Изобретение относится к области органической химии, а именно к новому биологически активному индивидуальному соединению класса спиро[пиррол-оксадиазолов], а именно к метил 9-бензоил-6-оксо-1,3,7-трифенил-4-окса-1,2,7-триазаспиро[4.4]нон-2,8-диен-8-карбоксилату (1) формулы:
обладающему противомикробной активностью, что позволяет предположить его использование в качестве исходных продуктов для синтеза новых гетероциклических систем, в фармакологии и в медицине в качестве лекарственного средства с противомикробным эффектом.
Известны структурные аналоги заявляемого соединения - спиро[индолин-3,2'-[1,3,4]оксадиазолы] (2) [Discovery of spirooxadiazoline oxindoles with dual-stage antimalarial activity /Е. A. Lopes et al. // European Journal of Medicinal Chemistry. - 2022. - V. 236. - P. 114324] общей формулы:
R1=H, Cl, Br; R2=t-Bu, Ph, C6H4-Cl-4, C6H4-Cl-3, C6H4-OMe; R3=Ph, C6H4-Cl-4, C6H4-Cl-3, C6H4-Cl-2.
Эталоном сравнения противомикробной эффективности выбран антибактериальный препарат диоксидин [Падейская Е.Н. Антибактериальный препарат диоксидин: особенности биологического действия и значение в терапии различных форм гнойной инфекции // Инфекции и антимикробная терапия. - 2001. - №. 5. - С.105-155], который широко применяется в лечебной практике и является аналогом по действию.
Задачей изобретения является поиск в ряду производных спиро[пиррол-оксадиазолов] веществ с противомикробным действием и расширение арсенала средств воздействия на живой организм.
Поставленная задача достигается получением метил 9-бензоил-6-оксо-1,3,7-трифенил-4-окса-1,2,7-триазаспиро[4.4]нон-2,8-диен-8-карбоксилата, который обладает противомикробной активностью.
Заявляемое соединение синтезируют путем взаимодействия 4-бензоил-5-метоксикарбонил-1-фенил-1H-пиррол-2,3-дио на (3) N-фенилбензогидразоноил хлорида (4) в присутствии 1 эквивалента Et3N в среде растворителя с последующим выделением целевого продукта, по следующей схеме:
Процесс ведут при комнатной температуре, а в качестве растворителя используют безводный ацетонитрил либо другие инертные апротонные растворители.
Изобретение иллюстрируется следующими примерами.
Пример 1. Получение метил 9-бензоил-6-оксо-1,3,7-трифенил-4-окса-1,2,7-триазаспиро[4.4]нон-2,8-диен-8-карбоксилата (1).
К раствору 1.0 ммоль 4-бензоил-5-метоксикарбонил-1-фенил-1Н-пиррол-2,3-диона (3) в 10 мл безводного ацетонитрила добавляли 1.0 ммоль N-фенилбензогидразоноил хлорида (4) и 1.0 ммоль Et3N. Реакционную массу выдерживали при комнатной температуре в течение 24 ч. Растворитель упаривали, образовавшийся осадок отфильтровывали и перекристаллизовывали из этилового спирта. Выход 46%, т.пл. 185-187°С.
Соединение (1) C32H23N3O5.
Найдено, %: С 72.71; Н 4.23; N 7.82.
Вычислено, %: С 72.58; Н 4.38; N 7.94.
Соединение (1) - красное кристаллическое вещество, легкорастворимое в ДМСО, ДМФА, хлороформе, дихлорметане, трудно растворимое в ацетоне, спиртах, нерастворимое в воде и алканах. Устойчиво при хранении в обычных условиях.
ИК спектр (в вазелиновом масле), v, см-1: 1766, 1742, 1644, 1639, 1619.
Спектр 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ, м.д.: 7.81 - 7.76 м (2Н, Наром), 7.54 -7.41 м (7Н, Наром), 7.41 - 7.35 м (2Н, Наром), 7.35 - 7.26 м (6Н, Наром), 7.05 - 7.00 м (2Н, Наром), 6.99 - 6.92 м (1Н, Наром), 3.07 с (3Н, ОСН3). Спектр 13С ЯМР (101 МГц, CDCl3) δ, м.д.: 188.36, 170.12, 158.69, 151.80, 146.29, 141.50, 137.77, 132.83, 132.74, 131.13, 129.54 (2С), 129.43 (2С), 129.13, 128.92 (2С), 128.41 (2С), 127.32 (2С), 126.33 (2С), 126.03 (2С), 123.73, 122.29, 115.89, 114.99 (1С), 96.76, 52.84.
Пример 2. Фармакологическое исследование метил 9-бензоил-6-оксо-1,3,7-трифенил-4-окса-1,2,7-триазаспиро[4.4]нон-2,8-диен-8-карбоксилата (1) на наличие противомикробной активности.
Противомикробные свойства химического вещества изучали на 2-х коллекционных условно-патогенных штаммах микроорганизмов: Staphylococcus aureus (штамм 906) и Escherichia coli (штамм 1257).
Противомикробное действие выявляли методом двукратных серийных разведений в соответствии с методическими указаниями по изучению противомикробной активности препаратов [Хабриев Р.У. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. - М.: Изд-во Медицина, 2005. - 832 с]. Готовили исходные разведения микроорганизмов в физиологическом растворе из суточной агаровой культуры по оптическому стандарту мутности (ОСО) на 5 ME с использованием денситометра. После ряда разведений конечная концентрация клеток в опыте составляла 2.5×105 клеток/мл. В лунках стерильного 96 луночного плоскодонного микропланшета готовили два параллельных ряда двукратных серийных разведений химических соединений в бульоне РПБ. В каждой лунке содержалось 150 мкл определенной концентрации испытуемого вещества и 150 мкл инокулята культуры. В последних рядах содержалась питательная среда и культура в равных объемах (контроль). Максимально испытанная концентрация соответствовала 1000.0 мкг/мл, минимальная - 2.0 мкг/мл.
Микропланшет помещали в термостат спектрофотометра Epoch и замеряли оптическую плотность (ОП) при длине волны 540 нм. Через 24 часа вновь регистрировали ОП культуральной жидкости.
Результаты оценивали с помощью программного обеспечения Gen 5 микропланшетного спектрофотометра Epoch. Последняя лунка ряда с задержкой роста и показателями ОП равной оптической плотности контрольной лунки соответствует минимальной подавляющей концентрацией соединения.
Проведенные исследования показали (см. таблицу), что соединение (1) проявляет выраженное ингибирующее действие относительно штаммов Staphylococcus aureus и Escherichia coli в концентрации - 125.0 мкг/мл и 500.0 мкг/мл соответственно.
Заявляемый ранее неописанный в литературе метил 9-бензоил-6-оксо-1,3,7-трифенил-4-окса-1,2,7-триазаспиро[4.4]нон-2,8-диен-8-карбоксилат может найти применение в качестве исходного продукта для синтеза гетероциклических систем и в фармакологии в качестве потенциального лекарственного средства с противомикробными свойствами.
Изобретение относится к области органической химии, а именно к метил 9-бензоил-6-оксо-1,3,7-трифенил-4-окса-1,2,7-триазаспиро[4.4]нон-2,8-диен-8-карбоксилату ниже указанной формулы, обладающему противомикробной активностью. 1 табл, 2 пр.
Метил 9-бензоил-6-оксо-1,3,7-трифенил-4-окса-1,2,7-триазаспиро[4.4]нон-2,8-диен-8-карбоксилат формулы:
обладающий противомикробной активностью.
