Изобретение относится к экспериментальной медицине, и может быть использовано для оптимизации схем лечения меланомы В16 у лабораторных животных, а именно для повышения выживаемости и уменьшения объема опухоли.
Так как злокачественный опухолевый процесс, оперативное вмешательство и развивающиеся в послеоперационном периоде осложнения приводят к значительной иммуносупрессии, одним из направлений, повышающих эффективность этиопатогенетической терапии в настоящее время является использование иммунотропных препаратов и разработка адекватных методов направленной иммунокоррекции в комплексной терапии.
Иммунотерапия представляет собой перспективный метод лечения злокачественных новообразований. В последние годы активно развивается иммунотерапия опухолей, направленная на ингибирование опухолевого роста и стимуляцию противоопухолевого иммунного ответа организма. Непосредственным влиянием на иммунную систему обладает иммуномодулятор Галавит, активное вещество - аминодигидрофталазиндион натрия (химическая формула - 5-амино-1,2,3,4-тетрагидрофталазин-1,4-диона натриевая соль).
Препарат Галавит представляет собой натриевую соль аминофталазина. Показано, что Галавит воздействует на клетки моноцитарно-макрофагального ряда и увеличивает функциональную активность макрофагов [Иммуномодулирующие и противовоспалительные свойства Галавита // Галавит. Клиническое использование и механизмы действия / Под ред член-корр РАМН Подколзина А.А., Гришаевой Т.И. - М.: Внешторгиздат, 2002. - С. 6-14].
Получены данные, характеризующие Галавит как потенциальный ингибитор метастазирования с патогенетической направленностью действия [Киселев С.М., Лабурдова Е.В., Козлов А.М. Влияние препарата Галавит на инвазивную активность опухолевых клеток // Российский биотерапевтический журнал. 2006. №3., С. 61-65].
Принимая во внимание способность клеток моноцитарно-макрофагального ряда и их продуктов играть важную роль в противоопухолевом иммунном ответе, было изучено действие Галавита на опухолевый рост и метастазирование мышиной меланомы В16, а также на продолжительность жизни животных-опухоленосителей [Хохлов А.П., Калюжин О.В., Абидов М.Т. Влияние Галавита на рост и метастазирование мышиной меланомы В 16 // Галавит в эксперименте и клинике. - М.:1998. - С. 32.].
Интересные данные получены in vivo при изучении антиметастатической активности препарата. При введении 50 мкг Галавита 1 раз в 3 дня показано достоверное (р <0,05) снижение на 44% количества легочных метастазов на 28-ой день эксперимента [Коробкова Л.И., Вельшер Л.З., Германов А.Б., Гришина Т.И., Станулис А.И., Гене Г.П., Щепеляев Д.О., и Израилов Р.Е. // Роль иммуномодулятора Галавит в онкологической и хирургической практике" Российский биотерапевтический журнал, Т. 3, № 3, 2004, С. 87-92.].
К недостаткам очевидно можно отнести тот факт, что не было выявлено статистически значимых различий с контролем.
Наиболее близким к данному изобретению является способ снижения метастазирования меланомы В-16 (RU 2308096 C2, 10.10.2007г.) Для этого вводят инъекционный водный раствор натриевой соли 5-амино-1,2,3,4-тетрагидрофталазин-1,4-диона внутрибрюшинно в дозе 40 мг соли/кг мыши один раз в сутки в течение 5 дней.
Недостатком данной работы является недостаточная информативность терапии. Не были выявлены результаты степени угнетения роста узла меланомы и продолжительности жизни мышей-опухоленосителей, что является важным фактором успешности лечения.
Задачей данного изобретения является разработка нового эффективного способа для увеличения продолжительности жизни и угнетения роста первичного узла меланомы мышей-опухоленосителей.
Техническим результатом изобретения является расширение арсенала средств для подавления роста злокачественных опухолей и повышения длительности жизни мышей-опухоленосителей путем введения аминодигидрофталазиндион натрия.
Указанный технический результат при осуществлении изобретения достигается за счет того, что также как и в известном способе, животным вводят внутрибрюшинно инъекционный водный раствор аминодигидрофталазиндион натрия.
Особенностью заявляемого способа является то, что препарат вводят через 7 суток после трансплантации опухоли в дозе 5 мг/мышь 2 раза в неделю общим курсом 10 инъекций.
Сущность изобретения заключается в противоопухолевой активности внутрибрюшинного применения соединения аминодигидрофталазиндион натрия в эксперименте на мышах с трансплантированной возле позвоночника подкожно меланомой В16.
Изобретение поясняется подробным описанием, экспериментальными данными, таблицами и иллюстрацией, на которой изображено:
Фиг. 1 - диаграмма 100% выживаемости мышей в III группе при отсроченной терапии Галавитом.
Изобретение осуществляют следующим способом.
В эксперименте использованы мыши линии CBAxC57BL/6 (F1), которые содержались в стандартных пластиковых клетках на стандартном пищевом рационе. Все манипуляции с мышами выполняли в соответствии с требованиями нормативно-правовых актов о порядке экспериментальной работы и гуманном отношении к животным [Euroguide on the accommodation and care of animals used for experimental and other scientific purposes. London: FELASA, 2007]. Ex vivo экспансированные клетки меланомы В16 инокулировали мышам около позвоночника на уровне бедра в количестве 106 кл/мышь в 100мкл физиологического раствора.
Через 7 суток после трансплантации опухоли, лабораторным животным для лечения меланомы В16, внутрибрюшинно вводят Галавит (соединение аминодигидрофталазиндион натрия) в дозе 5 мг/мышь 2 раза в неделю общим курсом 10 инъекций.
Экспериментальные данные, подтверждающие эффективность лечения меланомы В16.
Были сформированы следующие 3 группы по 10 мышей в каждой:
Группа 1. Контроль (подкожная трансплантация клеток меланомы В16).
Группа 2. Сразу после трансплантации опухоли животным внутрибрюшинно вводили Галавит в дозе 5мг/мышь два раза в неделю, всего 10 инъекций.
Группа 3. Через 7 суток после трансплантации опухоли животным внутрибрюшинно вводили Галавит в дозе 5мг/мышь два раза в неделю, всего 10 инъекций
Оценивали формирование опухолевого узла, интенсивность его роста (объем опухоли) на 10-90 сутки, выживаемость на 10-90 сутки и развитие отдаленных метастазов на фоне иммунотерапии препаратом Галавит. Результаты оценивали по χ2 (хи-квадрат)-критерию, а достоверность различий оценивали по t-критерию. Различия значений считали достоверными при p<0,05.
Установлено, что в группе контроля с 60-х по 90-е сутки наблюдали постепенное увеличение смертности мышей, 90-суточная выживаемость составила 70%. Во II группе 90-суточная выживаемость составила 30%, а в III группе при отсроченной терапии Галавитом наблюдали 100% выживаемость мышей (Фиг. 1).
В группе контроля опухолевые узлы начинали явно выявляться с 50-х суток. Во II группе при терапии Галавитом сразу с момента прививки опухолевых клеток были выявлены наиболее высокие темпы роста опухоли с 40 по 80 сутки. В III группе темпы роста опухоли при отсроченной терапии Галавитом были значительно ниже по сравнению с I и II группами (Таблица 1).
Темпы роста опухоли меланомы В16 лабораторных животных под влиянием соединения аминодигидрофталазиндион натрия
(I группа)
40
97
233
384
(II группа)
253
585
824
(III группа)
14
29
81
Влияние аминодигидрофталазиндиона натрия на подавление роста опухоли (III группа) оценивали путем статистического сравнения объема опухолевых узлов в контрольной и подопытной группах при разных сроках наблюдения, по длительности задержки роста опухоли и индексу торможения роста (ТРО), рассчитанному по следующей формуле:
,
где Vк - средний объем опухолевых узлов в контрольной группе и Vэ - средний объем опухолевых узлов в экспериментальной группе. Данные приведены в таблице 2.
Влияние аминодигидрофталазиндиона натрия на усиление роста опухоли (II группа) оценивали с применением индекса роста опухоли (ИР), рассчитанного по следующей формуле:
,
где: Vк - средний объем опухолевых узлов в контрольной группе и Vэ - средний объем опухолевых узлов в экспериментальной группе. Данные также приведены в таблице 2.
после перевивки
(II группа)
(III группа)
При вскрытии животных на 90 сутки в контроле отмечено, что у трех из пяти выживших мышей при визуальном осмотре органов грудной и брюшной полостей были выявлены множественные метастатические узлы разных размеров. У 2-х мышей локализация метастазов у корня легких и в средостении, а у одной мышки - опухолевый узел с локализацией в районе мочевого пузыря. Во II группе при терапии галавитом сразу с момента прививки опухолевых клеток при вскрытии оставшихся в живых 3 мышей были выявлены метастатические узлы во внутренних органах грудной и брюшной полостях. При вскрытии в III группе лишь у одной из десяти выживших были метастазы различного размера в легких и средостении.
Проведенные исследования показали, что именно отсроченная на неделю (III группа) с момента прививки опухоли меланомы В 16 терапия аминодигидрофталазиндионом натрия в дозе 5 мг/мышь дважды в неделю (10 инъекций) оказала положительное влияние, значительно повышая показатели выживаемости и подавляя вероятность прививки опухоли на месте их трансплантации, а также развитие отдаленных метастазов. В то время как терапия аминодигидрофталазиндионом натрия сразу после прививки (II группа) дала отрицательную динамику, превосходящую по смертности и метастазированию даже контроль. Это связано вероятно с тем, что мгновенная терапия препаратом усилила действию опухолевых клеток, подстегнув их к росту.
Использование заявляемого способа позволит повысить выживаемость и уменьшить объем опухоли при лечении меланомы В16 у лабораторных животных в эксперименте.
название | год | авторы | номер документа |
---|---|---|---|
СПОСОБ УГНЕТЕНИЯ РОСТА МЕЛАНОМЫ У МЫШЕЙ-ОПУХОЛЕНОСИТЕЛЕЙ | 2023 |
|
RU2813701C2 |
СПОСОБ СНИЖЕНИЯ МЕТАСТАЗИРОВАНИЯ МЕЛАНОМЫ В-16 | 2005 |
|
RU2308096C2 |
Фармацевтическая композиция на основе соединения палладия | 2015 |
|
RU2613305C2 |
СПОСОБ СНИЖЕНИЯ МЕТАСТАЗИРОВАНИЯ КАРЦИНОМЫ ЛЕГКОГО ЛЬЮИС | 2005 |
|
RU2308097C2 |
Способ лечения меланомы in vivo | 2023 |
|
RU2824428C2 |
СПОСОБ ФОТОДИНАМИЧЕСКОЙ ТЕРАПИИ ПЕРЕВИВНОЙ ЭКТОДЕРМАЛЬНОЙ ОПУХОЛИ МЕЛАНОМЫ B16 МЫШЕЙ | 2020 |
|
RU2724867C2 |
ИНГИБИТОР АНГИОГЕНЕЗА, АНТИАНГИОГЕННАЯ ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ НА ЕГО ОСНОВЕ И СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ ЗЛОКАЧЕСТВЕННЫХ НОВООБРАЗОВАНИЙ | 2005 |
|
RU2287341C1 |
Способ образования опухолевых узлов меланомы в организме экспериментальных животных | 2022 |
|
RU2796892C1 |
СПОСОБ ПОТЕНЦИРОВАНИЯ АКТИВНОСТИ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫХ ЦИТОСТАТИЧЕСКИХ ПРЕПАРАТОВ | 2017 |
|
RU2714140C2 |
СРЕДСТВО С ПРОТИВООПУХОЛЕВОЙ И АНТИМЕТАСТАТИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТЬЮ, ПРОТИВОВОСПАЛИТЕЛЬНЫМ И ПРОТИВОАЛЛЕРГЕННЫМ ДЕЙСТВИЕМ | 2018 |
|
RU2686672C1 |
Изобретение относится к экспериментальной медицине и может быть использовано для оптимизации схем лечения меланомы В16 у лабораторных животных. Для этого соединение аминодигидрофталазиндион натрия в дозе 5 мг/мышь вводят дважды в неделю внутрибрюшинно через неделю после прививки опухоли меланомы В16 общим курсом 10 инъекций. Изобретение обеспечивает повышение выживаемости и уменьшение объема опухоли при лечении меланомы В16 у лабораторных животных в эксперименте. 1 ил., 2 табл.
Способ подавления роста меланомы В16 у лабораторных животных, включающий внутрибрюшинное введение инъекционного водного раствора аминодигидрофталазиндион натрия, отличающийся тем, что препарат вводят через 7 суток после трансплантации опухоли в дозе 5 мг/мышь 2 раза в неделю общим курсом 10 инъекций.
СПОСОБ СНИЖЕНИЯ МЕТАСТАЗИРОВАНИЯ МЕЛАНОМЫ В-16 | 2005 |
|
RU2308096C2 |
СПОСОБ ПОДАВЛЕНИЯ ОПУХОЛЕВОГО РОСТА | 2012 |
|
RU2491930C1 |
ПЫЛЕВ Л.Н | |||
и др | |||
ТОРМОЗЯЩЕЕ ДЕЙСТВИЕ ПРЕПАРАТА "ГАЛАВИТ™" НА РОСТ ПЕРЕВИВАЕМОЙ МЕЗОТЕЛИОМЫ ПЛЕВРЫ У КРЫС WISTAR / РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ, 2010, т.9, N 4, стр | |||
Ударно-долбежная врубовая машина | 1921 |
|
SU115A1 |
КИСЕЛЕВ С.М | |||
и др | |||
Влияние препарата Галавит на инвазивную активность опухолевых клеток / Биотерапия, 2006, т |
Авторы
Даты
2022-11-24—Публикация
2022-04-14—Подача