от пептида. Типичные скорости потока составляли 600 мкл/мин. Температуру колонки поддерживали на постоянном уровне при 40 или 50°С. Пептиды количественно оценивали посредством мониторинга одного или более ионов продукта, полученных из многозарядного родительского иона.

Пример 14: Эффективность in vivo полипептидов аналога амилина с ингибированием приема пищи у крыс

Острое потребление пищи непрерывно измеряли в течение 72 часов с использованием системы пищевого мониторинга BioDAQ (Research Diets, Нью-Брансуик, Нью-Джерси) для количественного определения ингибирования потребления пищи за счет данных полипептидов аналога амилина. Использовали крыс Лонг-Эванс в возрасте приблизительно 8 недель. Крыс содержали поодиночке и акклиматизировали до рациона с 45% жира, по меньшей мере за 2 недели до введения дозы. После 1 недели акклиматизации всех крыс помещали поодиночке в клетки BioDAQ (Research Diets, Нью-Брансуик, Нью-Джерси) и поддерживали при постоянной температуре (приблизительно 22°С) и 30-70% относительной влажности с 12-часовым циклом свет/темнота (света с 7:00 до 19:00). Крысы получили ad libitum доступ к воде и гранулированному корму (Research Diets D12451i, 45 ккал % жиров, Research Diets, Нью-Брансуик, Нью-Джерси). Все процедуры были выполнены в соответствии с Законом о защите животных, правилами USDA и одобрены комитетом по содержанию и использованию лабораторных животных Mispro. Животные были рандомизированы в группы лечения в зависимости от массы тела (N=8 крыс/группа). Животным вводили дозы (п/к болюсная инъекция) полипептида аналога амилина при указанной концентрации или плацебо (солевой раствор) с 6:00 до 6:30 до включения света в закрытых камерах во время введения доз животным. Камеры открывали, а непрерывный сбор данных начинали сразу после завершения введения доз. Данные анализировали с помощью программного обеспечения BioDAQ Viewer (версии 2.3.07), и фильтры использовали при необходимости для уменьшения шума в данных, связанных с неблагоприятным пищевым поведением. Все данные выражены как % ингибирования относительно плацебо и приведены как среднее значение. Данные анализировали на статистическую значимость с использованием Microsoft Excel (Редмонд, Вашингтон) с помощью 2-выборочного Т-критерия. Значения Ρ<0,05 считались такими, что указывают на существенное различие между группами лечения. % ингибирования острого потребления пищи относительно плацебо для полипептидов аналога амилина приведен в таблице 10.

Пример 15: Эффективность in vivo в изменении массы тела у крыс LE DIO после 13 дней

Хронические (13 дней) in vivo доза-реагирующие исследования эффективности были проведены в модели грызунов для ожирения (крысы Лонг-Эванс с вызванным рационом ожирением (DIO)) для изучения эффективности и долговечности полипептидов аналога амилина в отношении потери массы. Использовали самцов крыс LE DIO (Envigo Laboratories, Inc., Индианаполис, Индиана), начиная с отъема крысы получали рацион с высоким содержанием жира (Teklad TD 95217, 40% ккал из жиров, Harlan Laboratories, Мэдисон, Висконсин). Возраст крыс на начало исследования составлял 15-17 недель. Крыс содержали по одной на клетку, предоставляли неограниченный доступ к рациону с высоким содержанием жиров (Harlan TD.95217, 4,3 ккал/г) и воде, поддерживали цикл свет/темнота по 12 ч. с 5:00 до 17:00 при температуре 21°С и относительной влажности 50%, и давали возможность акклиматизироваться в течение по меньшей мере 10 дней до начала операций. Все процедуры были выполнены в соответствии с Законом о защите животных, правилами USDA и одобрены комитетом по содержанию и использованию лабораторных животных Mispro. Измерения массы тела проводились 2 раза в неделю, начиная за три дня до операции. Измерения исходного уровня измерений массы жировой ткани и массы не жировой ткани были взяты за 3 дня до начала инфузии пептида с использованием прибора QMR (Echo Medical Systems, Houston, TX). Крысы были рандомизированы в различные группы лечения (n=4-6 крыс/группа) в соответствии с процентом массы жировой ткани в теле и/или массы тела. Миниатюрные осмотические насосы Alzet (2 недели; Model 2002, Durect Corporation, Купертино, Калифорния) были заполнены в стерильных условиях носителем или пептидом один день до операции. В день операции крысы анестезировали под изофлураном и выбривали и очищали поверхность кожи на спине. Крысам подкожно вводили флунексин (2,5 мг/кг). Между лопатками выполняли хирургический разрез 1-2 см. Посредством тупой диссекции создавали подкожный туннель 2-3 см, в который вводили стерильный заполненный осмотический миниатюрный насос. Разрез на коже закрывали скрепками для кожи. Каждой крысе имплантировали один или два осмотических насоса, содержащие носитель или пептид в соответствии с их группой лечения. Данные были проанализированы в Excel и/или Prism (GraphPad Software, Inc., Ла-Холья, Калифорния) с использованием однофакторного дисперсионного анализа для сравнения каждой группы с соответствующей контрольной группой. Значения Ρ<0,05 считались такими, что указывают на существенное различие между группами лечения. Средняя потеря массы (%) от исходного уровня и плацебо (ΔΔ) из 13-дневных исследований приведена в таблице 9.

Пример 16: Эффективность потери массы, вызванной полипептидами аналога амилина в комбинации с эксенатида у крыс LE DIO

Были проведены хронические исследования для определения эффектов и долговечности непрерывного введения полипептидов аналога амилина в комбинации с эксенатидом (агонистом рецептора GLP-1) на массу тела после 27 дней лечения у крыс LE DIO. Самцам крыс LE DIO возрастом 18 недель (14 недель на диете с высоким содержанием жира) либо подкожно (п/к), имплантировали два (2) осмотических мини-насоса Alzet, содержащие указанные дозы полипептида аналога амилина и/или эксенатида (10 мкг/кг/д=ED50 для потери массы) или плацебо (20% ДМСО в воде) (N=8 животных/группа лечения). Полипептиды аналога амилина, РК которых, поддерживалась путем введения каждые два дня (кдд), вводились посредством п/к инъекции кдд вместо введения мини-насоса. Все остальные процедуры были такими же, как описано для предыдущего примера. Средняя потеря массы (%) от исходного уровня и плацебо (ΔΔ), полученная из хронических комбинированных исследований с эксенатидом показаны в таблице 11.

Пример 17: Противодиабетическая эффективность, вызванная полипептидами аналога амилина в комбинации с эксенатида у крыс ZDF

Было проведено хронические исследования для определения противодиабетических эффектов непрерывного введения полипептида аналога амилина в сочетании с эксенатидом на HbA1c (первичный противодиабетический параметр) после 27 дней лечения у крыс Zucker с диабетом (ZDF). Самцы крыс линии ZDF были получены в возрасте шести (6) недель (Charles River, Роли, Северная Каролина) и использовались в исследовании в возрасте восемь (8) недель. В начале исследования крыс содержали по одной на клетку с неограниченным доступом к корму Purina 5008 (Lab Diet, Сент-Луис, Миссури) и воде, поддерживали цикл свет/темнота по 12 ч. с 5:00 до 17:00 при температуре 21°С и относительной влажности 50%, и давали возможность акклиматизироваться в течение (9) дней до начала исследования. Осуществляли предварительный забор крови (день -3) через хвостовую вену для измерения уровня глюкозы и HbA1c. Крысы ZDF с аналогичным средним HbA1c и глюкозой были рандомизированы в группы лечения (n=10/группа). Им подкожно (п/к), имплантировали два (2) осмотических мини-насоса Alzet, содержащие указанные дозы полипептида аналога амилина и/или эксенатида (10 мкг/кг/день) или плацебо (20% ДМСО в воде) (n=10 животных/группа лечения). Полипептиды аналога амилина, РК которых, поддерживалась путем введения каждые два дня (кдд), вводились посредством п/к инъекции кдд вместо введения мини-насоса. Все остальные процедуры были такими же, как описано для предыдущего примера. Образцы крови повторно отбирали на 14 и 27 дни (конец исследования) для измерения уровня глюкозы и HbA1c. Конечные образцы цельной крови собирали путем пункции сердца под анестезией изофлураном (день 27). Анализ HbA1c проводился с использованием клинического химического анализатора Carolina Chemistries CLC720i (Mindray Inc., Маува, Нью-Джерси) с протоколом и параметрами метода, описанными производителем. Результаты HbAlc выражались как % среднего изменение от исходного уровня и плацебо (ΔΔ), полученные из хронических комбинированных исследований с эксенатидом показаны в таблице 11.

Хотя настоящее изобретение было изложено в сочетании с его подробным описанием, вышеприведенное описание предназначено для иллюстрации, а не для ограничения объема изобретения, который определяется объемом прилагаемой формулы изобретения. Другие аспекты, преимущества и модификации находятся в рамках объема следующей формулы изобретения.

Другие варианты осуществления

Хотя настоящее изобретение было изложено в сочетании с его подробным описанием, вышеприведенное описание предназначено для иллюстрации, а не для ограничения объема изобретения, который определяется объемом прилагаемой формулы изобретения. Другие аспекты, преимущества и модификации находятся в рамках объема следующей формулы изобретения.

--->

ПЕРЕЧЕНЬ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ

<110> INTARCIA THERAPEUTICS, INC.

<120> ПОЛИПЕПТИДЫ АНАЛОГА АМИЛИНА ЧЕЛОВЕКА И СПОСОБЫ ИХ ПРИМЕНЕНИЯ

<130> 616782: 102487-055PC

<140>

<141>

<150> 62/744236

<151> 11.10.2018

<160> 318

<170> PatentIn версии 3.5

<210> 1

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<400> 1

His Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Phe Leu

1 5 10 15

Val Lys Ser Ser Asn Glu Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 2

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<400> 2

Ile Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Phe Leu

1 5 10 15

Val Lys Ser Ser Asn Glu Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 3

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (15)..(15)

<223> Lys(CO(CH2)4CO2H)

<400> 3

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Xaa Leu

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 4

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<400> 4

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ser Asn Phe Leu

1 5 10 15

Val Lys Ser Ser Asn Glu Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 5

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (16)..(16)

<223> Lys(гаммаGlu-dpeg-dpeg-(гаммаGlu)4-CO(CH2)14CH3)

<400> 5

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Glu Xaa

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 6

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (16)..(16)

<223> D-Leu

<400> 6

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Phe Xaa

1 5 10 15

Val Lys Ser Ser Asn Glu Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 7

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<400> 7

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Glu Leu

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Lys Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Asn Thr Tyr

35

<210> 8

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<400> 8

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Glu Leu

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Lys Thr Tyr

35

<210> 9

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<400> 9

Ser Cys Asn Thr Ala Ser Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Phe Leu

1 5 10 15

Val His Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Asn Val

20 25 30

Gly Ser Asn Thr Tyr

35

<210> 10

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (17)..(17)

<223> Lys(гаммаGlu-CO(CH2)14CH3)

<400> 10

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Glu Leu

1 5 10 15

Xaa Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 11

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<400> 11

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Glu Leu

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Arg Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Asn Thr Tyr

35

<210> 12

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (16)..(16)

<223> D-Lys(dpeg-dpeg-гаммаGlu-CO(CH2)14CH3)

<400> 12

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Glu Xaa

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 13

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (16)..(16)

<223> D-Lys((гаммаGlu)3-CO(CH2)16CH3)

<400> 13

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Glu Xaa

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 14

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (16)..(16)

<223> Lys((гаммаGlu)5-CO(CH2)14CH3)

<400> 14

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Glu Xaa

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 15

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<400> 15

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Tyr Leu

1 5 10 15

Val Lys Ser Ser Asn Glu Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 16

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (16)..(16)

<223> D-Lys(dpeg-dpeg-гаммаGlu-CO(CH2)14CH3)

<400> 16

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Glu Xaa

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Gly Thr Tyr

35

<210> 17

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<400> 17

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Glu Leu

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Asn Thr Tyr

35

<210> 18

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (15)..(15)

<223> Lys(CO(CH2)6CO2H)

<400> 18

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Xaa Leu

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 19

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (16)..(16)

<223> Lys(гаммаGlu-dpeg-dpeg-(гаммаGlu)3-CO(CH2)14CH3)

<400> 19

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Glu Xaa

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 20

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (16)..(16)

<223> D-Lys(dpeg-dpeg-гаммаGlu-CO(CH2)14CH3)

<400> 20

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Glu Xaa

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Ala Thr Tyr

35

<210> 21

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (16)..(16)

<223> Lys((гаммаGlu)4-CO(CH2)14CH3)

<400> 21

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Glu Xaa

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 22

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<400> 22

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Ser Arg Leu Ala Asn Tyr Leu

1 5 10 15

Val Lys Ser Ser Asn Glu Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 23

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<400> 23

Ser Cys Ser Thr Ala Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Phe Leu

1 5 10 15

Val His Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Asn Val

20 25 30

Gly Ser Asn Thr Tyr

35

<210> 24

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<400> 24

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Ile Leu

1 5 10 15

Val Lys Ser Ser Asn Glu Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 25

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (16)..(16)

<223> D-Lys(гаммаGlu-dpeg-dpeg-(гаммаGlu)-CO(CH2)14CH3)

<400> 25

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Glu Xaa

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 26

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (16)..(16)

<223> Lys(гаммаGlu-dpeg-dpeg-(гаммаGlu)2-CO(CH2)14CH3)

<400> 26

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Glu Xaa

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 27

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (16)..(16)

<223> D-Lys((гаммаGlu)2-CO(CH2)14CH3)

<400> 27

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Glu Xaa

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 28

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (16)..(16)

<223> D-Lys((гаммаGlu)2-CO(CH2)14CH3)

<400> 28

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Gln Glu Xaa

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 29

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (16)..(16)

<223> Lys((гаммаGlu)3-CO(CH2)14CH3)

<400> 29

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Glu Xaa

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 30

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<400> 30

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Glu Asn Phe Leu

1 5 10 15

Val Lys Ser Ser Asn Glu Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 31

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (15)..(15)

<223> Lys(CO(CH2)11CO2H)

<400> 31

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Xaa Leu

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 32

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<400> 32

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Ser Arg Leu Ala Asn Glu Leu

1 5 10 15

Val His Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Asn Val

20 25 30

Gly Ser Asn Thr Tyr

35

<210> 33

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<400> 33

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Ser Arg Leu Ser Asn Glu Leu

1 5 10 15

His Arg Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 34

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<400> 34

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ser Asn Glu Leu

1 5 10 15

His Arg Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 35

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (16)..(16)

<223> D-Leu

<400> 35

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Phe Xaa

1 5 10 15

Val Lys Ser Ser Asn Glu Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Asn Val

20 25 30

Gly Ser Asn Thr Tyr

35

<210> 36

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (16)..(16)

<223> D-Lys(гаммаGlu-CO(CH2)14CH3)

<400> 36

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Glu Xaa

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 37

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<400> 37

Ser Cys Asn Thr Ala Ser Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Tyr Leu

1 5 10 15

Val His Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Asn Val

20 25 30

Gly Ser Asn Thr Tyr

35

<210> 38

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<400> 38

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Glu Leu

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Glu Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Asn Thr Tyr

35

<210> 39

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (16)..(16)

<223> D-Lys((гаммаGlu)2-Gly-CO(CH2)14CH3)

<400> 39

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Glu Xaa

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 40

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<400> 40

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Glu Leu

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr His Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 41

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<400> 41

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Glu Leu

1 5 10 15

His Arg Ser Ser Asn Glu Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Asn Val

20 25 30

Gly Ser Asn Thr Tyr

35

<210> 42

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (15)..(15)

<223> Lys(гаммаGlu-CO(CH2)14CH3)

<400> 42

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Xaa Leu

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 43

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<400> 43

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Phe Leu

1 5 10 15

Val Lys Ser Ser Asn Glu Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 44

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<400> 44

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Glu Leu

1 5 10 15

Val His Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Asn Val

20 25 30

Gly Ser Asn Thr Tyr

35

<210> 45

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<400> 45

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Glu Leu

1 5 10 15

His Arg Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Asn Val

20 25 30

Gly Ser Asn Thr Tyr

35

<210> 46

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (16)..(16)

<223> D-Leu

<400> 46

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Phe Xaa

1 5 10 15

Val Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Asn Val

20 25 30

Gly Ser Asn Thr Tyr

35

<210> 47

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (16)..(16)

<223> D-Lys(гаммаGlu-CO(CH2)14CH3)

<400> 47

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Glu Xaa

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 48

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (1)..(1)

<223> Lys(dpeg-dpeg- гаммаGlu-(CO(CH2)16CO2H))

<400> 48

Xaa Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Ser Arg Leu Ala Gln Phe Leu

1 5 10 15

Gln Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 49

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<400> 49

Ser Cys Ser Thr Ala Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Tyr Leu

1 5 10 15

Val His Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Asn Val

20 25 30

Gly Ser Asn Thr Tyr

35

<210> 50

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (16)..(16)

<223> D-Leu

<400> 50

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Phe Xaa

1 5 10 15

Val Lys Ser Ser Asn Glu Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Asn Thr Tyr

35

<210> 51

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<400> 51

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Ser Arg Leu Ala Asn Glu Leu

1 5 10 15

Val Arg Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 52

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<400> 52

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ser Asn Glu Leu

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 53

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (16)..(16)

<223> D-Lys((гаммаGlu)3-CO(CH2)14CH3)

<400> 53

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Glu Xaa

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 54

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<400> 54

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Ser Arg Leu Ala Asn Glu Leu

1 5 10 15

His Arg Ser Ser Asn Glu Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 55

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (1)..(1)

<223> Lys(CO(CH2)16CO2H))

<400> 55

Xaa Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Ser Arg Leu Ala Asn Phe Leu

1 5 10 15

Gln Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 56

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (16)..(16)

<223> D-Lys((гаммаGlu)2-CO(CH2)16CH3)

<400> 56

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Glu Xaa

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 57

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<400> 57

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Glu Leu

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 58

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<400> 58

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Ser Arg Leu Ala Asn Phe Leu

1 5 10 15

Gln Lys Ser Ser Asn Glu Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 59

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<400> 59

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Ser Arg Leu Ala Asn Tyr Leu

1 5 10 15

Gln Lys Ser Ser Asn Glu Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 60

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (15)..(15)

<223> D-Phe

<400> 60

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Xaa Leu

1 5 10 15

Val Lys Ser Ser Asn Glu Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 61

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<400> 61

Ser Cys Asn Thr Ala Ser Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Tyr Leu

1 5 10 15

His Arg Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Asn Val

20 25 30

Gly Ser Asn Thr Tyr

35

<210> 62

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<400> 62

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Ser Arg Leu Ala Asn Phe Leu

1 5 10 15

Gln Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 63

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (16)..(16)

<223> Lys(гаммаGlu-dpeg-dpeg- гаммаGlu-CO(CH2)14CH3)

<400> 63

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Glu Xaa

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 64

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (1)..(1)

<223> Lys((гаммаGlu)2(CO(CH2)18CO2H))

<400> 64

Xaa Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Glu Leu

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 65

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (1)..(1)

<223> Lys((гаммаGlu)2(CO(CH2)16CO2H))

<400> 65

Xaa Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Glu Leu

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 66

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (16)..(16)

<223> D-Lys((гаммаGlu)4-CO(CH2)14CH3)

<400> 66

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Glu Xaa

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 67

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (16)..(16)

<223> D-Lys((гаммаGlu)3-CO(CH2)14CH3)

<400> 67

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Glu Xaa

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Asn Thr Tyr

35

<210> 68

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (15)..(15)

<223> Lys((гаммаGlu)2-CO(CH2)14CH3)

<220>

<221> MOD_RES

<222> (16)..(16)

<223> D-Lys(2(гаммаGlu)-CO(CH2)14CH3)

<400> 68

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Xaa Xaa

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 69

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (16)..(16)

<223> D-Lys(dpeg-dpeg-гаммаGlu-CO(CH2)14CH3)

<400> 69

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Glu Xaa

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Tyr Thr Tyr

35

<210> 70

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (16)..(16)

<223> D-Lys((гаммаGlu)2-CO(CH2)14CH3)

<400> 70

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Phe Xaa

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 71

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (16)..(16)

<223> D-Lys((гаммаGlu)2-dpeg-dpeg- гаммаGlu-CO(CH2)14CH3)

<400> 71

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Glu Xaa

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 72

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (15)..(15)

<223> Lys(CO(CH2)14CO2H))

<400> 72

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Xaa Leu

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 73

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (16)..(16)

<223> Lys(гаммаGlu-CO(CH2)18CO2H)

<400> 73

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Glu Xaa

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 74

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (16)..(16)

<223> Lys(CO(CH2)10CO2H))

<400> 74

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Glu Xaa

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 75

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (16)..(16)

<223> Lys(CO(CH2)18CO2H)

<400> 75

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Glu Xaa

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 76

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (16)..(16)

<223> Lys(гаммаGlu-CO(CH2)16CO2H)

<400> 76

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Glu Xaa

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 77

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (16)..(16)

<223> D-Lys((гаммаGlu)3-Gly-CO(CH2)14CH3)

<400> 77

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Glu Xaa

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 78

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (16)..(16)

<223> D-Lys(dpeg-dpeg-гаммаGlu-CO(CH2)14CH3)

<400> 78

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Glu Xaa

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Pro Thr Tyr

35

<210> 79

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (16)..(16)

<223> Lys(CO(CH2)15CO2H)

<400> 79

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Glu Xaa

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 80

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (16)..(16)

<223> Lys(гаммаGlu-CO(CH2)15CO2H)

<400> 80

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Glu Xaa

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 81

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (16)..(16)

<223> Lys(CO(CH2)12CO2H)

<400> 81

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Glu Xaa

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 82

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (15)..(15)

<223> Lys((гаммаGlu)2-CO(CH2)14CO2H)

<400> 82

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Xaa Leu

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 83

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (15)..(15)

<223> Lys(CO(CH2)16CO2H)

<400> 83

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Xaa Leu

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 84

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (16)..(16)

<223> Lys(CO(CH2)8CO2H)

<400> 84

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Glu Xaa

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 85

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (15)..(15)

<223> Lys((гаммаGlu)2-dpeg-dpeg- гаммаGlu-CO(CH2)18CO2H)

<400> 85

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Tyr Xaa Leu

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 86

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (16)..(16)

<223> Lys(CO(CH2)14CO2H)

<400> 86

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Glu Xaa

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 87

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (15)..(15)

<223> Lys((гаммаGlu)2-CO(CH2)16CO2H)

<400> 87

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Xaa Leu

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 88

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (16)..(16)

<223> Lys(гаммаGlu-CO(CH2)14CO2H)

<400> 88

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Glu Xaa

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 89

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (15)..(15)

<223> Lys(CO(CH2)18CO2H)

<400> 89

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Xaa Leu

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 90

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (16)..(16)

<223> Lys(CO(CH2)6CO2H)

<400> 90

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Glu Xaa

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 91

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (16)..(16)

<223> D-Lys((гаммаGlu)5-CO(CH2)14CH3)

<400> 91

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Glu Xaa

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 92

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (15)..(15)

<223> Lys((гаммаGlu)2-CO(CH2)18CO2H)

<400> 92

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Xaa Leu

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 93

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (16)..(16)

<223> Lys(CO(CH2)16CO2H)

<400> 93

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Glu Xaa

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 94

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (15)..(15)

<223> Lys((гаммаGlu)2-dpeg-dpeg- гаммаGlu-CO(CH2)18CO2H)

<400> 94

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Xaa Leu

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 95

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (15)..(15)

<223> D-Lys(CO(CH2)18CO2H)

<400> 95

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Xaa Leu

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 96

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (15)..(15)

<223> D-Lys((гаммаGlu)2-dpeg-CO(CH2)18CO2H)

<400> 96

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Xaa Leu

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 97

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (15)..(15)

<223> D-Lys((гаммаGlu)2-CO(CH2)18CO2H)

<400> 97

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Xaa Leu

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 98

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (15)..(15)

<223> Lys(dpeg-dpeg- гаммаGlu-CO(CH2)16CO2H)

<400> 98

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Xaa Leu

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 99

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (17)..(17)

<223> Lys(dpeg-dpeg- гаммаGlu-CO(CH2)16CO2H)

<400> 99

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Glu Leu

1 5 10 15

Xaa Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 100

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (15)..(15)

<223> D-Lys((гаммаGlu)2-dpeg- гаммаGlu-CO(CH2)18CO2H)

<400> 100

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Xaa Leu

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 101

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (15)..(15)

<223> D-Lys((гаммаGlu)2-dpeg-dpeg- гаммаGlu-CO(CH2)18CO2H)

<400> 101

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Xaa Leu

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 102

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (16)..(16)

<223> D-Lys(dpeg-dpeg-гаммаGlu-CO(CH2)16CO2H)

<400> 102

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Glu Xaa

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 103

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (16)..(16)

<223> D-Lys((гаммаGlu)2-dpeg-dpeg- гаммаGlu-CO(CH2)18CO2H)

<400> 103

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Glu Xaa

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 104

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (16)..(16)

<223> D-Lys((гаммаGlu)3-CO(CH2)16CO2H)

<400> 104

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Glu Xaa

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 105

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (1)..(1)

<223> Lys(dpeg- гаммаGlu-CO(CH2)16CO2H)

<400> 105

Xaa Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Ser Arg Leu Ala Gln Phe Leu

1 5 10 15

Gln Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 106

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (1)..(1)

<223> Lys(гаммаGlu-CO(CH2)16CO2H)

<400> 106

Xaa Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Ser Arg Leu Ala Gln Phe Leu

1 5 10 15

Gln Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 107

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (13)..(13)

<223> Lys(гаммаGlu-CO(CH2)14CH3)

<400> 107

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Xaa Asn Glu Leu

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 108

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (8)..(8)

<223> Lys(гаммаGlu-CO(CH2)14CH3)

<400> 108

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Xaa Thr Gln Arg Leu Ala Asn Glu Leu

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 109

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (1)..(1)

<223> Lys(гаммаGlu-CO(CH2)16CO2H)

<400> 109

Xaa Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Ser Arg Leu Ala Asn Phe Leu

1 5 10 15

Gln Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 110

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (1)..(1)

<223> Lys(гаммаGlu-CO(CH2)16CO2H)

<400> 110

Xaa Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Ser Arg Leu Ala Asn Tyr Leu

1 5 10 15

Val His Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 111

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<400> 111

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Ser Arg Leu Ala Asn Tyr Leu

1 5 10 15

Val His Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 112

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (1)..(1)

<223> Lys((гаммаGlu)2-dpeg-dpeg- гаммаGlu-CO(CH2)18CO2H)

<400> 112

Xaa Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Glu Leu

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 113

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (1)..(1)

<223> Lys(dpeg-dpeg- гаммаGlu-CO(CH2)16CO2H)

<400> 113

Xaa Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Glu Leu

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 114

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (1)..(1)

<223> Lys((гаммаGlu)2-CO(CH2)18CO2H)

<400> 114

Xaa Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Ser Arg Leu Ala Asn Phe Leu

1 5 10 15

Gln Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 115

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (1)..(1)

<223> Lys(CO(CH2)18CO2H)

<400> 115

Xaa Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Glu Leu

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 116

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (1)..(1)

<223> Lys(гаммаGlu-CO(CH2)18CO2H)

<400> 116

Xaa Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Ser Arg Leu Ala Asn Phe Leu

1 5 10 15

Gln Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 117

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (1)..(1)

<223> Lys((гаммаGlu)2-CO(CH2)10CO2H)

<400> 117

Xaa Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Glu Leu

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 118

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (1)..(1)

<223> Lys((гаммаGlu)2-CO(CH2)6CO2H)

<400> 118

Xaa Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Glu Leu

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 119

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (1)..(1)

<223> Lys(гаммаGlu)-CO(CH2)18CO2H)

<400> 119

Xaa Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Glu Leu

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 120

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (1)..(1)

<223> Lys(CO(CH2)16CO2H)

<400> 120

Xaa Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Glu Leu

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 121

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (12)..(12)

<223> Lys(гаммаGlu)-CO(CH2)14CH3)

<400> 121

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Xaa Ala Asn Glu Leu

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 122

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (16)..(16)

<223> Lys((гаммаGlu)2-dpeg-dpeg- гаммаGlu-CO(CH2)14CH3)

<400> 122

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Glu Xaa

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 123

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (16)..(16)

<223> Lys((гаммаGlu)2-CO(CH2)14CH3)

<400> 123

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Glu Xaa

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 124

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (16)..(16)

<223> D-Lys((гаммаGlu)2-CO(CH2)20CH3)

<400> 124

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Glu Xaa

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 125

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (16)..(16)

<223> Lys(гаммаGlu-CO(CH2)14CH3)

<400> 125

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Glu Xaa

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 126

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (1)..(1)

<223> Lys(dpeg-dpeg- гаммаGlu-CO(CH2)16CO2H)

<400> 126

Xaa Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Ser Arg Leu Ala Asn Phe Leu

1 5 10 15

Gln Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 127

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (16)..(16)

<223> D-Lys

<400> 127

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Phe Xaa

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 128

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<400> 128

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Glu Lys

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 129

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (16)..(16)

<223> D-Lys

<400> 129

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Glu Xaa

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 130

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<400> 130

Lys Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Glu Leu

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 131

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<400> 131

Lys Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Phe Leu

1 5 10 15

Gln Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 132

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (15)..(15)

<223> Aib

<400> 132

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Xaa Leu

1 5 10 15

Val Lys Ser Ser Asn Glu Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 133

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (19)..(19)

<223> Aib

<400> 133

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Phe Leu

1 5 10 15

Val Lys Xaa Ser Asn Glu Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 134

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (16)..(16)

<223> Aib

<400> 134

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Phe Xaa

1 5 10 15

Val Lys Ser Ser Asn Glu Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 135

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (17)..(17)

<223> Aib

<400> 135

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Phe Leu

1 5 10 15

Xaa Lys Ser Ser Asn Glu Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 136

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (16)..(16)

<223> N-MeLeu

<400> 136

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ser Asn Phe Xaa

1 5 10 15

Val Lys Ser Ser Asn Glu Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 137

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (16)..(16)

<223> N-MeLeu

<400> 137

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Phe Xaa

1 5 10 15

Val Lys Ser Ser Asn Glu Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 138

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (14)..(14)

<223> D-Asn

<220>

<221> MOD_RES

<222> (16)..(16)

<223> Lys((гаммаGlu)5-(CO(CH2)14CH3)

<400> 138

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Xaa Glu Xaa

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Gly Thr Pro

35

<210> 139

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (16)..(16)

<223> D-Lys((гаммаGlu)2-(CO(CH2)18CO2H)

<400> 139

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Glu Xaa

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Pro

35

<210> 140

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (1)..(1)

<223> Lys((гаммаGlu)2-(CO(CH2)16CO2H)

<220>

<221> MOD_RES

<222> (14)..(14)

<223> D-Asn

<400> 140

Xaa Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Xaa Glu Leu

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Gly Thr Pro

35

<210> 141

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (1)..(1)

<223> Lys((гаммаGlu)2-(CO(CH2)16CO2H)

<220>

<221> MOD_RES

<222> (14)..(14)

<223> D-Asp

<400> 141

Xaa Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Xaa Glu Leu

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Gly Thr Pro

35

<210> 142

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (1)..(1)

<223> Lys((гаммаGlu)2-(CO(CH2)16CO2H)

<220>

<221> MOD_RES

<222> (14)..(14)

<223> D-Asp

<400> 142

Xaa Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Xaa Glu Leu

1 5 10 15

Arg His Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Gly Thr Pro

35

<210> 143

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (1)..(1)

<223> Lys((гаммаGlu)2-(CO(CH2)14CO2H)

<400> 143

Xaa Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Glu Leu

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 144

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (16)..(16)

<223> D-Lys(ацетил)

<400> 144

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Glu Xaa

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 145

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (16)..(16)

<223> D-Lys(аллилоксикарбонил)

<400> 145

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Glu Xaa

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 146

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (16)..(16)

<223> D-Lys((диметил-2,6-дизоксоциклогекс-1-илиен)этил)

<400> 146

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Glu Xaa

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 147

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (16)..(16)

<223> D-Lys(гаммаGlu)

<400> 147

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Glu Xaa

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 148

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (16)..(16)

<223> D-Lys(гаммаGlu-ацетил)

<400> 148

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Glu Xaa

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 149

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (16)..(16)

<223> D-Lys(гаммаGlu-тритил)

<400> 149

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Glu Xaa

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 150

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (16)..(16)

<223> D-Lys(гаммаGlu-трет-бутил)

<400> 150

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Glu Xaa

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 151

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (16)..(16)

<223> D-Lys(гаммаGlu-гаммаGlu)

<400> 151

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Glu Xaa

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 152

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (16)..(16)

<223> D-Lys(гаммаGlu- гаммаGlu-ацетил)

<400> 152

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Glu Xaa

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 153

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (16)..(16)

<223> D-Lys(гаммаGlu- гаммаGlu-тритил)

<400> 153

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Glu Xaa

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 154

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (16)..(16)

<223> D-Lys(гаммаGlu-гаммаGlu-трет-бутил)

<400> 154

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Glu Xaa

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 155

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<400> 155

Lys Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Ser Arg Leu Ala Asn Phe Leu

1 5 10 15

Gln Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 156

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (1)..(1)

<223> Lys(Fmoc)

<400> 156

Xaa Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Ser Arg Leu Ala Asn Phe Leu

1 5 10 15

Gln Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 157

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (1)..(1)

<223> Lys(гаммаGlu)

<400> 157

Xaa Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Ser Arg Leu Ala Asn Phe Leu

1 5 10 15

Gln Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 158

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (1)..(1)

<223> Lys(гаммаGlu-ацетил)

<400> 158

Xaa Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Ser Arg Leu Ala Asn Phe Leu

1 5 10 15

Gln Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 159

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (1)..(1)

<223> Lys(гаммаGlu-тритил)

<400> 159

Xaa Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Ser Arg Leu Ala Asn Phe Leu

1 5 10 15

Gln Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 160

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (1)..(1)

<223> Lys(гаммаGlu-трет-бутил)

<400> 160

Xaa Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Ser Arg Leu Ala Asn Phe Leu

1 5 10 15

Gln Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 161

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (1)..(1)

<223> Lys(гаммаGlu-гаммаGlu)

<400> 161

Xaa Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Ser Arg Leu Ala Asn Phe Leu

1 5 10 15

Gln Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 162

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (1)..(1)

<223> Lys(гаммаGlu-гаммаGlu-ацетил)

<400> 162

Xaa Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Ser Arg Leu Ala Asn Phe Leu

1 5 10 15

Gln Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 163

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (1)..(1)

<223> Lys(гаммаGlu-гаммаGlu-тритил)

<400> 163

Xaa Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Ser Arg Leu Ala Asn Phe Leu

1 5 10 15

Gln Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 164

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (1)..(1)

<223> Lys(гаммаGlu-гаммаGlu-трте-бутил)

<400> 164

Xaa Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Ser Arg Leu Ala Asn Phe Leu

1 5 10 15

Gln Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 165

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (1)..(1)

<223> Lys(гаммаGlu)

<400> 165

Xaa Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Glu Leu

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 166

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (1)..(1)

<223> Lys(гаммаGlu-гаммаGlu)

<400> 166

Xaa Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Glu Leu

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 167

<400> 167

000

<210> 168

<400> 168

000

<210> 169

<400> 169

000

<210> 170

<400> 170

000

<210> 171

<400> 171

000

<210> 172

<400> 172

000

<210> 173

<400> 173

000

<210> 174

<400> 174

000

<210> 175

<400> 175

000

<210> 176

<400> 176

000

<210> 177

<400> 177

000

<210> 178

<400> 178

000

<210> 179

<400> 179

000

<210> 180

<400> 180

000

<210> 181

<400> 181

000

<210> 182

<400> 182

000

<210> 183

<400> 183

000

<210> 184

<400> 184

000

<210> 185

<400> 185

000

<210> 186

<400> 186

000

<210> 187

<400> 187

000

<210> 188

<400> 188

000

<210> 189

<400> 189

000

<210> 190

<400> 190

000

<210> 191

<400> 191

000

<210> 192

<400> 192

000

<210> 193

<400> 193

000

<210> 194

<400> 194

000

<210> 195

<400> 195

000

<210> 196

<400> 196

000

<210> 197

<400> 197

000

<210> 198

<400> 198

000

<210> 199

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (1)..(1)

<223> /replace=«Lys», или «D-Lys», или «His», или «Ile»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (3)..(3)

<223> /replace=«Ser»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (5)..(5)

<223> /replace=«Ala»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (6)..(6)

<223> /replace=«Ser»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (8)..(8)

<223> /replace=«Lys»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (10)..(10)

<223> /replace=«Ser»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (12)..(12)

<223> /replace=«Lys»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (13)..(13)

<223> /replace=«Ser», или «Glu», или «Lys»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (14)..(14)

<223> /replace=«D-Asn», или «D-Asp», или «Tyr», или «Gln»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (15)..(15)

<223> /replace=«Phe», или «D-Phe», или «Tyr», или «Ile», или «D-Lys», или «Lys»

или «альфа-аминоизомасляная кислота (Aib)»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (16)..(16)

<223> /replace= «D-Lys», или «Leu», или «Aib», или «N-метил лейцин

(N-MeL)» или «D-Leu»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (17)..(17)

<223> /replace=«Val», или «Gln», или «Arg», или «D-Lys», или «Lys», или «Aib»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (18)..(18)

<223> /replace=«His», или «Arg»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (19)..(19)

<223> /replace=«Aib»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (20)..(20)

<223> /replace=«Aib»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (22)..(22)

<223> /replace=«Glu»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (29)..(29)

<223> /replace=«Arg» или «Lys»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (31)..(31)

<223> /replace=«D-Lys», или «Asn», или «His»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (35)..(35)

<223> /replace=«D-Glu», или «Asn», или «Lys», или «Gly», или «Ala», или «Tyr», или «Pro»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (37)..(37)

<223> /replace=«Pro»

<220>

<221> САЙТ

<222> (1).(37)

<223> /note=«Вариантные остатки, приведенные в последовательности, не являются

предпочтительными по сравнению с приведенными в сносках

для вариантных положений»

<400> 199

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Glu Lys

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 200

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (1)..(1)

<223> /replace=«Lys», или «D-Lys», или «His», или «Ile»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (3)..(3)

<223> /replace=«Ser»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (5)..(5)

<223> /replace=«Ala»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (6)..(6)

<223> /replace=«Ser»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (8)..(8)

<223> /replace=«Lys»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (10)..(10)

<223> /replace=«Ser»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (12)..(12)

<223> /replace=«Lys»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (13)..(13)

<223> /replace=«Ser», или «Glu», или «Lys»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (14)..(14)

<223> /replace=«D-Asn», или «D-Asp», или «Tyr», или «Gln»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (15)..(15)

<223> /replace=«Phe», или «D-Phe», или «Tyr», или «Ile», или «D-Lys», или «Lys»

или «альфа-аминоизомасляная кислота (Aib)»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (16)..(16)

<223> /replace= «D-Lys», или «Leu», или «Aib», или «N-метил лейцин

(N-MeL)» или «D-Leu»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (17)..(17)

<223> /replace=«Val», или «Gln», или «Arg», или «D-Lys», или «Lys», или «Aib»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (18)..(18)

<223> /replace=«His», или «Arg»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (19)..(19)

<223> /replace=«Aib»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (20)..(20)

<223> /replace=«Aib»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (22)..(22)

<223> /replace=«Glu»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (29)..(29)

<223> /replace=«Arg» или «Lys»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (31)..(31)

<223> /replace= «D-Lys» или «Asn»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (35)..(35)

<223> /replace= «D-Glu» или «Asn»

<220>

<221> САЙТ

<222> (1).(37)

<223> /note=«Вариантные остатки, приведенные в последовательности, не являются

предпочтительными по сравнению с приведенными в сносках

для вариантных положений»

<400> 200

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Glu Lys

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 201

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (1)..(1)

<223> /replace=«Lys», или «D-Lys», или «His», или «Ile»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (3)..(3)

<223> /replace=«Ser»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (5)..(5)

<223> /replace=«Ala»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (6)..(6)

<223> /replace=«Ser»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (8)..(8)

<223> /replace=«Lys»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (10)..(10)

<223> /replace=«Ser»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (12)..(12)

<223> /replace=«Lys»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (13)..(13)

<223> /replace=«Ser», или «Glu», или «Lys»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (14)..(14)

<223> /replace=«D-Asn», или «D-Asp», или «Tyr», или «Gln»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (15)..(15)

<223> /replace=«Phe», или «D-Phe», или «Tyr», или «Ile», или «D-Lys»,

или «Lys», или «Aib»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (16)..(16)

<223> /replace=«D-Lys», или «Leu», или «Aib», или «N-MeL», или «D-Leu»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (17)..(17)

<223> /replace=«Val», или «Gln», или «Arg», или «D-Lys», или «Lys», или «Aib»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (18)..(18)

<223> /replace=«His», или «Arg»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (19)..(19)

<223> /replace=«Aib»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (20)..(20)

<223> /replace=«Aib»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (22)..(22)

<223> /replace=«Glu»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (29)..(29)

<223> /replace=«Arg» или «Lys»

<220>

<221> САЙТ

<222> (1).(37)

<223> /note=«Вариантные остатки, приведенные в последовательности, не являются

предпочтительными по сравнению с приведенными в сносках

для вариантных положений»

<400> 201

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Glu Lys

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 202

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (1)..(1)

<223> /replace= «D-Lys» или «Lys»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (5)..(5)

<223> /replace=«Ala»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (10)..(10)

<223> /replace=«Ser»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (15)..(15)

<223> /replace=«Phe»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (16)..(16)

<223> /replace=«D-Lys» или «Leu»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (17)..(17)

<223> /replace=«Val» или «Gln»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (18)..(18)

<223> /replace=«His», или «Arg»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (31)..(31)

<223> /replace=«Asn»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (35)..(35)

<223> /replace=«Asn»

<220>

<221> САЙТ

<222> (1).(37)

<223> /note=«Вариантные остатки, приведенные в последовательности, не являются

предпочтительными по сравнению с приведенными в сносках

для вариантных положений»

<400> 202

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Glu Lys

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 203

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (1)..(1)

<223> /replace= «D-Lys» или «Lys»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (5)..(5)

<223> /replace=«Ala»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (10)..(10)

<223> /replace=«Ser»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (15)..(15)

<223> /replace=«Phe»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (16)..(16)

<223> /replace=«D-Lys» или «Leu»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (17)..(17)

<223> /replace=«Val» или «Gln»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (18)..(18)

<223> /replace=«His», или «Arg»

<220>

<221> САЙТ

<222> (1).(37)

<223> /note=«Вариантные остатки, приведенные в последовательности, не являются

предпочтительными по сравнению с приведенными в сносках

для вариантных положений»

<400> 203

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Glu Lys

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 204

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (1)..(1)

<223> /replace= «Lys» или»«D-Lys»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (10)..(10)

<223> /replace=«Ser»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (15)..(15)

<223> /replace=«Phe»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (16)..(16)

<223> /replace= «Lys» или»«D-Lys»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (17)..(17)

<223> /replace=«Val» или «Gln»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (35)..(35)

<223> /replace=«Asn»

<220>

<221> САЙТ

<222> (1).(37)

<223> /note=«Вариантные остатки, приведенные в последовательности, не являются

предпочтительными по сравнению с приведенными в сносках

для вариантных положений»

<400> 204

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Glu Leu

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 205

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (1)..(1)

<223> /replace= «Lys» или»«D-Lys»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (10)..(10)

<223> /replace=«Ser»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (15)..(15)

<223> /replace=«Phe»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (16)..(16)

<223> /replace= «Lys» или»«D-Lys»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (17)..(17)

<223> /replace=«Val» или «Gln»

<220>

<221> САЙТ

<222> (1).(37)

<223> /note=«Вариантные остатки, приведенные в последовательности, не являются

предпочтительными по сравнению с приведенными в сносках

для вариантных положений»

<400> 205

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Glu Leu

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 206

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (15)..(15)

<223> /replace=«Phe»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (16)..(16)

<223> /replace= «Lys» или»«D-Lys»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (17)..(17)

<223> /replace=«Val» или «Gln»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (35)..(35)

<223> /replace=«Asn»

<220>

<221> САЙТ

<222> (1).(37)

<223> /note=«Вариантные остатки, приведенные в последовательности, не являются

предпочтительными по сравнению с приведенными в сносках

для вариантных положений»

<400> 206

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Glu Leu

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 207

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (15)..(15)

<223> /replace=«Phe»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (16)..(16)

<223> /replace= «Lys» или»«D-Lys»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (17)..(17)

<223> /replace=«Val» или «Gln»

<220>

<221> САЙТ

<222> (1).(37)

<223> /note=«Вариантные остатки, приведенные в последовательности, не являются

предпочтительными по сравнению с приведенными в сносках

для вариантных положений»

<400> 207

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Glu Leu

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 208

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (1)..(1)

<223> /replace=«D-Lys»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (10)..(10)

<223> /replace=«Ser»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (15)..(15)

<223> /replace=«Phe»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (16)..(16)

<223> /replace= «Lys» или»«D-Lys»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (17)..(17)

<223> /replace=«Val» или «Gln»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (35)..(35)

<223> /replace=«Asn»

<220>

<221> САЙТ

<222> (1).(37)

<223> /note=«Вариантные остатки, приведенные в последовательности, не являются

предпочтительными по сравнению с приведенными в сносках

для вариантных положений»

<400> 208

Lys Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Glu Leu

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 209

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (1)..(1)

<223> /replace=«D-Lys»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (10)..(10)

<223> /replace=«Ser»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (15)..(15)

<223> /replace=«Phe»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (16)..(16)

<223> /replace= «Lys» или»«D-Lys»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (17)..(17)

<223> /replace=«Val» или «Gln»

<220>

<221> САЙТ

<222> (1).(37)

<223> /note=«Вариантные остатки, приведенные в последовательности, не являются

предпочтительными по сравнению с приведенными в сносках

для вариантных положений»

<400> 209

Lys Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Glu Leu

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 210

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (1)..(1)

<223> /replace=«Lys», или «D-Lys», или «His», или «Ile»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (3)..(3)

<223> /replace=«Ser»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (5)..(5)

<223> /replace=«Ala»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (6)..(6)

<223> /replace=«Ser»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (8)..(8)

<223> /replace=«Lys»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (10)..(10)

<223> /replace=«Ser»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (12)..(12)

<223> /replace=«Lys»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (13)..(13)

<223> /replace=«Ser», или «Glu», или «Lys»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (14)..(14)

<223> /replace=«D-Asn», или «D-Asp», или «Tyr», или «Gln»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (15)..(15)

<223> /replace=«Phe», или «D-Phe», или «Tyr», или «Ile», или «D-Lys», или «Lys»

или «альфа-аминоизомасляная кислота (Aib)»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (16)..(16)

<223> /replace= «D-Lys», или «Leu», или «Aib», или «N-метил лейцин

(N-MeL)» или «D-Leu»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (17)..(17)

<223> /replace=«Val», или «Gln», или «Arg», или «D-Lys», или «Lys», или «Aib»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (18)..(18)

<223> /replace=«His», или «Arg»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (19)..(19)

<223> /replace=«Aib»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (20)..(20)

<223> /replace=«Aib»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (22)..(22)

<223> /replace=«Glu»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (29)..(29)

<223> /replace=«Arg» или «Lys»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (31)..(31)

<223> /replace= «D-Lys» или «Asn»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (35)..(35)

<223> /replace= «D-Glu» или «Asn»

<220>

<221> САЙТ

<222> (1).(37)

<223> /note=«Вариантные остатки, приведенные в последовательности, не являются

предпочтительными по сравнению с приведенными в сносках

для вариантных положений»

<400> 210

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Glu Lys

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 211

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (1)..(1)

<223> /replace= «Lys» или»«D-Lys»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (10)..(10)

<223> /replace=«Ser»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (15)..(15)

<223> /replace=«Phe»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (16)..(16)

<223> /replace= «Lys» или»«D-Lys»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (17)..(17)

<223> /replace=«Val» или «Gln»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (35)..(35)

<223> /replace=«Asn»

<220>

<221> САЙТ

<222> (1).(37)

<223> /note=«Вариантные остатки, приведенные в последовательности, не являются

предпочтительными по сравнению с приведенными в сносках

для вариантных положений»

<400> 211

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Glu Leu

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 212

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (15)..(15)

<223> /replace=«Phe»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (16)..(16)

<223> /replace= «Lys» или»«D-Lys»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (17)..(17)

<223> /replace=«Val» или «Gln»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (35)..(35)

<223> /replace=«Asn»

<220>

<221> САЙТ

<222> (1).(37)

<223> /note=«Вариантные остатки, приведенные в последовательности, не являются

предпочтительными по сравнению с приведенными в сносках

для вариантных положений»

<400> 212

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Glu Leu

1 5 10 15

His Lys Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Lys Val

20 25 30

Gly Ser Glu Thr Tyr

35

<210> 213

<400> 213

000

<210> 214

<400> 214

000

<210> 215

<400> 215

000

<210> 216

<400> 216

000

<210> 217

<400> 217

000

<210> 218

<400> 218

000

<210> 219

<400> 219

000

<210> 220

<400> 220

000

<210> 221

<400> 221

000

<210> 222

<400> 222

000

<210> 223

<400> 223

000

<210> 224

<400> 224

000

<210> 225

<400> 225

000

<210> 226

<400> 226

000

<210> 227

<400> 227

000

<210> 228

<400> 228

000

<210> 229

<400> 229

000

<210> 230

<400> 230

000

<210> 231

<400> 231

000

<210> 232

<400> 232

000

<210> 233

<400> 233

000

<210> 234

<400> 234

000

<210> 235

<400> 235

000

<210> 236

<400> 236

000

<210> 237

<400> 237

000

<210> 238

<400> 238

000

<210> 239

<400> 239

000

<210> 240

<400> 240

000

<210> 241

<400> 241

000

<210> 242

<400> 242

000

<210> 243

<400> 243

000

<210> 244

<400> 244

000

<210> 245

<400> 245

000

<210> 246

<400> 246

000

<210> 247

<400> 247

000

<210> 248

<400> 248

000

<210> 249

<400> 249

000

<210> 250

<400> 250

000

<210> 251

<400> 251

000

<210> 252

<400> 252

000

<210> 253

<400> 253

000

<210> 254

<400> 254

000

<210> 255

<400> 255

000

<210> 256

<400> 256

000

<210> 257

<400> 257

000

<210> 258

<400> 258

000

<210> 259

<400> 259

000

<210> 260

<400> 260

000

<210> 261

<400> 261

000

<210> 262

<400> 262

000

<210> 263

<400> 263

000

<210> 264

<400> 264

000

<210> 265

<400> 265

000

<210> 266

<400> 266

000

<210> 267

<400> 267

000

<210> 268

<400> 268

000

<210> 269

<400> 269

000

<210> 270

<400> 270

000

<210> 271

<400> 271

000

<210> 272

<400> 272

000

<210> 273

<400> 273

000

<210> 274

<400> 274

000

<210> 275

<400> 275

000

<210> 276

<400> 276

000

<210> 277

<400> 277

000

<210> 278

<400> 278

000

<210> 279

<400> 279

000

<210> 280

<400> 280

000

<210> 281

<400> 281

000

<210> 282

<400> 282

000

<210> 283

<400> 283

000

<210> 284

<400> 284

000

<210> 285

<400> 285

000

<210> 286

<400> 286

000

<210> 287

<400> 287

000

<210> 288

<400> 288

000

<210> 289

<400> 289

000

<210> 290

<400> 290

000

<210> 291

<400> 291

000

<210> 292

<400> 292

000

<210> 293

<400> 293

000

<210> 294

<400> 294

000

<210> 295

<400> 295

000

<210> 296

<400> 296

000

<210> 297

<400> 297

000

<210> 298

<400> 298

000

<210> 299

<400> 299

000

<210> 300

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Homo sapiens

<400> 300

Lys Cys Asn Thr Ala Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Phe Leu

1 5 10 15

Val His Ser Ser Asn Asn Phe Gly Ala Ile Leu Ser Ser Thr Asn Val

20 25 30

Gly Ser Asn Thr Tyr

35

<210> 301

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Rattus sp.

<400> 301

Lys Cys Asn Thr Ala Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Phe Leu

1 5 10 15

Val Arg Ser Ser Asn Asn Leu Gly Pro Val Leu Pro Pro Thr Asn Val

20 25 30

Gly Ser Asn Thr Tyr

35

<210> 302

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<400> 302

Lys Cys Asn Thr Ala Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Phe Leu

1 5 10 15

Val His Ser Ser Asn Asn Phe Gly Pro Ile Leu Pro Pro Thr Asn Val

20 25 30

Gly Ser Asn Thr Tyr

35

<210> 303

<211> 32

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид»

<400> 303

Lys Cys Asn Thr Ala Thr Cys Val Leu Gly Arg Leu Ser Gln Glu Leu

1 5 10 15

His Arg Leu Gln Thr Tyr Pro Arg Thr Asn Thr Gly Ser Asn Thr Tyr

20 25 30

<210> 304

<211> 32

<212> БЕЛОК

<213> Homo sapiens

<400> 304

Cys Gly Asn Leu Ser Thr Cys Met Leu Gly Thr Tyr Thr Gln Asp Phe

1 5 10 15

Asn Lys Phe His Thr Phe Pro Gln Thr Ala Ile Gly Val Gly Ala Pro

20 25 30

<210> 305

<211> 32

<212> БЕЛОК

<213> Неизвестная

<220>

<221> источник

<223> /note=«Описание неизвестной:

кальцитонин лосося»

<400> 305

Cys Ser Asn Leu Ser Thr Cys Val Leu Gly Lys Leu Ser Gln Glu Leu

1 5 10 15

His Lys Leu Gln Thr Tyr Pro Arg Thr Asn Thr Gly Ser Gly Thr Pro

20 25 30

<210> 306

<211> 37

<212> БЕЛОК

<213> Неизвестный

<220>

<221> источник

<223> /note=«Описание неизвестного:

пептид, связанный с геном бета-кальцитонина»

<400> 306

Ala Cys Asn Thr Ala Thr Cys Val Thr His Arg Leu Ala Gly Leu Leu

1 5 10 15

Ser Arg Ser Gly Gly Met Val Lys Ser Asn Phe Val Pro Thr Asn Val

20 25 30

Gly Ser Lys Ala Phe

35

<210> 307

<211> 39

<212> БЕЛОК

<213> Неизвестный

<220>

<221> источник

<223> /note=«Описание неизвестного:

последовательность эксенатида»

<400> 307

His Gly Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Ser Lys Gln Met Glu Glu

1 5 10 15

Glu Ala Val Arg Leu Phe Ile Glu Trp Leu Lys Asn Gly Gly Pro Ser

20 25 30

Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser

35

<210> 308

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (1)..(1)

<223> /replace= «D-Lys» или «Lys»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (5)..(5)

<223> /replace=«Ala»

<220>

<221> САЙТ

<222> (1).(7)

<223> /note=«Вариантные остатки, приведенные в последовательности, не являются

предпочтительными по сравнению с приведенными в сносках

для вариантных положений»

<400> 308

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys

1 5

<210> 309

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид»

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (1)..(1)

<223> /replace= «Lys» или»«D-Lys»

<220>

<221> САЙТ

<222> (1).(7)

<223> /note=«Вариантные остатки, приведенные в последовательности, не являются

предпочтительными по сравнению с приведенными в сносках

для вариантных положений»

<400> 309

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys

1 5

<210> 310

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид»

<400> 310

Ser Cys Asn Thr Ser Thr Cys

1 5

<210> 311

<211> 10

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (1).(10)

<223> гаммаGlu

<220>

<221> САЙТ

<222> (1).(10)

<223> /note=«Эта последовательность может охватывать 1-10 остатков»

<400> 311

Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa

1 5 10

<210> 312

<211> 11

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (1).(10)

<223> гаммаGlu

<220>

<221> САЙТ

<222> (1).(10)

<223> /note=«Эта область может охватывать 1-10 остатков»

<400> 312

Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Gly

1 5 10

<210> 313

<211> 4

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (1).(4)

<223> гаммаGlu

<400> 313

Xaa Xaa Xaa Xaa

1

<210> 314

<211> 5

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (1).(5)

<223> гаммаGlu

<400> 314

Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa

1 5

<210> 315

<211> 4

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (1).(3)

<223> гаммаGlu

<400> 315

Xaa Xaa Xaa Gly

1

<210> 316

<211> 11

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид»

<220>

<221> MOD_RES

<222> (2).(11)

<223> гаммаGlu

<220>

<221> САЙТ

<222> (2).(11)

<223> /note=«Эта область может охватывать 1-10 остатков»

<400> 316

Gly Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa

1 5 10

<210> 317

<211> 4

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /note= «Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид»

<400> 317

Glu Glu Glu Glu

1

<210> 318

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (1)..(1)

<223> /replace=«D-Lys»

<220>

<221> САЙТ

<222> (1).(7)

<223> /note=«Вариантные остатки, приведенные в последовательности, не являются

предпочтительными по сравнению с приведенными в сносках

для вариантных положений»

<400> 318

Lys Cys Asn Thr Ser Thr Cys

1 5

<---

Настоящее изобретение относится к области биотехнологии и может быть применимо в медицине. Изобретение раскрывает новые аналоги амилина человека, обладающие рядом преимуществ в сравнении с эндогенным амилином, например увеличенным периодом полувыведения (t_1/2), а также улучшенными растворимостью и термической стабильностью. Раскрытые полипептиды аналога амилина могут быть применимы при лечении метаболических заболеваний или расстройств, таких как диабет 1-го и 2-го типа, и в обеспечении потери массы тела. 8 н. и 12 з.п. ф-лы, 3 ил., 11 табл., 17 пр.

1. Выделенный полипептид, представляющий собой функциональный аналог амилина, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 202:

X₁CNTX₅TCATX₁₀RLANX₁₅X₁₆X₁₇X₁₈SSNNFGPILPPTX₃₁VGSX₃₅TY-(OH/NH₂) (SEQ ID NO: 202), или его фармацевтически приемлемая соль, где

X₁ представляет собой S, k или K;

X₅ представляет собой S;

X₁₀ представляет собой Q или S;

X₁₅ представляет собой E или F;

X₁₆ представляет собой k, K или L;

X₁₇ представляет собой H, V или Q;

X₁₈ представляет собой K;

X₃₁ представляет собой K или N; и

X₃₅ представляет собой E или N;

каждый K независимо представляет собой L-лизин, необязательно ковалентно связанный с липофильным заместителем, необязательно через спейсер;

каждый k независимо представляет собой D-лизин, необязательно ковалентно связанный с липофильным заместителем, необязательно через спейсер;

при этом два остатка цистеина X₁CX₃TX₅X₆C необязательно дополнительно связаны дисульфидным мостиком;

где L-аминокислоты представлены заглавными однобуквенными обозначениями, а D-аминокислоты представлены строчными однобуквенными обозначениями;

при условии, что если X₃₁ представляет собой N, тогда X₃₅ представляет собой E, или если X₃₅ представляет собой N, тогда X₃₁ представляет собой K.

2. Выделенный полипептид по п. 1, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 204: X₁CNTSTCATX₁₀RLANX₁₅X₁₆X₁₇KSSNNFGPILPPTKVGSX₃₅TY-(OH/NH₂) (SEQ ID NO: 204), или его фармацевтически приемлемая соль, где

X₁ представляет собой S, K или k;

X₁₀ представляет собой Q или S;

X₁₅ представляет собой E или F;

X₁₆ представляет собой L, K или k;

X₁₇ представляет собой H, V или Q; и

X₃₅ представляет собой E или N;

каждый K независимо представляет собой L-лизин, необязательно ковалентно связанный с липофильным заместителем, необязательно через спейсер;

каждый k независимо представляет собой D-лизин, необязательно ковалентно связанный с липофильным заместителем, необязательно через спейсер; и

при этом два остатка цистеина X₁CNTSTC (SEQ ID NO: 309) необязательно дополнительно связаны дисульфидным мостиком.

3. Выделенный полипептид по п. 1, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 206: SCNTSTCATQRLANX₁₅X₁₆X₁₇KSSNNFGPILPPTKVGSX₃₅TY-(OH/NH₂) (SEQ ID NO: 206), или его фармацевтически приемлемая соль, где

X₁₅ представляет собой E или F;

X₁₆ представляет собой L, K или k;

X₁₇ представляет собой H, V или Q; и

X₃₅ представляет собой E или N;

каждый K независимо представляет собой L-лизин, необязательно ковалентно связанный с липофильным заместителем, необязательно через спейсер;

каждый k независимо представляет собой D-лизин, необязательно ковалентно связанный с липофильным заместителем, необязательно через спейсер; и

при этом два остатка цистеина SCNTSTC (SEQ ID NO: 310) необязательно дополнительно связаны дисульфидным мостиком.

4. Выделенный полипептид по п. 1, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 209: X₁CNTSTCATX₁₀RLANX₁₅X₁₆X₁₇KSSNNFGPILPPTKVGSETY-(OH/NH₂) (SEQ ID NO: 209), или его фармацевтически приемлемая соль, где

X₁ представляет собой K или k;

X₁₀ представляет собой Q или S;

X₁₅ представляет собой E или F;

X₁₆ представляет собой L, K или k; и

X₁₇ представляет собой H, V или Q;

каждый K независимо представляет собой L-лизин, необязательно ковалентно связанный с липофильным заместителем, необязательно через спейсер;

каждый k независимо представляет собой D-лизин, необязательно ковалентно связанный с липофильным заместителем, необязательно через спейсер; и

при этом два остатка цистеина X₁CNTSTC (SEQ ID NO: 318) необязательно дополнительно связаны дисульфидным мостиком.

5. Выделенный полипептид, представляющий собой функциональный аналог амилина, содержащий аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 1-143, или его фармацевтически приемлемая соль.

6. Выделенный полипептид по п. 5, содержащий аминокислотную последовательность:

SC*NTSTC*ATQRLANEk*((γGlu)₂CO(CH₂)₁₄CH₃)HKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH₂ (SEQ ID NO: 27), или его фармацевтически приемлемая соль,

где k* представляет собой D-лизин, ковалентно связанный с (γGlu)₂CO(CH₂)₁₄CH₃; и

два цистеиновых остатка, обозначенных C*, в положениях 2 и 7 дополнительно связаны дисульфидным мостиком.

7. Выделенный полипептид по п. 5, содержащий аминокислотную последовательность:

SC*NTSTC*ATQRLANELHKSSNNFGPILPPTKVGSETY-(NH₂) (SEQ ID NO: 57), или его фармацевтически приемлемая соль,

где два цистеиновых остатка, обозначенных C*, в положениях 2 и 7 дополнительно связаны дисульфидным мостиком.

8. Выделенный полипептид по п. 5, содержащий аминокислотную последовательность:

K*((γGlu)₂(CO(CH₂)₁₈CO₂H))C*NTSTC*ATQRLANELHKSSNNFGPILPPTKVGSETY-(NH₂) (SEQ ID NO: 64), или его фармацевтически приемлемая соль,

где K* представляет собой L-лизин, ковалентно связанный с (γGlu)₂(CO(CH₂)₁₈CO₂H); и

два цистеиновых остатка, обозначенные C*, в положениях 2 и 7 дополнительно связаны дисульфидным мостиком.

9. Выделенный полипептид по п. 5, содержащий аминокислотную последовательность:

K*((γGlu)₂(CO(CH₂)₁₆CO₂H))C*NTSTC*ATQRLANELHKSSNNFGPILPPTKVGSETY-(NH₂) (SEQ ID NO: 65), или его фармацевтически приемлемая соль,

где K* представляет собой L-лизин, ковалентно связанный с (γGlu)₂(CO(CH₂)₁₆CO₂H); и

два цистеиновых остатка, обозначенные C*, в положениях 2 и 7 дополнительно связаны дисульфидным мостиком.

10. Выделенный полипептид по п. 5, содержащий аминокислотную последовательность:

K*(γGlu-CO(CH₂)₁₆CO₂H)C*NTSTC*ATSRLANFLQKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH₂ (SEQ ID NO: 109), или его фармацевтически приемлемая соль,

где K* представляет собой L-лизин, ковалентно связанный с γGlu-CO(CH₂)₁₆CO₂H; и

два цистеиновых остатка, обозначенные C*, в положениях 2 и 7 дополнительно связаны дисульфидным мостиком.

11. Выделенный полипептид по п. 5, содержащий аминокислотную последовательность:

KC*NTSTC*ATQRLANELHKSSNNFGPILPPTKVGSETY-(NH₂) (SEQ ID NO: 130), или его фармацевтически приемлемая соль,

где два цистеиновых остатка, обозначенные C*, в положениях 2 и 7 дополнительно связаны дисульфидным мостиком.

12. Выделенный полипептид по п. 5, содержащий аминокислотную последовательность:

KC*NTSTC*ATQRLANFLQKSSNNFGPILPPTKVGSETY-(NH₂) (SEQ ID NO: 131), или его фармацевтически приемлемая соль,

где два цистеиновых остатка, обозначенные C*, в положениях 2 и 7 дополнительно связаны дисульфидным мостиком.

13. Выделенный полипептид по любому из пп. 1-4 или его фармацевтически приемлемая соль, содержащие липофильный заместитель и необязательно содержащий спейсер.

14. Выделенный полипептид по п. 13, или его фармацевтически приемлемая соль, содержащие липофильный заместитель и спейсер формулы VI:

-(Y1)_n1-(V)_r-(Y2)_n2-CO-(CH₂)_m-Z

Формула VI,

или липофильный заместитель и спейсер формулы III:

-(γGlu)_n-CO-(CH₂)_m-Z

("(γGlu)_n" обозначенной как SEQ ID NO: 311)

Формула III,

где

Z представляет собой -CH₃ или -CO₂H;

m равно от 4 до 24;

Y1 выбран из группы, состоящей из γGlu, Asp и Gly;

Y2 выбран из группы, состоящей из γGlu, Asp и Gly;

V представляет собой -[COCH₂(O(CH₂)₂)_tOCH₂NH]-, и t равно от 1 до 8;

r равно от 1 до 8;

n равно от 1 до 10;

n1 равно от 0 до 10; и

n2 равно от 0 до 10.

15. Фармацевтическая композиция для лечения метаболического расстройства, выбранного из группы, состоящей из диабета 1-го типа, диабета 2-го типа и ожирения у субъекта-человека, содержащая эффективное количество выделенного полипептида по любому из пп. 1-14 или его фармацевтически приемлемую соль.

16. Осмотическое устройство доставки для введения подкожно или субдермально фармацевтической композиции по п. 15, где указанное осмотическое устройство доставки содержит:

непроницаемый резервуар, содержащий внутреннюю и внешнюю поверхности и первый и второй открытые концы;

полупроницаемую мембрану, герметично прикрепленную на первом открытом конце резервуара;

осмотический двигатель, расположенный внутри резервуара и прилегающий к полупроницаемой мембране;

поршень, примыкающий к осмотическому двигателю, в котором поршень образует подвижное уплотнение с внутренней поверхностью резервуара, поршень делит резервуар на первую камеру и вторую камеру, причем первая камера содержит осмотический двигатель;

лекарственный состав или состав в виде суспензии, содержащий выделенный полипептид или фармацевтическую композицию, при этом вторая камера содержит лекарственное средство или состав в виде суспензии, и лекарственное средство или состав в виде суспензии находятся в жидкой форме;

и замедлитель диффузии, вставленный во второй открытый конец резервуара, причем замедлитель диффузии примыкает к составу в виде суспензии.

17. Способ лечения ожирения у субъекта-человека, включающий введение указанному субъекту выделенного полипептида по любому из пп. 1-14 или его фармацевтически приемлемой соли, фармацевтической композиции по п. 15 или осмотического устройства по п. 16.

18. Способ лечения диабета 1-го или 2-го типа у субъекта-человека, включающий введение субъекту выделенного полипептида по любому из пп. 1-14 или его фармацевтически приемлемой соли, фармацевтической композиции по п. 15 или осмотического устройства по п. 16.

19. Фармацевтическая композиция для обеспечения потери массы тела или подавления аппетита у субъекта-человека, содержащая эффективное количество выделенного полипептида по любому из пп. 1-14 или его фармацевтически приемлемой соли.

20. Способ обеспечения потери массы тела или подавления аппетита у субъекта-человека, включающий введение субъекту выделенного полипептида по любому из пп. 1-14, или его фармацевтически приемлемой соли, или фармацевтической композиции по п. 19.

название	год	авторы	номер документа
Фармацевтическая композиция, содержащая инсулин и глюкагон	2019	Ким Чон Гук Ли Чон Сок Дон Чжу Ли А Рам	RU2823246C2
КОНСТРУКЦИИ, ИМЕЮЩИЕ SIRP-АЛЬФА ДОМЕН ИЛИ ЕГО ВАРИАНТ	2016	Понз Хауме Деминг Лаура Гудман Кори Сим Банг Джанет Каудер Стивен Эллиот Вань Хун Ко Трэйси Чиа-Чиэнь	RU2740672C2
СКОНСТРУИРОВАННЫЕ PH-ЗАВИСИМЫЕ АНТИТЕЛА К CD3, А ТАКЖЕ СПОСОБЫ ИХ ПОЛУЧЕНИЯ И ПРИМЕНЕНИЯ	2020	Геогеган, Джеймс Принц, Бьянка Пейхал, Роберт	RU2832079C2
ПЕПТИДНЫЕ ИНГИБИТОРЫ РЕЦЕПТОРА ИНТЕРЛЕЙКИНА-23 ДЛЯ ПЕРОРАЛЬНОГО ПРИЕМА И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ КИШЕЧНИКА	2015	Борн Грегори Бхандари Ашок Чэн Сяоли Фредерик Брайан Трой Чжан Цзе Пател Динеш В. Лю Дэвид	RU2736637C2
Терапевтическое применение глюкагона и включающей его комбинации	2019	Ким Чон Гук Пак Юн Джин Чой Ин Юн Ли Сан Дон Ли Чон Сок	RU2838895C2
МУЛЬТИРЕЦЕПТОРНЫЙ АГОНИСТ И ЕГО МЕДИЦИНСКОЕ ПРИМЕНЕНИЕ	2020	У Фанчжоу Ван Лэй Лю Сяо У Жань Хуа Хайцин Бао Жуди Ван Сяолэй	RU2816492C2
ПЕПТИДНЫЕ АНТАГОНИСТЫ ПЕПТИДНЫХ ГОРМОНОВ ИЗ СЕМЕЙСТВА КАЛЬЦИТОНИНА (CGRP) И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ	2017	Соарес Кристофер Дж.	RU2742826C2
С5-связующие полипептиды	2014	Нордлинг Эрик Нильссон Иоаким Стрёмберг Патрик	RU2714156C2
АНТИТЕЛА, КОТОРЫЕ СВЯЗЫВАЮТ ОПУХОЛЕВУЮ ТКАНЬ, ДЛЯ ДИАГНОСТИКИ И ЛЕЧЕНИЯ	2020	Дефалко, Джефф Эмерлинг, Дэниэл Эрик Финн, Джессика Гринберг, Норман Майкл Хуан, Вера Липпоу, Шон М. Лю, Фэнлин Мэннинг-Бог, Эми Робинсон, Уильям Х. Шольц, Александер Серафини, Тито Тань, Янн Чун Вад, Никхил Фолькмут, Уэйн	RU2806915C2
АНТИТЕЛА К РЕЦЕПТОРУ-1 НАТРИЙУРЕТИЧЕСКОГО ПЕПТИДА И СПОСОБЫ ИХ ПРИМЕНЕНИЯ	2020	Динер, Джон Луис Гадтке, Ларс Хартлепп, Феликс Ху, Тяньцэнь Ладетцки-Бес, Катрин Романовски, Майкл Руссо, Чезаре Вецлер, Ксения Се, Сяолин	RU2827871C2

WO 2010046357 A1, 29.04.2010
WO 2012162547 A2, 29.11.2012
BOWER R.L
et al.: "Amylin structure-function relationships and receptor pharmacology: implications for amylin mimetic drug development", British Journal of Pharmacology, 2016, v
Джино-прядильная машина	1922	Шиварев В.В.	SU173A1
KOWALCZYK R
et al.: "Convergent chemoenzymatic synthesis of a library of glycosylated

ПОЛИПЕПТИДЫ АНАЛОГА АМИЛИНА ЧЕЛОВЕКА И СПОСОБЫ ИХ ПРИМЕНЕНИЯ Российский патент 2025 года по МПК C07K14/575 A61K38/22

Описание патента на изобретение RU2839688C2

Похожие патенты RU2839688C2

Иллюстрации к изобретению RU 2 839 688 C2

Реферат патента 2025 года ПОЛИПЕПТИДЫ АНАЛОГА АМИЛИНА ЧЕЛОВЕКА И СПОСОБЫ ИХ ПРИМЕНЕНИЯ

Формула изобретения RU 2 839 688 C2

Документы, цитированные в отчете о поиске Патент 2025 года RU2839688C2

RU 2 839 688 C2