Перекрестные ссылки на родственные заявки

В настоящей заявке испрашивается приоритет предварительной заявки США № 62/259897, поданной 25 ноября 2015 г., предварительной заявки США № 62/313684, поданной 25 марта 2016 г., предварительной заявки США № 62/399087, поданной 23 сентября 2016 г., предварительной заявки США 62/422848, поданной 16 ноября 2016 года. Содержание вышеуказанных заявок включено в настоящее описание посредством ссылки в полном объеме.

СПИСОК ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ

Настоящая заявка содержит список последовательностей, который представлен в электронном виде в формате ASCII и полностью включен в настоящее описание посредством ссылки. Указанная копия ASCII, созданная 21 ноября 2016 года, имеет название P2029-7004WO_SL.txt и имеет размер 259298 байт.

Уровень техники

IgA-нефропатия является одним из наиболее распространенных хронических гломерулярных заболеваний во всем мире. Консервативные эпидемиологические оценки указывают на глобальную заболеваемость приблизительно 5-50 случаев/миллионов (детей) и 10-40 случаев/миллионов (взрослых). Эта заболеваемость имеет региональное смещение с более высокой распространенностью в Азии и Северной и Южной Америке с особенно высоким бременем болезней в Японии и регионах Китая. Подтвержденные биопсией случаи IgA-нефропатии в Японии прогнозируются примерно у 350000 человек. В США этот прогноз составляет приблизительно 100000, как таковое, это заболевание является наиболее часто диагностируемым гломерулярным заболеванием у взрослых. Несмотря на относительно медленное течение заболевания, IgA-нефропатия приводит к почечной недостаточности конечной стадии (ESRD), то есть почечной недостаточности у 20-50% пациентов в течение 20-30 лет. Эти цифры, вероятно, сильно занижены, учитывая необходимость подтверждения заболевания с помощью биопсии почек, протокол, который можно применять в различных клинических условиях. Заболевание имеет сложный патогенез с генетическими, эпидемиологическими и потенциально экологическими компонентами для этиологии, патологии и прогрессирования заболевания. Оно также имеет вариабельную клиническую картину, начиная от бессимптомной до почечной недостаточности конечной стадии (ESRD). IgG-нефропатия вызвана депонированием IgA, как правило, в виде иммунных комплексов в мезангии почки. В настоящее время нет конкретных способов лечения заболевания, направленных на первичное заболевание или прогрессирование.

Существует необходимость в разработке новых подходов к лечению, профилактике и диагностике IgA-нефропатии и других расстройств, которые имеют сходные механизмы заболевания.

Сущность изобретения

В настоящем раскрытии предложены, по меньшей мере частично, молекулы антитела, которые связываются с APRIL, например, с человеческим и/или мышиным APRIL, и которые имеют одно или более функциональных и структурных свойств, раскрытых в настоящем описании. В одном варианте осуществления молекула антитела связывается с APRIL и/или снижает (например, ингибирует, блокирует или нейтрализует) одну или более активностей APRIL. В одном варианте осуществления молекула антитела связывается с областью в APRIL, которая взаимодействует с TACI (например, CRD2-домен TACI). В одном варианте осуществления молекула антитела связывается с одним или более остатками внутри области человеческого APRIL, как определено в любой из Таблиц 3-4 или 7-8. Безотносительно к теории считается, что в одном варианте осуществления можно достичь улучшенного или оптимального ингибирования активности APRIL путем направленного воздействия на определенные области на APRIL (например, область (области), ассоциированная с взаимодействиями от APRIL и CDR2-доменом TACI). В одном варианте осуществления молекулу антитела выбирают из Таблицы 1 или 5 или она конкурирует за связывание с APRIL с молекулой антитела, выбранной из Таблицы 1 или 5. В одном варианте осуществления молекула антитела связывается с тем же или перекрывающимся эпитопом в качестве эпитопа, распознаваемого молекулой антитела, выбранного из Таблицы 1 или 5. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит одну или более вариабельных областей тяжелой цепи и/или одну или более вариабельных областей легкой цепи, описанных в Таблице 1 или 5. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит одну или более CDR тяжелой цепи и/или одну или более CDR легкой цепи, описанных в Таблице 1 или 5. В одном варианте осуществления также предложены молекулы нуклеиновой кислоты, кодирующие молекулы антитела, экспрессирующие векторы, клетки-хозяева, композиции (например, фармацевтические композиции), наборы, контейнеры и способы получения молекул антитела. Молекулы антител, раскрытые в настоящем описании, могут быть использованы (отдельно или в комбинации с другими агентами или терапевтическими модальностями) для лечения, профилактики и/или диагностики расстройств, ассоциированных с APRIL, таких как IgA-нефропатия.

Соответственно, в некоторых аспектах в настоящем раскрытии предложена молекула антитела, например молекула антитела, описанная в настоящем документе, имеющая одно или более (например, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22 или 23) из следующих свойств:

a) Связывается с человеческим APRIL с высокой аффинностью, например, с константой диссоциации (KD) менее чем примерно 100 нМ, как правило, примерно 10 нМ и более типично примерно 10-0,001 нМ, примерно 10-0,01 нМ, примерно 5-0,01 нМ, примерно 3-0,05 нМ, примерно 1-0,1 нМ или сильнее, например, менее чем примерно 80, 70, 60, 50, 40, 30, 20, 10, 8, 6, 4, 3, 2, 1, 0,5, 0,2, 0,1, 0,05, 0,01, 0,005 или 0,001 нМ,

b) Связывается с мышиным APRIL с высокой аффинностью, например, с константой диссоциации (KD) менее чем примерно 100 нМ, как правило, примерно 10 нМ и более типично, примерно 10-0,001 нМ, примерно 10-0,01 нМ, примерно 5-0,01 нМ, примерно 3-0,05 нМ, примерно 1-0,1 нМ или сильнее, например, менее чем примерно 80, 70, 60, 50, 40, 30, 20, 10, 8, 6, 4, 3, 2, 1, 0,5, 0,2, 0,1, 0,05, 0,01, 0,005 или 0,001 нМ,

c) Не связывается с мышиным APRIL или связывается с мышиным APRIL с низкой аффинностью, например, с константой диссоциации (KD) более чем примерно 500 нМ, например, более чем примерно 1000 нМ,

d) Не связывается или связывается с низкой аффинностью, например, с константой диссоциации (КД) более чем примерно 500 нМ, например, более чем примерно 1000 нМ, с одним или более (например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8 и более) цитокинами из суперсемейства TNF (TNFSF), отличных от APRIL (например, TNFα, CD40 (TNFSF4), FasL (TNFSF6), TRAIL (TNFSF10), RANKL (TNFSF11), Tweak (TNFSF12), BAFF (TNFSF13B) или LIGHT (TNFSF14)),

e) Связывается с одним или более остатками (например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25 или со всеми) в пределах области APRIL, как определено в Таблице 3, или специфично связывается с эпитопом на APRIL, например, с эпитопом, содержащим один или более остатков (например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25 или все), описанными в Таблице 3,

f) Связывается с одним или более остатками (например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 или со всеми) в пределах области APRIL, как определено в Таблице 4, или специфично связывается с эпитопом на APRIL, например, с эпитопом, содержащим один или более остатков (например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 или все), описанными в Таблице 4,

g) Связывается с одним или более остатками (например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17 или со всеми) в пределах области APRIL, как определено в Таблице 7, или специфично связывается с эпитопом на APRIL, например, с эпитопом, содержащим один или более остатков (например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17 или все), описанными в Таблице 7,

h) Связывается с одним или более остатками (например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25 или со всеми) в пределах области APRIL, как определено в Таблице 8, или специфично связывается с эпитопом на APRIL, например, с эпитопом, содержащим один или более остатков (например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25 или все), описанными в Таблице 8,

i) Специфично связывается с эпитопом на APRIL, например, с тем же самым, подобным или перекрывающимся эпитопом в качестве эпитопа, распознаваемого моноклональным антителом, описанным в Таблице 1 или 5, например, любым из моноклональных антител 2218, 2419, 2419-0105, 2419-0205, 2419-0206, 2419-0406, 2419-0605, 2419-0805, 2419-0806, 2419-1204, 2419-1205, 2419-1210, 2419-1305, 2419-1306, 2419-1310, 2419-1406, 2922, 3327, 3530, 3525, 3125, 2621, 4035, 4035-062, 3934, 3833, 3631, 3732, 4338, 4540, 4540-063, 4540-033, 4439 или 4237,

j) Снижает (например, ингибирует, блокирует или нейтрализует) одну или более биологических активностей APRIL (например, человеческого APRIL, мышиного APRIL или обоих), in vitro, ex vivo или in vivo,

k) Снижает (например, ингибирует, блокирует или нейтрализует) связывание человеческого APRIL с TACI, например, при IC₅₀ примерно 50 нМ или менее, как правило, примерно 0,01-50 нМ, 0,1-25 нМ, 0,1-10 нМ, 0,5-5 нМ или 1-5 нМ, например, менее чем примерно 40, 30, 20, 10, 5, 1, 0,5, 0,2, 0,1, 0,05 или 0,01 нМ, например, как определено описанным в настоящем документе способом,

l) Снижает (например, ингибирует, блокирует или нейтрализует) связывание мышиного APRIL с TACI, например, при IC₅₀ примерно 100 нМ или менее, как правило, примерно 0,01-75 нМ, 0,1-50 нМ, 0,1-25 нМ, 0,1-10 нМ, 0,5-5 нМ или 1-5 нМ, например, менее, чем примерно 80, 60, 40, 20, 10, 5, 1, 0,5, 0,2, 0,1, 0,05 или 0,01 нМ, например, как определено описанным в настоящем документе способом,

m) Снижает (например, ингибирует, блокирует или нейтрализует) связывание человеческого APRIL с BMCA, например, при IC₅₀ примерно 50 нМ или менее, обычно примерно 0,01-50 нМ, 0,1-25 нМ, 0,1-10 нМ, 0,5-5 нМ или 1-5 нМ, например, менее чем примерно 40, 30, 20, 10, 5, 1, 0,5, 0,2, 0,1, 0,05 или 0,01 нМ, например, как определено описанным в настоящем документе способом,

n) Снижает (например, ингибирует, блокирует или нейтрализует) связывание мышиного APRIL с BMCA, например, при IC₅₀ примерно 200 нМ или менее, как правило, примерно 0,01-200 нМ, 0,1-150 нМ, 0,1-100 нМ, 0,1-50 нМ, 0,1-25 нМ, 0,1-10 нМ, 0,5-5 нМ или 1-5 нМ, например, менее, чем примерно 150, 100, 50, 40, 30, 20, 10, 5, 1, 0,5, 0,2, 0,1, 0,05 или 0,01 нМ, например, как определено описанным в настоящем документе способом,

o) Демонстрирует такую же или сходную аффинность связывания или специфичность или их обе в качестве моноклонального антитела, описанного в Таблице 1 или 5, например, любого из моноклональных антител 2218, 2419, 2419-0105, 2419-0205, 2419-0206, 2419-0406, 2419-0605, 2419-0805, 2419-0806, 2419-1204, 2419-1205, 2419-1210, 2419-1305, 2419-1306, 2419-1310, 2419-1406, 2922, 3327, 3530, 3525, 3125, 2621, 4035, 4035-062, 3934, 3833, 3631, 3732, 4338, 4540, 4540-063, 4540-033, 4439 или 4237,

p) Показывает такую же или сходную аффинность связывания или специфичность или их обе, в качестве молекулы антитела, содержащей вариабельную область тяжелой цепи и/или вариабельную область легкой цепи, описанную в Таблице 1 или 5, например, вариабельную область тяжелой цепи и/или вариабельную область легкой цепи любого из моноклональных антител 2218, 2419, 2419-0105, 2419-0205, 2419-0206, 2419-0406, 2419-0605, 2419-0805, 2419-0806, 2419-1204, 2419-1205, 2419-1210, 2419-1305, 2419-1306, 2419-1310, 2419-1406, 2922, 3327, 3530, 3525, 3125, 2621, 4035, 4035-062, 3934, 3833, 3631, 3732, 4338, 4540, 4540-063, 4540-033, 4439 или 4237,

q) Показывает такую же или сходную аффинность связывания или специфичность, или и то, и другое, в качестве молекулы антитела, содержащей одну или более (например, две или три) CDR тяжелой цепи и/или одну или более (например, две или три) CDR легкой цепи, описанных в таблице 1 или 5, например, одну или более (например, две или три) CDR тяжелой цепи и/или одну или более (две или три) CDR легкой цепи любого из моноклональных антител 2218, 2419, 2419-0105, 2419-0205, 2419-0206, 2419-0406, 2419-0605, 2419-0805, 2419-0806, 2419-1204, 2419-1205, 2419-1210, 2419-1305, 2419-1306, 2419-1310, 2419-1406, 2922, 3327, 3530, 3525, 3125, 2621, 4035, 4035-062, 3934, 3833, 3631, 3732, 4338, 4540, 4540-063, 4540-033, 4439 или 4237,

r) Демонстрирует такую же или сходную аффинность связывания или специфичность, или их обе, в качестве молекулы антитела, содержащей аминокислотную последовательность, представленную в Таблице 1 или 5,

s) Демонстрирует такую же или сходную аффинность связывания или специфичность, или их обе, в качестве молекулы антитела, содержащей аминокислотную последовательность, кодированную нуклеотидной последовательностью, представленной в Таблице 2,

t) Ингибирует, например, конкурентно ингибирует, связывание второй молекулы антитела с человеческим APRIL, с мышиным APRIL или с обоими, где вторая молекула антитела представляет собой молекулу антитела, выбранную из Таблицы 1 или 5, например, любое из моноклональных антител 2218, 2419, 2419-0105, 2419-0205, 2419-0206, 2419-0406, 2419-0605, 2419-0805, 2419-0806, 2419-1204, 2419-1205, 2419-1210, 2419-1305, 2419-1306, 2419- 1310, 2419-1406, 2922, 3327, 3530, 3525, 3125, 2621, 4035, 4035-062, 3934, 3833, 3631, 3732, 4338, 4540, 4540-063, 4540-033, 4439 или 4237,

u) Конкурирует за связывания со второй молекулой антитела с человеческим APRIL, мышиным APRIL или с обоими, где вторая молекула антитела представляет собой моноклональное антитело, выбранное из Таблицы 1 или 5, например, любое из моноклональных антител 2218, 2419, 2419-0105, 2419- 0205, 2419-0206, 2419-0406, 2419-0605, 2419-0805, 2419-0806, 2419-1204, 2419-1205, 2419-1210, 2419-1305, 2419-1306, 2419-1310, 2419-1406, 2922, 3327, 3530, 3525, 3125, 2621, 4035, 4035-062, 3934, 3833, 3631, 3732, 4338, 4540, 4540-063, 4540-033, 4439 или 4237,

v) Имеет одно или более биологических свойств моноклонального антитела, выбранного из Таблицы 1 или 5, например, любого из моноклональных антител 2218, 2419, 2419-0105, 2419-0205, 2419-0206, 2419-0406, 2419-0605, 2419-0805, 2419-0806, 2419-1204, 2419-1205, 2419-1210, 2419-1305, 2419-1306, 2419-1310, 2419-1406, 2922, 3327, 3530, 3525, 3125, 2621, 4035, 4035-062, 3934, 3833, 3631, 3732, 4338, 4540, 4540-063, 4540-033, 4439 или 4237,

w) Имеет одно или более структурных свойств моноклонального антитела, выбранного из Таблицы 1 или 5, например, любого из моноклональных антител 2218, 2419, 2419-0105, 2419-0205, 2419-0206, 2419-0406, 2419-0605, 2419-0805, 2419-0806, 2419-1204, 2419-1205, 2419-1210, 2419-1305, 2419-1306, 2419-1310, 2419-1406, 2922, 3327, 3530, 3525, 3125, 2621, 4035, 4035-062, 3934, 3833, 3631, 3732, 4338, 4540, 4540-063, 4540-033, 4439 или 4237 или

x) Имеет одно или более фармакокинетических свойств моноклонального антитела, выбранного из Таблицы 1 или 5, например, любого из моноклональных антител 2218, 2419, 2419-0105, 2419-0205, 2419-0206, 2419-0406, 2419-0605, 2419-0805, 2419-0806, 2419-1204, 2419-1205, 2419-1210, 2419-1305, 2419-1306, 2419-1310, 2419-1406, 2922, 3327, 3530, 3525, 3125, 2621, 4035, 4035-062, 3934, 3833, 3631, 3732, 4338, 4540, 4540-063, 4540-033, 4439 или 4237.

В одном аспекте раскрытие представляет молекулу антитела против APRIL, которая:

(i) связывается или по существу связывается с человеческим APRIL;

(ii) связывается или по существу связывается с мышиным APRIL;

(iii) ингибирует или по существу ингибирует связывание APRIL (например, человеческого APRIL, мышиного APRIL или обоих) с TACI (например, человеческим TACI, мышиным TACI или с обоими); и

(iv) ингибирует или по существу ингибирует связывание APRIL (например, человеческого APRIL, мышиного APRIL или обоих) с BCMA (например, с человеческим BCMA, мышиным BCMA или с обоими).

В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой синтетическую молекулу антитела. В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой выделенную молекулу антитела.

В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с человеческим APRIL при EC₅₀ 20 нМ или менее, например 10 нМ или менее, 9 нМ или менее, 8 нМ или менее, 7 нМ или менее, 6 нМ или менее 5 нМ или менее, 4 нМ или менее, 3 нМ или менее, 2 нМ или менее, 1 нМ или менее, 0,8 нМ или менее, 0,6 нМ или менее, 0,4 нМ или менее, 0,2 нМ или менее, 0,1 нМ или менее 0,05 нМ или менее, 0,02 нМ или менее, 0,01 нМ или менее, 0,005 нМ или менее, 0,002 нМ или менее или 0,001 нМ или менее, например, от 0,001 нМ до 20 нМ, например, от 0,01 нМ до 20 нМ, от 0,1 нМ до 20 нМ, от 0,1 нМ до 10 нМ, от 0,5 нМ до 5 нМ, от 1 нМ до 5 нМ, от 0,001 нМ до 0,1 нМ, от 0,001 нМ до 0,01 нМ, от 0,001 нМ до 0,005 нМ, от 0,01 нМ до 0,05 нМ или от 0,01 нМ до 0,1 нМ, например, как определено описанным в настоящем документе способом.

В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с мышиным APRIL при EC₅₀ 100 нМ или менее, например, 80 нМ или менее, 60 нМ или менее, 40 нМ или менее, 20 нМ или менее, 10 нМ или менее 9 нМ или менее 9 нМ или менее, 8 нМ или менее, 7 нМ или менее, 6 нМ или менее, 5 нМ или менее, 4 нМ или менее, 3 нМ или менее, 2 нМ или менее, 1 нМ или менее, 0,8 нМ или менее, 0,6 нМ или менее, 0,4 нМ или менее, 0,2 нМ или менее, 0,1 нМ или менее, 0,05 нМ или менее, 0,02 нМ или менее, 0,01 нМ или менее, 0,005 нМ или менее, 0,002 нМ или менее, или 0,001 нМ или менее, например, от 0,001 нМ до 100 нМ, например, от 0,001 нМ до 50 нМ, от 0,01 нМ до 20 нМ, от 0,1 нМ до 10 нМ, от 0,5 нМ до 5 нМ или от 1 нМ до 5 нМ, от 0,001 нМ до 0,1 нМ, от 0,001 нМ до 0,01 нМ, от 0,001 нМ до 0,005 нМ, от 0,01 нМ до 0,05 нМ или от 0,01 нМ до 0,1 нМ, например, как определено описанным в настоящем документе способом.

В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует или по существу ингибирует связывание APRIL (например, человеческого APRIL, мышиного APRIL или обоих) с TACI (например, человеческим TACI, мышиным TACI или с обоими), при IC₅₀ 50 нМ или менее, например, 40 нМ или менее, 30 нМ или менее, 20 нМ или менее, 10 нМ или менее, 9 нМ или менее, 8 нМ или менее, 7 нМ или менее, 6 нМ или менее, 5 нМ или менее, 4 нМ или менее, 3 нМ или менее, 2 нМ или менее, 1 нМ или менее, 0,8 нМ или менее, 0,6 нМ или менее, 0,4 нМ или менее, 0,2 нМ или менее, 0,1 нМ или менее, 0,05 нМ или менее, 0,02 нМ или менее, или 0,01 нМ или менее, например, от 0,01 нМ до 50 нМ, от 0,1 нМ до 50 нМ, от 0,1 нМ до 25 нМ, от 0,1 нМ до 10 нМ, от 0,1 нМ до 5 нМ, от 0,1 нМ до 1 нМ, от 0,1 нМ до 0,5 нМ, от 0,5 нМ до 5 нМ или от 1 нМ до 5 нМ, например, как определено описанным в настоящем документе способом.

В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует или по существу ингибирует связывание APRIL (например, человеческого APRIL, мышиного APRIL или обоих) с BCMA (например, с человеческим BCMA, мышиным BCMA или с обоими), например, при IC₅₀ 200 нМ или менее, 150 нМ или менее, 100 нМ или менее, 50 нМ или менее, 40 нМ или менее, 30 нМ или менее, 20 нМ или менее, 10 нМ или менее, 9 нМ или менее, 8 нМ или менее, 7 нМ или менее, 6 нМ или менее, 5 нМ или менее, 4 нМ или менее, 3 нМ или менее, 2 нМ или менее, 1 нМ или менее, 0,8 нМ или менее, 0,6 нМ или менее, 0,4 нМ или менее, 0,2 нМ или менее, 0,1 нМ или менее, 0,05 нМ или менее, 0,02 нМ или менее, 0,01 нМ или менее, например, от 0,01 нМ до 50 нМ, от 0,1 нМ до 50 нМ, от 0,1 нМ до 25 нМ, от 0,1 нМ до 10 нМ, от 0,1 нМ до 5 нМ, от 0,1 нМ до 1 нМ, от 0,1 нМ до 0,5 нМ, от 0,5 нМ до 5 нМ или от 1 нМ до 5 нМ, например, как определено описанным в настоящем документе способом.

В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой молекулу антитела IgG, например, содержащую константную область тяжелой цепи IgG, например, выбранную из IgG1, IgG2 (например, IgG2a), IgG3 или IgG4, например IgG2 или IgG4. В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой молекулу антитела IgG1, например, имеющую константную область IgG1, описанную в настоящем документе. В другом варианте осуществления молекула антитела представляет собой молекулу антитела IgG2, например, имеющую константную область IgG2, описанную в настоящем документе. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит константную область легкой цепи каппа или легкой цепь лямбда.

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит Fc-область. В одном варианте осуществления Fc-область содержит одну или более мутаций, расположенных в интерфейсе между доменами CH2 и CH3 (например, для увеличения аффинности связывания с неонатальным рецептором FcRn и/или периода полужизни молекулы антитела). В одном варианте осуществления Fc-область содержит одну или более мутаций, например одну или более (например, 2, 3, 4, 5, 6 или все) мутаций, выбранных из T250Q, M252Y, S254T, T256E, M428L, H433K, N434F, или любую их комбинацию в IgG1. В одном варианте осуществления Fc-область содержит одну или более мутаций в положениях 233-236 или 322 человеческого IgG1 или IgG2 или одну или более замен в положениях 327, 330 или 331 человеческого IgG4 (например, для уменьшения комплемент-зависимой цитотоксичности (CDC)). В одном варианте осуществления Fc-область содержит одну или более (например, 2, 3, 4, 5, 6, 7 или все) мутаций, выбранных из E233P, L234V, L235A, G236, K322A, A327G, A330S, P331S или любой их комбинации.

В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой молекулу гуманизированного антитела, например, содержащую одну или более каркасных областей, полученных из каркасной последовательности зародышевой линии человека. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), описанную в Таблице 1 или 5. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит вариабельную область легкой цепи (VL), описанную в Таблице 1 или 5. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH) и вариабельную область легкой цепи (VL), описанную в Таблице 1 или 5. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит одну, две или три CDR вариабельной области тяжелой цепи (VH), описанной в Таблице 1 или 5. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит одну, две или три CDR вариабельной области легкой цепи (VL), описанной в Таблице 1 или 5. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит одну, две или три CDR вариабельной области тяжелой цепи (VH), описанной в Таблице 1 или 5, и одну, две или три CDR вариабельной области легкой цепи (VL), описанной в Таблице 1 или 5. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит две вариабельные области тяжелой цепи и две вариабельные области легкой цепи. В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой Fab, F(ab')2, Fv, Fd или одноцепочечный Fv-фрагмент (scFv).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), где вариабельная область тяжелой цепи содержит три области, определяющие комплементарность, тяжелой цепи (HCDR1, HCDR2 и HCDR3), где вариабельная область тяжелой цепи содержит один, два, или все из следующего: (i) HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 3530 (например, SEQ ID NO: 61); (ii) HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 3530 (например, SEQ ID NO: 62); или (ii) HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклонального антитела 3530 (например, SEQ ID NO: 63).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит вариабельную область легкой цепи (VL), где вариабельная область легкой цепи содержит три области, определяющие комплементарность, легкой цепи (LCDR1, LCDR2 и LCDR3), где вариабельная область легкой цепи содержит один, два, или все из следующего: (i) LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 моноклонального антитела 3530 (например, SEQ ID NO: 67); (ii) LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 3530 (например, SEQ ID NO: 45); или (iii) LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 3530 (например, SEQ ID NO: 46).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит:

(i) VH, содержащую один, два или все из следующего: HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 3530 (например, SEQ ID NO: 61); HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 3530 (например, SEQ ID NO: 62); или HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклонального антитела 3530 (например, SEQ ID NO: 63) и

(ii) VL, содержащую один, два или все из следующего: LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 моноклонального антитела 3530 (например, SEQ ID NO: 67); LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 3530 (например, SEQ ID NO: 45); или LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 3530 (например, SEQ ID NO: 46).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит: (i) VH, содержащую: HCDR1, содержащую аминокислотную последовательность HCDR1 моноклонального антитела 3530 (например, SEQ ID NO: 61); HCDR2, содержащую аминокислотную последовательность HCDR2 моноклонального антитела 3530 (например, SEQ ID NO: 62); и HCDR3, содержащую аминокислотную последовательность HCDR3 моноклонального антитела 3530 (например, SEQ ID NO: 63) и (ii) VL, содержащую: LCDR1, содержащую аминокислотную последовательность LCDR1 моноклонального антитела 3530 (например, SEQ ID NO: 67); LCDR2, содержащую аминокислотную последовательность LCDR2 моноклонального антитела 3530 (например, SEQ ID NO: 45); и LCDR3, содержащую аминокислотную последовательность LCDR3 моноклонального антитела 3530 (например, SEQ ID NO: 46).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), где вариабельная область тяжелой цепи содержит три области, определяющие комплементарность, тяжелой цепи (HCDR1, HCDR2 и HCDR3), где вариабельная область тяжелой цепи содержит один, два, или все из следующего: (i) HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 3530 (например, SEQ ID NO: 64); (ii) HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 3530 (например, SEQ ID NO: 65); или (iii) HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклонального антитела 3530 (например, SEQ ID NO: 63).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит вариабельную область легкой цепи (VL), где вариабельная область легкой цепи содержит три области, определяющие комплементарность, легкой цепи (LCDR1, LCDR2 и LCDR3), где вариабельная область легкой цепи содержит один, два, или все из следующего: (i) LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 моноклонального антитела 3530 (например, SEQ ID NO: 67); (ii) LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 3530 (например, SEQ ID NO: 45); или (iii) LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 3530 (например, SEQ ID NO: 46).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит:

(i) VH, содержащую один, два или все из следующего: HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 3530 (например, SEQ ID NO: 64); HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 3530 (например, SEQ ID NO: 65); или HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклонального антитела 3530 (например, SEQ ID NO: 63) и

(ii) VL, содержащую один, два или все из следующего: LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 моноклонального антитела 3530 (например, SEQ ID NO: 67); LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 3530 (например, SEQ ID NO: 45); или LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 3530 (например, SEQ ID NO: 46).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит: (i) VH, содержащую: HCDR1, содержащую аминокислотную последовательность HCDR1 моноклонального антитела 3530 (например, SEQ ID NO: 64); HCDR2, содержащую аминокислотную последовательность HCDR2 моноклонального антитела 3530 (например, SEQ ID NO: 65); и HCDR3, содержащую аминокислотную последовательность HCDR3 моноклонального антитела 3530 (например, SEQ ID NO: 63) и (ii) VL, содержащую: LCDR1, содержащую аминокислотную последовательность LCDR1 моноклонального антитела 3530 (например, SEQ ID NO: 67); LCDR2, содержащую аминокислотную последовательность LCDR2 моноклонального антитела 3530 (например, SEQ ID NO: 45); и LCDR3, содержащую аминокислотную последовательность LCDR3 моноклонального антитела 3530 (например, SEQ ID NO: 46).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VH моноклонального антитела 3530 (например, SEQ ID NO: 66), В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VL, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VL моноклонального антитела 3530 (например, SEQ ID NO: 70).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит: (i) VH, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VH моноклонального антитела 3530 (например, SEQ ID NO: 66); и (ii) VL, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VL моноклонального антитела 3530 (например, SEQ ID NO: 70). В одном варианте осуществления молекула антитела содержит: (i) VH, содержащую аминокислотную последовательность VH моноклонального антитела 3530 (например, SEQ ID NO: 66); и (ii) VL, содержащую аминокислотную последовательность VL моноклонального антитела 3530 (например, SEQ ID NO: 70).

В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой моноклональное антитело 3530. В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой гуманизированное моноклональное антитело 3530.

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), где вариабельная область тяжелой цепи содержит три области, определяющие комплементарность тяжелой цепи (HCDR1, HCDR2 и HCDR3), где вариабельная область тяжелой цепи содержит один, два, или все из следующего: (i) HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 3525 (например, SEQ ID NO: 61); (ii) HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 3525 (например, SEQ ID NO: 62); или (iii) HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклонального антитела 3525 (например, SEQ ID NO: 63).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит вариабельную область легкой цепи (VL), где вариабельная область легкой цепи содержит три области, определяющей комплементарность, легкой цепи (LCDR1, LCDR2 и LCDR3), где вариабельная область легкой цепи содержит один, два, или все из следующего: (i) LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 моноклонального антитела 3525 (например, SEQ ID NO: 44); (ii) LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 3525 (например, SEQ ID NO: 45); или (iii) LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 3525 (например, SEQ ID NO: 46).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит:

(i) VH, содержащую один, два или все из следующего: HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 3525 (например, SEQ ID NO: 61); HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 3525 (например, SEQ ID NO: 62); или HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклонального антитела 3525 (например, SEQ ID NO: 63) и

(ii) VL, содержащую один, два или все из следующего: LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 моноклонального антитела 3525 (например, SEQ ID NO: 44); LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 3525 (например, SEQ ID NO: 45); или LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 3525 (например, SEQ ID NO: 46).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит: (i) VH, содержащую три области, определяющие комплементарность, тяжелой цепи (HCDR1, HCDR2 и HCDR3), где вариабельная область тяжелой цепи содержит: HCDR1, содержащую аминокислотную последовательность HCDR1 моноклонального антитела 3525 (например, SEQ ID NO: 61); HCDR2, содержащую аминокислотную последовательность HCDR2 моноклонального антитела 3525 (например, SEQ ID NO: 62); и HCDR3, содержащую аминокислотную последовательность HCDR3 моноклонального антитела 3525 (например, SEQ ID NO: 63) и (ii) вариабельную область легкой цепи (VL), где вариабельная область легкой цепи содержит три области, определяющие комплементарность, легкой цепи (LCDR1, LCDR2 и LCDR3), где вариабельная область легкой цепи содержит: LCDR1, содержащую аминокислотную последовательность LCDR1 моноклонального антитела 3525 (например, SEQ ID NO: 44); LCDR2, содержащую аминокислотную последовательность LCDR2 моноклонального антитела 3525 (например, SEQ ID NO: 45); и LCDR3, содержащую аминокислотную последовательность LCDR3 моноклонального антитела 3525 (например, SEQ ID NO: 46).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), где вариабельная область тяжелой цепи содержит три области, определяющие комплементарность, тяжелой цепи (HCDR1, HCDR2 и HCDR3), где вариабельная область тяжелой цепи содержит один, два, или все из следующего: (i) HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 3525 (например, SEQ ID NO: 64); (ii) HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 3525 (например, SEQ ID NO: 65); или (iii) HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклонального антитела 3525 (например, SEQ ID NO: 63).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит вариабельную область легкой цепи (VL), где вариабельная область легкой цепи содержит три области, определяющие комплементарность, легкой цепи (LCDR1, LCDR2 и LCDR3), где вариабельная область легкой цепи содержит один, два, или все из следующего: (i) LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 моноклонального антитела 3525 (например, SEQ ID NO: 44); (ii) LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 3525 (например, SEQ ID NO: 45); или (iii) LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 3525 (например, SEQ ID NO: 46).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит:

(i) VH, содержащую один, два или все из следующего: HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 3525 (например, SEQ ID NO: 64); HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 3525 (например, SEQ ID NO: 65); или HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклонального антитела 3525 (например, SEQ ID NO: 63) и

(ii) VL, содержащую один, два или все из следующего: LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 моноклонального антитела 3525 (например, SEQ ID NO: 44); LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 3525 (например, SEQ ID NO: 45); или LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 3525 (например, SEQ ID NO: 46).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит: (i) VH, содержащую: HCDR1, содержащую аминокислотную последовательность HCDR1 моноклонального антитела 3525 (например, SEQ ID NO: 64); HCDR2, содержащую аминокислотную последовательность HCDR2 моноклонального антитела 3525 (например, SEQ ID NO: 65); и HCDR3, содержащую аминокислотную последовательность HCDR3 моноклонального антитела 3525 (например, SEQ ID NO: 63) и (ii) VL, содержащую: LCDR1, содержащую аминокислотную последовательность LCDR1 моноклонального антитела 3525 (например, SEQ ID NO: 44); LCDR2, содержащую аминокислотную последовательность LCDR2 моноклонального антитела 3525 (например, SEQ ID NO: 45); и LCDR3, содержащую аминокислотную последовательность LCDR3 моноклонального антитела 3525 (например, SEQ ID NO: 46).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VH моноклонального антитела 3525 (например, SEQ ID NO: 66). В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VL, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VL моноклонального антитела 3525 (например, SEQ ID NO: 50).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит: (i) VH, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VH моноклонального антитела 3525 (например, SEQ ID NO: 66); и (ii) VL, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VL моноклонального антитела 3525 (например, SEQ ID NO: 50). В одном варианте осуществления молекула антитела содержит: (i) VH, содержащую аминокислотную последовательность VH моноклонального антитела 3525 (например, SEQ ID NO: 66); и (ii) VL, содержащую аминокислотную последовательность VL моноклонального антитела 3525 (например, SEQ ID NO: 50).

В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой моноклональное антитело 3525. В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой гуманизированное моноклональное антитело 3525.

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), где вариабельная область тяжелой цепи содержит три области, определяющие комплементарность, тяжелой цепи (HCDR1, HCDR2 и HCDR3), где вариабельная область тяжелой цепи содержит один, два, или все из следующего: (i) HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 3833 (например, SEQ ID NO: 113); (ii) HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 3833 (например, SEQ ID NO: 114); или (iii) HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклонального антитела 3833 (например, SEQ ID NO: 115).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит вариабельную область легкой цепи (VL), где вариабельная область легкой цепи содержит три области, определяющие комплементарность, легкой цепи (LCDR1, LCDR2 и LCDR3), где вариабельная область легкой цепи содержит один, два, или все из следующего: (i) LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 моноклонального антитела 3833 (например, SEQ ID NO: 116); (ii) LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 3833 (например, SEQ ID NO: 117); или (iii) LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 3833 (например, SEQ ID NO: 118).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит:

(i) VH, содержащую один, два или все из следующего: HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 3833 (например, SEQ ID NO: 113); HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 3833 (например, SEQ ID NO: 114); или HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклонального антитела 3833 (например, SEQ ID NO: 115) и

(ii) VL, содержащую один, два или все из следующего: LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 моноклонального антитела 3833 (например, SEQ ID NO: 116); LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 3833 (например, SEQ ID NO: 117); или LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 3833 (например, SEQ ID NO: 118).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит: (i) VH, содержащую три области, определяющие комплементарность, тяжелой цепи (HCDR1, HCDR2 и HCDR3), где вариабельная область тяжелой цепи содержит: HCDR1, содержащую аминокислотную последовательность HCDR1 моноклонального антитела 3833 (например, SEQ ID NO: 113); HCDR2, содержащую аминокислотную последовательность HCDR2 моноклонального антитела 3833 (например, SEQ ID NO: 114); и HCDR3, содержащую аминокислотную последовательность HCDR3 моноклонального антитела 3833 (например, SEQ ID NO: 115) и (ii) вариабельную область легкой цепи (VL), где вариабельная область легкой цепи содержит три области, определяющие комплементарность, легкой цепи (LCDR1, LCDR2 и LCDR3), где вариабельная область легкой цепи содержит: LCDR1, содержащую аминокислотную последовательность LCDR1 моноклонального антитела 3833 (например, SEQ ID NO: 116); LCDR2, содержащую аминокислотную последовательность LCDR2 моноклонального антитела 3833 (например, SEQ ID NO: 117); и LCDR3, содержащую аминокислотную последовательность LCDR3 моноклонального антитела 3833 (например, SEQ ID NO: 118).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), где вариабельная область тяжелой цепи содержит три области, определяющие комплементарность, тяжелой цепи (HCDR1, HCDR2 и HCDR3), где вариабельная область тяжелой цепи содержит один, два, или все из следующего: (i) HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 3833 (например, SEQ ID NO: 119); (ii) HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 3833 (например, SEQ ID NO: 120); или (iii) HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклонального антитела 3833 (например, SEQ ID NO: 115).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит вариабельную область легкой цепи (VL), где вариабельная область легкой цепи содержит три области, определяющие комплементарность, легкой цепи (LCDR1, LCDR2 и LCDR3), где вариабельная область легкой цепи содержит один, два, или все из следующего: (i) LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 моноклонального антитела 3833 (например, SEQ ID NO: 116); (ii) LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 3833 (например, SEQ ID NO: 117); или (iii) LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 3833 (например, SEQ ID NO: 118).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит:

(i) VH, содержащую один, два или все из следующего: HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 3833 (например, SEQ ID NO: 119); HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 3833 (например, SEQ ID NO: 120); или HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклонального антитела 3833 (например, SEQ ID NO: 115) и

(ii) VL, содержащую один, два или все из следующего: LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 моноклонального антитела 3833 (например, SEQ ID NO: 116); LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 3833 (например, SEQ ID NO: 117); или LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 3833 (например, SEQ ID NO: 118).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит: (i) VH, содержащую: HCDR1, содержащую аминокислотную последовательность HCDR1 моноклонального антитела 3833 (например, SEQ ID NO: 119); HCDR2, содержащую аминокислотную последовательность HCDR2 моноклонального антитела 3833 (например, SEQ ID NO: 120); и HCDR3, содержащую аминокислотную последовательность HCDR3 моноклонального антитела 3833 (например, SEQ ID NO: 115) и (ii) VL, содержащую: LCDR1, содержащую аминокислотную последовательность LCDR1 моноклонального антитела 3833 (например, SEQ ID NO: 116); LCDR2, содержащую аминокислотную последовательность LCDR2 моноклонального антитела 3833 (например, SEQ ID NO: 117); и LCDR3, содержащую аминокислотную последовательность LCDR3 моноклонального антитела 3833 (например, SEQ ID NO: 118).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VH моноклонального антитела 3833 (например, SEQ ID NO: 121). В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VL, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VL моноклонального антитела 3833 (например, SEQ ID NO: 122).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит: (i) VH, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VH моноклонального антитела 3833 (например, SEQ ID NO: 121); и (ii) VL, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VL моноклонального антитела 3833 (например, SEQ ID NO: 122). В одном варианте осуществления молекула антитела содержит: (i) VH, содержащую аминокислотную последовательность VH моноклонального антитела 3833 (например, SEQ ID NO: 121); и (ii) VL, содержащую аминокислотную последовательность VL моноклонального антитела 3833 (например, SEQ ID NO: 122).

В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой моноклональное антитело 3833. В одном варианте осуществления моноклональное антитело 3833 представляет собой гуманизированное моноклональное антитело 3833. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность любой из SEQ ID NO: 246-250, VL, содержащую аминокислотную последовательность любой из SEQ ID NO: 251-253, или и то, и другое.

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), где вариабельная область тяжелой цепи содержит три области, определяющие комплементарность, тяжелой цепи (HCDR1, HCDR2 и HCDR3), где вариабельная область тяжелой цепи содержит один, два, или все из следующего: (i) HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 3631 (например, SEQ ID NO: 123); (ii) HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 3631 (например, SEQ ID NO: 124); или (iii) HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклонального антитела 3631 (например, SEQ ID NO: 125).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит вариабельную область легкой цепи (VL), где вариабельная область легкой цепи содержит три области, определяющие комплементарность, легкой цепи (LCDR1, LCDR2 и LCDR3), где вариабельная область легкой цепи содержит один, два, или все из следующего: (i) LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 моноклонального антитела 3631 (например, SEQ ID NO: 126); (ii) LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 3631 (например, SEQ ID NO: 127); или (iii) LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 3631 (например, SEQ ID NO: 128).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит:

(i) VH, содержащую один, два или все из следующего: HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 3631 (например, SEQ ID NO: 123); HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 3631 (например, SEQ ID NO: 124); или HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклонального антитела 3631 (например, SEQ ID NO: 125) и

(ii) VL, содержащую один, два или все из следующего: LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 моноклонального антитела 3631 (например, SEQ ID NO: 126); LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 3631 (например, SEQ ID NO: 127); или LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 3631 (например, SEQ ID NO: 128).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит: (i) VH, содержащую три области, определяющие комплементарность, тяжелой цепи (HCDR1, HCDR2 и HCDR3), где вариабельная область тяжелой цепи содержит: HCDR1, содержащую аминокислотную последовательность HCDR1 моноклонального антитела 3631 (например, SEQ ID NO: 123); HCDR2, содержащую аминокислотную последовательность HCDR2 моноклонального антитела 3631 (например, SEQ ID NO: 124); и HCDR3, содержащую аминокислотную последовательность HCDR3 моноклонального антитела 3631 (например, SEQ ID NO: 125) и (ii) вариабельную область легкой цепи (VL), где вариабельная область легкой цепи содержит три области, определяющие комплементарность, легкой цепи (LCDR1, LCDR2 и LCDR3), где вариабельная область легкой цепи содержит: LCDR1, содержащую аминокислотную последовательность LCDR1 моноклонального антитела 3631 (например, SEQ ID NO: 126); LCDR2, содержащую аминокислотную последовательность LCDR2 моноклонального антитела 3631 (например, SEQ ID NO: 127); и LCDR3, содержащую аминокислотную последовательность LCDR3 моноклонального антитела 3631 (например, SEQ ID NO: 128).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), где вариабельная область тяжелой цепи содержит три области, определяющие комплементарность, тяжелой цепи (HCDR1, HCDR2 и HCDR3), где вариабельная область тяжелой цепи содержит один, два, или все из следующего: HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотой последовательность HCDR1 моноклонального антитела 3631 (например, SEQ ID NO: 129); HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 3631 (например, SEQ ID NO: 130); или HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклонального антитела 3631 (например, SEQ ID NO: 125).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит вариабельную область легкой цепи (VL), где вариабельная область легкой цепи содержит три области, определяющие комплементарность, легкой цепи (LCDR1, LCDR2 и LCDR3), где вариабельная область легкой цепи содержит один, два, или все из следующего: LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотой последовательность LCDR1 моноклонального антитела 3631 (например, SEQ ID NO: 126); LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 3631 (например, SEQ ID NO: 127); или LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 3631 (например, SEQ ID NO: 128).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит:

(i) VH, содержащую один, два или все из следующего: HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 3631 (например, SEQ ID NO: 129); HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 3631 (например, SEQ ID NO: 130); или HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклонального антитела 3631 (например, SEQ ID NO: 125) и

(ii) VL, содержащую один, два или все из следующего: LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 моноклонального антитела 3631 (например, SEQ ID NO: 126); LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 3631 (например, SEQ ID NO: 127); или LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 3631 (например, SEQ ID NO: 128).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит: (i) VH, содержащую: HCDR1, содержащую аминокислотную последовательность HCDR1 моноклонального антитела 3631 (например, SEQ ID NO: 129); HCDR2, содержащую аминокислотную последовательность HCDR2 моноклонального антитела 3631 (например, SEQ ID NO: 130); и HCDR3, содержащую аминокислотную последовательность HCDR3 моноклонального антитела 3631 (например, SEQ ID NO: 125) и (ii) VL, содержащую: LCDR1, содержащую аминокислотную последовательность LCDR1 моноклонального антитела 3631 (например, SEQ ID NO: 126); LCDR2, содержащую аминокислотную последовательность LCDR2 моноклонального антитела 3631 (например, SEQ ID NO: 127); и LCDR3, содержащую аминокислотную последовательность LCDR3 моноклонального антитела 3631 (например, SEQ ID NO: 128).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VH моноклонального антитела 3631 (например, SEQ ID NO: 131). В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VL, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VL моноклонального антитела 3631 (например, SEQ ID NO: 132).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит: (i) VH, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VH моноклонального антитела 3631 (например, SEQ ID NO: 131); и (ii) VL, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VL моноклонального антитела 3631 (например, SEQ ID NO: 132). В одном варианте осуществления молекула антитела содержит: (i) VH, содержащую аминокислотную последовательность VH моноклонального антитела 3631 (например, SEQ ID NO: 131); и (ii) VL, содержащую аминокислотную последовательность VL моноклонального антитела 3631 (например, SEQ ID NO: 132).

В варианте осуществления молекула антитела представляет собой моноклональное антитело 3631. В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой гуманизированное моноклональное антитело 3631.

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), где вариабельная область тяжелой цепи содержит три области, определяющие комплементарность, тяжелой цепи (HCDR1, HCDR2 и HCDR3), где вариабельная область тяжелой цепи содержит один, два, или все из следующего: (i) HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 3732 (например, SEQ ID NO: 133); (ii) HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 3732 (например, SEQ ID NO: 134); или (iii) HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклонального антитела 3732 (например, SEQ ID NO: 135).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит вариабельную область легкой цепи (VL), где вариабельная область легкой цепи содержит три области, определяющие комплементарность легкой цепи (LCDR1, LCDR2 и LCDR3), где вариабельная область легкой цепи содержит один, два, или все из следующего: (i) LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 моноклонального антитела 3732 (например, SEQ ID NO: 136); (ii) LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 3732 (например, SEQ ID NO: 127); или (iii) LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 3732 (например, SEQ ID NO: 137).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит:

(i) VH, содержащую один, два или все из следующего: HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 3732 (например, SEQ ID NO: 133); HCDR2, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 3732 (например, SEQ ID NO: 134); или HCDR3, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклонального антитела 3732 (например, SEQ ID NO: 135) и

(ii) VL, содержащую один, два или все из следующего: LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 моноклонального антитела 3732 (например, SEQ ID NO: 136); LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 3732 (например, SEQ ID NO: 127); или LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 3732 (например, SEQ ID NO: 137).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит: (i) VH, содержащую три области, определяющие комплементарность тяжелой цепи (HCDR1, HCDR2 и HCDR3), где вариабельная область тяжелой цепи содержит: HCDR1, содержащую аминокислотную последовательность HCDR1 моноклонального антитела 3732 (например, SEQ ID NO: 133); HCDR2, содержащую аминокислотную последовательность HCDR2 моноклонального антитела 3732 (например, SEQ ID NO: 134); и HCDR3, содержащую аминокислотную последовательность HCDR3 моноклонального антитела 3732 (например, SEQ ID NO: 135) и (ii) вариабельную область легкой цепи (VL), где вариабельная область легкой цепи содержит три области, определяющих комплементарность легкой цепи (LCDR1, LCDR2 и LCDR3), где вариабельная область легкой цепи содержит: LCDR1, содержащую аминокислотную последовательность LCDR1 моноклонального антитела 3732 (например, SEQ ID NO: 136); LCDR2, содержащую аминокислотную последовательность LCDR2 моноклонального антитела 3732 (например, SEQ ID NO: 127); и LCDR3, содержащую аминокислотную последовательность LCDR3 моноклонального антитела 3732 (например, SEQ ID NO: 137).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), где вариабельная область тяжелой цепи содержит три области, определяющих комплементарность тяжелой цепи (HCDR1, HCDR2 и HCDR3), где вариабельная область тяжелой цепи содержит один, два, или все из следующего: (i) HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 3732 (например, SEQ ID NO: 138); (ii) HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 3732 (например, SEQ ID NO: 139); или (iii) HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклонального антитела 3732 (например, SEQ ID NO: 135).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит вариабельную область легкой цепи (VL), где вариабельная область легкой цепи содержит три области, определяющие комплементарности легкой цепи (LCDR1, LCDR2 и LCDR3), где вариабельная область легкой цепи содержит один, два, или все из следующего: (i) LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 моноклонального антитела 3732 (например, SEQ ID NO: 136); (ii) LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 3732 (например, SEQ ID NO: 127); или (iii) LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 3732 (например, SEQ ID NO: 137).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит:

(i) VH, содержащую один, два или все из следующего: HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 3732 (например, SEQ ID NO: 138); HCDR2, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 3732 (например, SEQ ID NO: 139); или HCDR3, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклонального антитела 3732 (например, SEQ ID NO: 135) и

(ii) VL, содержащую один, два или все из следующего: LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 моноклонального антитела 3732 (например, SEQ ID NO: 136); LCDR2, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 3732 (например, SEQ ID NO: 127); или LCDR3, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 3732 (например, SEQ ID NO: 137).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит: (i) VH, содержащую: HCDR1, содержащую аминокислотную последовательность HCDR1 моноклонального антитела 3732 (например, SEQ ID NO: 138); HCDR2, содержащую аминокислотную последовательность HCDR2 моноклонального антитела 3732 (например, SEQ ID NO: 139); и HCDR3, содержащую аминокислотную последовательность HCDR3 моноклонального антитела 3732 (например, SEQ ID NO: 135) и (ii) VL, содержащую: LCDR1, содержащую аминокислотную последовательность LCDR1 моноклонального антитела 3732 (например, SEQ ID NO: 136); LCDR2, содержащую аминокислотную последовательность LCDR2 моноклонального антитела 3732 (например, SEQ ID NO: 127); и LCDR3, содержащую аминокислотную последовательность LCDR3 моноклонального антитела 3732 (например, SEQ ID NO: 137).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VH моноклонального антитела 3732 (например, SEQ ID NO: 140). В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VL, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VL моноклонального антитела 3732 (например, SEQ ID NO: 141).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит: (i) VH, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VH моноклонального антитела 3732 (например, SEQ ID NO: 140); и (ii) VL, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VL моноклонального антитела 3732 (например, SEQ ID NO: 141). В одном варианте осуществления молекула антитела содержит: (i) VH, содержащую аминокислотную последовательность VH моноклонального антитела 3732 (например, SEQ ID NO: 140); и (ii) VL, содержащую аминокислотную последовательность VL моноклонального антитела 3732 (например, SEQ ID NO: 141).

В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой моноклональное антитело 3732. В одном варианте осуществления моноклональное антитело 3732 представляет собой гуманизированное моноклональное антитело 3732.

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), где вариабельная область тяжелой цепи содержит три области, определяющие комплементарность тяжелой цепи (HCDR1, HCDR2 и HCDR3), где вариабельная область тяжелой цепи содержит один, два, или все из следующего: (i) HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антител 4540, 4540-063 или 4540-033 (например, SEQ ID NO: 154); (ii) HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклональных антител 4540, 4540-063 или 4540-033 (например, SEQ ID NO: 155); или (iii) HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклональных антител 4540, 4540-063 или 4540-033 (например, SEQ ID NO: 156).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит вариабельную область легкой цепи (VL), где вариабельная область легкой цепи содержит три области, определяющие комплементарность легкой цепи (LCDR1, LCDR2 и LCDR3), где вариабельная область легкой цепи содержит один, два, или все из следующего: (i) LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 моноклонального антитела 4540 (например, SEQ ID NO: 116), 4540-063 (например, SEQ ID NO: 274) или 4540-033 (например, SEQ ID NO: 274); (ii) LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 4540 (например, SEQ ID NO: 157), 4540-063 (например, SEQ ID NO: 275) или 4540-033 (например, SEQ ID NO: 275); или (iii) LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотны остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклональных антител 4540, 4540-063 или 4540-033 (например, SEQ ID NO: 158).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит:

(i) VH, содержащую один, два или все из следующего: HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 4540, 4540-063 или 4540-033 (например, SEQ ID NO: 154); HCDR2, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 4540, 4540-063 или 4540-033 (например, SEQ ID NO: 155); или HCDR3, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклонального антитела 4540, 4540-063 или 4540-033 (например, SEQ ID NO: 156) и

(ii) VL, содержащую один, два или все из следующего: LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 моноклонального антитела 4540 (например, SEQ ID NO: 116), 4540-063 (например, SEQ ID NO: 274) или 4540-033 (например, SEQ ID NO: 274); LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 4540 (например, SEQ ID NO: 157), 4540-063 (например, SEQ ID NO: 275) или 4540-033 (например, SEQ ID NO: 275); или LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 4540, 4540-063 или 4540-033 (например, SEQ ID NO: 158).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит: (i) VH, содержащую три области, определяющие комплементарность тяжелой цепи (HCDR1, HCDR2 и HCDR3), где вариабельная область тяжелой цепи содержит: HCDR1, содержащую аминокислотную последовательность HCDR1 моноклонального антитела 4540, 4540-063 или 4540-033 (например, SEQ ID NO: 154); HCDR2, содержащую аминокислотную последовательность HCDR2 моноклонального антитела 4540, 4540-063 или 4540-033 (например, SEQ ID NO: 155); и HCDR3, содержащую аминокислотную последовательность HCDR3 моноклонального антитела 4540, 4540-063 или 4540-033 (например, SEQ ID NO: 156) и (ii) вариабельную область легкой цепи (VL), где вариабельная область легкой цепи содержит три области, определяющие комплементарность легкой цепи (LCDR1, LCDR2 и LCDR3), где вариабельная область легкой цепи содержит: LCDR1, содержащую аминокислотную последовательность LCDR1 моноклонального антитела 4540 (например, SEQ ID NO: 116), 4540-063 (например, SEQ ID NO: 274) или 4540-033 (например, SEQ ID NO: 274); LCDR2, содержащую аминокислотную последовательность LCDR2 моноклонального антитела 4540 (например, SEQ ID NO: 157), 4540-063 (например, SEQ ID NO: 275) или 4540-033 (например, SEQ ID NO: 275); и LCDR3, содержащую аминокислотную последовательность LCDR3 моноклонального антитела 4540, 4540-063 или 4540-033 (например, SEQ ID NO: 158).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), где вариабельная область тяжелой цепи содержит три области, определяющих комплементарность тяжелой цепи (HCDR1, HCDR2 и HCDR3), где вариабельная область тяжелой цепи содержит один, два, или все из следующего: (i) HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 4540 (например, SEQ ID NO: 159), 4540-063 (например, SEQ ID NO: 276) или 4540-033 (например, SEQ ID NO: 159); (ii) HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 4540 (например, SEQ ID NO: 160), 4540-063 (например, SEQ ID NO: 277) или 4540-033 (например, SEQ ID NO: 278); или (iii) HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклональных антител 4540, 4540-063 или 4540-033 (например, SEQ ID NO: 156).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит вариабельную область легкой цепи (VL), где вариабельная область легкой цепи содержит три области, определяющие комплементарность легкой цепи (LCDR1, LCDR2 и LCDR3), где вариабельная область легкой цепи содержит один, два, или все из следующего: (i) LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотны остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательности LCDR1 моноклонального антитела 4540 (например, SEQ ID NO: 116), 4540-063 (например, SEQ ID NO: 274) или 4540-033 (например, SEQ ID NO: 274); (ii) LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 4540 (например, SEQ ID NO: 157), 4540-063 (например, SEQ ID NO: 275) или 4540-033 (например, SEQ ID NO: 275); или (iii) LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 4540, 4540-063 или 4540-033 (например, SEQ ID NO: 158).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит:

(i) VH, содержащую один, два или все из следующего: HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 4540 (например, SEQ ID NO: 159), 4540-063 (например, SEQ ID NO: 276) или 4540-033 (например, SEQ ID NO: 159); HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 4540 (например, SEQ ID NO: 160), 4540-063 (например, SEQ ID NO: 277) или 4540-033 (например, SEQ ID NO: 278); или HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклонального антитела 4540, 4540-063 или 4540-033 (например, SEQ ID NO: 156) и

(ii) VL, содержащую один, два или все из следующего: LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 моноклонального антитела 4540 (например, SEQ ID NO: 116), 4540-063 (например, SEQ ID NO: 274) или 4540-033 (например, SEQ ID NO: 274); LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 4540 (например, SEQ ID NO: 157), 4540-063 (например, SEQ ID NO: 275) или 4540-033 (например, SEQ ID NO: 275); или LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 4540, 4540-063 или 4540-033 (например, SEQ ID NO: 158).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит: (i) VH, содержащую один, два или все из следующих: HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность HCDR1 моноклонального антитела 4540 (например, SEQ ID NO: 159), 4540 -063 (например, SEQ ID NO: 276) или 4540-033 (например, SEQ ID NO: 159); HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность HCDR2 моноклонального антитела 4540 (например, SEQ ID NO: 160), 4540-063 (например, SEQ ID NO: 277) или 4540-033 (например, SEQ ID NO: 278); или HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность HCDR3 моноклонального антитела 4540, 4540-063 или 4540-033 (например, SEQ ID NO: 156) и (ii) VL, содержащую один, два или все из следующих: LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность LCDR1 моноклонального антитела 4540 (например, SEQ ID NO: 116), 4540-063 (например, SEQ ID NO: 274) или 4540-033 (например, SEQ ID NO: 274); LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность LCDR2 моноклонального антитела 4540 (например, SEQ ID NO: 157), 4540-063 (например, SEQ ID NO: 275) или 4540-033 (например, SEQ ID NO: 275); или LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность LCDR3 моноклонального антитела 4540, 4540-063 или 4540-033 (например, SEQ ID NO: 158).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VH моноклонального антитела 4540 (например, SEQ ID NO: 161), 4540-063 (например, SEQ ID NO: 258) или 4540-033 (например, SEQ ID NO: 256). В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VL, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VL моноклонального антитела 4540 (например, SEQ ID NO: 162), 4540-063 (например, SEQ ID NO: 261) или 4540-033 (например, SEQ ID NO: 261).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит: (i) VH, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VH моноклонального антитела 4540 (например, SEQ ID NO: 161), 4540-063 (например, SEQ ID NO: 258) или 4540-033 (например, SEQ ID NO: 256); и (ii) VL, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VL моноклонального антитела 4540 (например, SEQ ID NO: 162), 4540-063 (например, SEQ ID NO: 261) или 4540-033 (например, SEQ ID NO: 261). В одном варианте осуществления молекула антитела содержит: (i) VH, содержащую аминокислотную последовательность VH моноклонального антитела 4540 (например, SEQ ID NO: 161), 4540-063 (например, SEQ ID NO: 258) или 4540-033 (например, SEQ ID NO: 256); и (ii) VL, содержащую аминокислотную последовательность VL моноклонального антитела 4540 (например, SEQ ID NO: 162), 4540-063 (например, SEQ ID NO: 261) или 4540-033 (например, SEQ ID NO: 261).

В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой моноклональное антитело 4540, 4540-063 или 4540-033. В одном варианте осуществления моноклональное антитело 4540 представляет собой гуманизированное моноклональное антитело 4540 (например, антитела 4540-063 или 4540-033). В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность любой из SEQ ID NO: 254-258, VL, содержащую аминокислотную последовательность любой из SEQ ID NO: 259-261, или и то, и другое.

В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с одним или более остатков, например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25 и более, остатков в пределах области человеческого APRIL, как определено в любой из Таблиц 3-4 или 7-8.

В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с одним или более остатками, например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25 и более, остатками в пределах области человеческого APRIL, как определено в Таблице 3. В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с эпитопом, который содержит или состоит из одного или более остатков, например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25 или всех остатков человеческого APRIL из Таблицы 3. В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с эпитопом, который перекрывает эпитоп, который содержит или состоит из всех остатков человеческого APRIL из Таблицы 3. В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с эпитопом, который содержит остатки APRIL из двух мономеров, например из мономера А и мономера В, как показано в Таблице 3.

В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с одним или более остатками, например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 или более остатками в пределах области человеческого APRIL, как определено в Таблице 4. В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с эпитопом, который содержит или состоит из одного или более остатков, например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 или всех остатков человеческого APRIL из Таблицы 4. В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с эпитопом, который перекрывает эпитоп, который содержит или состоит из всех остатков человеческого APRIL из Таблицы 4. В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с эпитопом, который содержит APRIL из петли C-D (например, петля, соединяющая β-листы C и D), петли G-H (например, петля, соединяющая β-листы G и H) или из обеих.

В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с одним или более остатками, например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17 или со всеми остатками в пределах области человеческого APRIL, как определено в Таблице 7. В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с эпитопом, который содержит или состоит из одного или более остатков, например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17 или всех остатков человеческого APRIL из Таблицы 7. В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с эпитопом, который перекрывает эпитоп, который содержит или состоит из всех остатков человеческого APRIL из Таблицы 7.

В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с одним или более остатками, например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25 или со всеми остатками в пределах области человеческого APRIL, как определено в Таблице 8. В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с эпитопом, который содержит или состоит из одного или более остатков, например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25 или всех остатков человеческого APRIL из Таблицы 8. В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с эпитопом, который перекрывает эпитоп, который содержит или состоит из всех остатков человеческого APRIL из Таблицы 8.

В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с одним или более (например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 или со всеми) остатками человеческого APRIL положений 105-114 и/или с одним или более остатками (например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 или со всеми) остатками мышиного APRIL положений 96-105. В одном варианте осуществления молекула антитела не связывается или по существу не связывается с одним, двумя или со всеми из Asp129, Arg233 или His203 человеческого APRIL. В варианте осуществления эпитоп представляет собой конформационный эпитоп.

В одном варианте осуществления связывание молекулы антитела с APRIL (например, с человеческим APRIL) ингибирует или по существу ингибирует связывание CRD2-домена TACI (например, человеческого TACI) с APRIL (например, с человеческим APRIL). В другом варианте осуществления связывание молекулы антитела с человеческим APRIL ингибирует или по существу ингибирует связывание человеческого TACI человека с одним или более, например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25 или со всеми остатками APRIL из Таблицы 3. Еще в одном варианте осуществления связывание молекулы антитела с человеческим APRIL ингибирует или по существу ингибирует связывание человеческого TACI с одним или более, например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, или со всеми остатками человеческого APRIL из Таблицы 4. Еще в одном варианте осуществления связывание молекулы антитела с человеческим APRIL ингибирует или по существу ингибирует связывание человеческого TACI с одним или более, например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17 или со всеми остатками человеческого APRIL из Таблицы 7. Еще в одном варианте осуществления связывание молекулы антитела с человеческим APRIL ингибирует или по существу ингибирует связывание человеческого TACI человека с одним или более, например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25 или со всеми остатками человеческого APRIL из Таблицы 8. В другом варианте осуществления связывание молекулы антитела с человеческим APRIL ингибирует или по существу ингибирует связывание человеческого BCMA с одним или более, например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25 или со всеми остатками человеческого APRIL из Таблицы 8.

В одном аспекте раскрытие представляет собой молекулу антитела, которая связывается или по существу связывается с одним или более, например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25 и более, остатками в пределах области человеческого APRIL, как определено в любой из Таблиц 3-4 или 7-8.

В одном варианте осуществления молекула антитела против APRIL связывается или по существу связывается с эпитопом, который содержит или состоит из одного или более, например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25 или более остатков из человеческого APRIL из любой из Таблиц 3-4 или 7-8. В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с конформационным эпитопом.

В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с одним или более, например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25 и более, остатками в пределах области человеческого APRIL, как определено в Таблице 3. В одном варианте осуществления молекула антитела против APRIL связывается или по существу связывается с эпитопом, который содержит или состоит из одного или более (например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25 или всех) остатков человеческого APRIL из Таблицы 3. В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с эпитопом, который содержит остатки APRIL из двух мономеров, например из мономера А и мономера В, как показано в Таблице 3.

В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с одним или более, например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 или со всеми остатками в области человеческого APRIL, как определено в Таблице 4. В одном варианте осуществления изобретения эпитоп состоит из одного или более, например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 или всех остатков APRIL из Таблицы 4. В одном варианте воплощения эпитоп содержит или состоит из одного или более остатков APRIL из петли C-D (например, петли, соединяющей β-листы C и D), петли G-H (например, петли, соединяющей β-листы G и H), или из обеих.

В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с одним или более, например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17 или со всеми остатками в пределах области человеческого APRIL, как определено в Таблице 7.В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с эпитопом, который содержит или состоит из одного или более, например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17 или всех остатков человеческого APRIL из Таблицы 7. В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с эпитопом, который перекрывает эпитоп, который содержит или состоит из всех остатков человеческого APRIL из Таблицы 7.

В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с одним или более, например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25 или со всеми остатками в пределах области человеческого APRIL, как определено в Таблице 8. В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с эпитопом, который содержит или состоит из одного или более, например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25 или всех остатков человеческого APRIL из Таблицы 8. В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с эпитопом, который перекрывает эпитоп, который содержит или состоит из всех остатков человеческого APRIL из Таблицы 8.

В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с одним или более (например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 или со всеми) остатками человеческого APRIL положений 105-114 и/или с одним или более (например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 или со всеми) остатками мышиного APRIL положений 96-105. В одном варианте осуществления молекула антитела не связывается или по существу не связывается с одним, двумя или со всеми из Asp129, Arg233 или His203 человеческого APRIL.

В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с эпитопом, который содержит или состоит из одного или более (например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32 или всех) остатков человеческого APRIL из Таблицы 6.

В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с одним или более (например, 2, 3, 4, 5 или со всеми) из аминокислотных остатков человеческого APRIL, выбранных из V174, F176, Q190, R195, R206, или Y208. В одном варианте осуществления молекула антитела не связывается или по существу не связывается с одним или более (например, 2, 3 или со всеми) из аминокислотных остатков человеческого APRIL, выбранных из V181, S226, I228 или N237. В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с одним или более (например, 2, 3 или со всеми) из аминокислотных остатков человеческого APRIL, выбранных из F176, V181, Q190 или I228. В одном варианте осуществления молекула антитела не связывается или по существу не связывается с одним или с обоими из аминокислотных остатков человеческого APRIL, выбранных из Y208 или N237. В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с одним или более (например, 2 или со всеми) из аминокислотных остатков человеческого APRIL, выбранных из V174, R206 или Y208. В одном варианте осуществления молекула антитела не связывается или по существу не связывается с одним или более (например, 2, 3 или со всеми) из аминокислотных остатков человеческого APRIL, выбранных из F176, V181, Q190 или N237.

В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с человеческим APRIL. В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с человеческим APRIL и мышиным APRIL. В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с человеческим APRIL, но не связывается с мышиным APRIL или связывается с мышиным APRIL с низкой аффинностью.

В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с человеческим APRIL при EC₅₀ 20 нМ или менее, например 10 нМ или менее, 9 нМ или менее или менее, 8 нМ или менее, 7 нМ или менее, 6 нМ или менее, 5 нМ или менее, 4 нМ или менее, 3 нМ или менее, 2 нМ или менее, 1 нМ или менее, 0,8 нМ или менее, 0,6 нМ или менее, 0,4 нМ или менее, 0,2 нМ или менее, 0,1 нМ или менее, 0,05 нМ или менее, 0,02 нМ или менее, 0,01 нМ или менее, 0,005 нМ или менее, 0,002 нМ или менее или 0,001 нМ или менее, например, от 0,001 нМ до 20 нМ, например, от 0,01 нМ до 20 нМ, от 0,1 нМ до 20 нМ, например, от 0,1 нМ до 10 нМ, от 0,5 нМ до 5 нМ, от 1 нМ до 5 нМ, от 0,001 нМ до 0,1 нМ, от 0,001 нМ до 0,01 нМ, от 0,001 нМ до 0,005 нМ, от 0,01 нМ до 0,05 нМ или от 0,01 нМ до 0,1 нМ, например, как определено описанным в настоящем документе способом.

В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с мышиным APRIL при EC₅₀ 100 нМ или менее, например, 80 нМ или менее, 60 нМ или менее, 40 нМ или менее, 20 нМ или менее, например, 10 нМ или менее, например 9 нМ или менее 9 нМ или менее, 8 нМ или менее, 7 нМ или менее, 6 нМ или менее, 5 нМ или менее, 4 нМ или менее, 3 нМ или менее, 2 нМ или менее, 1 нМ или менее, 0,8 нМ или менее, 0,6 нМ или менее, 0,4 нМ или менее, 0,2 нМ или менее, 0,1 нМ или менее, 0,05 нМ или менее, 0,02 нМ или менее, 0,01 нМ или менее, 0,005 нМ или менее, 0,002 нМ или менее или 0,001 нМ или менее, например, от 0,001 нМ до 100 нМ, например, от 0,001 нМ до 50 нМ, от 0,01 нМ до 20 нМ, от 0,1 нМ до 20 нМ, например, от 0,1 нМ до 10 нМ, от 0,5 нМ до 5 нМ, от 1 нМ до 5 нМ, от 0,001 нМ до 0,1 нМ, от 0,001 нМ до 0,01 нМ, от 0,001 нМ до 0,005 нМ, от 0,01 нМ до 0,05 нМ или от 0,01 нМ до 0,1 нМ, например, как определено описанным в настоящем документе способом.

В одном варианте осуществления молекула антитела не связывается с мышиным APRIL или связывается с мышиным APRIL с низкой аффинностью, например, при EC₅₀ 1000 нМ или более, например, 2000 нМ или более, например, как определено описанным в настоящем документе способом.

В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует или по существу ингибирует связывание APRIL (например, человеческого APRIL, мышиного APRIL или обоих) с TACI (например, с человеческим TACI, мышиным TACI или с обоими). В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует или по существу ингибирует связывание APRIL (например, человеческого APRIL, мышиного APRIL или обоих) с TACI (например, с человеческим TACI, мышиным TACI или с обоими), при IC₅₀ 50 нМ или менее, например, 40 нМ или менее, 30 нМ или менее, 20 нМ или менее, 10 нМ или менее, 9 нМ или менее, 8 нМ или менее, 7 нМ или менее, 6 нМ или менее, 5 нМ или менее, 4 нМ или менее, 3 нМ или менее, 2 нМ или менее, 1 нМ или менее, 0,8 нМ или менее, 0,6 нМ или менее, 0,4 нМ или менее, 0,2 нМ или менее, 0,1 нМ или менее, 0,05 нМ или менее, 0,02 нМ или менее, или 0,01 нМ или менее, например, от 0,01 нМ до 50 нМ, от 0,1 нМ до 50 нМ, от 0,1 нМ до 25 нМ, от 0,1 нМ до 10 нМ, от 0,1 нМ до 5 нМ, от 0,1 нМ до 1 нМ, от 0,1 нМ до 0,5 нМ, от 0,5 нМ до 5 нМ или от 1 нМ до 5 нМ, например, как определено описанным в настоящем документе способом.

В одном варианте осуществления связывание молекулы антитела с APRIL (например, с человеческим APRIL) ингибирует или по существу ингибирует связывание CRD2-домена TACI (например, человеческого TACI) с APRIL (например, с человеческим APRIL). В одном варианте осуществления связывание молекулы антитела с человеческим APRIL ингибирует или по существу ингибирует связывание человеческого TACI с одним или более, например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25 или со всеми остатками человеческого APRIL из Таблицы 3. В одном варианте осуществления связывание молекулы антитела с человеческим APRIL ингибирует или по существу ингибирует связывание человеческого TACI с одним или более, например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 или со всеми, из остатков человеческого APRIL из Таблицы 4. В одном варианте осуществления связывание молекулы антитела с человеческим APRIL ингибирует или по существу ингибирует связывание человеческого TACI с одним или более, например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17 или со всеми остатками человеческого APRIL из Таблицы 7. В одном варианте осуществления связывание молекулы антитела с человеческим APRIL ингибирует или по существу ингибирует связывание человеческого TACI с одним или более, например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25 или со всеми остатками человеческого APRIL из Таблицы 8. В другом варианте осуществления связывание молекулы антитела с человеческим APRIL ингибирует или по существу ингибирует связывание человеческого BCMA с одним или более, например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25 или со всеми остатками человеческого APRIL из Таблицы 8.

В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует или по существу ингибирует связывание человеческого APRIL (например, человеческого APRIL, мышиного APRIL или обоих) с BCMA (например, с человеческим BCMA, мышиным BCMA или с обоими). В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует или по существу ингибирует связывание APRIL (например, человеческого APRIL, мышиного APRIL или обоих) с BCMA (например, с человеческим BCMA, мышиным BCMA или с обоими), например, при IC₅₀ 200 нМ или менее, 150 нМ или менее, 100 нМ или менее, 50 нМ или менее, 40 нМ или менее, 30 нМ или менее, 20 нМ или менее, 10 нМ или менее, 9 нМ или менее, 8 нМ или менее, 7 нМ или менее, 6 нМ или менее, 5 нМ или менее, 4 нМ или менее, 3 нМ или менее, 2 нМ или менее, 1 нМ или менее, 0,8 нМ или менее, 0,6 нМ или менее, 0,4 нМ или менее, 0,2 нМ или менее, 0,1 нМ или менее, 0,05 нМ или менее, 0,02 нМ или менее, 0,01 нМ или менее, например, от 0,01 нМ до 50 нМ, от 0,1 нМ до 50 нМ, от 0,1 нМ до 25 нМ, от 0,1 нМ до 10 нМ, от 0,1 нМ до 5 нМ, от 0,1 нМ до 1 нМ, от 0,1 нМ до 0,5 нМ, от 0,5 нМ до 5 нМ или от 1 нМ до 5 нМ, например, как определено описанным в настоящем документе способом.

В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой синтетическую молекулу антитела. В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой выделенную молекулу антитела. В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой молекулу антитела IgG, например, содержащую константную область тяжелой цепи IgG, например, выбранного из IgG1, IgG2 (например, IgG2a), IgG3 или IgG4, например IgG2 или IgG4. В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой молекулу антитела IgG1. В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой молекулу антитела IgG2. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит константную область легкой цепи каппа или лямбда.

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит Fc-область. В одном варианте осуществления Fc-область содержит одну или более мутаций в области интерфейса между доменами CH2 и CH3 (например, FcRn и/или периода полужизни молекулы антитела). В одном варианте осуществления Fc-область содержит одну или более мутаций, например одну или более (например, 2, 3, 4, 6 или все) мутаций, выбранных из T250Q, M252Y, S254T, T256E, M428L, H433K, N434F или любые их комбинации, IgG1. В одном варианте осуществления Fc-область содержит одну или более мутаций в положениях 233-236 или 322 человеческого IgG1 или IgG2 или одну или более замен в положениях 327, 330 или 331 человеческого IgG4 (например, для уменьшения комплемент-зависимой цитотоксичности (CDC)). В одном варианте осуществления Fc-область содержит одну или более (например, 2, 3, 4, 6 7 или все) мутации, выбранные из E233P, L234V, L235A, G236, K322A, A327G, A330S, P331S или любую их комбинацию.

В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой молекулу гуманизированного антитела, например, как описано в таблице 1 или 5, например, содержащую одну или более каркасных областей, полученных из каркасной последовательности зародышевой линии человека.

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит две вариабельные области тяжелой цепи и две вариабельные области легкой цепи. В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой Fab, F (ab')2, Fv, Fd или одноцепочечный Fv-фрагмент (scFv).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), где вариабельная область тяжелой цепи содержит три области, определяющие комплементарность тяжелой цепи (HCDR1, HCDR2 и HCDR3), где вариабельная область тяжелой цепи содержит один, два, или все из следующего: (i) HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 2218 (например, SEQ ID NO: 1); (ii) HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 2218 (например, SEQ ID NO: 2); или (iii) HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклонального антитела 2218 (например, SEQ ID NO: 3).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит вариабельную область легкой цепи (VL), где вариабельная область легкой цепи содержит три области, определяющие комплементарность легкой цепи (LCDR1, LCDR2 и LCDR3), где вариабельная область легкой цепи содержит один, два, или все из следующего: (i) LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 моноклонального антитела 2218 (например, SEQ ID NO: 4); (ii) LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 2218 (например, SEQ ID NO: 5); или (iii) LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 2218 (например, SEQ ID NO: 6).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит:

(i) VH, содержащую один, два или все из следующего: HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 2218 (например, SEQ ID NO: 1); HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 2218 (например, SEQ ID NO: 2); или HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклонального антитела 2218 (например, SEQ ID NO: 3) и

(ii) VL, содержащую один, два или все из следующего: LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 моноклонального антитела 2218 (например, SEQ ID NO: 4); LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 2218 (например, SEQ ID NO: 5); или LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 2218 (например, SEQ ID NO: 6).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит: (i) VH, содержащую: HCDR1, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 2218 (например, SEQ ID NO: 1); HCDR2, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 2218 (например, SEQ ID NO: 2); и HCDR3, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклонального антитела 2218 (например, SEQ ID NO: 3) и (ii) VL, содержащую: LCDR1, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 моноклонального антитела 2218 (например, SEQ ID NO: 4); LCDR2, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 2218 (например, SEQ ID NO: 5); и LCDR3, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 2218 (например, SEQ ID NO: 6).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, содержащую один, два или все из следующих: (i) HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 2218 (например, SEQ ID NO: 7); (ii) HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 2218 (например, SEQ ID NO: 8); или (iii) HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклонального антитела 2218 (например, SEQ ID NO: 3).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VL, содержащую один, два или все из следующих: (i) LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 моноклонального антитела 2218 (например, SEQ ID NO: 4); (ii) LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 2218 (например, SEQ ID NO: 5); или (iii) LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 2218 (например, SEQ ID NO: 6).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит:

(i) VH, содержащую один, два или все из следующего: HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 2218 (например, SEQ ID NO: 7); HCDR2, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 2218 (например, SEQ ID NO: 8); или HCDR3, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклонального антитела 2218 (например, SEQ ID NO: 3) и

(ii) VL, содержащую один, два или все из следующего: LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 моноклонального антитела 2218 (например, SEQ ID NO: 4); LCDR2, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 2218 (например, SEQ ID NO: 5); или LCDR3, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 2218 (например, SEQ ID NO: 6).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит: (i) VH, содержащую: HCDR1, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 2218 (например, SEQ ID NO: 7); HCDR2, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 2218 (например, SEQ ID NO: 8); и HCDR3, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклонального антитела 2218 (например, SEQ ID NO: 3) и (ii) VL, содержащую: LCDR1, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 моноклонального антитела 2218 (например, SEQ ID NO: 4); LCDR2, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологи с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 2218 (например, SEQ ID NO: 5); и LCDR3, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 2218 (например, SEQ ID NO: 6).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VH моноклонального антитела 2218 (например, SEQ ID NO: 9). В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VL, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VL моноклонального антитела 2218 (например, SEQ ID NO: 10).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит: (i) VH, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VH моноклонального антитела 2218 (например, SEQ ID NO: 9); и (ii) VL, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VL моноклонального антитела 2218 (например, SEQ ID NO: 10). В одном варианте осуществления молекула антитела содержит: (i) VH, содержащую аминокислотную последовательность VH моноклонального антитела 2218 (например, SEQ ID NO: 9); и (ii) VL, содержащую аминокислотную последовательность VL моноклонального антитела 2218 (например, SEQ ID NO: 10).

В варианте осуществления молекула антитела представляет собой моноклональное антитело 2218. В одном варианте осуществления моноклональное антитело 2218 представляет собой гуманизированное моноклональное антитело 2218. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность любой из SEQ ID NO: 190-101, VL, содержащую аминокислотную последовательность любой из SEQ ID NO: 202-208, или их обе.

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), где вариабельная область тяжелой цепи содержит три области, определяющие комплементарность тяжелой цепи (HCDR1, HCDR2 и HCDR3), где вариабельная область тяжелой цепи содержит один, два, или все из следующего: (i) HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 2419 (например, SEQ ID NO: 11) или связанное с 2419 антитела; (ii) HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 2419 (например, SEQ ID NO: 12); или (iii) HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклонального антитела 2419 (например, SEQ ID NO: 13).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит вариабельную область легкой цепи (VL), где вариабельная область легкой цепи содержит три области, определяющие комплементарность легкой цепи (LCDR1, LCDR2 и LCDR3), где вариабельная область легкой цепи содержит один, два, или все из следующего: (i) LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 моноклонального антитела 2419 (например, SEQ ID NO: 14); (ii) LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 2419 (например, SEQ ID NO: 15); или (iii) LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 2419 (например, SEQ ID NO: 16).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит:

(i) VH, содержащую один, два или все из следующего: HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 2419 (например, SEQ ID NO: 11); HCDR2, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 2419 (например, SEQ ID NO: 12); или HCDR3, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклонального антитела 2419 (например, SEQ ID NO: 13), и один, два или все из следующего: HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 2419 (например, SEQ ID NO: 11); HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 2419 (например, SEQ ID NO: 12) или связанного с 2419 антитела; или HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклонального антитела 2419 (например, SEQ ID NO: 13) или связанного с 2419 антитела, и

(ii) VL, содержащую один, два или все из следующего: LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 моноклонального антитела 2419 (например, SEQ ID NO: 14); LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 2419 (например, SEQ ID NO: 15) или связанного с 2419 антитела; или LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 2419 (например, SEQ ID NO: 16) или связанного с 2419 антитела.

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит: (i) VH, содержащую: HCDR1, содержащую аминокислотную последовательность HCDR1 моноклонального антитела 2419 (например, SEQ ID NO: 11) или связанного с 2419 антитела; HCDR2, содержащую аминокислотную последовательность HCDR2 моноклонального антитела 2419 (например, SEQ ID NO: 12) или связанного с 2419 антитела; или HCDR3, содержащую аминокислотную последовательность HCDR3 моноклонального антитела 2419 (например, SEQ ID NO: 13) или связанного с 2419 антитела, и (ii) VL, содержащую: LCDR1, содержащую аминокислотную последовательность LCDR1 моноклонального антитела 2419 (например, SEQ ID NO: 14) или связанного с 2419 антитела; LCDR2, содержащую аминокислотную последовательность LCDR2 моноклонального антитела 2419 (например, SEQ ID NO: 15) или связанного с 2419 антитела; и LCDR3, содержащую аминокислотную последовательность LCDR3 моноклонального антитела 2419 (например, SEQ ID NO: 16) или связанного с 2419 антитела.

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), где вариабельная область тяжелой цепи содержит три области, определяющие комплементарность тяжелой цепи (HCDR1, HCDR2 и HCDR3), где вариабельная область тяжелой цепи содержит один, два, или все из следующего: (i) HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 2419 (например, SEQ ID NO: 17) или связанного с 2419 антитела; (ii) HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 2419 (например, SEQ ID NO: 18); или (iii) HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклонального антитела 2419 (например, SEQ ID NO: 13).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит вариабельную область легкой цепи (VL), где вариабельная область легкой цепи содержит три области, определяющие комплементарность легкой цепи (LCDR1, LCDR2 и LCDR3), где вариабельная область легкой цепи содержит один, два, или все из следующего: (i) LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 моноклонального антитела 2419 (например, SEQ ID NO: 14) или связанного с 2419 антитела; (ii) LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 2419 (например, SEQ ID NO: 15); или (iii) LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 2419 (например, SEQ ID NO: 16).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит:

(i) VH, содержащую один, два или все из следующего: HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 2419 (например, SEQ ID NO: 17); HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 2419 (например, SEQ ID NO: 18) или связанного с 2419 антитела; или HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклонального антитела 2419 (например, SEQ ID NO: 13) или связанного с 2419 антитела, и

(ii) VL, содержащую один, два или все из следующего: LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 моноклонального антитела 2419 (например, SEQ ID NO: 14); LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 2419 (например, SEQ ID NO: 15) или связанного с 2419 антитела; или LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 2419 (например, SEQ ID NO: 16) или связанного с 2419 антитела.

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит: (i) VH, содержащую: HCDR1, содержащую аминокислотную последовательность HCDR1 моноклонального антитела 2419 (например, SEQ ID NO: 17) или связанного с 2419 антитела; HCDR2, содержащую аминокислотную последовательность HCDR2 моноклонального антитела 2419 (например, SEQ ID NO: 18) или связанного с 2419 антитела; или HCDR3, содержащую аминокислотную последовательность HCDR3 моноклонального антитела 2419 (например, SEQ ID NO: 13) или связанного с 2419 антитела, и (ii) VL, содержащую: LCDR1, содержащую аминокислотную последовательность LCDR1 моноклонального антитела 2419 (например, SEQ ID NO: 14) или связанного с 2419 антитела; LCDR2, содержащую аминокислотную последовательность LCDR2 моноклонального антитела 2419 (например, SEQ ID NO: 15) или связанного с 2419 антитела; и LCDR3, содержащую аминокислотную последовательность LCDR3 моноклонального антитела 2419 (например, SEQ ID NO: 16) или связанного с 2419 антитела.

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VH моноклонального антитела 2419 (например, SEQ ID NO: 19) или связанного с 2419 антитела. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VL, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VL моноклонального антитела 2419 (например, SEQ ID NO: 20) или связанного с 2419 антитела.

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит: (i) VH, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VH моноклонального антитела 2419 (например, SEQ ID NO: 19) или связанного с 2419 антитела; и (ii) VL, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VL моноклонального антитела 2419 (например, SEQ ID NO: 20) или связанного с 2419 антитела.

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит: (i) VH, содержащую аминокислотную последовательность VH моноклонального антитела 2419 (например, SEQ ID NO: 19) или связанного с 2419 антитела; и (ii) VL, содержащую аминокислотную последовательность VL моноклонального антитела 2419 (например, SEQ ID NO: 20) или связанного с 2419 антитела.

В варианте осуществления молекула антитела представляет собой моноклональное антитело 2419. В одном варианте осуществления моноклональное антитело 2419 представляет собой гуманизированное моноклональное антитело 2419. В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой молекулу антитела, связанную с 2419, например, любое из антител 2419-0105, 2419-0205, 2419-0206, 2419-0406, 2419-0605, 2419-0805, 2419-0806, 2419-1204, 2419-1205, 2419-1210, 2419-1305, 2419-1306, 2419-1310 или 2419-1406, например, как описано в Таблице 1 или 5. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность любой из SEQ ID NO: 209-214, 283, 288, 289, 291, 292, 294, 296 или 317, VL, содержащую аминокислотную последовательность любой из SEQ ID NO: 215-219, 284, 286, 295 или 316 или их обе.

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), где вариабельная область тяжелой цепи содержит три области, определяющие комплементарность тяжелой цепи (HCDR1, HCDR2 и HCDR3), где вариабельная область тяжелой цепи содержит один, два, или все из следующего: (i) HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 2922 (например, SEQ ID NO: 21); (ii) HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 2922 (например, SEQ ID NO: 32); или (iii) HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклонального антитела 2922 (например, SEQ ID NO: 33).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит вариабельную область легкой цепи (VL), где вариабельная область легкой цепи содержит три области, определяющие комплементарность легкой цепи (LCDR1, LCDR2 и LCDR3), где вариабельная область легкой цепи содержит один, два, или все из следующего: (i) LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 моноклонального антитела 2922 (например, SEQ ID NO: 34); (ii) LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 2922 (например, SEQ ID NO: 35); или (iii) LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 2922 (например, SEQ ID NO: 36).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит:

(i) VH, содержащую один, два или все из следующего: HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 2922 (например, SEQ ID NO: 21); HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 2922 (например, SEQ ID NO: 32); или HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклонального антитела 2922 (например, SEQ ID NO: 33) и

(ii) VL, содержащую один, два или все из следующего: LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 моноклонального антитела 2922 (например, SEQ ID NO: 34); LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 2922 (например, SEQ ID NO: 35); или LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 2922 (например, SEQ ID NO: 36).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит: (i) VH, содержащую: HCDR1, содержащую аминокислотную последовательность HCDR1 моноклонального антитела 2922 (например, SEQ ID NO: 21); HCDR2, содержащую аминокислотную последовательность HCDR2 моноклонального антитела 2922 (например, SEQ ID NO: 32); и HCDR3, содержащую аминокислотную последовательность HCDR3 моноклонального антитела 2922 (например, SEQ ID NO: 33) и (ii) VL, содержащую: LCDR1, содержащую аминокислотную последовательность LCDR1 моноклонального антитела 2922 (например, SEQ ID NO: 34); LCDR2, содержащую аминокислотную последовательность LCDR2 моноклонального антитела 2922 (например, SEQ ID NO: 35); и LCDR3, содержащую аминокислотную последовательность LCDR3 моноклонального антитела 2922 (например, SEQ ID NO: 36).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), где вариабельная область тяжелой цепи содержит три области, определяющие комплементарность тяжелой цепи (HCDR1, HCDR2 и HCDR3), где вариабельная область тяжелой цепи содержит один, два, или все из следующего: (i) HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 2922 (например, SEQ ID NO: 37); (ii) HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 2922 (например, SEQ ID NO: 38); или (iii) HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклонального антитела 2922 (например, SEQ ID NO: 33).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит вариабельную область легкой цепи (VL), где вариабельная область легкой цепи содержит три области, определяющие комплементарность легкой цепи (LCDR1, LCDR2 и LCDR3), где вариабельная область легкой цепи содержит один, два, или все из следующего: (i) LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 моноклонального антитела 2922 (например, SEQ ID NO: 34); (ii) LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 2922 (например, SEQ ID NO: 35); или (iii) LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 2922 (например, SEQ ID NO: 36).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит:

(i) VH, содержащую один, два или все из следующего: HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 2922 (например, SEQ ID NO: 37); HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 2922 (например, SEQ ID NO: 38); или HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклонального антитела 2922 (например, SEQ ID NO: 33) и

(ii) VL, содержащую один, два или все из следующего: LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 моноклонального антитела 2922 (например, SEQ ID NO: 34); LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 2922 (например, SEQ ID NO: 35); или LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 2922 (например, SEQ ID NO: 36).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит: (i) VH, содержащую: HCDR1, содержащую аминокислотную последовательность HCDR1 моноклонального антитела 2922 (например, SEQ ID NO: 37); HCDR2, содержащую аминокислотную последовательность HCDR2 моноклонального антитела 2922 (например, SEQ ID NO: 38); и HCDR3, содержащую аминокислотную последовательность HCDR3 моноклонального антитела 2922 (например, SEQ ID NO: 33) и (ii) VL, содержащую: LCDR1, содержащую аминокислотную последовательность LCDR1 моноклонального антитела 2922 (например, SEQ ID NO: 34); LCDR2, содержащую аминокислотную последовательность LCDR2 моноклонального антитела 2922 (например, SEQ ID NO: 35); и LCDR3, содержащую аминокислотную последовательность LCDR3 моноклонального антитела 2922 (например, SEQ ID NO: 36).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VH моноклонального антитела 2922 (например, SEQ ID NO: 39). В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VL, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VL моноклонального антитела 2922 (например, SEQ ID NO: 40).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит: (i) VH, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VH моноклонального антитела 2922 (например, SEQ ID NO: 39); и (ii) VL, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VL моноклонального антитела 2922 (например, SEQ ID NO: 40). В одном варианте осуществления молекула антитела содержит: (i) VH, содержащую аминокислотную последовательность VH моноклонального антитела 2922 (например, SEQ ID NO: 39); и (ii) VL, содержащую аминокислотную последовательность VL моноклонального антитела 2922 (например, SEQ ID NO: 40).

В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой моноклональное антитело 2922. В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой гуманизированное моноклональное антитело 2922.

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), где вариабельная область тяжелой цепи содержит три области, определяющие комплементарность тяжелой цепи (HCDR1, HCDR2 и HCDR3), где вариабельная область тяжелой цепи содержит один, два, или все из следующего: (i) HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 3327 (например, SEQ ID NO: 51); (ii) HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 3327 (например, SEQ ID NO: 52); или (iii) HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклонального антитела 3327 (например, SEQ ID NO: 53).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит вариабельную область легкой цепи (VL), где вариабельная область легкой цепи содержит три области, определяющие комплементарность легкой цепи (LCDR1, LCDR2 и LCDR3), где вариабельная область легкой цепи содержит один, два, или все из следующего: (i) LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 моноклонального антитела 3327 (например, SEQ ID NO: 54); (ii) LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 3327 (например, SEQ ID NO: 55); или (iii) LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 3327 (например, SEQ ID NO: 56).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит:

(i) VH, содержащую один, два или все из следующего: HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 3327 (например, SEQ ID NO: 51); HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 3327 (например, SEQ ID NO: 52); или HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклонального антитела 3327 (например, SEQ ID NO: 53) и

(ii) VL, содержащую один, два или все из следующего: LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 моноклонального антитела 3327 (например, SEQ ID NO: 54); LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 3327 (например, SEQ ID NO: 55); или LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 3327 (например, SEQ ID NO: 56).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит: (i) VH, содержащую: HCDR1, содержащую аминокислотную последовательность HCDR1 моноклонального антитела 3327 (например, SEQ ID NO: 51); HCDR2, содержащую аминокислотную последовательность HCDR2 моноклонального антитела 3327 (например, SEQ ID NO: 52); и HCDR3, содержащую аминокислотную последовательность HCDR3 моноклонального антитела 3327 (например, SEQ ID NO: 53) и (ii) VL, содержащую: LCDR1, содержащую аминокислотную последовательность LCDR1 моноклонального антитела 3327 (например, SEQ ID NO: 54); LCDR2, содержащую аминокислотную последовательность LCDR2 моноклонального антитела 3327 (например, SEQ ID NO: 55); и LCDR3, содержащую аминокислотную последовательность LCDR3 моноклонального антитела 3327 (например, SEQ ID NO: 56).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), где вариабельная область тяжелой цепи содержит три области, определяющие комплементарность тяжелой цепи (HCDR1, HCDR2 и HCDR3), где вариабельная область тяжелой цепи содержит один, два, или все из следующего: (i) HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 3327 (например, SEQ ID NO: 57); (ii) HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 3327 (например, SEQ ID NO: 58); или (iii) HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклонального антитела 3327 (например, SEQ ID NO: 53).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит вариабельную область легкой цепи (VL), где вариабельная область легкой цепи содержит три области, определяющие комплементарность легкой цепи (LCDR1, LCDR2 и LCDR3), где вариабельная область легкой цепи содержит один, два, или все из следующего: (i) LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 моноклонального антитела 3327 (например, SEQ ID NO: 54); (ii) LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 3327 (например, SEQ ID NO: 55); или (iii) LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 3327 (например, SEQ ID NO: 56).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит:

(i) VH, содержащую один, два или все из следующего: HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 3327 (например, SEQ ID NO: 57); HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 3327 (например, SEQ ID NO: 58); или HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклонального антитела 3327 (например, SEQ ID NO: 53) и

(ii) VL, содержащую один, два или все из следующего: LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 моноклонального антитела 3327 (например, SEQ ID NO: 54); LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 3327 (например, SEQ ID NO: 55); или LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 3327 (например, SEQ ID NO: 56).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит: (i) VH, содержащую: HCDR1, содержащую аминокислотную последовательность HCDR1 моноклонального антитела 3327 (например, SEQ ID NO: 57); HCDR2, содержащую аминокислотную последовательность HCDR2 моноклонального антитела 3327 (например, SEQ ID NO: 58); и HCDR3, содержащую аминокислотную последовательность HCDR3 моноклонального антитела 3327 (например, SEQ ID NO: 53) и (ii) VL, содержащую: LCDR1, содержащую аминокислотную последовательность LCDR1 моноклонального антитела 3327 (например, SEQ ID NO: 54); LCDR2, содержащую аминокислотную последовательность LCDR2 моноклонального антитела 3327 (например, SEQ ID NO: 55); и LCDR3, содержащую аминокислотную последовательность LCDR3 моноклонального антитела 3327 (например, SEQ ID NO: 56).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VH моноклонального антитела 3327 (например, SEQ ID NO: 59), В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VL, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VL моноклонального антитела 3327 (например, SEQ ID NO: 60),

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит: (i) VH, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VH моноклонального антитела 3327 (например, SEQ ID NO: 59); и (ii) VL, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VL моноклонального антитела 3327 (например, SEQ ID NO: 60). В одном варианте осуществления молекула антитела содержит: (i) VH, содержащую аминокислотную последовательность VH моноклонального антитела 3327 (например, SEQ ID NO: 59); и (ii) VL, содержащую аминокислотную последовательность VL моноклонального антитела 3327 (например, SEQ ID NO: 60).

В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой моноклональное антитело 3327. В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой гуманизированное моноклональное антитело 3327.

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), где вариабельная область тяжелой цепи содержит три области, определяющие комплементарность тяжелой цепи (HCDR1, HCDR2 и HCDR3), где вариабельная область тяжелой цепи содержит один, два, или все из следующего: (i) HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 3530 (например, SEQ ID NO: 61); (ii) HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 3530 (например, SEQ ID NO: 62); или (iii) HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклонального антитела 3530 (например, SEQ ID NO: 63).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит вариабельную область легкой цепи (VL), где вариабельная область легкой цепи содержит три области, определяющие комплементарность легкой цепи (LCDR1, LCDR2 и LCDR3), где вариабельная область легкой цепи содержит один, два, или все из следующего: (i) LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 моноклонального антитела 3530 (например, SEQ ID NO: 67); (ii) LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 3530 (например, SEQ ID NO: 45); или (iii) LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 3530 (например, SEQ ID NO: 46).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит:

(i) VH, содержащую один, два или все из следующего: HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 3530 (например, SEQ ID NO: 61); HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 3530 (например, SEQ ID NO: 62); или HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклонального антитела 3530 (например, SEQ ID NO: 63) и

(ii) VL, содержащую один, два или все из следующего: LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 моноклонального антитела 3530 (например, SEQ ID NO: 67); LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 3530 (например, SEQ ID NO: 45); или LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 3530 (например, SEQ ID NO: 46).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит: (i) VH, содержащую: HCDR1, содержащую аминокислотную последовательность HCDR1 моноклонального антитела 3530 (например, SEQ ID NO: 61); HCDR2, содержащую аминокислотную последовательность HCDR2 моноклонального антитела 3530 (например, SEQ ID NO: 62); и HCDR3, содержащую аминокислотную последовательность HCDR3 моноклонального антитела 3530 (например, SEQ ID NO: 63) и (ii) VL, содержащую: LCDR1, содержащую аминокислотную последовательность LCDR1 моноклонального антитела 3530 (например, SEQ ID NO: 67); LCDR2, содержащую аминокислотную последовательность LCDR2 моноклонального антитела 3530 (например, SEQ ID NO: 45); и LCDR3, содержащую аминокислотную последовательность LCDR3 моноклонального антитела 3530 (например, SEQ ID NO: 46).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), где вариабельная область тяжелой цепи содержит три области, определяющие комплементарность тяжелой цепи (HCDR1, HCDR2 и HCDR3), где вариабельная область тяжелой цепи содержит один, два, или все из следующего: (i) HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 3530 (например, SEQ ID NO: 64); (ii) HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 3530 (например, SEQ ID NO: 65); или (iii) HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклонального антитела 3530 (например, SEQ ID NO: 63).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит вариабельную область легкой цепи (VL), где вариабельная область легкой цепи содержит три области, определяющие комплементарность легкой цепи (LCDR1, LCDR2 и LCDR3), где вариабельная область легкой цепи содержит один, два, или все из следующего: (i) LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 моноклонального антитела 3530 (например, SEQ ID NO: 67); (ii) LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 3530 (например, SEQ ID NO: 45); или (iii) LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 3530 (например, SEQ ID NO: 46).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит:

(i) VH, содержащую один, два или все из следующего: HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 3530 (например, SEQ ID NO: 64); HCDR2, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 3530 (например, SEQ ID NO: 65); или HCDR3, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклонального антитела 3530 (например, SEQ ID NO: 63) и

(ii) VL, содержащую один, два или все из следующего: LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 моноклонального антитела 3530 (например, SEQ ID NO: 67); LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 3530 (например, SEQ ID NO: 45); или LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 3530 (например, SEQ ID NO: 46).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит: (i) VH, содержащую: HCDR1, содержащую аминокислотную последовательность HCDR1 моноклонального антитела 3530 (например, SEQ ID NO: 64); HCDR2, содержащую аминокислотную последовательность HCDR2 моноклонального антитела 3530 (например, SEQ ID NO: 65); и HCDR3, содержащую аминокислотную последовательность HCDR3 моноклонального антитела 3530 (например, SEQ ID NO: 63) и (ii) VL, содержащую: LCDR1, содержащую аминокислотную последовательность LCDR1 моноклонального антитела 3530 (например, SEQ ID NO: 67); LCDR2, содержащую аминокислотную последовательность LCDR2 моноклонального антитела 3530 (например, SEQ ID NO: 45); и LCDR3, содержащую аминокислотную последовательность LCDR3 моноклонального антитела 3530 (например, SEQ ID NO: 46).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VH моноклонального антитела 3530 (например, SEQ ID NO: 66), В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VL, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VL моноклонального антитела 3530 (например, SEQ ID NO: 70),

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит: (i) VH, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VH моноклонального антитела 3530 (например, SEQ ID NO: 66); и (ii) VL, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VL моноклонального антитела 3530 (например, SEQ ID NO: 70). В одном варианте осуществления молекула антитела содержит: (i) VH, содержащую аминокислотную последовательность VH моноклонального антитела 3530 (например, SEQ ID NO: 66); и (ii) VL, содержащую аминокислотную последовательность VL моноклонального антитела 3530 (например, SEQ ID NO: 70).

В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой моноклональное антитело 3530. В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой гуманизированное моноклональное антитело 3530.

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), где вариабельная область тяжелой цепи содержит три области, определяющие комплементарность тяжелой цепи (HCDR1, HCDR2 и HCDR3), где вариабельная область тяжелой цепи содержит один, два, или все из следующего: (i) HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 3525 (например, SEQ ID NO: 61); (ii) HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 3525 (например, SEQ ID NO: 62); или (iii) HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклонального антитела 3525 (например, SEQ ID NO: 63).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит вариабельную область легкой цепи (VL), где вариабельная область легкой цепи содержит три области, определяющие комплементарность легкой цепи (LCDR1, LCDR2 и LCDR3), где вариабельная область легкой цепи содержит один, два, или все из следующего: (i) LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 моноклонального антитела 3525 (например, SEQ ID NO: 44); (ii) LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 3525 (например, SEQ ID NO: 45); или (iii) LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 3525 (например, SEQ ID NO: 46).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит:

(i) VH, содержащую: HCDR1, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминогруппой кислотную последовательность HCDR1 моноклонального антитела 3525 (например, SEQ ID NO: 61); HCDR2, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 3525 (например, SEQ ID NO: 62); или HCDR3, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклонального антитела 3525 (например, SEQ ID NO: 63) и

(ii) VL, содержащую: LCDR1, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминогруппой кислотная последовательность LCDR1 моноклонального антитела 3525 (например, SEQ ID NO: 44); LCDR2, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 3525 (например, SEQ ID NO: 45); или LCDR3, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 3525 (например, SEQ ID NO: 46).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит: (i) VH, содержащую: HCDR1, содержащую аминокислотную последовательность HCDR1 моноклонального антитела 3525 (например, SEQ ID NO: 61); HCDR2, содержащую аминокислотную последовательность HCDR2 моноклонального антитела 3525 (например, SEQ ID NO: 62); и HCDR3, содержащую аминокислотную последовательность HCDR3 моноклонального антитела 3525 (например, SEQ ID NO: 63) и (ii) VL, содержащую: LCDR1, содержащую аминокислотную последовательность LCDR1 моноклонального антитела 3525 (например, SEQ ID NO: 44); LCDR2, содержащую аминокислотную последовательность LCDR2 моноклонального антитела 3525 (например, SEQ ID NO: 45); и LCDR3, содержащую аминокислотную последовательность LCDR3 моноклонального антитела 3525 (например, SEQ ID NO: 46).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), где вариабельная область тяжелой цепи содержит три области, определяющие комплементарность тяжелой цепи (HCDR1, HCDR2 и HCDR3), где вариабельная область тяжелой цепи содержит один, два, или все из следующего: (i) HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 3525 (например, SEQ ID NO: 64); (ii) HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 3525 (например, SEQ ID NO: 65); или (iii) HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклонального антитела 3525 (например, SEQ ID NO: 63).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит вариабельную область легкой цепи (VL), где вариабельная область легкой цепи содержит три области, определяющие комплементарность легкой цепи (LCDR1, LCDR2 и LCDR3), где вариабельная область легкой цепи содержит один, два, или все из следующего: (i) LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 моноклонального антитела 3525 (например, SEQ ID NO: 44); (ii) LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 3525 (например, SEQ ID NO: 45); или (iii) LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 3525 (например, SEQ ID NO: 46).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит:

(i) VH, содержащую один, два или все из следующего: HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 3525 (например, SEQ ID NO: 64); HCDR2, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 3525 (например, SEQ ID NO: 65); или HCDR3, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклонального антитела 3525 (например, SEQ ID NO: 63) и

(ii) VL, содержащую один, два или все из следующего: LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 моноклонального антитела 3525 (например, SEQ ID NO: 44); LCDR2, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 3525 (например, SEQ ID NO: 45); или LCDR3, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 3525 (например, SEQ ID NO: 46).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит: (i) VH, содержащую: HCDR1, содержащую аминокислотную последовательность HCDR1 моноклонального антитела 3525 (например, SEQ ID NO: 64); HCDR2, содержащую аминокислотную последовательность HCDR2 моноклонального антитела 3525 (например, SEQ ID NO: 65); и HCDR3, содержащую аминокислотную последовательность HCDR3 моноклонального антитела 3525 (например, SEQ ID NO: 63) и (ii) VL, содержащую: LCDR1, содержащую аминокислотную последовательность LCDR1 моноклонального антитела 3525 (например, SEQ ID NO: 44); LCDR2, содержащую аминокислотную последовательность LCDR2 моноклонального антитела 3525 (например, SEQ ID NO: 45); и LCDR3, содержащую аминокислотную последовательность LCDR3 моноклонального антитела 3525 (например, SEQ ID NO: 46).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VH моноклонального антитела 3525 (например, SEQ ID NO: 66), В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VL, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VL моноклонального антитела 3525 (например, SEQ ID NO: 50),

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит: (i) VH, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VH моноклонального антитела 3525 (например, SEQ ID NO: 66); и (ii) VL, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VL моноклонального антитела 3525 (например, SEQ ID NO: 50). В одном варианте осуществления молекула антитела содержит: (i) VH, содержащую аминокислотную последовательность VH моноклонального антитела 3525 (например, SEQ ID NO: 66); и (ii) VL, содержащую аминокислотную последовательность VL моноклонального антитела 3525 (например, SEQ ID NO: 50).

В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой моноклональное антитело 3525. В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой гуманизированное моноклональное антитело 3525.

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), где вариабельная область тяжелой цепи содержит три области, определяющие комплементарность тяжелой цепи (HCDR1, HCDR2 и HCDR3), где вариабельная область тяжелой цепи содержит один, два, или все из следующего: (i) HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 2621 (например, SEQ ID NO: 21); (ii) HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 2621 (например, SEQ ID NO: 22); или (iii) HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклонального антитела 2621 (например, SEQ ID NO: 23).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит вариабельную область легкой цепи (VL), где вариабельная область легкой цепи содержит три области, определяющие комплементарность легкой цепи (LCDR1, LCDR2 и LCDR3), где вариабельная область легкой цепи содержит один, два, или все из следующего: (i) LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 моноклонального антитела 2621 (например, SEQ ID NO: 24); (ii) LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 2621 (например, SEQ ID NO: 25); или (iii) LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 2621 (например, SEQ ID NO: 26).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит:

(i) VH, содержащую один, два или все из следующего: HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 2621 (например, SEQ ID NO: 21); HCDR2, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 2621 (например, SEQ ID NO: 22); или HCDR3, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклонального антитела 2621 (например, SEQ ID NO: 23) и

(ii) VL, содержащую один, два или все из следующего: LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 моноклонального антитела 2621 (например, SEQ ID NO: 24); LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 2621 (например, SEQ ID NO: 25); или LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 2621 (например, SEQ ID NO: 26).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит: (i) VH, содержащую: HCDR1, содержащую аминокислотную последовательность HCDR1 моноклонального антитела 2621 (например, SEQ ID NO: 21); HCDR2, содержащую аминокислотную последовательность HCDR2 моноклонального антитела 2621 (например, SEQ ID NO: 22); и HCDR3, содержащую аминокислотную последовательность HCDR3 моноклонального антитела 2621 (например, SEQ ID NO: 23) и (ii) VL, содержащую: LCDR1, содержащую аминокислотную последовательность LCDR1 моноклонального антитела 2621 (например, SEQ ID NO: 24); LCDR2, содержащую аминокислотную последовательность LCDR2 моноклонального антитела 2621 (например, SEQ ID NO: 25); и LCDR3, содержащую аминокислотную последовательность LCDR3 моноклонального антитела 2621 (например, SEQ ID NO: 26).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), где вариабельная область тяжелой цепи содержит три области, определяющие комплементарность тяжелой цепи (HCDR1, HCDR2 и HCDR3), где вариабельная область тяжелой цепи содержит один, два, или все из следующего: (i) HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 2621 (например, SEQ ID NO: 27); (ii) HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 2621 (например, SEQ ID NO: 28); или (iii) HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклонального антитела 2621 (например, SEQ ID NO: 23).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит вариабельную область легкой цепи (VL), где вариабельная область легкой цепи содержит три области, определяющие комплементарность легкой цепи (LCDR1, LCDR2 и LCDR3), где вариабельная область легкой цепи содержит один, два, или все из следующего: (i) LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 моноклонального антитела 2621 (например, SEQ ID NO: 24); (ii) LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 2621 (например, SEQ ID NO: 25); или (iii) LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 2621 (например, SEQ ID NO: 26).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит:

(i) VH, содержащую один, два или все из следующего: HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 2621 (например, SEQ ID NO: 27); HCDR2, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 2621 (например, SEQ ID NO: 28); или HCDR3, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклонального антитела 2621 (например, SEQ ID NO: 23) и

(ii) VL, содержащую один, два или все из следующего: LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 моноклонального антитела 2621 (например, SEQ ID NO: 24); LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 2621 (например, SEQ ID NO: 25); или LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 2621 (например, SEQ ID NO: 26).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит: (i) VH, содержащую: HCDR1, содержащую аминокислотную последовательность HCDR1 моноклонального антитела 2621 (например, SEQ ID NO: 27); HCDR2, содержащую аминокислотную последовательность HCDR2 моноклонального антитела 2621 (например, SEQ ID NO: 28); и HCDR3, содержащую аминокислотную последовательность HCDR3 моноклонального антитела 2621 (например, SEQ ID NO: 23) и (ii) VL, содержащую: LCDR1, содержащую аминокислотную последовательность LCDR1 моноклонального антитела 2621 (например, SEQ ID NO: 24); LCDR2, содержащую аминокислотную последовательность LCDR2 моноклонального антитела 2621 (например, SEQ ID NO: 25); и LCDR3, содержащую аминокислотную последовательность LCDR3 моноклонального антитела 2621 (например, SEQ ID NO: 26).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VH моноклонального антитела 2621 (например, SEQ ID NO: 29), В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VL, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VL моноклонального антитела 2621 (например, SEQ ID NO: 30).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит: (i) VH, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VH моноклонального антитела 2621 (например, SEQ ID NO: 29); и (ii) VL, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VL моноклонального антитела 2621 (например, SEQ ID NO: 30). В одном варианте осуществления молекула антитела содержит: (i) VH, содержащую аминокислотную последовательность VH моноклонального антитела 2621 (например, SEQ ID NO: 29); и (ii) VL, содержащую аминокислотную последовательность VL моноклонального антитела 2621 (например, SEQ ID NO: 30).

В варианте осуществления молекула антитела представляет собой моноклональное антитело 2621. В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой гуманизированное моноклональное антитело 2621.

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), где вариабельная область тяжелой цепи содержит три области, определяющие комплементарность тяжелой цепи (HCDR1, HCDR2 и HCDR3), где вариабельная область тяжелой цепи содержит один, два, или все из следующего: (i) HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 3125 (например, SEQ ID NO: 11); (ii) HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 3125 (например, SEQ ID NO: 42); или (iii) HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклонального антитела 3125 (например, SEQ ID NO: 43).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит вариабельную область легкой цепи (VL), где вариабельная область легкой цепи содержит три области, определяющие комплементарность легкой цепи (LCDR1, LCDR2 и LCDR3), где вариабельная область легкой цепи содержит один, два, или все из следующего: (i) LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 моноклонального антитела 3125 (например, SEQ ID NO: 44); (ii) LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 3125 (например, SEQ ID NO: 45); или (iii) LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 3125 (например, SEQ ID NO: 46).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит:

(i) VH, содержащую один, два или все из следующего: HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 3125 (например, SEQ ID NO: 11); HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 3125 (например, SEQ ID NO: 42); или HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклонального антитела 3125 (например, SEQ ID NO: 43) и

(ii) VL, содержащую один, два или все из следующего: LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 моноклонального антитела 3125 (например, SEQ ID NO: 44); LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 3125 (например, SEQ ID NO: 45); или LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 3125 (например, SEQ ID NO: 46).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит: (i) VH, содержащую: HCDR1, содержащую аминокислотную последовательность HCDR1 моноклонального антитела 3125 (например, SEQ ID NO: 11); HCDR2, содержащую аминокислотную последовательность HCDR2 моноклонального антитела 3125 (например, SEQ ID NO: 42); и HCDR3, содержащую аминокислотную последовательность HCDR3 моноклонального антитела 3125 (например, SEQ ID NO: 43) и (ii) VL, содержащую: LCDR1, содержащую аминокислотную последовательность LCDR1 моноклонального антитела 3125 (например, SEQ ID NO: 44); LCDR2, содержащую аминокислотную последовательность LCDR2 моноклонального антитела 3125 (например, SEQ ID NO: 45); и LCDR3, содержащую аминокислотную последовательность LCDR3 моноклонального антитела 3125 (например, SEQ ID NO: 46).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), где вариабельная область тяжелой цепи содержит три области, определяющие комплементарность тяжелой цепи (HCDR1, HCDR2 и HCDR3), где вариабельная область тяжелой цепи содержит один, два, или все из следующего: (i) HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 3125 (например, SEQ ID NO: 47); (ii) HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 3125 (например, SEQ ID NO: 48); или (iii) HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклонального антитела 3125 (например, SEQ ID NO: 43).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит вариабельную область легкой цепи (VL), где вариабельная область легкой цепи содержит три области, определяющие комплементарность легкой цепи (LCDR1, LCDR2 и LCDR3), где вариабельная область легкой цепи содержит один, два, или все из следующего: (i) LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 моноклонального антитела 3125 (например, SEQ ID NO: 44); (ii) LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 3125 (например, SEQ ID NO: 45); или (iii) LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 3125 (например, SEQ ID NO: 46).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит:

(i) VH, содержащую один, два или все из следующего: HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 3125 (например, SEQ ID NO: 47); HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 3125 (например, SEQ ID NO: 48); или HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклонального антитела 3125 (например, SEQ ID NO: 43) и

(ii) VL, содержащую один, два или все из следующего: LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 моноклонального антитела 3125 (например, SEQ ID NO: 44); LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 3125 (например, SEQ ID NO: 45); или LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 3125 (например, SEQ ID NO: 46).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит: (i) VH, содержащую: HCDR1, содержащую аминокислотную последовательность HCDR1 моноклонального антитела 3125 (например, SEQ ID NO: 47); HCDR2, содержащую аминокислотную последовательность HCDR2 моноклонального антитела 3125 (например, SEQ ID NO: 48); и HCDR3, содержащую аминокислотную последовательность HCDR3 моноклонального антитела 3125 (например, SEQ ID NO: 43) и (ii) VL, содержащую: LCDR1, содержащую аминокислотную последовательность LCDR1 моноклонального антитела 3125 (например, SEQ ID NO: 44); LCDR2, содержащую аминокислотную последовательность LCDR2 моноклонального антитела 3125 (например, SEQ ID NO: 45); и LCDR3, содержащую аминокислотную последовательность LCDR3 моноклонального антитела 3125 (например, SEQ ID NO: 46).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VH моноклонального антитела 3125 (например, SEQ ID NO: 49). В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VL, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VL моноклонального антитела 3125 (например, SEQ ID NO: 50).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит: (i) VH, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VH моноклонального антитела 3125 (например, SEQ ID NO: 49); и (ii) VL, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VL моноклонального антитела 3125 (например, SEQ ID NO: 50). В одном варианте осуществления молекула антитела содержит: (i) VH, содержащую аминокислотную последовательность VH моноклонального антитела 3125 (например, SEQ ID NO: 49); и (ii) VL, содержащую аминокислотную последовательность VL моноклонального антитела 3125 (например, SEQ ID NO: 50).

В варианте осуществления молекула антитела представляет собой моноклональное антитело 3125. В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой гуманизированное моноклональное антитело 3125.

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), где вариабельная область тяжелой цепи содержит три области, определяющие комплементарность тяжелой цепи (HCDR1, HCDR2 и HCDR3), где вариабельная область тяжелой цепи содержит один, два, или все из следующего: (i) HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 4035 или 4035-062 (например, SEQ ID NO: 93); (ii) HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 4035 или 4035-062 (например, SEQ ID NO: 94); или (iii) HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклонального антитела 4035 или 4035-062 (например, SEQ ID NO: 95).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит вариабельную область легкой цепи (VL), где вариабельная область легкой цепи содержит три области, определяющие комплементарность легкой цепи (LCDR1, LCDR2 и LCDR3), где вариабельная область легкой цепи содержит один, два, или все из следующего: (i) LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 моноклонального антитела 4035 или 4035-062 (например, SEQ ID NO: 96); (ii) LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 4035 или 4035-062 (например, SEQ ID NO: 97); или (iii) LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 4035 или 4035-062 (например, SEQ ID NO: 98).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит:

(i) VH, содержащую один, два или все из следующего: HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 4035 или 4035-062 (например, SEQ ID NO: 93); HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 4035 или 4035-062 (например, SEQ ID NO: 94); или HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклонального антитела 4035 или 4035-062 (например, SEQ ID NO: 95) и

(ii) VL, содержащую один, два или все из следующего: LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 моноклонального антитела 4035 или 4035-062 (например, SEQ ID NO: 96); LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 4035 или 4035-062 (например, SEQ ID NO: 97); или LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 4035 или 4035-062 (например, SEQ ID NO: 98).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит: (i) VH, содержащую: HCDR1, содержащую аминокислотную последовательность HCDR1 моноклонального антитела 4035 или 4035-062 (например, SEQ ID NO: 93); HCDR2, содержащую аминокислотную последовательность HCDR2 моноклонального антитела 4035 или 4035-062 (например, SEQ ID NO: 94); и HCDR3, содержащую аминокислотную последовательность HCDR3 моноклонального антитела 4035 или 4035-062 (например, SEQ ID NO: 95) и (ii) VL, содержащую: LCDR1, содержащую аминокислотную последовательность LCDR1 моноклонального антитела 4035 или 4035-062 (например, SEQ ID NO: 96); LCDR2, содержащую аминокислотную последовательность LCDR2 моноклонального антитела 4035 или 4035-062 (например, SEQ ID NO: 97); и LCDR3, содержащую аминокислотную последовательность LCDR3 моноклонального антитела 4035 или 4035-062 (например, SEQ ID NO: 98).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), где вариабельная область тяжелой цепи содержит три области, определяющие комплементарность тяжелой цепи (HCDR1, HCDR2 и HCDR3), где вариабельная область тяжелой цепи содержит один, два, или все из следующего: (i) HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 4035 или 4035-062 (например, SEQ ID NO: 99); (ii) HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 4035 (например, SEQ ID NO: 100) или 4035-062 (например, SEQ ID NO: 273); или (iii) HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклонального антитела 4035 или 4035-062 (например, SEQ ID NO: 95).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит вариабельную область легкой цепи (VL), где вариабельная область легкой цепи содержит три области, определяющие комплементарность легкой цепи (LCDR1, LCDR2 и LCDR3), где вариабельная область легкой цепи содержит один, два, или все из следующего: (i) LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 моноклонального антитела 4035 или 4035-062 (например, SEQ ID NO: 96); (ii) LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 4035 или 4035-062 (например, SEQ ID NO: 97); или (iii) LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 4035 или 4035-062 (например, SEQ ID NO: 98).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит:

(i) VH, содержащую один, два или все из следующего: HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 4035 или 4035-062 (например, SEQ ID NO: 99); HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 4035 (например, SEQ ID NO: 100) или 4035-062 (например, SEQ ID NO: 273); или HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклонального антитела 4035 или 4035-062 (например, SEQ ID NO: 95) и

(ii) VL, содержащую один, два или все из следующего: LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 моноклонального антитела 4035 или 4035-062 (например, SEQ ID NO: 96); LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 4035 или 4035-062 (например, SEQ ID NO: 97); или LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 4035 или 4035-062 (например, SEQ ID NO: 98).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит: (i) VH, содержащую: HCDR1, содержащую аминокислотную последовательность HCDR1 моноклонального антитела 4035 или 4035-062 (например, SEQ ID NO: 99); HCDR2, содержащую аминокислотную последовательность HCDR2 моноклонального антитела 4035 (например, SEQ ID NO: 100) или 4035-062 (например, SEQ ID NO: 273); и HCDR3, содержащую аминокислотную последовательность HCDR3 моноклонального антитела 4035 или 4035-062 (например, SEQ ID NO: 95) и (ii) VL, содержащую: LCDR1, содержащую аминокислотную последовательность LCDR1 моноклонального антитела 4035 или 4035-062 (например, SEQ ID NO: 96); LCDR2, содержащую аминокислотную последовательность LCDR2 моноклонального антитела 4035 или 4035-062 (например, SEQ ID NO: 97); и LCDR3, содержащую аминокислотную последовательность LCDR3 моноклонального антитела 4035 или 4035-062 (например, SEQ ID NO: 98).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VH моноклонального антитела 4035 (например, SEQ ID NO: 101) или 4035-062 (например, SEQ ID NO: 225). В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VL, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VL моноклонального антитела 4035 (например, SEQ ID NO: 102) или 4035-062 (например, SEQ ID NO: 229).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит: (i) VH, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VH моноклонального антитела 4035 (например, SEQ ID NO: 101) или 4035-062 (например, SEQ ID NO: 225); и (ii) VL, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VL моноклонального антитела 4035 (например, SEQ ID NO: 102) или 4035-062 (например, SEQ ID NO: 229). В одном варианте осуществления молекула антитела содержит: (i) VH, содержащую аминокислотную последовательность VH моноклонального антитела 4035 (например, SEQ ID NO: 101) или 4035-062 (например, SEQ ID NO: 225); и (ii) VL, содержащую аминокислотную последовательность VL моноклонального антитела 4035 (например, SEQ ID NO: 102) или 4035-062 (например, SEQ ID NO: 229).

В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой моноклональное антитело 4035. В одном варианте осуществления моноклональное антитело 4035 представляет собой гуманизированное моноклональное антитело 4035 (например, антитело 4035-062). В другом варианте осуществления молекула антитела представляет собой антитело 4035-062. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность любой из SEQ ID NO: 220-227 или 262-265, VL, содержащую аминокислотную последовательность любой из SEQ ID NO: 228-234, или их обе.

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), где вариабельная область тяжелой цепи содержит три области, определяющие комплементарность тяжелой цепи (HCDR1, HCDR2 и HCDR3), где вариабельная область тяжелой цепи содержит один, два, или все из следующего: (i) HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 3934 (например, SEQ ID NO: 103); (ii) HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 3934 (например, SEQ ID NO: 104); или (iii) HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклонального антитела 3934 (например, SEQ ID NO: 105).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит вариабельную область легкой цепи (VL), где вариабельная область легкой цепи содержит три области, определяющие комплементарность легкой цепи (LCDR1, LCDR2 и LCDR3), где вариабельная область легкой цепи содержит один, два, или все из следующего: (i) LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 моноклонального антитела 3934 (например, SEQ ID NO: 106); (ii) LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 3934 (например, SEQ ID NO: 107); или (iii) LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 3934 (например, SEQ ID NO: 108).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит:

(i) VH, содержащую один, два или все из следующего: HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 3934 (например, SEQ ID NO: 103); HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 3934 (например, SEQ ID NO: 104); или HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклонального антитела 3934 (например, SEQ ID NO: 105) и

(ii) VL, содержащую один, два или все из следующего: LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 моноклонального антитела 3934 (например, SEQ ID NO: 106); LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 3934 (например, SEQ ID NO: 107); или LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 3934 (например, SEQ ID NO: 108).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит: (i) VH, содержащую: HCDR1, содержащую аминокислотную последовательность HCDR1 моноклонального антитела 3934 (например, SEQ ID NO: 103); HCDR2, содержащую аминокислотную последовательность HCDR2 моноклонального антитела 3934 (например, SEQ ID NO: 104); и HCDR3, содержащую аминокислотную последовательность HCDR3 моноклонального антитела 3934 (например, SEQ ID NO: 105) и (ii) VL, содержащую: LCDR1, содержащую аминокислотную последовательность LCDR1 моноклонального антитела 3934 (например, SEQ ID NO: 106); LCDR2, содержащую аминокислотную последовательность LCDR2 моноклонального антитела 3934 (например, SEQ ID NO: 107); и LCDR3, содержащую аминокислотную последовательность LCDR3 моноклонального антитела 3934 (например, SEQ ID NO: 108).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), где вариабельная область тяжелой цепи содержит три области, определяющие комплементарность тяжелой цепи (HCDR1, HCDR2 и HCDR3), где вариабельная область тяжелой цепи содержит один, два, или все из следующего: (i) HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 3934 (например, SEQ ID NO: 109); (ii) HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 3934 (например, SEQ ID NO: 110); или (iii) HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклонального антитела 3934 (например, SEQ ID NO: 105).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит вариабельную область легкой цепи (VL), где вариабельная область легкой цепи содержит три области, определяющие комплементарность легкой цепи (LCDR1, LCDR2 и LCDR3), где вариабельная область легкой цепи содержит один, два, или все из следующего: (i) LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 моноклонального антитела 3934 (например, SEQ ID NO: 106); (ii) LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 3934 (например, SEQ ID NO: 107); или (iii) LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 3934 (например, SEQ ID NO: 108).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит:

(i) VH, содержащую один, два или все из следующего: HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 3934 (например, SEQ ID NO: 109); HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 3934 (например, SEQ ID NO: 110); или HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклонального антитела 3934 (например, SEQ ID NO: 105) и

(ii) VL, содержащую один, два или все из следующего: LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 моноклонального антитела 3934 (например, SEQ ID NO: 106); LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 3934 (например, SEQ ID NO: 107); или LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 3934 (например, SEQ ID NO: 108).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит: (i) VH, содержащую: HCDR1, содержащую аминокислотную последовательность HCDR1 моноклонального антитела 3934 (например, SEQ ID NO: 109); HCDR2, содержащую аминокислотную последовательность HCDR2 моноклонального антитела 3934 (например, SEQ ID NO: 110); и HCDR3, содержащую аминокислотную последовательность HCDR3 моноклонального антитела 3934 (например, SEQ ID NO: 105) и (ii) VL, содержащую: LCDR1, содержащую аминокислотную последовательность LCDR1 моноклонального антитела 3934 (например, SEQ ID NO: 106); LCDR2, содержащую аминокислотную последовательность LCDR2 моноклонального антитела 3934 (например, SEQ ID NO: 107); и LCDR3, содержащую аминокислотную последовательность LCDR3 моноклонального антитела 3934 (например, SEQ ID NO: 108).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VH моноклонального антитела 3934 (например, SEQ ID NO: 111), В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VL, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VL моноклонального антитела 3934 (например, SEQ ID NO: 112),

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит: (i) VH, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VH моноклонального антитела 3934 (например, SEQ ID NO: 111); и (ii) VL, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VL моноклонального антитела 3934 (например, SEQ ID NO: 112). В одном варианте осуществления молекула антитела содержит: (i) VH, содержащую аминокислотную последовательность VH моноклонального антитела 3934 (например, SEQ ID NO: 111); и (ii) VL, содержащую аминокислотную последовательность VL моноклонального антитела 3934 (например, SEQ ID NO: 112).

В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой моноклональное антитело 3934. В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой гуманизированное моноклональное антитело 3934.

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), где вариабельная область тяжелой цепи содержит три области, определяющие комплементарность тяжелой цепи (HCDR1, HCDR2 и HCDR3), где вариабельная область тяжелой цепи содержит один, два, или все из следующего: (i) HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 3833 (например, SEQ ID NO: 112); (ii) HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 3833 (например, SEQ ID NO: 113); или (iii) HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклонального антитела 3833 (например, SEQ ID NO: 114).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит вариабельную область легкой цепи (VL), где вариабельная область легкой цепи содержит три области, определяющие комплементарность легкой цепи (LCDR1, LCDR2 и LCDR3), где вариабельная область легкой цепи содержит один, два, или все из следующего: (i) LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 моноклонального антитела 3833 (например, SEQ ID NO: 115); (ii) LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 3833 (например, SEQ ID NO: 116); или (iii) LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 3833 (например, SEQ ID NO: 117).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит:

(i) VH, содержащую один, два или все из следующего: HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 3833 (например, SEQ ID NO: 113); HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 3833 (например, SEQ ID NO: 114); или HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклонального антитела 3833 (например, SEQ ID NO: 115) и

(ii) VL, содержащую один, два или все из следующего: LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 моноклонального антитела 3833 (например, SEQ ID NO: 116); LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 3833 (например, SEQ ID NO: 117); или LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 3833 (например, SEQ ID NO: 118).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит: (i) VH, содержащую: HCDR1, содержащую аминокислотную последовательность HCDR1 моноклонального антитела 3833 (например, SEQ ID NO: 113); HCDR2, содержащую аминокислотную последовательность HCDR2 моноклонального антитела 3833 (например, SEQ ID NO: 114); и HCDR3, содержащую аминокислотную последовательность HCDR3 моноклонального антитела 3833 (например, SEQ ID NO: 115) и (ii) VL, содержащую: LCDR1, содержащую аминокислотную последовательность LCDR1 моноклонального антитела 3833 (например, SEQ ID NO: 116); LCDR2, содержащую аминокислотную последовательность LCDR2 моноклонального антитела 3833 (например, SEQ ID NO: 117); и LCDR3, содержащую аминокислотную последовательность LCDR3 моноклонального антитела 3833 (например, SEQ ID NO: 118).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), где вариабельная область тяжелой цепи содержит три области, определяющие комплементарность тяжелой цепи (HCDR1, HCDR2 и HCDR3), где вариабельная область тяжелой цепи содержит один, два, или все из следующего: (i) HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 3833 (например, SEQ ID NO: 119); (ii) HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 3833 (например, SEQ ID NO: 120); или (iii) HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклонального антитела 3833 (например, SEQ ID NO: 115).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит вариабельную область легкой цепи (VL), где вариабельная область легкой цепи содержит три области, определяющие комплементарность легкой цепи (LCDR1, LCDR2 и LCDR3), где вариабельная область легкой цепи содержит один, два, или все из следующего: (i) LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 моноклонального антитела 3833 (например, SEQ ID NO: 116); (ii) LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 3833 (например, SEQ ID NO: 117); или (iii) LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 3833 (например, SEQ ID NO: 118).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит:

(i) VH, содержащую один, два или все из следующего: HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 3833 (например, SEQ ID NO: 119); HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 3833 (например, SEQ ID NO: 120); или HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклонального антитела 3833 (например, SEQ ID NO: 115) и

(ii) VL, содержащую один, два или все из следующего: LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 моноклонального антитела 3833 (например, SEQ ID NO: 116); LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 3833 (например, SEQ ID NO: 117); или LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 3833 (например, SEQ ID NO: 118).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит: (i) VH, содержащую: HCDR1, содержащую аминокислотную последовательность HCDR1 моноклонального антитела 3833 (например, SEQ ID NO: 119); HCDR2, содержащую аминокислотную последовательность HCDR2 моноклонального антитела 3833 (например, SEQ ID NO: 120); и HCDR3, содержащую аминокислотную последовательность HCDR3 моноклонального антитела 3833 (например, SEQ ID NO: 115) и (ii) VL, содержащую: LCDR1, содержащую аминокислотную последовательность LCDR1 моноклонального антитела 3833 (например, SEQ ID NO: 116); LCDR2, содержащую аминокислотную последовательность LCDR2 моноклонального антитела 3833 (например, SEQ ID NO: 117); и LCDR3, содержащую аминокислотную последовательность LCDR3 моноклонального антитела 3833 (например, SEQ ID NO: 118).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VH моноклонального антитела 3833 (например, SEQ ID NO: 121), В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VL, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VL моноклонального антитела 3833 (например, SEQ ID NO: 122),

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит: (i) VH, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VH моноклонального антитела 3833 (например, SEQ ID NO: 121); и (ii) VL, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VL моноклонального антитела 3833 (например, SEQ ID NO: 122). В одном варианте осуществления молекула антитела содержит: (i) VH, содержащую аминокислотную последовательность VH моноклонального антитела 3833 (например, SEQ ID NO: 121); и (ii) VL, содержащую аминокислотную последовательность VL моноклонального антитела 3833 (например, SEQ ID NO: 122).

В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой моноклональное антитело 3833. В одном варианте осуществления моноклональное антитело 3833 представляет собой гуманизированное моноклональное антитело 3833. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность любой из SEQ ID NO: 246-250, VL, содержащую аминокислотную последовательность любой из SEQ ID NO: 251-253, или их обе.

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), где вариабельная область тяжелой цепи содержит три области, определяющие комплементарность тяжелой цепи (HCDR1, HCDR2 и HCDR3), где вариабельная область тяжелой цепи содержит один, два, или все из следующего: (i) HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 3631 (например, SEQ ID NO: 123); (ii) HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 3631 (например, SEQ ID NO: 124); или (iii) HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклонального антитела 3631 (например, SEQ ID NO: 125).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит вариабельную область легкой цепи (VL), где вариабельная область легкой цепи содержит три области, определяющие комплементарность легкой цепи (LCDR1, LCDR2 и LCDR3), где вариабельная область легкой цепи содержит один, два, или все из следующего: (i) LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 моноклонального антитела 3631 (например, SEQ ID NO: 126); (ii) LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 3631 (например, SEQ ID NO: 127); или (iii) LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 3631 (например, SEQ ID NO: 128).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит:

(i) VH, содержащую один, два или все из следующего: HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 3631 (например, SEQ ID NO: 123); HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 3631 (например, SEQ ID NO: 124); или HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклонального антитела 3631 (например, SEQ ID NO: 125) и

(ii) VL, содержащую один, два или все из следующего: LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 моноклонального антитела 3631 (например, SEQ ID NO: 126); LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 3631 (например, SEQ ID NO: 127); или LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 3631 (например, SEQ ID NO: 128).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит: (i) VH, содержащую: HCDR1, содержащую аминокислотную последовательность HCDR1 моноклонального антитела 3631 (например, SEQ ID NO: 123); HCDR2, содержащую аминокислотную последовательность HCDR2 моноклонального антитела 3631 (например, SEQ ID NO: 124); и HCDR3, содержащую аминокислотную последовательность HCDR3 моноклонального антитела 3631 (например, SEQ ID NO: 125) и (ii) VL, содержащую: LCDR1, содержащую аминокислотную последовательность LCDR1 моноклонального антитела 3631 (например, SEQ ID NO: 126); LCDR2, содержащую аминокислотную последовательность LCDR2 моноклонального антитела 3631 (например, SEQ ID NO: 127); и LCDR3, содержащую аминокислотную последовательность LCDR3 моноклонального антитела 3631 (например, SEQ ID NO: 128).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), где вариабельная область тяжелой цепи содержит три области, определяющие комплементарность тяжелой цепи (HCDR1, HCDR2 и HCDR3), где вариабельная область тяжелой цепи содержит один, два, или все из следующего: (i) HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 3631 (например, SEQ ID NO: 129); (ii) HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 3631 (например, SEQ ID NO: 130); или (iii) HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклонального антитела 3631 (например, SEQ ID NO: 125).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит вариабельную область легкой цепи (VL), где вариабельная область легкой цепи содержит три области, определяющие комплементарность легкой цепи (LCDR1, LCDR2 и LCDR3), где вариабельная область легкой цепи содержит один, два, или все из следующего: (i) LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 моноклонального антитела 3631 (например, SEQ ID NO: 126); (ii) LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 3631 (например, SEQ ID NO: 127); или (iii) LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 3631 (например, SEQ ID NO: 128).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит:

(i) VH, содержащую один, два или все из следующего: HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 3631 (например, SEQ ID NO: 129); HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 3631 (например, SEQ ID NO: 130); или HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклонального антитела 3631 (например, SEQ ID NO: 125) и

(ii) VL, содержащую один, два или все из следующего: LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 моноклонального антитела 3631 (например, SEQ ID NO: 126); LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 3631 (например, SEQ ID NO: 45); или LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 3631 (например, SEQ ID NO: 128).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит: (i) VH, содержащую: HCDR1, содержащую аминокислотную последовательность HCDR1 моноклонального антитела 3631 (например, SEQ ID NO: 129); HCDR2, содержащую аминокислотную последовательность HCDR2 моноклонального антитела 3631 (например, SEQ ID NO: 130); и HCDR3, содержащую аминокислотную последовательность HCDR3 моноклонального антитела 3631 (например, SEQ ID NO: 125) и (ii) VL, содержащую: LCDR1, содержащую аминокислотную последовательность LCDR1 моноклонального антитела 3631 (например, SEQ ID NO: 126); LCDR2, содержащую аминокислотную последовательность LCDR2 моноклонального антитела 3631 (например, SEQ ID NO: 127); и LCDR3, содержащую аминокислотную последовательность LCDR3 моноклонального антитела 3631 (например, SEQ ID NO: 128).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VH моноклонального антитела 3631 (например, SEQ ID NO: 131), В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VL, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VL моноклонального антитела 3631 (например, SEQ ID NO: 132),

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит: (i) VH, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VH моноклонального антитела 3631 (например, SEQ ID NO: 131); и (ii) VL, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VL моноклонального антитела 3631 (например, SEQ ID NO: 132). В одном варианте осуществления молекула антитела содержит: (i) VH, содержащую аминокислотную последовательность VH моноклонального антитела 3631 (например, SEQ ID NO: 131); и (ii) VL, содержащую аминокислотную последовательность VL моноклонального антитела 3631 (например, SEQ ID NO: 132).

В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой моноклональное антитело 3631. В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой гуманизированное моноклональное антитело 3631.

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), где вариабельная область тяжелой цепи содержит три области, определяющие комплементарность тяжелой цепи (HCDR1, HCDR2 и HCDR3), где вариабельная область тяжелой цепи содержит один, два, или все из следующего: (i) HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 3732 (например, SEQ ID NO: 133); (ii) HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 3732 (например, SEQ ID NO: 134); или (iii) HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклонального антитела 3732 (например, SEQ ID NO: 135).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит вариабельную область легкой цепи (VL), где вариабельная область легкой цепи содержит три области, определяющие комплементарность легкой цепи (LCDR1, LCDR2 и LCDR3), где вариабельная область легкой цепи содержит один, два, или все из следующего: (i) LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 моноклонального антитела 3732 (например, SEQ ID NO: 136); (ii) LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 3732 (например, SEQ ID NO: 127); или (iii) LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 3732 (например, SEQ ID NO: 137).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит:

(i) VH, содержащую один, два или все из следующего: HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 3732 (например, SEQ ID NO: 133); HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 3732 (например, SEQ ID NO: 134); или HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклонального антитела 3732 (например, SEQ ID NO: 135) и

(ii) VL, содержащую один, два или все из следующего: LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 моноклонального антитела 3732 (например, SEQ ID NO: 136); LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 3732 (например, SEQ ID NO: 127); или LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 3732 (например, SEQ ID NO: 137).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит: (i) VH, содержащую: HCDR1, содержащую аминокислотную последовательность HCDR1 моноклонального антитела 3732 (например, SEQ ID NO: 133); HCDR2, содержащую аминокислотную последовательность HCDR2 моноклонального антитела 3732 (например, SEQ ID NO: 134); и HCDR3, содержащую аминокислотную последовательность HCDR3 моноклонального антитела 3732 (например, SEQ ID NO: 135) и (ii) VL, содержащую: LCDR1, содержащую аминокислотную последовательность LCDR1 моноклонального антитела 3732 (например, SEQ ID NO: 136); LCDR2, содержащую аминокислотную последовательность LCDR2 моноклонального антитела 3732 (например, SEQ ID NO: 127); и LCDR3, содержащую аминокислотную последовательность LCDR3 моноклонального антитела 3732 (например, SEQ ID NO: 137).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), где вариабельная область тяжелой цепи содержит три области, определяющие комплементарность тяжелой цепи (HCDR1, HCDR2 и HCDR3), где вариабельная область тяжелой цепи содержит один, два, или все из следующего: (i) HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 3732 (например, SEQ ID NO: 138); (ii) HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 3732 (например, SEQ ID NO: 139); или (iii) HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклонального антитела 3732 (например, SEQ ID NO: 135).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит вариабельную область легкой цепи (VL), где вариабельная область легкой цепи содержит три области, определяющие комплементарность легкой цепи (LCDR1, LCDR2 и LCDR3), где вариабельная область легкой цепи содержит один, два, или все из следующего: (i) LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 моноклонального антитела 3732 (например, SEQ ID NO: 136); (ii) LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 3732 (например, SEQ ID NO: 127); или (iii) LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 3732 (например, SEQ ID NO: 137).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит:

(i) VH, содержащую один, два или все из следующего: HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 3732 (например, SEQ ID NO: 138); HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 3732 (например, SEQ ID NO: 139); или HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклонального антитела 3732 (например, SEQ ID NO: 135) и

(ii) VL, содержащую один, два или все из следующего: LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 моноклонального антитела 3732 (например, SEQ ID NO: 136); LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 3732 (например, SEQ ID NO: 127); или LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 3732 (например, SEQ ID NO: 137).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит: (i) VH, содержащую: HCDR1, содержащую аминокислотную последовательность HCDR1 моноклонального антитела 3732 (например, SEQ ID NO: 138); HCDR2, содержащую аминокислотную последовательность HCDR2 моноклонального антитела 3732 (например, SEQ ID NO: 139); и HCDR3, содержащую аминокислотную последовательность HCDR3 моноклонального антитела 3732 (например, SEQ ID NO: 135) и (ii) VL, содержащую: LCDR1, содержащую аминокислотную последовательность LCDR1 моноклонального антитела 3732 (например, SEQ ID NO: 136); LCDR2, содержащую аминокислотную последовательность LCDR2 моноклонального антитела 3732 (например, SEQ ID NO: 127); и LCDR3, содержащую аминокислотную последовательность LCDR3 моноклонального антитела 3732 (например, SEQ ID NO: 137).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VH моноклонального антитела 3732 (например, SEQ ID NO: 140), В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VL, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VL моноклонального антитела 3732 (например, SEQ ID NO: 141).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит: (i) VH, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VH моноклонального антитела 3732 (например, SEQ ID NO: 140); и (ii) VL, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VL моноклонального антитела 3732 (например, SEQ ID NO: 141). В одном варианте осуществления молекула антитела содержит: (i) VH, содержащую аминокислотную последовательность VH моноклонального антитела 3732 (например, SEQ ID NO: 140); и (ii) VL, содержащую аминокислотную последовательность VL моноклонального антитела 3732 (например, SEQ ID NO: 141).

В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой моноклональное антитело 3732. В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой гуманизированное моноклональное антитело 3732.

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), где вариабельная область тяжелой цепи содержит три области, определяющие комплементарность тяжелой цепи (HCDR1, HCDR2 и HCDR3), где вариабельная область тяжелой цепи содержит один, два, или все из следующего: (i) HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 4338 (например, SEQ ID NO: 11); (ii) HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 4338 (например, SEQ ID NO: 142); или (iii) HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклонального антитела 4338 (например, SEQ ID NO: 143).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит вариабельную область легкой цепи (VL), где вариабельная область легкой цепи содержит три области, определяющие комплементарность легкой цепи (LCDR1, LCDR2 и LCDR3), где вариабельная область легкой цепи содержит один, два, или все из следующего: (i) LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 моноклонального антитела 4338 (например, SEQ ID NO: 144 или 146); (ii) LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 4338 (например, SEQ ID NO: 107 или 147); или (iii) LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 4338 (например, SEQ ID NO: 145 или 148).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит:

(i) VH, содержащую один, два или все из следующего: HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 4338 (например, SEQ ID NO: 11); HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 4338 (например, SEQ ID NO: 142); или HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклонального антитела 4338 (например, SEQ ID NO: 143) и

(ii) VL, содержащую один, два или все из следующего: LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 моноклонального антитела 4338 (например, SEQ ID NO: 144 или 146); LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 4338 (например, SEQ ID NO: 107 или 147); или LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 4338 (например, SEQ ID NO: 145 или 148).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит: (i) VH, содержащую: HCDR1, содержащую аминокислотную последовательность HCDR1 моноклонального антитела 4338 (например, SEQ ID NO: 11); HCDR2, содержащую аминокислотную последовательность HCDR2 моноклонального антитела 4338 (например, SEQ ID NO: 142); и HCDR3, содержащую аминокислотную последовательность HCDR3 моноклонального антитела 4338 (например, SEQ ID NO: 143) и (ii) VL, содержащую: LCDR1, содержащую аминокислотную последовательность LCDR1 моноклонального антитела 4338 (например, SEQ ID NO: 144 или 146); LCDR2, содержащую аминокислотную последовательность LCDR2 моноклонального антитела 4338 (например, SEQ ID NO: 107 или 147); и LCDR3, содержащую аминокислотную последовательность LCDR3 моноклонального антитела 4338 (например, SEQ ID NO: 145 или 148).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), где вариабельная область тяжелой цепи содержит три области, определяющие комплементарность тяжелой цепи (HCDR1, HCDR2 и HCDR3), где вариабельная область тяжелой цепи содержит один, два, или все из следующего: (i) HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 4338 (например, SEQ ID NO: 149); (ii) HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 4338 (например, SEQ ID NO: 150); или (iii) HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклонального антитела 4338 (например, SEQ ID NO: 143).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит вариабельную область легкой цепи (VL), где вариабельная область легкой цепи содержит три области, определяющие комплементарность легкой цепи (LCDR1, LCDR2 и LCDR3), где вариабельная область легкой цепи содержит один, два, или все из следующего: (i) LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 моноклонального антитела 4338 (например, SEQ ID NO: 144 или 146); (ii) LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 4338 (например, SEQ ID NO: 107 или 147); или (iii) LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 4338 (например, SEQ ID NO: 145 или 148).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит:

(i) VH, содержащую один, два или все из следующего: HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 4338 (например, SEQ ID NO: 149); HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 4338 (например, SEQ ID NO: 150); или HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклонального антитела 4338 (например, SEQ ID NO: 143) и

(ii) VL, содержащую один, два или все из следующего: LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 моноклонального антитела 4338 (например, SEQ ID NO: 144 или 146); LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 4338 (например, SEQ ID NO: 107 или 147); или LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 4338 (например, SEQ ID NO: 145 или 148).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит: (i) VH, содержащую: HCDR1, содержащую аминокислотную последовательность HCDR1 моноклонального антитела 4338 (например, SEQ ID NO: 149); HCDR2, содержащую аминокислотную последовательность HCDR2 моноклонального антитела 4338 (например, SEQ ID NO: 150); и HCDR3, содержащую аминокислотную последовательность HCDR3 моноклонального антитела 4338 (например, SEQ ID NO: 143) и (ii) VL, содержащую: LCDR1, содержащую аминокислотную последовательность LCDR1 моноклонального антитела 4338 (например, SEQ ID NO: 144 или 146); LCDR2, содержащую аминокислотную последовательность LCDR2 моноклонального антитела 4338 (например, SEQ ID NO: 107 или 147); и LCDR3, содержащую аминокислотную последовательность LCDR3 моноклонального антитела 4338 (например, SEQ ID NO: 145 или 148).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VH моноклонального антитела 4338 (например, SEQ ID NO: 151), В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VL, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VL моноклонального антитела 4338 (например, SEQ ID NO: 152 или 153).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит: (i) VH, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VH моноклонального антитела 4338 (например, SEQ ID NO: 151); и (ii) VL, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VL моноклонального антитела 4338 (например, SEQ ID NO: 152 или 153). В одном варианте осуществления молекула антитела содержит: (i) VH, содержащую аминокислотную последовательность VH моноклонального антитела 4338 (например, SEQ ID NO: 150); и (ii) VL, содержащую аминокислотную последовательность VL моноклонального антитела 4338 (например, SEQ ID NO: 152 или 153).

В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой моноклональное антитело 4338. В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой гуманизированное моноклональное антитело 4338.

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), где вариабельная область тяжелой цепи содержит три области, определяющие комплементарность тяжелой цепи (HCDR1, HCDR2 и HCDR3), где вариабельная область тяжелой цепи содержит один, два, или все из следующего: (i) HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 4540, 4540-063 или 4540-033 (например, SEQ ID NO: 154); (ii) HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклональных антител 4540, 4540-063 или 4540-033 (например, SEQ ID NO: 155); или (iii) HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклональных антител 4540, 4540-063 или 4540-033 (например, SEQ ID NO: 156).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит вариабельную область легкой цепи (VL), где вариабельная область легкой цепи содержит три области, определяющие комплементарность легкой цепи (LCDR1, LCDR2 и LCDR3), где вариабельная область легкой цепи содержит один, два, или все из следующего: (i) LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 моноклонального антитела 4540 (например, SEQ ID NO: 116), 4540-063 (например, SEQ ID NO: 274) или 4540-033 (например, SEQ ID NO: 274); (ii) LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 4540 (например, SEQ ID NO: 157), 4540-063 (например, SEQ ID NO: 275) или 4540-033 (например, SEQ ID NO: 275); или (iii) LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 4540, 4540-063 или 4540-033 (например, SEQ ID NO: 158).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит:

(i) VH, содержащую один, два или все из следующего: HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 4540, 4540-063 или 4540-033 (например, SEQ ID NO: 154); HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 4540, 4540-063 или 4540-033 (например, SEQ ID NO: 155); или HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклонального антитела 4540, 4540-063 или 4540-033 (например, SEQ ID NO: 156) и

(ii) VL, содержащую один, два или все из следующего: LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 моноклонального антитела 4540 (например, SEQ ID NO: 116), 4540-063 (например, SEQ ID NO: 274) или 4540-033 (например, SEQ ID NO: 274); LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 4540 (например, SEQ ID NO: 157), 4540-063 (например, SEQ ID NO: 275) или 4540-033 (например, SEQ ID NO: 275); или LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 4540, 4540-063 или 4540-033 (например, SEQ ID NO: 158).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит: (i) VH, содержащую три области, определяющие комплементарность тяжелой цепи (HCDR1, HCDR2 и HCDR3), где вариабельная область тяжелой цепи содержит: HCDR1 содержит аминокислотную последовательность HCDR1 моноклональной антитело 4540, 4540-063 или 4540-033 (например, SEQ ID NO: 154); HCDR2, содержащую аминокислотную последовательность HCDR2 моноклонального антитела 4540, 4540-063 или 4540-033 (например, SEQ ID NO: 155); и HCDR3, содержащую аминокислотную последовательность HCDR3 моноклонального антитела 4540, 4540-063 или 4540-033 (например, SEQ ID NO: 156) и (ii) вариабельную область легкой цепи (VL), в котором свет (LCDR1, LCDR2 и LCDR3), где вариабельная область легкой цепи содержит: LCDR1, содержащую аминокислотную последовательность LCDR1 моноклонального антитела 4540 (например, SEQ ID NO: 116), 4540-063 (например, SEQ ID NO: 274) или 4540-033 (например, SEQ ID NO: 274); LCDR2, содержащую аминокислотную последовательность LCDR2 моноклонального антитела 4540 (например, SEQ ID NO: 157), 4540-063 (например, SEQ ID NO: 275) или 4540-033 (например, SEQ ID NO: 275); и LCDR3, содержащую аминокислотную последовательность LCDR3 моноклонального антитела 4540, 4540-063 или 4540-033 (например, SEQ ID NO: 158).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), где вариабельная область тяжелой цепи содержит три области, определяющие комплементарность тяжелой цепи (HCDR1, HCDR2 и HCDR3), где вариабельная область тяжелой цепи содержит один, два, или все из следующего: (i) HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 4540 (например, SEQ ID NO: 159), 4540-063 (например, SEQ ID NO: 276) или 4540-033 (например, SEQ ID NO: 159); (ii) HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 4540 (например, SEQ ID NO: 160), 4540-063 (например, SEQ ID NO: 277) или 4540-033 (например, SEQ ID NO: 278); или (iii) HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклональных антител 4540, 4540-063 или 4540-033 (например, SEQ ID NO: 156).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит вариабельную область легкой цепи (VL), где вариабельная область легкой цепи содержит три области, определяющие комплементарность легкой цепи (LCDR1, LCDR2 и LCDR3), где вариабельная область легкой цепи содержит один, два, или все из следующего: (i) LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 моноклонального антитела 4540 (например, SEQ ID NO: 116), 4540-063 (например, SEQ ID NO: 274) или 4540-033 (например, SEQ ID NO: 274); (ii) LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 4540 (например, SEQ ID NO: 157), 4540-063 (например, SEQ ID NO: 275) или 4540-033 (например, SEQ ID NO: 275); или (iii) LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 4540, 4540-063 или 4540-033 (например, SEQ ID NO: 158).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит:

(i) VH, содержащую один, два или все из следующего: HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 4540 (например, SEQ ID NO: 159), 4540-063 (например, SEQ ID NO: 276) или 4540-033 (например, SEQ ID NO: 159); HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 4540 (например, SEQ ID NO: 160), 4540-063 (например, SEQ ID NO: 277) или 4540-033 (например, SEQ ID NO: 278); или HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклонального антитела 4540, 4540-063 или 4540-033 (например, SEQ ID NO: 156) и

(ii) VL, содержащую один, два или все из следующего: LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 моноклонального антитела 4540 (например, SEQ ID NO: 116), 4540-063 (например, SEQ ID NO: 274) или 4540-033 (например, SEQ ID NO: 274); LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 4540 (например, SEQ ID NO: 157), 4540-063 (например, SEQ ID NO: 275) или 4540-033 (например, SEQ ID NO: 275); или LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 4540, 4540-063 или 4540-033 (например, SEQ ID NO: 158).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит: (i) VH, содержащую один, два или все из следующего: HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность HCDR1 моноклонального антитела 4540 (например, SEQ ID NO: 159), 4540 -063 (например, SEQ ID NO: 276) или 4540-033 (например, SEQ ID NO: 159); HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность HCDR2 моноклонального антитела 4540 (например, SEQ ID NO: 160), 4540-063 (например, SEQ ID NO: 277) или 4540-033 (например, SEQ ID NO: 278); или HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность HCDR3 моноклонального антитела 4540, 4540-063 или 4540-033 (например, SEQ ID NO: 156) и (ii) VL, содержащую один, два или все из следующего: LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность LCDR1 моноклонального антитела 4540 (например, SEQ ID NO: 116), 4540-063 (например, SEQ ID NO: 274) или 4540-033 (например, SEQ ID NO: 274); LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность LCDR2 моноклонального антитела 4540 (например, SEQ ID NO: 157), 4540-063 (например, SEQ ID NO: 275) или 4540-033 (например, SEQ ID NO: 275); или LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность LCDR3 моноклонального антитела 4540, 4540-063 или 4540-033 (например, SEQ ID NO: 158).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VH моноклонального антитела 4540 (например, SEQ ID NO: 161), 4540-063 (например, SEQ ID NO: 258) или 4540-033 (например, SEQ ID NO: 256). В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VL, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VL моноклонального антитела 4540 (например, SEQ ID NO: 162), 4540-063 (например, SEQ ID NO: 261) или 4540-033 (например, SEQ ID NO: 261).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит: (i) VH, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VH моноклонального антитела 4540 (например, SEQ ID NO: 161), 4540-063 (например, SEQ ID NO: 258) или 4540-033 (например, SEQ ID NO: 256); и (ii) VL, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VL моноклонального антитела 4540 (например, SEQ ID NO: 162), 4540-063 (например, SEQ ID NO: 261) или 4540-033 (например, SEQ ID NO: 261). В одном варианте осуществления молекула антитела содержит: (i) VH, содержащую аминокислотную последовательность VH моноклонального антитела 4540 (например, SEQ ID NO: 161), 4540-063 (например, SEQ ID NO: 258) или 4540-033 (например, SEQ ID NO: 256); и (ii) VL, содержащую аминокислотную последовательность VL моноклонального антитела 4540 (например, SEQ ID NO: 162), 4540-063 (например, SEQ ID NO: 261) или 4540-033 (например, SEQ ID NO: 261).

В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой моноклональное антитело 4540, 4540-063 или 4540-033. В одном варианте осуществления моноклональное антитело 4540 представляет собой гуманизированное моноклональное антитело 4540 (например, антитела 4540-063 или 4540-033). В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность любой из SEQ ID NO: 254-258, VL, содержащую аминокислотную последовательность любой из SEQ ID NO: 259-261, или их обе.

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), где вариабельная область тяжелой цепи содержит три области, определяющие комплементарность тяжелой цепи (HCDR1, HCDR2 и HCDR3), где вариабельная область тяжелой цепи содержит один, два, или все из следующего: (i) HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 4237 (например, SEQ ID NO: 163); (ii) HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 4237 (например, SEQ ID NO: 164); или (iii) HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклонального антитела 4237 (например, SEQ ID NO: 165).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит вариабельную область легкой цепи (VL), где вариабельная область легкой цепи содержит три области, определяющие комплементарность легкой цепи (LCDR1, LCDR2 и LCDR3), где вариабельная область легкой цепи содержит один, два, или все из следующего: (i) LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 моноклонального антитела 4237 (например, SEQ ID NO: 166); (ii) LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 4237 (например, SEQ ID NO: 167); или (iii) LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 4237 (например, SEQ ID NO: 168).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит:

(i) VH, содержащую один, два или все из следующего: HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 4237 (например, SEQ ID NO: 163); HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 4237 (например, SEQ ID NO: 164); или HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклонального антитела 4237 (например, SEQ ID NO: 165) и

(ii) VL, содержащую один, два или все из следующего: LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 моноклонального антитела 4237 (например, SEQ ID NO: 166); LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 4237 (например, SEQ ID NO: 167); или LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 4237 (например, SEQ ID NO: 168).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит: (i) VH, содержащую: HCDR1, содержащую аминокислотную последовательность HCDR1 моноклонального антитела 4237 (например, SEQ ID NO: 163); HCDR2, содержащую аминокислотную последовательность HCDR2 моноклонального антитела 4237 (например, SEQ ID NO: 164); и HCDR3, содержащую аминокислотную последовательность HCDR3 моноклонального антитела 4237 (например, SEQ ID NO: 165) и (ii) VL, содержащую: LCDR1, содержащую аминокислотную последовательность LCDR1 моноклонального антитела 4237 (например, SEQ ID NO: 166); LCDR2, содержащую аминокислотную последовательность LCDR2 моноклонального антитела 4237 (например, SEQ ID NO: 167); и LCDR3, содержащую аминокислотную последовательность LCDR3 моноклонального антитела 4237 (например, SEQ ID NO: 168).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), где вариабельная область тяжелой цепи содержит три области, определяющие комплементарность тяжелой цепи (HCDR1, HCDR2 и HCDR3), где вариабельная область тяжелой цепи содержит один, два, или все из следующего: (i) HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 4237 (например, SEQ ID NO: 169); (ii) HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 4237 (например, SEQ ID NO: 170); или (iii) HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклонального антитела 4237 (например, SEQ ID NO: 165).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит вариабельную область легкой цепи (VL), где вариабельная область легкой цепи содержит три области, определяющие комплементарность легкой цепи (LCDR1, LCDR2 и LCDR3), где вариабельная область легкой цепи содержит один, два, или все из следующего: (i) LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 моноклонального антитела 4237 (например, SEQ ID NO: 166); (ii) LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 4237 (например, SEQ ID NO: 167); или (iii) LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 4237 (например, SEQ ID NO: 168).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит:

(i) VH, содержащую один, два или все из следующего: HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 4237 (например, SEQ ID NO: 169); HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 4237 (например, SEQ ID NO: 170); или HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклонального антитела 4237 (например, SEQ ID NO: 165) и

(ii) VL, содержащую один, два или все из следующего: LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 моноклонального антитела 4237 (например, SEQ ID NO: 166); LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 4237 (например, SEQ ID NO: 167); или LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 4237 (например, SEQ ID NO: 168).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит: (i) VH, содержащую: HCDR1, содержащую аминокислотную последовательность HCDR1 моноклонального антитела 4237 (например, SEQ ID NO: 169); HCDR2, содержащую аминокислотную последовательность HCDR2 моноклонального антитела 4237 (например, SEQ ID NO: 170); и HCDR3, содержащую аминокислотную последовательность HCDR3 моноклонального антитела 4237 (например, SEQ ID NO: 165) и (ii) VL, содержащую: LCDR1, содержащую аминокислотную последовательность LCDR1 моноклонального антитела 4237 (например, SEQ ID NO: 166); LCDR2, содержащую аминокислотную последовательность LCDR2 моноклонального антитела 4237 (например, SEQ ID NO: 167); и LCDR3, содержащую аминокислотную последовательность LCDR3 моноклонального антитела 4237 (например, SEQ ID NO: 168).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VH моноклонального антитела 4237 (например, SEQ ID NO: 171), В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VL, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VL моноклонального антитела 4237 (например, SEQ ID NO: 172).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит: (i) VH, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VH моноклонального антитела 4237 (например, SEQ ID NO: 171); и (ii) VL, содержащую аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VL моноклонального антитела 4237 (например, SEQ ID NO: 172). В одном варианте осуществления молекула антитела содержит: (i) VH, содержащую аминокислотную последовательность VH моноклонального антитела 4237 (например, SEQ ID NO: 171); и (ii) VL, содержащую аминокислотную последовательность VL моноклонального антитела 4237 (например, SEQ ID NO: 172).

В варианте осуществления молекула антитела представляет собой моноклональное антитело 4237. В одном варианте осуществления моноклональное антитело 4237 представляет собой гуманизированное моноклональное антитело 4237. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность любой из SEQ ID NO: 235-240, VL, содержащую аминокислотную последовательность любой из SEQ ID NO: 241-245, или их обе.

В другом аспекте раскрытие представляет собой молекулу антитела против APRIL, которая:

(i) связывается или по существу связывается с человеческим APRIL;

(ii) ингибирует или по существу ингибирует связывание APRIL (например, человеческого APRIL, мышиного APRIL или обоих) с TACI (например, с человеческим TACI, мышиным TACI или с обоими);

(iii) ингибирует или по существу ингибирует связывание APRIL (например, человеческого APRIL, мышиного APRIL или обоих) с BCMA (например, с человеческим BCMA, мышиным BCMA или с обоими); и

(iv) связывается или по существу связывается с одним или более, например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25 или более остатками в пределах области человеческого APRIL, как определено в любой из Таблиц 3-4 или 7-8.

В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с человеческим APRIL при EC₅₀ 20 нМ или менее, например 10 нМ или менее, 9 нМ или менее, 8 нМ или менее, 7 нМ или менее, 6 нМ или менее 5 нМ или менее, 4 нМ или менее, 3 нМ или менее, 2 нМ или менее, 1 нМ или менее, 0,8 нМ или менее, 0,6 нМ или менее, 0,4 нМ или менее, 0,2 нМ или менее, 0,1 нМ или менее 0,05 нМ или менее, 0,02 нМ или менее, 0,01 нМ или менее, 0,005 нМ или менее, 0,002 нМ или менее или 0,001 нМ или менее, например, от 0,001 нМ до 20 нМ, например, от 0,01 нМ до 20 нМ, от 0,1 нМ до 20 нМ, от 0,1 нМ до 10 нМ, от 0,5 нМ до 5 нМ, от 1 нМ до 5 нМ, от 0,001 нМ до 0,1 нМ, от 0,001 нМ до 0,01 нМ, от 0,001 нМ до 0,005 нМ, от 0,01 нМ до 0,05 нМ или от 0,01 нМ до 0,1 нМ, например, как определено описанным в настоящем документе способом.

В одном варианте осуществления молекула антитела не связывается с мышиным APRIL или связывается с мышиным APRIL с низкой аффинностью, например, при EC₅₀ 1000 нМ или более, например, 2000 нМ или более, например, как определено описанным в настоящем документе способом.

В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует или по существу ингибирует связывание APRIL (например, человеческого APRIL, мышиного APRIL или обоих) с TACI (например, с человеческим TACI, мышиным TACI или с обоими), при IC₅₀ 50 нМ или менее, например, 40 нМ или менее, 30 нМ или менее, 20 нМ или менее, 10 нМ или менее, 9 нМ или менее, 8 нМ или менее, 7 нМ или менее, 6 нМ или менее, 5 нМ или менее, 4 нМ или менее, 3 нМ или менее, 2 нМ или менее, 1 нМ или менее, 0,8 нМ или менее, 0,6 нМ или менее, 0,4 нМ или менее, 0,2 нМ или менее, 0,1 нМ или менее, 0,05 нМ или менее, 0,02 нМ или менее, или 0,01 нМ или менее, например, от 0,01 нМ до 50 нМ, от 0,1 нМ до 50 нМ, от 0,1 нМ до 25 нМ, от 0,1 нМ до 10 нМ, от 0,1 нМ до 5 нМ, от 0,1 нМ до 1 нМ, от 0,1 нМ до 0,5 нМ, от 0,5 нМ до 5 нМ или от 1 нМ до 5 нМ, например, как определено описанным в настоящем документе способом.

В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует или по существу ингибирует связывание APRIL (например, человеческого APRIL, мышиного APRIL или обоих) с BCMA (например, с человеческим BCMA, мышиным BCMA или с обоими), например, при IC₅₀ 200 нМ или менее, 150 нМ или менее, 100 нМ или менее, 50 нМ или менее, 40 нМ или менее, 30 нМ или менее, 20 нМ или менее, 10 нМ или менее, 9 нМ или менее, 8 нМ или менее, 7 нМ или менее, 6 нМ или менее, 5 нМ или менее, 4 нМ или менее, 3 нМ или менее, 2 нМ или менее, 1 нМ или менее, 0,8 нМ или менее, 0,6 нМ или менее, 0,4 нМ или менее, 0,2 нМ или менее, 0,1 нМ или менее, 0,05 нМ или менее, 0,02 нМ или менее, 0,01 нМ или менее, например, от 0,01 нМ до 50 нМ, от 0,1 нМ до 50 нМ, от 0,1 нМ до 25 нМ, от 0,1 нМ до 10 нМ, от 0,1 нМ до 5 нМ, от 0,1 нМ до 1 нМ, от 0,1 нМ до 0,5 нМ, от 0,5 нМ до 5 нМ или от 1 нМ до 5 нМ, например, как определено описанным в настоящем документе способом.

В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с эпитопом, который содержит остатки APRIL из двух мономеров, например один или более остатков из мономера А и мономера В, как показано в Таблице 3. В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с одним или более остатками APRIL из петли C-D (например, петля, соединяющая β-листы C и D), петли G-H (например, петля, соединяющая β-листы G и H), или с обеими. В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с одним или более (например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 или со всеми) остатками человеческого APRIL положений 105-114 и/или с одним или более (например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 или со всеми) остатками мышиного APRIL положений 96-105.В одном варианте осуществления молекула антитела не связывается или связывается с низкой аффинностью с одним, двумя или со всеми из Asp129, Arg233 или His203 человеческого APRIL.

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит один или оба из следующего:

(i) вариабельной области тяжелой цепи (VH), содержащей один, два или все из следующего: HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка от или, по меньшей мере, 85, 90, 95, 99 или 100%, аминокислотная последовательность HCDR1 моноклонального антитела, выбранного из антител 2218, 2419, 2419-0105, 2419-0205, 2419-0206, 2419-0406, 2419-0605, 2419-0805, 2419-0806, 2419-1204, 2419-1205, 2419-1210, 2419-1305, 2419-1306, 2419-1310, 2419-1406, 2922, 3327, 3125, 2621, 4035, 4035-062, 3934, 4338, 4439 или 4237; HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 (того же) моноклонального антитела; или HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 (того же) моноклонального антитела или

(ii) вариабельной области легкой цепи (VL), содержащей один, два или все из следующего: LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 (того же) моноклонального антитела; LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 (того же) моноклонального антитела; или LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 (того же) моноклонального антитела.

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит один или оба из следующего:

(i) VH, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков от, или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VH моноклонального антитела, выбранного из антител 2218, 2419, 2419-0105, 2419-0205, 2419-0206, 2419-0406, 2419-0605, 2419-0805, 2419-0806, 2419-1204, 2419-1205, 2419-1210, 2419-1305, 2419-1306, 2419-1310, 2419-1406, 2922, 3327, 3125, 2621, 4035, 4035-062, 3934, 4338, 4439 или 4237; или

(ii) VL, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков от, или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VL (того же) моноклонального антитела.

В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой синтетическую молекулу антитела. В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой выделенную молекулу антитела. В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой молекулу гуманизированного антитела, например, содержащую одну или более каркасных областей, полученных из каркасных последовательности зародышевой линии человека.

В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой молекулу антитела IgG, например, содержащую константную область тяжелой цепи IgG, например, выбранную из IgG1, IgG2 (например, IgG2a), IgG3 или IgG4, например IgG2 или IgG4. В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой молекулу антитела IgG1. В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой молекулу антитела IgG2. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит константную область легкой цепи каппа или лямбда.

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит Fc-область. В одном варианте осуществления Fc-область содержит одну или более мутаций, расположенных в области интерфейса между доменами CH2 и CH3 (например, для увеличения аффинности связывания с новорожденным рецептором FcRn и/или периода полужизни молекулы антитела). В одном варианте осуществления Fc-область содержит одну или более мутаций, например одну или более (например, 2, 3, 4, 6 или все) мутаций, выбранных из T250Q, M252Y, S254T, T256E, M428L, H433K, N434F или любых их комбинации, IgG1. В одном варианте осуществления Fc-область содержит одну или более мутаций в положениях 233-236 или 322 человеческого IgG1 или IgG2 или одну или более замен в положениях 327, 330 или 331 человеческого IgG4 (например, для уменьшения комплемент-зависимой цитотоксичности (CDC)). В одном варианте осуществления Fc-область содержит одну или более (например, 2, 3, 4, 6 7 или все) мутаций, выбранных из E233P, L234V, L235A, G236, K322A, A327G, A330S, P331S, или любую их комбинацию.

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит две вариабельные области тяжелой цепи и две вариабельные области легкой цепи. В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой Fab, F (ab')2, Fv, Fd или одноцепочечный Fv-фрагмент (scFv).

В одном аспекте раскрытие представляет собой антитело против APRIL, которое:

а) конкурирует за связывание с APRIL с молекулой антитела, содержащей области, определяющие комплементарность тяжелой цепи (HCDR1, HCDR2 и HCDR3), и области, определяющие комплементарность легкой цепи (LCDR1, LCDR2 и LCDR3) любого из моноклональных антител 2218, 2419, 2419- 0105, 2419-0205, 2419-0206, 2419-0406, 2419-0605, 2419-0805, 2419-0806, 2419-1204, 2419-1205, 2419-1210, 2419-1305, 2419-1306, 2419-1310, 2419-1406, 2922, 3327, 3530, 3525, 3125, 2621, 4035, 4035-062, 3934, 3833, 3631, 3732, 4338, 4540, 4540-063, 4540-033, 4439 или 4237, например, как описанные в Таблице 1 или 5; или

b) связывается или по существу связывается с эпитопом, который полностью или частично перекрывается с эпитопом молекулы антитела, содержащим области, определяющие комплементарность тяжелой цепи (HCDR1, HCDR2 и HCDR3) и области, определяющие комплементарность легкой цепи (LCDR1, LCDR2 и LCDR3) любого из моноклональных антител 2218 (например, SEQ ID NO: 1-6 в соответствии с нумерацией Chothia или SEQ ID NO: 3-8 в соответствии с нумерацией Kabat), 2419 (например, SEQ ID NO: 11-16 в соответствии с нумерацией Chothia или SEQ ID NO: 13-18 в соответствии с нумерацией Kabat), 2419-0105 (например, SEQ ID NO: 11-13, 16, 280 и 281 в соответствии с нумерацией Chothia или SEQ ID NO: 13, 16, 17 и 280- 282 в соответствии с нумерацией Kabat), 2419-0205 (например, SEQ ID NO: 11-13, 16, 280 и 281 в соответствии с нумерацией Chotia или SEQ ID NO: 13, 16, 17 и 280-282 в соответствии с нумерацией Kabat), 2419-0206 (например, SEQ ID NO: 11-13, 16, 280 и 285 в соответствии с нумерацией Chothia или SEQ ID NO: 13, 16, 17, 280, 282 и 285 в соответствии с нумерацией Kabat), 24 19-0406 (например, SEQ ID NO: 11-13, 16, 280 и 285 в соответствии с нумерацией Chothia или SEQ ID NO: 13, 16, 17, 280, 285 и 290 в соответствии с нумерацией Kabat), 2419-0605 (например,, SEQ ID NO: 11-13, 16, 280 и 281 в соответствии с нумерацией Chothia или SEQ ID NO: 13, 16, 17 и 280-282 в соответствии с нумерацией Kabat), 2419-0805 (например, SEQ ID NO: 11- 13, 16, 280 и 281 в соответствии с нумерацией Chotia или SEQ ID NO: 13, 16, 17, 280, 281 и 287 в соответствии с нумерацией Kabat), 2419-0806 (например, SEQ ID NO: 11-13, 16, 280 и 285 в соответствии с нумерацией Chothia или SEQ ID NO: 13, 16, 17, 280, 285 и 287 в соответствии с нумерацией Kabat), 2419-1204 (например, SEQ ID NO: 11-13, 16, 280 и 293 в соответствии с нумерацией Chothia или SEQ ID NO: 13, 16, 17, 280, 282 и 293 в соответствии с нумерацией Kabat), 2419-1205 (например, SEQ ID NO: 11-13, 16, 280 и 281 в соответствии с нумерацией Chothia или SEQ ID NO: 13, 16, 17 и 280-282 в соответствии с нумерацией Kabat), 2419-1210 (например, SEQ ID NO: 11-13, 16, 314 и 315 в соответствии с нумерацией Chothia или SEQ ID NO: 13, 16, 17, 282, 314 и 315 в соответствии с нумерацией Kabat), 2419-1305 (например, SEQ ID NO: 11-13, 16, 280 и 281 в соответствии с нумерацией Chothia или SEQ ID NO: 13, 16, 17 и 280-282 в соответствии с нумерацией Kabat), 2419-1306 (например, SEQ ID NO: 11-13, 16, 280 и 285 в соответствии с нумерацией Chothia или SEQ ID NO: 13, 16, 17, 280, 282 и 285 в соответствии с нумерацией Kabat), 2419-1310 (например, SEQ ID NO: 11-13, 16, 314 и 315 в соответствии с нумерацией Chothia или SEQ ID NO: 13, 16, 17, 282, 314 и 315 в соответствии с нумерацией Kabat), 2419-1406 (например, SEQ ID NO: 11-13, 16, 280 и 285 в соответствии с нумерацией Chotia или SEQ ID NO: 13, 16, 17, 280, 282 и 285 в соответствии с нумерацией Kabat), 2922 (например, SEQ ID NO: 21 и 32-36 в соответствии с нумерацией Chothia или SEQ ID NO: 33-38 в соответствии с нумерацией Kabat), 3327 (например, SEQ ID NO: 51-56 в соответствии с нумерацией Chothia или SEQ ID NO: 53-58 в соответствии с нумерацией Kabat), 3530 (например, SEQ ID NO: 61-63, 67, 45 и 46 в соответствии с нумерацией Chothia или SEQ ID NO: 63-65, 67, 45 и 46 в соответствии с нумерацией Kabat), 3525 (например, SEQ ID NO: 44-46 и 61-63 в соответствии с нумерацией Chothia или SEQ ID NO: 44-46 и 63- 65 в соответствии с нумерацией Kabat), 3125 (например, SEQ ID NO: 11 и 42-46 в соответствии с нумерацией Chotia или SEQ ID NO: 43-48 в соответствии с нумерацией Kabat), 2621 (например, SEQ ID NO: 21-26 в соответствии с нумерацией Chotia или SEQ ID NO: 23-28 в соответствии с нумерацией Kabat), 4035 (например, SEQ ID NO: 93-98 в соответствии с нумерацией Chotia или SEQ ID NO: 95-100 в соответствии с нумерацией Kabat), 4035-062 (например, SEQ ID NO: 93-98 в соответствии с нумерацией Chothia или SEQ ID NO: 95-99 и 273 в соответствии с нумерацией Kabat), 3934 (например, SEQ ID NO: 103-108 в соответствии с нумерацией Chothia или SEQ ID NO: 105 -110 в соответствии с нумерацией Kabat), 3833 (например, SEQ ID NO: 113-118 в соответствии с нумерацией Chotia или SEQ ID NO: 115-120 в соответствии с нумерацией Kabat), 3631 (например, SEQ ID NO: 123-128 в соответствии с нумерацией Chothia или SEQ ID NO: 125-130 в соответствии с нумерацией Kabat), 3732 (например, SEQ ID NO: 127 и 133-137 в соответствии с нумерацией Chothia или SEQ ID NO: 127 и 135-139 в соответствии с нумерацией Kabat), 4338 (например, SEQ ID NO: 11, 107 и 142-145, или SEQ ID NO: 11, 142, 143 и 146-148 в соответствии с нумерацией Chothia; или SEQ ID NO: 107, 143-145 и 149-150 или SEQ ID NO: 143 и 146-150 в соответствии с нумерацией Kabat), 4540 (например, SEQ ID NO: 116 и 154-158 в соответствии с нумерацией Chotia или SEQ ID NO: ID NOS: 116 и 156-160 в соответствии с нумерацией Kabat), 4540-063 (например, SEQ ID NO: 154-156, 158, 274 и 275 в соответствии с нумерацией Chotia или SEQ ID NO: 156, 158 и 274-277 в соответствии с нумерацией Kabat), 4540-033 (например, SEQ ID NO: 154-156, 158, 274 и 275 в соответствии с нумерацией Chotia или SEQ ID NO: 156, 158, 159, 274, 275 и 278 в соответствии с нумерацией Kabat), 4439 (например, SEQ ID NO: 146-148 и 266-268 в соответствии с нумерацией Chotia или SEQ ID NO: 146-148 и 269-270 в соответствии с нумерацией Kabat) или 4237 (например, SEQ ID NO: 163-168 в соответствии с к нумерации Chothia или SEQ ID NO: 165-170 в соответствии с нумерацией Kabat), например, как описано в Таблице 1 или 5.

В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой синтетическую молекулу антитела. В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой выделенную молекулу антитела.

В одном варианте осуществления молекула антитела конкурирует за связывание с двумя, тремя, четырьмя, пятью, шестью, семью, восемью, девятью, десятью или более молекулами антител, которые содержат HCDR1, HCDR2, HCDR3, LCDR1, LCDR2 и LCDR3 любого из моноклональных антител 2218, 2419, 2419-0105, 2419-0205, 2419-0206, 2419-0406, 2419-0605, 2419-0805, 2419-0806, 2419-1204, 2419-1205, 2419-1210, 2419 -1305, 2419-1306, 2419-1310, 2419-1406, 2922, 3327, 3530, 3525, 3125, 2621, 4035, 4035-062, 3934, 3833, 3631, 3732, 4338, 4540, 4540-063, 4540 -033, 4439 или 4237.

В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с эпитопом, который полностью или частично перекрывается эпитопами из двух, трех, четырех, пяти, шести, семи, восьми, девяти, десяти или более молекул антител, которые содержат HCDR1, HCDR2, HCDR3, LCDR1, LCDR2 и LCDR3 любого из моноклональных антител 2218, 2419, 2419-0105, 2419-0205, 2419-0206, 2419-0406, 2419-0605, 2419-0805, 2419-0806, 2419-1204, 2419-1205, 2419-1210, 2419-1305, 2419-1306, 2419-1310, 2419-1406, 2922, 3327, 3530, 3525, 3125, 2621, 4035, 4035-062, 3934, 3833, 3631, 3732, 4338, 4540, 4540-063, 4540-033, 4439 или 4237.

В одном варианте осуществления молекула антитела, которая содержит HCDR1, HCDR2, HCDR3, LCDR1, LCDR2 и LCDR3 любого из моноклональных антител 2218, 2419, 2419-0105, 2419-0205, 2419-0206, 2419-0406, 2419-0605, 2419-0805, 2419-0806, 2419-1204, 2419-1205, 2419-1210, 2419-1305, 2419-1306, 2419-1310, 2419-1406, 2922, 3327, 3530, 3525, 3125, 2621, 4035, 3934, 3833, 3631, 3732, 4338, 4540, 4439 или 4237, содержит вариабельную область тяжелой цепи и вариабельную область легкой цепи любого из моноклональных антител 2218, 2419, 2419-0105, 2419-0205, 2419-0206, 2419-0406, 2419-0605, 2419-0805, 2419-0806, 2419-1204, 2419-1205, 2419-1210, 2419-1305, 2419-1306, 2419-1310, 2419-1406, 2922, 3327, 3530, 3525, 3125, 2621, 4035, 3934, 3833, 3631, 3732, 4338, 4540, 4439 или 4237.

В одном варианте осуществления молекула антитела, которая содержит HCDR1, HCDR2, HCDR3, LCDR1, LCDR2 и LCDR3 любого из моноклональных антител 2218, 2419, 2419-0105, 2419-0205, 2419-0206, 2419-0406, 2419-0605, 2419-0805, 2419-0806, 2419-1204, 2419-1205, 2419-1210, 2419-1305, 2419-1306, 2419-1310, 2419-1406, 2922, 3327, 3530, 3525, 3125, 2621, 4035, 3934, 3833, 3631, 3732, 4338, 4540, 4439 или 4237, представляет собой моноклональное антитело 2218, 2419, 2419-0105, 2419-0205, 2419-0206, 2419-0406, 2419-0605, 2419-0805, 2419- 0806, 2419-1204, 2419-1205, 2419-1210, 2419-1305, 2419-1306, 2419-1310, 2419-1406, 2922, 3327, 3530, 3525, 3125, 2621, 4035, 3934, 3833, 3631, 3732, 4338, 4540, 4439 или 4237.

В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой гуманизированное моноклональное антитело 2218, 2419, 2419-0105, 2419-0205, 2419-0206, 2419-0406, 2419-0605, 2419-0805, 2419-0806, 2419-1204, 2419- 1205, 2419-1210, 2419-1305, 2419-1306, 2419-1310, 2419-1406, 2922, 3327, 3530, 3525, 3125, 2621, 4035, 4035-062, 3934, 3833, 3631, 3732, 4338, 4540, 4540-063, 4540-033, 4439 или 4237. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), имеющую аминокислотную последовательность, описанную в Таблице 1 или 5. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит вариабельную область легкой цепи (VL), имеющую аминокислотную последовательность, описанную в Таблице 1 или 5. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), имеющую аминокислотную последовательность, описанную в Таблице 1 или 5, и вариабельную область легкой цепи (VL), имеющую аминокислотную последовательность, описанную в Таблице 1 или 5.

В одном варианте осуществления молекула антитела конкурирует за связывание с человеческим APRIL, мышиным APRIL или с обоими. В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с человеческим APRIL при EC₅₀ 20 нМ или менее, например 10 нМ или менее, 9 нМ или менее или менее, 8 нМ или менее, 7 нМ или менее, 6 нМ или менее, 5 нМ или менее, 4 нМ или менее, 3 нМ или менее, 2 нМ или менее, 1 нМ или менее, 0,8 нМ или менее, 0,6 нМ или менее, 0,4 нМ или менее, 0,2 нМ или менее, 0,1 нМ или менее, 0,05 нМ или менее, 0,02 нМ или менее, 0,01 нМ или менее, 0,005 нМ или менее, 0,002 нМ или менее или 0,001 нМ или менее, например, от 0,001 нМ до 100 нМ, например, от 0,001 нМ до 50 нМ, от 0,01 нМ до 20 нМ, от 0,1 нМ до 20 нМ, например, от 0,1 нМ до 10 нМ, от 0,5 нМ до 5 нМ, от 1 нМ до 5 нМ, от 0,001 нМ до 0,1 нМ, от 0,001 нМ до 0,01 нМ, от 0,001 нМ до 0,005 нМ, от 0,01 нМ до 0,05 нМ или от 0,01 нМ до 0,1 нМ, например, как определено описанным в настоящем документе способом.

В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с мышиным APRIL при EC₅₀ 100 нМ или менее, например, 80 нМ или менее, 60 нМ или менее, 40 нМ или менее, 20 нМ или менее, 10 нМ или менее 9 нМ или менее, 8 нМ или менее, 7 нМ или менее, 6 нМ или менее, 5 нМ или менее, 4 нМ или менее, 3 нМ или менее, 2 нМ или менее, 1 нМ или менее, 0,8 нМ или 0,6 нМ или менее, 0,4 нМ или менее, 0,2 нМ или менее, 0,1 нМ или менее, 0,05 нМ или менее, 0,02 нМ или менее, 0,01 нМ или менее, 0,005 нМ или менее, 0,002 нМ или менее или 0,001 нМ или менее, например, от 0,001 нМ до 100 нМ, например, от 0,001 нМ до 50 нМ, от 0,01 нМ до 20 нМ, от 0,1 нМ до 20 нМ, например от 0,1 нМ до 10 нМ, от 0,5 нМ до 5 нМ, от 1 нМ до 5 нМ, от 0,001 нМ до 0,1 нМ, от 0,001 нМ до 0,01 нМ, от 0,001 нМ до 0,005 нМ, от 0,01 нМ до 0,05 нМ или от 0,01 нМ до 0,1 нМ, например, как определено описанным в настоящем документе способом.

В одном варианте осуществления молекула антитела не связывается или связывается с мышиным APRIL с низкой аффинностью, например, при EC₅₀ 1000 нМ или более, например, 2000 нМ или более, например, как определено описанным в настоящем документе способом.

В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует или по существу ингибирует связывание APRIL (например, человеческого APRIL, мышиного APRIL или обоих) с TACI (например, с человеческим TACI, мышиным TACI или с обоими), ингибирует или по существу ингибирует связывание APRIL (например, человеческого APRIL, мышиного APRIL или и обоих) с BCMA (например, с человеческим BCMA, мышиным BCMA или с обоими) или и то, и другое.

В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует или по существу ингибирует связывание APRIL (например, человеческого APRIL, мышиного APRIL или обоих) с TACI (например, с человеческим TACI, мышиным TACI или с обоими), при IC₅₀ 50 нМ или менее, например, 40 нМ или менее, 30 нМ или менее, 20 нМ или менее, 10 нМ или менее, 9 нМ или менее, 8 нМ или менее, 7 нМ или менее, 6 нМ или менее, 5 нМ или менее, 4 нМ или менее, 3 нМ или менее, 2 нМ или менее, 1 нМ или менее, 0,8 нМ или менее, 0,6 нМ или менее, 0,4 нМ или менее, 0,2 нМ или менее, 0,1 нМ или менее, 0,05 нМ или менее, 0,02 нМ или менее, или 0,01 нМ или менее, например, от 0,01 нМ до 50 нМ, от 0,1 нМ до 50 нМ, от 0,1 нМ до 25 нМ, от 0,1 нМ до 10 нМ, от 0,1 нМ до 5 нМ, от 0,1 нМ до 1 нМ, от 0,1 нМ до 0,5 нМ, от 0,5 нМ до 5 нМ или от 1 нМ до 5 нМ, например, как определено описанным в настоящем документе способом.

В одном варианте осуществления связывание молекулы антитела с APRIL (например, с человеческим APRIL) ингибирует или по существу ингибирует связывание CRD2-домена TACI (например, человеческого TACI) с APRIL (например, с человеческим APRIL).

В одном варианте осуществления связывание молекулы антитела с человеческим APRIL ингибирует или по существу ингибирует связывание человеческого TACI с одним или более, например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25 или со всеми остатками человеческого APRIL из Таблицы 3. В одном варианте осуществления связывание молекулы антитела с человеческим APRIL ингибирует или по существу ингибирует связывание человеческого TACI с одним или более, например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 или со всеми остатками человеческого APRIL из Таблицы 4. В одном варианте осуществления связывание молекулы антитела с человеческим APRIL ингибирует или по существу ингибирует связывание человеческого TACI с одним или более, например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17 или со всеми остатками человеческого APRIL из Таблицы 7. В одном варианте связывание молекулы антитела с человеческим APRIL ингибирует или по существу ингибирует связывание человеческого TACI с одним или более, например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25 или со всеми остатками человеческого APRIL из Таблицы 8.

В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует или по существу ингибирует связывание APRIL (например, человеческого APRIL, мышиного APRIL или обоих) с BCMA (например, с человеческим BCMA, мышиным BCMA или с обоими).

В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует или по существу ингибирует связывание APRIL (например, человеческого APRIL, мышиного APRIL или обоих) с BCMA (например, с человеческим BCMA, мышиным BCMA или с обоими), например, при IC₅₀ 200 нМ или менее, 150 нМ или менее, 100 нМ или менее, 50 нМ или менее, 40 нМ или менее, 30 нМ или менее, 20 нМ или менее, 10 нМ или менее, 9 нМ или менее, 8 нМ или менее, 7 нМ или менее, 6 нМ или менее, 5 нМ или менее, 4 нМ или менее, 3 нМ или менее, 2 нМ или менее, 1 нМ или менее, 0,8 нМ или менее, 0,6 нМ или менее, 0,4 нМ или менее, 0,2 нМ или менее, 0,1 нМ или менее, 0,05 нМ или менее, 0,02 нМ или менее, 0,01 нМ или менее, например, от 0,01 нМ до 50 нМ, от 0,1 нМ до 50 нМ, от 0,1 нМ до 25 нМ, от 0,1 нМ до 10 нМ, от 0,1 нМ до 5 нМ, от 0,1 нМ до 1 нМ, от 0,1 нМ до 0,5 нМ, от 0,5 нМ до 5 нМ или от 1 нМ до 5 нМ, например, как определено описанным в настоящем документе способом.

В одном варианте осуществления молекула антитела не ингибирует или по существу не ингибирует связывание APRIL (например, человеческого APRIL, мышиного APRIL или обоих) с BCMA (например, с человеческим BCMA, мышиным BCMA или с обоими).

В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с одним или более, например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25 и более, остатками в пределах области человеческого APRIL, как определено в любой из Таблиц 3-4 или 7-8. В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с конформационным эпитопом.

В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с одним или более, например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25 и более, остатками в пределах области человеческого APRIL, как определено в Таблице 3. В одном варианте осуществления молекула антитела связывается с эпитопом, который содержит или состоит из одного или более, например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25 или всех остатков человеческого APRIL из Таблицы 3. В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с эпитопом, который содержит остатки APRIL из двух мономеров, например один или более остатков из мономера А и мономера В, как показано в Таблице 3.

В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с одним или более, например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 или более остатками в пределах области человеческого APRIL, как определено в Таблице 4. В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с эпитопом, который состоит из одного или более, например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 или всех остатков APRIL из Таблицы 4. В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с эпитопом, который содержит один или более остатков APRIL из петли C-D (например, петля, соединяющая β-листы C и D), петли G-H (например, петля, соединяющая β-листы G и H) или из обеих.

В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с одним или более, например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17 или со всеми остатками в пределах области человеческого APRIL, как определено в Таблице 7. В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с эпитопом, который содержит или состоит из одного или более, например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17 или всех остатков человеческого APRIL из Таблицы 7. В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с эпитопом, который перекрывает эпитоп, который содержит или состоит из всех остатков человеческого APRIL из Таблицы 7.

В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с одним или более, например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25 или со всеми остатками в пределах области человеческого APRIL, как определено в Таблице 8. В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с эпитопом, который содержит или состоит из одного или более, например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25 или всех остатков человеческого APRIL из Таблицы 8. В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с эпитопом, который перекрывает эпитоп, который содержит или состоит из всех остатков человеческого APRIL из Таблицы 8.

В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с одним или более (например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 или со всеми) остатками человеческого APRIL положений 105-114 и/или с одним или более (например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 или со всеми) остатками мышиного APRIL положений 96-105. В одном варианте осуществления молекула антитела не связывается или по существу не связывается с одним, двумя или со всеми из Asp129, Arg233 или His203 человеческого APRIL.

В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой молекулу антитела IgG, например, содержащую константную область тяжелой цепи IgG, например, выбранную из IgG1, IgG2 (например, IgG2a), IgG3 или IgG4, например IgG2 или IgG4. В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой молекулу антитела IgG1. В другом варианте осуществления молекула антитела представляет собой молекулу антитела IgG2. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит константную область легкой цепи каппа или лямбда.

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит Fc-область. В одном варианте осуществления Fc-область содержит одну или более мутаций, расположенных в области интерфейса между доменами CH2 и CH3 (например, для повышения аффинности связывания с неонатальным рецептором FcRn и/или периода полужизни молекулы антитела). В одном варианте осуществления Fc-область содержит одну или более мутаций, например одну или более (например, 2, 3, 4, 6 или все) мутаций IgG1, выбранных из T250Q, M252Y, S254T, T256E, M428L, H433K, N434F, или любая их комбинация. В одном варианте осуществления Fc-область содержит одну или более мутаций в положениях 233-236 или 322 человеческого IgG1 или IgG2 или одну или более замен в положениях 327, 330 или 331 человеческого IgG4 (например, для уменьшения комплемент-зависимой цитотоксичности (CDC)). В одном варианте осуществления Fc-область содержит одну или более (например, 2, 3, 4, 6 7 или все) мутаций, выбранных из E233P, L234V, L235A, G236, K322A, A327G, A330S, P331S, или любую их комбинацию.

В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой молекулу гуманизированного антитела, например, содержащую одну или более каркасных областей, полученных из каркасной последовательности зародышевой линии человека. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит две вариабельные области тяжелой цепи и две вариабельные области легкой цепи. В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой Fab, F(ab')2, Fv, Fd или одноцепочечный Fv-фрагмент (scFv).

В одном аспекте раскрытие представляет собой описанную в настоящем документе молекулу антитела против APRIL, например, синтетическую или выделенную молекулу антитела против APRIL, описанную в настоящем документе.

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит:

(i) вариабельную область тяжелой цепи (VH), где вариабельная область тяжелой цепи содержит три области, определяющие комплементарность тяжелой цепи (HCDR1, HCDR2 и HCDR3), где вариабельная область тяжелой цепи содержит один, два или все из следующего: HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 2218 (например, SEQ ID NO: 1 или 7); HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 2218 (например, SEQ ID NO: 2 или 8); или HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклонального антитела 2218 (например, SEQ ID NO: 3) и

(ii) вариабельную область легкой цепи (VL), где вариабельная область легкой цепи содержит три области, определяющие комплементарность легкой цепи (LCDR1, LCDR2 и LCDR3), где вариабельная область легкой цепи содержит один, два или все из следующего: LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 моноклонального антитела 2218 (например, SEQ ID NO: 4); LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 2218 (например, SEQ ID NO: 5); или LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 2218 (например, SEQ ID NO: 6).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит один или оба из следующего: (i) VH, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VH моноклонального антитела 2218 (например SEQ ID NO: 9); или (ii) VL, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VL моноклонального антитела 2218 (например, SEQ ID NO: 10).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, кодируемую нуклеотидной последовательностью SEQ ID NO: 71 (или нуклеотидной последовательностью, по существу идентичной ей), или VL, кодируемую нуклеотидной последовательностью SEQ ID NO: 72 (или нуклеотидной последовательностью, по существу, идентичной ей) или их обе.

В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой моноклональное антитело 2218. В одном варианте осуществления моноклональное антитело 2218 представляет собой гуманизированное моноклональное антитело 2218. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность любой из SEQ ID NO: 190-101, VL, содержащую аминокислотную последовательность любой из SEQ ID NO: 202-208, или и то, и другое.

В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с человеческим APRIL. В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с человеческим APRIL при EC₅₀ 20 нМ или менее, например 10 нМ или менее, 9 нМ или менее, 8 нМ или менее, 7 нМ или менее, 6 нМ или менее 5 нМ или менее, 4 нМ или менее, 3 нМ или менее, 2 нМ или менее, 1 нМ или менее, 0,8 нМ или менее, 0,6 нМ или менее, 0,4 нМ или менее, 0,2 нМ или менее, 0,1 нМ или менее 0,05 нМ или менее, 0,02 нМ или менее, 0,01 нМ или менее, 0,005 нМ или менее, 0,002 нМ или менее или 0,001 нМ или менее, например, от 0,001 нМ до 20 нМ, например, от 0,01 нМ до 20 нМ, от 0,1 нМ до 20 нМ, от 0,1 нМ до 10 нМ, от 0,5 нМ до 5 нМ, от 1 нМ до 5 нМ, от 0,001 нМ до 0,1 нМ, от 0,001 нМ до 0,01 нМ, от 0,001 нМ до 0,005 нМ, от 0,01 нМ до 0,05 нМ или от 0,01 нМ до 0,1 нМ, например, как определено описанным в настоящем документе способом. В одном варианте осуществления молекула антитела связывается с человеческим APRIL при EC₅₀ 1 нМ или менее, например, примерно 0,6 нМ. В одном варианте осуществления молекула антитела не связывается с мышиным APRIL или связывается с мышиным APRIL с низкой аффинностью, например, при EC₅₀ 1000 нМ или более, например, 2000 нМ или более, например, как определено описанным в настоящем документе способом,

В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует или по существу ингибирует связывание APRIL (например, человеческого APRIL) с TACI (например, с человеческим TACI), BCMA (например, с человеческим BCMA) или с обоими.

В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует или по существу ингибирует связывание человеческого APRIL с человеческим TACI при IC₅₀ 50 нМ или менее, например 40 нМ или менее, 30 нМ или менее, 20 нМ или менее, 10 нМ или менее, 9 нМ или менее, 8 нМ или менее, 7 нМ или менее, 6 нМ или менее, 5 нМ или менее, 4 нМ или менее, 3 нМ или менее, 2 нМ или менее, 1 нМ или менее, 0,8 нМ или менее, 0,6 нМ или менее, 0,4 нМ или менее, 0,2 нМ или менее, 0,1 нМ или менее, 0,05 нМ или менее, 0,02 нМ или менее или 0,01 нМ или менее, например, от 0,01 нМ до 50 нМ, от 0,1 нМ до 50 нМ, от 0,1 нМ до 25 нМ, от 0,1 нМ до 10 нМ, от 0,1 нМ до 5 нМ, от 0,1 нМ до 1 нМ, от 0,1 нМ до 0,5 нМ, от 0,5 нМ до 5 нМ или от 1 нМ до 5 нМ, например, как определено описанным в настоящем документе способом. В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует связывание человеческого APRIL с человеческим TACI при IC₅₀ 1 нМ или менее, например, примерно 0,74 нМ.

В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует или по существу ингибирует связывание человеческого APRIL с человеческим BCMA при IC₅₀ 200 нМ или менее, 150 нМ или менее, 100 нМ или менее, 50 нМ или менее, 40 нМ или менее, 30 нМ или менее, 20 нМ или менее, 10 нМ или менее, 9 нМ или менее, 8 нМ или менее, 7 нМ или менее, 6 нМ или менее, 5 нМ или менее, 4 нМ или менее, 3 нМ или менее, 2 нМ или менее, 1 нМ или менее, 0,8 нМ или менее, 0,6 нМ или менее, 0,4 нМ или менее, 0,2 нМ или менее, 0,1 нМ или менее, 0,05 нМ или менее, 0,02 нМ или менее, 0,01 нМ или менее, например, от 0,01 нМ до 50 нМ, от 0,1 нМ до 50 нМ, от 0,1 нМ до 25 нМ, от 0,1 нМ до 10 нМ, от 0,1 нМ до 5 нМ, от 0,1 нМ до 1 нМ, от 0,1 нМ до 0,5 нМ, от 0,5 нМ до 5 нМ или от 1 нМ до 5 нМ, например, как определено описанным в настоящем документе способом. В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует связывание человеческого APRIL с человеческим BCMA при IC₅₀ 0,5 нМ или менее, например, примерно 0,22 нМ.

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит один или оба из следующего:

(i) вариабельной области тяжелой цепи (VH), где вариабельная область тяжелой цепи содержит три области, определяющие комплементарность тяжелой цепи (HCDR1, HCDR2 и HCDR3), где вариабельная область тяжелой цепи содержит один, два или все из следующего: HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность G-Y-T-F-T-D-Y (SEQ ID NO: 11); HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность Y-P-L-R-G-S (SEQ ID NO: 12); или HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность H-G-A-Y-Y-S-N-A-F-D-Y (SEQ ID NO: 13) или

(ii) вариабельной области легкой цепи (VL), где вариабельная область легкой цепи содержит три области, определяющие комплементарность легкой цепи (LCDR1, LCDR2 и LCDR3), где вариабельная область легкой цепи содержит один, два или все из следующего: LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность X1-X2-S-X4-S-V-D-N-D-G-I-R-F-X14-H (SEQ ID NO: 327), где X1 представляет собой R или K; X2 представляет собой A или S; X4 представляет собой E или Q; и X14 представляет собой M или L; LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность R-A-S-X4-X5-X6-X7 (SEQ ID NO: 328), где X4 представляет собой N или T; X5 представляет собой L или R; X6 представляет собой E или A; и X7 представляет собой S или T; или LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность QQSNKDPYT (SEQ ID NO: 16).

В другом варианте осуществления молекула антитела содержит один или оба из следующего:

(i) вариабельной области тяжелой цепи (VH), где вариабельная область тяжелой цепи содержит три области, определяющие комплементарность тяжелой цепи (HCDR1, HCDR2 и HCDR3), где вариабельная область тяжелой цепи содержит один, два или все из следующего: HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность D-Y-T-I-H (SEQ ID NO: 17); HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность W-I-Y-P-L-R-G-S-I-N-Y-X12-X13-X14-F-X16-X17 (SEQ ID NO: 329), где X12 представляет собой N, S или A, X13 представляет собой E, P или Q; X14 представляет собой K или S; X16 представляет собой K или Q; и X17 представляет собой D или G; или HCCDR3, содержащей аминокислотную последовательность H-G-A-Y-Y-S-N-A-F-D-Y (SEQ ID NO: 13) или

(ii) вариабельной области легкой цепи (VL), где вариабельная область легкой цепи содержит три области, определяющие комплементарность легкой цепи (LCDR1, LCDR2 и LCDR3), где вариабельная область легкой цепи содержит один, два или все из следующего: LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность X1-X2-S-X4-S-V-D-N-D-G-I-R-F-X14-H (SEQ ID NO: 327), где X1 представляет собой R или K; X2 представляет собой A или S; X4 представляет собой E или Q; и X14 представляет собой M или L; LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность R-A-S-X4-X5-X6-X7 (SEQ ID NO: 328), где X4 представляет собой N или T; X5 представляет собой L или R; X6 - E или A; и X7 представляет собой S или T; или LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность QQSNKDPYT (SEQ ID NO: 16).

В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой любое из антител 2419, 2419-0105, 2419-0205, 2419-0206, 2419-0406, 2419-0605, 2419-0805, 2419-0806, 2419-1204, 2419-1205, 2419 -1210, 2419-1305, 2419-1306, 2419-1310 или 2419-1406.

В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с человеческим APRIL при EC₅₀ 20 нМ или менее, например 10 нМ или менее, 9 нМ или менее, 8 нМ или менее, 7 нМ или менее, 6 нМ или менее 5 нМ или менее, 4 нМ или менее, 3 нМ или менее, 2 нМ или менее, 1 нМ или менее, 0,8 нМ или менее, 0,6 нМ или менее, 0,4 нМ или менее, 0,2 нМ или менее, 0,1 нМ или менее 0,05 нМ или менее, 0,02 нМ или менее, 0,01 нМ или менее, 0,005 нМ или менее, 0,002 нМ или менее или 0,001 нМ или менее, например, от 0,001 нМ до 20 нМ, например, от 0,01 нМ до 20 нМ, от 0,1 нМ до 20 нМ, от 0,1 нМ до 10 нМ, от 0,5 нМ до 5 нМ, от 1 нМ до 5 нМ, от 0,001 нМ до 0,1 нМ, от 0,001 нМ до 0,01 нМ, от 0,001 нМ до 0,005 нМ, от 0,01 нМ до 0,05 нМ или от 0,01 нМ до 0,1 нМ, например, как определено описанным в настоящем документе способом. В одном варианте осуществления молекула антитела связывается с человеческим APRIL при EC₅₀ 0,01 нМ или менее, например, примерно 0,001-0,005 нМ или 0,002-0,004 нМ, например, примерно 0,001, 0,002, 0,003, 0,004 или 0,005 нМ. В одном варианте осуществления молекула антитела не связывается с мышиным APRIL или связывается с мышиным APRIL с низкой аффинностью, например, при EC₅₀ 1000 нМ или более, например, 2000 нМ или более, например, как определено описанным в настоящем документе способом.

В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует или по существу ингибирует связывание APRIL (например, человеческого APRIL) с TACI (например, с человеческим TACI), BCMA (например, с человеческим BCMA) или и то, и другое.

В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует или по существу ингибирует связывание человеческого APRIL с человеческим TACI при IC₅₀ 50 нМ или менее, например 40 нМ или менее, 30 нМ или менее, 20 нМ или менее, 10 нМ или менее, 9 нМ или менее, 8 нМ или менее, 7 нМ или менее, 6 нМ или менее, 5 нМ или менее, 4 нМ или менее, 3 нМ или менее, 2 нМ или менее, 1 нМ или менее, 0,8 нМ или менее, 0,6 нМ или менее, 0,4 нМ или менее, 0,2 нМ или менее, 0,1 нМ или менее, 0,05 нМ или менее, 0,02 нМ или менее или 0,01 нМ или менее, например, от 0,01 нМ до 50 нМ, от 0,1 нМ до 50 нМ, от 0,1 нМ до 25 нМ, от 0,1 нМ до 10 нМ, от 0,1 нМ до 5 нМ, от 0,1 нМ до 1 нМ, от 0,1 нМ до 0,5 нМ, от 0,5 нМ до 5 нМ или от 1 нМ до 5 нМ, например, как определено описанным в настоящем документе способом. В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует связывание человеческого APRIL с человеческим TACI при IC₅₀ 0,5 нМ или менее, например, примерно 0,1-0,5 нМ или 0,2-0,4 нМ, например, примерно 0,1, 0,2, 0,3, 0,4 или 0,5 нМ.

В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует или по существу ингибирует связывание человеческого APRIL с человеческим BCMA при IC₅₀ 200 нМ или менее, 150 нМ или менее, 100 нМ или менее, 50 нМ или менее, 40 нМ или менее, 30 нМ или менее, 20 нМ или менее, 10 нМ или менее, 9 нМ или менее, 8 нМ или менее, 7 нМ или менее, 6 нМ или менее, 5 нМ или менее, 4 нМ или менее, 3 нМ или менее, 2 нМ или менее, 1 нМ или менее, 0,8 нМ или менее, 0,6 нМ или менее, 0,4 нМ или менее, 0,2 нМ или менее, 0,1 нМ или менее, 0,05 нМ или менее, 0,02 нМ или менее, 0,01 нМ или менее, например, от 0,01 нМ до 50 нМ, от 0,1 нМ до 50 нМ, от 0,1 нМ до 25 нМ, от 0,1 нМ до 10 нМ, от 0,1 нМ до 5 нМ, от 0,1 нМ до 1 нМ, от 0,1 нМ до 0,5 нМ, от 0,5 нМ до 5 нМ или от 1 нМ до 5 нМ, например, как определено описанным в настоящем документе способом. В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует связывание человеческого APRIL с человеческим BCMA при IC₅₀ 0,5 нМ или менее, например, примерно 0,1-0,5 нМ или 0,2-0,4 нМ, например, примерно 0,1, 0,2, 0,3, 0,4 или 0,5 нМ.

В другом варианте осуществления молекула антитела содержит (i) вариабельную область тяжелой цепи (VH), где вариабельная область тяжелой цепи содержит три области, определяющие комплементарность тяжелой цепи (HCDR1, HCDR2 и HCDR3), где вариабельная область тяжелой цепи содержит один, два или все из следующего: HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 2419 (например, SEQ ID NO: 11 или 17); HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 2419 (например, SEQ ID NO: 12 или 18); или HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклонального антитела 2419 (например, SEQ ID NO: 13) и

(ii) вариабельную область легкой цепи (VL), где вариабельная область легкой цепи содержит три области, определяющие комплементарность легкой цепи (LCDR1, LCDR2 и LCDR3), где вариабельная область легкой цепи содержит один, два или все из следующего: LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 моноклонального антитела 2419 (например, SEQ ID NO: 14); LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 2419 (например, SEQ ID NO: 15); или LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 2419 (например, SEQ ID NO: 16).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит один или оба из следующего: (i) VH, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VH моноклонального антитела 2419 (например SEQ ID NO: 19); или (ii) VL, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VL моноклонального антитела 2419 (например, SEQ ID NO: 20).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, кодируемую нуклеотидной последовательностью SEQ ID NO: 73 (или нуклеотидной последовательностью, по существу идентичной ей), или VL, кодируемую нуклеотидной последовательностью SEQ ID NO: 74 (или нуклеотидной последовательностью, по существу, идентичной ей) или их обе.

В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой моноклональное антитело 2419. В одном варианте осуществления моноклональное антитело 2419 представляет собой гуманизированное моноклональное антитело 2419. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность любой из SEQ ID NO: 209-214, VL, содержащую аминокислотную последовательность любой из SEQ ID NO: 215-219 или их обе.

В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с человеческим APRIL при EC₅₀ 20 нМ или менее, например 10 нМ или менее, 9 нМ или менее, 8 нМ или менее, 7 нМ или менее, 6 нМ или менее 5 нМ или менее, 4 нМ или менее, 3 нМ или менее, 2 нМ или менее, 1 нМ или менее, 0,8 нМ или менее, 0,6 нМ или менее, 0,4 нМ или менее, 0,2 нМ или менее, 0,1 нМ или менее 0,05 нМ или менее, 0,02 нМ или менее, 0,01 нМ или менее, 0,005 нМ или менее, 0,002 нМ или менее или 0,001 нМ или менее, например, от 0,001 нМ до 20 нМ, например, от 0,01 нМ до 20 нМ, от 0,1 нМ до 20 нМ, от 0,1 нМ до 10 нМ, от 0,5 нМ до 5 нМ, от 1 нМ до 5 нМ, от 0,001 нМ до 0,1 нМ, от 0,001 нМ до 0,01 нМ, от 0,001 нМ до 0,005 нМ, от 0,01 нМ до 0,05 нМ или от 0,01 нМ до 0,1 нМ, например, как определено описанным в настоящем документе способом. В одном варианте осуществления молекула антитела связывается с человеческим APRIL при EC₅₀ 1 нМ или менее, например, примерно 0,8 нМ, примерно 0,003 нМ или примерно 0,002 нМ. В одном варианте осуществления молекула антитела не связывается или связывается с мышиным APRIL с низкой аффинностью, например, при EC₅₀ 500 нМ или более.

В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует или по существу ингибирует связывание APRIL (например, человеческого APRIL) с TACI (например, с человеческим TACI), BCMA (например, с человеческим BCMA) или и то, и другое.

В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует или по существу ингибирует связывание человеческого APRIL с человеческим TACI при IC₅₀ 50 нМ или менее, например 40 нМ или менее, 30 нМ или менее, 20 нМ или менее, 10 нМ или менее 9 нМ или менее, 8 нМ или менее, 7 нМ или менее, 6 нМ или менее, 5 нМ или менее, 4 нМ или менее, 3 нМ или менее, 2 нМ или менее, 1 нМ или менее, 0,8 нМ или менее 0,6 нМ или менее, 0,4 нМ или менее, 0,2 нМ или менее, 0,1 нМ или менее, 0,05 нМ или менее, 0,02 нМ или менее или 0,01 нМ или менее, например, от 0,01 нМ до 50 нМ, от 0,1 нМ до 50 нМ, от 0,1 нМ до 25 нМ, от 0,1 нМ до 10 нМ, от 0,1 нМ до 5 нМ, от 0,1 нМ до 1 нМ, от 0,1 нМ до 0,5 нМ, от 0,5 нМ до 5 нМ или от 1 нМ до 5 нМ, например, как определено описанным в настоящем документе способом. В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует связывание человеческого APRIL с человеческим TACI при IC₅₀ 1 нМ или менее, например, примерно 0,74 нМ, примерно 0,4 нМ, 0,3 нМ или 0,2 нМ.

В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует или по существу ингибирует связывание человеческого APRIL с человеческим BCMA при IC₅₀ 200 нМ или менее, 150 нМ или менее, 100 нМ или менее, 50 нМ или менее, 40 нМ или менее, 30 нМ или менее, 20 нМ или менее, 10 нМ или менее, 9 нМ или менее, 8 нМ или менее, 7 нМ или менее, 6 нМ или менее, 5 нМ или менее, 4 нМ или менее, 3 нМ или менее, 2 нМ или менее, 1 нМ или менее, 0,8 нМ или менее, 0,6 нМ или менее, 0,4 нМ или менее, 0,2 нМ или менее, 0,1 нМ или менее, 0,05 нМ или менее, 0,02 нМ или менее, 0,01 нМ или менее, например, от 0,01 нМ до 50 нМ, от 0,1 нМ до 50 нМ, от 0,1 нМ до 25 нМ, от 0,1 нМ до 10 нМ, от 0,1 нМ до 5 нМ, от 0,1 нМ до 1 нМ, от 0,1 нМ до 0,5 нМ, от 0,5 нМ до 5 нМ или от 1 нМ до 5 нМ, например, как определено описанным в настоящем документе способом. В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует связывание человеческого APRIL с человеческим BCMA при IC₅₀ 5 нМ или менее, например, примерно 4 нМ, примерно 2 нМ или примерно 1 нМ или 0,5 нМ или менее, например, примерно 0,22 нМ, примерно 1 нМ, примерно 0,7 нМ, примерно 0,3 нМ, примерно 0,2 нМ или примерно 0,1 нМ.

В другом варианте осуществления молекула антитела содержит:

(i) вариабельную область тяжелой цепи (VH), где вариабельная область тяжелой цепи содержит три области, определяющие комплементарность тяжелой цепи (HCDR1, HCDR2 и HCDR3), где вариабельная область тяжелой цепи содержит один, два или все из следующего: HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 связанного с 2419 антитела (например, SEQ ID NO: 11 или 17); HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 связанного с 2419 антитела (например, SEQ ID NO: 12, 282, 287 или 290); или HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 связанного с 2419 антитела (например, SEQ ID NO: 13) и

(ii) вариабельную область легкой цепи (VL), где вариабельная область легкой цепи содержит три области, определяющие комплементарность легкой цепи (LCDR1, LCDR2 и LCDR3), где вариабельная область легкой цепи содержит один, два или все из следующего: LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 связанного с 2419 антитела (например, SEQ ID NO: 280 или 314); LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 связанного с 2419 антитела (например, SEQ ID NO: 281, 285, 293 или 315); или LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 связанного с 2419 антитела (например, SEQ ID NO: 16).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит один или оба из следующего: (i) VH, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VH связанного с 2419 антитела (например, SEQ ID NO: 283, 288, 289, 291, 292, 294, 296 или 317); или (ii) VL, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VL связанного с 2419 антитела (например, SEQ ID NO: 284, 286, 295 или 316).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, кодируемую нуклеотидной последовательностью VH связанного с 2419 антитела (например, SEQ ID NO: 304, 307, 308, 309, 310, 311, 313 или 319) (или нуклеотидной последовательностью, по существу идентичной ей) или VL, кодируемую нуклеотидной последовательностью VL связанного с 2419 антителом (например, SEQ ID NO: 305, 306, 312 или 318) (или нуклеотидной последовательностью, по существу идентичной ей), или и то, и другое.

В одном варианте осуществления молекула связанного с 2419 антитела выбрана из антител 2419-0105, 2419-0205, 2419-0206, 2419-0406, 2419-0605, 2419-0805, 2419-0806, 2419-1204, 2419-1205, 2419-1210, 2419-1305, 2419-1306, 2419-1310 или 2419-1406. В одном варианте осуществления связанное с 2419 антитело представляет собой молекулу гуманизированного антитела. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность любой из SEQ ID NO: 209-214, 283, 288, 289, 291, 292, 294, 296 или 317, VL, содержащую аминокислотную последовательность любой из SEQ ID NO: 215-219, 284, 286, 295 или 316 или и то, и другое.

В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с человеческим APRIL. В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с человеческим APRIL при EC₅₀ 20 нМ или менее, например 10 нМ или менее, 9 нМ или менее или менее, 8 нМ или менее, 7 нМ или менее, 6 нМ или менее, 5 нМ или менее, 4 нМ или менее, 3 нМ или менее, 2 нМ или менее, 1 нМ или менее, 0,8 нМ или менее, 0,6 нМ или менее, 0,4 нМ или менее, 0,2 нМ или менее, 0,1 нМ или менее, 0,05 нМ или менее, 0,02 нМ или менее, 0,01 нМ или менее, 0,005 нМ или менее, 0,002 нМ или менее или 0,001 нМ или менее, например, от 0,001 нМ до 20 нМ, например, от 0,01 нМ до 20 нМ, от 0,1 нМ до 20 нМ, например, от 0,1 нМ до 10 нМ, от 0,5 нМ до 5 нМ, от 1 нМ до 5 нМ, от 0,001 нМ до 0,1 нМ, от 0,001 нМ до 0,01 нМ, от 0,001 нМ до 0,005 нМ, от 0,01 нМ до 0,05 нМ или от 0,01 нМ до 0,1 нМ, например, как определено описанным в настоящем документе способом. В одном варианте осуществления молекула антитела связывается с человеческим APRIL при EC₅₀ 1 нМ или менее, например, примерно 0,8 нМ, примерно 0,003 нМ или примерно 0,002 нМ.

В одном варианте осуществления молекула антитела не связывается или связывается с мышиным APRIL с низкой аффинностью, например, при EC₅₀ 500 нМ или более.

В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует или по существу ингибирует связывание APRIL (например, человеческого APRIL) с TACI (например, с человеческим TACI), BCMA (например, с человеческим BCMA) или и то, и другое. В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует или по существу ингибирует связывание человеческого APRIL с человеческим TACI при IC₅₀ 50 нМ или менее, например 40 нМ или менее, 30 нМ или менее, 20 нМ или менее, 10 нМ или менее 9 нМ или менее, 8 нМ или менее, 7 нМ или менее, 6 нМ или менее, 5 нМ или менее, 4 нМ или менее, 3 нМ или менее, 2 нМ или менее, 1 нМ или менее, 0,8 нМ или менее 0,6 нМ или менее, 0,4 нМ или менее, 0,2 нМ или менее, 0,1 нМ или менее, 0,05 нМ или менее, 0,02 нМ или менее или 0,01 нМ или менее, например, от 0,01 нМ до 50 нМ, от 0,1 нМ до 50 нМ, от 0,1 нМ до 25 нМ, от 0,1 нМ до 10 нМ, от 0,1 нМ до 5 нМ, от 0,1 нМ до 1 нМ, от 0,1 нМ до 0,5 нМ, от 0,5 нМ до 5 нМ или от 1 нМ до 5 нМ, например, как определено описанным в настоящем документе способом. В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует связывание человеческого APRIL с человеческим TACI при IC₅₀ 1 нМ или менее, например, примерно 0,74 нМ, примерно 0,4 нМ, 0,3 нМ или 0,2 нМ.

В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует или по существу ингибирует связывание человеческого APRIL с человеческим BCMA при IC₅₀ 200 нМ или менее, 150 нМ или менее, 100 нМ или менее, 50 нМ или менее, 40 нМ или менее, 30 нМ или менее, 20 нМ или менее, 10 нМ или менее, 9 нМ или менее, 8 нМ или менее, 7 нМ или менее, 6 нМ или менее, 5 нМ или менее, 4 нМ или менее, 3 нМ или менее, 2 нМ или менее, 1 нМ или менее, 0,8 нМ или менее, 0,6 нМ или менее, 0,4 нМ или менее, 0,2 нМ или менее, 0,1 нМ или менее, 0,05 нМ или менее, 0,02 нМ или менее, 0,01 нМ или менее, например, от 0,01 нМ до 50 нМ, от 0,1 нМ до 50 нМ, от 0,1 нМ до 25 нМ, от 0,1 нМ до 10 нМ, от 0,1 нМ до 5 нМ, от 0,1 нМ до 1 нМ, от 0,1 нМ до 0,5 нМ, от 0,5 нМ до 5 нМ или от 1 нМ до 5 нМ, например, как определено описанным в настоящем документе способом. В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует связывание человеческого APRIL с человеческим BCMA при IC₅₀ 5 нМ или менее, например, примерно 4 нМ, примерно 2 нМ или примерно 1 нМ или 0,5 нМ или менее, например, примерно 0,22 нМ, примерно 1 нМ, примерно 0,7 нМ, примерно 0,3 нМ, примерно 0,2 нМ или примерно 0,1 нМ.

В другом варианте осуществления молекула антитела содержит (i) вариабельную область тяжелой цепи (VH), где вариабельная область тяжелой цепи содержит три области, определяющие комплементарность тяжелой цепи (HCDR1, HCDR2 и HCDR3), где вариабельная область тяжелой цепи содержит один, два или все из следующего: HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 2922 (например, SEQ ID NO: 21 или 37); HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 2922 (например, SEQ ID NO: 32 или 38); или HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклонального антитела 2922 (например, SEQ ID NO: 33) и

(ii) вариабельную область легкой цепи (VL), где вариабельная область легкой цепи содержит три области, определяющие комплементарность легкой цепи (LCDR1, LCDR2 и LCDR3), где вариабельная область легкой цепи содержит один, два или все из следующего: LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 моноклонального антитела 2922 (например, SEQ ID NO: 34); LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 2922 (например, SEQ ID NO: 35); или LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 2922 (например, SEQ ID NO: 36).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит один или оба из следующего: (i) VH, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VH моноклонального антитела 2922 (например SEQ ID NO: 39); или (ii) VL, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VL моноклонального антитела 2922 (например, SEQ ID NO: 40).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, кодируемую нуклеотидной последовательностью SEQ ID NO: 77 (или нуклеотидной последовательностью, по существу идентичной ей), или VL, кодируемую нуклеотидной последовательностью SEQ ID NO: 78 (или нуклеотидной последовательностью, по существу, идентичной им) или и то, и другое.

В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой моноклональное антитело 2922. В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой гуманизированное моноклональное антитело 2922.

В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с человеческим APRIL. В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с человеческим APRIL при EC₅₀ 20 нМ или менее, например 10 нМ или менее, 9 нМ или менее, 8 нМ или менее, 7 нМ или менее, 6 нМ или менее 5 нМ или менее, 4 нМ или менее, 3 нМ или менее, 2 нМ или менее, 1 нМ или менее, 0,8 нМ или менее, 0,6 нМ или менее, 0,4 нМ или менее, 0,2 нМ или менее, 0,1 нМ или менее 0,05 нМ или менее, 0,02 нМ или менее, 0,01 нМ или менее, 0,005 нМ или менее, 0,002 нМ или менее или 0,001 нМ или менее, например, от 0,001 нМ до 20 нМ, например, от 0,01 нМ до 20 нМ, от 0,1 нМ до 20 нМ, от 0,1 нМ до 10 нМ, от 0,5 нМ до 5 нМ, от 1 нМ до 5 нМ, от 0,001 нМ до 0,1 нМ, от 0,001 нМ до 0,01 нМ, от 0,001 нМ до 0,005 нМ, от 0,01 нМ до 0,05 нМ или от 0,01 нМ до 0,1 нМ, например, как определено описанным в настоящем документе способом. В одном варианте осуществления молекула антитела связывается с человеческим APRIL при EC₅₀ 5 нМ или менее, например, примерно 3,3 нМ. В одном варианте осуществления молекула антитела не связывается или связывается с мышиным APRIL с низкой аффинностью, например, при EC₅₀ 1000 нМ или более, например, 2000 нМ или более, например, как определено описанным в настоящем документе способом.

В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует или по существу ингибирует связывание APRIL (например, человеческого APRIL) с TACI (например, с человеческим TACI), BCMA (например, с человеческим BCMA) или и то, и другое. В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует или по существу ингибирует связывание человеческого APRIL с человеческим TACI при IC₅₀ 50 нМ или менее, например 40 нМ или менее, 30 нМ или менее, 20 нМ или менее, 10 нМ или менее 9 нМ или менее, 8 нМ или менее, 7 нМ или менее, 6 нМ или менее, 5 нМ или менее, 4 нМ или менее, 3 нМ или менее, 2 нМ или менее, 1 нМ или менее, 0,8 нМ или менее 0,6 нМ или менее, 0,4 нМ или менее, 0,2 нМ или менее, 0,1 нМ или менее, 0,05 нМ или менее, 0,02 нМ или менее или 0,01 нМ или менее, например, от 0,01 нМ до 50 нМ, от 0,1 нМ до 50 нМ, от 0,1 нМ до 25 нМ, от 0,1 нМ до 10 нМ, от 0,1 нМ до 5 нМ, от 0,1 нМ до 1 нМ, от 0,1 нМ до 0,5 нМ, от 0,5 нМ до 5 нМ или от 1 нМ до 5 нМ, например, как определено описанным в настоящем документе способом. В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует связывание человеческого APRIL с человеческим TACI при IC₅₀ 50 нМ или менее, например, примерно 31,64 нМ.

В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует или по существу ингибирует связывание человеческого APRIL с человеческим BCMA при IC₅₀ 200 нМ или менее, 150 нМ или менее, 100 нМ или менее, 50 нМ или менее, 40 нМ или менее, 30 нМ или менее, 20 нМ или менее, 10 нМ или менее, 9 нМ или менее, 8 нМ или менее, 7 нМ или менее, 6 нМ или менее, 5 нМ или менее, 4 нМ или менее, 3 нМ или менее, 2 нМ или менее, 1 нМ или менее, 0,8 нМ или менее, 0,6 нМ или менее, 0,4 нМ или менее, 0,2 нМ или менее, 0,1 нМ или менее, 0,05 нМ или менее, 0,02 нМ или менее, 0,01 нМ или менее, например, от 0,01 нМ до 50 нМ, от 0,1 нМ до 50 нМ, от 0,1 нМ до 25 нМ, от 0,1 нМ до 10 нМ, от 0,1 нМ до 5 нМ, от 0,1 нМ до 1 нМ, от 0,1 нМ до 0,5 нМ, от 0,5 нМ до 5 нМ или от 1 нМ до 5 нМ, например, как определено описанным в настоящем документе способом. В одном варианте осуществления IC₅₀ составляет 50 нМ или менее. В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует связывание человеческого TACI с человеческим BCMA при IC₅₀ 25 нМ или менее, например, примерно 21,96 нМ.

В другом варианте осуществления молекула антитела содержит:

(i) вариабельную область тяжелой цепи (VH), где вариабельная область тяжелой цепи содержит три области, определяющие комплементарность тяжелой цепи (HCDR1, HCDR2 и HCDR3), где вариабельная область тяжелой цепи содержит один, два или все из следующего: HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 3327 (например, SEQ ID NO: 51 или 57); HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 3327 (например, SEQ ID NO: 52 или 58); или HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклонального антитела 3327 (например, SEQ ID NO: 53) и

(ii) вариабельную область легкой цепи (VH), где вариабельная область легкой цепи содержит три области, определяющие комплементарность легкой цепи (LCDR1, LCDR2 и LCDR3), где вариабельная область легкой цепи содержит один, два или все из следующего: LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 моноклонального антитела 3327 (например, SEQ ID NO: 54); LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 3327 (например, SEQ ID NO: 55); или LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 3327 (например, SEQ ID NO: 56).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит один или оба из следующего: (i) VH, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VH моноклонального антитела 3327 (например SEQ ID NO: 59); или (ii) VL, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VL моноклонального антитела 3327 (например, SEQ ID NO: 60).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, кодируемую нуклеотидной последовательностью SEQ ID NO: 81 (или нуклеотидной последовательностью, по существу идентичной ей) или VL, кодируемую нуклеотидной последовательностью SEQ ID NO: 82 (или нуклеотидной последовательностью по существу идентичной ей) или и то, и другое.

В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой моноклональное антитело 3327. В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой гуманизированное антитело 3327.

В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с человеческим APRIL. В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с человеческим APRIL при EC₅₀ 100 нМ или менее, например, 80 нМ или менее, 60 нМ или менее, 40 нМ или менее, 20 нМ или менее, 10 нМ или менее 9 нМ или менее 9 нМ или менее, 8 нМ или менее, 7 нМ или менее, 6 нМ или менее, 5 нМ или менее, 4 нМ или менее, 3 нМ или менее, 2 нМ или менее, 1 нМ или менее, 0,8 нМ или менее, 0,6 нМ или менее, 0,4 нМ или менее, 0,2 нМ или менее, 0,1 нМ или менее, 0,05 нМ или менее, 0,02 нМ или менее, 0,01 нМ или менее, 0,005 нМ или менее, 0,002 нМ или менее, или 0,001 нМ или менее, например, от 0,001 нМ до 100 нМ, например, от 0,001 нМ до 50 нМ, от 0,01 нМ до 20 нМ, от 0,1 нМ до 10 нМ, от 0,5 нМ до 5 нМ или от 1 нМ до 5 нМ, от 0,001 нМ до 0,1 нМ, от 0,001 нМ до 0,01 нМ, от 0,001 нМ до 0,005 нМ, от 0,01 нМ до 0,05 нМ или от 0,01 нМ до 0,1 нМ, например, как определено описанным в настоящем документе способом. В одном варианте осуществления молекула антитела не связывается или связывается с мышиным APRIL с низкой аффинностью, например, при EC₅₀ 1000 нМ или более, например, 2000 нМ или более, например, как определено описанным в настоящем документе способом.

В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует или по существу ингибирует связывание APRIL (например, человеческого APRIL) с TACI (например, с человеческим TACI), BCMA (например, с человеческим BCMA) или и то, и другое. В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует или по существу ингибирует связывание человеческого APRIL с человеческим TACI при IC₅₀ 50 нМ или менее, например 40 нМ или менее, 30 нМ или менее, 20 нМ или менее, 10 нМ или менее 9 нМ или менее, 8 нМ или менее, 7 нМ или менее, 6 нМ или менее, 5 нМ или менее, 4 нМ или менее, 3 нМ или менее, 2 нМ или менее, 1 нМ или менее, 0,8 нМ или менее 0,6 нМ или менее, 0,4 нМ или менее, 0,2 нМ или менее, 0,1 нМ или менее, 0,05 нМ или менее, 0,02 нМ или менее или 0,01 нМ или менее, например, от 0,01 нМ до 50 нМ, от 0,1 нМ до 50 нМ, от 0,1 нМ до 25 нМ, от 0,1 нМ до 10 нМ, от 0,1 нМ до 5 нМ, от 0,1 нМ до 1 нМ, от 0,1 нМ до 0,5 нМ, от 0,5 нМ до 5 нМ или от 1 нМ до 5 нМ, например, как определено описанным в настоящем документе способом. В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует связывание человеческого APRIL с человеческим TACI при IC₅₀ 5 нМ или менее, например, примерно 3,16 нМ.

В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует или по существу ингибирует связывание человеческого APRIL с человеческим BCMA при IC₅₀ 200 нМ или менее, 150 нМ или менее, 100 нМ или менее, 50 нМ или менее, 40 нМ или менее, 30 нМ или менее, 20 нМ или менее, 10 нМ или менее, 9 нМ или менее, 8 нМ или менее, 7 нМ или менее, 6 нМ или менее, 5 нМ или менее, 4 нМ или менее, 3 нМ или менее, 2 нМ или менее, 1 нМ или менее, 0,8 нМ или менее, 0,6 нМ или менее, 0,4 нМ или менее, 0,2 нМ или менее, 0,1 нМ или менее, 0,05 нМ или менее, 0,02 нМ или менее, 0,01 нМ или менее, например, от 0,01 нМ до 50 нМ, от 0,1 нМ до 50 нМ, от 0,1 нМ до 25 нМ, от 0,1 нМ до 10 нМ, от 0,1 нМ до 5 нМ, от 0,1 нМ до 1 нМ, от 0,1 нМ до 0,5 нМ, от 0,5 нМ до 5 нМ или от 1 нМ до 5 нМ, например, как определено описанным в настоящем документе способом. В одном варианте осуществления IC₅₀ составляет 50 нМ или менее. В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует связывание человеческого APRIL с человеческим BCMA при IC₅₀ 5 нМ или менее, например примерно 2,35 нМ.

В другом варианте осуществления молекула антитела содержит:

(i) вариабельную область тяжелой цепи (VH), где вариабельная область тяжелой цепи содержит три области, определяющие комплементарность тяжелой цепи (HCDR1, HCDR2 и HCDR3), где вариабельная область тяжелой цепи содержит один, два или все из следующего: HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 4035 (например, SEQ ID NO: 93 или 99); HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 4035 (например, SEQ ID NO: 94 или 100); или HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклонального антитела 4035 (например, SEQ ID NO: 95) и

(ii) вариабельную область легкой цепи (VH), где вариабельная область легкой цепи содержит три области, определяющие комплементарность легкой цепи (LCDR1, LCDR2 и LCDR3), где вариабельная область легкой цепи содержит один, два или все из следующего: LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 моноклонального антитела 4035 (например, SEQ ID NO: 96); LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 4035 (например, SEQ ID NO: 97); или LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 4035 (например, SEQ ID NO: 98).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит один или оба из следующего: (i) VH, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VH моноклонального антитела 4035 (например SEQ ID NO: 101); или (ii) VL, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VL моноклонального антитела 4035 (например, SEQ ID NO: 102).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, кодируемую нуклеотидной последовательностью SEQ ID NO: 173 (или нуклеотидной последовательностью, по существу идентичной ей), или VL, кодируемую нуклеотидной последовательностью SEQ ID NO: 174 (или нуклеотидной последовательностью, по существу, идентичной ей) или и то, и другое.

В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой моноклональное антитело 4035. В одном варианте осуществления моноклональное антитело 4035 представляет собой гуманизированное моноклональное антитело 4035. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность любой из SEQ ID NO: 220-227 или 262-265, VL, содержащую аминокислотную последовательность любой из SEQ ID NO: 228-234, или и то, и другое.

В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с человеческим APRIL. В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с человеческим APRIL при EC₅₀ 20 нМ или менее, например 10 нМ или менее, 9 нМ или менее, 8 нМ или менее, 7 нМ или менее, 6 нМ или менее 5 нМ или менее, 4 нМ или менее, 3 нМ или менее, 2 нМ или менее, 1 нМ или менее, 0,8 нМ или менее, 0,6 нМ или менее, 0,4 нМ или менее, 0,2 нМ или менее, 0,1 нМ или менее 0,05 нМ или менее, 0,02 нМ или менее, 0,01 нМ или менее, 0,005 нМ или менее, 0,002 нМ или менее или 0,001 нМ или менее, например, от 0,001 нМ до 20 нМ, например, от 0,01 нМ до 20 нМ, от 0,1 нМ до 20 нМ, от 0,1 нМ до 10 нМ, от 0,5 нМ до 5 нМ, от 1 нМ до 5 нМ, от 0,001 нМ до 0,1 нМ, от 0,001 нМ до 0,01 нМ, от 0,001 нМ до 0,005 нМ, от 0,01 нМ до 0,05 нМ или от 0,01 нМ до 0,1 нМ, например, как определено описанным в настоящем документе способом. В одном варианте осуществления молекула антитела связывается с человеческим APRIL при EC₅₀ 0,01 нМ или менее, например, примерно 0,001-0,002 нМ. В одном варианте осуществления молекула антитела не связывается или связывается с мышиным APRIL с низкой аффинностью, например, при EC₅₀ 1000 нМ или более, например, 2000 нМ или более, например, как определено описанным в настоящем документе способом.

В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует или по существу ингибирует связывание APRIL (например, человеческого APRIL) с TACI (например, с человеческим TACI), BCMA (например, с человеческим BCMA) или и то, и другое. В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует или по существу ингибирует связывание человеческого APRIL с человеческим TACI при IC₅₀ 50 нМ или менее, например 40 нМ или менее, 30 нМ или менее, 20 нМ или менее, 10 нМ или менее 9 нМ или менее, 8 нМ или менее, 7 нМ или менее, 6 нМ или менее, 5 нМ или менее, 4 нМ или менее, 3 нМ или менее, 2 нМ или менее, 1 нМ или менее, 0,8 нМ или менее 0,6 нМ или менее, 0,4 нМ или менее, 0,2 нМ или менее, 0,1 нМ или менее, 0,05 нМ или менее, 0,02 нМ или менее или 0,01 нМ или менее, например, от 0,01 нМ до 50 нМ, от 0,1 нМ до 50 нМ, от 0,1 нМ до 25 нМ, от 0,1 нМ до 10 нМ, от 0,1 нМ до 5 нМ, от 0,1 нМ до 1 нМ, от 0,1 нМ до 0,5 нМ, от 0,5 нМ до 5 нМ или от 1 нМ до 5 нМ, например, как определено описанным в настоящем документе способом. В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует связывание человеческого APRIL с человеческим TACI при IC₅₀ 5 нМ или менее, например, примерно 3,16 нМ или примерно 0,1-0,5 нМ или 0,2-0,4 нМ.

В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует или по существу ингибирует связывание человеческого APRIL с человеческим BCMA при IC₅₀ 200 нМ или менее, 150 нМ или менее, 100 нМ или менее, 50 нМ или менее, 40 нМ или менее, 30 нМ или менее, 20 нМ или менее, 10 нМ или менее, 9 нМ или менее, 8 нМ или менее, 7 нМ или менее, 6 нМ или менее, 5 нМ или менее, 4 нМ или менее, 3 нМ или менее, 2 нМ или менее, 1 нМ или менее, 0,8 нМ или менее, 0,6 нМ или менее, 0,4 нМ или менее, 0,2 нМ или менее, 0,1 нМ или менее, 0,05 нМ или менее, 0,02 нМ или менее, 0,01 нМ или менее, например, от 0,01 нМ до 50 нМ, от 0,1 нМ до 50 нМ, от 0,1 нМ до 25 нМ, от 0,1 нМ до 10 нМ, от 0,1 нМ до 5 нМ, от 0,1 нМ до 1 нМ, от 0,1 нМ до 0,5 нМ, от 0,5 нМ до 5 нМ или от 1 нМ до 5 нМ, например, как определено описанным в настоящем документе способом. В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует связывание человеческого APRIL с человеческим BCMA при IC₅₀ 5 нМ или менее, например, примерно 2,35 нМ или примерно 0,1-0,5 нМ или 0,1-0,2 нМ.

В другом варианте осуществления молекула антитела содержит:

(i) вариабельную область тяжелой цепи (VH), где вариабельная область тяжелой цепи содержит три области, определяющие комплементарность тяжелой цепи (HCDR1, HCDR2 и HCDR3), где вариабельная область тяжелой цепи содержит один, два или все из следующего: HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 4035-062 (например, SEQ ID NO: 93 или 99); HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 4035-062 (например, SEQ ID NO: 94 или 273); или HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклонального антитела 4035-062 (например, SEQ ID NO: 95) и

(ii) вариабельную область легкой цепи (VH), где вариабельная область легкой цепи содержит три области, определяющие комплементарность легкой цепи (LCDR1, LCDR2 и LCDR3), где вариабельная область легкой цепи содержит один, два или все из следующего: LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 моноклонального антитела 4035-062 (например, SEQ ID NO: 96); LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 4035-062 (например, SEQ ID NO: 97); или LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 4035-062 (например, SEQ ID NO: 98).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит один или оба из следующего: (i) VH, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VH моноклонального антитела 4035- 062 (например, SEQ ID NO: 225); или (ii) VL, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VL моноклонального антитела 4035-062 (например, SEQ ID NO: 229).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, кодируемую нуклеотидной последовательностью SEQ ID NO: 299 (или нуклеотидной последовательностью, по существу идентичной ей), или VL, кодируемую нуклеотидной последовательностью SEQ ID NO: 300 (или нуклеотидной последовательностью, по существу, идентичной ей) или и то, и другое.

В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой моноклональное антитело 4035-062.

В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с человеческим APRIL. В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с человеческим APRIL при EC₅₀ 20 нМ или менее, например 10 нМ или менее, 9 нМ или менее, 8 нМ или менее, 7 нМ или менее, 6 нМ или менее 5 нМ или менее, 4 нМ или менее, 3 нМ или менее, 2 нМ или менее, 1 нМ или менее, 0,8 нМ или менее, 0,6 нМ или менее, 0,4 нМ или менее, 0,2 нМ или менее, 0,1 нМ или менее 0,05 нМ или менее, 0,02 нМ или менее, 0,01 нМ или менее, 0,005 нМ или менее, 0,002 нМ или менее или 0,001 нМ или менее, например, от 0,001 нМ до 20 нМ, например, от 0,01 нМ до 20 нМ, от 0,1 нМ до 20 нМ, от 0,1 нМ до 10 нМ, от 0,5 нМ до 5 нМ, от 1 нМ до 5 нМ, от 0,001 нМ до 0,1 нМ, от 0,001 нМ до 0,01 нМ, от 0,001 нМ до 0,005 нМ, от 0,01 нМ до 0,05 нМ или от 0,01 нМ до 0,1 нМ, например, как определено описанным в настоящем документе способом. В одном варианте осуществления молекула антитела связывается с человеческим APRIL при EC₅₀ 0,01 нМ или менее, например, примерно 0,001-0,002 нМ. В одном варианте осуществления молекула антитела не связывается или связывается с мышиным APRIL с низкой аффинностью, например, при EC₅₀ 1000 нМ или более, например, 2000 нМ или более, например, как определено описанным в настоящем документе способом.

В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует или по существу ингибирует связывание APRIL (например, человеческого APRIL) с TACI (например, с человеческим TACI), BCMA (например, с человеческим BCMA) или и то, и другое. В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует или по существу ингибирует связывание человеческого APRIL с человеческим TACI при IC₅₀ 50 нМ или менее, например 40 нМ или менее, 30 нМ или менее, 20 нМ или менее, 10 нМ или менее 9 нМ или менее, 8 нМ или менее, 7 нМ или менее, 6 нМ или менее, 5 нМ или менее, 4 нМ или менее, 3 нМ или менее, 2 нМ или менее, 1 нМ или менее, 0,8 нМ или менее 0,6 нМ или менее, 0,4 нМ или менее, 0,2 нМ или менее, 0,1 нМ или менее, 0,05 нМ или менее, 0,02 нМ или менее или 0,01 нМ или менее, например, от 0,01 нМ до 50 нМ, от 0,1 нМ до 50 нМ, от 0,1 нМ до 25 нМ, от 0,1 нМ до 10 нМ, от 0,1 нМ до 5 нМ, от 0,1 нМ до 1 нМ, от 0,1 нМ до 0,5 нМ, от 0,5 нМ до 5 нМ или от 1 нМ до 5 нМ, например, как определено описанным в настоящем документе способом. В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует связывание человеческого APRIL с человеческим TACI при IC₅₀ 1 нМ или менее, например, примерно 0,1-0,5 нМ или 0,2-0,4 нМ.

В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует или по существу ингибирует связывание человеческого APRIL с человеческим BCMA при IC₅₀ 200 нМ или менее, 150 нМ или менее, 100 нМ или менее, 50 нМ или менее, 40 нМ или менее, 30 нМ или менее, 20 нМ или менее, 10 нМ или менее, 9 нМ или менее, 8 нМ или менее, 7 нМ или менее, 6 нМ или менее, 5 нМ или менее, 4 нМ или менее, 3 нМ или менее, 2 нМ или менее, 1 нМ или менее, 0,8 нМ или менее, 0,6 нМ или менее, 0,4 нМ или менее, 0,2 нМ или менее, 0,1 нМ или менее, 0,05 нМ или менее, 0,02 нМ или менее, 0,01 нМ или менее, например, от 0,01 нМ до 50 нМ, от 0,1 нМ до 50 нМ, от 0,1 нМ до 25 нМ, от 0,1 нМ до 10 нМ, от 0,1 нМ до 5 нМ, от 0,1 нМ до 1 нМ, от 0,1 нМ до 0,5 нМ, от 0,5 нМ до 5 нМ или от 1 нМ до 5 нМ, например, как определено описанным в настоящем документе способом. В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует связывание человеческого APRIL с человеческим BCMA при IC₅₀ 1 нМ или менее, например, примерно 0,1-0,5 нМ или 0,1-0,2 нМ.

В другом варианте осуществления молекула антитела содержит:

(i) вариабельную область тяжелой цепи (VH), где вариабельная область тяжелой цепи содержит три области, определяющие комплементарность тяжелой цепи (HCDR1, HCDR2 и HCDR3), где вариабельная область тяжелой цепи содержит один, два или все из следующего: HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность I-Y-D-V-H (SEQ ID NO: 99); HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность V-I-W-S-D-G-S-T-D-Y-N-X12-X13-X14-X15-S (SEQ ID NO: 342), X12 представляет собой A или P, X13 представляет собой A или S, X14 представляет собой F или L, а X15 представляет собой I или K; или HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность N-W-V-D-Q-A-W-F-A-Y (SEQ ID NO: 95) и

(ii) вариабельную область легкой цепи (VH), где вариабельная область легкой цепи содержит три области, определяющие комплементарность легкой цепи (LCDR1, LCDR2 и LCDR3), где вариабельная область легкой цепи содержит один, два или все из следующего: LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность R-A-S-K-N-I-Y-S-Y-L-A (SEQ ID NO: 96); LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность N-A-K-T-L-P-E (SEQ ID NO: 97); или LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность Q-H-H-Y-G-T-P-L-T (SEQ ID NO: 98).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит один или оба из следующего: (i) VH, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 101 или 225; или (ii) VL, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 102 или 229.

В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой моноклональное антитело 4035. В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой моноклональное антитело 4035-062.

В другом варианте осуществления молекула антитела содержит:

(i) вариабельную область тяжелой цепи (VH), где вариабельная область тяжелой цепи содержит три области, определяющие комплементарность тяжелой цепи (HCDR1, HCDR2 и HCDR3), где вариабельная область тяжелой цепи содержит один, два или все из следующего: HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 3934 (например, SEQ ID NO: 103 или 109); HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 3934 (например, SEQ ID NO: 104 или 110); или HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклонального антитела 3934 (например, SEQ ID NO: 105) и

(ii) вариабельную область легкой цепи (VH), где вариабельная область легкой цепи содержит три области, определяющие комплементарность легкой цепи (LCDR1, LCDR2 и LCDR3), где вариабельная область легкой цепи содержит один, два или все из следующего: LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 моноклонального антитела 3934 (например, SEQ ID NO: 106); LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 3934 (например, SEQ ID NO: 107); или LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 3934 (например, SEQ ID NO: 108).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит один или оба из следующего: (i) VH, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VH моноклонального антитела 3934 (например, SEQ ID NO: 111); или (ii) VL, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VL моноклонального антитела 3934 (например, SEQ ID NO: 112).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, кодируемую нуклеотидной последовательностью SEQ ID NO: 175 (или нуклеотидной последовательностью, по существу идентичной ей), или VL, кодируемую нуклеотидной последовательностью SEQ ID NO: 176 (или нуклеотидной последовательностью, по существу, идентичной ей) или и то, и другое.

В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой моноклональное антитело 3934. В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой гуманизированное моноклональное антитело 3934.

В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с человеческим APRIL. В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с человеческим APRIL при EC₅₀ 20 нМ или менее, например 10 нМ или менее, 9 нМ или менее, 8 нМ или менее, 7 нМ или менее, 6 нМ или менее 5 нМ или менее, 4 нМ или менее, 3 нМ или менее, 2 нМ или менее, 1 нМ или менее, 0,8 нМ или менее, 0,6 нМ или менее, 0,4 нМ или менее, 0,2 нМ или менее, 0,1 нМ или менее 0,05 нМ или менее, 0,02 нМ или менее, 0,01 нМ или менее, 0,005 нМ или менее, 0,002 нМ или менее или 0,001 нМ или менее, например, от 0,001 нМ до 20 нМ, например, от 0,01 нМ до 20 нМ, от 0,1 нМ до 20 нМ, от 0,1 нМ до 10 нМ, от 0,5 нМ до 5 нМ, от 1 нМ до 5 нМ, от 0,001 нМ до 0,1 нМ, от 0,001 нМ до 0,01 нМ, от 0,001 нМ до 0,005 нМ, от 0,01 нМ до 0,05 нМ или от 0,01 нМ до 0,1 нМ, например, как определено описанным в настоящем документе способом. В одном варианте осуществления молекула антитела не связывается или связывается с мышиным APRIL с низкой аффинностью, например, при EC₅₀ 1000 нМ или более, например, 2000 нМ или более, например, как определено описанным в настоящем документе способом.

В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует или по существу ингибирует связывание APRIL (например, человеческого APRIL) с TACI (например, с человеческим TACI), BCMA (например, с человеческим BCMA) или и то, и другое. В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует или по существу ингибирует связывание человеческого APRIL с человеческим TACI при IC₅₀ 50 нМ или менее, например 40 нМ или менее, 30 нМ или менее, 20 нМ или менее, 10 нМ или менее 9 нМ или менее, 8 нМ или менее, 7 нМ или менее, 6 нМ или менее, 5 нМ или менее, 4 нМ или менее, 3 нМ или менее, 2 нМ или менее, 1 нМ или менее, 0,8 нМ или менее 0,6 нМ или менее, 0,4 нМ или менее, 0,2 нМ или менее, 0,1 нМ или менее, 0,05 нМ или менее, 0,02 нМ или менее или 0,01 нМ или менее, например, от 0,01 нМ до 50 нМ, от 0,1 нМ до 50 нМ, от 0,1 нМ до 25 нМ, от 0,1 нМ до 10 нМ, от 0,1 нМ до 5 нМ, от 0,1 нМ до 1 нМ, от 0,1 нМ до 0,5 нМ, от 0,5 нМ до 5 нМ или от 1 нМ до 5 нМ, например, как определено описанным в настоящем документе способом. В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует связывание человеческого APRIL с человеческим TACI при IC₅₀ 5 нМ или менее, например, примерно 3,16 нМ.

В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует или по существу ингибирует связывание человеческого APRIL с человеческим BCMA при IC₅₀ 200 нМ или менее, 150 нМ или менее, 100 нМ или менее, 50 нМ или менее, 40 нМ или менее, 30 нМ или менее, 20 нМ или менее, 10 нМ или менее, 9 нМ или менее, 8 нМ или менее, 7 нМ или менее, 6 нМ или менее, 5 нМ или менее, 4 нМ или менее, 3 нМ или менее, 2 нМ или менее, 1 нМ или менее, 0,8 нМ или менее, 0,6 нМ или менее, 0,4 нМ или менее, 0,2 нМ или менее, 0,1 нМ или менее, 0,05 нМ или менее, 0,02 нМ или менее, 0,01 нМ или менее, например, от 0,01 нМ до 50 нМ, от 0,1 нМ до 50 нМ, от 0,1 нМ до 25 нМ, от 0,1 нМ до 10 нМ, от 0,1 нМ до 5 нМ, от 0,1 нМ до 1 нМ, от 0,1 нМ до 0,5 нМ, от 0,5 нМ до 5 нМ или от 1 нМ до 5 нМ, например, как определено описанным в настоящем документе способом. В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует связывание человеческого APRIL с человеческим BCMA при IC₅₀ 5 нМ или менее, например, примерно 2,35 нМ.

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит:

(i) вариабельную область тяжелой цепи (VH), где вариабельная область тяжелой цепи содержит три области, определяющие комплементарность тяжелой цепи (HCDR1, HCDR2 и HCDR3), где вариабельная область тяжелой цепи содержит один, два или все из следующего: HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 4338 (например, SEQ ID NO: 11 или 149); HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 4338 (например, SEQ ID NO: 142 или 150); или HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклонального антитела 4338 (например, SEQ ID NO: 143) и

(ii) вариабельную область легкой цепи (VH), где вариабельная область легкой цепи содержит три области, определяющие комплементарность легкой цепи (LCDR1, LCDR2 и LCDR3), где вариабельная область легкой цепи содержит один, два или все из следующего: LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 моноклонального антитела 4338 (например, SEQ ID NO: 144 или 146); LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 4338 (например, SEQ ID NO: 107 или 147); или LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 4338 (например, SEQ ID NO: 145 или 148).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит один или оба из следующего: (i) VH, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VH моноклонального антитела 4338 (например, SEQ ID NO: 151); или (ii) VL, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VL моноклонального антитела 4338 (например, SEQ ID NO: 152 или 153).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, кодируемую нуклеотидной последовательностью SEQ ID NO: 183 (или нуклеотидной последовательностью, по существу идентичной ей), или VL, кодируемую нуклеотидной последовательностью SEQ ID NO: 184 или 185 (или нуклеотидной последовательностью, по существу идентичной ей), или и то, и другое.

В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой моноклональное антитело 4338. В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой гуманизированное моноклональное антитело 4338.

В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с человеческим APRIL. В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с человеческим APRIL при EC₅₀ 20 нМ или менее, например 10 нМ или менее, 9 нМ или менее, 8 нМ или менее, 7 нМ или менее, 6 нМ или менее 5 нМ или менее, 4 нМ или менее, 3 нМ или менее, 2 нМ или менее, 1 нМ или менее, 0,8 нМ или менее, 0,6 нМ или менее, 0,4 нМ или менее, 0,2 нМ или менее, 0,1 нМ или менее 0,05 нМ или менее, 0,02 нМ или менее, 0,01 нМ или менее, 0,005 нМ или менее, 0,002 нМ или менее или 0,001 нМ или менее, например, от 0,001 нМ до 20 нМ, например, от 0,01 нМ до 20 нМ, от 0,1 нМ до 20 нМ, от 0,1 нМ до 10 нМ, от 0,5 нМ до 5 нМ, от 1 нМ до 5 нМ, от 0,001 нМ до 0,1 нМ, от 0,001 нМ до 0,01 нМ, от 0,001 нМ до 0,005 нМ, от 0,01 нМ до 0,05 нМ или от 0,01 нМ до 0,1 нМ, например, как определено описанным в настоящем документе способом. В одном варианте осуществления молекула антитела не связывается или связывается с мышиным APRIL с низкой аффинностью, например, при EC₅₀ 1000 нМ или более, например, 2000 нМ или более, например, как определено описанным в настоящем документе способом.

В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует или по существу ингибирует связывание APRIL (например, человеческого APRIL) с TACI (например, с человеческим TACI), BCMA (например, с человеческим BCMA) или и то, и другое. В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует или по существу ингибирует связывание человеческого APRIL с человеческим TACI при IC₅₀ 50 нМ или менее, например 40 нМ или менее, 30 нМ или менее, 20 нМ или менее, 10 нМ или менее 9 нМ или менее, 8 нМ или менее, 7 нМ или менее, 6 нМ или менее, 5 нМ или менее, 4 нМ или менее, 3 нМ или менее, 2 нМ или менее, 1 нМ или менее, 0,8 нМ или менее 0,6 нМ или менее, 0,4 нМ или менее, 0,2 нМ или менее, 0,1 нМ или менее, 0,05 нМ или менее, 0,02 нМ или менее или 0,01 нМ или менее, например, от 0,01 нМ до 50 нМ, от 0,1 нМ до 50 нМ, от 0,1 нМ до 25 нМ, от 0,1 нМ до 10 нМ, от 0,1 нМ до 5 нМ, от 0,1 нМ до 1 нМ, от 0,1 нМ до 0,5 нМ, от 0,5 нМ до 5 нМ или от 1 нМ до 5 нМ, например, как определено описанным в настоящем документе способом. В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует связывание человеческого APRIL с человеческим TACI при IC₅₀ 5 нМ или менее, например, примерно 3,16 нМ.

В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует или по существу ингибирует связывание человеческого APRIL с человеческим BCMA при IC₅₀ 200 нМ или менее, 150 нМ или менее, 100 нМ или менее, 50 нМ или менее, 40 нМ или менее, 30 нМ или менее, 20 нМ или менее, 10 нМ или менее, 9 нМ или менее, 8 нМ или менее, 7 нМ или менее, 6 нМ или менее, 5 нМ или менее, 4 нМ или менее, 3 нМ или менее, 2 нМ или менее, 1 нМ или менее, 0,8 нМ или менее, 0,6 нМ или менее, 0,4 нМ или менее, 0,2 нМ или менее, 0,1 нМ или менее, 0,05 нМ или менее, 0,02 нМ или менее, 0,01 нМ или менее, например, от 0,01 нМ до 50 нМ, от 0,1 нМ до 50 нМ, от 0,1 нМ до 25 нМ, от 0,1 нМ до 10 нМ, от 0,1 нМ до 5 нМ, от 0,1 нМ до 1 нМ, от 0,1 нМ до 0,5 нМ, от 0,5 нМ до 5 нМ или от 1 нМ до 5 нМ, например, как определено описанным в настоящем документе способом. В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует связывание человеческого APRIL с человеческим BCMA при IC₅₀ 5 нМ или менее, например примерно 2,35 нМ.

В другом варианте осуществления молекула антитела содержит (i) вариабельную область тяжелой цепи (VH), где вариабельная область тяжелой цепи содержит три области, определяющие комплементарность тяжелой цепи (HCDR1, HCDR2 и HCDR3), где вариабельная область тяжелой цепи содержит один, два или все из следующего: HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 4237 (например, SEQ ID NO: 163 или 169); HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 4237 (например, SEQ ID NO: 164 или 170); или HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклонального антитела 4237 (например, SEQ ID NO: 165) и

(ii) вариабельную область легкой цепи (VH), где вариабельная область легкой цепи содержит три области, определяющие комплементарность легкой цепи (LCDR1, LCDR2 и LCDR3), где вариабельная область легкой цепи содержит один, два или все из следующего: LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 моноклонального антитела 4237 (например, SEQ ID NO: 166); LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 4237 (например, SEQ ID NO: 167); или LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 4237 (например, SEQ ID NO: 168).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит один или оба из следующего: (i) VH, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VH моноклонального антитела 4237 (например SEQ ID NO: 171); или (ii) VL, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VL моноклонального антитела 4237 (например, SEQ ID NO: 172).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, кодируемую нуклеотидной последовательностью SEQ ID NO: 188 (или нуклеотидной последовательностью, по существу идентичной ей), или VL, кодируемую нуклеотидной последовательностью SEQ ID NO: 189 (или нуклеотидной последовательностью, по существу, идентичной ей) или и то, и другое.

В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой моноклональное антитело 4237. В одном варианте осуществления моноклональное антитело 4237 представляет собой гуманизированное моноклональное антитело 4237. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность любой из SEQ ID NO: 235-240, VL, содержащую аминокислотную последовательность любой из SEQ ID NO: 241-245, или и то, и другое.

В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с человеческим APRIL. В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с человеческим APRIL при EC₅₀ 20 нМ или менее, например 10 нМ или менее, 9 нМ или менее, 8 нМ или менее, 7 нМ или менее, 6 нМ или менее 5 нМ или менее, 4 нМ или менее, 3 нМ или менее, 2 нМ или менее, 1 нМ или менее, 0,8 нМ или менее, 0,6 нМ или менее, 0,4 нМ или менее, 0,2 нМ или менее, 0,1 нМ или менее 0,05 нМ или менее, 0,02 нМ или менее, 0,01 нМ или менее, 0,005 нМ или менее, 0,002 нМ или менее или 0,001 нМ или менее, например, от 0,001 нМ до 20 нМ, например, от 0,01 нМ до 20 нМ, от 0,1 нМ до 20 нМ, от 0,1 нМ до 10 нМ, от 0,5 нМ до 5 нМ, от 1 нМ до 5 нМ, от 0,001 нМ до 0,1 нМ, от 0,001 нМ до 0,01 нМ, от 0,001 нМ до 0,005 нМ, от 0,01 нМ до 0,05 нМ или от 0,01 нМ до 0,1 нМ, например, как определено описанным в настоящем документе способом. В одном варианте осуществления молекула антитела не связывается или связывается с мышиным APRIL с низкой аффинностью, например, при EC₅₀ 1000 нМ или более, например, 2000 нМ или более, например, как определено описанным в настоящем документе способом.

В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует или по существу ингибирует связывание APRIL (например, человеческого APRIL) с TACI (например, с человеческим TACI), BCMA (например, с человеческим BCMA) или и то, и другое. В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует или по существу ингибирует связывание человеческого APRIL с человеческим TACI при IC₅₀ 50 нМ или менее, например 40 нМ или менее, 30 нМ или менее, 20 нМ или менее, 10 нМ или менее 9 нМ или менее, 8 нМ или менее, 7 нМ или менее, 6 нМ или менее, 5 нМ или менее, 4 нМ или менее, 3 нМ или менее, 2 нМ или менее, 1 нМ или менее, 0,8 нМ или менее 0,6 нМ или менее, 0,4 нМ или менее, 0,2 нМ или менее, 0,1 нМ или менее, 0,05 нМ или менее, 0,02 нМ или менее или 0,01 нМ или менее, например, от 0,01 нМ до 50 нМ, от 0,1 нМ до 50 нМ, от 0,1 нМ до 25 нМ, от 0,1 нМ до 10 нМ, от 0,1 нМ до 5 нМ, от 0,1 нМ до 1 нМ, от 0,1 нМ до 0,5 нМ, от 0,5 нМ до 5 нМ или от 1 нМ до 5 нМ, например, как определено описанным в настоящем документе способом. В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует связывание человеческого APRIL с человеческим TACI при IC₅₀ 5 нМ или менее, например, примерно 3,16 нМ.

В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует или по существу ингибирует связывание человеческого APRIL с человеческим BCMA при IC₅₀ 200 нМ или менее, 150 нМ или менее, 100 нМ или менее, 50 нМ или менее, 40 нМ или менее, 30 нМ или менее, 20 нМ или менее, 10 нМ или менее, 9 нМ или менее, 8 нМ или менее, 7 нМ или менее, 6 нМ или менее, 5 нМ или менее, 4 нМ или менее, 3 нМ или менее, 2 нМ или менее, 1 нМ или менее, 0,8 нМ или менее, 0,6 нМ или менее, 0,4 нМ или менее, 0,2 нМ или менее, 0,1 нМ или менее, 0,05 нМ или менее, 0,02 нМ или менее, 0,01 нМ или менее, например, от 0,01 нМ до 50 нМ, от 0,1 нМ до 50 нМ, от 0,1 нМ до 25 нМ, от 0,1 нМ до 10 нМ, от 0,1 нМ до 5 нМ, от 0,1 нМ до 1 нМ, от 0,1 нМ до 0,5 нМ, от 0,5 нМ до 5 нМ или от 1 нМ до 5 нМ, например, как определено описанным в настоящем документе способом. В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует связывание человеческого APRIL с человеческим BCMA при IC₅₀ 5 нМ или менее, например примерно 2,35 нМ.

В другом варианте осуществления молекула антитела содержит один или оба из следующего:

(i) вариабельной области тяжелой цепи (VH), где вариабельная область тяжелой цепи содержит три области, определяющие комплементарность тяжелой цепи (HCDR1, HCDR2 и HCDR3), где вариабельная область тяжелой цепи содержит один, два или все из следующего: HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность G-Y-X3-X4-T-X6-X7-Y (SEQ ID NO: 330), где X3 представляет собой S или T; X4 представляет собой I или F; X6 является S или отсутствует; и X7 представляет собой G, D или S; HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность X3-X4-X5-X6-X7-X8 (SEQ ID NO: 331), где X3 отсутствует, N или Y; X4 представляет собой S или P, X5 представляет собой Y, L или R; X6 представляет собой D, N или R; X7 представляет собой G или S; и X8 представляет собой Y, D или S; или HCCDR3, содержащей аминокислотную последовательность X1-X2-X3-X4-Y-X6-X7-X8-X9-F-X11-X12 (SEQ ID NO: 332), где X1 представляет собой Y, E или H; X2 отсутствует или G; X3 представляет собой Y, D или A; X4 представляет собой D, G или Y; X6 представляет собой E, отсутствует или D; X7 представляет собой D, Y, S или K; X8 представляет собой W, N или R; X9 представляет собой Y, A или G; X11 представляет собой G или D; и X12 представляет собой V или Y, или

(ii) вариабельный участок легкой цепи (VL), где вариабельная область легкой цепи содержит три области, определяющие комплементарность легкой цепи (LCDR1, LCDR2 и LCDR3), где вариабельная область легкой цепи содержит один, два или все из следующего: LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность X1-AS-X4-SV-X7-X8-X9-G-X11-X12-X13-X14-X15 (SEQ ID NO: 333), где X1 представляет собой R или K; X4 представляет собой E или Q; X7 представляет собой D или S; X8 представляет собой N, F, I или N; X9 представляет собой Y, A, I или D; X11 - I или T; X12 представляет собой S, N или R; X13 представляет собой F, L или S; X14 представляет собой M или I; и X15 представляет собой N или H; LCDR2, содержащую аминокислотную последовательность X1-A-S-N-X5-X6-X7 (SEQ ID NO: 334), где X1 представляет собой A, R или H; X5 - Q или L; X6 представляет собой G или E; и X7 представляет собой S, P или T; или LCDR3, содержащую аминокислотную последовательность X1-QS-X4-X5-X6-P-X8-T (SEQ ID NO: 335), где X1 представляет собой Q или L; X4 представляет собой K, R или N; X5 - E или K; X6 представляет собой V, Y, I или D; и X8 представляет собой R, W или Y.

В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой любое из моноклональных антител 2218, 2419, 2922 или 3327.

В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с человеческим APRIL. В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с человеческим APRIL при EC₅₀ 20 нМ или менее, например 10 нМ или менее, 9 нМ или менее, 8 нМ или менее, 7 нМ или менее, 6 нМ или менее 5 нМ или менее, 4 нМ или менее, 3 нМ или менее, 2 нМ или менее, 1 нМ или менее, 0,8 нМ или менее, 0,6 нМ или менее, 0,4 нМ или менее, 0,2 нМ или менее, 0,1 нМ или менее 0,05 нМ или менее, 0,02 нМ или менее, 0,01 нМ или менее, 0,005 нМ или менее, 0,002 нМ или менее или 0,001 нМ или менее, например, от 0,001 нМ до 20 нМ, например, от 0,01 нМ до 20 нМ, от 0,1 нМ до 20 нМ, от 0,1 нМ до 10 нМ, от 0,5 нМ до 5 нМ, от 1 нМ до 5 нМ, от 0,001 нМ до 0,1 нМ, от 0,001 нМ до 0,01 нМ, от 0,001 нМ до 0,005 нМ, от 0,01 нМ до 0,05 нМ или от 0,01 нМ до 0,1 нМ, например, как определено описанным в настоящем документе способом. В одном варианте осуществления молекула антитела не связывается или связывается с мышиным APRIL с низкой аффинностью, например, при EC₅₀ 1000 нМ или более, например, 2000 нМ или более, например, как определено описанным в настоящем документе способом.

В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует или по существу ингибирует связывание APRIL (например, человеческого APRIL) с TACI (например, с человеческим TACI), BCMA (например, с человеческим BCMA) или и то, и другое. В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует или по существу ингибирует связывание человеческого APRIL с человеческим TACI при IC₅₀ 50 нМ или менее, например 40 нМ или менее, 30 нМ или менее, 20 нМ или менее, 10 нМ или менее 9 нМ или менее, 8 нМ или менее, 7 нМ или менее, 6 нМ или менее, 5 нМ или менее, 4 нМ или менее, 3 нМ или менее, 2 нМ или менее, 1 нМ или менее, 0,8 нМ или менее 0,6 нМ или менее, 0,4 нМ или менее, 0,2 нМ или менее или 0,1 нМ или менее, например, от 0,1 до 50 нМ, например, от 0,1 нМ до 25 нМ, от 0,1 нМ до 10 нМ, от 0,5 нМ до 5 нМ, или от 1 нМ до 5 нМ, например, как определено описанным в настоящем документе способом.

В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует или по существу ингибирует связывание человеческого APRIL с человеческим BCMA при IC₅₀ 200 нМ или менее, 150 нМ или менее, 100 нМ или менее, 50 нМ или менее, 40 нМ или менее, 30 нМ или менее, 20 нМ или менее, 10 нМ или менее, 9 нМ или менее, 8 нМ или менее, 7 нМ или менее, 6 нМ или менее, 5 нМ или менее, 4 нМ или менее, 3 нМ или менее, 2 нМ или менее, 1 нМ или менее, 0,8 нМ или менее, 0,6 нМ или менее, 0,4 нМ или менее, 0,2 нМ или менее, 0,1 нМ или менее, 0,05 нМ или менее, 0,02 нМ или менее, 0,01 нМ или менее, например, от 0,01 нМ до 50 нМ, от 0,1 нМ до 50 нМ, от 0,1 нМ до 25 нМ, от 0,1 нМ до 10 нМ, от 0,1 нМ до 5 нМ, от 0,1 нМ до 1 нМ, от 0,1 нМ до 0,5 нМ, от 0,5 нМ до 5 нМ или от 1 нМ до 5 нМ, например, как определено описанным в настоящем документе способом.

В другом варианте осуществления молекула антитела содержит один или оба из следующего:

(i) вариабельной области тяжелой цепи (VH), где вариабельная область тяжелой цепи содержит три области, определяющие комплементарность тяжелой цепи (HCDR1, HCDR2 и HCDR3), где вариабельная область тяжелой цепи содержит один, два или все из следующего: HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность X6-X7-Y-X9-X10-X11 (SEQ ID NO: 336), где X6 представляет собой S или отсутствует; X7 представляет собой G, D или S; X9 представляет собой Y, F, T или D; X10 представляет собой W, M, I или V; и X11 представляет собой N, H или F; HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность X1-I-X3-X4-X5-X6-X7-X8-X9-X10-YN-X13-X14-X15-K-X17 (SEQ ID NO: 337), где X1 представляет собой Y, R или W; X3 отсутствует, N или Y; X4 представляет собой S или P, X5 представляет собой Y, L или R; X6 представляет собой D, N или R; X7 представляет собой G или S; X8 представляет собой Y, D или S; X9 представляет собой N, T или I; X10 представляет собой N, F или K; X13 представляет собой P, Q или E; X14 представляет собой S или K; X15 представляет собой L или F; и X17 представляет собой N, G или D; или HCCDR3, содержащий аминокислотную последовательность X1-X2-X3-X4-Y-X6-X7-X8-X9-F-X11-X12 (SEQ ID NO: 332), где X1 представляет собой Y, E или H; X2 отсутствует или G; X3 представляет собой Y, D или A; X4 представляет собой D, G или Y; X6 - E, отсутствует или D; X7 представляет собой D, Y, S или K; X8 представляет собой W, N или R; X9 представляет собой Y, A или G; X11 представляет собой G или D; и X12 представляет собой V или Y, или

(ii) вариабельной области легкой цепи (VL), где вариабельная область легкой цепи содержит три области, определяющие комплементарность легкой цепи (LCDR1, LCDR2 и LCDR3), где вариабельная область легкой цепи содержит один, два или все из следующего: LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность X1-AS-X4-SV-X7-X8-X9-G-X11-X12-X13-X14-X15 (SEQ ID NO: 333), где X1 представляет собой R или K; X4 представляет собой E или Q; X7 представляет собой D или S; X8 представляет собой N, F, I или N; X9 представляет собой Y, A, I или D; X11 представляет собой I или T; X12 представляет собой S, N или R; X13 представляет собой F, L или S; X14 представляет собой M или I; и X15 представляет собой N или H; LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность X1-A-S-N-X5-X6-X7 (SEQ ID NO: 334), где X1 представляет собой A, R или H; X5 представляет собой Q или L; X6 представляет собой G или E; и X7 представляет собой S, P или T; или LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность X1-QS-X4-X5-X6-P-X8-T (SEQ ID NO: 335), где X1 представляет собой Q или L; X4 представляет собой K, R или N; X5 - E или K; X6 представляет собой V, Y, I или D; и X8 представляет собой R, W или Y.

В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой любое из моноклональных антител 2218, 2419, 2922 или 3327. В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой гуманизированное моноклональное антитело 2218, 2419, 2922 или 3327.

В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с человеческим APRIL. В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с человеческим APRIL при EC₅₀ 20 нМ или менее, например 10 нМ или менее, 9 нМ или менее, 8 нМ или менее, 7 нМ или менее, 6 нМ или менее 5 нМ или менее, 4 нМ или менее, 3 нМ или менее, 2 нМ или менее, 1 нМ или менее, 0,8 нМ или менее, 0,6 нМ или менее, 0,4 нМ или менее, 0,2 нМ или менее, 0,1 нМ или менее 0,05 нМ или менее, 0,02 нМ или менее, 0,01 нМ или менее, 0,005 нМ или менее, 0,002 нМ или менее или 0,001 нМ или менее, например, от 0,001 нМ до 20 нМ, например, от 0,01 нМ до 20 нМ, от 0,1 нМ до 20 нМ, от 0,1 нМ до 10 нМ, от 0,5 нМ до 5 нМ, от 1 нМ до 5 нМ, от 0,001 нМ до 0,1 нМ, от 0,001 нМ до 0,01 нМ, от 0,001 нМ до 0,005 нМ, от 0,01 нМ до 0,05 нМ или от 0,01 нМ до 0,1 нМ, например, как определено описанным в настоящем документе способом. В одном варианте осуществления молекула антитела не связывается или связывается с мышиным APRIL с низкой аффинностью, например, при EC₅₀ 1000 нМ или более, например, 2000 нМ или более, например, как определено описанным в настоящем документе способом.

В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует или по существу ингибирует связывание APRIL (например, человеческого APRIL) с TACI (например, с человеческим TACI), BCMA (например, с человеческим BCMA) или и то, и другое. В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует или по существу ингибирует связывание человеческого APRIL с человеческим TACI при IC₅₀ 50 нМ или менее, например 40 нМ или менее, 30 нМ или менее, 20 нМ или менее, 10 нМ или менее 9 нМ или менее, 8 нМ или менее, 7 нМ или менее, 6 нМ или менее, 5 нМ или менее, 4 нМ или менее, 3 нМ или менее, 2 нМ или менее, 1 нМ или менее, 0,8 нМ или менее 0,6 нМ или менее, 0,4 нМ или менее, 0,2 нМ или менее, 0,1 нМ или менее, 0,05 нМ или менее, 0,02 нМ или менее или 0,01 нМ или менее, например, от 0,01 нМ до 50 нМ, от 0,1 нМ до 50 нМ, от 0,1 нМ до 25 нМ, от 0,1 нМ до 10 нМ, от 0,1 нМ до 5 нМ, от 0,1 нМ до 1 нМ, от 0,1 нМ до 0,5 нМ, от 0,5 нМ до 5 нМ или от 1 нМ до 5 нМ, например, как определено описанным в настоящем документе способом.

В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует или по существу ингибирует связывание человеческого APRIL с человеческим BCMA при IC₅₀ 200 нМ или менее, 150 нМ или менее, 100 нМ или менее, 50 нМ или менее, 40 нМ или менее, 30 нМ или менее, 20 нМ или менее, 10 нМ или менее, 9 нМ или менее, 8 нМ или менее, 7 нМ или менее, 6 нМ или менее, 5 нМ или менее, 4 нМ или менее, 3 нМ или менее, 2 нМ или менее, 1 нМ или менее, 0,8 нМ или менее, 0,6 нМ или менее, 0,4 нМ или менее, 0,2 нМ или менее, 0,1 нМ или менее, 0,05 нМ или менее, 0,02 нМ или менее, 0,01 нМ или менее, например, от 0,01 нМ до 50 нМ, от 0,1 нМ до 50 нМ, от 0,1 нМ до 25 нМ, от 0,1 нМ до 10 нМ, от 0,1 нМ до 5 нМ, от 0,1 нМ до 1 нМ, от 0,1 нМ до 0,5 нМ, от 0,5 нМ до 5 нМ или от 1 нМ до 5 нМ, например, как определено описанным в настоящем документе способом.

В другом варианте осуществления молекула антитела содержит:

(i) вариабельную область тяжелой цепи (VH), где вариабельная область тяжелой цепи содержит три области, определяющие комплементарность тяжелой цепи (HCDR1, HCDR2 и HCDR3), где вариабельная область тяжелой цепи содержит один, два или все из следующего: HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 3530 (например, SEQ ID NO: 61 или 64); HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 3530 (например, SEQ ID NO: 62 или 65); или HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклонального антитела 3530 (например, SEQ ID NO: 63) и

(ii) вариабельную область легкой цепи (VL), где вариабельная область легкой цепи содержит три области, определяющие комплементарность легкой цепи (LCDR1, LCDR2 и LCDR3), где вариабельная область легкой цепи содержит один, два или все из следующего: LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 моноклонального антитела 3530 (например, SEQ ID NO: 67); LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 3530 (например, SEQ ID NO: 45); или LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 3530 (например, SEQ ID NO: 46).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит один или оба из следующего: (i) VH, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VH моноклонального антитела 3530 (например SEQ ID NO: 66); или (ii) VL, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VL моноклонального антитела 3530 (например, SEQ ID NO: 70).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, кодируемую нуклеотидной последовательностью SEQ ID NO: 83 (или нуклеотидной последовательностью, по существу идентичной ей), или VL, кодируемую нуклеотидной последовательностью SEQ ID NO: 84 (или нуклеотидной последовательностью, по существу, идентичной ей) или и то, и другое.

В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой моноклональное антитело 3530. В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой гуманизированное моноклональное антитело 3530.

В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с человеческим APRIL, мышиным APRIL или с обоими.

В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с человеческим APRIL при EC₅₀ 20 нМ или менее, например 10 нМ или менее, 9 нМ или менее, 8 нМ или менее, 7 нМ или менее, 6 нМ или менее 5 нМ или менее, 4 нМ или менее, 3 нМ или менее, 2 нМ или менее, 1 нМ или менее, 0,8 нМ или менее, 0,6 нМ или менее, 0,4 нМ или менее, 0,2 нМ или менее, 0,1 нМ или менее 0,05 нМ или менее, 0,02 нМ или менее, 0,01 нМ или менее, 0,005 нМ или менее, 0,002 нМ или менее или 0,001 нМ или менее, например, от 0,001 нМ до 20 нМ, например, от 0,01 нМ до 20 нМ, от 0,1 нМ до 20 нМ, от 0,1 нМ до 10 нМ, от 0,5 нМ до 5 нМ, от 1 нМ до 5 нМ, от 0,001 нМ до 0,1 нМ, от 0,001 нМ до 0,01 нМ, от 0,001 нМ до 0,005 нМ, от 0,01 нМ до 0,05 нМ или от 0,01 нМ до 0,1 нМ, например, как определено описанным в настоящем документе способом. В одном варианте осуществления молекула антитела связывается с человеческим APRIL при EC₅₀ 5 нМ или менее, например, примерно 2,7 нМ.

В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с мышиным APRIL при EC₅₀ 100 нМ или менее, например, 80 нМ или менее, 60 нМ или менее, 40 нМ или менее, 20 нМ или менее, 10 нМ или менее 9 нМ или менее 9 нМ или менее, 8 нМ или менее, 7 нМ или менее, 6 нМ или менее, 5 нМ или менее, 4 нМ или менее, 3 нМ или менее, 2 нМ или менее, 1 нМ или менее, 0,8 нМ или менее, 0,6 нМ или менее, 0,4 нМ или менее, 0,2 нМ или менее, 0,1 нМ или менее, 0,05 нМ или менее, 0,02 нМ или менее, 0,01 нМ или менее, 0,005 нМ или менее, 0,002 нМ или менее, или 0,001 нМ или менее, например, от 0,001 нМ до 100 нМ, например, от 0,001 нМ до 50 нМ, от 0,01 нМ до 20 нМ, от 0,1 нМ до 10 нМ, от 0,5 нМ до 5 нМ или от 1 нМ до 5 нМ, от 0,001 нМ до 0,1 нМ, от 0,001 нМ до 0,01 нМ, от 0,001 нМ до 0,005 нМ, от 0,01 нМ до 0,05 нМ или от 0,01 нМ до 0,1 нМ, например, как определено описанным в настоящем документе способом.

В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует или по существу ингибирует связывание APRIL (например, человеческого APRIL) с TACI (например, с человеческим TACI), BCMA (например, с человеческим BCMA) или и то, и другое. В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует или по существу ингибирует связывание APRIL (например, человеческого APRIL, мышиного APRIL или обоих) с TACI (например, с человеческим TACI, мышиным TACI или с обоими), при IC₅₀ 50 нМ или менее, например, 40 нМ или менее, 30 нМ или менее, 20 нМ или менее, 10 нМ или менее, 9 нМ или менее, 8 нМ или менее, 7 нМ или менее, 6 нМ или менее, 5 нМ или менее, 4 нМ или менее, 3 нМ или менее, 2 нМ или менее, 1 нМ или менее, 0,8 нМ или менее, 0,6 нМ или менее, 0,4 нМ или менее, 0,2 нМ или менее, 0,1 нМ или менее, 0,05 нМ или менее, 0,02 нМ или менее, или 0,01 нМ или менее, например, от 0,01 нМ до 50 нМ, от 0,1 нМ до 50 нМ, от 0,1 нМ до 25 нМ, от 0,1 нМ до 10 нМ, от 0,1 нМ до 5 нМ, от 0,1 нМ до 1 нМ, от 0,1 нМ до 0,5 нМ, от 0,5 нМ до 5 нМ или от 1 нМ до 5 нМ, например, как определено описанным в настоящем документе способом. В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует связывание человеческого APRIL с человеческим TACI при IC₅₀ 5 нМ или менее, например, примерно 4,95 нМ.

В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует или по существу ингибирует связывание APRIL (например, человеческого APRIL, мышиного APRIL или обоих) с BCMA (например, с человеческим BCMA, мышиным BCMA или с обоими), при IC₅₀ 200 нМ или менее 150 нМ или менее, 100 нМ или менее, 50 нМ или менее, 40 нМ или менее, 30 нМ или менее, 20 нМ или менее, 10 нМ или менее, 9 нМ или менее, 8 нМ или менее, 7 нМ или менее 6 нМ или менее, 5 нМ или менее, 4 нМ или менее, 3 нМ или менее, 2 нМ или менее, 1 нМ или менее, 0,8 нМ или менее, 0,6 нМ или менее, 0,4 нМ или менее, 0,2 нМ или менее 0,1 нМ или менее, 0,05 нМ или менее, 0,02 нМ или менее, 0,01 нМ или менее, например, от 0,01 нМ до 50 нМ, от 0,1 нМ до 50 нМ, от 0,1 нМ до 25 нМ, от 0,1 нМ и 10 нМ, от 0,1 нМ до 5 нМ, от 0,1 нМ до 1 нМ, от 0,1 нМ до 0,5 нМ, от 0,5 нМ до 5 нМ или от 1 нМ до 5 нМ, например, как определено описанным в настоящем документе способом. В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует связывание человеческого APRIL с человеческим BCMA при IC₅₀ 1 нМ или менее, например, примерно 0,68 нМ.

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит:

(i) вариабельную область тяжелой цепи (VH), где вариабельная область тяжелой цепи содержит три области, определяющие комплементарность тяжелой цепи (HCDR1, HCDR2 и HCDR3), где вариабельная область тяжелой цепи содержит один, два или все из следующего: HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 3525 (например, SEQ ID NO: 61 или 64); HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 3525 (например, SEQ ID NO: 62 или 65); или HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклонального антитела 3525 (например, SEQ ID NO: 63) и

(ii) вариабельную область легкой цепи (VL), где вариабельная область легкой цепи содержит три области, определяющие комплементарность легкой цепи (LCDR1, LCDR2 и LCDR3), где вариабельная область легкой цепи содержит один, два или все из следующего: LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 моноклонального антитела 3525 (например, SEQ ID NO: 44); LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 3525 (например, SEQ ID NO: 45); или LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 3525 (например, SEQ ID NO: 46).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит один или оба из следующего: (i) VH, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VH моноклонального антитела 3525 (например SEQ ID NO: 66); или (ii) VL, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VL моноклонального антитела 3525 (например, SEQ ID NO: 50).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, кодируемую нуклеотидной последовательностью SEQ ID NO: 83 (или нуклеотидной последовательностью, по существу идентичной ей), или VL, кодируемую нуклеотидной последовательностью SEQ ID NO: 80 (или нуклеотидной последовательностью, по существу, идентичной ей) или и то, и другое.

В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой моноклональное антитело 3525. В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой гуманизированное моноклональное антитело 3525.

В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с человеческим APRIL, мышиным APRIL или с обоими.

В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с человеческим APRIL при EC₅₀ 20 нМ или менее, например 10 нМ или менее, 9 нМ или менее, 8 нМ или менее, 7 нМ или менее, 6 нМ или менее 5 нМ или менее, 4 нМ или менее, 3 нМ или менее, 2 нМ или менее, 1 нМ или менее, 0,8 нМ или менее, 0,6 нМ или менее, 0,4 нМ или менее, 0,2 нМ или менее, 0,1 нМ или менее 0,05 нМ или менее, 0,02 нМ или менее, 0,01 нМ или менее, 0,005 нМ или менее, 0,002 нМ или менее или 0,001 нМ или менее, например, от 0,001 нМ до 20 нМ, например, от 0,01 нМ до 20 нМ, от 0,1 нМ до 20 нМ, от 0,1 нМ до 10 нМ, от 0,5 нМ до 5 нМ, от 1 нМ до 5 нМ, от 0,001 нМ до 0,1 нМ, от 0,001 нМ до 0,01 нМ, от 0,001 нМ до 0,005 нМ, от 0,01 нМ до 0,05 нМ или от 0,01 нМ до 0,1 нМ, например, как определено описанным в настоящем документе способом. В одном варианте осуществления молекула антитела связывается с человеческим APRIL при EC₅₀ 5 нМ или менее, например, примерно 2,5 нМ.

В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с мышиным APRIL при EC₅₀ 100 нМ или менее, например, 80 нМ или менее, 60 нМ или менее, 40 нМ или менее, 20 нМ или менее, 10 нМ или менее 9 нМ или менее 9 нМ или менее, 8 нМ или менее, 7 нМ или менее, 6 нМ или менее, 5 нМ или менее, 4 нМ или менее, 3 нМ или менее, 2 нМ или менее, 1 нМ или менее, 0,8 нМ или менее, 0,6 нМ или менее, 0,4 нМ или менее, 0,2 нМ или менее, 0,1 нМ или менее, 0,05 нМ или менее, 0,02 нМ или менее, 0,01 нМ или менее, 0,005 нМ или менее, 0,002 нМ или менее, или 0,001 нМ или менее, например, от 0,001 нМ до 100 нМ, например, от 0,001 нМ до 50 нМ, от 0,01 нМ до 20 нМ, от 0,1 нМ до 10 нМ, от 0,5 нМ до 5 нМ или от 1 нМ до 5 нМ, от 0,001 нМ до 0,1 нМ, от 0,001 нМ до 0,01 нМ, от 0,001 нМ до 0,005 нМ, от 0,01 нМ до 0,05 нМ или от 0,01 нМ до 0,1 нМ, например, как определено описанным в настоящем документе способом.

В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует или по существу ингибирует связывание APRIL (например, человеческого APRIL) с TACI (например, с человеческим TACI), BCMA (например, с человеческим BCMA) или и то, и другое. В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует или по существу ингибирует связывание APRIL (например, человеческого APRIL, мышиного APRIL или обоих) с TACI (например, с человеческим TACI, мышиным TACI или с обоими), при IC₅₀ 50 нМ или менее, например, 40 нМ или менее, 30 нМ или менее, 20 нМ или менее, 10 нМ или менее, 9 нМ или менее, 8 нМ или менее, 7 нМ или менее, 6 нМ или менее, 5 нМ или менее, 4 нМ или менее, 3 нМ или менее, 2 нМ или менее, 1 нМ или менее, 0,8 нМ или менее, 0,6 нМ или менее, 0,4 нМ или менее, 0,2 нМ или менее, 0,1 нМ или менее, 0,05 нМ или менее, 0,02 нМ или менее, или 0,01 нМ или менее, например, от 0,01 нМ до 50 нМ, от 0,1 нМ до 50 нМ, от 0,1 нМ до 25 нМ, от 0,1 нМ до 10 нМ, от 0,1 нМ до 5 нМ, от 0,1 нМ до 1 нМ, от 0,1 нМ до 0,5 нМ, от 0,5 нМ до 5 нМ или от 1 нМ до 5 нМ, например, как определено описанным в настоящем документе способом. В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует связывание человеческого APRIL с человеческим TACI при IC₅₀ 5 нМ или менее, например, примерно 4,05 нМ.

В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует или по существу ингибирует связывание APRIL (например, человеческого APRIL, мышиного APRIL или обоих) с BCMA (например, с человеческим BCMA, мышиным BCMA или с обоими), при IC₅₀ 200 нМ или менее 150 нМ или менее, 100 нМ или менее, 50 нМ или менее, 40 нМ или менее, 30 нМ или менее, 20 нМ или менее, 10 нМ или менее, 9 нМ или менее, 8 нМ или менее, 7 нМ или менее 6 нМ или менее, 5 нМ или менее, 4 нМ или менее, 3 нМ или менее, 2 нМ или менее, 1 нМ или менее, 0,8 нМ или менее, 0,6 нМ или менее, 0,4 нМ или менее, 0,2 нМ или менее 0,1 нМ или менее, 0,05 нМ или менее, 0,02 нМ или менее, 0,01 нМ или менее, например, от 0,01 нМ до 50 нМ, от 0,1 нМ до 50 нМ, от 0,1 нМ до 25 нМ, от 0,1 нМ и 10 нМ, от 0,1 нМ до 5 нМ, от 0,1 нМ до 1 нМ, от 0,1 нМ до 0,5 нМ, от 0,5 нМ до 5 нМ или от 1 нМ до 5 нМ, например, как определено описанным в настоящем документе способом. В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует связывание человеческого APRIL с человеческим BCMA при IC₅₀ 1 нМ или менее, например, примерно 0,85 нМ.

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит:

(i) вариабельную область тяжелой цепи (VH), где вариабельная область тяжелой цепи содержит три области, определяющие комплементарность тяжелой цепи (HCDR1, HCDR2 и HCDR3), где вариабельная область тяжелой цепи содержит один, два или все из следующего: HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 3833 (например, SEQ ID NO: 113 или 119); HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 3833 (например, SEQ ID NO: 114 или 120); или HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклонального антитела 3833 (например, SEQ ID NO: 115) и

(ii) вариабельную область легкой цепи (VL), где вариабельная область легкой цепи содержит три области, определяющие комплементарность легкой цепи (LCDR1, LCDR2 и LCDR3), где вариабельная область легкой цепи содержит один, два или все из следующего: LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 моноклонального антитела 3833 (например, SEQ ID NO: 116); LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 3833 (например, SEQ ID NO: 117); или LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 3833 (например, SEQ ID NO: 118).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит один или оба из следующего: (i) VH, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VH моноклонального антитела 3833 (например SEQ ID NO: 121); или (ii) VL, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VL моноклонального антитела 3833 (например, SEQ ID NO: 122).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, кодируемую нуклеотидной последовательностью SEQ ID NO: 177 (или нуклеотидной последовательностью, по существу идентичной ей), или VL, кодируемую нуклеотидной последовательностью SEQ ID NO: 178 (или нуклеотидной последовательностью, по существу, идентичной ей) или и то, и другое.

В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой моноклональное антитело 3833. В одном варианте осуществления моноклональное антитело 3833 представляет собой гуманизированное моноклональное антитело 3833. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность любой из SEQ ID NO: 246-250, VL, содержащую аминокислотную последовательность любой из SEQ ID NO: 251-253, или и то, и другое.

В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с человеческим APRIL, мышиным APRIL или с обоими.

В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с человеческим APRIL при EC₅₀ 20 нМ или менее, например 10 нМ или менее, 9 нМ или менее, 8 нМ или менее, 7 нМ или менее, 6 нМ или менее 5 нМ или менее, 4 нМ или менее, 3 нМ или менее, 2 нМ или менее, 1 нМ или менее, 0,8 нМ или менее, 0,6 нМ или менее, 0,4 нМ или менее, 0,2 нМ или менее, 0,1 нМ или менее 0,05 нМ или менее, 0,02 нМ или менее, 0,01 нМ или менее, 0,005 нМ или менее, 0,002 нМ или менее или 0,001 нМ или менее, например, от 0,001 нМ до 20 нМ, например, от 0,01 нМ до 20 нМ, от 0,1 нМ до 20 нМ, от 0,1 нМ до 10 нМ, от 0,5 нМ до 5 нМ, от 1 нМ до 5 нМ, от 0,001 нМ до 0,1 нМ, от 0,001 нМ до 0,01 нМ, от 0,001 нМ до 0,005 нМ, от 0,01 нМ до 0,05 нМ или от 0,01 нМ до 0,1 нМ, например, как определено описанным в настоящем документе способом. В одном варианте осуществления молекула антитела связывается с человеческим APRIL при EC₅₀ 5 нМ или менее, например, примерно 2,5 нМ.

В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с мышиным APRIL при EC₅₀ 100 нМ или менее, например, 80 нМ или менее, 60 нМ или менее, 40 нМ или менее, 20 нМ или менее, 10 нМ или менее 9 нМ или менее 9 нМ или менее, 8 нМ или менее, 7 нМ или менее, 6 нМ или менее, 5 нМ или менее, 4 нМ или менее, 3 нМ или менее, 2 нМ или менее, 1 нМ или менее, 0,8 нМ или менее, 0,6 нМ или менее, 0,4 нМ или менее, 0,2 нМ или менее, 0,1 нМ или менее, 0,05 нМ или менее, 0,02 нМ или менее, 0,01 нМ или менее, 0,005 нМ или менее, 0,002 нМ или менее, или 0,001 нМ или менее, например, от 0,001 нМ до 100 нМ, например, от 0,001 нМ до 50 нМ, от 0,01 нМ до 20 нМ, от 0,1 нМ до 10 нМ, от 0,5 нМ до 5 нМ или от 1 нМ до 5 нМ, от 0,001 нМ до 0,1 нМ, от 0,001 нМ до 0,01 нМ, от 0,001 нМ до 0,005 нМ, от 0,01 нМ до 0,05 нМ или от 0,01 нМ до 0,1 нМ, например, как определено описанным в настоящем документе способом.

В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует или по существу ингибирует связывание APRIL (например, человеческого APRIL) с TACI (например, с человеческим TACI), BCMA (например, с человеческим BCMA) или и то, и другое. В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует или по существу ингибирует связывание APRIL (например, человеческого APRIL, мышиного APRIL или обоих) с TACI (например, с человеческим TACI, мышиным TACI или с обоими), при IC₅₀ 50 нМ или менее, например, 40 нМ или менее, 30 нМ или менее, 20 нМ или менее, 10 нМ или менее, 9 нМ или менее, 8 нМ или менее, 7 нМ или менее, 6 нМ или менее, 5 нМ или менее, 4 нМ или менее, 3 нМ или менее, 2 нМ или менее, 1 нМ или менее, 0,8 нМ или менее, 0,6 нМ или менее, 0,4 нМ или менее, 0,2 нМ или менее, 0,1 нМ или менее, 0,05 нМ или менее, 0,02 нМ или менее, или 0,01 нМ или менее, например, от 0,01 нМ до 50 нМ, от 0,1 нМ до 50 нМ, от 0,1 нМ до 25 нМ, от 0,1 нМ до 10 нМ, от 0,1 нМ до 5 нМ, от 0,1 нМ до 1 нМ, от 0,1 нМ до 0,5 нМ, от 0,5 нМ до 5 нМ или от 1 нМ до 5 нМ, например, как определено описанным в настоящем документе способом. В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует связывание человеческого APRIL с человеческим TACI при IC₅₀ 5 нМ или менее, например, примерно 4,05 нМ.

В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует или по существу ингибирует связывание APRIL (например, человеческого APRIL, мышиного APRIL или обоих) с BCMA (например, с человеческим BCMA, мышиным BCMA или с обоими), при IC₅₀ 200 нМ или менее 150 нМ или менее, 100 нМ или менее, 50 нМ или менее, 40 нМ или менее, 30 нМ или менее, 20 нМ или менее, 10 нМ или менее, 9 нМ или менее, 8 нМ или менее, 7 нМ или менее 6 нМ или менее, 5 нМ или менее, 4 нМ или менее, 3 нМ или менее, 2 нМ или менее, 1 нМ или менее, 0,8 нМ или менее, 0,6 нМ или менее, 0,4 нМ или менее, 0,2 нМ или менее 0,1 нМ или менее, 0,05 нМ или менее, 0,02 нМ или менее, 0,01 нМ или менее, например, от 0,01 нМ до 50 нМ, от 0,1 нМ до 50 нМ, от 0,1 нМ до 25 нМ, от 0,1 нМ и 10 нМ, от 0,1 нМ до 5 нМ, от 0,1 нМ до 1 нМ, от 0,1 нМ до 0,5 нМ, от 0,5 нМ до 5 нМ или от 1 нМ до 5 нМ, например, как определено описанным в настоящем документе способом. В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует связывание человеческого APRIL с человеческим BCMA при IC₅₀ 1 нМ или менее, например, примерно 0,85 нМ.

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит:

(i) вариабельную область тяжелой цепи (VH), где вариабельная область тяжелой цепи содержит три области, определяющие комплементарность тяжелой цепи (HCDR1, HCDR2 и HCDR3), где вариабельная область тяжелой цепи содержит один, два или все из следующего: HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 3631 (например, SEQ ID NO: 123 или 129); HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 3631 (например, SEQ ID NO: 124 или 130); или HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклонального антитела 3631 (например, SEQ ID NO: 125) и

(ii) вариабельную область легкой цепи (VL), где вариабельная область легкой цепи содержит три области, определяющие комплементарность легкой цепи (LCDR1, LCDR2 и LCDR3), где вариабельная область легкой цепи содержит один, два или все из следующего: LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 моноклонального антитела 3631 (например, SEQ ID NO: 126); LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 3631 (например, SEQ ID NO: 127); или LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 3631 (например, SEQ ID NO: 128).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит один или оба из следующего: (i) VH, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VH моноклонального антитела 3631 (например SEQ ID NO: 131); или (ii) VL, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VL моноклонального антитела 3631 (например, SEQ ID NO: 132).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, кодируемую нуклеотидной последовательностью SEQ ID NO: 179 (или нуклеотидной последовательностью, по существу идентичной ей), или VL, кодируемую нуклеотидной последовательностью SEQ ID NO: 180 (или нуклеотидной последовательностью, по существу, идентичной ей) или и то, и другое.

В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой моноклональное антитело 3631. В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой гуманизированное моноклональное антитело 3631.

В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с человеческим APRIL, мышиным APRIL или с обоими.

В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с человеческим APRIL при EC₅₀ 20 нМ или менее, например 10 нМ или менее, 9 нМ или менее, 8 нМ или менее, 7 нМ или менее, 6 нМ или менее 5 нМ или менее, 4 нМ или менее, 3 нМ или менее, 2 нМ или менее, 1 нМ или менее, 0,8 нМ или менее, 0,6 нМ или менее, 0,4 нМ или менее, 0,2 нМ или менее, 0,1 нМ или менее 0,05 нМ или менее, 0,02 нМ или менее, 0,01 нМ или менее, 0,005 нМ или менее, 0,002 нМ или менее или 0,001 нМ или менее, например, от 0,001 нМ до 20 нМ, например, от 0,01 нМ до 20 нМ, от 0,1 нМ до 20 нМ, от 0,1 нМ до 10 нМ, от 0,5 нМ до 5 нМ, от 1 нМ до 5 нМ, от 0,001 нМ до 0,1 нМ, от 0,001 нМ до 0,01 нМ, от 0,001 нМ до 0,005 нМ, от 0,01 нМ до 0,05 нМ или от 0,01 нМ до 0,1 нМ, например, как определено описанным в настоящем документе способом. В одном варианте осуществления молекула антитела связывается с человеческим APRIL при EC₅₀ 5 нМ или менее, например, примерно 2,5 нМ.

В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с мышиным APRIL при EC₅₀ 100 нМ или менее, например, 80 нМ или менее, 60 нМ или менее, 40 нМ или менее, 20 нМ или менее, 10 нМ или менее 9 нМ или менее 9 нМ или менее, 8 нМ или менее, 7 нМ или менее, 6 нМ или менее, 5 нМ или менее, 4 нМ или менее, 3 нМ или менее, 2 нМ или менее, 1 нМ или менее, 0,8 нМ или менее, 0,6 нМ или менее, 0,4 нМ или менее, 0,2 нМ или менее, 0,1 нМ или менее, 0,05 нМ или менее, 0,02 нМ или менее, 0,01 нМ или менее, 0,005 нМ или менее, 0,002 нМ или менее, или 0,001 нМ или менее, например, от 0,001 нМ до 100 нМ, например, от 0,001 нМ до 50 нМ, от 0,01 нМ до 20 нМ, от 0,1 нМ до 10 нМ, от 0,5 нМ до 5 нМ или от 1 нМ до 5 нМ, от 0,001 нМ до 0,1 нМ, от 0,001 нМ до 0,01 нМ, от 0,001 нМ до 0,005 нМ, от 0,01 нМ до 0,05 нМ или от 0,01 нМ до 0,1 нМ, например, как определено описанным в настоящем документе способом.

В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует или по существу ингибирует связывание APRIL (например, человеческого APRIL) с TACI (например, с человеческим TACI), BCMA (например, с человеческим BCMA) или и то, и другое. В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует или по существу ингибирует связывание APRIL (например, человеческого APRIL, мышиного APRIL или обоих) с TACI (например, с человеческим TACI, мышиным TACI или с обоими), при IC₅₀ 50 нМ или менее, например, 40 нМ или менее, 30 нМ или менее, 20 нМ или менее, 10 нМ или менее, 9 нМ или менее, 8 нМ или менее, 7 нМ или менее, 6 нМ или менее, 5 нМ или менее, 4 нМ или менее, 3 нМ или менее, 2 нМ или менее, 1 нМ или менее, 0,8 нМ или менее, 0,6 нМ или менее, 0,4 нМ или менее, 0,2 нМ или менее, 0,1 нМ или менее, 0,05 нМ или менее, 0,02 нМ или менее, или 0,01 нМ или менее, например, от 0,01 нМ до 50 нМ, от 0,1 нМ до 50 нМ, от 0,1 нМ до 25 нМ, от 0,1 нМ до 10 нМ, от 0,1 нМ до 5 нМ, от 0,1 нМ до 1 нМ, от 0,1 нМ до 0,5 нМ, от 0,5 нМ до 5 нМ или от 1 нМ до 5 нМ, например, как определено описанным в настоящем документе способом. В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует связывание человеческого APRIL с человеческим TACI при IC₅₀ 5 нМ или менее, например, примерно 4,05 нМ.

В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует или по существу ингибирует связывание APRIL (например, человеческого APRIL, мышиного APRIL или обоих) с BCMA (например, с человеческим BCMA, мышиным BCMA или с обоими), при IC₅₀ 200 нМ или менее 150 нМ или менее, 100 нМ или менее, 50 нМ или менее, 40 нМ или менее, 30 нМ или менее, 20 нМ или менее, 10 нМ или менее, 9 нМ или менее, 8 нМ или менее, 7 нМ или менее 6 нМ или менее, 5 нМ или менее, 4 нМ или менее, 3 нМ или менее, 2 нМ или менее, 1 нМ или менее, 0,8 нМ или менее, 0,6 нМ или менее, 0,4 нМ или менее, 0,2 нМ или менее 0,1 нМ или менее, 0,05 нМ или менее, 0,02 нМ или менее, 0,01 нМ или менее, например, от 0,01 нМ до 50 нМ, от 0,1 нМ до 50 нМ, от 0,1 нМ до 25 нМ, от 0,1 нМ и 10 нМ, от 0,1 нМ до 5 нМ, от 0,1 нМ до 1 нМ, от 0,1 нМ до 0,5 нМ, от 0,5 нМ до 5 нМ или от 1 нМ до 5 нМ, например, как определено описанным в настоящем документе способом. В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует связывание человеческого APRIL с человеческим BCMA при IC₅₀ 1 нМ или менее, например, примерно 0,85 нМ.

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит:

(i) вариабельную область тяжелой цепи (VH), где вариабельная область тяжелой цепи содержит три области, определяющие комплементарность тяжелой цепи (HCDR1, HCDR2 и HCDR3), где вариабельная область тяжелой цепи содержит один, два или все из следующего: HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 3732 (например, SEQ ID NO: 133 или 138); HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 3732 (например, SEQ ID NO: 134 или 139); или HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклонального антитела 3732 (например, SEQ ID NO: 135) и

(ii) вариабельную область легкой цепи (VL), где вариабельная область легкой цепи содержит три области, определяющие комплементарность легкой цепи (LCDR1, LCDR2 и LCDR3), где вариабельная область легкой цепи содержит один, два или все из следующего: LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 моноклонального антитела 3732 (например, SEQ ID NO: 136); LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 3732 (например, SEQ ID NO: 127); или LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 3732 (например, SEQ ID NO: 137).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит один или оба из следующего: (i) VH, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VH моноклонального антитела 3732 (например SEQ ID NO: 140); или (ii) VL, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VL моноклонального антитела 3732 (например, SEQ ID NO: 141).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, кодируемую нуклеотидной последовательностью SEQ ID NO: 181 (или нуклеотидной последовательностью, по существу идентичной ей), или VL, кодируемую нуклеотидной последовательностью SEQ ID NO: 182 (или нуклеотидной последовательностью, по существу, идентичной ей) или и то, и другое.

В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой моноклональное антитело 3732. В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой гуманизированное моноклональное антитело 3732.

В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с человеческим APRIL, мышиным APRIL или с обоими.

В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с человеческим APRIL при EC₅₀ 20 нМ или менее, например 10 нМ или менее, 9 нМ или менее, 8 нМ или менее, 7 нМ или менее, 6 нМ или менее 5 нМ или менее, 4 нМ или менее, 3 нМ или менее, 2 нМ или менее, 1 нМ или менее, 0,8 нМ или менее, 0,6 нМ или менее, 0,4 нМ или менее, 0,2 нМ или менее, 0,1 нМ или менее 0,05 нМ или менее, 0,02 нМ или менее, 0,01 нМ или менее, 0,005 нМ или менее, 0,002 нМ или менее или 0,001 нМ или менее, например, от 0,001 нМ до 20 нМ, например, от 0,01 нМ до 20 нМ, от 0,1 нМ до 20 нМ, от 0,1 нМ до 10 нМ, от 0,5 нМ до 5 нМ, от 1 нМ до 5 нМ, от 0,001 нМ до 0,1 нМ, от 0,001 нМ до 0,01 нМ, от 0,001 нМ до 0,005 нМ, от 0,01 нМ до 0,05 нМ или от 0,01 нМ до 0,1 нМ, например, как определено описанным в настоящем документе способом. В одном варианте осуществления молекула антитела связывается с человеческим APRIL при EC₅₀ 5 нМ или менее, например, примерно 2,5 нМ.

В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с мышиным APRIL при EC₅₀ 100 нМ или менее, например, 80 нМ или менее, 60 нМ или менее, 40 нМ или менее, 20 нМ или менее, 10 нМ или менее 9 нМ или менее 9 нМ или менее, 8 нМ или менее, 7 нМ или менее, 6 нМ или менее, 5 нМ или менее, 4 нМ или менее, 3 нМ или менее, 2 нМ или менее, 1 нМ или менее, 0,8 нМ или менее, 0,6 нМ или менее, 0,4 нМ или менее, 0,2 нМ или менее, 0,1 нМ или менее, 0,05 нМ или менее, 0,02 нМ или менее, 0,01 нМ или менее, 0,005 нМ или менее, 0,002 нМ или менее, или 0,001 нМ или менее, например, от 0,001 нМ до 100 нМ, например, от 0,001 нМ до 50 нМ, от 0,01 нМ до 20 нМ, от 0,1 нМ до 10 нМ, от 0,5 нМ до 5 нМ или от 1 нМ до 5 нМ, от 0,001 нМ до 0,1 нМ, от 0,001 нМ до 0,01 нМ, от 0,001 нМ до 0,005 нМ, от 0,01 нМ до 0,05 нМ или от 0,01 нМ до 0,1 нМ, например, как определено описанным в настоящем документе способом.

В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует или по существу ингибирует связывание APRIL (например, человеческого APRIL) с TACI (например, с человеческим TACI), BCMA (например, с человеческим BCMA) или и то, и другое.

В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует или по существу ингибирует связывание APRIL (например, человеческого APRIL, мышиного APRIL или обоих) с TACI (например, с человеческим TACI, мышиным TACI или с обоими), при IC₅₀ 50 нМ или менее, например, 40 нМ или менее, 30 нМ или менее, 20 нМ или менее, 10 нМ или менее, 9 нМ или менее, 8 нМ или менее, 7 нМ или менее, 6 нМ или менее, 5 нМ или менее, 4 нМ или менее, 3 нМ или менее, 2 нМ или менее, 1 нМ или менее, 0,8 нМ или менее, 0,6 нМ или менее, 0,4 нМ или менее, 0,2 нМ или менее, 0,1 нМ или менее, 0,05 нМ или менее, 0,02 нМ или менее, или 0,01 нМ или менее, например, от 0,01 нМ до 50 нМ, от 0,1 нМ до 50 нМ, от 0,1 нМ до 25 нМ, от 0,1 нМ до 10 нМ, от 0,1 нМ до 5 нМ, от 0,1 нМ до 1 нМ, от 0,1 нМ до 0,5 нМ, от 0,5 нМ до 5 нМ или от 1 нМ до 5 нМ, например, как определено описанным в настоящем документе способом. В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует связывание человеческого APRIL с человеческим TACI при IC₅₀ 5 нМ или менее, например, примерно 4,05 нМ.

В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует или по существу ингибирует связывание APRIL (например, человеческого APRIL, мышиного APRIL или обоих) с BCMA (например, с человеческим BCMA, мышиным BCMA или с обоими), при IC₅₀ 200 нМ или менее 150 нМ или менее, 100 нМ или менее, 50 нМ или менее, 40 нМ или менее, 30 нМ или менее, 20 нМ или менее, 10 нМ или менее, 9 нМ или менее, 8 нМ или менее, 7 нМ или менее 6 нМ или менее, 5 нМ или менее, 4 нМ или менее, 3 нМ или менее, 2 нМ или менее, 1 нМ или менее, 0,8 нМ или менее, 0,6 нМ или менее, 0,4 нМ или менее, 0,2 нМ или менее 0,1 нМ или менее, 0,05 нМ или менее, 0,02 нМ или менее, 0,01 нМ или менее, например, от 0,01 нМ до 50 нМ, от 0,1 нМ до 50 нМ, от 0,1 нМ до 25 нМ, от 0,1 нМ и 10 нМ, от 0,1 нМ до 5 нМ, от 0,1 нМ до 1 нМ, от 0,1 нМ до 0,5 нМ, от 0,5 нМ до 5 нМ или от 1 нМ до 5 нМ, например, как определено описанным в настоящем документе способом. В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует связывание человеческого APRIL с человеческим BCMA при IC₅₀ 1 нМ или менее, например, примерно 0,85 нМ.

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит:

(i) вариабельную область тяжелой цепи (VH), где вариабельная область тяжелой цепи содержит три области, определяющие комплементарность тяжелой цепи (HCDR1, HCDR2 и HCDR3), где вариабельная область тяжелой цепи содержит один, два или все из следующего: HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 4540 (например, SEQ ID NO: 154 или 159); HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 4540 (например, SEQ ID NO: 155 или 160); или HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклонального антитела 4540 (например, SEQ ID NO: 156) и

(ii) вариабельную область легкой цепи (VL), где вариабельная область легкой цепи содержит три области, определяющие комплементарность легкой цепи (LCDR1, LCDR2 и LCDR3), где вариабельная область легкой цепи содержит один, два или все из следующего: LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 моноклонального антитела 4540 (например, SEQ ID NO: 116); LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 4540 (например, SEQ ID NO: 157); или LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 4540 (например, SEQ ID NO: 158).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит один или оба из следующего: (i) VH, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VH моноклонального антитела 4540 (например SEQ ID NO: 161); или (ii) VL, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VL моноклонального антитела 4540 (например, SEQ ID NO: 162).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, кодируемую нуклеотидной последовательностью SEQ ID NO: 186 (или нуклеотидной последовательностью, по существу идентичной ей), или VL, кодируемую нуклеотидной последовательностью SEQ ID NO: 187 (или нуклеотидной последовательностью, по существу, идентичной ей) или и то, и другое.

В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой моноклональное антитело 4540. В одном варианте осуществления моноклональное антитело 4540 представляет собой гуманизированное моноклональное антитело 4540. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность любой из SEQ ID NO: 254-258, VL, содержащую аминокислотную последовательность любой из SEQ ID NO: 259-261, или и то, и другое.

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит:

(i) вариабельную область тяжелой цепи (VH), где вариабельная область тяжелой цепи содержит три области, определяющие комплементарность тяжелой цепи (HCDR1, HCDR2 и HCDR3), где вариабельная область тяжелой цепи содержит один, два или все из следующего: HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 4540-063 (например, SEQ ID NO: 154 или 276); HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 4540-063 (например, SEQ ID NO: 155 или 277); или HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклонального антитела 4540-063 (например, SEQ ID NO: 156) и

(ii) вариабельную область легкой цепи (VL), где вариабельная область легкой цепи содержит три области, определяющие комплементарность легкой цепи (LCDR1, LCDR2 и LCDR3), где вариабельная область легкой цепи содержит один, два или все из следующего: LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 моноклонального антитела 4540-063 (например, SEQ ID NO: 274); LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 4540-063 (например, SEQ ID NO: 275); или LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 4540-063 (например, SEQ ID NO: 158).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит один или оба из следующего: (i) VH, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VH моноклонального антитела 4540- 063 (например, SEQ ID NO: 258); или (ii) VL, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VL моноклонального антитела 4540-063 (например, SEQ ID NO: 261).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, кодируемую нуклеотидной последовательностью SEQ ID NO: 301 (или нуклеотидной последовательностью, по существу идентичной ей), или VL, кодируемую нуклеотидной последовательностью SEQ ID NO: 302 (или нуклеотидной последовательностью, по существу, идентичной ей) или и то, и другое.

В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой моноклональное антитело 4540-063.

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит:

(i) вариабельную область тяжелой цепи (VH), где вариабельная область тяжелой цепи содержит три области, определяющие комплементарность тяжелой цепи (HCDR1, HCDR2 и HCDR3), где вариабельная область тяжелой цепи содержит один, два или все из следующего: HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 4540-033 (например, SEQ ID NO: 154 или 159); HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 4540-033 (например, SEQ ID NO: 155 или 278); или HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклонального антитела 4540-033 (например, SEQ ID NO: 156) и

(ii) вариабельную область легкой цепи (VL), где вариабельная область легкой цепи содержит три области, определяющие комплементарность легкой цепи (LCDR1, LCDR2 и LCDR3), где вариабельная область легкой цепи содержит один, два или все из следующего: LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 моноклонального антитела 4540-033 (например, SEQ ID NO: 274); LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 4540-033 (например, SEQ ID NO: 275); или LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 4540-033 (например, SEQ ID NO: 158).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит один или оба из следующего: (i) VH, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VH моноклонального антитела 4540- 033 (например, SEQ ID NO: 256); или (ii) VL, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VL моноклонального антитела 4540-033 (например, SEQ ID NO: 261).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, кодируемую нуклеотидной последовательностью SEQ ID NO: 303 (или нуклеотидной последовательностью, по существу идентичной ей), или VL, кодируемую нуклеотидной последовательностью SEQ ID NO: 302 (или нуклеотидной последовательностью, по существу, идентичной ей) или и то, и другое.

В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой моноклональное антитело 4540-033.

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит:

(i) вариабельную область тяжелой цепи (VH), где вариабельная область тяжелой цепи содержит три области, определяющие комплементарность тяжелой цепи (HCDR1, HCDR2 и HCDR3), где VH содержит один, два или все из следующих: HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность D-Y-Y-X4-N (SEQ ID NO: 343), где X4 представляет собой I или M; HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность W-I-F-P-G-S-G-S-T-Y-Y-X12-X13-K-X15-X16-G, где X12 представляет собой N или A, X13 представляет собой E или Q, X15 представляет собой F или L, а X16 представляет собой K или Q (SEQ ID NO: 344); или HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность G-D-S-G-R-A-M-D-Y (SEQ ID NO: 156) и

(ii) вариабельную область легкой цепи (VL), где вариабельная область легкой цепи содержит три области, определяющие комплементарность легкой цепи (LCDR1, LCDR2 и LCDR3), где VL содержит один, два или все из следующего: LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность X1-A-S-Q-D-I-N-K-Y-I-A, где X1 представляет собой K или Q (SEQ ID NO: 345); LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность Y-T-S-T-L-X6-X7, где X6 представляет собой Q или E, и X7 представляет собой S или T (SEQ ID NO: 346); или LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность L-Q-Y-D-N-L-L-T (SEQ ID NO: 158).

В другом варианте осуществления молекула антитела содержит:

(i) вариабельную область тяжелой цепи (VH), где вариабельная область тяжелой цепи содержит три области, определяющие комплементарность тяжелой цепи (HCDR1, HCDR2 и HCDR3), где VH содержит один, два или все из следующих: HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность G-Y-T-F-A-D-Y (SEQ ID NO: 154); HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность F-P-G-S-G-S (SEQ ID NO: 155); или HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность G-D-S-G-R-A-M-D-Y (SEQ ID NO: 156) и

(ii) вариабельную область легкой цепи (VL), где вариабельная область легкой цепи содержит три области, определяющие комплементарность легкой цепи (LCDR1, LCDR2 и LCDR3), где VL содержит один, два или все из следующего: LCDR1 содержащей аминокислотную последовательность X1-A-S-Q-D-I-N-K-Y-I-A, где X1 представляет собой K или Q (SEQ ID NO: 345); LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность Y-T-S-T-L-X6-X7 (SEQ ID NO: 346), где X6 представляет собой Q или E, а X7 представляет собой S или T; или LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность L-Q-Y-D-N-L-L-T (SEQ ID NO: 158).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит один или оба из следующего: (i) VH, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 161, 256 или 258; или (ii) VL, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 162 или 261.

В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой моноклональное антитело 4540. В другом варианте осуществления молекула антитела представляет собой моноклональное антитело 4540-063. В еще одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой моноклональное антитело 4540-033.

В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с человеческим APRIL, мышиным APRIL или с обоими.

В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с человеческим APRIL при EC₅₀ 20 нМ или менее, например 10 нМ или менее, 9 нМ или менее или менее, 8 нМ или менее, 7 нМ или менее, 6 нМ или менее, 5 нМ или менее, 4 нМ или менее, 3 нМ или менее, 2 нМ или менее, 1 нМ или менее, 0,8 нМ или менее, 0,6 нМ или менее, 0,4 нМ или менее, 0,2 нМ или менее или 0,1 нМ или менее, например, от 0,1 нМ до 20 нМ, например, от 0,1 нМ до 10 нМ, от 0,5 нМ до 5 нМ или от 1 нМ до 5 нМ, например, как определено описанным в настоящем документе способом. В одном варианте осуществления молекула антитела связывается с человеческим APRIL при EC₅₀ 5 нМ или менее, например, примерно 2,5 нМ.

В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с мышиным APRIL при EC₅₀ 100 нМ или менее, например, 80 нМ или менее, 60 нМ или менее, 40 нМ или менее, 20 нМ или менее, 10 нМ или менее 9 нМ или менее, 8 нМ или менее, 7 нМ или менее, 6 нМ или менее, 5 нМ или менее, 4 нМ или менее, 3 нМ или менее, 2 нМ или менее, 1 нМ или менее, 0,8 нМ или менее, 0,6 нМ или менее, 0,4 нМ или менее, 0,2 нМ или менее или 0,1 нМ или менее, например, от 0,1 нМ до 20 нМ, например от 0,1 нМ до 10 нМ, от 0,5 нМ до 5 нМ, или от 1 нМ до 5 нМ, например, как определено описанным в настоящем документе способом.

В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует или по существу ингибирует связывание APRIL (например, человеческого APRIL) с TACI (например, с человеческим TACI), BCMA (например, с человеческим BCMA) или и то, и другое.

В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует или по существу ингибирует связывание APRIL (например, человеческого APRIL, мышиного APRIL или обоих) с TACI (например, с человеческим TACI, мышиным TACI или с обоими), при IC₅₀ 50 нМ или менее, например, 40 нМ или менее, 30 нМ или менее, 20 нМ или менее, 10 нМ или менее, 9 нМ или менее, 8 нМ или менее, 7 нМ или менее, 6 нМ или менее, 5 нМ или менее, 4 нМ или менее, 3 нМ или менее, 2 нМ или менее, 1 нМ или менее, 0,8 нМ или менее, 0,6 нМ или менее, 0,4 нМ или менее, 0,2 нМ или менее, 0,1 нМ или менее, 0,05 нМ или менее, 0,02 нМ или менее, или 0,01 нМ или менее, например, от 0,01 нМ до 50 нМ, от 0,1 нМ до 50 нМ, от 0,1 нМ до 25 нМ, от 0,1 нМ до 10 нМ, от 0,1 нМ до 5 нМ, от 0,1 нМ до 1 нМ, от 0,1 нМ до 0,5 нМ, от 0,5 нМ до 5 нМ или от 1 нМ до 5 нМ, например, как определено описанным в настоящем документе способом. В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует связывание человеческого APRIL с человеческим TACI при IC₅₀ 5 нМ или менее, например, примерно 4,05 нМ.

В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует или по существу ингибирует связывание APRIL (например, человеческого APRIL, мышиного APRIL или обоих) с BCMA (например, с человеческим BCMA, мышиным BCMA или с обоими), при IC₅₀ 200 нМ или менее 150 нМ или менее, 100 нМ или менее, 50 нМ или менее, 40 нМ или менее, 30 нМ или менее, 20 нМ или менее, 10 нМ или менее, 9 нМ или менее, 8 нМ или менее, 7 нМ или менее 6 нМ или менее, 5 нМ или менее, 4 нМ или менее, 3 нМ или менее, 2 нМ или менее, 1 нМ или менее, 0,8 нМ или менее, 0,6 нМ или менее, 0,4 нМ или менее, 0,2 нМ или менее 0,1 нМ или менее, 0,05 нМ или менее, 0,02 нМ или менее, 0,01 нМ или менее, например, от 0,01 нМ до 50 нМ, от 0,1 нМ до 50 нМ, от 0,1 нМ до 25 нМ, от 0,1 нМ и 10 нМ, от 0,1 нМ до 5 нМ, от 0,1 нМ до 1 нМ, от 0,1 нМ до 0,5 нМ, от 0,5 нМ до 5 нМ или от 1 нМ до 5 нМ, например, как определено описанным в настоящем документе способом. В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует связывание человеческого APRIL с человеческим BCMA при IC₅₀ 1 нМ или менее, например, примерно 0,85 нМ.

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит:

(i) вариабельную область тяжелой цепи (VH), где вариабельная область тяжелой цепи содержит три области, определяющие комплементарность тяжелой цепи (HCDR1, HCDR2 и HCDR3), где вариабельная область тяжелой цепи содержит один, два или все из следующего: HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 2621 (например, SEQ ID NO: 21 или 27); HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 2621 (например, SEQ ID NO: 22 или 28); или HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклонального антитела 2621 (например, SEQ ID NO: 23) и

(ii) вариабельную область легкой цепи (VL), где вариабельная область легкой цепи содержит три области, определяющие комплементарность легкой цепи (LCDR1, LCDR2 и LCDR3), где вариабельная область легкой цепи содержит один, два или все из следующего: LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 моноклонального антитела 2621 (например, SEQ ID NO: 24); LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 2621 (например, SEQ ID NO: 25); или LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 2621 (например, SEQ ID NO: 26).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит один или оба из следующего: (i) VH, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VH моноклонального антитела 2621 (например SEQ ID NO: 29); или (ii) VL, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VL моноклонального антитела 2621 (например, SEQ ID NO: 30).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, кодируемую нуклеотидной последовательностью SEQ ID NO: 75 (или нуклеотидной последовательностью, по существу идентичной ей), или VL, кодируемую нуклеотидной последовательностью SEQ ID NO: 76 (или нуклеотидной последовательностью, по существу, идентичной ей) или и то, и другое.

В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой моноклональное антитело 2621. В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой гуманизированное моноклональное антитело 2621.

В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с человеческим APRIL.

В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с человеческим APRIL при EC₅₀ 20 нМ или менее, например 10 нМ или менее, 9 нМ или менее, 8 нМ или менее, 7 нМ или менее, 6 нМ или менее 5 нМ или менее, 4 нМ или менее, 3 нМ или менее, 2 нМ или менее, 1 нМ или менее, 0,8 нМ или менее, 0,6 нМ или менее, 0,4 нМ или менее, 0,2 нМ или менее, 0,1 нМ или менее 0,05 нМ или менее, 0,02 нМ или менее, 0,01 нМ или менее, 0,005 нМ или менее, 0,002 нМ или менее или 0,001 нМ или менее, например, от 0,001 нМ до 20 нМ, например, от 0,01 нМ до 20 нМ, от 0,1 нМ до 20 нМ, от 0,1 нМ до 10 нМ, от 0,5 нМ до 5 нМ, от 1 нМ до 5 нМ, от 0,001 нМ до 0,1 нМ, от 0,001 нМ до 0,01 нМ, от 0,001 нМ до 0,005 нМ, от 0,01 нМ до 0,05 нМ или от 0,01 нМ до 0,1 нМ, например, как определено описанным в настоящем документе способом. В одном варианте осуществления молекула антитела связывается с человеческим APRIL при EC₅₀ 1 нМ или менее, например, примерно 0,7 нМ. В одном варианте осуществления молекула антитела не связывается или связывается с мышиным APRIL с низкой аффинностью, например, при EC₅₀ 1000 нМ или более, например, 2000 нМ или более, например, как определено описанным в настоящем документе способом.

В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует или по существу ингибирует связывание APRIL (например, человеческого APRIL) с TACI (например, с человеческим TACI). В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует или по существу ингибирует связывание APRIL (например, человеческого APRIL) с TACI (например, с человеческим TACI) при IC₅₀ 50 нМ или менее, например, 40 нМ или менее, 30 нМ или менее 20 нМ или менее, 10 нМ или менее, 9 нМ или менее, 8 нМ или менее, 7 нМ или менее, 6 нМ или менее, 5 нМ или менее, 4 нМ или менее, 3 нМ или менее, 2 нМ или менее 1 нМ или менее, 0,8 нМ или менее, 0,6 нМ или менее, 0,4 нМ или менее, 0,2 нМ или менее, 0,1 нМ или менее, 0,05 нМ или менее, 0,02 нМ или менее или 0,01 нМ или менее, от 0,01 нМ до 50 нМ, от 0,1 нМ до 50 нМ, от 0,1 нМ до 25 нМ, от 0,1 нМ до 10 нМ, от 0,1 нМ до 5 нМ, от 0,1 нМ до 1 нМ, от 0,1 нМ до 0,5 нМ, от 0,5 нМ до 5 нМ или от 1 нМ до 5 нМ, например, как определено описанным в настоящем документе способом. В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует связывание человеческого APRIL с человеческим TACI при IC₅₀ примерно 1 нМ или менее.

В одном варианте осуществления молекула антитела не ингибирует или по существу не ингибирует связывание APRIL (например, человеческого APRIL) с BCMA (например, с человеческим BCMA).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит:

(i) вариабельную область тяжелой цепи (VH), где вариабельная область тяжелой цепи содержит три области, определяющие комплементарность тяжелой цепи (HCDR1, HCDR2 и HCDR3), где вариабельная область тяжелой цепи содержит один, два или все из следующего: HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 3125 (например, SEQ ID NO: 11 или 47); HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 3125 (например, SEQ ID NO: 42 или 48); или HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклонального антитела 3125 (например, SEQ ID NO: 43) и

(ii) вариабельную область легкой цепи (VH), где вариабельная область легкой цепи содержит три области, определяющие комплементарность легкой цепи (LCDR1, LCDR2 и LCDR3), где вариабельная область легкой цепи содержит один, два или все из следующего: LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 моноклонального антитела 3125 (например, SEQ ID NO: 44); LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 3125 (например, SEQ ID NO: 45); или LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 3125 (например, SEQ ID NO: 46).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит один или оба из следующего: (i) VH, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VH моноклонального антитела 3125 (например SEQ ID NO: 49); или (ii) VL, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VL моноклонального антитела 3125 (например, SEQ ID NO: 50).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, кодируемую нуклеотидной последовательностью SEQ ID NO: 79 (или нуклеотидной последовательностью, по существу идентичной ей), или VL, кодируемую нуклеотидной последовательностью SEQ ID NO: 80 (или нуклеотидной последовательностью, по существу, идентичной ей) или и то, и другое.

В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой моноклональное антитело 3125. В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой гуманизированное моноклональное антитело 3125.

В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с человеческим APRIL. В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с человеческим APRIL при EC₅₀ 20 нМ или менее, например 10 нМ или менее, 9 нМ или менее, 8 нМ или менее, 7 нМ или менее, 6 нМ или менее 5 нМ или менее, 4 нМ или менее, 3 нМ или менее, 2 нМ или менее, 1 нМ или менее, 0,8 нМ или менее, 0,6 нМ или менее, 0,4 нМ или менее, 0,2 нМ или менее, 0,1 нМ или менее 0,05 нМ или менее, 0,02 нМ или менее, 0,01 нМ или менее, 0,005 нМ или менее, 0,002 нМ или менее или 0,001 нМ или менее, например, от 0,001 нМ до 20 нМ, например, от 0,01 нМ до 20 нМ, от 0,1 нМ до 20 нМ, от 0,1 нМ до 10 нМ, от 0,5 нМ до 5 нМ, от 1 нМ до 5 нМ, от 0,001 нМ до 0,1 нМ, от 0,001 нМ до 0,01 нМ, от 0,001 нМ до 0,005 нМ, от 0,01 нМ до 0,05 нМ или от 0,01 нМ до 0,1 нМ, например, как определено описанным в настоящем документе способом. В одном варианте осуществления молекула антитела связывается с человеческим APRIL при EC₅₀ 20 нМ или менее, например, примерно 13 нМ. В одном варианте осуществления молекула антитела не связывается или связывается с мышиным APRIL с низкой аффинностью, например, при EC₅₀ 1000 нМ или более, например, 2000 нМ или более, например, как определено описанным в настоящем документе способом.

В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует или по существу ингибирует связывание APRIL (например, человеческого APRIL) с TACI (например, с человеческим TACI). В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует или по существу ингибирует связывание APRIL (например, человеческого APRIL) с TACI (например, с человеческим TACI) при IC₅₀ 50 нМ или менее, например, 40 нМ или менее, 30 нМ или менее 20 нМ или менее, 10 нМ или менее, 9 нМ или менее, 8 нМ или менее, 7 нМ или менее, 6 нМ или менее, 5 нМ или менее, 4 нМ или менее, 3 нМ или менее, 2 нМ или менее 1 нМ или менее, 0,8 нМ или менее, 0,6 нМ или менее, 0,4 нМ или менее, 0,2 нМ или менее, 0,1 нМ или менее, 0,05 нМ или менее, 0,02 нМ или менее или 0,01 нМ или менее, от 0,01 нМ до 50 нМ, от 0,1 нМ до 50 нМ, от 0,1 нМ до 25 нМ, от 0,1 нМ до 10 нМ, от 0,1 нМ до 5 нМ, от 0,1 нМ до 1 нМ, от 0,1 нМ до 0,5 нМ, от 0,5 нМ до 5 нМ или от 1 нМ до 5 нМ, например, как определено описанным в настоящем документе способом. В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует связывание человеческого APRIL с человеческим TACI при IC₅₀ 150 нМ или менее, например, примерно 112,97 нМ. В одном варианте осуществления молекула антитела не ингибирует или по существу не ингибирует связывание APRIL (например, человеческого APRIL) с BCMA (например, с человеческим BCMA).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит:

(i) вариабельную область тяжелой цепи (VH), где вариабельная область тяжелой цепи содержит три области, определяющие комплементарность тяжелой цепи (HCDR1, HCDR2 и HCDR3), где вариабельная область тяжелой цепи содержит один, два или все из следующего: HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR1 моноклонального антитела 4439 (например, SEQ ID NO: 266 или 269); HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR2 моноклонального антитела 4439 (например, SEQ ID NO: 267 или 270); или HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью HCDR3 моноклонального антитела 4439 (например, SEQ ID NO: 268) и

(ii) вариабельную область легкой цепи (VL), где вариабельная область легкой цепи содержит три области, определяющие комплементарность легкой цепи (LCDR1, LCDR2 и LCDR3), где вариабельная область легкой цепи содержит один, два или все из следующего: LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 моноклонального антитела 4439 (например, SEQ ID NO: 146); LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR2 моноклонального антитела 4439 (например, SEQ ID NO: 147); или LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR3 моноклонального антитела 4439 (например, SEQ ID NO: 148).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит один или оба из следующего: (i) VH, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VH моноклонального антитела 4439 (например, SEQ ID NO: 271); или (ii) VL, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью VL моноклонального антитела 4439 (например, SEQ ID NO: 272).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, кодируемую нуклеотидной последовательностью SEQ ID NO: 297 (или нуклеотидной последовательностью, по существу идентичной ей), или VL, кодируемую нуклеотидной последовательностью SEQ ID NO: 298 (или нуклеотидной последовательностью, по существу, идентичной ей) или и то, и другое.

В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой моноклональное антитело 4439. В одном варианте осуществления моноклональное антитело 4439 представляет собой гуманизированное моноклональное антитело 4439.

В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с одним или более, например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25 или более, остатками в пределах области человеческого APRIL, как определено в любой из Таблиц 3-4 или 7-8.

В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с одним или более, например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25 или более, остатками в пределах области человеческого APRIL, как определено в Таблице 3. В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с эпитопом, который содержит или состоит из одного или более, например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25 или всех остатков человеческого APRIL из Таблицы 3. В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с эпитопом, который перекрывает эпитоп, который содержит или состоит из всех остатков человеческого APRIL из Таблицы 3. В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с эпитопом, который содержит остатки APRIL из двух мономеров, например один или более остатков из мономера А и мономера В, как показано в Таблице 3.

В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с одним или более, например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 или более, остатками в пределах области человеческого APRIL, как определено в Таблице 4. В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с эпитопом, который содержит или состоит из одного или более, например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 или всех остатков человеческого APRIL из Таблицы 4. В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с эпитопом, который перекрывает эпитоп, который содержит или состоит из всех остатков человеческого APRIL из Таблицы 4. В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с эпитопом, который содержит один или более остатков APRIL из петли C-D (например, петля, соединяющая β-листы C и D), петли G-H (например, петля, соединяющая β-листы G и H) или и то, и другое.

В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с одним или более, например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17 или со всеми остатками в пределах области человеческого APRIL, как определено в Таблице 7.В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с эпитопом, который содержит или состоит из одного или более, например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17 или всех остатков человеческого APRIL из Таблицы 7. В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с эпитопом, который перекрывает эпитоп, который содержит или состоит из всех остатков человеческого APRIL из Таблицы 7.

В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с одним или более, например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25 и более, остатками в пределах области человеческого APRIL, как определено в Таблице 8. В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с эпитопом, который содержит или состоит из одного или более, например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25 или всех остатков человеческого APRIL из Таблицы 8. В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с эпитопом, который перекрывает эпитоп, который содержит или состоит из всех остатков человеческого APRIL из Таблицы 8. В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с эпитопом, который содержит остатки APRIL из двух мономеров, например один или более остатков из мономера А и мономера В, как показано в Таблице 8.

В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой молекулу антитела IgG, например, содержащую константную область тяжелой цепи IgG, например, выбранную из IgG1, IgG2 (например, IgG2a), IgG3 или IgG4, например IgG2 или IgG4. В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой молекулу антитела IgG1. В другом варианте осуществления молекула антитела представляет собой молекулу антитела IgG2. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит константную область легкой цепи каппа или лямбда.

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит Fc-область. В одном варианте осуществления Fc-область содержит одну или более мутаций, расположенных в области интерфейса между доменами CH2 и CH3 (например, для повышения аффинности связывания с неонатальным рецептором FcRn и/или периода полужизни молекулы антитела). В одном варианте осуществления Fc-область содержит одну или более мутаций, например одну или более (например, 2, 3, 4, 6 или все) мутаций IgG1, выбранных из T250Q, M252Y, S254T, T256E, M428L, H433K, N434F, или любую их комбинацию. В одном варианте осуществления Fc-область содержит одну или более мутаций в положениях 233-236 или 322 человеческого IgG1 или IgG2 или одну или более замен в положениях 327, 330 или 331 человеческого IgG4 (например, для уменьшения комплемент-зависимой цитотоксичности (CDC)). В одном варианте осуществления Fc-область содержит одну или более (например, 2, 3, 4, 6, 7 или все) мутаций, выбранных из E233P, L234V, L235A, G236, K322A, A327G, A330S, P331S, или любую их комбинацию.

В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой молекулу гуманизированного антитела, например, как описано в Таблице 5, например, содержащую одну или более каркасных областей, полученных из каркасной последовательности зародышевой линии человека.

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит две вариабельные области тяжелой цепи и две вариабельные области легкой цепи. В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой Fab, F(ab')2, Fv, Fd или одноцепочечный Fv-фрагмент (scFv).

В одном аспекте раскрытие относится к композиции, например фармацевтической композиции, содержащей молекулу антитела, описанную в настоящем документе. В одном варианте осуществления композиция дополнительно содержит фармацевтически приемлемый носитель.

В одном аспекте раскрытие относится к молекуле нуклеиновой кислоты, кодирующей вариабельную область тяжелой цепи (VH), вариабельную область легкой цепи (VL) или и то, и другое молекулы антитела, описанные в настоящем документе.

В одном аспекте раскрытие относится к вектору, содержащему молекулу нуклеиновой кислоты, описанную в настоящем документе.

В одном аспекте раскрытие относится к клетке, например выделенной клетке, содержащей молекулу нуклеиновой кислоты, описанную в настоящем документе, или вектор, описанный в настоящем документе.

В одном аспекте раскрытие относится к набору, содержащему молекулу антитела, описанную в настоящем документе, и инструкции по использованию молекулы антитела.

В одном аспекте раскрытие относится к контейнеру, содержащему молекулу антитела, описанную в настоящем документе.

В одном аспекте раскрытие относится к способу получения молекулы антитела против APRIL, причем способ включает культивирование клетки, описанной в настоящем документе, в условиях, которые позволяют продуцировать молекулу антитела, тем самым продуцируя молекулу антитела.

В одном варианте осуществления способ дополнительно включает выделение молекулы антитела.

В одном аспекте раскрытие относится к способу лечения IgA-нефропатии, причем способ включает введение пациенту, нуждающемуся в этом, эффективного количества молекулы антитела, описанного в настоящем документе, или композиции, описанной в настоящем документе, тем самым подвергая лечению IgA-нефропатию.

В одном варианте осуществления молекулу антитела вводят пациенту внутривенно.

В одном вардоанте осуществлендоя молекулу антдотела вводят пацдоенту в дозе от 0,1 до 50 мг/кг, напрдомер, от 0,2 до 25 мг/кг, от 0,5 мг/кг до 10 мг/кг, от 0,5 мг/кг до 5 мг/кг, от 0,5 мг/кг до 3 мг/кг, от 0,5 мг/кг до 2,5 мг/кг, от 0,5 мг/кг до 2 мг/кг, от 0,5 мг/кг до 1,5 мг/кг, от 0,5 мг/кг до 1 мг/кг, от 1 мг/кг до 1,5 мг/кг, от 1 мг/кг до 2 мг/кг, от 1 мг/кг до 2,5 мг/кг, от 1 мг/кг до 3 мг/кг, от 1 мг/кг до 2,5 мг/кг долдо от 1 мг/кг до 5 мг/кг.

В одном варианте осуществления молекулу антитела вводят пациенту при фиксированной дозе от 10 и 1000 мг, например, от 10 до 500 мг, от 10 до 250 мг, от 10 до 150 мг, от 10 мг до 100 мг, от 10 до 50 мг, от 250 до 500 мг, от 150 до 500 мг, от 100 до 500 мг, от 50 до 500 мг, от 25 до 250 мг, от 50 до 150 мг, от 50 мг до 100 мг, от 100 мг до 150 мг, от 100 мг до 200 мг или от 150 мг до 250 мг.

В одном варианте осуществления молекулу антитела вводят один раз в неделю, два раза в неделю, раз в две недели, раз в три недели, раз в четыре недели, раз в восемь недель, один раз в месяц, один раз в два месяца или один раз в три месяца.

В одном варианте осуществления введение молекулы антитела снижает уровень IgA в периферической ткани, например, в сыворотке, слизистой оболочке, костном мозге или любой их комбинации.

В одном варианте осуществления введение молекулы антитела снижает уровень IgA1. В одном варианте введение молекулы антитела снижает уровень IgA1 в полимерной форме (pIgA1). В одном варианте введение молекулы антитела снижает уровень IgA1 с O-связанными вариантами гликозилирования (например, аберрантный или уменьшенный состав галактозы в шарнирной области CH1).

В одном варианте осуществления способ дополнительно включает определение уровня IgA в образце периферической ткани у пациента, например, из сыворотки, ткани слизистой оболочки или костного мозга.

В одном варианте осуществления способ дополнительно включает введение пациенту второй терапии IgA-нефропатии. В одном варианте осуществления вторую терапию выбирают из ингибитора ангиотензинпревращающего фермента (ACE), блокатора рецепторов ангиотензина (ARB), жирных кислот омега-3, иммунодепрессанта (например, кортикостероида, например, преднизона), статина, микофенолята мофетила или любой их комбинации.

В одном аспекте раскрытие относится к способу лечения диабетической нефропатии, причем способ включает введение пациенту, нуждающемуся в этом, эффективного количества молекулы антитела, описанного в настоящем документе, или композиции, описанной в настоящем документе, и тем самым подвергая лечению диабетическую нефропатию.

В одном аспекте раскрытие относится к способу лечения злокачественного новообразования, причем способ включает введение пациенту, нуждающемуся в этом, эффективного количества молекулы антитела, описанного в настоящем документе, или композиции, описанной в настоящем документе, и тем самым подвергая лечению злокачественное новообразование.

В одном варианте осуществления злокачественное новообразование представляет собой гематологическое онкологическое заболевание. В одном варианте осуществления гематологическое онкологическое заболевание выбирают из неходжкинской лимфомы В-клеток, хронического лимфоцитарного лейкоза (CLL), лимфомы Ходжкина, множественной миеломы, макроглобулинемии Вальденстрема или лимфоплазматической лимфомы. В одном варианте осуществления злокачественное новообразование представляет собой множественную миелому.

В одном аспекте раскрытие относится к способу лечения иммунопролиферативного расстройства, причем способ включает введение пациенту, нуждающемуся в этом, эффективного количества молекулы антитела, описанного в настоящем документе, или композиции, описанной в настоящем документе, тем самым подвергая лечению иммунопролиферативное расстройство.

В одном варианте осуществления иммунопролиферативное расстройство представляет собой моноклональную IgA гипергаммаглобулинемию.

В одном аспекте раскрытие относится к способу лечения васкулита, причем способ включает введение пациенту, нуждающемуся в этом, эффективного количества молекулы антитела, описанного в настоящем документе, или композиции, описанной в настоящем документе, подвергая тем самым лечению васкулит.

В одном варианте осуществления васкулит представляет собой почечный васкулит. В одном варианте осуществления васкулит представляет собой васкулит, ассоциированный с IgA (например, пурпура Шенлейна-Геноха), или пост-стрептококковый гломерулонефрит.

В одном аспекте раскрытие относится к способу лечения аутоиммунного заболевания, причем способ включает введение пациенту, нуждающемуся в этом, эффективного количества молекулы антитела, описанного в настоящем документе, или композиции, описанной в настоящем документе, тем самым подвергая лечению аутоиммунное расстройство.

В одном варианте аутоиммунное расстройство выбирают из ревматоидного артрита, системной красной волчанки, линейного IgA-зависимого буллезного заболевания (например, линейного иммуноглобулин A (IgA)-зависимого дерматоза) или IgA-опосредованного приобретенного буллезного эпидермолиза (EBA).

В одном аспекте раскрытие относится к способу лечения IgA-пемфигуса, причем способ включает введение пациенту, нуждающемуся в этом, эффективного количества молекулы антитела, описанного в настоящем документе, или композиции, описанной в настоящем документе, подвергая тем самым лечению IgA-пемфигус.

В одном аспекте раскрытие относится к способу лечения целиакии, причем способ включает введение пациенту, нуждающемуся в этом, эффективного количества молекулы антитела, описанной в настоящем документе, или композиции, описанной в настоящем документе, подвергая тем самым лечению целиакию.

В одном аспекте раскрытие относится к способу лечения алкогольного цирроза, причем способ включает введение пациенту, нуждающемуся в этом, эффективного количества молекулы антитела, описанного в настоящем документе, или композиции, описанной в настоящем документе, тем самым подвергая лечению алкогольный цирроз.

В одном аспекте раскрытие относится к способу снижения уровня IgA в клетке или у пациента, причем способ включает контактирование клетки или пациента или введение пациенту, нуждающемуся в этом, эффективного количества молекулы антитела, описанной в настоящем документе, или композиции, описанной в настоящем документе, тем самым снижая уровень IgA.

В одном варианте осуществления молекулу антитела вводят пациенту внутривенно.

В одном варианте осуществления молекулу антитела вводят пациенту в дозе от 0,1 до 50 мг/кг, например, от 0,2 до 25 мг/кг, от 0,5 мг/кг до 10 мг/кг, от 0,5 мг/кг до 5 мг/кг, от 0,5 мг/кг до 3 мг/кг, от 0,5 мг/кг до 2,5 мг/кг, от 0,5 мг/кг до 2 мг/кг, от 0,5 мг/кг до 1,5 мг/кг, от 0,5 мг/кг до 1 мг/кг, от 1 мг/кг до 1,5 мг/кг, от 1 мг/кг до 2 мг/кг, от 1 мг/кг до 2,5 мг/кг, от 1 мг/кг до 3 мг/кг, от 1 мг/кг до 2,5 мг/кг или от 1 мг/кг до 5 мг/кг.

В одном варианте осуществления молекулу антитела вводят пациенту при фиксированной дозе от 10 до 1000 мг, например, от 10 и 500 мг, от 10 до 250 мг, от 10 до 150 мг, от 10 мг до 100 мг, от 10 до 50 мг, от 250 до 500 мг, от 150 до 500 мг, от 100 до 500 мг, от 50 до 500 мг, от 25 до 250 мг, от 50 до 150 мг мг, от 50 до 100 мг, от 100 мг до 150 мг, от 100 мг до 200 мг или от 150 мг до 250 мг.

В одном варианте осуществления молекулу антитела вводят один раз в неделю, два раза в неделю, раз в две недели, раз в три недели, раз в четыре недели, раз в восемь недель, один раз в месяц, один раз в два месяца, один раз в три месяца.

В одном варианте введение молекулы антитела снижает уровень IgA в периферической ткани, например, в сыворотке, слизистой оболочке, костном мозге или любой их комбинации.

В одном варианте осуществления введение молекулы антитела снижает уровень IgA1. В одном варианте введение молекулы антитела снижает уровень IgA1 в полимерной форме (pIgA1). В одном варианте введение молекулы антитела снижает уровень IgA1 с O-связанными вариантами гликозилирования (например, аберрантный или уменьшенный состав галактозы в шарнирной области CH1).

В одном аспекте раскрытие относится к применению описанной в настоящем документе молекулы антитела или композиции, описанной в настоящем документе, при лечении или в производстве лекарственного средства для лечения описанного в настоящем документе расстройства.

В другом аспекте раскрытие относится к молекуле антитела или композицию, описанным в настоящем документе для применения при лечении описанного в настоящем документе расстройства.

В одном аспекте раскрытие относится к способу детектирования молекулы APRIL, причем способ включает контактирование клетки или образца пациента с молекулой антитела, описанной в настоящем документе, тем самым детектируя молекулу APRIL.

В одном варианте осуществления молекула антитела соединена с детектируемой меткой. В одном варианте осуществления молекулу APRIL детектируют in vitro или ex vivo. В другом варианте осуществления молекулу APRIL детектируют in vivo.

В раскрытии рассматриваются все комбинации любого одного или более из вышеуказанных аспектов и/или вариантов осуществления, а также комбинации с любым одним или более вариантами осуществления, изложенными в подробном описании и примерах.

Другие признаки, объекты и преимущества композиций и способов настоящего описания будут очевидны из описания и чертежей и из формулы изобретения.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ЧЕРТЕЖЕЙ

На ФИГ.1А-1В изображено профилирование антител против APRIL из гибридом, полученных из мыши. Мышей CD-1 иммунизировали рекомбинантным мультимерным APRIL (человеческим или мышиным), как описано. Спленоциты от анти-APRIL сероположительных мышей были иммортализованы путем слияния миеломы с получением гибридом. Методы скрининга на основе ИФА использовали для оценки антител против APRIL, присутствующих в кондиционированных средах гибридом, продуцирующих иммуноглобулины. Супернатанты клеточной культуры сначала подвергали скринингу как на связывание с мишенью (APRIL) с помощью непрямого ИФА, так и на функциональную активность в отношении способности блокировать взаимодействие APRIL с рекомбинантным растворимым человеческим рецептором TNF TACI-Fc (блокирующий ИФА). Скрининг против человеческого и мышиного APRIL проводили для идентификации потенциально перекрестно-реактивных антител. Относительная активность основана на точечных измерениях после нормализации концентрации иммуноглобулина до 10 мкг/мл, когда это возможно. Иммуноген APRIL для конечного бустерного введения в хвостовую вену выделен жирным шрифтом. Полученные из гибридомы антитела, лишенные активности блокирования как для человеческого, так и для мышиного APRIL (как первоначально определено, блокирование рецепторов менее чем 10% в этом скрининговом анализе первого захода), не включены в эту сводную таблицу. Изотопы Ig для отдельных гибридом отмечены.

На ФИГ. 2A-2B изображена активность блокирования рецептора APRIL иллюстративными антителами против APRIL. Функциональные активности выбранных антител против APRIL, очищенных от клонов гибридом, полученных из мышей, оценивали с помощью ИФА с использованием рекомбинантного TACI-Fc в качестве растворимого рецептора. Анализ включает две стадии: 1) преинкубацию APRIL с различными концентрациями очищенного мышиного антитела; 2) последующее измерение связывания APRIL с иммобилизованным TACI-Fc, как определено количественно с помощью ИФА, с использованием соответствующего вторичного антитела для детектирования APRIL, маркированного эпитопом. Интерференцию связывания APRIL-рецептора измеряли как потерю A450. Гибридомные антитела изображены сплошными символами. Контрольные и сравнительные антитела изображены незакрашенными символами. Apry-1-1 представляет собой специфичное для мыши блокирующее антитело, используемое в качестве контроля. Человеческие нейтрализующие антитела 0201 и 1313 также использовали в качестве контролей и в сравнительных целях для антител, описанных в научной литературе. Представленные данные являются репрезентативными для анализа и метода оценки ингибирования антител (блокирование рецепторов). ФИГ. 2A (человеческий APRIL); ФИГ. 2B (мышиный APRIL). Значения IC₅₀ представлены на ФИГ. 3.

На ФИГ.3 изображены профили активности отобранных, очищенных полученных из мышей антител против APRIL. Активности связывания и блокирования экстраполировали на основе данных, представленных на ФИГ. 2A-2B и основаны на нелинейной регрессии титрования антител с трехпараметрической кривой с подгонкой с использованием Graphpad Prism. Пунктиром указывают отсутствие активности.

На ФИГ. 4 изображено ингибирование APRIL-опосредованной сигнализации TACI в клетках HEK 293. Функциональное ингибирование активации рецептора, опосредованной человеческим APRIL, оценивали с использованием клеточной линии, полученной из клеток 293, со стабильно трансфецированным репортером NF-κB и транзиторно трансфецированным рецептором человеческого APRIL TACI. HA-маркированный GCN4 человеческий APRIL (R & D Systems) использовали в качестве источника APRIL. В качестве положительного контроля использовали уже существующие mAb 1313 (специфичные для человека с уже установленной блокирующей активностью); в качестве отрицательного контроля использовали мышиное специфичное антитело против APRIL Apry-1-1. Данные являются иллюстрацией ортогонального биологически релевантного анализа для оценки активности антител против APRIL мышиных антител.

На ФИГ. 5 изображено связывание антител против APRIL с человеческим APRIL. Относительное связывание отобранных антител против APRIL измеряли с помощью непрямого ИФА. Отобранные антитела на основе предварительного скрининга гибридом рекомбинантно продуцировали (на основе секвенирования VH и VL гена иммуноглобина), как описано. HA-маркированный GCN4 человеческий APRIL (R & D Systems) использовали в качестве источника APRIL. Данные связывания анализировали с помощью нелинейной регрессии с использованием трехпараметрической кривой. MAb 1313, 0201 и Aprily-5 были включены для сравнительных целей; Apry-1-1 использовали в качестве отрицательного контроля. Экстраполированные значения EC₅₀ суммированы на ФИГ. 6.

На ФИГ.6 изображены относительные аффинности связывания отобранных антител против APRIL. Данные были получены из непрямого ИФА (суммированы на ФИГ. 5). Пунктиром указано отсутствие активности связывания.

На ФИГ. 7 изображено ингибирование антителами связывания APRIL с TACI. Анализ основан на блокирующем ИФА с использованием рекомбинантного человеческого APRIL (R & D Systems) и человеческого TACI-Fc. Ингибирование анализировали с помощью нелинейной регрессии с использованием четырехпараметрической кривой с подгонкой. MAb 1313 и 0201 использовали в качестве контролей и для сравнительных целей. В качестве отрицательного контроля использовали не нейтрализующее mAb против APRIL, Aprily-5.

На ФИГ.8 изображено ингибирование антителами связывания APRIL с BCMA. Анализ основан на блокирующем ИФА с использованием рекомбинантного человеческого APRIL и человеческого BCMA-Fc. Для подробностей см. описание ФИГ. 7.

На ФИГ.9 изображено ингибирование антителами связывания APRIL как с человеческим TACI-Fc, так и с человеческим BCMA-Fc. Относительные ингибирующие активности суммированы. Данные, полученные в результате анализов нелинейной регрессии кривых ингибирования антител, как изображено на ФИГ. 7-8, с использованием четырехпараметрической подгонки % ингибирования, нормализовали без контроля антител (100% ингибирование) после вычитания фона (0% ингибирования). Пунктир означает отсутствие рассчитанных значений IC₅₀ из-за плохой или нулевой активности блокирования.

На ФИГ.10А-10В изображена перекрестная реактивность между видами антител против APRIL. Антитела против APRIL с блокирующей активностью (суммированы на ФИГ. 9) оценивали на способность блокировать связывание человеческого и мышиного APRIL с человеческими TACI-Fc и BCMA-Fc. В качестве рецепторных лигандов использовали рекомбинантный мышиный и человеческий APRIL с иными идентичными HA-маркированными GCN4 N-концевыми слияниями (R & D Systems). Данные отбора включены в иллюстративных целях. Антитела 3530 и 3525 демонстрировали любую перекрестно-видовую активность в отношении блокирования рецептора TACI-Fc (ФИГ. 10А). Аналогичная перекрестная-нейтрализация в отношении связывания APRIL с BCMA-Fc была только частично достигнута (ФИГ.10В). В качестве контролей использовали нейтрализующее антитело 1313 (специфичное для человека) и антитело Apry-1-1 (специфичное для мыши). Закрашенные символы, человеческий APRIL; незакрашенные символы, мышиный APRIL.

На ФИГ. 11A-11B изображено ингибирование антителом APRIL-опосредованной сигнализации рецептора. Ингибирование опосредованной APRIL-рецептором внутриклеточной сигнализации NF-κB оценивали с использованием репортерной клеточной линии HEK 293 NF-κB после транзиторной трансфекции либо вектором, экспрессирующим кДНК полноразмерного человеческого рецептора TACI семейства TNF-рецепторов, либо вектором, экспрессирующим кДНК полноразмерного BCMA. Данные нормализовали к активности против отсутствия обработки антителами. Масштаб оси Y находится в диапазоне от 0 до 1. Ингибирование передачи APRIL-опосредованной сигнализации рецептора измеряли при трех различных концентрациях антител (0,08 мкг/мл, 0,4 мкг/мл и 10 мкг/мл). На ФИГ. 11А показано ингибирование TACI-опосредованной сигнализации NFB; На ФИГ.11В показано ингибирование BCMA-опосредованной сигнализации NF-κB.

На ФИГ.12А-12В изображена эффективность in vivo антитела против APRIL в снижении уровня IgA в сыворотке. Пригодность использования антитела против APRIL для модуляции продуцирования IgA in vivo оценивали, основываясь непосредственно на снижении уровня IgA в сыворотке после введения нейтрализующего антитела против APRIL в лабораторной модели грызунов. Для этой цели в качестве тестируемого антитела для демонстрации доказательной концепции также использовали специфичное, блокирующее антитело против APRIL Apry-1-1 (Adipogen), которое до сих пор использовали в качестве контроля для оценки активности антитела против APRIL in vitro. Самцам мышей B6C3F1 в возрасте (6-10 недель) вводили 20 мг/кг антитела два раза в неделю посредством инъекции ip в общей сложности 8 недель. Солевой раствор для инъекций использовали в качестве отрицательного контроля (носитель) (VC). Уровень иммуноглобулина специфического изотипа в сыворотке (IgG, IgM и IgA) контролировали индивидуально с помощью ИФА приблизительно каждые 12 дней. На ФИГ. 12А показано влияние лечения на уровень IgA в сыворотке; На ФИГ. 12В показано влияние лечения по сравнению с контролем на уровень общего иммуноглобулина в сыворотке. Данные представляют собой суммирование уровней IgG+IgA+IgM, измеренных отдельно.

На ФИГ.13 изображено выравнивание последовательностей человеческого и мышиного APRIL (SEQ ID NO: 85 и 91, соответственно). Выравнивание последовательностей растворимого APRIL определяли с использованием CLUSTALW. Аминокислотные последовательности соответствуют регистрационным номерам SwissProt O75888 (человека) и Q9D777 (мыши).

На ФИГ.14 изображено структурное определение иллюстративного эпитопа APRIL для направленного воздействия антител. Изображена модель заполнения пространства тримерного APRIL. Иллюстративная (пространственно определенная) область, которая должна быть подвержена направленному воздействию молекулы антитела, изображена темно-серым и обозначена стрелкой. Этот эпитоп включает положения в APRIL, которые соединяют мономеры. Различия между последовательностями мышиного и человеческого APRIL выделены соответствующими аминокислотными различиями в этих указанных положениях. Предполагаемый сайт N-гликозилирования (N124) отмечен черным цветом и обозначен стрелкой.

На ФИГ. 15 изображено структурное определение иллюстративного эпитопа APRIL для направленного воздействия антител. Изображена ленточная модель тримерного APRIL, а основной эпитоп для направленного воздействия антитела против APRIL выделен темно-серым цветом.

На ФИГ.16 изображено связывание примерных антител против APRIL с человеческим APRIL. Относительное связывание иллюстативных антител против APRIL измеряли с помощью непрямого ИФА. Экстраполированные значения EC₅₀ суммированы на ФИГ. 17.

На ФИГ. 17 изображены относительные аффинности связывания иллюстративных антител против APRIL. Данные получали из непрямого ИФА (суммированы на фиг.16).

На ФИГ. 18A-18B изображено ингибирование антител опосредованной APRIL рецепторной сигнализацией. Ингибирование APRIL-рецептор опосредованной внутриклеточной сигнализации NFκB оценивали с использованием репортерной клеточной линии HEK 293 NFκB после транзиторной трансфекции либо вектором, экспрессирующим кДНК полноразмерного человеческого рецептор TACI семейства рецепторов TNFа (ФИГ.18A), либо вектором, экспрессирующим кДНК полноразмерного BCMA (ФИГ.18B). Иллюстративные антитела показаны для иллюстративных целей.

На ФИГ. 19A-19B изображено ингибирование антителом связывания APRIL с рецепторами TACI TNFSF (ФИГ.19А) и BCMA (ФИГ.19B). Анализ основан на блокировании ИФА с использованием рекомбинантного человеческого APRIL (R & D Systems) и человеческого TACI-Fc. Ингибирование анализировали с помощью нелинейной регрессии с использованием четырехпараметрической подгонки. Значения IC₅₀ суммированы на ФИГ. 20.

На ФИГ. 20 изображено ингибирование антителом связывания APRIL как с человеческим TACI-Fc, так и с человеческим BCMA-Fc (суммирование относительных ингибирующих активностей). Данные, полученные из нелинейных регрессионных анализов кривых ингибирования антител, изображены на ФИГ. 19, с использованием четырехпараметрической подгонки. % ингибирования нормализовали без контроля антител (100% ингибирования) после вычитания фона (0% ингибирования). Пунктир означает отсутствие рассчитанных значений IC₅₀ из-за плохой или частичной измеренной активности блокирования.

На ФИГ.21А-21В изображены активности антител против APRIL, межвидового перекрестного блокирования APRIL. Способность антител против APRIL блокировать связывание как человеческого (ФИГ.21A), так и мышиного (ФИГ.21B) APRIL с BCMA оценивали с помощью ИФА. Показаны соответствующие блокирующие активности иллюстративных антител (3833, 4540, 3530, 3631 и 3732) с ранее определенным межвидовым связыванием APRIL (мыши и человека).

На ФИГ.22 изображены сайт-направленные варианты человеческого APRIL, используемые для картирования эпитопов. APRIL изображен в виде тримера. Типичный эпитоп, содержащий сайт высокоаффинного связывания рецептора с CRD2, изображен темно-серым. Положения аминокислотных замен отмечены с использованием номера предыдущей аминокислоты дикого типа и последующей мутации (например, R233G представляет мутацию аргинина в положении 233 до глицина).

На ФИГ. 23A-23B изображено эпитопное картирование антитела 4035 (ФИГ.23А) (сравнение проводят с эталонным антителом 1313, см. ФИГ.23В). Связывание антитела с человеческими и мышиными вариантами, оценивали с помощью ИФА. FLAG-маркированный APRIL захватывали из клеточной культуральной среды с использованием антитела против FLAG. Варианты человеческого APRIL изображены как незакрашенные столбцы; варианты мышиного APRIL изображены как закрашенные столбцы.

На ФИГ.24А-24В изображено картирование эпитопов антитела 2419 (ФИГ.24А) (сравнение проводят с эталонным антителом 1313, см. ФИГ.24В). Связывание антитела с человеческими и мышиными вариантами оценивали с помощью ИФА. Варианты человеческого APRIL изображены в виде незакрашенных столбцов; варианты мышиного APRIL изображены в виде закрашенных столбцов.

На ФИГ. 25А-25В изображено эпитопное картирование антитела 3833 (ФИГ.25А) (сравнение проводят с эталонным антителом 1313, см. ФИГ.25В). Связывание антитела с человеческими и мышиными вариантами, оценивали с помощью ИФА. FLAG-маркированный APRIL захватывали из клеточной культуральной среды с использованием антитела против FLAG. Варианты человеческого APRIL изображены в виде незакрашенных столбцов; варианты мышиного APRIL изображены в виде закрашенных столбцов.

На ФИГ.26 изображено дифференцированное картирование эпитопов антител против APRIL с помощью сайт-направленного мутагенеза. Первичную характеристику сайта связывания человеческого APRIL проводили путем сайт-направленного мутагенеза выбранных положений аминокислот в APRIL с последующей оценкой связывания антитела с этими вариантами с помощью ИФА. Для иллюстративных целей показаны иллюстративные данные для трех антител против APRIL 4035 (закрашенные круги), 2419 (закрашенные квадраты) и 1313 (незакрашенные треугольники).

На ФИГ. 27A-27B изображено связывание иллюстративных антител против APRIL с человеческим APRIL. Антитела включают гуманизированные варианты мышиных антител 4035 (ФИГ.27А) и 2419 (ФИГ.27В). Относительное связывание иллюстративных антител против APRIL измеряли с помощью непрямого ИФА. Сравнение гуманизированных антител против APRIL с родительскими (не гуманизированными) мышиными антителами проводят для сравнительных целей. Экстраполированные значения EC₅₀ суммированы на ФИГ. 29A.

На ФИГ.28А-28В изображено связывание гуманизированного варианта перекрестно-реактивного антитела человек-мышь 4540-063 как с человеческим APRIL (ФИГ.28А), так и с мышиным APRIL (ФИГ.28В). Относительное связывание иллюстративного антитела против APRIL измеряли с помощью непрямого ИФА. Сравнение родительского (не гуманизированного) антитела проводят для сравнительных целей. Экстраполированные значения EC₅₀ суммированы на ФИГ. 29B.

На ФИГ. 29A-29B изображены относительные аффинности связывания иллюстративных антител против APRIL. Данные (значения EC₅₀) получали из непрямого ИФА (суммированы на ФИГ.27А-27В и ФИГ.28А-28В). На ФИГ.29А показаны относительные аффинности связывания иллюстративных гуманизированных антител против APRIL на основе 2419 и 4035. На фиг.29В показаны относительные аффинности связывания перекрестно-реактивного антитела 4540 и его гуманизированного варианта 4540-063. Включены данные связывания как для человеческого, так и для мышиного APRIL.

На ФИГ. 29C-29D изображена аффинность связывания антител 2419-1406 и 4035-062 с тримерным человеческим APRIL, измеренная с помощью ИФА. Тример стабилизировали с помощью N-концевого слияния APRIL с доменом изолейциновой застежки (GCN4). Связывание APRIL с человеческим TACI-Fc показано для сравнительных целей.

Значения EC₅₀, полученные из кривых связывания, изображенных на ФИГ. 29С, суммированы на ФИГ. 29D.

На ФИГ. 30A-30B изображено ингибирование антителом связывания APRIL с TNFSF-рецепторами TACI и BCMA с помощью гуманизированных вариантов IgG2κ родительского антитела мышиного происхождения 2419.Анализ основан на ИФА блокирования рецепторов с использованием рекомбинантного человеческого APRIL (R & D Systems) и человеческих TACI-Fc (ФИГ.30А) или BCMA-Fc (ФИГ.30В). Родительское, химерное 2419 (мышиные VH-VL, трансплантированные на константные области человеческого IgG1κ), было включено для сравнительных целей в виде химерного антитела 4035 против человеческого APRIL. Ингибирование анализировали с помощью нелинейной регрессии с использованием четырехпараметрической кривой с подгонкой после нормализации до 100% активности (без контроля антител). Значения IC₅₀ суммированы на ФИГ. 33.

На ФИГ. 31A-31B изображено ингибирование связывания APRIL с TNFSF-рецепторами TACI (ФИГ.31А) и BCMA (ФИГ.33B) с помощью дополнительных гуманизированных вариантов 2419 (IgG2κ) 2419-0205 и 2419-1406 и гуманизированного варианта (4035-062) родительского антитела 4035.Гуманизированный 4035-062 относится к подтипу IgG1κ. Химерные, не гуманизированные варианты мышиных антител 4035 и 2419 и 1313 включены в целях сравнения. mAb1313 представляет собой контрольное антитело против APRIL.Использовали TACI-Fc и BCMA-Fc. Значения IC₅₀ суммированы на ФИГ. 33.

На ФИГ. 32A-32B изображено ингибирование антителом связывания APRIL с TNFSF-рецепторами TACI (фиг.32A) и BCMA (ФИГ.32B) с помощью гуманизированных вариантов перекрестно-нейтрализующего антитела 4540 мышиного/человеческого APRIL.Гуманизированное антитело 4540 относится к подтипу IgG1κ. Родительское 4540 (не гуманизированное химерное) и гуманизированное 4035-062 (ФИГ.30А-30В) включены для сравнительных целей. Ингибирование анализировали нелинейной регрессией с использованием четырехпараметрической кривой с подгонкой, как описано для ФИГ. 29А-29В и ФИГ. 30A-30B.Значения IC₅₀ также суммированы на ФИГ. 33.

На ФИГ. 33 изображены значения IC₅₀ ингибирования антителом связывания APRIL-рецептора. Значения IC₅₀ основаны на нелинейном регрессионном анализе данных, представленных на ФИГ. 30A-32B. Данные также нормализую (относительная активность) к родительскому мышиному антителу 2419.

На фиг. 34A-34B изображено ингибирование антителом опосредованной APRIL рецепторной сигнализации. Ингибирование APRIL-рецептор опосредованной внутриклеточной сигнализации NFκB оценивали с использованием репортерной клеточной линии HEK 293 NFκB после транзиторной трансфекции либо вектором, экспрессирующим кДНК полноразмерного человеческого TNF-рецептора TACI, либо вектором, экспрессирующим кДНК BCMA. Данные нормализуют без контроля антител (100%). На ФИГ. 34А показано ингибирование TACI-опосредованной сигнализации NFκB. На ФИГ. 34B показано ингибирование BCMA-опосредованной сигнализации NFκB.

На ФИГ. 35 изображены приблизительные значения IC₅₀ ингибирования антителом APRIL-опосредованной рецепторной сигнализации. Данные экстраполируют с ФИГ. 34A-34B на основе нелинейного регрессионного анализа с использованием переменного наклона, трехпараметрической подгонки концентраций антител против ответа. Отрицательный контроль антител (без связывания APRIL) продемонстрировал отсутствие активности в этом анализе (данные не показаны).

На ФИГ.36 изображен анализ реактивности связывания антитела APRIL с другими членами семейства цитокинов TNFSF13. Выборочную группу рекомбинантных TNFSF-родственных цитокинов (Adipogen) использовали для тестирования перекрестной реактивности антител, как измерено с помощью ИФА. Панель включала человеческий APRIL (конкретная мишень) и структурно связанный BAFF. Иллюстративные антитела включены для иллюстративных целей. Как и прогнозировали, было обнаружено сильное связывание антител против APRIL с человеческим APRIL. Однако перекрестная реактивность с BAFF и другими членами, отличными от мишени (человеческий APRIL), как правило, по существу не детектировали выше уровня фона анализа (измеряли здесь с использованием только BSA и аналитического разбавителя, 1xPBS-контроли). Антитело 4338, ранее идентифицированное перекрестно-реактивное с BAFF антитело использовали в качестве положительного (BAFF-реактивного) контроля. Контрольное антитело, mAb1313, также было включено.

На ФИГ. 37A-37C изображена минимальная белковая перекрестная реактивность mAb 2419-1406 и mAb 4035-062 на крупномасштабном чипе из более чем 4500 гетерологично экспрессируемых мембранных белков человека в анализе на основе HEK293 и в подтверждающем/вторичном скрининге. Пример конструкции чипа экспрессии белков показан на ФИГ. 37А. На ФИГ. 37B-37C изображены подтверждающий/вторичный скрининг 12 белков. Уровни экспрессии чипа вторичного скрининга из 12 мембранных белков в клетках 293 на основе GFP показаны на левых панелях ФИГ. 37B-37C. Связывание антитела с этим же чипом показано на правой панели ФИГ. 37B-37C.

На ФИГ.38А изображено молекулярное взаимодействие mAb 2419 против APRIL с APRIL на основе совместных данных кристаллографии с низким разрешением для человеческого APRIL (аминокислоты 115-250) и мышиной Fab-области 2419. Структуру разрешали путем молекулярной замены с использованием мышиного APRIL, описанного в базе данных структуры белка. Эпитоп 2419 в APRIL обозначали стрелкой. Также указаны тяжелые и легкие цепи вариабельной области mAb 2419. Структура APRIL изображена в виде тримера.

На ФИГ.38В изображены остатки в APRIL, которые содержат подгруппу эпитопа 2419. Это структурное изображение эпитопа 2419 также подчеркивает тот факт, что 2419 связывается с нелинейным четвертичным эпитопом, охватывающим два разных мономера APRIL в рамках большего тримерного комплекса, изображенного здесь как мономер A и мономер B. Указаны эпитопы на мономере А и эпитоп на мономере В. Эпитоп 2419 по существу перекрывается с сайтом связывания с высоко-аффинным рецептором (CRD2) и сайтом связывания с низко-аффинным рецептором (CRD1), критичным для рецепторной сигнализации, опосредованной APRIL. Сайт связывания рецептора CRD2 и сайт связывания рецептора CRD1 отмечены и указаны.

На ФИГ. 39А-39В изображена термостабильность антител mAb 2419-1406 и 4035-062, измеренная с использованием анализа сканирования флуоресценции Sypro-Orange®. Температуры термического плавления (значения Tпл) для 2419-1406 и 4035-062 приведены на ФИГ. 3.

На ФИГ. 40A-40B изображены PK-профили mAb 2419-1406 и 4035-062 в трансгенной мышиной линии tg32, несущей гуманизированный FcRn. Мышам Tg32 вводили одну дозу 5 мг/кг mAb 2419-1406 или mAb 4035-062 путем внутривенной инъекции. Уровни антител в сыворотке определяли с помощью ИФА с соблюдением временных точек, полученных до 20 дней. Значения PK приведены на ФИГ. 40В.

На ФИГ. 41 изображено снижение базального уровня IgA в сыворотке у мышей, обработанных mAb 4540 и mAb 3833. 11-недельным мышам C57/BL6 субхронически дозировали (1 раз в неделю путем инъекции ip) с помощью 20 мг/кг mAb 4540 или контрольного антитела к изотипу в течение семи недель. Базальный уровень в сыворотке общего IgA определяли с помощью ИФА. Уровни медианного IgA изображены графически; N=5 мышей на группу.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ

В настоящем описании раскрыты молекулы антител, которые связываются с APRIL, например, с человеческим APRIL, мышиным APRIL или обоими, с высокой аффинностью и специфичностью. Преимущественно, некоторые молекулы антител, описанные в настоящем описании, обладают улучшенной способностью уменьшать (например, ингибировать, блокировать или нейтрализовать) одну или более биологических активностей APRIL. Также предлагаются молекулы нуклеиновых кислот, кодирующие молекулы антител, экспрессирующие векторы, клетки-хозяева, композиции (например, фармацевтические композиции), наборы и способы получения молекул антитела. Молекулы антител и фармацевтические композиции, раскрытые в настоящем описании, могут быть использованы (отдельно или в комбинации с другими агентами или терапевтическими модальностями) для лечения, предотвращения и/или диагностики расстройств и патологических состояний, например расстройств и патологических состояний, ассоциированных с APRIL, например IgA-нефропатии.

Определения

Используемый в настоящем описании термин один относятся к одному или более чем одному (например, по меньшей мере одному) грамматическому объекту изделия.

Термин «или» используется в настоящем описании для обозначения и используется взаимозаменяемо с термином «и/или», если контекст явно не указывает иначе.

«Примерно» и «приблизительно» обычно означает приемлемую степень погрешности для количества, измеряемого с учетом характера или точности измерений. Иллюстративные степени погрешности находятся в пределах 20% (%), как правило, в пределах 10% и, более типично, в пределах 5% от заданного значения или диапазона значений.

Раскрытые в настоящем описании композиции и способы включают полипептиды и нуклеиновые кислоты, имеющие указанные последовательности, или последовательности, по существу идентичные или сходные с ними, например последовательности, по меньшей мере, на 85%, 90%, 95% или выше идентичные указанной последовательности.

В контексте аминокислотной последовательности термин «по существу идентичный» используется в настоящем описании для обозначения первой аминокислоты, которая содержит достаточное или минимальное количество аминокислотных остатков, которые являются i) идентичными или ii) консервативными заменами выровненных аминокислотных остатков во второй аминокислотной последовательности, так что первая и вторая аминокислотные последовательности могут иметь общий структурный домен и/или общую функциональную активность. Например, аминокислотные последовательности, которые содержат общую структурную область, имеющую по меньшей мере примерно 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентичности с эталонной последовательность, например с последовательностью, представленной в настоящем описании.

В контексте нуклеотидной последовательности термин «по существу идентичный» используется в настоящем описании для обозначения первой последовательности нуклеиновой кислоты, которая содержит достаточное или минимальное количество нуклеотидов, которые идентичны выровненным нуклеотидам во второй последовательности нуклеиновой кислоты, так что первая и вторая нуклеотидные последовательности кодируют полипептид, имеющий общую функциональную активность, или кодируют общий структурный полипептидный домен или общую функциональную полипептидную активность. Например, нуклеотидные последовательности, имеющие по меньшей мере примерно 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентичности с эталонной последовательностью, например, с последовательностью, представленной в настоящем описании.

Термин «функциональный вариант» относится к полипептидам, которые имеют, по существу, идентичную аминокислотную последовательность, к природной последовательности или кодируются по существу идентичной нуклеотидной последовательностью и способны иметь одну или более активностей природной последовательности.

Расчет гомологии или идентичности последовательностей между последовательностями (термины используются в настоящем описании взаимозаменяемо) выполняется следующим образом.

Для определения процента идентичности двух аминокислотных последовательностей или двух последовательностей нуклеиновой кислоты, последовательности выравнивают в целях оптимального сравнения (например, пропуски могут быть введены в одну или обе из первой и второй аминокислотной или нуклеотидной последовательности для оптимального выравнивания, и не гомологичные последовательности могут быть проигнорированы для целей сравнения). В типичном варианте осуществления длина эталонной последовательности, выровненной в целях сравнения, составляет по меньшей мере 30%, например, по меньшей мере 40%, 50%, 60%, например, по меньшей мере 70%, 80%, 90%, 100% длины эталонной последовательности. Затем сравнивают аминокислотные остатки или нуклеотиды в соответствующих положениях аминокислот или положениях нуклеотидов. Когда положение в первой последовательности занято тем же аминокислотным остатком или нуклеотидом в качестве соответствующего положения во второй последовательности, то молекулы в этом положении идентичны.

Процент идентичности между двумя последовательностями является функцией количества идентичных положений, разделяемых последовательностями, с учетом количества пропусков и длины каждого пропуска, которые необходимо ввести для оптимального выравнивания двух последовательностей.

Сравнение последовательностей и определение процента идентичности между двумя последовательностями может быть выполнено с использованием математического алгоритма. В некоторых вариантах осуществления процент идентичности между двумя аминокислотными последовательностями определяют с использованием алгоритма Needleman and Wunsch ((1970) J. Mol. Biol. 48: 444-453), который был включен в программу GAP в программном пакете GCG (см. Www.gcg.com), используя либо матрицу Blossum 62, либо матрицу PAM250, и размер пропуска 16, 14, 12, 10, 8, 6 или 4 и вес длины 1, 2, 3, 4, 5 или 6. В некоторых вариантах осуществления процент идентичности между двумя нуклеотидными последовательностями определяют с использованием программы GAP в программном пакете GCG (см. Www.gcg.com) с использованием NWSgapdna.CMP и веса пропуска 40, 50, 60, 70 или 80 и веса длины 1, 2, 3, 4, 5 или 6. Один подходящий набор параметров (и тот, который должен использоваться, если не указано иное) - это матрица подсчета Blossum 62 с штрафом за пропуск 12, штрафом за удлинение пропуска 4 и штрафом за сдвиг рамки 5.

Процент идентичности между двумя аминокислотными или нуклеотидными последовательностями может быть определен с использованием алгоритма E.Meyers и W. Miller ((1989) CABIOS, 4: 11-17), который был включен в программу ALIGN (версия 2.0), используя таблицу веса остатков PAM120, штраф за длину пропуск 12 и штраф за пропуск 4.

Последовательности нуклеиновой кислоты и белка, описанные в настоящем описании, могут быть использованы в качестве «последовательности запросов» для выполнения поиска по открытым базам данных, например, для идентификации других членов семейства или связанных последовательностей. Такие поиски могут выполняться с использованием программ NBLAST и XBLAST (версия 2.0) Altschul et al. (1990) J. Mol. Biol. 215: 403-10. Поиск нуклеотидов BLAST может выполняться с помощью программы NBLAST, оценка=100, длина слова=12 для получения нуклеотидных последовательностей, гомологичных нуклеиновой кислоте, как описано в настоящем описании. Поиск белка BLAST может выполняться с помощью программы XBLAST, оценка=50, длина слова=3 для получения аминокислотных последовательностей, гомологичных молекулам белка, описанным в настоящем описании. Для получения прерывистых выравниваний для целей сравнения может быть использован Gapped BLAST, как описано в Altschul et al., (1997) Nucleic Acids Res. 25: 3389-3402. При использовании программ BLAST и gapped BLAST могут использоваться параметры по умолчанию для соответствующих программ (например, XBLAST и NBLAST). См. Www.ncbi.nlm.nih.gov.

Используемый в настоящем описании термин «гибридизуется в условиях низкой жесткости, средней жесткости, высокой жесткости или очень высокой жесткости» описывает условия для гибридизации и промывки. Руководство по проведению реакций гибридизации можно найти в Current Protocols in Molecular Biology, John Wiley & Sons, NY (1989), 6.3.1-6.3.6, которая включена в качестве ссылки. Водные и неводные способы описаны в этой ссылке и могут быть использованы. Специфичные условия гибридизации, упомянутые в настоящем описании, представляют собой следующие: 1) условия низкой жесткости гибридизации в 6х хлорид натрия/цитрат натрия (SSC) при примерно 45 °С, с последующими двумя промывками в 0,2xSSC, 0,1% SDS, по меньшей мере при 50 °С (температура промывок может быть увеличена до 55 °С для условий низкой жесткости); 2) условия гибридизации средней жесткости в 6ХSSC при примерно 45 °С, с последующим одним или более промывками в 0,2xSSC, 0,1% SDS при 60 °С; 3) условия гибридизации высокой жесткости в 6хSSC при примерно 45 °С, с последующим одним или более промывками в 0,2xSSC, 0,1% SDS при 65 °С; и, предпочтительно, 4) условия гибридизации очень высокой жесткости соответствуют 0,5М фосфата натрия, 7% SDS при 65 °С, с последующими одной или более промывками в 0,2xSSC, 1% SDS при 65 °С. Условия очень высокой жесткости 4) являются подходящими условиями и теми, которые должны использоваться, если не указано иное.

Понятно, что описанные в настоящем документе молекулы могут иметь дополнительные консервативные или заменимые аминокислотные замены, которые не оказывают существенного влияния на их функции.

Подразумевается, что термин «аминокислота» охватывает все молекулы, будь то природные или синтетические, которые включают как функциональность аминогрупп, так и кислотную функциональность и могут быть включены в полимер природных аминокислот. Примеры аминокислот включают природные аминокислоты; аналоги, производные и их конгенеры; аминокислотные аналоги с вариантами боковых цепей; и все стереоизомеры любого из вышеперечисленных. Используемый в настоящем описании термин «аминокислота» включает как D-, так и L-оптические изомеры и пептидомиметики.

«Консервативная замена аминокислоты» представляет собой «консервативную аминокислотную замену», в которой аминокислотный остаток заменен аминокислотным остатком, имеющим сходную боковую цепь. Семьи аминокислотных остатков, имеющих сходные боковые цепи, определены в данной области техники. Эти семейства включают аминокислоты с основными боковыми цепями (например, лизин, аргинин, гистидин), кислотными боковыми цепями (например, аспарагиновая кислота, глутаминовая кислота), незаряженными полярными боковыми цепями (например, глицин, аспарагин, глутамин, серин, треонин, тирозин, цистеин), неполярными боковыми цепями (например, аланин, валин, лейцин, изолейцин, пролин, фенилаланин, метионин, триптофан), бета-разветвленными боковыми цепями (например, треонин, валин, изолейцин) и ароматическими боковыми цепями (например, тирозин, фенилаланин, триптофан, гистидин).

Термины «полипептид», «пептид» и «белок» (если одна цепь) используются в настоящем описании взаимозаменяемо для обозначения полимеров аминокислот любой длины. Полимер может быть линейным или разветвленным, он может содержать модифицированные аминокислоты и он может прерываться не аминокислотами. Термины также охватывают аминокислотный полимер, который был модифицирован; например, образованием дисульфидной с вязи, гликозилированием, липидацией, ацетилированием, фосфорилированием или любыми другими манипуляциями, такие как конъюгация с меченым компонентом. Полипептид может быть выделен из природных источников, может быть получен рекомбинантными методами из эукариотического или прокариотического хозяина или может быть продуктом синтетических процедур.

Термины «нуклеиновая кислота», «последовательность нуклеиновой кислоты», «нуклеотидная последовательность» или «полинуклеотидная последовательность» и «полинуклеотид» используются взаимозаменяемо. Они относятся к полимерной форме нуклеотидов любой длины, либо дезоксирибонуклеотидов, либо рибонуклеотидов, или их аналогов. Полинуклеотид может быть либо одноцепочечным, либо двухцепочечным, и если он одноцепочечный, то это может быть кодирующая цепь или некодирующая (антисмысловая) цепь. Полинуклеотид может содержать модифицированные нуклеотиды, такие как метилированные нуклеотиды и нуклеотидные аналоги. Последовательность нуклеотидов может быть прервана ненуклеотидными компонентами. Полинуклеотид может быть дополнительно модифицирован после полимеризации, например, путем конъюгации с меченым компонентом. Нуклеиновая кислота может быть рекомбинантным полинуклеотидом или полинуклеотидом геномного, кДНК, полусинтетического или синтетического происхождения, который либо не встречается в природе, либо связан с другим полинуклеотидом в неприродном окружении.

Используемый в настоящем описании термин «выделенный» относится к материалу, который удаляется из его первоначальной или нативной среды (например, природной среды, если она встречается в природе). Например, природный полинуклеотид или полипептид, присутствующий в живом животном, не является выделенным, но тот же полинуклеотид или полипептид, отделенный вмешательством человека от некоторых или ото всех совместно существующих материалов в естественной системе, является выделенным. Такие полинуклеотиды могут быть частью вектора, и/или такие полинуклеотиды или полипептиды могут быть частью композиции и все же будут выделенными в том смысле, что такой вектор или композиция не является частью среды, в которой он встречается в природе.

Используемый в настоящем описании термин «лечение», например IgA-нефропатии, означает, что пациент (например, человек), который имеет расстройство, например IgA-нефропатию и/или испытывает симптом расстройства, например IgA-нефропатии, будет в одном варианте осуществления менее тяжелым симптомом и/или быстрее восстанавливаться, когда вводят молекулу антитела, чем в случае, если бы молекулу антитела никогда бы не вводили. В одном варианте осуществления при лечении IgA-нефропатии биопсия почек будет демонстрировать меньше или отсутствие депонирования IgA, например, в виде иммунных комплексов в мезангии почки после эффективного лечения IgA-нефропатии. Например, диагностический анализ с использованием иммунофлуоресцентной или электронной микроскопии будет обнаруживать меньше отсутствия депонирования IgA в биологическом образце пациента после введения молекулы антитела, описанной в настоящем документе для эффективного лечения IgA-нефропатии. Другие анализы, анализы мочи, анализы крови, тесты на удаление йоталамата или визуализация почек (например, ультразвук, рентген или цистоскопия) также могут использоваться для мониторинга лечения у пациента или для обнаружения присутствия, например, снижения присутствия (или отсутствие), симптома IgA-нефропатии после лечения IgA-нефропатии у пациента. Лечение может, например, частично или полностью, облегчать, улучшать, ослаблять, ингибировать или уменьшать тяжесть и/или уменьшать заболеваемость и, возможно, задерживать начало одного или более проявлений эффектов или симптомов, признаков и/или причин расстройства, например, IgA-нефропатии. В одном варианте осуществления лечение относится к пациенту, который не демонстрирует определенных признаков расстройства, например IgA-нефропатии, и/или к пациенту, который демонстрирует только ранние признаки расстройства, например нефропатии. В одном варианте осуществления лечение относится к пациенту, который демонстрирует один или более установленных признаков расстройства, например IgA-нефропатии. В одном варианте осуществления лечение относится к пациенту, которого диагностировали как страдающего расстройством, например, IgA-нефропатией.

Используемый в настоящем описании термин «предотвращать» расстройство, например IgA-нефропатию, означает, что пациент (например, человек) с меньшей вероятностью будет иметь расстройство, например IgA-нефропатию, если пациент получает молекулу антитела.

Различные аспекты композиций и способов описаны в настоящем документе более подробно ниже. Дополнительные определения представлены в описании изобретения.

APRIL

APRIL (лиганд, индуцирующий пролиферацию), также известный как CD256, TNF- и APOL-связанный лейкоцит экспрессированный лиганд 2 (TALL-2) или TNF-связанный лиганд смерти 1 (TRDL-1), представляет собой цитокин семейства TNF, кодируемый геном члена 13 суперсемейства лигандов фактора некроза опухоли (TNFF13) (также известный как APRIL, TALL2 или ZTNF2). APRIL играет роль в ряде биологических процессов, таких как трансдукция сигналов, регуляция клеточной пролиферации и переключение класса IgA (Hahne et al. (1998) J. Exp. Med. 188: 1185-1190 (1998); Castigli et al. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 101:3903-3908 (2004)).

APRIL функционально и структурно связан с BAFF (фактор F13B активации B-клеток), также известный как BLyS (стимулятор B-лимфоцитов). Оба цитокина участвуют в регуляции ключевых аспектов врожденных и адаптивных иммунных функций. Оба, APRIL и BAFF связываются с рецепторами лимфоцитов TACI (трансмембранный активатор и CAML-взаимодействующий агент) и BCMA (антиген созревания В-клеток). APRIL и BAFF, по-видимому, гетерологично взаимодействуют друг с другом через белок-белковые взаимодействия. Хотя оба APRIL и BAFF имеют биохимическое (связывание с рецептором), иммунологическое и даже некоторое структурное перекрывание (например, поскольку оно относится к трехмерной топологии их соответствующих доменов связывания с рецептором), два цитокина, тем не менее, являются структурно и функционально различными. APRIL связывается с биологически значимым гепарансульфатом (присутствующим во внеклеточном матриксе клеток в виде гепарансульфатных протеогликанов); BAFF - нет. Это взаимодействие играет критическую биологическую функцию в отношении продвижения состояния олигомеризации APRIL в сочетании с его локализованным взаимодействием с TACI, которое также требует HSPGS для полной активности. В отличие от BAFF, который действует как мощный активатор B-клеток, включая как пролиферацию, так и дифференцировку, APRIL, по-видимому, будет функционировать более конкретно в отношении модуляции фенотипа В-клеток, например, поскольку он связан с продуцированием IgA и дифференцировкой/выживаемостью IgA-положительных плазматических клеток. Собственно, ожидается, что направленное нарушение сигнализации APRIL-рецептора будет оказывать меньший пертурбативный эффект на гомеостаз B-клеток и общую иммунную функцию по сравнению с другими иммунологическими терапевтическими средствами, которые нацелены на BAFF (например, белимумаб), или с терапией с антителом против CD20 (например, ритуксимаб), которые в основном нацелены на пре-В-клетки и ранние В-клетки. Было также показано, что APRIL экспрессируется на высоком уровне на других клетках, относящихся к костному мозгу, и в лимфоидных тканях, а также на клетках при гематологических онкологических заболеваниях (например, миеломе, хроническом лимфоцитарном лейкозе (CLL)) и в клетках твердых опухолей (например, толстой кишки, щитовидной железы и груди).

Примерные аминокислотные и нуклеотидные последовательности человеческого APRIL описаны, например, в Hahne et al. J. Exp. Med. 188: 1185-1190 (1998); Shu et al. J. Leukoc. Biol. 65:680-683 (1999); Kelly et al. Cancer Res. 60: 1021-1027 (2000); и Pradet-Balade et al. EMBO J. 21:5711-5720 (2002).

Аминокислотная последовательность человеческого APRIL (изоформа альфа, также называемая «канонической» последовательностью (SEQ ID NO: 85)), представлена ниже.

> huAPRIL

MPASSPFLLAPKGPPGNMGGPVREPALSVALWLSWGAALGAVACAMALLTQQTELQSLRREVSRLQGTGGPSQNGEGYPWQSLPEQSSDALEAWENGERSRKRRAVLTQKQKKQHSVLHLVPINATSKDDSDVTEVMWQPALRRGRGLQAQGYGVRIQDAGVYLLYSQVLFQDVTFTMGQVVSREGQGRQETLFRCIRSMPSHPDRAYNSCYSAGVFHLHQGDILSVIIPRARAKLNLSPHGTFLGFVKL

Существует несколько изоформ человеческого APRIL, полученных путем альтернативного сплайсинга.

Изоформа бета имеет следующую аминокислотную последовательность (SEQ ID NO: 86):

> sp | O75888-2 | TNF13_ЧЕЛОВЕЧЕСКИЙ Изоформа Бета члена 13 суперсемейства фактора некроза опухоли OS=Homo sapiens GN=TNFSF13

MPASSPFLLAPKGPPGNMGGPVREPALSVALWLSWGAALGAVACAMALLTQQTELQSLRREVSRLQGTGGPSQNGEGYPWQSLPEQSSDALEAWENGERSRKRRAVLTQKQKNDSDVTEVMWQPALRRGRGLQAQGYGVRIQDAGVYLLYSQVLFQDVTFTMGQVVSREGQGRQETLFRCIRSMPSHPDRAYNSCYSAGVFHLHQGDILSVIIPRARAKLNLSPHGTFLGFVKL

Последовательность изоформы бета отличается от канонической последовательности следующим образом: аминокислоты 113-129 SEQ ID NO: 85: KQHSVLHLVPINATSKD → N

Изоформа гамма имеет следующую аминокислотную последовательность (SEQ ID NO: 87):

> sp | O75888-3 | TNF13_Человеческий Изоформа гамма члена 13 суперсемейства фактора некроза опухоли OS=Homo sapiens GN=TNFSF13

MPASSPFLLAPKGPPGNMGGPVREPALSVALWLSWGAALGAVACAMALLTQQTELQSLRREVSRLQGTGGPSQNGEGYPWQSLPEQSSDALEAWENGERSRKRRAVLTQKQKKQHSVLHLVPINATSKDDSDVTEVMWQPALRRGRGLQAQGYGVRIQDAGVYLLYSQVLFQDVTFTMGQVVSREGQGRQETLFRCIRSMPSHPDRAYNSCYSAGVFHLHQGDILSVIIPRARAKLNLSPHGTFLGL

Последовательность изоформы гамма отличается от канонической последовательности следующим образом: аминокислоты 247-249: отсутствуют.

Изоформа 4 имеет следующую аминокислотную последовательность (SEQ ID NO: 88):

> sp | O75888-4 | TNF13_Человеческий Изоформа 4 члена 13 суперсемейства фактора некроза опухоли OS=Homo sapiens GN=TNFSF13

MPASSPFLLAPKGPPGNMGGPVREPALSVALWLSWGAALGAVACAMALLTQQTELQSLRREVSRLQGTGGPSQNGEGYPWQSLPEQHSVLHLVPINATSKDDSDVTEVMWQPALRRGRGLQAQGYGVRIQDAGVYLLYSQVLFQDVTFTMGQVVSREGQGRQETLFRCIRSMPSHPDRAYNSCYSAGVFHLHQGDILSVIIPRARAKLNLSPHGTFLGFVKL

Последовательность изоформы 4 отличается от канонической последовательности следующим образом: аминокислоты 86-113: отсутствуют.

Изоформа TWE-PRIL имеет следующую аминокислотную последовательность (SEQ ID NO: 89):

> sp | O43508-2 | TNF12_человеческая Изоформа TWE-PRIL члена 12 суперсемейства фактора некроза опухоли OS=Homo sapiens GN=TNFSF12

MAARRSQRRRGRRGEPGTALLVPLALGLGLALACLGLLLAVVSLGSRASLSAQEPAQEELVAEEDQDPSELNPQTEESQDPAPFLNRLVRPRRSAPKGRKTRARRAIAAHYEVHPRPGQDGAQAGVDGTVSGWEEARINSSSPLRYNRQIGEFIVTRAGLYYLYCQSSDALEAWENGERSRKRRAVLTQKQKKQHSVLHLVPINATSKDDSDVTEVMWQPALRRGRGLQAQGYGVRIQDAGVYLLYSQVLFQDVTFTMGQVVSREGQGRQETLFRCIRSMPSHPDRAYNSCYSAGVFHLHQGDILSVIIPRARAKLNLSPHGTFLGFVKL

Изоформа 5 имеет следующую аминокислотную последовательность (SEQ ID NO: 90):

> sp | O75888-5 | TNF13_человеческая Изоформа 5 члена 13 суперсемейства фактора некроза опухоли OS=Homo sapiens GN=TNFSF13

MGGPVREPALSVALWLSWGAALGAVACAMALLTQQTELQSLRREVSRLQGTGGPSQNGEGYPWQSLPEQHSVLHLVPINATSKDDSDVTEVMWQPALRRGRGLQAQGYGVRIQDAGVYLLYSQVLFQDVTFTMGQVVSREGQGRQETLFRCIRSMPSHPDRAYNSCYSAGVFHLHQGDILSVIIPRARAKLNLSPHGTFLGFVKL

Последовательность изоформы 5 отличается от канонической последовательности следующим образом: аминокислоты 1-17: отсутствуют; аминокислоты 87-114: Отсутствуют.

Другие варианты и альтернативные последовательности человеческого APRIL описаны, например, в The MGC Project Team, Genome Res. 14:2121-2127 (2004); Ota et al. Nat. Genet. 36:40-45 (2004); и Kelly et al. Cancer Res. 60:1021-1027 (2000).

Как используется в настоящем описании, когда молекула антитела против APRIL связывается или по существу связывается с человеческим APRIL, она связывается или по существу связывается с одной или более изоформ человеческого APRIL, например, с одной или более изоформ человеческого APRIL, описанных в настоящем документе. В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с человеческим APRIL, имеющим аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 85.

Иллюстративные аминокислотные и нуклеотидные последовательности мышиного APRIL описаны, например, в Yu et al. Nat. Immunol. 1: 252-256 (2000); Carninci et al. Science 309:1559-1563 (2005); The MGC Project Team, Genome Res. 14:2121-2127 (2004); и Bossen et al. J. Biol Chem. 281: 13964-13971 (2006).

Аминокислотная последовательность изоформы 1 мышиного APRIL (SEQ ID NO: 91) представлена ниже.

> muAPRIL

MPASSPGHMGGSVREPALSVALWLSWGAVLGAVTCAVALLIQQTELQSLRREVSRLQRSGGPSQKQGERPWQSLWEQSPDVLEAWKDGAKSRRRRAVLTQKHKKKHSVLHLVPVNITSKADSDVTEVMWQPVLRRGRGLEAQGDIVRVWDTGIYLLYSQVLFHDVTFTMGQVVSREGQGRRETLFRCIRSMPSDPDRAYNSCYSAGVFHLHQGDIITVKIPRANAKLSLSPHGTFLGFVKL

Аминокислотная последовательность изоформы 2 мышиного APRIL (SEQ ID NO: 92) представлена ниже.

MPASSPGHMGGSVREPALSVALWLSWGAVLGAVTCAVALLIQQTELQSLRREVSRLQRSGGPSQKQGERPWQSLWEQSPDVLEAWKDGAKSRRRRAVLTQKHKKKHSVLHLVPVNITSKDSDVTEVMWQPVLRRGRGLEAQGDIVRVWDTGIYLLYSQVLFHDVTFTMGQVVSREGQGRRETLFRCIRSMPSDPDRAYNSCYSAGVFHLHQGDIITVKIPRANAKLSLSPHGTFLGFVKL

Как используется в настоящем описании, когда молекула антитела против APRIL связывается или по существу связывается с мышиным APRIL, она связывается или по существу связывается с одной или более изоформами мышиного APRIL, например с одной или более изоформами мышиного APRIL, описанного в настоящем документе. В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с мышиным APRIL, имеющим аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 91, SEQ ID NO: 92 или и с тем, и с другим.

Как используется в настоящем описании, когда молекула антитела против APRIL не связывается или по существу не связывается с мышиным APRIL, она не связывается или по существу не связывается с одной или более изоформ мышиного APRIL, например с одной или более изоформ мышиного APRIL, описанных в настоящем документе. В одном варианте осуществления молекула антитела не связывается или по существу не связывается с мышиным APRIL, имеющим аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 91 или 92. В типичном варианте осуществления молекула антитела не связывается или по существу не связывается с мышиным APRIL, имеющим аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 91, и с мышиным APRIL, имеющим аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 92.

Выравнивание последовательности иллюстративных белков человеческого и мышиного APRIL (SEQ ID NO: 85 и 91 соответственно) показана на ФИГ. 13.

Эпитоп

Молекула антитела, описанная в настоящем документе, может связываться с эпитопом на APRIL (например, на человеческом APRIL, мышином APRIL или на обоих). Например, эпитоп, связанный молекулой антитела, описанной в настоящем документе, может включать одну или более точек контакта эпитопов, описанных в настоящем документе.

В одном варианте молекула антитела контактирует (например, связывается или по существу связывается) с одним или более остатками или с одной или более областями, как описано в любой из Таблиц 3-4 или 6-8, или на любой из ФИГ. 14, 22, 23A-23B, 24A-24B, 25A-25B или 38A-38B.

В одном варианте осуществления молекула антитела контактирует (например, связывается или по существу связывается) с одним или более (например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25 или со всеми) аминокислотными остатками, показанными в Таблице 3. В одном варианте осуществления молекула антитела контактирует (например, связывается или по существу связывается) со всеми аминокислотными остатками, показанными в Таблице 3. Например, молекулы антитела, описанные в настоящем документе, могут контактировать с аминокислотными остатками, показанными в Таблице 3, таким образом, что они включают связывание через два мономера APRIL (например, как показано в Таблице 3 как A против B).Безотносительно к теории, считается, что в одном варианте осуществления по меньшей мере некоторые из аминокислотных остатков, показанных в Таблице 3, способствуют высокоаффинному взаимодействию между APRIL и CDR2-доменом TACI. В одном варианте осуществления контактирование одного или более аминокислотных остатков в Таблице 3 с молекулой антитела, описанной в настоящем документе, ингибирует или по существу ингибирует связывание APRIL с TACI.

Иллюстративные аминокислотные остатки человеческого APRIL, которые могут связываться с молекулами антител против APRIL, описанными в настоящем документе, показаны в Таблице 3. Структурное представление этого эпитопа (например, определяемое как пространственно, так и конформационно) изображено на ФИГ. 14.

Таблица 3. Иллюстративные аминокислотные остатки человеческого APRIL, которые связываются с антителами против APRIL (нумерация аминокислот на основе SEQ ID NO: 85)

Мономер Положение аминокислоты Аминокислота A 130 Asp A 131 Ser A 132 Asp A 174 Val A 175 Thr A 176 Phe A 177 Thr A 178 Met A 179 Gly A 180 Gln A 181 Val A 192 Thr A 195 Arg A 196 Cys A 197 Ile A 200 Met A 201 Pro A 202 Ser A 208 Tyr A 230 Pro A 231 Arg A 232 Ala A 241 His B 170 Leu B 205 Asp B 206 Arg

В другом варианте осуществления молекула антитела контактирует (например, связывается или по существу связывается) с одним или более (например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 или со всеми) аминокислотными остатками, показанными в Таблице 4. В другом варианте осуществления молекула антитела контактирует (например, связывается или по существу связывается) со всеми аминокислотными остатками, показанными в Таблице 4. В одном варианте осуществления молекула антитела связывается, или, по существу связывается с петлей C-D (например, петля, связывания β-листов C и D), петлей G-H (например, петля связывания β-листов G и Н), или с обеими на APRIL.

Структурная (пространственная) презентация этого эпитопа (иногда упоминаемого в настоящем описании как «коровая область») изображена на ФИГ. 15. Как показано на ФИГ. 15, каждая молекула белка APRIL содержит два упакованных антипараллельных восмицепочечных β-листа (А-G), один внутренний и один внешний, в β топологии рулета. Эти листы B связаны петлями, которые также определяют (на основе определений вторичной структуры) целевой эпитоп. Безотносительно к теории считается, что поскольку эти положения/структуры определяют подгруппу ключевых взаимодействий с APRIL и CRD2-доменом TACI, то возможно было бы достичь оптимального ингибирования связывания APRIL с TACI с помощью такого антитела.

Таблица 4. Иллюстративные аминокислотные остатки человеческого APRIL, которые связываются с антителами против APRIL (нумерация аминокислот на основе SEQ ID NO: 85)

Положение аминокислоты Аминокислота 174 Val 175 Thr 176 Phe 177 Thr 178 Met 179 Gly 180 Gln 181 Val 230 Pro 231 Arg 232 Ala

В другом варианте осуществления молекула антитела не связывается с одним, двумя или всеми из Asp129, Arg233 или HIS203 на человеческом APRIL (например, SEQ ID NO: 85). Например, одна или более мутаций в этих положениях, например Asp129Ala, Arg233Asn, His203Asp или любая их комбинация, не уменьшали бы или уменьшали бы аффинность связывания молекулы антитела с человеческим APRIL или ингибирующее действие молекулы антитела на активность человеческого APRIL (например, нейтрализация связывания APRIL с TACI).

Еще в одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с одним или более (например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 или со всеми) остатками человеческого APRIL (например, SEQ ID NO: 85) из положений 105-114 и/или с одним или более (например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 или со всеми) остатками мышиного APRIL (например, SEQ ID NO: 91) из положений 96-105.

В другом варианте осуществления молекула антитела контактирует (например, связывается или по существу связывается с) одним или более (например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17 или со всеми) аминокислотными остатками, показанными в Таблице 7. В другом варианте осуществления молекула антитела контактирует (например, связывается или по существу связывается со всеми) аминокислотными остатками, показанными в Таблице 7.

Таблица 7. Иллюстративные аминокислотные остатки человеческого APRIL, которые связываются с антителами против APRIL (нумерация аминокислот на основе SEQ ID NO: 85)

Положение аминокислоты Аминокислота 132 Asp 170 Leu 175 Thr 176 Phe 177 Thr 178 Met 181 Val 192 Thr 195 Arg 197 Ile 205 Asp 206 Arg 208 Tyr 228 Iso 230 Pro 231 Arg 232 Ala 241 His

В одном варианте осуществления молекула антитела, например молекула антитела против APRIL, имеющая один, два, три, четыре, пять или шесть CDR любого из моноклональных антител 2419, 2419-0105, 2419-0205, 2419-0206, 2419- 0406, 2419-0605, 2419-0805, 2419-0806, 2419-1204, 2419-1210, 2419-1305, 2419-1306, 2419-1310 или 2419-1406, связывается с одной или более аминокислотами, описанными в Таблице 7. В другом варианте осуществления молекула антитела, например, специфичная для человека молекула антитела против APRIL, например, имеющая один, два, три, четыре, пять или шесть CDR любого из моноклональных антител 2419, 2419-0105, 2419-0205, 2419-0206, 2419-0406, 2419-0605, 2419-0805, 2419-0806, 2419-1204, 2419-1210, 2419-1305, 2419-1306, 2419-1310, 2419-1406, связывается с мышиным APRIL, когда одно или более (например, 2, 3, 4 или все) следующие положения в мышином APRIL (применяется нумерация мышиного APRIL) подвергнуты мутации, например, следующим образом: A120D, N224R, H163Q, K219I или R181Q. Еще в одном варианте осуществления молекула антитела, например, специфичная для человека молекула антитела против APRIL, например, имеющая один, два, три, четыре, пять или шесть CDR любого из моноклональных антител 2419, 2419-0105, 2419- 0205, 2419-0206, 2419-0406, 2419-0605, 2419-0805, 2419-0806, 2419-1204, 2419-1210, 2419-1305, 2419-1306, 2419-1310, 2419-1406, связывается с мышиным APRIL, когда лизин в положении 219 (применяется нумерация мышиного APRIL) подвергнут мутации, например, до изолейцина (то есть K219I).

В одном варианте осуществления молекула антитела контактирует (например, связывается или по существу связывается с) одним или более (например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32 или со всеми) аминокислотными остатками человеческого APRIL, показанными в Таблице 6. В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой молекулу антитела, описанную в настоящем документе, например моноклональное антитело 2218, 2419, 2621, 2622, 3125, 3327, 3525, 3530, 4035, 3934, 3833, 3631, 3732, 4338, 4540 или 4237,

В одном варианте осуществления молекула антитела контактирует (например, связывается или по существу связывается с) одним или более (например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 или со всеми) аминокислотными остатками человеческого APRIL выбранными из D132, V174, F176, V181, Q190, R195, R206, Y208, I228 или N237. В одном варианте осуществления молекула антитела контактирует (например, связывается или по существу связывается с) одним или более (например, 2, 3, 4, 5 или со всеми) аминокислотными остатками человеческого APRIL, выбранными из V174, F176, Q190, R195, R206 или Y208. В одном варианте осуществления молекула антитела контактирует (например, связывается или по существу связывается с) одним или более (например, 2, 3 или со всеми) аминокислотными остатками человеческого APRIL, выбранными из F176, V181, Q190 или I228. В одном варианте осуществления молекула антитела контактирует (например, связывается или по существу связывается с) одним или более (например, 2 или со всеми) аминокислотными остатками человеческого APRIL, выбранными из V174, R206 или Y208.

В одном варианте осуществления молекула антитела не контактирует (например, не связывается или по существу не связывается) по меньшей мере с одним (например, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 или 20) из аминокислотных остатков человеческого APRIL, показанных в Таблице 6. В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой молекулу антитела, описанную в настоящем документе, например моноклональное антитело 2218, 2419, 2621, 2622, 3125, 3327, 3525, 3530, 4035, 3934, 3833, 3631, 3732, 4338, 4540 или 4237,

В одном варианте осуществления молекула антитела не контактирует (например, не связывает или по существу не связывается) с одним или более (например, 2, 3, 4, 5, 6 или со всеми) аминокислотными остатками человеческого APRIL, выбранными из F176, V181, Q190, S226, I228, Y208 или N237. В одном варианте осуществления молекула антитела не контактирует (например, не связывается или по существу не связывается) с одним или более (например, 2, 3 или со всеми) аминокислотными остатками человеческого APRIL, выбранными из V181, S226, I228 или N237. В одном варианте осуществления молекула антитела не контактирует (например, не связывается или по существу не связывается) с одним или обоими из аминокислотных остатков человеческого APRIL, выбранных из Y208 или N237. В одном варианте осуществления молекула антитела не контактирует (например, не связывается или по существу не связывается) с одним или более (например, 2, 3 или со всеми) аминокислотными остатками человеческого APRIL, выбранными из F176, V181, Q190 или N237.

В одном варианте осуществления молекула антитела контактирует (например, связывается или по существу связывается с) одним или более (например, 2, 3, 4, 5 или со всеми) аминокислотными остатками человеческого APRIL, выбранными из V174, F176, Q190, R195, R206 или Y208; и не контактирует (например, не связывает или по существу не связывается) с одним или более (например, 2, 3 или со всеми) из аминокислотных остатков человеческого APRIL, выбранных из V181, S226, I228 или N237. В одном варианте осуществления молекула антитела контактирует (например, связывается или по существу связывается с) одним или обоими из аминокислотных остатков человеческого APRIL, выбранных из V174 или R206; и не контактирует (например, не связывается или по существу не связывается) с одним или обоими из аминокислотных остатков человеческого APRIL, выбранных из V181 или N237 (и, необязательно, S226). В одном варианте осуществления молекула антитела содержит одну или более (например, две или три) CDR тяжелых цепей, одну или более (например, две или три) CDR легкой цепи или и то, и другое моноклонального антитела 4035. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит область тяжелой цепи, вариабельную область легкой цепи или и то, и другое моноклонального антитела 4035. В одном варианте осуществления моноклональное антитело 4035 представляет собой молекулу гуманизированного антитела.

В одном варианте осуществления молекула антитела контактирует (например, связывается или по существу связывается с) одним или более (например, 2, 3 или со всеми) из аминокислотных остатков человеческого APRIL, выбранных из F176, V181, Q190 или I228; и не контактирует (например, не связывается или по существу не связывается) с одним или обоими из аминокислотных остатков человеческого APRIL, выбранных из Y208 или N237. В одном варианте осуществления молекула антитела контактирует (например, связывается или по существу связывается) с аминокислотным остатком I228 человеческого APRIL; и не контактирует (например, не связывается или по существу не связывается) с одним или обоими из аминокислотных остатков человеческого APRIL, выбранных из Y208 или N237. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит одну или более (например, две или три) CDR тяжелой цепи, одну или более (например, две или три) CDR легкой цепи или и то, и другое моноклонального антитела 2419. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит область тяжелой цепи, вариабельную область легкой цепи или и то, и другое моноклонального антитела 2419. В одном варианте осуществления моноклональное антитело 2419 представляет собой молекулу гуманизированного антитела.

В одном варианте осуществления молекула антитела контактирует (например, связывается или по существу связывается) с одним или более (например, 2 или со всеми) из аминокислотных остатков человеческого APRIL, выбранных из V174, R206 или Y208; и не контактирует (например, не связывает или по существу не связывается) с одним или более (например, с 2, 3 или со всеми) из аминокислотных остатков человеческого APRIL, выбранных из F176, V181, Q190 или N237. В одном варианте осуществления молекула антитела контактирует (например, связывается или по существу связывается) с одним или обоими из аминокислотных остатков человеческого APRIL, выбранных из V174 или R206; и не контактирует (например, не связывается или по существу не связывается) с одним или более (например, 2, 3 или со всеми) из аминокислотных остатков человеческого APRIL, выбранных из F176, V181, Q190 или N237. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит одну или более (например, две или три) CDR тяжелой цепи, одну или более (например, две или три) CDR легкой цепи или и то, и другое моноклонального антитела 3833. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит область тяжелой цепи, вариабельную область легкой цепи или и то, идругое моноклонального антитела 3833. В одном варианте осуществления моноклональное антитело 3833 представляет собой молекулу гуманизированного антитела.

В варианте осуществления эпитоп перекрывается с сайтом связывания рецептора CRD2. В одном варианте осуществления эпитоп представляет собой нелинейный эпитоп, например, который проходит вдоль границы мономера. В одном варианте осуществления эпитоп находится в области, ассоциированной с блокированием обоих рецепторов TACI и BCMA.

В одном варианте осуществления молекула антитела контактирует (например, связывается или по существу связывается) с одним или более (например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, или со всеми) из аминокислотных остатков человеческого APRIL, выбранных из V133, V181, E185, Q187, G188, R189, Q190, E191, T192, R195, H218, L219, H220, S226, I228, P230 (расположенных в мономере A). В одном варианте осуществления молекула антитела контактирует (например, связывается или по существу связывается) с одним или более (например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 или со всеми) из аминокислотных остатков человеческого APRIL выбранных из V121, I123, Q139, P140, A141, L142, N237, S239, P240 или H241 (расположенных в мономере B). В одном варианте осуществления молекула антитела контактирует (например, связывается или по существу связывается) с одним или более (например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25 или со всеми) из аминокислотных остатков человеческого APRIL, выбранных из V133, V181, E185, Q187, G188, R189, Q190, E191, T192, R195, H218, L219, H220, S226, I228, P230 (находится в мономере A); V121, I123, Q139, P140, A141, L142, N237, S239, P240 или H241 (расположенные в мономере B).

В одном варианте осуществления молекула антитела контактирует (например, связывается или по существу связывается) с одним или более (например, 2, 3 или со всеми) из аминокислотных остатков человеческого APRIL, выбранных из V181, Q190, T192 и I228 (расположенных в мономере А). В одном варианте осуществления молекула антитела контактирует (например, связывается или по существу связывается) с одним или обоими из аминокислотных остатков человеческого APRIL, выбранных из A141 или H241 (расположенных в мономере B). В одном варианте осуществления молекула антитела контактирует (например, связывается или по существу связывается) с одним или более (например, 2, 3, 4, 5 или со всеми) из аминокислотных остатков человеческого APRIL, выбранных из V181, Q190, T192, и I228 (располагается в мономере А); A141 или H241 (располагается в мономере B).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит одну или более (например, две или три) CDR тяжелой цепи, одну или более (например, две или три) CDR легкой цепи или и то, и другое моноклонального антитела 2419. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит область тяжелой цепи, вариабельную область легкой цепи или и то, и другое моноклонального антитела 2419. В одном варианте осуществления моноклональное антитело 2419 представляет собой молекулу гуманизированного антитела.

В одном варианте осуществления эпитоп содержит один или более (например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25 или все) из аминокислотных остатков человеческого APRIL, выбранных из V133, V181, E185, Q187, G188, R189, Q190, E191, T192, R195, H218, L219, H220, S226, I228, P230 (расположенных в мономере A); V121, I123, Q139, P140, A141, L142, N237, S239, P240 или H241 (расположенных в мономере B). В одном варианте осуществления эпитоп содержит один или более (например, 2, 3, 4, 5 или все) из аминокислотных остатков человеческого APRIL, выбранных из V181, Q190, T192 и I228 (расположенных в мономере A); A141 или H241 (расположенных в мономере B).

В одном варианте осуществления структурное изображение этого эпитопа представлено на ФИГ. 3. В одном варианте осуществления эпитоп содержит один или более (например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25 или все) из аминокислотных остатков, показанных в Таблице 8.

В одном варианте осуществления молекула антитела контактирует (например, связывает или по существу связывается) со всеми аминокислотными остатками, показанными в любой из Таблиц 3-4 или 7-8. В одном варианте осуществления эпитоп содержит или состоит из всех аминокислотных остатков, показанных в любой из Таблиц 3-4 или 7-8.

В одном варианте осуществления молекула антитела обладает одним или более из следующих свойств, описанных в настоящем документе, например одно или более (например, два, три или все): (i) связывается или по существу связывается с человеческим APRIL; (ii) связывается или по существу связывается с мышиным APRIL; (iii) ингибирует или по существу ингибирует связывание APRIL (например, человеческого APRIL, мышиного APRIL или обоих) с TACI (например, с человеческим TACI, мышиным TACI или с обоими); или (iv) ингибирует или по существу ингибирует связывание APRIL (например, человеческого APRIL, мышиного APRIL или обоих) с BCMA (например, человеческим BCMA, мышиным BCMA или с обоими). В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с мышиным APRIL. В другом варианте осуществления молекула антитела не связывается или связывается с низкой аффинностью с мышиным APRIL.

Молекулы антител

В настоящем описании раскрыты молекулы антител, которые связываются с APRIL, например, с молекулой APRIL, описанной в настоящем документе.

Используемый в настоящем описании термин «молекула антитела» относится к белку, например к цепи иммуноглобулина или его фрагменту, содержащему по меньшей мере одну последовательность вариабельного домена иммуноглобулина. Термин «молекула антитела» включает, например, полноразмерные, зрелые антитела и антигенсвязывающие фрагменты антитела. Например, молекула антитела может включать в себя последовательность вариабельного домена тяжелой (H) цепи (сокращенно здесь как VH) и последовательность вариабельного домена легкой (L) цепи (сокращенно здесь как VL). В другом примере молекула антитела содержит две последовательности вариабельного домена тяжелой (H) цепи и две последовательности вариабельного домена легкой цепи (L), образуя, таким образом, два сайта связывания антигена, такие как Fab, Fab ', F (ab') 2, Fc, Fd, Fd ', Fv, одноцепочечные антитела (например, scFv), антитела с одной вариабельной областью, диатела (Dab) (двухвалентные и биспецифичные) и химерные (например, гуманизированные) антитела, которые могут быть получены путем модификации цельных антител или синтезированных de novo с использованием технологий рекомбинантных ДНК. Эти функциональные фрагменты антител сохраняют способность избирательно связываться с их соответствующим антигеном или рецептором. Антитела и фрагменты антител могут быть из любого класса антител, включая, но не ограничиваясь ими, IgG, IgA, IgM, IgD и IgE и из любого подкласса (например, IgG1, IgG2, IgG3 и IgG4) антител. Молекулы антител могут быть моноклональными или поликлональными. Молекула антитела может также представлять собой человеческое, гуманизированное, CDR-трансплантированное или in vitro полученное антитело. Молекула антитела может иметь константную область тяжелой цепи, выбранную, например, из IgG1, IgG2, IgG3 или IgG4. Молекула антитела также может иметь легкую цепь, выбранную, например, из каппа или лямбда. Термин «иммуноглобулин» (Ig) используется в настоящем описании взаимозаменяемо с термином «антитело».

Примеры антигенсвязывающих фрагментов включают: (i) Fab-фрагмент, одновалентный фрагмент, состоящий из доменов VL, VH, CL и CH1; (ii) F(ab')2-фрагмент, двухвалентный фрагмент, содержащий два Fab-фрагмента, соединенных дисульфидным мостиком в шарнирной области; (iii) Fd-фрагмент, состоящий из доменов VH и CH1; (iv) Fv-фрагмент, состоящий из доменов VL и VH одного плеча антитела, (v) фрагмент диатела (dAb), который состоит из домена VH; (vi) верблюжий или камелизированный вариабельный домен; (vii) одноцепочечный Fv (scFv), см., например, Bird et al. (1988) Science 242: 423-426; и Huston et al. (1988) Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 85: 5879-5883); (viii) однодоменное антитело. Эти фрагменты антител могут быть получены с использованием любого подходящего способа, включая несколько обычных методов, известных специалистам в данной области, и фрагменты могут быть скринированы на предмет полезности таким же образом, как и интактные антитела.

Термин «антитело» включает интактные молекулы, а также их функциональные фрагменты. Константные области антител могут быть изменены, например, подвергнуты мутации для модификации свойства антитела (например, для увеличения или уменьшения одного или более из: связывания Fc-рецептора, гликозилирования антител, количества остатков цистеина, функции эффекторных клеток или функции комплемента).

Молекула антитела может представлять собой одноцепочечное антитело. Одноцепочечное антитело (scFv) может быть сконструированным (см., например, Colcher, D. et al. (1999) Ann NY Acad Sci 880: 263-80; и Reiter, Y. (1996) Clin Cancer Res 2:245-52). Одноцепочечное антитело можно димеризовать или мультимеризовать для получения поливалентных антител, обладающих специфичностью для разных эпитопов одного и того же белка-мишени.

Молекулы антител, раскрытые в настоящем описании, также могут представлять собой однодоменные антитела. Однодоменные антитела могут включать антитела, чьи области, определяющие комплементарность, являются частью однодоменного полипептида. Примеры включают, но не ограничиваются ими, антитела, содержащие тяжелую цепь, антитела, по своей природе лишенные легких цепей, однодоменные антитела, полученные из обычных 4-цепочечных антител, сконструированные антитела и однодоменные каркасы, отличных от тех, которые получены из антител. Однодоменные антитела могут представлять собой любые из известных в данной области или любыми будущими однодоменными антителами. Однодоменные антитела могут быть получены из любых видов, включая, но не ограничиваясь ими, мышь, человека, верблюда, ламу, рыбу, акулу, козу, кролика и быка. Согласно некоторым аспектам однодоменное антитело представляет собой природное однодоменное антитело, известное как антитело тяжелой цепи, лишенное легких цепей. Такие однодоменные антитела раскрыты, например, в WO 94/04678. Для ясности этот вариабельный домен, полученный из антитела с тяжелой цепью, по своей природе лишенного легкой цепи, известен в настоящем описании как VHH или нанотело, чтобы отличать его от обычного домена VH четырехцепочечных иммуноглобулинов. Такая молекула VHH может быть получена из антител с происхождением из видов верблюдовых, например, из верблюдов, лам, дромадаров, альпаков и гуанако. Другие виды, кроме верблюдовых, могут продуцировать антитела тяжелой цепи, лишенные по своей природе легкой цепи; такие VHH также предусмотрены.

Области VH и VL можно подразделить на области гипервариабельности, называемые «областями, определяющими комплементарность» (CDR), которые чередуются с более консервативными областями, называемыми «каркасными областями» (FR или FW). Термины «область, определяющая комплементарность» и «CDR», используемые в настоящем описании, относятся к последовательностям аминокислот в вариабельных областях антитела, которые придают антигенную специфичность и аффинность связывания. Используемые в настоящем описании термины «каркас», «FW» и «FR» используются взаимозаменяемо.

Протяженность каркасного региона и CDR точно определяется рядом методов (см., Kabat, E. A., et al. (1991) Sequences of Proteins of Immunological Interest, Fifth Edition, U.S. Department of Health and Human Services, NIH Publication No. 91-3242; Chothia, C. et al. (1987) J. Mol. Biol. 196: 901-917; и определением AbM, используемым программным обеспечением для моделирования антител AbM от Oxford Molecular. См., в общем, например, Protein Sequence and Structure Analysis of Antibody Variable Domains. In: Antibody Engineering Lab Manual (Ed.: Duebel, S. and Kontermann, R., Springer-Verlag, Heidelberg). В одном варианте осуществления используются следующие определения: определение AbM CDR1 вариабельного домена тяжелой цепи и определения Kabat для других CDR. В одном варианте осуществления определения Kabat используются для всех CDR. Кроме того, варианты осуществления, описанные в отношении CDR Kabat или AbM, также могут быть реализованы с использованием гиепрвариабельных петель Chothia. Каждая VH и VL обычно включает три CDR и четыре FR, расположенных от N-конца до C-конца в следующем порядке: FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3 и FR4.

Используемый в настоящем описании термин «последовательность вариабельного домена иммуноглобулина» относится к аминокислотной последовательности, которая может образовывать структуру вариабельного домена иммуноглобулина. Например, последовательность может включать в себя всю или часть аминокислотной последовательности природного вариабельного домена. Например, последовательность может включать или не включать одну, две или более N- или С-концевых аминокислот или может включать другие изменения, которые совместимы с образованием белковой структуры.

Термин «антигенсвязывающая область» относится к части молекулы антитела, которая содержит детерминанты, которые образуют поверхность связывания, которая связывается с антигеном, например с APRIL, или его эпитопом. Что касается белков (или белковых миметиков), то антигенсвязывающая область обычно включает одну или более петель (по меньшей мере, например, четыре аминокислоты или аминокислотных миметика), которые образуют поверхность связывания, которая связывается с антигеном, например APRIL. Как правило, антигенсвязывающая область молекулы антитела включает по меньшей мере одну или две CDR и/или гипервариабельных петель или, более типично, по меньшей мере три, четыре, пять или шесть CDR и/или гипервариабельных петель.

Термины «конкурировать» или «перекрестно конкурировать» используются в настоящем описании взаимозаменяемо для обозначения способности молекулы антитела препятствовать связыванию молекулы антитела против APRIL, например молекулы антитела против APRIL, представленной в настоящем описании, с мишенью, например, APRIL. Препятствие связыванию может быть прямым или косвенным (например, посредством аллостерической модуляции молекулы антитела или мишени). Степень, в которой молекула антитела может препятствовать связыванию другой молекулы антитела с мишенью и, следовательно, где можно сказать, что она конкурирует, может быть определена с использованием анализа конкурентного связывания, например, анализа FACS, ИФА или BIACORE. В одном варианте осуществления анализ конкурентного связывания представляет собой количественный конкурентный анализ. В одном варианте осуществления считается, что первая молекула антитела против APRIL конкурирует за связывание с мишенью со второй молекулой антитела против APRIL, когда связывание первой молекулы антитела с мишенью снижается на 10% или более, например, 20% или более, 30% или более, 40% или более, 50% или более, 55% или более, 60% или более, 65% или более, 70% или более, 75% или более, 80% и более, 85% или более, 90% или более, 95% или более, 98% или более, 99% или более в анализе конкурентного связывания (например, в конкурентном анализе, описанном в настоящем описании).

Термины «моноклональное антитело» или «композиция моноклонального антитела», используемые в настоящем описании, относятся к препарату молекул антител одного молекулярного состава. Композиция моноклональных антител демонстрирует специфичность связывания и аффинность к конкретному эпитопу. Моноклональное антитело может быть получено гибридомной технологией или методами, которые не используют гибридомную технологию (например, рекомбинантные методы).

«Эффективно человеческий» белок представляет собой белок, который не вызывает ответ нейтрализующего антитела, например ответ человеческого антитела против мышиного белка (HAMA). HAMA может быть проблематичным в ряде случаев, например, если молекулу антитела вводить повторно, например, при лечении хронического или рецидивирующего заболевания. Ответ HAMA может сделать повторное введение антитела потенциально неэффективным из-за повышенного клиренса антител из сыворотки (см., например, Saleh et al., Cancer Immunol.Immunother., 32: 180-190 (1990)), а также из-за потенциальных аллергических реакций (см., например, LoBuglio et al., Hybridoma, 5: 5117-5123 (1986)).

Молекула антитела может быть поликлональным или моноклональным антителом. В некоторых вариантах осуществления антитело может быть получено рекомбинантно, например, с помощью любого подходящего фагового дисплея или комбинаторных методов.

Различные виды фагового дисплея и комбинаторные методы для получения антител известны в данной области (как описано, например, в Ladner et al. Патент США № 5223409; Kang et al. Международная публикация № WO 92/18619; Dower et al. Международная публикация № WO 91/17271; Winter et al. Международная публикация WO 92/20791; Markland et al. Международная публикация № WO 92/15679; Breitling et al. Международная публикация WO 93/01288; McCafferty et al. Международная публикация № WO 92/01047; Garrard et al. Международная публикация № WO 92/09690; Ladner et al. Международная публикация № WO 90/02809; Fuchs et al. (1991) Bio/Technology 9: 1370-1372; Hay et al. (1992) Hum Antibod Hybridomas 3: 81-85; Huse et al. (1989) Science 246: 1275-1281; Griffths et al. (1993) EMBO J 12: 725-734; Hawkins et al. (1992) J Mol Biol 226: 889-896; Clackson et al. (1991) Nature 352: 624-628; Gram et al. (1992) PNAS 89: 3576-3580; Garrad et al. (1991) Bio/Technology 9: 1373-1377; Hoogenboom et al. (1991) Nuc Acid Res 19: 4133-4137; и Barbas et al. (1991) PNAS 88: 7978-7982, содержание которых включено в настоящее описание посредством ссылки).

В одном варианте осуществления молекула антитела является полностью человеческим антителом (например, антителом, полученным в мыши, которая была генетически сконструирована для получения антитела из последовательности человеческого иммуноглобулина), или антителом, отличным от человека, например антителом грызуна (мышь или крыса), козы, примата (например, обезьяны), верблюда. В одном варианте осуществления антитело, отличное от человека, является антителом грызуна (мышиным или крысиным антителом). Способы получения антител грызунов известны в данной области.

Человеческие моноклональные антитела могут быть получены с использованием трансгенных мышей, несущих гены человеческого иммуноглобулина, а не мышиную систему генов. Спленоциты от этих трансгенных мышей, иммунизированных представляющим интерес антигеном, используют для получения гибридом, которые секретируют человеческие mAb со специфичной аффинностью для эпитопов из человеческого белка (см., например, Wood et al. Международная заявка WO 91/00906, Kucherlapati et al. Публикация РСТ WO 91/10741; Lonberg et al. Международная заявка WO 92/03918; Kay et al. Международная заявка 92/03917; Lonberg, N. et al. 1994 Nature 368:856-859; Green, L.L. et al. 1994 Genet Genet. 7: 13-21; Morrison, SL et al. 1994 Proc. Natl. Acad. Sci. USA 81: 6851-6855; Bruggeman et al. 1993 Year Immunol 7:33-40; Tuaillon et al. 1993 PNAS 90: 3720-3724; Bruggeman et al. 1991 Eur J Immunol 21: 1323-1326).

Антитело может представлять собой антитело, в котором вариабельная область или ее часть, например CDR, генерируются в организме, отличном от человеческого, например в крысе или мыши. Химерные, CDR-трансплантированные и гуманизированные антитела находятся в рамках изобретения. Антитела, вырабатываемые в организме, отличном от человеческого, например крысы или мыши, а затем модифицированные, например, в вариабельной каркасной или в константной области, для снижения антигенности у человека, находятся в рамках изобретения.

Химерные антитела могут быть получены с помощью любой подходящей методики рекомбинантной ДНК. Некоторые из них известны в данной области (см. Robinson et al., Публикация Международной патентной заявки № WO1987/002671, Akira и др., Публикация Европейской патентной заявки № 184187, Taniguchi, M., публикация Европейской патентной заявки № 171496; Morrison et al., Публикация Европейской патентной заявки № 173494, Neuberger и др., Публикация Международной патентной заявки № WO 86/01533, Cabilly et al. Патент США № 4816567; Cabilly et al., Публикация Европейской патентной заявки № 125 023; Better et al. (1988 Science 240: 1041-1043); Liu et al. (1987) PNAS 84: 3439-3443; Liu et al., 1987, J. Immunol. 139: 3521-3526; Sun et al. (1987) PNAS 84: 214-218; Nishimura et al., 1987, Canc. Res. 47:999-1005; Wood et al. (1985) Nature 314: 446-449; и Shaw et al., 1988, J. Natl Cancer Inst. 80: 1553-1559).

Гуманизированное или CDR-трансплантированное антитело будет иметь по меньшей мере одну или две, но, как правило, все три реципиентных CDR (из тяжелых и легких цепей иммуноглобулина), замененных донорными CDR. Антитело может быть заменено, по меньшей мере, частью CDR, отличной от человеческой, или только некоторые из CDR могут быть заменены CDR, отличными от человеческих. Необходимо только заменить ряд CDR, необходимых для связывания гуманизированного антитела с липополисахаридом. В одном варианте осуществления донор будет представлять собой антитело грызунов, например антитело крысы или мыши, а реципиентом будет каркасная область человека или консенсус каркасной области человека. Как правило, иммуноглобулин, предоставляющий CDR, называется «донором», а иммуноглобулин, предоставляющий структуру, называется «акцептором». В некоторых вариантах осуществления донорный иммуноглобулин имеет происхождение, отличное от человеческого (например, из грызуна). Акцепторная каркасная область, как правило, представляет собой природную (например, человеческую) каркасную область или консенсусную каркасную область или последовательность, которая примерно на 85% или более, например, на 90%, 95%, 99% или выше, идентична им.

Используемый в настоящем описании термин «консенсусная последовательность» относится к последовательности, образованной из наиболее часто встречающихся аминокислот (или нуклеотидов) в семействе родственных последовательностей (см., например, Winnaker, From Genes to Clones (Verlagsgesellschaft, Weinheim, Germany 1987), В семействе белков каждое положение в консенсусной последовательности занято наиболее часто встречающейся аминокислотой в этом положении в семействе. Если две аминокислоты встречаются одинаково часто, то они могут быть включены в консенсусную последовательность. «Консенсусная каркасная последовательность» относится к каркасной области в консенсусной последовательности иммуноглобулина.

Антитело может быть гуманизировано любым подходящим способом и несколько таких способов известны в данной области (см., например, Morrison, SL, 1985, Science 229: 1202-1207, Oi et al., 1986, BioTechniques 4: 214 и Queen et al. US 5585089, US 5693761 и US 5693762, содержание которых включено в настоящее описание в качестве ссылки в полном объеме).

Гуманизированные или CDR-трансплантированные антитела могут быть получены путем CDR-трансплантации или замещения CDR, где одна, две или все CDR цепи иммуноглобулина могут быть заменены. См., например, патент США 5225539; Jones et al. 1986 Nature 321:552-525; Verhoeyan et al. 1988 Science 239: 1534; Beidler et al. 1988 J. Immunol. 141: 4053-4060; Winter US 5225539, содержание которых включено в настоящее описание в качестве ссылки в полном объеме. Winter описывает метод CDR-трансплантации, который может быть использован для получения гуманизированных антител (патентная заявка Великобритании GB 2188638A, поданная 26 марта 1987 г., Winter US 5225539), содержание которой явно включено в качестве ссылки.

Также представлены гуманизированные антитела, в которых определенные аминокислоты были заменены, удалены или добавлены. Критерии отбора аминокислот из донора описаны, например, в US 5585089, например, в колонках 12-16 из US 5585089, содержание которых включено в настоящее описание посредством ссылки. Другие методы гуманизации антител описаны в Padlan et al. EP 519596 A1, опубликованном 23 декабря 1992 года.

В одном варианте осуществления молекула антитела имеет константную область тяжелой цепи, выбранную, например, из константных областей тяжелой цепи IgG1, IgG2 (например, IgG2a), IgG3, IgG4, IgM, IgA1, IgA2, IgD и IgE; в частности, выбранных например из константных областей тяжелой цепи IgG1, IgG2, IgG3 и IgG4 (например, человека). В другом варианте осуществления молекула антитела имеет константную область легкой цепи, выбранную, например, из константных областей легкой цепи каппа или лямбда (например, человека). Константная область может быть изменена, например, подвергнута мутации, чтобы модифицировать свойства молекулы антитела (например, для увеличения или уменьшения одного или более из: связывания Fc-рецептора, гликозилирования антитела, количества цистеиновых остатков, функции эффекторных клеток и/или функция комплемента). В одном варианте осуществления молекула антитела имеет эффекторную функцию и может фиксировать комплемент. В другом варианте осуществления молекула антитела не рекрутирует эффекторные клетки или не фиксирует комплемент. В некоторых вариантах осуществления молекула антитела обладает уменьшенной способностью связываться с Fc-рецептором или не обладает этой способностью. Например, это может быть изотип или подтип, фрагмент или другой мутант, который не поддерживает связывание с Fc-рецептором, например, он имеет мутагенную или делетированную область связывания рецептора Fc.

В одном варианте осуществления константная область молекулы антитела изменена. Способы изменения константной области антитела известны в данной области. Молекулы антител с измененной функцией, например с измененной аффинностью к эффекторному лиганду, такому как FcR на клетке, или к C1-компоненту комплемента, могут быть получены путем замены по меньшей мере одного аминокислотного остатка в константной части антитела на другой остаток (см., например, ЕР 388151 А1, Патент США № 5624821 и Патент США 5648260, содержание каждого из которых включено в настоящее описание в качестве ссылки).Также предполагаются мутации аминокислот, которые стабилизируют структуру антитела, такие как S228P (номенклатура EU, S241P в номенклатуре Kabat) в человеческом IgG4. Могут быть описаны изменения аналогичного типа, которые при применении к мышиному или другому виду иммуноглобулина уменьшали бы или устраняли бы эти функции.

В одном варианте осуществления единственными аминокислотами в молекуле антитела являются канонические аминокислоты. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит природные аминокислоты; аналоги, производные и их конгенеры; аминокислотные аналоги с вариантами боковых цепей; и/или все стереоизомеры любого из вышеперечисленных. Молекула антитела может включать D- или L-оптические изомеры аминокислот и пептидомиметиков.

Полипептид молекулы антитела, описанный в настоящем документе, может быть линейным или разветвленным, он может содержать модифицированные аминокислоты и может прерываться неаминокислотными компонентами. Молекула антитела также может быть модифицирована; например, путем образования дисульфидных связей, гликозилирования, липидации, ацетилирования, фосфорилирования или любых других манипуляций, таких как конъюгация с меченым компонентом. Полипептид может быть выделен из природных источников, может быть получен рекомбинантными методами из эукариотического или прокариотического хозяина или может быть продуктом синтетических процедур.

Молекула антитела, описанная в настоящем документе, может использоваться отдельно в неконъюгированной форме или может быть связана с веществом, например анатоксином или фрагментом (например, терапевтическим лекарственным средством; соединением, излучающим радиацию; молекулами растительного, грибкового или бактериального происхождения; или с биологическим белком (например, белковым анатоксином) или с частицей (например, рекомбинантной вирусной частицей, например, через белок вирусной оболочки). Например, антитело против APRIL может быть соединено с радиоактивным изотопом, таким как α-, β- или γ-излучающее соединение, или β- и γ-излучающее соединение.

Молекула антитела может быть подвергнута модификации или связана с другой функциональной молекулой (например, другим пептидом или белком). Используемый в настоящем описании термин «подвергнутая модификации» молекула антитела является модифицированной. Способы модификации включают, но не ограничиваются ими, добавление флуоресцентной части, радиоактивно-меченного нуклеотида, токсина, фермента или аффинного лиганда, такого как биотин. Соответственно, молекулы антитела предназначены для включения подвергнутых модификации и других модифицированных форм описанных в настоящем документе антител, включая молекулы иммуноадгезии. Например, молекула антитела может быть функционально связана (посредством химической связи, генетического слияния, нековалентной ассоциации или иначе) с одним или более другими молекулярными объектами, такими как другое антитело (например, биспецифичное антитело или диатело), детектируемый агент, токсин, фармацевтический агент и/или белок или пептид, который может опосредовать ассоциацию антитела или части антитела с другой молекулой (такой как коровая область стрептавидина или полигистидиновая метка).

Некоторые типы подвергнутой модификации молекулы антитела получают путем сшивания двух или более антител (одного и того же типа или разных типов, например, для создания биспецифичных антител). Подходящие сшивающие агенты включают те, которые являются гетеробифункциональными, с двумя отдельными реактивными группами, разделенными подходящим спейсером (например, m-малеимидобензоил-N-гидроксисукцинимидным эфиром), или которые являются гомобифункциональными (например, дисукцинимидил суберат). Такие линкеры доступны от Pierce Chemical Company, Rockford, Ill.

Полезные детектируемые агенты, с помощью которых молекула антитела против денге может быть подвергнута модификации (или помечена), чтобы включать флуоресцентные соединения, различные ферменты, простетические группы, люминесцентные вещества, биолюминесцентные вещества, флуоресцентно излучающие атомы металлов, например европий (Eu) и другие антаниды, и радиоактивные вещества (описанные ниже). Примеры флуоресцентных детектируемых агентов включают флуоресцеин, изотиоцианат флуоресцеина, родамин, 5-диметиламин-1-нафталинсульфонилхлорид, фикоэритрин и тому подобное. Антитело также может быть подвергнуто модификации с помощью детектируемых ферментов, таких как щелочная фосфатаза, пероксидаза хрена, β-галактозидаза, ацетилхолинэстераза, глюкозооксидаза и тому подобное. Когда антитело подвергают модификации детектируемым ферментом, то его детектируют добавлением дополнительных реагентов, которые фермент использует для получения детектируемого продукта реакции. Например, когда присутствует детектируемый агент пероксидаза хрена, то добавление перекиси водорода и диаминобензидина приводит к получению окрашенного продукта реакции, который можно детектировать. Молекула антитела также может быть подвергнута модификации с помощью простетической группы (например, стрептавидин/биотин и авидин/биотин). Например, антитело может быть подвергнуто модификации с помощью биотина и детектировано путем косвенного измерения связывания авидина или стрептавидина. Примеры подходящих флуоресцентных материалов включают умбеллиферон, флуоресцеин, изотиоцианат флуоресцеина, родамин, дихлортриазиниламин флуоресцеин, дансилхлорид или фикоэритрин; пример люминесцентного материала включает люминол; и примеры биолюминесцентных материалов включают люциферазу, люциферин и аэкорин.

Помеченные молекулы антитела могут быть использованы, например, для диагностики и/или экспериментально в ряде контекстов, включая (i) выделение заранее определенного антигена стандартными методами, такими как аффинная хроматография или иммунопреципитация; (ii) детектирование заранее определенного антигена (например, в клеточном лизате или клеточном супернатанте) для оценки представленности и профиля экспрессии белка; (iii) контроля уровня белка в ткани в рамках процедуры клинических испытаний, например, для определения эффективности данной схемы лечения.

Молекула антитела может быть конъюгирована с другим молекулярным объектом, как правило, с меткой или терапевтическим (например, антимикробным (например, антибактериальным или бактерицидным), иммуномодулирующим, иммуностимулирующим, цитотоксическим или цитостатическим) агентом или компонентом. Радиоактивные изотопы могут использоваться в диагностических или терапевтических применениях. Радиоактивные изотопы, которые могут быть связаны с молекулами антител, включают, но не ограничиваются ими, α-, β- или γ-излучающие соединения, или β- и γ-излучающие соединения. Такие радиоактивные изотопы включают, но не ограничиваются ими, йод (¹³¹I или ¹²⁵I), иттрий (⁹⁰Y), лютеций (¹⁷⁷Lu), актиний (²²⁵Ac), празеодим, астатин (²¹¹At), рений (¹⁸⁶Re), висмут (²¹²Bi или ²¹³Bi), индий (¹¹¹In), технеций (⁹⁹mTc), фосфор (³²P), родий (¹⁸⁸Rh), серу (³⁵S), углерод (¹⁴C), тритий (³H), хром (⁵¹Cr), хлор (³⁶Cl), кобальт (⁵⁷Co или ⁵⁸Co), железо (⁵⁹Fe), селен (⁷⁵Se) или галлий (⁶⁷Ga). Радиоизотопы, используемые в качестве терапевтических агентов, включают иттрий (⁹⁰Y), лютеций (¹⁷⁷Lu), актиний (²²⁵Ac), празеодим, астатин (²¹¹At), рений (¹⁸⁶Re), висмут (²¹²Bi или ²¹³Bi) и родий (¹⁸⁸Rh). Радиоизотопы, используемые в качестве меток, например, для использования в диагностике, включают йод (¹³¹I или ¹²⁵I), индий (¹¹¹In), технеций (⁹⁹mTc), фосфор (³²P), углерод (¹⁴C) и тритий (³H) или один или более перечисленных выше терапевтических изотопов.

В настоящем раскрытии предложены молекулы радиоактивно меченных антител и способы их мечения. В одном варианте осуществления раскрыт способ мечения молекулы антитела. Способ включает контакт молекулы антитела с хелатирующим агентом с получением, таким образом, конъюгированного антитела. Конъюгированное антитело является радиоактивно меченым радиоизотопом, например ¹¹¹индием, ⁹⁰иттрием и ¹⁷⁷лютецием, с получением таким образом меченой молекулы антитела.

В некоторых аспектах в настоящем раскрытии предложен способ получения молекулы антитела, раскрытой в настоящем описании. Способ включает: предоставление антигена, например APRIL или его фрагмента; получение молекулы антитела, которая специфично связывается с антигеном; оценку эффективности молекулы антитела в модулирующей активности антигена и/или организма, экспрессирующего антиген, например APRIL. Способ может дополнительно включать введение молекулы антитела, включая его производное (например, гуманизированную молекулу антитела) пациенту, например человеку.

В настоящем раскрытии предложена выделенная молекула нуклеиновой кислоты, кодирующая вышеуказанную молекулу антитела, векторы и их клетки-хозяева. Молекула нуклеиновой кислоты включает, но не ограничивается ими, РНК, геномную ДНК и кДНК.

Аминокислотные и нуклеотидные последовательности иллюстративных молекул антител описаны в Таблицах 1 и 2, соответственно. Аминокислотные последовательности дополнительных иллюстративных гуманизированных молекул антител описаны в Таблице 5.

Таблица 1. Аминокислотные последовательности вариабельной области тяжелой цепи (VH) и вариабельной области легкой цепи (VL) иллюстративных антител против APRIL представлены далее. CDR, определенные в соответствии с системой Kabat, подчеркнуты и выделены жирным шрифтом, а CDR, определенные в соответствии с системой Chothia, выделены курсивом.

Таблица 2. Нуклеотидные последовательности вариабельных областей тяжелой цепи (VH) и вариабельных областей легкой цепи (VL) иллюстративных молекул антител

Антитело Цепь Нуклеотидная последовательность SEQ ID NO 2218 VH GATGTACAGCTTCAGGAGTCAGGACCTGGCCTCGTGAAACCTTCTCAGTCTCTGTCTCTCACCTGCTCTGTCACTGGCTACTCCATCACCAGTGGTTATTACTGGAACTGGATCCGGCAGTTTCCAGGAAACAAACTGGAATGGATGGGCTACATAAGCTACGATGGTTACAATAACTACAACCCATCTCTCAAAAATCGAATCTCCATCACTCGTGACACATCTAAGAACCAGTTTTTCCTGAAGTTGAATTCTGTGACTACTGAGGACACAGCCACATATTACTGTGCAAACTACTATGATTACGAAGACTGGTACTTCGGTGTCTGGGGCACAGGGACCACGGTCACCGTCTCCTCA 71 VL GACATTGTGCTGACCCAATCTCCAGCTTCTTTGGCTATGTCTCTAGGGAAGAGGGCCACCATCTCCTGCAGAGCCAGCGAAAGTGTCAGTATTATTGGTACTAATTCAATACACTGGTACCAACAGAAACCAGGACAGCCACCCAAACTCCTCATCTATCATGCATCCAACCTAGAAACTGGAGTCCCTGCCAGGTTCAGTGGCAGTGGGTCTAGAACAGACTTCACCCTCACCATTGATCCTGTGGAGGAAGATGATGTTGCAATCTATTACTGTCTGCAAAGTAGGAAGATTCCGTACACGTTCGGAGGGGGGACCAAGCTGGAAATAAAA 72 2419 VH CAGGTCCAGCTGCAGCAGTCTGGAGCTGAGCTGGTGAAACCCGGGGCATCAGTGAGGCTGTCCTGCGAGGCTTCTGGCTACACCTTCACGGACTATACTATACACTGGGTAAAGCAGAGGTCTGGACAGGGTCTTGAGTGGATTGGATGGATTTACCCTCTAAGAGGTAGTATAAACTACAATGAGAAATTCAAGGACAAGGCCACATTGACTGCGGACAAATCCTCCAGCACAGTCTATTTGGAGCTTGGTAGATTGACATCTAAGGACTCTGCGGTCTATTTCTGTGCAAGACACGGAGCCTACTATAGTAACGCCTTTGACTACTGGGGCCAAGGCACCACTCTCACAGTCTCCTCA 73 VL AACATTGTAATGACCCAATCTCCAGCTTCATTGGCTGTGTCTCTAGGTCAGAGGGCCACCATCTCCTGCAGAGCCAGCGAGAGTGTTGATAATGATGGCATTAGATTTATGCACTGGTACCAGCAGAAACCAGGACAGCCACCCAAACTCCTCATCTATCGTGCATCCAACCTAGAATCTGGGATCCCTGCCAGGTTCAGTGGCAGTGGGTCTAGGACAGACTTCACCCTCACTATTAATCCTGTGGAGACTGATGATGTTGCAACCTATTACTGTCAGCAAAGTAATAAGGATCCGTACACGTTCGGAGGGGGGACCAAGCTGGAGCTGAAA 74 2419-1305 VH CAAGTTCAGTTGGTGCAAAGCGGGGCAGAAGTGAAGAAACCTGGTGCTTCTGTGAAAGTTTCCTGCAAGGCCAGCGGCTACACCTTTACTGATTACACAATACACTGGGTACGGCAGGCAACTGGGCAAGGATTGGAATGGATGGGGTGGATATACCCATTGCGAGGGTCTATAAACTACGCACAGAAATTTCAAGGTCGAGTAACAATGACAGCCAACAAATCAATAAGCACCGTTTATATGGAACTCTCATCTCTCAGGAGTGAGGATACCGCCGTGTATTTCTGCGCACGACACGGTGCATATTACTCAAACGCTTTCGACTATTGGGGCCAGGGCACCCTTGTGACTGTTAGTAGC 304 VL GAGATAGTAATGACTCAGTCTCCCGCTACACTTAGTGTAAGCCCAGGGGAGCGAGCAACCCTCAGTTGCAGAGCATCTGAGAGTGTTGATAATGATGGAATACGTTTTCTCCATTGGTATCAACAAAAACCAGGGCAGGCCCCCAGATTGCTGATCTACCGTGCTTCCAATCGCGAGACTGGCATTCCTGCACGTTTCAGCGGCAGCGGCTCCGGAACCGAGTTTACACTTACTATTAGCTCACTCCAGTCTGAAGACTTCGCTGTGTATTACTGTCAGCAATCCAACAAGGACCCATACACTTTCGGAGGCGGCACTAAGGTTGAGATCAAA 305 2419-1306 VH CAAGTTCAGTTGGTGCAAAGCGGGGCAGAAGTGAAGAAACCTGGTGCTTCTGTGAAAGTTTCCTGCAAGGCCAGCGGCTACACCTTTACTGATTACACAATACACTGGGTACGGCAGGCAACTGGGCAAGGATTGGAATGGATGGGGTGGATATACCCATTGCGAGGGTCTATAAACTACGCACAGAAATTTCAAGGTCGAGTAACAATGACAGCCAACAAATCAATAAGCACCGTTTATATGGAACTCTCATCTCTCAGGAGTGAGGATACCGCCGTGTATTTCTGCGCACGACACGGTGCATATTACTCAAACGCTTTCGACTATTGGGGCCAGGGCACCCTTGTGACTGTTAGTAGC 304 VL GAGATAGTTATGACTCAGTCTCCCGCCACACTTTCAGTAAGTCCCGGTGAACGCGCCACCCTGTCCTGCCGTGCTTCCGAATCAGTGGATAATGACGGCATTAGGTTTTTGCACTGGTACCAACAAAAGCCCGGACAGGCCCCCCGCCTGCTGATATATCGTGCATCAACACGAGCAACAGGGATCCCCGCTCGATTTAGTGGATCCGGAAGCAGGACCGAATTTACACTTACCATTTCCTCACTTCAGTCAGAAGATTTCGCCGTTTACTACTGTCAGCAGTCAAATAAGGATCCTTACACATTTGGGGGCGGTACAAAAGTCGAGATCAAA 306 2419-1310 VH CAAGTTCAGTTGGTGCAAAGCGGGGCAGAAGTGAAGAAACCTGGTGCTTCTGTGAAAGTTTCCTGCAAGGCCAGCGGCTACACCTTTACTGATTACACAATACACTGGGTACGGCAGGCAACTGGGCAAGGATTGGAATGGATGGGGTGGATATACCCATTGCGAGGGTCTATAAACTACGCACAGAAATTTCAAGGTCGAGTAACAATGACAGCCAACAAATCAATAAGCACCGTTTATATGGAACTCTCATCTCTCAGGAGTGAGGATACCGCCGTGTATTTCTGCGCACGACACGGTGCATATTACTCAAACGCTTTCGACTATTGGGGCCAGGGCACCCTTGTGACTGTTAGTAGC 304 VL GACATTGTAATGACCCAGTCTCCCGATAGCCTCGCTGTCTCACTCGGAGAACGCGCAACCATCAACTGCAAGTCCTCCCAAAGCGTTGACAATGACGGCATTAGGTTTTTGCACTGGTACCAGCAGAAACCCGGTCAACCTCCTAAGTTGCTCATTTACCGAGCATCTACCCGCGAGTCAGGAGTACCTGATCGCTTTTCCGGTAGCGGTAGTGGAACAGATTTTACTCTGACCATTAGTTCACTCCAGGCAGAAGATGTGGCTGTCTACTACTGCCAACAGTCAAATAAAGACCCTTATACCTTCGGTGGGGGTACCAAAGTAGAGATCAAA 318 2419-0806 VH GAGGTCCAGTTGGTCCAGTCAGGAGCCGAAGTCAAGAAGCCTGGGGAAAGCCTGAAAATAAGTTGCAAAGCTAGTGGATATACATTTACAGATTATACCATTCATTGGGTCCGGCAAATGCCAGGAAAAGGCTTGGAGTGGATGGGGTGGATTTATCCCCTCCGAGGCTCAATAAATTATAGTCCTAGTTTTCAGGGGCAGGTAACTATTAGCGCTGATAAAAGTATTTCTACAGTTTATTTGCAGTGGAGTTCATTGAAGGCTAGTGACACCGCTATGTATTTCTGCGCTAGACATGGTGCATATTATTCAAATGCCTTCGACTATTGGGGCCAGGGCACCCTCGTCACTGTGAGTTCC 307 VL GAGATAGTTATGACTCAGTCTCCCGCCACACTTTCAGTAAGTCCCGGTGAACGCGCCACCCTGTCCTGCCGTGCTTCCGAATCAGTGGATAATGACGGCATTAGGTTTTTGCACTGGTACCAACAAAAGCCCGGACAGGCCCCCCGCCTGCTGATATATCGTGCATCAACACGAGCAACAGGGATCCCCGCTCGATTTAGTGGATCCGGAAGCAGGACCGAATTTACACTTACCATTTCCTCACTTCAGTCAGAAGATTTCGCCGTTTACTACTGTCAGCAGTCAAATAAGGATCCTTACACATTTGGGGGCGGTACAAAAGTCGAGATCAAA 306 2419-0205 VH CAGGTGCAACTTGTTCAGTCAGGGGCTGAAGTAAAGAAGCCAGGCTCATCAGTCAAGGTATCATGCAAAGCATCTGGCTATACATTTACAGATTACACCATTCACTGGGTGAGGCAAGCTCCCGGTCAAGGTCTCGAGTGGATGGGGTGGATATACCCTCTCAGAGGCTCTATAAATTACGCTCAGAAATTTCAAGGGAGAGTTACAATTACTGCTGATAAAAGTACCAGCACTGCTTATATGGAGCTTTCCTCACTTCGTTCAGAGGACACCGCCGTTTACTTTTGTGCCCGGCATGGTGCCTATTATTCAAATGCCTTCGATTATTGGGGGCAGGGAACTTTGGTCACAGTTTCATCT 308 VL GAGATAGTAATGACTCAGTCTCCCGCTACACTTAGTGTAAGCCCAGGGGAGCGAGCAACCCTCAGTTGCAGAGCATCTGAGAGTGTTGATAATGATGGAATACGTTTTCTCCATTGGTATCAACAAAAACCAGGGCAGGCCCCCAGATTGCTGATCTACCGTGCTTCCAATCGCGAGACTGGCATTCCTGCACGTTTCAGCGGCAGCGGCTCCGGAACCGAGTTTACACTTACTATTAGCTCACTCCAGTCTGAAGACTTCGCTGTGTATTACTGTCAGCAATCCAACAAGGACCCATACACTTTCGGAGGCGGCACTAAGGTTGAGATCAAA 305 2419-0406 VH CAAGTTCAACTTGTCCAAAGTGGGGCTGAAGTTAAAAAACCTGGATCATCAGTCAAGGTTTCATGCAAAGCCAGCGGTTACACATTTACAGACTATACAATACATTGGGTTCGACAGGCTCCCGGGCAAGGGCTCGAATGGATGGGATGGATTTATCCCCTCAGGGGCTCAATTAACTATGCTGAGAAATTTAAGGGTCGTGTAACACTCACCGCCGATAAATCCACCTCAACCGTATATATGGAGCTTTCTTCTCTTCGCTCTGAAGATACCGCCGTCTATTTCTGCGCACGACACGGGGCATACTATTCTAATGCTTTTGACTACTGGGGACAAGGGACACTTGTGACCGTTAGTAGC 309 VL GAGATAGTTATGACTCAGTCTCCCGCCACACTTTCAGTAAGTCCCGGTGAACGCGCCACCCTGTCCTGCCGTGCTTCCGAATCAGTGGATAATGACGGCATTAGGTTTTTGCACTGGTACCAACAAAAGCCCGGACAGGCCCCCCGCCTGCTGATATATCGTGCATCAACACGAGCAACAGGGATCCCCGCTCGATTTAGTGGATCCGGAAGCAGGACCGAATTTACACTTACCATTTCCTCACTTCAGTCAGAAGATTTCGCCGTTTACTACTGTCAGCAGTCAAATAAGGATCCTTACACATTTGGGGGCGGTACAAAAGTCGAGATCAAA 306 2419-0605 VH CAGGTGCAGTTGGTCCAGAGCGGGGCAGAGGTTAAGAAGCCTGGGGCCTCAGTAAAGGTATCCTGCAAGGCTTCTGGGTACACCTTCACAGATTACACTATTCATTGGGTGCGCCAAGCACCTGGTCAAGGCCTTGAATGGATGGGATGGATTTACCCCTTGCGAGGGAGTATTAATTATGCACAGAAGTTCCAGGGAAGGGTTACTCTTACCGCCGACAAGTCCACATCAACCGTTTACATGGAGCTTTCCTCTCTCAGGTCCGAAGACACTGCTGTATATTTCTGCGCTCGGCATGGGGCTTATTACAGCAACGCCTTCGATTACTGGGGTCAGGGTACATTGGTCACAGTGTCCAGT 319 VL GAGATAGTAATGACTCAGTCTCCCGCTACACTTAGTGTAAGCCCAGGGGAGCGAGCAACCCTCAGTTGCAGAGCATCTGAGAGTGTTGATAATGATGGAATACGTTTTCTCCATTGGTATCAACAAAAACCAGGGCAGGCCCCCAGATTGCTGATCTACCGTGCTTCCAATCGCGAGACTGGCATTCCTGCACGTTTCAGCGGCAGCGGCTCCGGAACCGAGTTTACACTTACTATTAGCTCACTCCAGTCTGAAGACTTCGCTGTGTATTACTGTCAGCAATCCAACAAGGACCCATACACTTTCGGAGGCGGCACTAAGGTTGAGATCAAA 305 2419-0805 VH GAGGTCCAGTTGGTCCAGTCAGGAGCCGAAGTCAAGAAGCCTGGGGAAAGCCTGAAAATAAGTTGCAAAGCTAGTGGATATACATTTACAGATTATACCATTCATTGGGTCCGGCAAATGCCAGGAAAAGGCTTGGAGTGGATGGGGTGGATTTATCCCCTCCGAGGCTCAATAAATTATAGTCCTAGTTTTCAGGGGCAGGTAACTATTAGCGCTGATAAAAGTATTTCTACAGTTTATTTGCAGTGGAGTTCATTGAAGGCTAGTGACACCGCTATGTATTTCTGCGCTAGACATGGTGCATATTATTCAAATGCCTTCGACTATTGGGGCCAGGGCACCCTCGTCACTGTGAGTTCC 307 VL GAGATAGTAATGACTCAGTCTCCCGCTACACTTAGTGTAAGCCCAGGGGAGCGAGCAACCCTCAGTTGCAGAGCATCTGAGAGTGTTGATAATGATGGAATACGTTTTCTCCATTGGTATCAACAAAAACCAGGGCAGGCCCCCAGATTGCTGATCTACCGTGCTTCCAATCGCGAGACTGGCATTCCTGCACGTTTCAGCGGCAGCGGCTCCGGAACCGAGTTTACACTTACTATTAGCTCACTCCAGTCTGAAGACTTCGCTGTGTATTACTGTCAGCAATCCAACAAGGACCCATACACTTTCGGAGGCGGCACTAAGGTTGAGATCAAA 305 2419-0105 VH CAAGTGCAGTTGGTCCAGAGTGGAGCAGAGGTGAAGAAGCCTGGTGCTTCCGTCAAGGTGAGTTGCAAGGCATCTGGTTATACTTTCACTGACTACACAATTCATTGGGTCAGGCAGGCCCCTGGACAGGGACTGGAATGGATGGGATGGATCTATCCACTTAGAGGATCAATCAACTATGCTCAAAAGTTCCAGGGTCGTGTAACAATGACCGCAGACAAAAGTATCTCAACTGTATACATGGAATTGTCCCGATTGAGGAGCGACGACACAGCCGTATATTATTGTGCCAGGCACGGAGCCTACTACAGTAATGCCTTCGACTACTGGGGGCAGGGCACCCTTGTTACCGTGTCCAGC 310 VL GAGATAGTAATGACTCAGTCTCCCGCTACACTTAGTGTAAGCCCAGGGGAGCGAGCAACCCTCAGTTGCAGAGCATCTGAGAGTGTTGATAATGATGGAATACGTTTTCTCCATTGGTATCAACAAAAACCAGGGCAGGCCCCCAGATTGCTGATCTACCGTGCTTCCAATCGCGAGACTGGCATTCCTGCACGTTTCAGCGGCAGCGGCTCCGGAACCGAGTTTACACTTACTATTAGCTCACTCCAGTCTGAAGACTTCGCTGTGTATTACTGTCAGCAATCCAACAAGGACCCATACACTTTCGGAGGCGGCACTAAGGTTGAGATCAAA 305 2419-1204 VH CAAGTGCAGCTCGTTCAGTCTGGCGCAGAAGTGAAGAAGCCAGGAGCTTCCGTTAAAGTGTCCTGTAAAGCCTCTGGATATACATTCACAGATTATACAATTCACTGGGTGAGACAAGCAACCGGTCAAGGTCTCGAATGGATGGGCTGGATATACCCCCTCCGAGGTTCCATCAACTACGCTCAAAAATTCCAAGGACGAGTCACTATGACAGCAAACAAGAGTTCCTCCACTGTATATATGGAACTCTCTAGTTTGCGCTCTGAAGACACCGCCGTGTACTTCTGTGCCAGGCACGGCGCATACTATTCTAATGCATTTGACTATTGGGGGCAGGGCACATTGGTAACAGTTAGTTCC 311 VL GAAATTGTAATGACCCAGAGCCCCGCCACCCTTAGTGTGTCCCCAGGCGAGAGGGCCACTCTTTCTTGCCGCGCAAGCGAATCCGTAGACAACGATGGTATAAGATTTTTGCATTGGTATCAGCAAAAGCCAGGCCAGGCACCCCGGCTTCTCATCTACAGAGCTAGCACCCTCGAAACTGGAATCCCCGCTCGTTTTTCAGGATCTGGTAGCGGAACAGAATTTACTTTGACAATTAGTAGTTTGCAGTCAGAGGACTTTGCTGTCTATTATTGCCAGCAGTCTAATAAAGATCCATACACCTTCGGCGGAGGGACCAAAGTAGAGATTAAA 312 2419-1210 VH CAAGTGCAGCTCGTTCAGTCTGGCGCAGAAGTGAAGAAGCCAGGAGCTTCCGTTAAAGTGTCCTGTAAAGCCTCTGGATATACATTCACAGATTATACAATTCACTGGGTGAGACAAGCAACCGGTCAAGGTCTCGAATGGATGGGCTGGATATACCCCCTCCGAGGTTCCATCAACTACGCTCAAAAATTCCAAGGACGAGTCACTATGACAGCAAACAAGAGTTCCTCCACTGTATATATGGAACTCTCTAGTTTGCGCTCTGAAGACACCGCCGTGTACTTCTGTGCCAGGCACGGCGCATACTATTCTAATGCATTTGACTATTGGGGGCAGGGCACATTGGTAACAGTTAGTTCC 311 VL GACATTGTAATGACCCAGTCTCCCGATAGCCTCGCTGTCTCACTCGGAGAACGCGCAACCATCAACTGCAAGTCCTCCCAAAGCGTTGACAATGACGGCATTAGGTTTTTGCACTGGTACCAGCAGAAACCCGGTCAACCTCCTAAGTTGCTCATTTACCGAGCATCTACCCGCGAGTCAGGAGTACCTGATCGCTTTTCCGGTAGCGGTAGTGGAACAGATTTTACTCTGACCATTAGTTCACTCCAGGCAGAAGATGTGGCTGTCTACTACTGCCAACAGTCAAATAAAGACCCTTATACCTTCGGTGGGGGTACCAAAGTAGAGATCAAA 318 2419-1406 VH CAAGTTCAGTTGGTGCAAAGCGGGGCAGAAGTGAAGAAACCTGGTGCTTCTGTGAAAGTTTCCTGCAAGGCCAGCGGCTACACCTTTACTGATTACACAATACACTGGGTACGGCAGGCAACTGGGCAAGGATTGGAATGGATGGGGTGGATATACCCATTGCGAGGGTCTATAAACTACGCACAGAAATTTCAAGGTCGAGTAACAATGACAGCCGACAAATCAATAAGCACCGTTTATATGGAACTCTCATCTCTCAGGAGTGAGGATACCGCCGTGTATTTCTGCGCACGACACGGTGCATATTACTCAAACGCTTTCGACTATTGGGGCCAGGGCACCCTTGTGACTGTTAGTAGC 313 VL GAGATAGTTATGACTCAGTCTCCCGCCACACTTTCAGTAAGTCCCGGTGAACGCGCCACCCTGTCCTGCCGTGCTTCCGAATCAGTGGATAATGACGGCATTAGGTTTTTGCACTGGTACCAACAAAAGCCCGGACAGGCCCCCCGCCTGCTGATATATCGTGCATCAACACGAGCAACAGGGATCCCCGCTCGATTTAGTGGATCCGGAAGCAGGACCGAATTTACACTTACCATTTCCTCACTTCAGTCAGAAGATTTCGCCGTTTACTACTGTCAGCAGTCAAATAAGGATCCTTACACATTTGGGGGCGGTACAAAAGTCGAGATCAAA 306 2419-1205 VH CAAGTGCAGCTCGTTCAGTCTGGCGCAGAAGTGAAGAAGCCAGGAGCTTCCGTTAAAGTGTCCTGTAAAGCCTCTGGATATACATTCACAGATTATACAATTCACTGGGTGAGACAAGCAACCGGTCAAGGTCTCGAATGGATGGGCTGGATATACCCCCTCCGAGGTTCCATCAACTACGCTCAAAAATTCCAAGGACGAGTCACTATGACAGCAAACAAGAGTTCCTCCACTGTATATATGGAACTCTCTAGTTTGCGCTCTGAAGACACCGCCGTGTACTTCTGTGCCAGGCACGGCGCATACTATTCTAATGCATTTGACTATTGGGGGCAGGGCACATTGGTAACAGTTAGTTCC 311 VL GAGATAGTAATGACTCAGTCTCCCGCTACACTTAGTGTAAGCCCAGGGGAGCGAGCAACCCTCAGTTGCAGAGCATCTGAGAGTGTTGATAATGATGGAATACGTTTTCTCCATTGGTATCAACAAAAACCAGGGCAGGCCCCCAGATTGCTGATCTACCGTGCTTCCAATCGCGAGACTGGCATTCCTGCACGTTTCAGCGGCAGCGGCTCCGGAACCGAGTTTACACTTACTATTAGCTCACTCCAGTCTGAAGACTTCGCTGTGTATTACTGTCAGCAATCCAACAAGGACCCATACACTTTCGGAGGCGGCACTAAGGTTGAGATCAAA 305 2419-0206 VH CAGGTGCAACTTGTTCAGTCAGGGGCTGAAGTAAAGAAGCCAGGCTCATCAGTCAAGGTATCATGCAAAGCATCTGGCTATACATTTACAGATTACACCATTCACTGGGTGAGGCAAGCTCCCGGTCAAGGTCTCGAGTGGATGGGGTGGATATACCCTCTCAGAGGCTCTATAAATTACGCTCAGAAATTTCAAGGGAGAGTTACAATTACTGCTGATAAAAGTACCAGCACTGCTTATATGGAGCTTTCCTCACTTCGTTCAGAGGACACCGCCGTTTACTTTTGTGCCCGGCATGGTGCCTATTATTCAAATGCCTTCGATTATTGGGGGCAGGGAACTTTGGTCACAGTTTCATCT 308 VL GAGATAGTTATGACTCAGTCTCCCGCCACACTTTCAGTAAGTCCCGGTGAACGCGCCACCCTGTCCTGCCGTGCTTCCGAATCAGTGGATAATGACGGCATTAGGTTTTTGCACTGGTACCAACAAAAGCCCGGACAGGCCCCCCGCCTGCTGATATATCGTGCATCAACACGAGCAACAGGGATCCCCGCTCGATTTAGTGGATCCGGAAGCAGGACCGAATTTACACTTACCATTTCCTCACTTCAGTCAGAAGATTTCGCCGTTTACTACTGTCAGCAGTCAAATAAGGATCCTTACACATTTGGGGGCGGTACAAAAGTCGAGATCAAA 306 2621 VH GAGGTCCAGCTTCAGCAGTCTGGAGCTGAGCTGGTGAGGCCTGGGTCCTCAGTGAAGATGTCCTGCAAGACTTCTGGATATACTTTCACAAGCTACGGTATAAACTGGGTGAAGCAGAGGCCTGGACAGGGCCTGGAATGGATTGGATATATTTATATTGGAAATGGTTATGCTGAGTACAATGAGAGGTTCAAGGGCAAGGCCACACTGACTTCAGACACATCCTCCAGCACAGCCTACATGCAGCTCAGCAGCCTGACATCTGAGGACTCTGCAATCTATTTCTGTGCACTATACTATCCCTGGTTTACTTACTGGGGCCAGGGGACTCTGGTCACTGTCTCTGCA 75 VL GACATCCAGATGACTCAGTCTCCAGCCTCCCTTTCTGCATCTGTGGGAGATTCTGTCACCATCACATGTCGAGCAAGTGAGAATATTTACAGTTATTTAGCATGGTATCAGCAGAAACAGGGAAAATCTCCTCAGCTCCTGGTCTATAATGCAAAAACCTTAGCTGAAGGTGTGCCATCAAGGTTCAGTGGCAGTGGATCAGGCACACAGTTTTCTCTGAAGATCAACAGCCTGCAGCCTGAAGATTTTGGGAATTATTACTGTCAACATCATTATGATACTCCGTTCACGTTCGGAGGGGGGACCAAGCTGGAAATAAAA 76 2922 VH CAGGTTCAGCTGCACCAGTCTGGACCTGAGCTGGTGAAGCCTGGGGCTTCAGTGAAGTTGTCCTGCAAGACTTCTGGCTACACCTTCACAAGCTACGATGTCTTCTGGGTGAAGCAGAGGCCTGGACAGGGACTTGAGTGGATTGGATGGATTTATCCTAGAGATAGTAGTACTAAATACAATGAGAAGTTCAAGGGCAAGGCCACATTGACTGTAGACACATCCTCCAGCACAGCATACATGGAGCTCCACAGCCTGACATCTGAGGACTCTGCGGTCTATTTCTGTGCAAAAGAGGGGTATGATTATGACAAGAGGGGCTTTGACTACTGGGGCCAAGGCACCACTCTCACAGTCTCCTCA 77 VL GACATTGTGCTGACCCAATCTCCAGCTTCTTTGGCTGTGTCTCTAGGGCAGAGGGCCATCATCTCCTGCAAGGCCAGCCAAAGTGTCAGTTTTGCTGGTACTAATTTAATGCACTGGTACCAACAGAGACCAGGGCAGCAACCCAAACTCCTCATCTATCGTGCATCCAACCTAGAACCTGGGGTTCCTACCAGGTTTAGTGGCAGTGGGTCTAGGACAGACTTCACCCTCAATATCCATCCTGTGGAGGAAGATGATGCTGCAACCTATTACTGTCAGCAAAGTAGGGAATATCCGTGGACGTTCGGTGGAGGCACCAAGCTGGAAATCAAA 78 3125 VH CAGGTTCAACTGCAGCAGTCTGGGGCTGAGCTGGTGAGGCCTGGGGCTTCAGTGACGCTGTCCTGCAAGGCTTCGGGCTACACTTTTACTGACTATGAAATGCACTGGGTGAAGCAGACACCTGTGCATGGCCTGGAATGGATTGGAGCTATTGATCCTGAAACTGGTGGTACTGCCTACAATCAGAGGTTCAAGGGCAAGGCCATACTGACTACAGACAAATCCTCCATCACAGCCTACATGGAGCTCCGCAGCCTGACATCTGAGGACTCTGCCGTCTATTACTGTACAAGATGGAATGATGGCGACTACTGGGGCCAAGGCACCACTCTCACAGTCTCCTCA 79 VL GATGTTGTGATGACCCAGACTCCACTGTCTTTGTCGGTTACCATTGGACAACCAGCCTCCATTTCTTGCAAGTCAAGTCAGAGCCTCTTATACAGTAATGGAAAGACATATTTGAATTGGTTTCAACAGAGGCCTGGCCAGTCTCCAAAGCGCCTAATGTATCAGGTGTCCAAACTGGACCCTGGCATCCCTGACAGGTTCAGTGGCAGTGGATCAGAAACAGATTTTACACTTAAAATCAGCAGAGTGGAGGCTGAAGATTTGGGACTTTATTACTGCTTGCAAGGTACATATTATCCGTACACGTTCGGAGGGGGGACCAAGCTGGAAATAAAA 80 3327 VH GAGGTCCAGCTGCAGCAGTCTGGACCTGAGCTGGTGAAGCCTGGGGCTTCAGTGAAGATGTCCTGCAAGGCTTCTGGTTACTCCTTTACTGGCTACTTTATGAACTGGGTGAAGCAGAGCCATGGAAAGAGCCTTGAGTGGATTGGACGTATTAATCCTTACAATGGTGATACTTTCTACAACCAGAAGTTCAAGGGCAAGGCCACATTGACTGTAGACAAATCCTCTAGCACAGCCCACATGGAGCTCCGGAGCCTGACATCTGAGGACTCTGCACTCTATTATTGTGCAAGCGAAGGTGATGGTTACTACTGGTACTTCGATGTCTGGGGCGCAGGGACCACGGTCACCGTCTCCTCA 81 VL GACATTGTGCTGACCCAATCTCCAGCTTCTTTGGCTGTGTCTCTAGGGCAGAGGGCCACCATCTCCTGCAGAGCCAGCGAAAGTGTTGATAATTATGGCATTAGTTTTATGAACTGGTTCCAACAGAAACCAGGACAGCCACCCAAACTCCTCATCTATGCTGCATCCAACCAAGGATCCGGGGTCCCTGCCAGGTTTAGTGGCAGTGGGTCTGGGACAGACTTCAGCCTCAACATCCATCCTATGGAGGAGGATGATACTGCAATGTATTTCTGTCAGCAAAGTAAGGAGGTTCCTCGGACGTTCGGTGGAGGCACCAAGCTGGAAATCAAA 82 3525 VH CAGGTTCAACTGCAGCAGTCTGGGGCTGAGCTGGTGAGGCCTGGGGCTTCAGTGAAGCTGTCCTGCAAGGCTTCGGGCTACACATTTACTGACCATGAAATGCACTGGGTGAGACAGACACCTGTGCATGGCCTGGAATGGATTGGAGTTATTGATCCTGACACTGGTGATACTACCTACAATCAGAAATTCAAGGGCAAGGCCACACTGACTGCAGACAAATCCTCCAGCACAGCCTACATGGACCTCCGCAGCCTGACATCTGAGGACTCTGCCGTCTTTTACTGTACACGGTGGACTGGGGGGGACTACTGGGGCCATGGCACCACTCTCACAGTCTCCTCA 83 VL GATGTTGTGATGACCCAGACTCCACTGTCTTTGTCGGTTACCATTGGACAACCAGCCTCCATTTCTTGCAAGTCAAGTCAGAGCCTCTTATACAGTAATGGAAAGACATATTTGAATTGGTTTCAACAGAGGCCTGGCCAGTCTCCAAAGCGCCTAATGTATCAGGTGTCCAAACTGGACCCTGGCATCCCTGACAGGTTCAGTGGCAGTGGATCAGAAACAGATTTTACACTTAAAATCAGCAGAGTGGAGGCTGAAGATTTGGGACTTTATTACTGCTTGCAAGGTACATATTATCCGTACACGTTCGGAGGGGGGACCAAGCTGGAAATAAAA 80 3530 VH CAGGTTCAACTGCAGCAGTCTGGGGCTGAGCTGGTGAGGCCTGGGGCTTCAGTGAAGCTGTCCTGCAAGGCTTCGGGCTACACATTTACTGACCATGAAATGCACTGGGTGAGACAGACACCTGTGCATGGCCTGGAATGGATTGGAGTTATTGATCCTGACACTGGTGATACTACCTACAATCAGAAATTCAAGGGCAAGGCCACACTGACTGCAGACAAATCCTCCAGCACAGCCTACATGGACCTCCGCAGCCTGACATCTGAGGACTCTGCCGTCTTTTACTGTACACGGTGGACTGGGGGGGACTACTGGGGCCATGGCACCACTCTCACAGTCTCCTCA 83 VL GATGCTGTGATGACCCAGACTCCACTGTCTTTGTCGGTTACCATTGGACAACCAGCCTCTATCTCTTGCAAGTCGAGTCAGAGCCTCTTATATAGTGATGGAAAGACATATTTGAATTGGTTCCAACAGAGGCCAGGCCAGTCTCCAAAGCGCCTAATGTATCAGGTGTCCAAACTGGACCCTGGCATCCCTGACAGGTTCAGTGGCAGTGGATCAGAGACAGATTTTACACTTAAAATCAGCAGAGTGGAGGCTGAGGATTTGGGAGTTTATTACTGCTTGCAAGGTACATATTATCCGTATACGTTCGGATCGGGGACCAAGCTGGAAATAAAA 84 4035 VH CAGGTGCAGCTGAAGGAGTCAGGACCTGGCCTGGTGGCGCCCTCACAGAGCCTGTCCATCACCTGCACAGTCTCTGGTTTCTCATTAACCATCTATGATGTACACTGGGTTCGCCAGTCTCCAGGAAAGGGTCTGGAGTGGCTGGGAGTGATATGGAGTGATGGAAGCACAGACTATAATGCAGCTTTCATATCTAGACTGAGCATCAGCAAGGACAACTCCAAGAGCCAAGTTTTCTTTAAAATGAACAGTCTGCAAGCTGATGACACAGCCATATACTACTGTGCCAGAAATTGGGTCGACCAGGCCTGGTTTGCTTACTGGGGCCAAGGGACTCTGGTCACTGTCTCTGCA 173 VL GACATCCAGATGACTCAGTCTCCAGCCTCCCTATCTGCATCTGTGGGAGAAACTATCACCATCACATGTCGAGCAAGTAAGAATATTTACAGTTATTTAGCATGGTATCAGCAGAAACAGGGAAAATCTCCTCAGCTCCTGGTCTATAATGCAAAAACCTTACCAGAAGGTGTGCCATCAAGGTTCAGTGGCAGTGGATCAGGCACACAGTTTTCTCTGAAGATCAACAGCCTGCAGCCTGAAGATTTTGGGAGTTATTACTGTCAACATCATTATGGTACTCCGCTCACGTTCGGTGCTGGGACCAAGCTGGAGCTGAAA 174 4035-062 VH CAGGTACAACTCCAGGAATCCGGGCCTGGGCTCGTCAAACCAAGCGAAACACTCTCTCTCACCTGCACCGTTTCTGGGTTTTCTCTTACTATCTATGACGTACATTGGGTAAGGCAACCACCCGGGAAGGGGCTGGAGTGGATCGGTGTAATCTGGTCAGATGGATCTACAGACTACAACCCATCCCTTAAAAGCAGGGTGACCATTTCTAAGGACACTTCCAAGAACCAAGTATCCCTTAAATTGTCCTCTGTAACCGCAGCAGACACCGCAGTTTACTACTGCGCACGAAATTGGGTTGACCAAGCATGGTTTGCATATTGGGGACAGGGAACTCTTGTCACTGTGTCTTCA 299 VL GATATTCAAATGACCCAATCCCCCTCATCACTTTCAGCATCTGTCGGTGATCGGGTCACCATTACTTGCAGAGCCAGTAAGAATATCTACAGCTACCTGGCTTGGTATCAGCAAAAACCTGGTAAGGCCCCTAAACTTCTCGTTTACAATGCTAAGACCCTTCCCGAGGGAGTTCCTTCCAGGTTTTCCGGTAGCGGGAGTGGAACAGATTTCACCTTGACTATTTCTAGCTTGCAGCCCGAGGATTTCGCTACATACTACTGCCAGCATCACTATGGAACCCCCCTGACCTTCGGTCAGGGAACCAAGCTCGAGATCAAA 300 3934 VH CAGGTCCAACTGCAGCAGTCTGGACCTGAGCTGGTGAAGCCTGGAGCTTCAGTGAAGCTGTCCTGCAAGGCTGCTGGCTACATCTTCACTGACTATACTATAAACTGGGTGAAGCAGAGTCCTGGACAGGGACTTGAGTGGATTGGATGGATTTATCCTGGAAGTGGTAATCGTAAATACAATGACAAGTTCAAGGGCAAGGCCACAATGACTGCAGACAAATCCTCCAGCACAGCCTACATGCAGCTCAGCAGCCTGACCTCTGAGGATTCTGCGGTCTATTTCTGTGCAAGAGAGAGTAACTACGTGGGGTACTATGCTATGGACTATTGGGGTCAAGGAACCTCAGTCACCGTCTCCTCA 175 VL GATGTTTTGATGACCCAAACTCCACTCTCCCTGCCTGTCAGTCTTGGAGATCAAGCCTCCATCTCTTGCAGATCTAGTCAGAGCGTTGTAAATAGTAATGGAAACACCTATTTAGAATGGTACCTGCAGAAACCAGGCCAGTCTCCAAATCTCCTGATCTACAAAGTTTCCAATCGATTTTCTGGGGTCCCAGACAGGTTCAGTGGCAGTGGATCGGGGACAGATTTCACACTCAAGATCAGCAGAGTGGAGGCTGAGGATCTGGGAGTTTATTACTGTTTTCAAGGTTCACATGTTCCGTGGACGTTCGGTGGAGGCACCAAGCTGGAAATCAAA 176 3833 VH CAGGTCCAGCTGCAGCAGTCTGGAGCTGAGCTGGTAAGGCCTGGGACTTCAGTGAAGATGTCCTGCAAGGCTGCTGGATACACCTTCACAAACTACTGGATAGGTTGGGTAAAGCAGAGGCCTGGACATGGCCTTGAGTGGATTGGAGATATTTACCCTGGAGGTATAGGAGGTGGTTATACTAAGTACAATGAGAAGTTCAAGGGCAAGGCCACACTGACTGCAGACACATCCTCCAGCACAGCCTACATGCAGCTCGGCAGCCTGACATCTGAGGACTCTGCCATCTATTTCTGTTCAAGATCGGAAACTGGACGGGCTATGGACTACTGGGGTCAAGGAACCTCAGTCACCGTCTCCTCA 177 VL GACATCCAGATGACACAGTCTCCATCCTCACTGTCTGCATCTCTGGGAGGCAAAGTCACCATCACTTGCAAGGCAAGCCAAGACATTAATAAGTATATAGCTTGGTACCAACACAAGCCTGGAAAAGGTCCTAGGCTGCTCATACATTACACATCTACATTAAAGCCAGGCATCCCATCAAGGTTCAGTGGAAGTGGGTCTGGGAGAGATTATTCCTTCAGCATCAGTGACCTGGAGCCTGAAGATATTGCAACTTATTATTGTCTACAGTATGATAATCTGAACACGTTCGGAGGGGGGACCAAGCTGGAAATAAAA 178 3631 VH GAGATCCAGCTGCAGCAGTCTGGACCTGAGCTGGTGAAGCCTGGGGCTTCAGTGAAGGTGTCCTGCAAGGCTTCTGGTTATTCATTCACTGACTACAACATCTACTGGGTGAAGCAGAGCCATGGAAAGAGCCTTGAGTGGATTGGATATATTGATCCTTCCAATGGTGGTCCTGGCTACAACCAGAAGTTCAGGGGCAAGGCCACATTGACTGTTGACAAGTCCTCCAGCACAGCCTTCCTGCATCTCAACAGCCTGACATCTGAGGACTCTGCAGTCTATTACTGTGCAAGAAGGGACAACTACGGCTCGGGGACTATGGACTACTGGGGTCAAGGAACCTCAGTCACCGTCTCCTCA 179 VL GACATTGTGATGACCCAGTCTCAAAAATTCATGTCCACATCAGTAGGAGACAGGGTCAGCATCACCTGTAAGGCCAGTCAGAATGTGGGTACTGATGTATCCTGGTATCAACAGAAACCAGGGAAATCTCCTAAACCACTGATTTACTGGGCATCAAACCGGTTCACTGGAGTCCCTGATCGCTTCATAGGTAGTGGATCTGGGACAGATTTCACTCTCACCATCAGCAATGTGCAGTCTGAAGACTTGGCAGATTATTTCTGTGAGCAATATAGCATCTATCCGCTCACGTTCGGTGCTGGGACCAAGCTGGAGCTGAAA 180 3732 VH GAGATCCAGCTGCAGCAGTCTGGACCTGAGCTGGTGAAGCCTGGGGCGTCAGTGAAGGTATCCTGCAAGGCTTCTGGTTACTCATTCACTGACGACAACATGTACTGGGTGAAGCAGAGCCATGGAAAGAGCCTTGAGTGGATTGGATATATTGATCCTCTCAATGGTGGTACTGGCTACAACCAGAAATTCAAGGGCAAGGCCACACTGACTGTTGACAAGTCCTCCAGCACAGCCTTCCTGCATCTCAACAGCCTGACATCTGAGGACTCTGCAGTCTATTACTGTGCAAGAAGGGACAACTACGCCACGGGGACTATGGACTACTGGGGTCAAGGAACCTCAGTCACCGTCTCCTCA 181 VL GACATTGTGATGACCCAGTCTCAAAAATTCATGTCCACATCAGTAGGAGACAGGGTCAGCATCACCTGCAAGGCCAGTAAGAATGTGGGTACTGATGTATCCTGGTATCAACAGAAACCAGGGAAATCTCCTAAACCACTGATTTACTGGGCATCAAACCGGTTCACTGGAGTCCCTGATCGCTTCACAGGCAGTGGATCTGGGACAGATTTCACTCTCACCATCAACAATGTGCAGTCTGAAGACTTGGCAGATTATTTCTGTGAGCAATATAGCAGCTATCCGCTCACGTTCGGTGCTGGGACCAAGCTGGAGCTGAAA 182 4338 VH GAGGTCCAGCTGCAGCAGTCTGGCCCTGAGCTGGTGAAGCCTGGGGCTTCAGTGAAGATATCCTGCAAGGCTTCTGGATACACATTCACTGACTACAACATGGACTGGGTGAAGCAGAGCCATGGAAAGAGCCTTGAGTGGATTGGAAATATTTATCCTATCAATGGTTATACTGGCTACAACCAGAGGTTCAAGAACAAGGCCACATTGACTGTAGACAAGTCCTCCAGCACAGCCTACATGGAACTCCACAGCCTGACATCTGAGGACTCTGCGGTCTATTACTGCGCAAGAGATAGTAACTACGTTGGCTGGTACTTCGATGTCTGGGGCGCAGGGACCACGGTCACCGTCTCCTCA 183 VL GATGTTGTGATGACCCAAACTCCACTCTCCCTGCCTGTCAGTCTTGGAGATCAAGCCTCCATCTCTTGCAGATCTAGTCAGAGCCTTGTACACAGTAATGGAAACACCTATTTACATTGGTACCTGCAGAAGCCAGGCCAGTCTCCAAAGCTCCTGATCTACAAAGTTTCCAACCGATTTTCTGGGGTCCCAGACAGGTTCAGTGGCAGTGGATCAGGGACAGATTTCACATTCAAGATCAGCAGAGTGGAGGCTGAGGATCTGGGAGTTTATTTCTGCTCTCAAAGTACACATGTTCCTCGGACGTTCGGTGGAGGCACCAAGCTGGAAATCAAA 184 VL GACATTGTGCTGACACAGTCTCCTGCTTCCTTAACTGTATCTCTGGGGCAGAGGGCCACCTTCTCATGCAGGGCCAGCAAAAGTGTCAGTACATCTGGCTATAGTTATATGCACTGGTACCAACAGAAACCAGGACAGCCACCCAAACTCCTCATCTATTTTACATCCGACCTAGAACCTGGGGTCCCTGCCAGGTTCACTGGCAGTGGGTCTGGGACAGACTTCACCCTCAACATCCATCCTGTGGAGGAGGAGGATGCTGCAACCTATTACTGTCAGCACAGTAGGGAGCTTCCGTACCCCTTCGGAGGGGGGACCAAGTTGGAAATAAAA 185 4540 VH caggtccagctacagcagtctggacctgagctggtgaagcctggggcttcagtgaagatatcctgcaaggcttctggctacaccttcgctgactactatataaactgggtgaagcagaggcctggacagggacttgagtggattggatggatttttcctggaagtggtagtacttactacaatgagaagttcaagggcaaggccacacttactgtagacaaatcctccagcacagcctacatgttgctcagcagcctgacctctgaggactctgcggtctatttctgtgcaagaggggactccggtagggctatggactactggggtcaaggaacctcagtcaccgtctcctca 186 VL gacatccagatgacacagtctccatcctcactgtctgcatctctgggaggcaaagtcaccatcacttgcaaggcaagccaagacattaacaaatatatagcttggtaccaacacaagcctggaaaaggtcctaggctgctcatacattacacatctacattacagtcaggcatcccatcaaggttcagtggaagtgggtctgggagagattattccttcagcatcagcaacctggagcctgaagataatgcaacttattattgtctacagtatgataatcttctcacgttcggtgctgggaccaagctggagctgaaa 187 4540-063 VH CAAGTCCAGCTCGTACAGAGCGGGGCAGAGCTGAAGAAGCCTGGGGCCTCCGTCAAGGTCTCCTGTAAGGCTTCTGGTTACACATTTGCCGACTACTACATGAACTGGGTACGGCAAGCCCCAGGTCAAGGGCTGGAATGGATGGGATGGATTTTTCCAGGGAGCGGCAGCACTTACTACAACCAGAAATTTCAAGGTCGTGTGACAATGACCGTGGATAAAAGCAGCTCTACAGCTTACATGGAGCTTTCCCGCTTGAGGTCCGATGATACTGCCGTATATTATTGTGCCCGTGGTGACTCAGGTAGGGCCATGGACTATTGGGGACAGGGCACCCTCGTGACCGTGTCCAGC 301 VL GATATCCAGATGACACAATCCCCTTCATCCTTGAGCGCATCAGTTGGCGACAGGGTCACCATAACTTGTCAGGCTAGTCAGGATATTAACAAGTACCTGGCTTGGTATCAACACAAGCCTGGAAAGGCCCCCAAATTGCTGATTCACTACACCTCTACATTGGAAACTGGCGTACCCAGTCGCTTTTCTGGGAGTGGAAGCGGAACTGATTTCACTTTCACTATATCCAGTCTTCAGCCAGAAGATATCGCAACTTACTATTGTCTTCAGTATGATAACTTGCTTACTTTCGGAGGAGGGACCAAAGTTGAAATCAAG 302 4540-033 VH CAGGTGCAGTTGGTCCAATCCGGGGCTGAGGTGAAGAAGCCTGGGGCCTCTGTTAAAGTTAGTTGCAAGGCATCAGGCTACACCTTCGCTGACTACTACATCAACTGGGTTAGACAGGCCCCCGGGCAGGGGTTGGAGTGGATGGGTTGGATTTTTCCAGGATCAGGTTCAACATATTACGCACAAAAACTGCAAGGTAGAGTAACCATGACAACTGATACTAGCACCTCCACAGCCTATATGGAACTCCGCTCTCTCAGGAGTGACGATACAGCCGTTTATTACTGCGCCCGTGGGGATTCAGGCCGTGCAATGGATTACTGGGGTCAAGGGACCCTCGTGACCGTAAGTTCA 303 VL GATATCCAGATGACACAATCCCCTTCATCCTTGAGCGCATCAGTTGGCGACAGGGTCACCATAACTTGTCAGGCTAGTCAGGATATTAACAAGTACCTGGCTTGGTATCAACACAAGCCTGGAAAGGCCCCCAAATTGCTGATTCACTACACCTCTACATTGGAAACTGGCGTACCCAGTCGCTTTTCTGGGAGTGGAAGCGGAACTGATTTCACTTTCACTATATCCAGTCTTCAGCCAGAAGATATCGCAACTTACTATTGTCTTCAGTATGATAACTTGCTTACTTTCGGAGGAGGGACCAAAGTTGAAATCAAG 302 4237 VH CAGGCGCACCTGAAGGAGTCAGGACCTGGCCTGGTGGCGCCCTCACAGAGCCTGTCCATCACCTGCACAGTCTCTGGTTTCTCATTAACCGACTATGATGTACACTGGGTTCGCCAGTCTCCAGGAAAGGGTCTGGAGTGGCTGGGAGTGATATGGAATGATGGAAGCACAGACTATAATACAGCTTTCATATCTAGACTGACCATCAGCAAGGACAACTCCAAGAGCCAAGTTTTCTTTAAAATGAACAGTCTGCAAGCTGATGACACAGCCATATACTACTGTGCCAGAAATTGGTATGGTGGCTACTGGTTTGCTTACTGGGGCCAAGGGACTCTGGTCACTGTCTCTGCA 188 VL GACATCCAGATGACTCAGTCTCCAGCCTCCCTATCTGCATCTGCGGGAGAAACTGTCACCATCACATGTCGATCAAGTGAGAATATTTACAGTTATTTAGCATGGTATCAGCAGAAACAGGGAAAATCTCCTCAGCTCCTAGTCTATAATGCAAATGCCTTAGCAGAAGGTGTGCCATCGAGGTTCAGTGGCAGTGGATCAGTCACACAGTTTTCTCTGAAGATCAACAGCCTGCAGCCTGAAGATTTTGGGAGTTATTACTGTCAACATCATTATGGTACTCCATTCACGTTCGGCTCGGGGACAAAGTTGGAAATAAAA 189 4439 VH GAGATCCAGCTGCAGCAGTCTGGAGCTGAACTGGTGAAGCCTGGGGCTTCAGTGAAGATATCCTGCAAGGCTTCTGATTACTCATTCACTGGCTACAACATGAACTGGGTGATGCAGAGCCATGGAAAGAGCCTTGAGTGGATTGGAAATATTCATCCTTACTATGGTGGTACTAGCTTCAATCAGAAGTTCATGGGCAAGGCCACATTGACTGCAGACAAATCTTCCAGCACAGCCTACATGCAGCTCAACAGCCTGACATCTGAAGACTCTGCAGTCTATTACTGTGCAAGAGAGAGAAGTAACTTCCATGCTCTGGACTACTGGGGTCAGGGAACCTCAGTCACCGTCTCCTCA 297 VL GACATTGTGCTGACACAGTCTCCTGCTTCCTTAACTGTATCTCTGGGGCAGAGGGCCACCTTCTCATGCAGGGCCAGCAAAAGTGTCAGTACATCTGGCTATAGTTATATGCACTGGTACCAACAGAAACCAGGACAGCCACCCAAACTCCTCATCTATTTTACATCCGACCTAGAACCTGGGGTCCCTGCCAGGTTCACTGGCAGTGGGTCTGGGACAGACTTCACCCTCAACATCCATCCTGTGGAGGAGGAGGATGCTGCAACCTATTACTGTCAGCACAGTAGGGAGCTTCCGTACCCCTTCGGAGGGGGGACCAAGTTGGAAATAAAA 298

Таблица 5. Аминокислотные последовательности вариабельной области тяжелой цепи (VH) и вариабельной области легкой цепи (VL) иллюстративных гуманизированных антител против APRIL представлены далее.

Цепь антитела Аминокислотная последовательность SEQ ID NO >Hu_2218_VH01 QVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCTVSGYSITSGYYWNWIRQHPGKGLEWIGYISYDGYNNYNPSLKNRVTISVDTSKNQFSLKLSSVTAADTAVYYCARYYDYEDWYFGVWGQGTMVTVSS 190 >Hu_2218_VH02 QVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCTVSGYSITSGYYWSWIRQHPGKGLEWIGYISYDGYTYYNPSLKSRVTISVDTSKNQFSLKLSSVTAADTAVYYCARYYDYEDWYFGVWGQGTMVTVSS 191 >Hu_2218_VH03 QVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCTVSGYSITSGYYWNWIRQHPGKGLEWIGYISYDGYNNYNPSLKSRVTISRDTSKNQFSLKLSSVTAADTAVYYCARYYDYEDWYFGVWGQGTMVTVSS 192 >Hu_2218_VH04 QVQLQQWGAGLLKPSETLSLTCAVYGYSITSGYYWNWIRQPPGKGLEWIGYISYDGYNNYNPSLKNRVTISVDTSKNQFSLKLSSVTAADTAVYYCANYYDYEDWYFGVWGQGTTVTVSS 193 >Hu_2218_VH05 QVQLQQWGAGLVKPSETLSLTCAVYGYSITSGYYWNWIRQPPGKGLEWIGYISYDGYNNYNPSLKNRVTISRDTSKNQFSLKLSSVTAADTAVYYCANYYDYEDWYFGVWGQGTTVTVSS 194 >Hu_2218_VH06 QVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGYSITSGYYWNWIRQPPGKGLEWIGYISYDGYNNYNPSLKNRVTISVDTSKNQFSLKLSSVTAADTAVYYCANYYDYEDWYFGVWGQGTTVTVSS 195 >Hu_2218_VH07 QVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGYSITSGYYWNWIRQPPGKGLEWIGYISYDGYNNYNPSLKNRVTISRDTSKNQFSLKLSSVTAADTAVYYCANYYDYEDWYFGVWGQGTTVTVSS 196 >Hu_2218_VH08 QVQLQESGPGLMKPSETLSLTCSVSGYSITSGYYWSWIRKPPGKGLEYIGYVSYDGSTYYNPSLKSRVTISVDTSKNRFSLKLNSVTAADTAVYYCANYYDYEDWYFGYWGQGILVTVSS 197 >Hu_2218_VH09 QVQLQESGPGLMKPSETLSLTCSVSGYSITSGYYWNWIRKPPGKGLEWIGYISYDGYNNYNPSLKSRVTISRDTSKNRFSLKLNSVTAADTAVYYCANYYDYEDWYFGVWGQGILVTVSS 198 >Hu_2218_VH10 EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAVSGYSITSGYYWNWIRQAPGKGLEWVASISYDGYNNYNPSVKGRITISRDDSKNTFYLQMNSLRAEDTAVYYCANYYDYEDWYFGVWGQGTLVTVSS 199 >Hu_2218_VH11 EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAVSGYSITSGYYWNWIRQAPGKGLEWVAYISYDGYNNYNPSVKGRITISRDTSKNTFYLQMNSLRAEDTAVYYCANYYDYEDWYFGVWGQGTLVTVSS 200 >Hu_2218_VH12 QVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCAASGYSITSGYYWNWVRQAPGKGLEWVAYISYDGYNNYNPSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCANYYDYEDWYFGVWGQGTMVTVSS 201 >Hu_2218_VL01 EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASESVSIIGTNSIHWYQQKPGQAPRLLIYHASNLETGIPARFSGSGPGTDFTLTISSLEPEDFAVYYCLQSRKIPYTFGQGTKLEIK 202 >Hu_2218_VL02 DIVLTQSPASLAVSPGQRATITCRASESVSIIGTNSIHWYQQKPGQPPKLLIYHASNLETGVPARFSGSGSGTDFTLTINPVEANDTANYYCLQSRKIPYTFGGGTKLEIK 203 >Hu_2218_VL03 EIVMTQSPATLSVSPGERATLSCRASESVSIIGTNSLHWYQQKPGQAPRLLIYHASQSISGIPARFSGSGSGTEFTLTISSLQSEDFAVYYCQQSRKIPYTFGGGTKVEIK 204 >Hu_2218_VL04 EIVMTQSPATLSVSPGERATLSCRASESVSIIGTNSIHWYQQKPGQAPRLLIYHASNLETGIPARFSGSGSRTEFTLTISSLQSEDFAVYYCLQSRKIPYTFGGGTKVEIK 205 >Hu_2218_VL05 DIQLTQSPSSLSASVGDRVTITCRASESVSIIGTNSMNWYQQKPGKAPKLLIYHASYLESGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCLQSRKIPYTFGQGTKVEIK 206 >Hu_2218_VL06 DIQLTQSPSSLSASVGDRVTITCRASESVSIIGTNSMHWYQQKPGKAPKLLIYHASNLESGVPSRFSGSGSRTDFTLTISSLQPEDFATYYCLQSRKIPYTFGQGTKVEIK 207 >Hu_2218_VL07 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASESVSIIGTNSMHWYQQKPGKAPKLLIYHASNLESGVPSRFSGSGSGTDFTFTISSLQPEDIATYYCLQSRKIPYTFGQGTKVEIK 208 >Hu_2419_VH01 QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTDYTIHWVRQAPGQGLEWMGWIYPLRGSINYNEKFKDRVTSTRDTSISTAYMELSRLRSDDTVVYYCARHGAYYSNAFDYWGQGTLVTVSS 209 >Hu_2419_VH02 QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTDYYMHWVRQAPGQGLEWMGRIYPLRGSTNYAQKFQGRVTSTRDTSISTAYMELSRLRSDDTVVYYCARHGAYYSNAFDYWGQGTLVTVSS 210 >Hu_2419_VH03 QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTDYTIHWVRQAPGQGLEWMGWIYPLRGSINYNEKFKDRVTMTADTSSSTAYMELSRLRSDDTVVYYCARHGAYYSNAFDYWGQGTLVTVSS 211 >Hu_2419_VH04 QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCEASGYTFTDYTIHWVRQAPGKGLEWMGWIYPLRGSINYNEKFKDRVTMTADTSTDTAYMELSSLRSKDTAVYYCARHGAYYSNAFDYWGQGTLVTVSS 212 >Hu_2419_VH05 QVQLVQSGAEVVKPGASVKLSCKASGYTFTDYTMYWVKQAPGQGLEWIGEIYPLRGSINFNEKFKSKATLTVDKSASTAYMELSSLRSEDTAVYYCARHGAYYSNAFDYWGQGTLVTVSS 213 >Hu_2419_VH06 QVQLVQSGAEVVKPGASVKLSCKASGYTFTDYTMHWVKQAPGQGLEWIGEIYPLRGSINFNEKFKSKATLTVDKSASTAYMELSSLRSEDTAVYYCARHGAYYSNAFDYWGQGTLVTVSS 214 >Hu_2419_VL01 EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASESVDNDGIRFMHWYQQKPGQAPRLLIYRASNLESGIPARFSGSGPGTDFTLTISSLEPEDFAVYYCQQSNKDPYTFGQGTKLEIK 215 >Hu_2419_VL02 EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASESVDNDGIRFMHWYQQKPGQAPRLLIYRASNLESGIPARFSGSGPGTDFTLTISSLEPEDVAVYYCQQSNKDPYTFGQGTKLEIK 216 >Hu_2419_VL03 DIVMTQSPASLAVSLGERATINCRASESVDNDGIRFMHWYQQKPGQPPKLLIYRASNLESGVPDRFSGSGSRTDFTLTISSLQAEDVAVYYCQQSNKDPYTFGGGTKVEIK 217 >Hu_2419_VL04 DIVMTQSPASLAVSLGERATINCRASESVDNDGIRFMHWYQQKPGQPPKLLIYRASNLESGVPDRFSGSGSRTDFTLTINSLQAEDVAVYYCQQSNKDPYTFGGGTKVELK 218 >Hu_2419_VL05 DIVLTQSPATLSVSPGERATISCRASESVDNDGIRFMHWYQQKPGQPPKLLIYRASNLESGVPARFSGSGSRTDFTLTISSVEPEDFATYYCQHSWEIPPTFGGGTKLEIK 219 >hu_4035_VH01 QVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCAASGFSLTIYDVHWVRQAPGKGLEWVAVIWSDGSTDYNAAFISRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARNWVDQAWFAYWGQGTLVTVSS 220 >hu_4035_VH02 QVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCAASGFSLTIYDVHWVRQAPGKGLEWVGVIWSDGSTDYNAAFISRFTISKDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARNWVDQAWFAYWGQGTLVTVSS 221 >hu_4035_VH03 QVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCAASGFSLTIYDVHWVRQAPGKGLEWVAVIWSDGSTDYADSVKGRFTISKDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARNWVDQAWFAYWGQGTLVTVSS 222 >hu_4035_VH04 QVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCAVSGFSLTIYDVHWVRQAPGKGLEWVGVIWSDGSTDYADSVKGRFTISKDNSKNTVYLQMNSLRAEDTAVYYCARNWVDQAWFAYWGQGTLVTVSS 223 >hu_4035_VH05 QVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGFSLTIYDVHWIRQPPGKGLEWIGVIWSDGSTDYNAAFISRVTISVDTSKNQFSLKLSSVTAADTAVYYCARNWVDQAWFAYWGQGTLVTVSS 224 >hu_4035_VH06 QVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGFSLTIYDVHWVRQPPGKGLEWIGVIWSDGSTDYNPSLKSRVTISKDTSKNQVSLKLSSVTAADTAVYYCARNWVDQAWFAYWGQGTLVTVSS 225 >hu_4035_VH07 QVQLQESGPGLMKPSETLSLTCSVSGDSITIYDWHWIRQPPGKGLEWIGVVWSDGSTDYNPSLKSRVTISVDTSKNRFSLKLSSVTAADTAVYYCARNWVDQAWFAYWGQGTLVTVSS 226 >hu_4035_VH07 QVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGFSLTIYDVHWIRQPPGKGLEWIGVIWSDGSTDYNPSLKSRVTISKDNSKNQFSLKLSSVTAADTAVYYCARNWVDQAWFAYWGQGTLVTVSS 227 >hu_4035_VH09 QVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGFSLTIYDVHWIRQPPGKGLEWIGVIWSDGSTDYNPSLKSRVTISKDTSKNQVSLKLSSVTAADTAVYYCARNWVDQAWFAYWGQGTLVTVSS 262 >hu_4035_VH10 QVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGGSITIYDWHWVRQPPGKGLEWIGVIWSDGSTDYNPSLKSRVTISKDTSKNQFSLKLSSVTAADTAVYYCARNWVDQAWFAYWGQGTLVTVSS 263 >hu_4035_VH11 QVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGGSITIYDWHWVRQPPGKGLEWIGVIWSDGSTDYNPSLKSRVTISVDTSKNQFSLKLSSVTAADTAVYYCARNWVDQAWFAYWGQGTLVTVSS 264 >hu_4035_VH12 QVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGGSITIYDWHWIRQPPGKGLEWIGVIWSDGSTDYNPSLKSRVTISVDTSKNQFSLKLSSVTAADTAVYYCARNWVDQAWFAYWGQGTLVTVSS 265 >hu_4035_VL01 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASKNIYSYLAWYQQKPGKAPKLLIYNAKTLPEGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQHHYGTPLTFGQGTKLEIK 228 >hu_4035_VL02 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASKNIYSYLAWYQQKPGKAPKLLVYNAKTLPEGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQHHYGTPLTFGQGTKLEIK 229 >hu_4035_VL03 EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASKNIYSYLAWYQQKPGQAPRLLIYNAKTRATGIPARFSGSGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYYCQHHYGTPLTFGQGTKLEIK 230 >hu_4035_VL04 EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASKNIYSYLAWYQQKPGQAPRLLVYNAKTLPEGIPARFSGSGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYYCQHHYGTPLTFGQGTKLEIK 231 >hu_4035_VL05 EIVMTQSPATLSVSPGERATLSCRASKNIYSYLAWYQQKPGQAPRLLIYNAKTRATGIPARFSGSGSGTEFTLTISSLQSEDFAVYYCQHHYGTPLTFGGGTKVEIK 232 >hu_4035_VL06 DIQLTQSPSFLSASVGDRVTITCRASKNIYSYLAWYQQKPGKAPKLLIYNAKSLQSGVPSRFSGSGSGTEFTLTISSLQPEDFATYYCQHHYGTPLTFGGGTKLEIK 233 >hu_4035_VL07 DIQLTQSPSFLSASVGDRVTITCRASKNIYSYLAWYQQKPGKAPKLLIYNAKSLQSGVPSRFSGSGSGTEFTLTISSLQPEDFATYYCQHHYGTPLTFGGGTKLEIK 234 >hu_4237_VH01 QLQLQESGSGLVKPSQTLSLTCAVSGFSLTDYDVHWVRQPPGKGLEWIGVIWNDGSTDYNPSLISRVTISKDNSKNQVSLKLSSVTAADTAVYYCARNWYGGYWFAYWGQGTLVTVSS 235 >hu_4237_VH02 QLQLQESGSGLVKPSQTLSLTCAVSGGSITDYDWHWVRQPPGKGLEWIGVIWNDGSTDYNPSLISRVTISVDNSKNQFSLKLSSVTAADTAVYYCARNWYGGYWFAYWGQGTLVTVSS 236 >hu_4237_VH03 QVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCAASGFSFTDYDMHWVRQAPGKGLEWVAVIWNDGSTDYATSVIGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARNWYGGYWFAYWGQGTLVTVSS 237 >hu_4237_VH04 QVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCAASGFSFTDYDMHWVRQAPGKGLEWVGVIWNDGSTDYATSVIGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARNWYGGYWFAYWGQGTLVTVSS 238 >hu_4237_VH05 QVQLQESGPGLMKPSETLSLTCSVSGGSITDYDWHWIRQPPGKGLEWIGVVWNDGSTDYNPSLKSRVTISVDTSKNRFSLKLNSVTAADTAVYYCARNWYGGYWFAYWGQGILVTVSS 239 >hu_4237_VH06 QVTLKESGPALVKPTQTLTLTCTFSGFSLTDYDVHWIRQPPGKALEWLAVIWNDGSTDYSPSLKSRLTITKDTSKNQVVLTMTNMDPVDTATYYCARNWYGGYWFAYWGQGTLVTVSS 240 >hu_4237_VL01 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRSSENIYSYLAWYQQKPGKAPKLLVYNANALAEGVPSRFSGSGSVTDFTLTISSLQPEDFATYYCQHHYGTPFTFGQGTKLEIK 241 >hu_4237_VL02 DIQMTQSPSTLSASVGDRVTITCRSSENIYSYLAWYQQKPGKAPKLLVYNANALAEGVPSRFSGSGSVTEFTLTISSLQPDDFATYYCQHHYGTPFTFGQGTKLEIK 242 >hu_4237_VL03 EIVMTQSPATLSVSPGERATLSCRASENIYSYLAWYQQKPGQAPRLLIYNANASAEGIPARFSGSGSGTEFTLTISSLQSEDFAVYYCQQHYGTPFTFGGGTKVEIK 243 >hu_4237_VL04 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASENIYSYLAWYQQKPGKAPKLLLYNANRLESGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFASYYCQHHYGTPFTFGSGTKLEIK 244 >hu_4237_VL05 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASENIYSYLAWYQQKPGKAPKLLLYNANRLESGVPSRFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFASYYCQHHYGTPFTFGSGTKLEIK 245 >hu_3833_VH01 QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTNYWIGWVRQAPGQGLEWMGDIYPGGIGGGYTKYNEKFKGRVTMTADTSTSTAYMELRSLRSDDTAVYYCSRSETGRAMDYWGQGTLVTVSS 246 >hu_3833_VH02 QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTNYWIGWVRQAPGQGLEWMGDIYPGGIGGGYTKYAQKLQGRVTMTADTSTSTAYMELRSLRSDDTAVYYCSRSETGRAMDYWGQGTLVTVSS 247 >hu_3833_VH03 QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTNYWIGWVRQAPGQGLEWMGDIYPGGIGGGYTKYAQKFQGRVTMTADTSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCSRSETGRAMDYWGQGTLVTVSS 248 >hu_3833_VH04 QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTNYWIGWVRQAPGQGLEWMGDIYPGGIGGGYTKYNEKFKGRVTMTADTSTSTAYMELSSLRSEDTAVYFCSRSETGRAMDYWGQGTLVTVSS 249 >hu_3833_VH05 QVQLVQSGAELKRPGASVKVSCKASGYTFTNYWMGWVKQAPGQGLEWMGDIYPGGIGGGYTNYAQKFKGKATMTADTSSSTAYMQLSRLRSEDTAVYYCSRSETGRAMDYWGQGTLVTVSS 250 >hu_3833_VL01 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCQASQDINKYLAWYQQKPGKAPKLLIHYTSTLKPGVPSRFSGSGSGTDFTFTISSLQPEDIATYYCLQYDNLNTFGGGTKLEIK 251 >hu_3833_VL02 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCKASQDINKYIAWYQQKPGKAPKLLIHYTSTLKPGVPSRFSGSGSGRDYTFTISSLQPEDIATYYCLQYDNLNTFGGGTKLEIK 252 >hu_3833_VL03 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCQASQDINKYLAWYQQKPGKAPKLLIYYTSTLETGVPSRFSGSGSGTDFTFSISSLQPEDIATYYCLQYDNLNTFGGGTKLEIK 253 >hu_4540_VH01 QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFADYYINWVRQAPGKGLEWMGWIFPGSGSTYYNEKFKGRVTMTVDKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYFCARGDSGRAMDYWGQGTLVTVSS 254 >hu_4540_VH02 QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFADYYMNWVRQAPGQGLEWMGWIFPGSGSTYYAEKFKGRVTSTRDTSISTAYMELSRLRSDDTVVYYCARGDSGRAMDYWGQGTLVTVSS 255 >hu_4540_VH03 QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFADYYINWVRQAPGQGLEWMGWIFPGSGSTYYAQKLQGRVTMTTDTSTSTAYMELRSLRSDDTAVYYCARGDSGRAMDYWGQGTLVTVSS 256 >hu_4540_VH04 QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFADYYINWVRQAPGQGLEWMGWIFPGSGSTYYAQKLQGRVTMTVDKSSSTAYMELRSLRSDDTAVYYCARGDSGRAMDYWGQGTLVTVSS 257 >hu_4540_VH05 QVQLVQSGAELKKPGASVKVSCKASGYTFADYYMNWVRQAPGQGLEWMGWIFPGSGSTYYNQKFQGRVTMTVDKSSSTAYMELSRLRSDDTAVYYCARGDSGRAMDYWGQGTLVTVSS 258 >hu_4540_VL01 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCKASQDINKYIAWYQQKPGKAPKLLIHYTSTLQSGVPSRFSGSGSGTDFTFTISSLQPEDIATYYCLQYDNLLTFGQGTKLEIK 259 >hu_4540_VL02 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCKASQDINKYIAWYQHKPGKAPKLLIHYTSTLQSGVPSRFSGSGSGRDYTFTISSLQPEDIATYYCLQYDNLLTFGQGTKLEIK 260 >hu_4540_VL03 DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCQASQDINKYLAWYQHKPGKAPKLLIHYTSTLETGVPSRFSGSGSGTDFTFTISSLQPEDIATYYCLQYDNLLTFGGGTKVEIK 261

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит одну, две или три CDR VH-области молекулы антитела, описанной в настоящем документе, например, в Таблице 1 или 5 (например, любое из моноклональных антител 2218, 2419, 2419-0105, 2419- 0205, 2419-0206, 2419-0406, 2419-0605, 2419-0805, 2419-0806, 2419-1204, 2419-1205, 2419-1210, 2419-1305, 2419-1306, 2419-1310, 2419-1406, 2922, 3327, 3530, 3525, 3125, 2621, 4035, 4035-062, 3934, 3833, 3631, 3732, 4338, 4540, 4540-063, 4540-033, 4439, 4439 или 4237), используя определения CDR Kabat или Chothia. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит одну, две или три CDR VL-области молекулы антитела, описанной в настоящем документе, например, в Таблице 1 или 5 (например, любое из моноклональных антител 2218, 2419, 2419-0105, 2419- 0205, 2419-0206, 2419-0406, 2419-0605, 2419-0805, 2419-0806, 2419-1204, 2419-1205, 2419-1210, 2419-1305, 2419-1306, 2419-1310, 2419-1406, 2922, 3327, 3530, 3525, 3125, 2621, 4035, 4035-062, 3934, 3833, 3631, 3732, 4338, 4540, 4540-063, 4540-033, 4439, 4439 или 4237), используя определения CDR Kabat или Chothia. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит одну или более (например, две или три) CDR VH-области и/или одну или более (например, две или три) CDR VL-области молекулы антитела, описанной в настоящем документе, например, в Таблице 1 или 5 (например, любое из моноклональных антител 2218, 2419, 2419-0105, 2419-0205, 2419-0206, 2419-0406, 2419-0605, 2419-0805, 2419-0806, 2419-1204, 2419- 1205, 2419-1210, 2419-1305, 2419-1306, 2419-1310, 2419-1406, 2922, 3327, 3530, 3525, 3125, 2621, 4035, 4035-062, 3934, 3833, 3631, 3732, 4338, 4540, 4540-063, 4540-033, 4439, 4439 или 4237), используя определения CDR Kabat или Chothia.

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит одну, две или три VH CDR, описанных в Таблице 1 или 5. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит одну, две или три VL CDR, описанных в Таблице 1 или 5. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит одну или более (например, две или три) VH CDR и/или одну или более (например, две или три) VL CDR, описанных в Таблице 1 или 5.

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит одну, две, три или четыре каркасных области VH молекулы антитела, описанного в Таблице 1 или 5 (например, любого из моноклональных антител 2218, 2419, 2419-0105, 2419-0205, 2419-0206, 2419-0406, 2419-0605, 2419-0805, 2419-0806, 2419-1204, 2419-1205, 2419-1210, 2419-1305, 2419-1306, 2419-1310, 2419-1406, 2922, 3327, 3530, 3525, 3125, 2621, 4035, 4035-062, 3934, 3833, 3631, 3732, 4338, 4540, 4540-063, 4540-033, 4439, 4439 или 4237). В одном варианте осуществления молекула антитела содержит одну, две, три или четыре каркасных области VL молекулы антитела, описанного в Таблице 1 или 5 (например, любого из моноклональных антител 2218, 2419, 2419-0105, 2419-0205, 2419-0206, 2419-0406, 2419-0605, 2419-0805, 2419-0806, 2419-1204, 2419-1205, 2419-1210, 2419-1305, 2419-1306, 2419-1310, 2419-1406, 2922, 3327, 3530, 3525, 3125, 2621, 4035, 4035-062, 3934, 3833, 3631, 3732, 4338, 4540, 4540-063, 4540-033, 4439, 4439 или 4237). В одном варианте осуществления молекула антитела содержит одну или более (например, две, три или четыре) каркасных области VH и/или одну или более (например, две, три или четыре) каркасных области VL молекулы антитела, описанного в Таблице 1 или 5 (например, любого из моноклональных антител 2218, 2419, 2419-0105, 2419-0205, 2419-0206, 2419-0406, 2419-0605, 2419-0805, 2419-0806, 2419-1204, 2419-1205, 2419-1210, 2419-1305, 2419-1306, 2419-1310, 2419-1406, 2922, 3327, 3530, 3525, 3125, 2621, 4035, 4035-062, 3934, 3833, 3631, 3732, 4338, 4540, 4540-063, 4540-033, 4439 или 4237).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит вариабельную область тяжелой цепи молекулы антитела, описанного в настоящем документе, например, в Таблице 1 или 5 (например, любого из моноклональных антител 2218, 2419, 2419-0105, 2419-0205, 2419-0206, 2419-0406, 2419-0605, 2419-0805, 2419-0806, 2419-1204, 2419-1205, 2419-1210, 2419-1305, 2419-1306, 2419-1310, 2419-1406, 2922, 3327, 3530, 3525, 3125, 2621, 4035, 4035-062, 3934, 3833, 3631, 3732, 4338, 4540, 4540-063, 4540-033, 4439 или 4237). В одном варианте осуществления молекула антитела содержит вариабельную область легкой цепи молекулы антитела, описанного в настоящем документе, например, в Таблице 1 или 5 (например, любого из моноклональных антител 2218, 2419, 2419-0105, 2419-0205, 2419-0206, 2419-0406, 2419-0605, 2419-0805, 2419-0806, 2419-1204, 2419-1205, 2419-1210, 2419-1305, 2419-1306, 2419-1310, 2419-1406, 2922, 3327, 3530, 3525, 3125, 2621, 4035, 4035-062, 3934, 3833, 3631, 3732, 4338, 4540, 4540-063, 4540-033, 4439 или 4237). В одном варианте осуществления молекула антитела содержит вариабельную область тяжелой цепи и вариабельную область легкой цепи молекулы антитела, описанного в настоящем документе, например, в Таблице 1 или 5 (например, любого из моноклональных антител 2218, 2419, 2419-0105, 2419- 0205, 2419-0206, 2419-0406, 2419-0605, 2419-0805, 2419-0806, 2419-1204, 2419-1205, 2419-1210, 2419-1305, 2419-1306, 2419-1310, 2419-1406, 2922, 3327, 3530, 3525, 3125, 2621, 4035, 4035-062, 3934, 3833, 3631, 3732, 4338, 4540, 4540-063, 4540-033, 4439 или 4237).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит вариабельную область тяжелой цепи, имеющую аминокислотную последовательность, описанную в Таблице 1 или 5, или аминокислотную последовательность, по существу, идентичную ей. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит вариабельную область легкой цепи, имеющую аминокислотную последовательность, описанную в Таблице 1 или 5, или аминокислотную последовательность, по существу, идентичную ей. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит вариабельную область тяжелой цепи, имеющую аминокислотную последовательность, описанную в Таблице 1 или 5 (или ее аминокислотную последовательность, по существу идентичную ей) и вариабельный участок легкой цепи, имеющий аминокислотные последовательности, описанные в таблице 1 или 5 (или аминокислотная последовательность, по существу идентичная им).

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит вариабельную область тяжелой цепи, кодируемую нуклеотидной последовательностью, описанной в Таблице 2, или нуклеотидной последовательностью, по существу, идентичной ей. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит вариабельную область легкой цепи, кодируемую нуклеотидной последовательностью, описанной в Таблице 2, или нуклеотидной последовательностью, по существу, идентичной ей. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит вариабельную область тяжелой цепи, кодируемую нуклеотидной последовательностью, описанной в Таблице 2 (или нуклеотидной последовательностью, по существу идентичной ей), и вариабельную область легкой цепи, кодируемую нуклеотидной последовательностью, описанной в Таблице 2 (или нуклеотидной последовательностью, по существу, идентичной ей).

В одном варианте осуществления молекула антитела дополнительно содержит константную область тяжелой цепи. В одном варианте осуществления константная область тяжелой цепи представляет собой константную область IgG1, например, любую из SEQ ID NO: 320-322 или ее функциональную часть. В другом варианте осуществления константная область тяжелой цепи представляет собой константную область IgG2, например, любую из SEQ ID NO: 323-326 или ее функциональную часть. В одном варианте осуществления молекула антитела дополнительно содержит константную область легкой цепи. В одном варианте осуществления молекула антитела дополнительно содержит константную область тяжелой цепи и константную область легкой цепи. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит константную область тяжелой цепи, константную область легкой цепи и вариабельные области тяжелой и легкой цепей молекул антител, описанных в Таблице 1 или 5. В некоторых вариантах осуществления молекула антитела содержит константную область тяжелой цепи, константную область легкой цепи и вариабельные области, которые содержат одну, две, три, четыре, пять или шесть CDR молекулы антитела, описанной в Таблице 1 или 5.

Иллюстративные константные области тяжелой цепи описаны ниже.

Иллюстративные константные области IgG1

> IGHG1 * 01

STKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSP (SEQ ID NO: 320)

> IGHG1 * 03

ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSP (SEQ ID NO: 321)

> IGHG1 * 04

ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNIFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSP (SEQ ID NO: 322)

Иллюстративные константные области IgG2

> IGHG2 * 01

STKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSNFGTQTYTCNVDHKPSNTKVDKTVERKCCVECPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTFRVVSVLTVVHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPAPIEKTISKTKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPMLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSP (SEQ ID NO: 323)

> IGHG2 * 02

STKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVTSSNFGTQTYTCNVDHKPSNTKVDKTVERKCCVECPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVQFNWYVDGMEVHNAKTKPREEQFNSTFRVVSVLTVVHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPAPIEKTISKTKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPMLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSP (SEQ ID NO: 324)

> IGHG2 * 04

STKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYTCNVDHKPSNTKVDKTVERKCCVECPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTFRVVSVLTVVHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPAPIEKTISKTKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPMLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSP (SEQ ID NO: 325)

> IGHG2 * 06

STKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSNFGTQTYTCNVDHKPSNTKVDKTVERKCCVECPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTFRVVSVLTVVHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPAPIEKTISKTKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDISVEWESNGQPENNYKTTPPMLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSP (SEQ ID NO: 326)

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит один или оба из следующего:

(i) вариабельной области тяжелой цепи (VH), где вариабельная область тяжелой цепи содержит три области, определяющие комплементарность тяжелой цепи (HCDR1, HCDR2 и HCDR3), где вариабельная область тяжелой цепи содержит один, два или все из следующего: HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 11; HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 12; или HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 13, или

(ii) вариабельной области легкой цепи (VL), где вариабельная область легкой цепи содержит три области, определяющие комплементарность легкой цепи (LCDR1, LCDR2 и LCDR3), где вариабельная область легкой цепи содержит один, два или все из следующего: LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 SEQ ID NO: 280; LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 285; или LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 16.

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит:

(i) вариабельную область тяжелой цепи (VH), где вариабельная область тяжелой цепи содержит три области, определяющие комплементарность тяжелой цепи (HCDR1, HCDR2 и HCDR3), где вариабельная область тяжелой цепи содержит: HCDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 11; HCDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 12; и HCDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 13 и

(ii) вариабельную область легкой цепи (VL), где вариабельная область легкой цепи содержит три области, определяющие комплементарность легкой цепи (LCDR1, LCDR2 и LCDR3), где вариабельная область легкой цепи содержит: LCDR1, содержащую аминокислотную последовательность LCDR1 SEQ ID NO: 280; LCDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 285; или LCDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 16.

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит один или оба из следующего:

(i) вариабельной области тяжелой цепи (VH), где вариабельная область тяжелой цепи содержит три области, определяющие комплементарность тяжелой цепи (HCDR1, HCDR2 и HCDR3), где вариабельная область тяжелой цепи содержит один, два или все из следующего: HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 17; HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 282; или HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 13, или

(ii) вариабельной области легкой цепи (VL), где вариабельная область легкой цепи содержит три области, определяющие комплементарность легкой цепи (LCDR1, LCDR2 и LCDR3), где вариабельная область легкой цепи содержит один, два или все из следующего: LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 280; LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 285; или LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 16.

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит:

(i) вариабельную область тяжелой цепи (VH), где вариабельная область тяжелой цепи содержит три области, определяющие комплементарность тяжелой цепи (HCDR1, HCDR2 и HCDR3), где вариабельная область тяжелой цепи содержит: HCDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 17; HCDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 282; и HCDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 13 и

(ii) вариабельную область легкой цепи (VL), где вариабельная область легкой цепи содержит три области, определяющие комплементарность легкой цепи (LCDR1, LCDR2 и LCDR3), где вариабельная область легкой цепи содержит: LCDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 280; LCDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 285; или LCDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 16.

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 296. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VL, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 286. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 296 и VL, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 286.

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, кодируемую нуклеиновой кислотой, содержащей нуклеотидную последовательность SEQ ID NO: 313. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VL, кодируемую нуклеиновой кислотой, содержащей нуклеотидную последовательность SEQ ID NO: 306. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, кодируемую нуклеиновой кислотой, содержащей нуклеотидную последовательность SEQ ID NO: 313, и VL, кодируемую нуклеиновой кислотой, содержащей нуклеотидную последовательность SEQ ID NO: 306.

В одном варианте осуществления молекула антитела дополнительно содержит константную область тяжелой цепи IgG2, например, любую из SEQ ID NO: 323-326.

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит один или оба из следующего:

(i) вариабельной области тяжелой цепи (VH), где вариабельная область тяжелой цепи содержит три области, определяющие комплементарность тяжелой цепи (HCDR1, HCDR2 и HCDR3), где вариабельная область тяжелой цепи содержит один, два или все из следующего: HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 11; HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 12; или HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 13, или

(ii) вариабельной области легкой цепи (VL), где вариабельная область легкой цепи содержит три области, определяющие комплементарность легкой цепи (LCDR1, LCDR2 и LCDR3), где вариабельная область легкой цепи содержит один, два или все из следующего: LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 SEQ ID NO: 280; LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 285; или LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 16.

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит:

(i) вариабельную область тяжелой цепи (VH), где вариабельная область тяжелой цепи содержит три области, определяющие комплементарность тяжелой цепи (HCDR1, HCDR2 и HCDR3), где вариабельная область тяжелой цепи содержит: HCDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 11; HCDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 12; и HCDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 13 и

(ii) вариабельную область легкой цепи (VL), где вариабельная область легкой цепи содержит три области, определяющие комплементарность легкой цепи (LCDR1, LCDR2 и LCDR3), где вариабельная область легкой цепи содержит: LCDR1, содержащую аминокислотную последовательность LCDR1 SEQ ID NO: 280; LCDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 285; или LCDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 16.

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит один или оба из следующего:

(i) вариабельной области тяжелой цепи (VH), где вариабельная область тяжелой цепи содержит три области, определяющие комплементарность тяжелой цепи (HCDR1, HCDR2 и HCDR3), где вариабельная область тяжелой цепи содержит один, два или все из следующего: HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 17; HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 282; или HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 13, или

(ii) вариабельной области легкой цепи (VL), где вариабельная область легкой цепи содержит три области, определяющие комплементарность легкой цепи (LCDR1, LCDR2 и LCDR3), где вариабельная область легкой цепи содержит один, два или все из следующего: LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 280; LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 285; или LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 16.

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит:

(i) вариабельную область тяжелой цепи (VH), где вариабельная область тяжелой цепи содержит три области, определяющие комплементарность тяжелой цепи (HCDR1, HCDR2 и HCDR3), где вариабельная область тяжелой цепи содержит: HCDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 17; HCDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 282; и HCDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 13 и

(ii) вариабельную область легкой цепи (VL), где вариабельная область легкой цепи содержит три области, определяющие комплементарность легкой цепи (LCDR1, LCDR2 и LCDR3), где вариабельная область легкой цепи содержит: LCDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 280; LCDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 285; или LCDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 16.

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 289. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VL, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 286. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 289 и VL, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 286.

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, кодируемую нуклеиновой кислотой, содержащей нуклеотидную последовательность SEQ ID NO: 308. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VL, кодируемую нуклеиновой кислотой, содержащей нуклеотидную последовательность SEQ ID NO: 305. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, кодируемую нуклеиновой кислотой, содержащей нуклеотидную последовательность SEQ ID NO: 308 и VL, кодируемую нуклеиновой кислотой, содержащей нуклеотидную последовательность SEQ ID NO: 306.

В одном варианте осуществления молекула антитела дополнительно содержит константную область тяжелой цепи IgG2, например, любую из SEQ ID NO: 323-326.

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит один или оба из следующего:

(i) вариабельной области тяжелой цепи (VH), где вариабельная область тяжелой цепи содержит три области, определяющие комплементарность тяжелой цепи (HCDR1, HCDR2 и HCDR3), где вариабельная область тяжелой цепи содержит один, два или все из следующего: HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 11; HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 12; или HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 13, или

(ii) вариабельной области легкой цепи (VL), где вариабельная область легкой цепи содержит три области, определяющие комплементарность легкой цепи (LCDR1, LCDR2 и LCDR3), где вариабельная область легкой цепи содержит один, два или все из следующего: LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 SEQ ID NO: 280; LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 281; или LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 16.

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит:

(i) вариабельную область тяжелой цепи (VH), где вариабельная область тяжелой цепи содержит три области, определяющие комплементарность тяжелой цепи (HCDR1, HCDR2 и HCDR3), где вариабельная область тяжелой цепи содержит: HCDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 11; HCDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 12; и HCDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 13 и

(ii) вариабельную область легкой цепи (VL), где вариабельная область легкой цепи содержит три области, определяющие комплементарность легкой цепи (LCDR1, LCDR2 и LCDR3), где вариабельная область легкой цепи содержит: LCDR1, содержащую аминокислотную последовательность LCDR1 SEQ ID NO: 280; LCDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 281; или LCDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 16.

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит один или оба из следующего:

(i) вариабельной области тяжелой цепи (VH), где вариабельная область тяжелой цепи содержит три области, определяющие комплементарность тяжелой цепи (HCDR1, HCDR2 и HCDR3), где вариабельная область тяжелой цепи содержит один, два или все из следующего: HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 17; HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 282; или HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 13, или

(ii) вариабельной области легкой цепи (VL), где вариабельная область легкой цепи содержит три области, определяющие комплементарность легкой цепи (LCDR1, LCDR2 и LCDR3), где вариабельная область легкой цепи содержит один, два или все из следующего: LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 280; LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 281; или LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 16.

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит:

(i) вариабельную область тяжелой цепи (VH), где вариабельная область тяжелой цепи содержит три области, определяющие комплементарность тяжелой цепи (HCDR1, HCDR2 и HCDR3), где вариабельная область тяжелой цепи содержит: HCDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 17; HCDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 282; и HCDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 13 и

(ii) вариабельную область легкой цепи (VL), где вариабельная область легкой цепи содержит три области, определяющие комплементарность легкой цепи (LCDR1, LCDR2 и LCDR3), где вариабельная область легкой цепи содержит: LCDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 280; LCDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 281; или LCDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 16.

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 289. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VL, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 284. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 289 и VL, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 284.

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, кодируемую нуклеиновой кислотой, содержащей нуклеотидную последовательность SEQ ID NO: 308. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VL, кодируемую нуклеиновой кислотой, содержащей нуклеотидную последовательность SEQ ID NO: 305. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, кодируемую нуклеиновой кислотой, содержащей нуклеотидную последовательность SEQ ID NO: 308 и VL, кодируемую нуклеиновой кислотой, содержащей нуклеотидную последовательность SEQ ID NO: 305.

В одном варианте осуществления молекула антитела дополнительно содержит константную область тяжелой цепи IgG2, например, любую из SEQ ID NO: 323-326.

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит один или оба из следующего:

(i) вариабельной области тяжелой цепи (VH), где вариабельная область тяжелой цепи содержит три области, определяющие комплементарность тяжелой цепи (HCDR1, HCDR2 и HCDR3), где вариабельная область тяжелой цепи содержит один, два или все из следующего: HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 93; HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 94; или HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 95, или

(ii) вариабельной области легкой цепи (VL), где вариабельная область легкой цепи содержит три области, определяющие комплементарность легкой цепи (LCDR1, LCDR2 и LCDR3), где вариабельная область легкой цепи содержит один, два или все из следующего: LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью LCDR1 SEQ ID NO: 96; LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 97; или LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 98.

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит:

(i) вариабельную область тяжелой цепи (VH), где вариабельная область тяжелой цепи содержит три области, определяющие комплементарность тяжелой цепи (HCDR1, HCDR2 и HCDR3), где вариабельная область тяжелой цепи содержит: HCDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 93; HCDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 94; и HCDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 95 и

(ii) вариабельную область легкой цепи (VL), где вариабельная область легкой цепи содержит три области, определяющие комплементарность легкой цепи (LCDR1, LCDR2 и LCDR3), где вариабельная область легкой цепи содержит: LCDR1, содержащую аминокислотную последовательность LCDR1 SEQ ID NO: 96; LCDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 97; или LCDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 98.

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит один или оба из следующего:

(i) вариабельной области тяжелой цепи (VH), где вариабельная область тяжелой цепи содержит три области, определяющие комплементарность тяжелой цепи (HCDR1, HCDR2 и HCDR3), где вариабельная область тяжелой цепи содержит один, два или все из следующего: HCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 99; HCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 273; или HCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 95, или

(ii) вариабельной области легкой цепи (VL), где вариабельная область легкой цепи содержит три области, определяющие комплементарность легкой цепи (LCDR1, LCDR2 и LCDR3), где вариабельная область легкой цепи содержит один, два или все из следующего: LCDR1, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 96; LCDR2, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 97; или LCDR3, содержащей аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2 или 3 аминокислотных остатка или имеет по меньшей мере 85, 90, 95, 99 или 100% гомологии с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 98.

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит:

(i) вариабельную область тяжелой цепи (VH), где вариабельная область тяжелой цепи содержит три области, определяющие комплементарность тяжелой цепи (HCDR1, HCDR2 и HCDR3), где вариабельная область тяжелой цепи содержит: HCDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 99; HCDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 273; и HCDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 95 и

(ii) вариабельную область легкой цепи (VL), где вариабельная область легкой цепи содержит три области, определяющие комплементарность легкой цепи (LCDR1, LCDR2 и LCDR3), где вариабельная область легкой цепи содержит: LCDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 96; LCDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 97; или LCDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 98.

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 225. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VL, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 229. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 225 и VL, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 229.

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, кодируемую нуклеиновой кислотой, содержащей нуклеотидную последовательность SEQ ID NO: 299. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VL, кодируемую нуклеиновой кислотой, содержащей нуклеотидную последовательность SEQ ID NO: 300. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, кодируемую нуклеиновой кислотой, содержащей нуклеотидную последовательность SEQ ID NO: 299 и VL, кодируемую нуклеиновой кислотой, содержащей нуклеотидную последовательность SEQ ID NO: 300.

В одном варианте осуществления молекула антитела дополнительно содержит константную область тяжелой цепи IgG1, например, любой из SEQ ID NO: 320-322.

В одном варианте осуществления молекула антитела, описанная в настоящем документе, имеет одно или более (например, 2, 3, 4, 5 или все) из следующих свойств: (а) представляет собой молекулу гуманизированного антитела; (b) связывается с человеческим APRIL при EC₅₀ 60 пМ или менее, как определено ИФА; (c) ингибирует связывание человеческого APRIL с TACI, например in vitro, при IC₅₀ 0,5 нМ или менее; (d) ингибирует связывание человеческого APRIL с BCMI, например in vitro, при IC₅₀ 0,6 нМ или менее; (e) представляет собой n IgG2κ; или (f) имеет Fc-область, сконструированную для уменьшения активации комплемента.В одном варианте осуществления молекула антитела содержит одну или более (например, 2, 3, 4, 5 или все) CDR, одну или обе из вариабельной области тяжелой цепи или вариабельной области легкой цепи или одну или обе из тяжелой цепи или легкой цепи любой из молекул антител 2419-1406, 2419-0205 или 2419-0206.В одном варианте осуществления молекула антитела подходит для использования при лечении расстройства в почках, например, IgA-нефропатии. В другом варианте осуществления молекула антитела подходит для использования при лечении злокачественного новообразования, например множественной миеломы.

В одном варианте осуществления молекула антитела, описанная в настоящем документе, обладает одним или более (например, 2, 3, 4, 5 или всеми) из следующих свойств: (а) представляет собой молекулу гуманизированного антитела; (b) связывается с человеческим APRIL при EC50 50 пМ или менее, как определено ИФА; (c) ингибирует связывание человеческого APRIL с TACI, например in vitro, при IC₅₀ 0,3 нМ или менее; (d) ингибирует связывание человеческого APRIL с BCMA, например in vitro, при IC₅₀ 0,2 нМ или менее; (e) представляет собой IgG1κ; или (f) имеет более высокую активность нейтрализации BCMA, например, имеет IC₅₀ 0,1 нМ или менее.В одном варианте осуществления молекула антитела содержит один или более (например, 2, 3, 4, 5 или все) CDR, одну или обе из вариабельной области тяжелой цепи или вариабельной области легкой цепи или одну или обе из тяжелой цепи или легкой цепи молекулы антитела 4035-062.В одном варианте осуществления молекула антитела подходит для использования при лечении злокачественного новообразования или аутоиммунного расстройства.

Молекулы антител, описанные в настоящем документе, могут иметь несколько преимущественных свойств. Например, молекулы антитела могут быть использованы для эффективного лечения, предотвращения или диагностики расстройства, ассоциириованного с APRIL, например, описанного в настоящем документе расстройства, например IgA-нефропатии.

В одном варианте осуществления молекула антитела способна связываться или по существу связываться с человеческим APRIL и мышиным APRIL. В одном варианте осуществления молекула антитела способна связываться или по существу связываться с человеческим APRIL, но не может связываться или по существу не может связываться с мышиным APRIL. В одном варианте осуществления молекула антитела связывается с APRIL с высокой аффинностью, например, с константой диссоциации (KD) менее чем примерно 100 нМ, как правило примерно 10 нМ и более типично, примерно 10-0,001 нМ, примерно 10-0,01 нМ, примерно 10-0,01 нМ, примерно 5-0,01 нМ, примерно 3-0,05 нМ, примерно 1-0,1 нМ или более, например, менее чем примерно 80, 70, 60, 50, 40, 30, 20, 10, 8, 6, 4, 3, 2, 1, 0,5, 0,2, 0,1, 0,05, 0,01, 0,005 или 0,001 нМ. В одном варианте осуществления молекула антитела связывается с APRIL с Koff медленнее, чем 1×10^-4, 5×10^-5 или 1×10^-5 с^-1. В одном варианте осуществления молекула антитела связывается с APRIL с Kon быстрее, чем 1×10⁴, 5×10⁴, 1×10⁵ или 5×10⁵ M^-1с^-1.

В одном варианте осуществления молекула антитела способна ингибировать или по существу ингибировать связывание человеческого APRIL с TACI. В одном варианте осуществления молекула антитела способна ингибировать или по существу ингибировать связывание человеческого APRIL с TACI. В одном варианте осуществления молекула антитела способна ингибировать или по существу ингибировать связывание человеческого APRIL с BCMA. В одном варианте осуществления молекула антитела способна ингибировать или по существу ингибировать связывание человеческого APRIL с TACI и BCMA. В одном варианте осуществления молекула антитела способна ингибировать или по существу ингибировать связывание человеческого APRIL с TACI, но не способна ингибировать или по существу ингибировать связывание человеческого APRIL с BCMA. В одном варианте осуществления молекула антитела способна ингибировать или по существу ингибировать связывание человеческого APRIL с BCMA, но не способна ингибировать или существенно ингибировать связывание человеческого APRIL с TACI.

В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует связывание человеческого APRIL с человеческим TACI на 50% или более, например 60% или более, 70% или более, 80% или более, 85% или более, 90% или более, 95% или более, 96% или более, 97% или более, 98% или более, 99% или более или на 100%, как определено описанным в настоящем документе способом (например, нормализовано без контроля антител).

В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует связывание человеческого APRIL с человеческим BCMA на 30% или более, например 40% или более, 50% или более, 60% или более, 70% или более, 80% или более, 85% или более, 90% или более, 95% или более, 96% или более, 97% или более, 98% или более, 99% или более или 100%, как определено описанным в настоящем документе способом (например, нормализовано без контроля антител).

В одном варианте осуществления молекула антитела по существу не ингибирует связывание человеческого APRIL с человеческим BCMA, например, ингибирует связывание человеческого APRIL с человеческим BCMA менее чем на 10%, как определено описанным в настоящем документе способом (например, нормализовано без контроля антитела).

В одном варианте осуществления молекула антитела связывается с линейным или конформационным эпитопом на APRIL. В одном варианте осуществления молекула антитела связывается с эпитопом, консервативным между человеческим APRIL и мышиным APRIL. В одном варианте осуществления молекула антитела связывается с описанным в настоящем документе эпитопом. В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с тем же, аналогичным или перекрывающимся эпитопом на APRIL, в качестве второй молекулы антитела (например, моноклональное антитело, описанное в Таблице 1 или 5). В одном варианте осуществления молекула антитела конкурирует со второй молекулой антитела (например, моноклонального антитела, описанного в Таблице 1 или 5) за связывание с APRIL.

В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с одним или более, например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25 или более, остатками в пределах области APRIL, как определено в Таблице 3. В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с эпитопом, который содержит или состоит из одного или более, например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25 или всех остатков человеческого APRIL из Таблицы 3. В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с эпитопом, который перекрывает эпитоп, который содержит или состоит из всех остатков человеческого APRIL из Таблицы 3. В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с эпитопом, который содержит остатки APRIL из двух мономеров, например один или более остатков из мономера А и мономера В, как показано в Таблице 3.

В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с одним или более, например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 или более остатками в области APRIL, как определено в Таблице 4. В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с эпитопом, который содержит или состоит из одного или более, например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 или всех остатков человеческого APRIL из Таблицы 4. В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с эпитопом, который перекрывает эпитоп, который содержит или состоит из всех остатков человеческого APRIL из Таблицы 4. В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с эпитопом, который содержит один или более остатков APRIL из петли C-D (например, петля, соединяющая β-листы C и D), петли G-H (например, петля, соединяющая β-листы G и H) или из обеих.

В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с одним или более (например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 или со всеми) остатками человеческого APRIL положений 105-114 и/или с одним или более (например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 или со всеми) остатками мышиного APRIL положений 96-105.

В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с одним или более, например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17 или более, остатками в пределах области APRIL, как определено в Таблице 7. В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с эпитопом, который содержит или состоит из одного или более, например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17 или всех остатков человеческого APRIL из Таблицы 7. В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с эпитопом, который перекрывает эпитоп, который содержит или состоит из всех остатков человеческого APRIL из Таблицы 7.

В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с одним или более, например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25 или более, остатками в пределах области APRIL, как определено в Таблице 8. В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с эпитопом, который содержит или состоит из одного или более, например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25 или всех остатков человеческого APRIL из Таблицы 8. В одном варианте осуществления молекула антитела связывается или по существу связывается с эпитопом, который перекрывает эпитоп, который содержит или состоит из всех остатков человеческого APRIL из Таблицы 8.

В варианте осуществления эпитоп представляет собой конформационный эпитоп.

В одном варианте осуществления молекула антитела не связывается или по существу не связывается с одним, двумя или со всеми из Asp129, Arg233 или His203 человеческого APRIL.

В одном варианте связывание молекулы антитела с APRIL (например, с человеческим APRIL) ингибирует или по существу ингибирует связывание CRD2-домена TACI (например, человеческого TACI) с APRIL (например, человеческим APRIL). В другом варианте осуществления связывание молекулы антитела с человеческим APRIL ингибирует или по существу ингибирует связывание человеческого TACI с одним или более, например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25 или со всеми остатками APRIL из Таблицы 3. В еще одном варианте осуществления связывание молекулы антитела с человеческим APRIL ингибирует или по существу ингибирует связывание человеческого TACI с одним или более, например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, или со всеми остатками человеческого APRIL из Таблицы 4. Еще в одном варианте осуществления связывание молекулы антитела с человеческим APRIL ингибирует или по существу ингибирует связывание человеческого TACI с одним или более, например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17 или со всеми остатками человеческого APRIL из Таблицы 7. Еще в одном варианте осуществления связывание молекулы антитела с человеческим APRIL ингибирует или по существу ингибирует связывание человеческого TACI с одним или более, например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25 или со всеми остатками человеческого APRIL из Таблицы 8.

Животные модели

Молекулы антител, описанные в настоящем документе, могут быть оценены in vivo, например, с использованием различных животных моделей. Например, животная модель может быть использована для тестирования эффективности молекулы антитела, описанной в настоящем документе, в ингибировании APRIL и/или при лечении или предотвращении описанного в настоящем документе расстройства, например IgA-нефропатии. Животные модели также можно использовать, например, для исследования побочных эффектов, измерения концентрации молекул антител in situ, демонстрации корреляции между функцией APRIL и описанным в настоящем документе расстройством (например, IgA-нефропатией).

Иллюстративные животные модели для IgA-нефропатии, которые могут быть использованы для оценки молекулы антитела, описанной в настоящем документе, включают, но не ограничиваются ими, мышиную модель ddY для спонтанного IgA-нефрита (Imai et al. Kidney Int. 1985; 27 (5): 756-761); мышиную модель с использованием инертных белков или обычного вирусного патогена в качестве стимулирующего антигена (Emancipator et al. Curr. Protoc. Immunol. 2001 May; Chapter 15: Unit 15.11), крысиную модель с неинфекционными белковыми антигенами (Emancipator et al. Curr. Protoc. Immunol. 2001 May; Chapter 15: Unit 15.11); хроническую мышиную модель IgA-нефропатии, ассоциированной с иммунным комплексом (Montinaro et al. Nephrol. Dial. Transplant. 1995; 10(11): 2035-2042); мышь Gne M712T в качестве модели человеческой гломерулопатии (Kakani et al. Am. J. Pathol. 2012; 180 (4): 1431-1440); мышиную IgA-нефропатию с гибридным белком MBP-20 (Zhang et al. Anat. Rec. (Hoboken). 2010; 293 (10): 1729-1737); и мышиную модель для IgA-нефрита, ассоциированного с иммунным комплексом (Rifai et al. J Exp Med. 1979; 150 (5): 1161-1173). Другие животные модели для IgA-нефропатии описаны, например, в Tomino et al. J. Nephrol. 2008; 21(4):463-467; Endo Ren. Fail. 1997; 19(3):347-371; и Rifai Kidney Int. 1987; 31(1):1-7.

Иллюстративные животные модели для других расстройств, описанных в настоящем документе, также известны в данной области. Иллюстративные типы животных, которые могут быть использованы для оценки молекул антител, описанных в настоящем документе, включают, но не ограничиваются ими, мышей, крыс, кроликов, морских свинок и обезьян.

Фармацевтические композиции и наборы

В некоторых аспектах настоящее раскрытие содержит композиции, например фармацевтически приемлемые композиции, которые включают описанную в настоящем документе молекулу антитела (например, описанную в настоящем документе гуманизированную молекулу антитела), приготовленную вместе с фармацевтически приемлемым носителем.

Используемый в настоящем описании термин «фармацевтически приемлемый носитель» включает любые и все растворители, дисперсионные среды, изотонические и замедляющие абсорбцию агенты и тому подобное, которые являются физиологически совместимыми. Носитель может быть подходящим для внутривенного, внутримышечного, подкожного, парентерального, ректального, спинного или эпидермального введения (например, путем инъекции или инфузии). В некоторых вариантах осуществления в качестве агрегатов присутствуют менее чем примерно 5%, например, менее чем примерно 4%, 3%, 2% или 1% молекул антитела в фармацевтической композиции. В других вариантах осуществления по меньшей мере примерно 95%, например, по меньшей мере, примерно 96%, 97%, 98%, 98,5%, 99%, 99,5%, 99,8% или более молекул антител в фармацевтической композиции присутствуют в виде мономеров. В некоторых вариантах осуществления уровень агрегатов или мономеров определяют хроматографией, например, высокоэффективной эксклюзионной хроматографией (HP-SEC).

Композиции, представленные в настоящем описании, могут быть представлены в различных формах. К ним относятся, например, жидкие, полутвердые и твердые лекарственные формы, такие как жидкие растворы (например, растворы для инъекций и инфузий), дисперсии или суспензии, липосомы и суппозитории. Подходящая форма зависит от предполагаемого способа введения и терапевтического применения. Типичные подходящие композиции находятся в форме растворов для инъекций или инфузий. Одним из подходящих способов введения является парентеральный (например, внутривенный, подкожный, внутрибрюшинный, внутримышечный). В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела вводят внутривенным вливанием или инъекцией. В некоторых вариантах осуществления антитело вводят внутримышечно или подкожно.

Используемые в настоящем описании выражения «парентеральное введение» и «вводимые парентерально» означают способы введения, отличные от энтерального и местного введения, обычно путем инъекции, и включают, без ограничения, внутривенную, внутримышечную, внутриартериальную, интратекальную, внутрикапсулярную, интраорбитальную, внутрисердечную, внутрикожную, внутрибрюшинную, транстрахеальную, подкожную, под кутикулу, внутрисуставную, субкапсулярную, субарахноидальную, внутриспинальную, эпидуральную и внутрисуставную инъекцию и инфузию.

Терапевтические композиции обычно должны быть стерильными и стабильными в условиях производства и хранения. Композицию можно приготовить в виде раствора, микроэмульсии, дисперсии, липосомы или другой упорядоченной структуры, подходящей для высокой концентрации антител. Стерильные растворы для инъекций могут быть получены путем включения активного соединения (то есть антитела или части антитела) в требуемом количестве в подходящем растворителе с одним или более ингредиентами, перечисленными выше, с последующим стерилизацией фильтрованием. Как правило, дисперсии получают путем включения активного соединения в стерильный носитель, который содержит основную дисперсионную среду и требуемые другие ингредиенты из перечисленных выше. В случае стерильных порошков для приготовления стерильных растворов для инъекций предпочтительными способами получения являются вакуумная сушка и лиофильная сушка, которой получают порошок активного ингредиента вместе с любым дополнительным целевым ингредиентом из ранее стерильно-отфильтрованного раствора. Правильную текучесть раствора можно поддерживать, например, путем использования покрытия, такого как лецитин, путем поддержания требуемого размера частиц в случае дисперсии и с использованием поверхностно-активных веществ. Длительное поглощение инъекционных композиций может быть обеспечено путем включения в состав агента, который задерживает абсорбцию, например, моностеаратных солей и желатина.

Молекулы антител, описанные в настоящем документе, могут вводиться различными способами. Некоторые из них известны в данной области, и для многих терапевтических, профилактических или диагностических применений подходящим способом/способом введения является внутривенная инъекция или инфузия. Например, молекулы антител можно вводить внутривенной инфузией со скоростью менее чем 10 мг/мин; предпочтительно менее чем или равно 5 мг/мин, до достижения дозы примерно 1-100 мг/м², предпочтительно примерно от 5 до 50 мг/м2, примерно от 7 до 25 мг/м² и более предпочтительно примерно 10 мг/м². Как будет понятно специалисту в данной области, путь и/или способ введения будут варьироваться в зависимости от целевых результатов. В некоторых вариантах осуществления активное соединение может быть получено с носителем, который защитит соединение от быстрого высвобождения, как например композиция с контролируемым высвобождением, включая имплантаты, трансдермальные пластыри и микроинкапсулированные системы доставки. Могут использоваться биодеградируемые, биосовместимые полимеры, такие как этиленвинилацетат, полиангидриды, полигликолевая кислота, коллаген, полиортоэфиры и полимолочная кислота. Многие способы получения таких композиций запатентованы или известны специалистам в данной области техники. См., например, Sustained and Controlled Release Drug Delivery Systems, J. R. Robinson, ed., Marcel Dekker, Inc., New York, 1978.

В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела можно вводить перорально, например, с помощью инертного разбавителя или ассимилируемого съедобного носителя. Молекула антитела (и другие ингредиенты, если целесообразно) также может быть заключена в твердую или мягкую оболочку желатиновой капсулы, спрессована в таблетки или включена непосредственно в рацион субъекта. Для перорального терапевтического введения молекулу антитела можно вводить с вспомогательными веществами и использовать в виде проглатываемых таблеток, буккальных таблеток, пастилок, капсул, эликсиров, суспензий, сиропов, вафель и тому подобного. Для введения молекулы антитела, отличного от парентерального введения, может быть необходимо покрытие соединения или совместное введение соединения с материалом для предотвращения его инактивации. Терапевтические, профилактические или диагностические композиции также можно вводить с помощью медицинских устройств, и некоторые из них известны в данной области.

Схемы дозирования регулируются для обеспечения целевого ответа (например, терапевтического, профилактического или диагностического ответа). Например, можно вводить один болюс, несколько разделенных доз можно вводить в течение времени, или доза может быть пропорционально уменьшена или увеличена в соответствии с требованиями терапевтической ситуации. Особенно выгодно готовить парентеральные композиции в единой лекарственной форме для удобства введения и единообразия дозировки. Используемая в настоящем описании единая лекарственная форма относится к физически дискретным единицам, подходящим в качестве унифицированных доз для пациентов, подлежащих лечению; каждая единица содержит предопределенное количество активного соединения, рассчитанное для получения целевого терапевтического эффекта в сочетании с необходимым фармацевтическим носителем. Спецификация единых лекарственных форм продиктована и непосредственно зависит от (а) уникальных характеристик молекулы антитела и конкретного терапевтического, профилактического или диагностического эффекта, который должен быть достигнут, и (b) ограничений, присущих методам смешивания такой молекулы антитела для лечения чувствительности у индивидуумов.

Типичный неограничивающий диапазон для терапевтически, профилактически или диагностически эффективного количества молекулы антитела составляет примерно 0,1-50 мг/кг массы тела пациента, например, примерно 0,1-30 мг/кг, например, примерно 1- 30, 1-15, 1-10, 1-5, 5-10 или 1-3 мг/кг, например, примерно 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 15, 20, 30, 40 или 50 мг/кг. Молекулу антитела можно вводить внутривенной инфузией со скоростью менее чем 10 мг/мин, например, менее чем или равной 5 мг/мин, до достижения дозы примерно от 1 до 100 мг/м², например примерно от 5 до 50 мг/м², примерно от 7 до 25 мг/м², например, примерно 10 мг/м². Следует отметить, что значения дозировки могут варьироваться в зависимости от типа и тяжести состояния, которое необходимо облегчить. Следует также понимать, что для любого конкретного пациента конкретные схемы дозировки должны корректироваться со временем в соответствии с индивидуальной потребностью и профессиональным мнением лица, осуществляющего или контролирующего введение композиций, и что диапазоны доз, указанные в настоящем документе, являются только иллюстративными и не предназначены для ограничения объема или практического применения заявленных композиций.

Фармацевтические композиции настоящего описания могут включать «терапевтически эффективное количество», «профилактически эффективное количество» или «диагностически эффективное количество» молекулы антитела, описанной в настоящем документе.

«Терапевтически эффективное количество» относится к количеству, эффективному в дозировках и в течение периодов времени, необходимых для достижения целевого терапевтического результата. Терапевтически эффективное количество молекулы антитела может варьироваться в зависимости от таких факторов, как состояние заболевания, возраст, пол и масса индивидуума, а также способность части антитела или антитела вызывать целевой ответ у индивидуума. Терапевтически эффективное количество также является таким, при котором любое токсическое или вредное воздействие молекулы антитела перевешивается терапевтически благоприятными эффектами. «Терапевтически эффективная доза» обычно ингибирует измеряемый параметр, по меньшей мере, примерно на 20%, например, по меньшей мере на 40%, по меньшей мере на 60% или по меньшей мере на 80% относительно пациентов, не подвергнутых лечению. Измеряемым параметром может быть, например, гематурия, окрашенная моча, пенная моча, боль, отек (эдема) в руках и ногах или высокое кровяное давление. Способность молекулы антитела ингибировать измеряемый параметр может быть оценена в животной модельной системе, прогнозирующей эффективность при лечении или предотвращении IgA-нефропатии. Альтернативно, это свойство композиции можно оценить, исследуя способность молекулы антитела ингибировать APRIL, например, с помощью анализа in vitro.

«Профилактически эффективное количество» относится к количеству, эффективному в дозировках и в течение периодов времени, необходимых для достижения целевого профилактического результата. Как правило, поскольку профилактическая доза используется у пациентов до или на более ранней стадии заболевания, профилактически эффективное количество будет меньше терапевтически эффективного количества.

«Диагностически эффективное количество» относится к количеству, эффективному в дозировках и в течение периодов времени, необходимых для достижения целевого диагностического результата. Обычно диагностически эффективное количество представляет собой такое, при котором расстройство, например, описанное в настоящем документе расстройство, например IgA-нефропатия, может быть диагностировано in vitro, ex vivo или in vivo.

Также в настоящем раскрытии представлен набор, который содержит молекулу антитела, описанную в настоящем документе. Набор может включать один или более других элементов, включая: инструкции по использованию; другие реагенты, например метку, терапевтический агент или агент, пригодный для хелатирования или иного связывания, молекулы антитела с меткой или терапевтическим агентом или радиозащитную композицию; устройства или другие материалы для получения молекулы антитела для введения; фармацевтически приемлемые носители; и устройства или другие материалы для введения пациенту.

Нуклеиновые кислоты

Настоящее раскрытие также включает нуклеиновые кислоты, содержащие нуклеотидные последовательности, которые кодируют молекулы антитела (например, вариабельные области тяжелой и легкой цепей и CDR молекул антитела), как описано в настоящем документе.

Например, настоящее раскрытие включает в себя первую и вторую нуклеиновые кислоты, кодирующие вариабельные области тяжелой и легкой цепей, соответственно, молекулы антитела, выбранной из одной или более молекул антител, описанных в настоящем документе, например молекулы антитела из Таблицы 1 или 5, или часть молекулы антитела, например вариабельные области Таблицы 2. Нуклеиновая кислота может содержать нуклеотидную последовательность, кодирующую любую из аминокислотных последовательностей в приведенных в настоящем описании Таблицах, или последовательность, по существу идентичную ей (например, последовательность, по меньшей мере, примерно на 85%, 90%, 95%, 99% или более идентичную ей, или которая отличается не более чем на 3, 6, 15, 30 или 45 нуклеотидов от последовательностей, представленных в приведенных в настоящем описании Таблицах).

В некоторых вариантах осуществления нуклеиновая кислота может содержать нуклеотидную последовательность, кодирующую по меньшей мере одну, две или три CDR из вариабельной области тяжелой цепи, имеющей аминокислотную последовательность, представленную в приведенных в настоящем описании таблицах, или последовательность, по существу, гомологичную ей (например, последовательность по меньшей мере примерно на 85%, 90%, 95%, 99% или более идентичную им и/или имеющую одну или более замен, например, консервативных замен). В некоторых вариантах осуществления нуклеиновая кислота может содержать нуклеотидную последовательность, кодирующую по меньшей мере одну, две или три CDR из вариабельной области легкой цепи, имеющей аминокислотную последовательность, представленную в приведенных в настоящем описании таблицах, или последовательность, по существу гомологичную ей (например, последовательность по меньшей мере примерно на 85%, 90%, 95%, 99% или более идентичную им и/или имеющую одну или более замен, например, консервативных замен). В некоторых вариантах осуществления нуклеиновая кислота может содержать нуклеотидную последовательность, кодирующую по меньшей мере одну, две, три, четыре, пять или шесть CDR из вариабельных областей тяжелой и легкой цепей, имеющих аминокислотную последовательность, представленную в приведенных в настоящем описании таблицах, или последовательность, по существу гомологичную ей (например, последовательность по меньшей мере на 85%, 90%, 95%, 99% или более идентичную ей и/или с одной или более заменами, например, консервативными заменами).

В некоторых вариантах осуществления нуклеиновая кислота может содержать нуклеотидную последовательность, кодирующую по меньшей мере одну, две или три CDR из вариабельной области тяжелой цепи, имеющей нуклеотидную последовательность, представленную в Таблице 2, последовательность, по существу гомологичную ей (например, последовательность по меньшей мере, примерно на 85%, 90%, 95%, 99% или более идентичную ей и/или способную к гибридизации в условиях жесткости, описанных в настоящем документе). В некоторых вариантах осуществления нуклеиновая кислота может содержать нуклеотидную последовательность, кодирующую по меньшей мере одну, две или три CDR из вариабельной области легкой цепи, имеющей нуклеотидную последовательность, представленную в Таблице 2, или последовательность, по существу гомологичную ей (например, последовательность по меньшей мере, примерно на 85%, 90%, 95%, 99% или более идентичную ей и/или способную к гибридизации в условиях жесткости, описанных в настоящем документе). В некоторых вариантах осуществления нуклеиновая кислота может содержать нуклеотидную последовательность, кодирующую по меньшей мере одну, две, три, четыре, пять или шесть CDR из вариабельных областей тяжелой и легкой цепей, имеющих нуклеотидную последовательность, представленную в Таблице 2, или последовательность, по существу, гомологичную им (например, последовательность по меньшей мере на 85%, 90%, 95%, 99% или более идентичную им и/или способную гибридизоваться в условиях жесткости, описанных в настоящем документе).

В некоторых вариантах осуществления нуклеиновая кислота содержит нуклеотидную последовательность, представленную в Таблице 2, или последовательность, по существу, гомологичную ей (например, последовательность по меньшей мере примерно на 85, 90, 95, 99 или более идентичную ей и/или способную к гибридизации в условиях жесткости, описанных в настоящем документе). В некоторых вариантах осуществления нуклеиновая кислота содержит часть нуклеотидной последовательности, представленной в Таблице 2, или последовательность, по существу, гомологичную ей (например, последовательность по меньшей мере примерно на 85, 90, 95, 99 или более идентичную ей, и/или способную к гибридизации в условиях жесткости, описанных в настоящем документе). Часть может кодировать, например, вариабельную область (например, VH или VL); одну, две или три или более CDR; или одну, две, три или четыре или более каркасных областей.

Описанные в настоящем документе нуклеиновые кислоты включают дезоксирибонуклеотиды или рибонуклеотиды или их аналоги. Полинуклеотид может быть либо одноцепочечным, либо двухцепочечным, и если он одноцепочечный, то он может представлять собой кодирующую цепь или некодирующую (антисмысловую) цепь. Полинуклеотид может содержать модифицированные нуклеотиды, такие как метилированные нуклеотиды и нуклеотидные аналоги. Последовательность нуклеотидов может быть прервана ненуклеотидными компонентами. Полинуклеотид может быть дополнительно модифицирован после полимеризации, например, путем конъюгации с меченым компонентом. Нуклеиновая кислота может представлять собой рекомбинантный полинуклеотид или полинуклеотид геномного, кДНК, полусинтетического или синтетического происхождения, который либо не встречается в природе, либо связан с другим полинуклеотидом в искусственной среде.

В некоторых аспектах применение включает клетки-хозяева и векторы, содержащие нуклеиновые кислоты, описанные в настоящем документе. Нуклеиновые кислоты могут присутствовать в одном векторе или отдельных векторах, присутствующих в той же самой клетке-хозяине или отдельной клетке-хозяине, как описано более подробно ниже.

Векторы

Далее в настоящем описании представлены векторы, которые содержат нуклеотидные последовательности, кодирующие молекулу антитела, описанную в настоящем документе.

В одном варианте осуществления вектор содержит нуклеотид, кодирующий молекулу антитела, описанную в настоящем документе, например, как описано в Таблице 1 или 5. В другом варианте осуществления вектор содержит нуклеотидную последовательность, описанную в настоящем документе, например, в Таблице 2. Векторы включают, но не ограничиваются ими, вирусный, плазмидный, космидный, лямбда-фаговый вектор или из искусственной дрожжевой хромосомы (YAC).

Можно использовать множество векторных систем. Например, один класс векторов использует элементы ДНК, которые получены из вирусов животных, таких как, например, вирус бычьей папилломы, вирус полиомы, аденовирус, вирус коровьей оспы, бакуловирус, ретровирусы (вирус саркомы Rous, MMTV или MOMLV) или вирус SV40. В другом классе векторов используются элементы РНК, полученные из РНК-вирусов, таких как вирус леса Семлики, вирус восточного энцефалита лошадей и флавивирусы.

Кроме того, клетки, которые имеют стабильно интегрированную ДНК в своих хромосомах, могут быть отобраны путем введения одного или более маркеров, которые позволяют отбирать трансфецированные клетки-хозяева. Маркер может обеспечить, например, прототропию в ауксотрофном хозяине, устойчивость к биоцидам (например, антибиотикам) или устойчивость к тяжелым металлам, таким как медь, или тому подобное. Ген маркера селекции может быть либо непосредственно связан с последовательностями ДНК, которые должны экспрессироваться, либо вводиться в одну и ту же клетку путем котрансформации. Для оптимального синтеза мРНК могут потребоваться дополнительные элементы. Эти элементы могут включать в себя сигналы сплайсинга, а также промоторы транскрипции, энхансеры и сигналы терминации транскрипции.

Как только экспрессирующий вектор или последовательность ДНК, содержащая конструкции, были получены для экспрессии, экспрессирующие векторы могут быть трансфецированы или введены в соответствующую клетку-хозяина. Для достижения этого могут быть использованы различные методы, такие как, например, слияние протопластов, осаждение фосфатом кальция, электропорация, ретровирусная трансдукция, трансфекция вируса, генная пушка, трансфекция на основе липидов или другие общепринятые методы. В случае слияния протопластов клетки выращивают в средах и подвергают скринингу на предмет соответствующей активности.

Способы и условия культивирования полученных трансфецированных клеток и для извлечения продуцируемой молекулы антитела известны специалистам в данной области и могут варьироваться или оптимизироваться в зависимости от конкретного экспрессирующего вектора и используемой клетки-хозяина млекопитающего на основе настоящего описания.

Клетки

В настоящем раскрытии также предложены клетки (например, клетки-хозяева), содержащие нуклеиновую кислоту, кодирующую молекулу антитела, как описано в настоящем документе. Например, клетки-хозяева могут содержать молекулу нуклеиновой кислоты, имеющую нуклеотидную последовательность, описанную в Таблице 2, последовательность, по существу гомологичную ей (например, последовательность, по меньшей мере, примерно на 85%, 90%, 95%, 99% или более идентичную ей, и/или способную к гибридизации в условиях жесткости, описанных в настоящем документе), или часть одной из указанных нуклеиновых кислот.Кроме того, клетки-хозяева могут содержать молекулу нуклеиновой кислоты, кодирующую аминокислотную последовательность из Таблицы 1 или 5, последовательность, по существу гомологичную ей (например, последовательность по меньшей мере примерно на 80%, 85%, 90%, 95%, 99% или более идентичную ей) или часть одной из указанных последовательностей.

В некоторых вариантах осуществления клетки-хозяева генетически модифицированы, чтобы содержать нуклеиновые кислоты, кодирующие молекулу антитела, описанную в настоящем документе.

В некоторых вариантах осуществления клетки-хозяева генетически сконструированы с использованием экспрессирующей кассеты. Выражение «экспрессирующая кассета» относится к нуклеотидным последовательностям, которые способны влиять на экспрессию гена в хозяевах, совместимых с такими последовательностями. Такие кассеты могут включать в себя промотор, открытую рамку считывания с интронами или без них и сигнал терминации. Могут также использоваться дополнительные факторы, необходимые или полезные для осуществления экспрессии, такие как, например, индуцируемый промотор.

В раскрытии также предложены клетки-хозяева, содержащие описанные в настоящем документе векторы.

Клетка может быть, но не ограничивается этим, эукариотической клеткой, бактериальной клеткой, клеткой насекомого или клеткой человека. Подходящие эукариотические клетки включают, но не ограничиваются ими, клетки Vero, клетки HeLa, клетки COS, клетки CHO, клетки HEK293, клетки BHK и клетки MDCKII. Подходящие клетки насекомых включают, но не ограничиваются ими, клетки Sf9. В одном варианте осуществления клетка (например, клетка-хозяин) представляет собой выделенную клетку.

Применения молекул антител

Молекулы антител, описанные в настоящем документе, а также фармацевтические композиции, раскрытые в настоящем описании, имеют in vitro, ex vivo и in vivo терапевтические, профилактические и/или диагностические применения.

В одном варианте осуществления молекула антитела уменьшает (например, ингибирует, блокирует или нейтрализует) одну или более биологических активностей APRIL. Например, эти молекулы антител можно вводить в клетки в культуре, in vitro или ex vivo, или пациенту, например человеку, например in vivo, для снижения (например, ингибирования, блокирования или нейтрализации) одной или более биологических активностей APRIL. В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует или по существу ингибирует связывание APRIL, например человеческого APRIL, с TACI, BCMA или с обоими. Соответственно, в одном аспекте в раскрытии предложен способ лечения, предотвращения или диагностики расстройства, например расстройства, описанного в настоящем документе (например, IgA-нефропатии) у пациента, причем способ включает введение пациенту молекулы антитела, описанной в настоящем документе, так что расстройство подвергается лечению, предотвращается или диагностируется. Например, в раскрытии предложен способ, включающий контакт молекулы антитела, описанной в настоящем документе с клетками в культуре, например in vitro или ex vivo, или введение молекулы антитела, описанной в настоящем документе, пациенту, например in vivo, для лечения, предотвращения или диагностики расстройства, например, расстройства, ассоциированного с APRIL (например, IgA-нефропатии).

Подразумевается, что используемый в настоящем описании термин «пациент» включает людей и животных, не относящихся к человеку. В некоторых вариантах осуществления пациент представляет собой человека, например человека, страдающего расстройством, описанным в настоящем документе (например, IgA-нефропатией), или с риском развития описанного в настоящем документе расстройства (например, IgA-нефропатии). Термин «животные, не относящиеся к человеку» включает в себя млекопитающих и не млекопитающих, таких как приматы, не относящиеся к человеку. В некоторых вариантах осуществления пациент является человеком. Способы и композиции, описанные в настоящем документе, пригодны для лечения у людей-пациентов описанного в настоящем документе расстройства (например, IgA-нефропатии). Пациенты, страдающие расстройством, описанным в настоящем документе (например, IgA-нефропатией), включают пациентов, у которых развилось расстройство, описанное в настоящем документе (например, IgA-нефропатия), но они (по меньшей мере временно) бессимптомны, пациентов, у которых проявился симптом описанного в настоящем документе расстройства (например, IgA-нефропатии) или пациентов, страдающих расстройством, связанным с описанным в настоящем документе расстройством или связанным с ним (например, IgA-нефропатией).

Способы лечения или предотвращения расстройств

Молекулы антител, описанные в настоящем документе, могут быть использованы для лечения или предотвращения расстройств, ассоциированных с APRIL или их симптомами.

Характерные расстройства или состояния, которые могут быть связаны с APRIL, включают, но не ограничиваются ими, IgA-нефропатию, диабетическую нефропатию, злокачественное новообразование (например, гематологическое онкологическое заболевание (например, неходжкинскую лимфому B-клеток, хронический лимфоцитарный лейкоз, лимфому Ходжкина, множественную миелому, (например, рак толстой кишки, рак молочной железы (например, карциному молочной железы), рак пищевода (например, аденокарциному пищевода), рак мозга (например, глиобластому) и рак почки (например, почечноклеточную карциному)), иммунопролиферативные расстройства (например, моноклональную IgA гипергаммаглобулинемию), васкулит (например, васкулит почек, пурпуру Шенлейна-Геноха (IgA-ассоциированный васкулит) и постстрептококковый гломерулонефрит), аутоиммунные расстройства (например, ревматоидный артрит, системную красную волчанку, линейный IgA-опосредованное буллезное заболевание/линейный иммуноглобулин А (IgA)-опосредованный дерматоз и IgA-опосредованный приобретенный буллезный эпидермолиз), IgA-пемфигус, целиакию и алкогольный цирроз печени. В одном варианте осуществления расстройство ассоциировано с аберрантной экспрессией IgA. В одном варианте осуществления молекулу антитела используют для лечения пациента, имеющего расстройство, описанное в настоящем документе, или который подвержен риску развития описанного в настоящем документе расстройства.

Молекулы антител, описанные в настоящем документе, обычно вводят с частотой, которая сохраняет терапевтически эффективный уровень молекул антител в системе пациента до тех пор, пока пациент не восстановится. Например, молекулы антител можно вводить с частотой, которая достигает концентрации в сыворотке, достаточной для того, чтобы по меньшей мере примерно 1, 2, 5, 10, 20, 30 или 40 молекул антител связывались с каждой молекулой APRIL. В одном варианте осуществления молекулы антитела вводят каждые 1, 2, 3, 4, 5, 6 или 7 дней, каждые 1, 2, 3, 4, 5 или 6 недель или каждые 1, 2, 3, 4, 5 или 6 месяцев.

Способы введения различных молекул антител известны в данной области и описаны ниже. Подходящие используемые дозы молекул антител будут зависеть от возраста и массы пациента и конкретного используемого лекарственного средства.

В одном варианте осуществления молекулу антитела вводят пациенту (например, человеку) внутривенно. В одном варианте осуществления молекулу антитела вводят пациенту в дозе от 0,1 до 50 мг/кг, например, от 0,2 до 25 мг/кг, от 0,5 мг/кг до 10 мг/кг, от 0,5 мг/кг до 5 мг/кг, от 0,5 мг/кг до 3 мг/кг, от 0,5 мг/кг и 2,5 мг/кг, от 0,5 мг/кг и 2 мг/кг, от 0,5 мг/кг и 1,5 мг/кг, от 0,5 мг/кг до 1 мг/кг, от 1 мг/кг до 1,5 мг/кг, от 1 мг/кг до 2 мг/кг, от 1 мг/кг до 2,5 мг/кг, от 1 мг/кг до 3 мг/кг, от 1 мг/кг до 2,5 мг/кг или от 1 мг/кг до 5 мг/кг. В одном варианте осуществления молекулу антитела вводят пациенту при фиксированной дозе от 10 до 1000 мг, например, от 10 до 500 мг, от 10 до 250 мг, от 10 до 150 мг, от 10 мг до 100 мг, от 10 до 50 мг, от 250 до 500 мг, от 150 до 500 мг, от 100 до 500 мг, от 50 до 500 мг, от 25 до 250 мг, от 50 до 150 мг мг, от 50 до 100 мг, от 100 мг до 150 мг от 100 мг до 200 мг или от 150 мг до 250 мг. В одном варианте осуществления молекулу антитела вводят один раз в неделю, два раза в неделю, раз в две недели, раз в три недели, раз в четыре недели, раз в восемь недель, один раз в месяц, один раз в два месяца или один раз в три месяца. В одном варианте осуществления молекулу антитела вводят в концентрации от 0,5 мг/кг до 3 мг/кг или от 50 до 150 мг один раз в неделю, два раза в неделю, раз в две недели или раз в четыре недели.

Молекулы антител могут быть использованы сами по себе или конъюгированы со вторым агентом, например бактериальным агентом, токсином или белком, например, со второй молекулой антитела против APRIL. Этот способ включает: введение молекулы антитела, отдельно или конъюгированной со вторым агентом, пациенту, нуждающемуся в таком лечении. Молекулы антител могут быть использованы для доставки различных терапевтических агентов, например токсина или их смесей.

IgG-нефропатия

IgG-нефропатия (также известная как болезнь Бергера, синдром Бергера, синдром Бергера, нефрит, IgAN или синфарингитный гломерулонефрит) является наиболее распространенной хронической гломерулярной болезнью во всем мире. Консервативные эпидемиологические оценки указывают на глобальную заболеваемость примерно 5-50 случаев /на миллион (детей) и 10-40 случаев /на миллион (взрослых). Эта заболеваемость имеет региональный сдвиг с более высокой распространенностью в Азии и Северной и Южной Америке с особенно высоким бременем болезней в Японии и регионах Китая.Биопсия подтвердила случаи IgA-нефропатии в Японии с прогнозом приблизительно в 350000 случаев.В США этот прогноз составляет приблизительно 100000 - как таковой, он является наиболее часто диагностированным гломерулярным заболеванием у взрослых.Несмотря на относительно медленно развивающееся заболевание, IgA-нефропатия приводит к почечной недостаточности конечной стадии (ESRD), то есть почечной недостаточности у 20-50% пациентов в течение 20-30 лет. Эти цифры, вероятно, сильно занижены, учитывая необходимость подтверждения заболевания с помощью биопсии почек, протокола, который можно применять в различных клинических условиях. Заболевание имеет сложный патогенез с генетическими, эпидемиологическими и потенциально экологическими компонентами для этиологии, патологии и прогрессирования заболевания. Оно также имеет переменную клиническую картину, начиная от бессимптомной и заканчивающейся почечной недостаточности (ESRD). В настоящее время нет никаких конкретных способов лечения, специфичных для заболевания, для лечения первичной болезни или прогрессирования.

Этиология этого заболевания установлена, как следует из его названия. Вкратце, заболевание вызвано депонированием IgA, как правило, в виде иммунных комплексов в мезангиуме почки. Проведена молекулярная характеристика этих конкретных иммуноглобулинов. Эти IgA относятся к подклассу A1 (IgA1 против IgA2), преимущественно полимерному (с J-цепными опосредованными связями) и, по-видимому, дифференциально-о-гликозилированному в области шарнира, который располагается между доменами CH1 и CH2.В частности, эти о-гликаны гетерогенно лишены β1,3 галактозных связей и, как таковые, обычно обозначаются как дефицитные по галактозе IgA1 (или gdIgA1). Поскольку патогенез этой дисфункции может включать в себя полигенный, мультиударный механизм для индуцирования почечной патологии и аберрантной физиологии, IgA1 можно рассматривать как так называемый аутоантиген, представляющий этот первый критический «удар» в мультиударной модели для IgA-нефропатии.Набор аутоантител к этому заболеванию также определен и относится к иммуноглобулинам (преимущественно IgG), которые специфично распознают этот дифференцированный гликозилированный эпитоп и способствуют образованию иммунных комплексов (представляющих так называемый «удар 2»). Следует также отметить, что сам IgA подвержен агрегации из-за неправильной сборки, конформационных изменений и потенциальных изменений в состоянии N-гликозилирования гликанов CH2/CH3.

Безотносительно к теории считается, что в одном варианте осуществления уровень аберрантно гликозилированного IgA1 коррелирует с заболеванием и клиническим исходом при IgA-нефропатии. Аберрантно-гликозилированный IgA1 был охарактеризован непосредственно из биопсий почек, и повышенное продуцирование аберрантно-гликозилированного IgA1 наблюдали в В-клетках (тонзилляр, РВМС) у пациентов с IgA-нефропатией. Уровень дефицитного по галактозе IgA1 в сыворотке пациентов с IgA-нефропатией ассоциирован с прогрессированием заболевания (Zhao et al. Kidney Int. 2012; 82 (7): 790-6). Дифференциальное окрашивание лектинов продемонстрировало повышенный уровень аберрантно гликозилированного IgA1 в сыворотке и клубочках пациентов с IgA-нефропатией по сравнению со здоровыми контролями (Allen et al. Kidney Int. 2001; 60 (3): 969-73).

Основываясь на этой эволюционирующей модели заболевания, IgA -нефропатия может быть надлежащим образом рассмотрена как аутоиммунное заболевание с сильным и критическим экстрапочечным участием. Предполагается, что идентификация и валидация выбранных мишеней на основе иммунной системы играет критически важную роль в патогенезе болезни, а именно: продуцирование IgA и последующее продуцирование аутореактивных антител к этой мишени, представляют собой логическую терапевтическую стратегию лечения. По этой причине на APRIL (TNFSF13) сфокусировано особое внимание. Дополнительным обоснованием для направленного воздействия на APRIL являются новые генетические данные, основанные на множестве полногеномных исследований (GWAS) наряду с генетическими нарушениями, связанными с IgA, например с IgG-гипогаммаглобулинемией, связанной с общей переменной иммуноглобулиновой недостаточностью (CVID), чьи локусы картированы с дефектами в TNFRSF13B (TACI) с прямыми последствиями роли взаимодействий APRIL-TACI в регуляции синтеза IgA.

IgA-нефропатия часто не вызывает симптомов на ранних стадиях. Заболевание может остаться незамеченным в течение многих лет, и иногда ее сначала диагностируют, когда обычные тесты показывают белок и эритроциты в моче, которые невозможно увидеть без микроскопа (микроскопическая гематурия). Признаки и симптомы IgA-нефропатии, когда функция почек нарушена, включают, например, мочу цвета колы или чайного цвета (вызванную эритроцитами в моче); повторяющиеся эпизоды мочи цвета колы или чайного цвета, иногда даже видимая кровь в моче, обычно во время или после инфекции верхних дыхательных путей или другого типа; боль со стороны спины ниже ребер (боковая сторона); пена в туалетной воде из-за белка в моче; отек (эдема) в руках и ногах; и высокое кровяное давление. В одном варианте осуществления признак или симптом включает, например, одно или более из гематурии, протеинурии, альбуминурии, гипертензии или ранней стадии заболевания почек (например, требующего диализ или трансплантацию). В варианте осуществления признак или симптом ассоциирован, например, с одним или более из аберрантно гликозилированных IgA1, образованием аутоантител, депонированием нефритогенных иммунных комплексов в почках или воспалением и потерей функции почек.

Классическая презентация (примерно в 40-50% случаев, более распространенная у молодых людей) IgA-нефропатии - эпизодическая гематурия, которая обычно начинается через день или два из-за неспецифической инфекции верхних дыхательных путей (отсюда и синфарингит). Менее часто желудочно-кишечная или мочевая инфекция может быть возбуждающим агентом. Все эти инфекции имеют общую активацию защиты слизистой оболочки и, следовательно, продуцирование IgA-антител. Эти эпизоды могут возникать на нерегулярной основе каждые несколько месяцев, а у большинства пациентов в конечном итоге стихают. Почечная функция обычно остается нормальной, хотя и редко, может возникнуть острая почечная недостаточность.

Меньшая доля (примерно в 20-30% случаев, обычно пожилых) пациентов с IgA-нефропатией имеет микроскопическую гематурию и протеинурию (менее 2 грамм в день). Эти пациенты могут не иметь никаких симптомов, которые обнаруживаются только клинически, если врач решает взять образец мочи. Следовательно, заболевание чаще диагностируется в ситуациях, когда анализ мочи является обязательным, например, у школьников в Японии.

Некоторые (примерно 5%) пациентов с IgA-нефропатией имеют следующую картину заболевания: нефротический синдром (например, 3-3,5 г потери белка в моче, что связано с худшим прогнозом); острая почечная недостаточность (например, как осложнение явной гематурии, когда она обычно восстанавливается, или из-за быстро прогрессирующего гломерулонефрита, который часто приводит к хронической почечной недостаточности); хроническая почечная недостаточность (например, отсутствие предшествующих симптомов, отсутствие анемии, гипертония и другие симптомы почечной недостаточности у людей, которые, вероятно, имели давнюю необнаруженную микроскопическую гематурию и/или протеинурию).

Множество системных заболеваний может быть связано с IgA-нефропатией, таких как печеночная недостаточность, целиакия, ревматоидный артрит, реактивный артрит, анкилозирующий спондилоартрит и ВИЧ. Диагностика IgA-нефропатии и поиск любого ассоциированного заболевания иногда выявляют такое серьезное системное заболевание. Иногда возникают одновременные симптомы пурпуры Шенлейна-Геноха. Некоторые аллели HLA подозреваются наряду с фенотипами комплемента как генетические факторы.

IgG-нефропатию можно диагностировать с помощью различных тестов, например, анализов мочи, анализов крови (например, по увеличению уровня содержания креатинина в продуктах жизнедеятельности), тестом на клиренс иоталамата, визуализацией почек (например, ультразвуком, рентгеновским излучением или цистоскопией), биопсией почек или их комбинацией.

Для взрослого пациента с изолированной гематурией обычно проводят тесты, такие как УЗИ почек и цистоскопия, чтобы определить источник кровотечения. Эти тесты исключили бы камни в почках и рак мочевого пузыря, две другие общие урологические причины гематурии. У детей и молодых людей история и связь с респираторной инфекцией могут вызвать подозрение на IgA-нефропатию. Для подтверждения диагноза часто необходима биопсия почек. Биопсийный образец демонстрирует пролиферацию мезангиума с депонированиями IgA на иммунофлюоресценции и электронной микроскопии. Однако пациенты с изолированной микроскопической гематурией (т.е. без ассоциированной протеинурии и с нормальной функцией почек) обычно не биопсируются, поскольку это связано с отличным прогнозом. Анализ мочи будет показывать эритроциты, как правило, в виде эритроцитарных почечных цилиндров. Протеинурия, обычно менее 2 граммов в день, также может присутствовать. Другие почечные причины изолированной гематурии включают, например, тонкое заболевание базальной мембраны и синдром Альпорта, причем последнее является наследственным заболеванием, связанным с нарушением слуха и проблемами с глазами. Другие анализы крови, проводимые для постановки диагноза, включают CRP или ESR, уровень комплемента, ANA и LDH. Белковый электрофорез и уровень иммуноглобулина могут показать увеличение IgA у 50% всех пациентов.

Лечение рядом препаратов может замедлить развитие заболевания и помочь справиться с такими симптомами, как высокое кровяное давление, белок в моче (протеинурия) и отеки (эдема) в руках и ногах. Иллюстративные методы лечения IgA-нефропатии включают, например, лекарственные средства от высокого кровяного давления (например, ингибиторы ангиотензинпревращающего фермента (ACE) или блокаторы рецепторов ангиотензина (ARB)), жирные кислоты омега-3, иммунодепрессанты (например, препараты кортикостероидов, такие как преднизон), статиновую терапию, мофетил микофенолята, циклоспорин, мизорибин, циклофосфамид (например, в комбинации с антитромбоцитами/антикоагулянтами или в сочетании со стероидами и азатиоприном), почечный диализ или трансплантацию почки. Иллюстративные терапии IgA-нефропатии описаны также в Floege and Eitner J. Am. Soc. Nephrol. 22: 1785-1794, 2011. Другие иллюстративные терапии IgA-нефропатии описаны в разделе «Комбинированная терапия» настоящего описания.

Безотносительно к теории считается, что в одном варианте осуществления направленное воздействие на APRIL селективно снижает IgA. Мыши APRIL -/- имеют нормальное развитие T и B лимфоцитов, нормальную пролиферацию T и B клеток in vitro, но имеют пониженный уровень IgA в сыворотке (Castigli et al. Proc Natl Acad Sci U S A. 2004; 101(11):3903-8). Открытие новых локусов риска для IgA-нефропатии подразумевает гены, участвующие в иммунитете против кишечных патогенов (Kiryluk et al. Nat Genet. 2014; 46 (11): 1187-96). Уровень в сыворотке и продуцирование В-клетками APRIL повышены у пациентов с IgA-нефропатией и коррелирует с уровнем аберрантно-гликозилированного IgA (Zhai et al. Medicine (Baltimore). 2016; 95(11):e3099). Уровень APRIL (TNFSF13) в плазме коррелируют с прогрессированием хронического заболевания почек при IgA-нефропатии (Han et al. J Am Soc Nephrol. 2016; 27 (2): 439-53). Лечение антителами против APRIL приводит к снижению IgA в сыворотке, очищению почечного мезангиума и уменьшению инфильтрации воспалительных клеток и гломерулярных повреждений у мышей (Kim et al. PLoS One. 2015; 10(9):e0137044). Антитело против APRIL сохраняет гомеостаз иммунных клеток в костном мозге и селезенке (Kim et al. PLoS One. 2015; 10(9):e0137044).

APRIL (TNFSF13) представляет собой логическую биологическую и терапевтическую мишень для лечения IgA-нефропатии. Безотносительно к теории считается, что в одном варианте осуществления эффективность молекул антител, описанных в настоящем документе, в отношении направленной модуляции APRIL-опосредованных иммунобиолиальных механизмов, имеет непосредственное отношение к лечению IgA-нефропатии. Молекулы антител против APRIL, описанные в настоящем документе, (например, гуманизированные молекулы антитела против APRIL), например, с высокой биологической эффективностью и/или с низкой активацией комплемента, могут быть использованы для лечения IgA-нефропатии. В одном варианте осуществления молекула антитела имеет пикомолярную аффинность связывания APRIL и субнаномолярную активность блокирования рецепторов как для TACI, так и для BCMA, например in vitro. В другом варианте осуществления молекула антитела функционально интерферирует с APRIL-опосредованной последующей клеточной сигнализацией, например, через канонический путь активации NFκB. В одном варианте осуществления молекула антитела сконструирована, например, в качестве подтипа IgG2 для целей клинического смягчения против антителозависимого обострения рекрутинга комплемена, например, в почках пациентов с IgA-нефропатией. В одном варианте осуществления молекула антитела, описанная в настоящем документе, может иметь улучшенный профиль безопасности по сравнению с более эффективными терапевтическими подходами на основе обеднения В-клеток, например, из-за меньших пертурбаций гомеостаза В- и Т-клеток, как показано в мышиной модели (Kim et al., PLoS One. 2015;10(9):e0137044).

Молекулы антител, описанные в настоящем документе, могут быть использованы для лечения или профилактики различных стадий IgA-нефропатии. В одном варианте осуществления молекулу антитела используют для лечения симптома, ассоциированного с IgA-нефропатией, например гематурией, протеинурией, альбуминурией, гипертонией, ранней стадией заболевания почек (например, требующим диализа или трансплантации) или их комбинацией. В одном варианте осуществления молекула антитела уменьшает аберрантно гликозилированный IgA1, образование аутоантител, депонирование нефритогенных иммунных комплексов в почках, воспаление и потерю функции почек или их комбинацию. В одном варианте осуществления пациент подвержен низкому риску, например, имеет незначительные аномалии мочевого пузыря (например, микрогематурию), нормальную скорость клубочковой фильтрации (СКФ) и/или отсутствие гипертонии. В другом варианте осуществления пациент подвержен умеренному или высокому риску, например, имеет протеинурию более 0,5-1 г/сут и/или уменьшенную СКФ (например, ниже 30-50 мл/мин) и/или гипертензию. Еще в одном варианте осуществления пациент имеет острую или быструю потерю СКФ, например, с нефротическим синдромом или быстро прогрессирующим гломерулонефритом (RPGN) или острой почечной недостаточностью (AKI) из-за макрогематурии или другой общей причины. В одном варианте осуществления пациент имеет протеинурию более 0,5 г/сут, например, от 0,5 до 1 г/сут или более 1 г/сут. В варианте осуществления пациент, подвергнутый лечениию IgA-нефропатии, имеет скорость клубочковой фильтрации (СКФ) менее 50 мл/мин, например, менее 30 мл/мин. В одном варианте осуществления молекула антитела существенно не изменяет (например, способна сохранять) гомеостаз иммунных клеток. В другом варианте осуществления молекула антитела приводит к уменьшению IgA, а не полной абляции IgA.

Диабетическая нефропатия

Молекула антитела, описанная в настоящем документе, может быть использована для лечения или профилактики диабетической нефропатии. Диабетическая нефропатия (или известная как диабетическая болезнь почек) является прогрессирующим заболеванием почек, вызванным, например, повреждением капилляров в клубочках почек. Обычно она характеризуется нефротическим синдромом и диффузным рубцеванием клубочков. Это часто связано с многолетним сахарным диабетом и является основной причиной диализа. Она классифицируется как осложнение сахарного диабета, связанное с малыми кровеносными сосудами.

Иллюстративные симптомы диабетической нефропатии включают, но не ограничиваются ими, сильную усталость, головные боли, общее чувство болезни, тошноту, рвоту, частые мочеиспускания, отсутствие аппетита, зудящую кожу или опухание ног. Причиной диабетической нефропатии может быть, например, высокий уровень сахара в крови, повышенное образование конечного продукта гликирования. Цитокины могут участвовать в развитии диабетической нефропатии.

Диабет может вызвать ряд изменений в метаболизме и кровообращении организма, которые, вероятно, объединяются с получением выработки избыточных активных форм кислорода. Эти изменения повреждают клубочки почек, что приводит к отличительной особенности альбуминурии (Cao and Cooper J Diabetes Investig. 2011; 2 (4): 243-247). По мере развития диабетической нефропатии барьер клубочковой фильтрации (GFB), состоящий из окончатого эндотелия, клубочковой базальной мембраны и эпителиальных подоцитов, является увеличенно поврежденным (Mora-Fernández et al. J.Physiol. (Lond.) 2014; 592 (Pt 18): 3997-4012). Повреждение клубочковой базальной мембраны позволяет белкам в крови просачиваться, что приводит к накоплению в пространстве Боумана в виде отдельных узлов, положительных по иодной кислоте- Шиффу (узлы Киммельстиль-Уилсона).

Диагностика диабетической нефропатии может быть основана на измерении высокого уровня альбумина в моче или свидетельствах снижения функции почек (Lewis and Maxwell Practitioner. 2014; 258 (1768): 13-7, 2). Измерения альбумина могут быть определены следующим образом: нормальная альбуминурия: экскреция альбумина с мочой <30 мг/24 часа; микроальбуминурия: экскреция альбумина с мочой в диапазоне 30-299 мг/сут; клиническая (явная) альбуминурия: экскреция альбумина с мочой ≥300 мг/24 ч. Для тестирования функции почек оценивают скорость клубочковой фильтрации у пациента (eGFR), измеренную по образцу крови. Нормальное значение eGFR составляет от 90 до 120 мл/мин/1,73 м2.

Другие способы лечения, которые могут быть использованы в комбинации с молекулой антитела, описанной в настоящем документе, для лечения диабетической нефропатии, включают, например, ингибитор ангиотензинпревращающего фермента (ACE) (например, каптоприл, эналаприл, лизиноприл или рамиприл), блокатор рецепторов ангиотензина II (ARB) (например, кандесартан цилексетил, ирбесартан, лозартан или телмисартан), блокатор кальциевых каналов (например, амлодипин, дилтиазем или верапамил), мочегонное средство (например, хлорталидон, гидрохлоротиазид или спиронолактон), бета-блокатор (например, атенолол, карведилол или метопролол) и диабетическую терапию (например, контроль высокого кровяного давления или уровня сахара в крови или уменьшение потребления пищевой соли).

Злокачественное новообразование

Молекула антитела, описанная в настоящем документе, может быть использована для лечения или предотвращения злокачественного новообразования. Иллюстративные виды злокачественных новообразований, которые могут быть подвергнуты лечению или предотвращены молекулами антител, описанными в настоящем документе, включают, но не ограничиваются ими, острый лимфобластный лейкоз (ALL), острый миелоидный лейкоз (AML), адренокортикальную карциному, саркому Капоши, связанную с СПИДом лимфому, первичную лимфому центральной нервной системы (ЦНС), рак анального канала, рак аппендикса, астроцитому, атипичную тератоидную/рабдоидную опухоль, базальноклеточную карциному, рак желчных протоков, рак мочевого пузыря, рак кости (например, саркому Юинга или остеосаркому и злокачественную фиброзную гистиоцитому), опухоль головного мозга (например, астроцитому, глиому головного мозга, атипичную тератоидную/рабдоидную опухоль центральной нервной системы, эмбриональную опухоль центральной нервной системы, опухоль зародышевых клеток центральной нервной системы, краниофарингиому или эпендимому), рак молочной железы, бронхиальную опухоль, лимфому Беркитта, карциноидную опухоль (например, желудочно-кишечную карциноидную опухоль), сердечную (сердца) опухоль, эмбриональную опухоль, опухоль зародышевых клеток, лимфому, рак шейки матки, холангиокарциному, хордому, хронический лимфоцитарный лейкоз (ХЛЛ), хронический миелогенный лейкоз (ХМЛ), хроническое миелопролиферативное новообразование, рак толстой кишки, колоректальный рак, краниофарингиому, кожную Т-клеточную лимфому, карциному протоков in situ (DCIS), рак эндометрия, эпендимому, рак пищевода, эстезионейробластому, саркому Юинга, опухоль экстракраниальных зародышевых клеток, опухоль экстрагонадных зародышевых клеток, злокачественное новообразование глаз (например, внутриглазная меланома или ретинобластома), рак фаллопиевой трубы, фиброзную гистиоцитому кости, остеосаркома, рак желчного пузыря, рак желудка, желудочно-кишечную карциноидную опухоль, желудочно-кишечные стромальные опухоли (GIST), опухоль зародышевых клеток (например, опухоль центральной нервной системы, экстракраниальная опухоль, экстрагонадная опухоль, рак яичников или рак яичка), гестационное трофобластное заболевание, глиому, волосатоклеточный лейкоз, рак головы и шеи, гепатоцеллюлярный (печени) рак, лимфому Ходжкина, гипофарингеальная рак, внутриглазную меланому, опухоль островковых клеток, панкреатическую нейроэндокринную опухоль, саркому Капоши, рак почки (например, почечноклеточный рак или опухоль Вильмса), гистиоцитоз клеток Лангерганса (LCH), рак гортани, лейкоз (например, острый лимфобластный лейкоз (ALL), острый миелоидный лейкоз (AML), хронический лимфоцитарный лейкоз (CLL), хронический миелолейкоз (CML) или волосатоклеточный лейкоз), рак губ и ротовой полости, рак печени, рак легких (например, немелкоклеточный рак легкого (NSCLC) или мелкоклеточный рак легкого), лимфому (например, связанную с СПИДом лимфому Беркитта, кожную Т-клеточную лимфому, лимфому Ходжкина, неходжкинскую лимфому или лимфому центральной центральной нервной системы), макроглобулинемию Вальденстрема, мужской рак груди, злокачественную фиброзную гистиоцитому кости и остеосаркому, меланому (например, внутриглазную (глазную) меланому), карциному клеток Меркель, мезотелиому, метастатический плоскоклеточный рак, карцинома срединного тракта, рака полости рта, синдрома множественной эндокринной неоплазии, множественные миеломы/новообразования плазмацитов, фунгоидный микоз, миелодиспластический синдром, миелодиспластическое/миелопролиферативное новообразование, хроническое миелопролиферативное новообразование, рак носовой полости и рак придаточных пазух носа, рак носоглотки, нейробластому, рак полости рта, рак губы и ротовой полости, рак рак ротоглотки, остеосаркому и злокачественную фиброзную гистиоцитому кости, рак яичников (например, эпителиальный рак яичников или опухоль зародышевых клеток яичника), рак поджелудочной железы, панкреатические нейроэндокринные опухоли (опухоли островковых клеток), папилломатоз, параганглиому, рак придаточных пазух носа и рак носовой полости, рак паращитовидной железы, рак полового члена, рак глотки, феохромоцитому, опухоль гипофиза, плевропульмонарную бластому, перитонеальный рак, рак предстательной железы, рак прямой кишки, ретинобластому, рабдомиосаркому, саркому слюнной железы (саркому Юинга, саркому Капоши, остеосаркому, рабдомиосаркому, саркому мягких тканей или саркому матки), синдром Сезари, рак кожи (например, меланому, карциному Меркель или немеланомный рак кожи), рак тонкой кишки, плоскоклеточный рак, рак яичек, рак горла, тимому и карциному тимуса, рак щитовидной железы, рак переходных клеток почечной лоханки и мочеточников, рак уретры, рак эндометрия, вагинальный рак, рак вульвы или их метастатическое поражение.

В одном варианте осуществления злокачественное новообразование представляет собой гематологическое онкологическое заболевание, например лимфому или лейкоз, например, выбранные из неходжкинской лимфомы В-клеток, хронического лимфоцитарного лейкоза (CLL), лимфомы Ходжкина, множественной миеломы, макроглобулинемии Вальденстрема или лимфоплазматической лимфомы. В одном варианте осуществления злокачественное новообразование представляет собой множественную миелому. В другом варианте осуществления злокачественное новообразование представляет собой солидную опухоль,выбранную, например, из колоректального рака, рака молочной железы (например, карциномы молочной железы), рака пищевода (например, аденокарциномы пищевода), рака головного мозга (например, глиобластомы) или рака почки (например, карцинома почек).

В одном варианте осуществления молекулу антитела используют для лечения лимфомы. Другие методы лечения, которые могут быть использованы в комбинации с молекулой антитела, описанной в настоящем документе, для лечения лимфомы, включают, например, химиотерапию, иммунотерапию, направленную лекарственную терапию, лучевую терапию и трансплантацию стволовых клеток. Иллюстративная направленная лекарственная терапия включает ингибитор CD20 (например, ритуксимаб (RITUXAN® или ибритумомаб тиуксетан (ZEVALIN®)).

В одном варианте осуществления молекулу антитела используют для лечения лейкоза. Другие способы лечения, которые могут быть использованы в комбинации с молекулой антитела, описанной в настоящем документе, для лечения лейкоза включают, например, химиотерапию, иммунотерапию, направленную лекарственную терапию, лучевую терапию и трансплантацию стволовых клеток. Иллюстративная направленная лекарственная терапия включает ингибитор тирозинкиназы (например, иматиниб (GLEEVEC®).

В одном варианте осуществления молекулу антитела используют для лечения множественной миеломы. Другие способы лечения, которые могут быть использованы в комбинации с молекулой антитела, описанной в настоящем документе, для лечения множественной миеломы, включают, например, химиотерапию, кортикостероиды, иммунотерапию, направленную лекарственную терапию, лучевую терапию и трансплантацию стволовых клеток. Иллюстративная направленная лекарственная терапия включает, например, аналог талидомида (например, талидомид (THALOMID®), леналидомид (REVLIMID®) или помалидомид (POMALYST®)).

В одном варианте осуществления молекулу антитела используют для лечения макроглобулинемии Вальденстрема. Другие методы лечения, которые можно использовать в комбинации с молекулой антитела, описанной в настоящем документе, для лечения макроглобулинемии Вальденстрема, включают, например, плазмаферез, химиотерапию, иммунотерапию, направленную лекарственную терапию и трансплантацию стволовых клеток.

В одном варианте осуществления молекулу антитела используют для лечения колоректального рака. Другие способы лечения, которые могут быть использованы в комбинации с молекулой антитела, описанной в настоящем документе, для лечения колоректального рака, включают, например, хирургию, химиотерапию, лучевую терапию, иммунотерапию и направленную лекарственную терапию. Иллюстративная направленная лекарственная терапия включает, например, ингибитор VEGF (например, бевацизумаб (AVASTIN®)), ингибитор EGFR (например, цетуксимаб (ERBITUX®), панитумумаб (VECTIBIX®)) и двойной ингибитор тирозинкиназы VEGFR2-TIE2 (например, регорафениб (STIVARGA®)).

В одном варианте осуществления молекулу антитела используют для лечения рака молочной железы, например карциномы молочной железы. Другие способы лечения, которые могут быть использованы в комбинации с молекулой антитела, описанной в настоящем документе, для лечения рака молочной железы, включают, например, хирургию, химиотерапию, лучевую терапию, гормональную терапию, иммунотерапию и направленную лекарственную терапию. Иллюстративная направленная лекарственная терапия включает, например, ингибитор HER2 (например, трастузумаб (HERCEPTIN®), пертузумаб (PERJETA®), адо-трастузумаб (KADCYLA®) или лапатиниб (TYKERB®)) или ингибитор VEGF (например, бевацизумаб (Avastin®)).

В одном варианте осуществления молекулу антитела используют для лечения рака пищевода, например аденокарциномы пищевода. Другие способы лечения, которые могут быть использованы в комбинации с молекулой антитела, описанной в настоящем документе, для лечения рака пищевода, включают, например, хирургию, химиотерапию, лучевую терапию и иммунотерапию.

В одном варианте осуществления молекулу антитела используют для лечения рака мозга, например глиобластомы. Другие способы лечения, которые могут быть использованы в комбинации с молекулой антитела, описанной в настоящем документе, для лечения рака мозга, включают, например, хирургию, химиотерапию, лучевую терапию, радиохирургию, иммунотерапию и направленную лекарственную терапию. Иллюстративная направленная лекарственная терапия включает, например, ингибитор VEGF (например, бевацизумаб (AVASTIN®)).

В одном варианте осуществления молекулу антитела используют для лечения рака почки, например карциномы почек. Другие способы лечения, которые могут быть использованы в комбинации с молекулой антитела, описанной в настоящем документе, для лечения рака почки, включают, например, хирургическую операцию, криодеструкцию, радиочастотную абляцию, лучевую терапию, иммунотерапию и направленную лекарственную терапию. Иллюстративная направленная лекарственная терапия включает, например, ингибитор VEGF (например, бевацизумаб (AVASTIN®)), ингибитор тирозинкиназы (например, акситиниб (INLYTA®), пазопаниб (VOTRIENT®), сорафениб (NEXAVAR®) или сунитиниб (SUTENT ®) или ингибитор mTOR (например, темсиролимус (TORISEL®) или эверолимус (AFINITOR®).

Иммунопролиферативные расстройства

Молекула антитела, описанная в настоящем документе, может быть использована для лечения или предотвращения иммунопролиферативного расстройства. Иммунопролиферативные расстройства (также известные как иммунопролиферативные заболевания или иммунопролиферативные новообразования) представляют собой нарушения иммунной системы, которые характеризуются аномальной пролиферацией первичных клеток иммунной системы (например, В-клеток, Т-клеток и натуральных киллерных клеток (NK)) или чрезмерным продуцированием иммуноглобулинов (например, антител).

Типичные иммунопролиферативные расстройства включают, но не ограничиваются ими, лимфопролиферативные расстройства (LPD), гипергаммаглобулинемию и парапротеинемию. Лимфопролиферативные расстройства включают несколько патологических состояний, при которых лимфоциты продуцируются в избыточных количествах. Они обычно возникают у пациентов, которые подвергли риску иммунную систему. Гипергаммаглобулинемия часто характеризуется повышенным уровнем иммуноглобулинов в сыворотке крови. Парапротеинемия или моноклональная гаммапатия - это наличие избыточного количества одного моноклонального гаммаглобулина (например, парапротеина) в крови. В одном варианте осуществления молекулу антитела используют для лечения моноклональной IgA гипергаммаглобулинемии.

Васкулит

Молекула антитела, описанная в настоящем документе, может быть использована для лечения или профилактики васкулита. Васкулит - это группа расстройств, которые разрушают кровеносные сосуды при воспалении. Васкулит в основном вызван миграцией лейкоцитов и, как следствие, повреждением. Иллюстративные типы васкулитов включают, но не ограничиваются ими, микроскопический полиартериит (полиангиит), гранулематоз Вегенера, пурпуру Шенлейна-Геноха и узелковый полиартериит.

В одном варианте осуществления молекулу антитела используют для лечения пурпуры Шенлейна-Геноха (IgA-ассоциированный васкулит).

Пурпура Шенлейна-Геноха (HSP, также известная как анафилактоидная пурпура, пурпура-ревматика или пурпура Шенлейна-Геноха) - это заболевание кожи и других органов, которые чаще всего поражают детей. HSP представляет собой системный васкулит (воспаление кровеносных сосудов) и характеризуется депонированием иммунных комплексов IgA и компонента 3 комплемента (C3) на артериолах, капиллярах и венулах. В коже заболевание вызывает ощутимую пурпуру (небольшие кровоизлияния); часто с болью в суставах и брюшной полости. При поражении почек может быть потеря небольших количеств крови и белка в моче; в небольшом количестве случаев участие почек переходит в хроническое заболевание почек даже с необратимым повреждением почек. HSP часто предшествует инфекция, такая как инфекция горла.

Симптомы пурпуры Шенлейна-Геноха включают, например, сыпь (пурпуру), опухшие или больные суставы (артрит), желудочно-кишечные симптомы (например, боль в животе, тошнота, рвота или кровавый стул) и поражение почек (например, белок или кровь в моче). Уровень IgA в сыворотке пациентов с HSP является высоким.

Стандарты для определения пурпуры Шенлейна-Геноха включают, например, классификацию Американского колледжа ревматологии (ACR) 1990 года (Mills et al.(1990). Arthritis and Rheumatism 33 (8): 1114-21), Согласительной Конференции в Чэпел Хилле 1994 года (CHCC) (Jennette et al. (1994) Arthritis and Rheumatism 37 (2): 187-92), а также классификацию Европейской лиги против ревматизма (EULAR) и общества детской ревматологии (PRES) 2006 года, которые включают в себя обязательный критерий пальпирования пурпуры по меньшей мере вместе с одним из следующих результатов: диффузная абдоминальная боль, преобладающее депонирование IgA (подтвержденное на биопсии кожи), острый артрит в любом суставе и почечная недостаточность (о чем свидетельствует наличие крови и/или белка в моче) (Ozen et al. (2006) Annals of Rheumatic Diseases 65 (7): 936-41).

Другие способы лечения, которые могут быть использованы в комбинации с молекулой антитела, описанной в настоящем документе, для лечения пурпуры Шенлейна-Геноха, включают, например, анальгетики для боли в животе и суставах, стероиды (например, пероральные стероиды или комбинацию внутривенного метилпреднизолона (стероида), циклофосфамид и дипиридамол с последующим преднизоном). Другие схемы также включают, например, стероиды/азатиоприн и стероиды/циклофосфамид (с гепарином и варфарином или без него) или внутривенный иммуноглобулин (IVIG).

В другом варианте осуществления молекулу антитела используют для лечения острого пролиферативного гломерулонефрита, например, после стрептококкового гломерулонефрита.

Острый пролиферативный гломерулонефрит представляет собой расстройство клубочков (гломерулонефрит) или мелких кровеносных сосудов в почках. Это распространенное осложнение бактериальных инфекций, как правило, инфекции кожи стрептококковыми бактериями типов 12, 4 и 1 (импетиго), а также после стрептококкового фарингита, для которых он также известен как постинфекционный или постстрептококковый гломерулонефрит. Инфекция вызывает образование кровеносных сосудов в почках воспаления, что препятствует способности почечных органов фильтровать мочу.

Патофизиология этого расстройства согласуется с механизмом, опосредованным иммунным комплексом. Это расстройство производит белки, которые имеют разные антигенные детерминанты, которые, в свою очередь, имеют аффинность к сайтам в клубочках. Как только происходит связывание с клубочком посредством взаимодействия с пропердином, активируется комплемент. Фиксация комплемента вызывает генерацию дополнительных воспалительных медиаторов.

Симптомы острого пролиферативного гломерулонефрита включают, например, гематурию, олигурию, отек, гипертонию, лихорадку, головную боль, недомогание, анорексию и тошноту.

Другие способы лечения, которые можно использовать в комбинации с молекулой антитела, описанной в настоящем документе, для лечения острого пролиферативного гломерулонефрита, включают, например, контроль артериального давления (АД) и контроль количества калия у лиц с острой фазой олигурического повреждения почек.

Аутоиммунные расстройства

Молекула антитела, описанная в настоящем документе, может быть использована для лечения или профилактики аутоиммунного расстройства. Иллюстративные аутоиммунные нарушения, которые могут быть подвергнуты лечению или предотвращены с помощью молекулы антитела, описанной в настоящем документе, включают без ограничения, острый рассеянный энцефаломиелит (ADEM), острый некротический геморрагический лейкоэнцефалит, болезнь Аддисона, агаммаглобулинемию, алопецию, амилоидоз, анкилозирующий спондилит, анти-GBIM/анти-TBM нефрит, антифосфолипидный синдром (APS), аутоиммунную ангиодистрофию, аутоиммунную апластическую анемию, аутоиммунную дисфункцию, аутоиммунный гепатит, аутоиммунную гиперлипидемию, аутоиммунный иммунодефицит, аутоиммунную болезнь внутреннего уха (AIED), аутоиммунный миокардит, аутоиммунный оофорит, аутоиммунный панкреатит, аутоиммунную ретинопатию, аутоиммунную тромбоцитопеническую пурпуру (АТФ), аутоиммунную болезнь щитовидной железы, аутоиммунную уртикарию, аксонные и нейронные невропатии, болезнь Бало, болезнь Бехчета, буллезный пемфигоид, кардиомиопатию, болезнь Кастлемена, целиакию, болезнь Шагаса, синдром хронической усталости, хроническую воспалительную демиелинизирующую полинейропатию (CIDP), хронический рецидивирующий многофокальный остомиелит (CRMO), синдром Чарга-Стросса, рубцующийся пемфигоид/ доброкачественный пемфигоид слизистой оболочки, болезнь Крона, синдром Когана, болезнь холодовых агглютининов, врожденную блокаду сердца, миокардит Коксаки, болезнь CREST, эссенциальную смешанную криоглобулинемию, демиелинизирующие невропатии, герпетиформный дерматит, дерматомиозит, болезнь Девика (оптиконейромиелит), дискоидную волчанку, синдром Дресслера, эндометриоз, эозинофильный эзофагит, эозинофильный фасцит, узелковую эритему, экспериментальный аллергический энцефаломиелит, синдром Эванса, фибромиалгию, фиброзный альвеолит, гигантоклеточный артериит (височный артериит), гигантоклеточный миокардит, гломерулонефрит, синдром Гудпасчера, гранулематоз с полиангититом (ранее называемый гранулематозом Вегенера), болезнь Грейвса, синдром Гийена-Барре, энцефалит Хашимото, тиреоидит Хашимото, гемолитическую анемию, пурпуру Шенлейна-Геноха, герпес беременных, гипогаммаглобулинемию, идиопатическую тромбоцитопеническую пурпуру (ITP), IgA-нефропатию, связанная с IgG4 склерозирующая болезнь, иммунорегуляторные липопротеины, миозит с телами включения, интерстициальный цистит, ювенильный артрит, ювенильный диабет (диабет типа 1), ювенильный миозит, синдром Кавасаки, синдром Ламберта-Итона, лейкоцитокластический васкулит, плоский лишай, склеротический лишай, деревянистый конъюнктивит, линейный IgA дерматоз (LAD), волчанку (SLE), болезнь Лайма, хронические заболевания, болезнь Меньера, микроскопический полиангит, смешанная болезнь соединительной ткани (MCTD), язва Мурена, болезнь Мухи-Габермана, рассеянный склероз, миастению гравис, миозит, нарколепсию, оптиконейромиелит (Девика), нейтропению, глазной рубцующийся пемфигоид, оптиконеврит, палиндромный ревматизм, PANDAS (педиатрические аутоиммунные нейропсихиатрические расстройства, связанные со стрептококком), паранеопластическую мозжечковую дегенерацию, пароксизмальную ночную гемоглобинурию (PNH), синдром Парри-Ромберга, синдром Персонейджа-Тернера, Pars planitis (периферический увеит), пемфигус, периферическую нейропатию, перивенозный энцефаломиелит, пернициозную анемию, синдром POEMS, узелковый полиартериит, аутоиммунные полигландулярные синдромы типа I, II и III, полимиалгию, ревматизм, полимиозит, синдром постинфаркта миокарда, постперикардиотомический синдром, прогестеронный дерматит, первичный билиарный цирроз, первичный склерозирующий холангит, псориаз, псориатический артрит, идиопатический легочный фиброз, гангренозную приодермию, истинную эритроцитарную аплазию, болезнь Рейно, реактивный артрит, рефлекторную симпатическую дистрофию, синдром Рейтера, рецидивирующий полихондрит, синдром беспокойных ног, забрюшинный фиброз, ревматическую лихорадку, ревматоидный артрит, саркоидоз, синдром Шмидта, склероз, склеродермию, синдром Шегрена, аутоиммунитет спермы и яичек, синдром скованного человека, подострый септический эндокардит (SBE), синдром Сусака, симпатическую офтальмию, артериит Такаясу, височный артериит/гигантоклеточный артериит, тромбоцитопеническую пурпуру (ТТП), синдром Толоса-Ханта, поперечный миелит, диабет 1 типа, язвенный колит, недифференцированную болезнь соединительной ткани (UCTD), увеит, васкулит, везикулобуллезный дерматоз, витилиго, гранулематоз Вегенера (также известный как гранулематоз с полиангититом (GPA).

В одном варианте осуществления аутоиммунное расстройство представляет собой ревматоидный артрит, системную красную волчанку, линейный IgA-буллезный дерматоз (например, линейный иммуноглобулин A (IgA) дерматоз) или IgA-опосредованный приобретенный буллезный эпидермолиз.

В одном варианте осуществления молекулу антитела используют для лечения ревматоидного артрита. Другие способы лечения, которые могут быть использованы в комбинации с молекулой антитела, описанной в настоящем документе, для лечения ревматоидного артрита, включают, например, NSAID, стероид (например, кортикостероид), противоревматическое лекарственное средство, модифицирующее заболевание (DMARD) (например, метотрексат (TREXALL®), лефлуномид (ARAVA®), гидроксихлорохин (PLAQUENIL®) или сульфасалазин (AZULFIDINE®), модификатор биологического ответа (например, абатасепт (ORENCIA®), адалимумаб (HUMIRa®), анакин (KINERET®), сертолизумаб (CIMZIA®), этанерцепт (ENBREL®), голимумаб (SIMPONI®), инфликсимаб (REMICADE®), ритуксимаб (RITUXAN®) и тоцилизумаб (ACTEMRA®), или тофаситиниб (XELJANZ®)), или хирургическое вмешательство.

В одном варианте осуществления молекулу антитела используют для лечения системной красной волчанки. Другие способы лечения, которые могут быть использованы в комбинации с молекулой антитела, описанной в настоящем документе, для лечения ревматоидного артрита, включают, например, NSAID, противомалярийное лекарственное средство (например, гидроксихлорохин (PLAQUENIL®), кортикостероид (например, преднизон), иммунодепрессант (например, азатиоприн (IMURAN®, AZASAN®), микофенолят (CELLCEPT®), лефлуномид (ARAVA®) или метотрексат (TREXALL®)) или ингибитор BAFF (например, белимумаб (BENLYSTA®).

В одном варианте осуществления молекулу антитела используют для лечения линейного IgA буллезного заболевания (например, линейный иммуноглобулин A (IgA)-дерматоз). Другие способы лечения, которые могут быть использованы в комбинации с молекулой антитела, описанной в настоящем документе, для лечения линейного IgA-буллезного заболевания (например, линейного иммуноглобулин A (IgA)-дерматоза), включают, например, кортикостероиды (например, преднизон или преднизолон), антибиотик (например, тетрациклин, эритромицин, сульфапиридин), колхицин или микофенолят мофетил.

В одном варианте осуществления молекулу антитела используют для лечения IgA-опосредованного приобретенного буллезного эпидермолиза. Другие способы лечения, которые могут быть использованы в комбинации с молекулой антитела, описанной в настоящем документе, для лечения IgA-опосредованного приобретенного буллезного эпидермолиза, включают, например, антибиотик, противовоспалительное лекарственное средство (например, кортикостероид) или хирургическое вмешательство.

Другие расстройства

Молекулу антитела, описанную в настоящем документе, можно использовать для лечения или профилактики других расстройств, например, IgA-пемфигуса, целиакии или алкогольного цирроза.

В одном варианте осуществления молекулу антитела используют для лечения или профилактики IgA-пемфигуса. Другие способы лечения, которые могут быть использованы в комбинации с молекулой антитела, описанной в настоящем документе, для лечения пемфигуса IgA, включают, например, кортикостероид, иммунодепрессант (например, азатиоприн (IMURAN®), метотрексат (TREXALL®) или микофенолят-мофетил (CELLCEPT®)), ингибитор CD-20 (например, ритуксимаб (RITUXAN®), антибиотик, противовирусное средство или противогрибковый агент.

В одном варианте осуществления молекулу антитела используют для лечения или профилактики целиакии. Другие способы лечения, которые можно использовать в комбинации с молекулой антитела, описанной в настоящем документе, для лечения целиакии, включают, например, диету без глютена, витаминную или минеральную добавку или стероид.

В одном варианте осуществления молекулу антитела используют для лечения или профилактики алкогольного цирроза. Другие способы лечения, которые можно использовать в комбинации с молекулой антитела, описанной в настоящем документе, для лечения алкогольного цирроза, включают, например, иммунодепрессант (например, азатиоприн, преднизон, азатиоприн, циклоспорин или метотрексат) или трансплантацию печени.

Комбинированные терапии

Молекулы антител можно использовать в комбинации с другими видами терапии. Например, комбинированная терапия может включать в себя молекулу антитела, включенную в один состав и/или совместно вводимую вместе с одним или более дополнительными терапевтическими агентами, например с одним или более дополнительных терапевтических агентов, описанных в настоящем документе. В других вариантах осуществления молекулы антитела вводят в комбинации с другими формами терапевтического лечения, например, с другими формами терапевтического лечения, описанными в настоящем документе. Такая комбинированная терапия может преимущественно использовать более низкие дозы вводимых терапевтических агентов, что позволяет избежать возможных токсических эффектов или осложнений, связанных с различными монотерапиями.

Используемый в настоящем описании термин вводить «в комбинации» означает, что два (или более) различных способа лечения доставляют пациенту до или во время болезни пациента. В одном варианте осуществления два или более лечения доставляются профилактически, например, до того, как субъект заболевает или диагностирован с расстройством. В другом варианте осуществления два или более способа лечения доставляют пациенту после того, как у него развилось или было диагностировано расстройство. В некоторых вариантах осуществления доставка одного способа лечения все еще происходит, когда начинается доставка второго, так что происходит их перекрывание. Иногда это называют «одновременной» или «параллельной доставкой». В других вариантах осуществления доставка одного способа лечения заканчивается до начала другого способа лечения. В некоторых вариантах осуществления обоих случаев лечение является более эффективным благодаря комбинированному введению. Например, второе лечение более эффективно, например, эквивалентный эффект наблюдают при меньшей степени второго лечения, или при втором лечении в большей степени уменьшаются симптомы, чем можно было бы наблюдать, если бы второе лечение проводили в отсутствие первого лечения, или аналогичную ситуацию наблюдают при первом лечении. В некоторых вариантах осуществления доставка такова, что уменьшение симптома или другого параметра, связанного с расстройством, больше, чем то, что можно было бы наблюдать с одним видом лечения, полученном в отсутствие другого. Эффект двух видов лечения может быть частично аддитивным, полностью аддитивным или большим, чем аддитивный. Доставка может быть такой, что эффект первого доставленного вида лечения все еще детектируется, когда доставляют второй вид лечения.

В некоторых вариантах осуществления дополнительный агент представляет собой вторую молекулу антитела, например молекулу антитела, отличную от первой молекулы антитела. Иллюстративные молекулы антител, которые могут использоваться в комбинации, включают, но не ограничиваются ими, любую комбинацию молекул антител, перечисленных в Таблице 1 или 5.

В одном варианте осуществления молекулу антитела вводят в комбинации со второй терапией для лечения или предотвращения IgA-нефропатии.

В одном варианте осуществления молекулу антитела вводят в комбинации с ингибитором ангиотензинпревращающего фермента (ACE) или блокатором рецепторов ангиотензина (ARB).

В одном варианте осуществления молекулу антитела вводят в комбинации с Fc-рецептором-ловушкой, например растворимым Fc-рецептором. В одном варианте растворимый Fc-рецептор представляет собой растворимый Fc-гамма рецептор IIB. В одном варианте растворимый Fc-рецептор представляет собой SM101/BAX 1810 (Baxalta). В одном варианте растворимый рецептор Fc вводят в дозе от 1 мг/кг до 50 мг/кг, например, от 5 мг/кг до 15 мг/кг, от 12 мг/кг до 24 мг/кг или от 20 мг/кг до 30 мг/кг.

В одном варианте осуществления молекулу антитела вводят в комбинации с кортикотропином продолжительного действия (ACTHAR®). Кортикотропин продолжительного действия является аналогом адренокортикотропного гормона (ACTH). В оном варианте осуществления кортикотропин продолжительного действия вводят в дозе от 50Ед до 150Ед, например, от 80Ед до 120Ед, путем подкожной инъекции два или три раза в неделю. В варианте осуществления кортикотропин продолжительного действия вводят в дозе 120Ед путем подкожной инъекции, например один, два или три раза в неделю.

В одном варианте осуществления молекулу антитела вводят в комбинации с микофенолат мофетилом (MMF). Микофенолат мофетил представляет собой 2-морфолиноэтиловый эфир микофенольной кислоты (MPA), иммунодепрессант и ингибитор индозинмонофосфатдегидрогеназы (IMPDH). В одном варианте осуществления микофенолат мофетил вводят в дозе от 0,5 г до 2 г, например, от 1 г до 1,5 г или от 1,5 г до 2 г, перорально или внутривенно, например один, два или три раза в день.

В одном варианте осуществления молекулу антитела вводят в комбинации с бортезомибом (VELCADE®). Бортезомиб, также известный как [(1R)-3-метил-1-({(2S)-3-фенил-2-[(пиразин-2-илкарбонил)амино]пропаноил}амино)бутил]борная кислота, представляет собой протеасомный ингибитор. В одном варианте осуществления бортезомиб вводят в дозе от 0,5 мг/м2 до 2,5 мг/м2, например, от 1 мг/м2 до 1,5 мг/м2, например, каждые три дня или каждую неделю.

В одном варианте осуществления молекулу антитела вводят в комбинации с аллопуринолом (ZYLOPRIM®). Аллопуринол, также известный как 1Н-пиразоло[3,4-d]пиримидин-4(2Н)-он, представляет собой пуриновый аналог. В варианте осуществления аллопуринол вводят в дозе от примерно 50 до 1000 мг, например, от 100 мг до 600 мг или от 200 до 300 мг, перорально, например, один раз в день или один раз в два дня.

В одном варианте осуществления молекулу антитела вводят в комбинации с преднизоном и/или циклофосфамидом. В одном варианте осуществления преднизон вводят в дозе от 0,2 до 2 мг/кг, например, от 0,5 до 1 мг/кг, например, один раз в день. В одном варианте циклофосфамид вводят в дозе от 0,2 до 2 г, например, от 0,5 до 1 г, например, один раз в день.

В одном варианте осуществления молекулу антитела вводят в комбинации с ритуксимабом (RITUXAN®). Ритуксимаб представляет собой химерное моноклональное антитело против CD20. В одном варианте осуществления ритуксимаб вводят в дозе от 100 мг/м2 до 500 мг/м2, например, от 200 мг/м2 до 450 мг/м2 или от 300 мг/м2 до 400 мг/м2, внутривенно, например, один раз еженедельно, раз в две недели, раз в четыре недели или раз в восемь недель.

В одном варианте осуществления молекулу антитела вводят в комбинации с блисибимодом. Блисибимод, также известный как A-623 или AMG 623, является селективным антагонистом активирующего фактора B-клеток (BAFF, также известного как B-лимфоцитарный стимулятор или BLyS).

В одном варианте осуществления молекулу антитела вводят вместе с будесонидом. В одном варианте осуществления будесонид представляет собой NEFECON®, пероральную композицию, которая высвобождает будесонид.

В одном варианте осуществления молекулу антитела вводят вместе с валсартаном и/или пробуколом. В одном варианте осуществления валсартан вводят в дозе от 50 мг/сут до 200 мг /сут, например, от 80 мг /сут до 160 мг/сут. В одном варианте осуществления пробукол вводят в дозе от 500 мг/сут до 1000 мг/сут, например, от 700 мг /сут до 800 мг/сут.

В одном варианте осуществления молекулу антитела вводят в комбинации с OPL-CCL2-LPM. OPL-CCL2-LPM представляет собой рекомбинантный слитый белок, состоящий из хемокина человека CCL2 (моноцитарный хемоаттрактантный белок-1), слитый с укороченной формой ферментативно активного домена A1 голоцитоксина Shigella dysenteriae (SA1). В одном варианте осуществления OPL-CCL2-LPM вводят в дозе от 0,001 до 1 мг/кг, например, от 0,01 мг/кг до 0,5 мг/кг или от 0,05 мг/кг до 0,1 мг/кг, например, внутривенно.

В одном варианте осуществления молекулу антитела вводят в комбинации с метилпреднизолоном. В одном варианте осуществления метилпреднизолон вводят в дозе от 0,1 мг/кг до 2 мг/кг/сут, например, от 0,2 мг/кг/сут до 1,5 мг/кг/сут или от 0,5 мг/кг/сут до 1 мг/кг/сут, например, перорально.

В одном варианте осуществления молекулу антитела вводят в комбинации с сиролимусом. Сиролимус, также известный как рапамицин, может ингибировать IL-2 и другие механизмы сигнальной трансдукции, зависимые от цитокиновых рецепторов, посредством действия на mTOR и тем самым блокируя активацию T- и B-клеток. В одном варианте осуществления сиролимус вводят в дозе от 0,2 мг/сут до 2 мг/сут, например, от 0,5 мг/сут до 1 мг/сут.

В одном варианте осуществления молекулу антитела вводят в комбинации с блокатором ренин-ангиотензиновой системы (RAS). Например, блокатор RAS может быть ингибитором ангиотензинпревращающего фермента (ACE) или блокатором рецептора AT1 (ARB). Иллюстративные ингибиторы ACE, которые могут быть использованы в комбинации с молекулой антитела, описанной в настоящем документе, включают, например, беназеприл (LOTENSIN®), каптоприл, эналаприл (VASOTEC®), фозиноприл, лизиноприл (ZESTRIL®), моэксиприл (UNIVASC®), периндоприл (ACEON ®), хинаприл (ACCUPRIL®), рамиприл (ALTACE®) или трандолаприл (MAVIK®). Иллюстративные блокаторы АТ1-рецепторов, которые могут быть использованы в комбинации с молекулой антитела, описанной в настоящем документе, включают, например, кандесартан (ATACAND®), эпросартан (TEVETEN®), ирбесартан (AVAPRO®), лозартан (COZAAR®), олмесартан (BENICAR®) телмисартан (MICARDIS®) или валсартан (DIOVAN®).

В одном варианте осуществления молекулу антитела вводят в комбинации с фостаматинибом. Фостаматиниб представляет собой пролекарственное средство активного соединения таматиниб (R-406), которое является ингибитором фермента тирозинкиназы селезенки (Syk). В одном варианте осуществления фостаматиниб вводят в дозе примерно от 50 до 200 мг, например, от 100 мг до 150 мг, например, перорально, например, каждый день.

В одном варианте осуществления молекулу антитела вводят в комбинации с парикальцитолом. В одном варианте осуществления парикальцитол вводят в дозе примерно от 0,2 до 2 мг, например, от 0,5 мг до 1 мг, например, каждый день.

В одном варианте осуществления молекулу антитела вводят в комбинации с рамиприлом. В одном варианте осуществления рамиприл вводят в дозе примерно от 0,5 до 5 мг, например, от 1 мг до 4 мг или от 2 мг до 3 мг, например, каждый день.

В одном варианте осуществления молекулу антитела вводят в комбинации с ингибитором ангиотензин-превращающего фермента (ACE). В одном варианте осуществления ингибитор ACE представляет собой эналаприл (VASOTEC®).

В одном варианте осуществления молекулу антитела вводят в комбинации с иммунодепрессантом. В одном варианте осуществления иммунодепрессант представляет собой такролимус. Такролимус, также известный как FK-506 или фуджимицин, представляет собой макролидный ингибитор кальциневрина.

В одном варианте осуществления молекулу антитела вводят в комбинации с омега-3 жирными кислотами.

В одном варианте осуществления молекулу антитела вводят в комбинации с CCX168. CCX168 представляет собой ингибитор C5aR перорального введения.

Иллюстративные терапии, которые могут быть использованы в комбинации с молекулой антитела или композицией, описанной в настоящем документе, для лечения или предотвращения других расстройств, также описаны в разделе «Способы лечения или предотвращения заболеваний» настоящего описания.

Методы диагностики

В некоторых аспектах в настоящем раскрытии предложен способ диагностики для детектирования присутствия APRIL in vitro (например, в биологическом образце, таком как биопсийный или образец крови) или in vivo (например, визуализация in vivo у пациента). Способ включает: (i) контакт образца с молекулой антитела, описанной в настоящем документе, или введение пациенту молекулы антитела; (необязательно) (ii) контакт контрольного образца, например контрольного образца (например, контрольного биологического образца, такого как биопсийный или образец крови) или контрольного пациента с молекулой антитела, описанной в настоящем документе; и (iii) детектирование образования комплекса между молекулой антитела и APRIL в образце или у пациента или в контрольном образце или у контрольного пациента, где изменение, например, статистически значимое изменение, в образовании комплекса в образце или у пациента относительно контрольного образца или пациента свидетельствует о наличии APRIL в образце. Молекула антитела может быть помечена прямо или косвенно детектируемым веществом для облегчения детектирования связанного или несвязанного антитела. Подходящие детектируемые вещества включают различные ферменты, протезные группы, флуоресцентные вещества, люминесцентные вещества и радиоактивные вещества, как описано выше и более подробно описано ниже.

Термин «образец», если он относится к образцам, используемым для детектирования полипептида (например, APRIL) или нуклеиновой кислоты, кодирующей полипептид, включает, но не ограничивается ими, клетки, клеточные лизаты, белки или мембранные экстракты клеток, биологические жидкости, таких как кровь, или образцы тканей, такие как биопсии.

Образование комплекса между молекулой антитела и APRIL может быть детектировано путем измерения или визуализации либо молекулы антитела, связанной с APRIL, либо несвязанной молекулы антитела. Могут использоваться любые подходящие анализы для детектирования, а обычные анализы детектирования включают твердофазные иммуноферментные анализы (ИФА), радиоиммуноанализ (RIA) или тканевую иммуногистохимию. Альтернативно мечению молекулы антитела, присутствие APRIL можно анализировать в образце с помощью конкурентного иммуноанализа с использованием стандартов, меченных детектируемым веществом, и немеченой молекулы антитела. В этом анализе биологический образец, меченые стандарты и молекулу антитела объединяют и определяют количество меченого стандарта, связанного с немеченой связывающей молекулой. Количество APRIL в образце обратно пропорционально количеству меченого стандарта, связанного с молекулой антитела.

Молекулы антител, описанные в настоящем документе, могут быть использованы для диагностики расстройств, которые могут быть подвергнуты лечению или предотвращены с помощью молекул антител, описанных в настоящем документе. Способы детектирования или диагностики, описанные в настоящем документе, могут быть использованы в комбинации с другими способами, описанными в настоящем документе, для лечения или предотвращения описанного в настоящем документе расстройства.

ПРИМЕРЫ

Пример 1. Иммунизация и селекция антител против APRIL.

Самок мышей CD-1 IGS (аутбредные) (массой 20-25 г), в возрасте 7-8 недель иммунизировали внутрибрюшинно (ip) 10 мкг рекомбинантного олигомерного FLAG-ACRP30headless APRIL, упоминаемого здесь как FLAG-ACR-APRIL. Для целей потенциальной генерации ответа перекрестно реактивного между видами антитела против APRIL (мыши и человека) проводили как аутологичные, так и гетерологичные иммунизации, и они включали в себя использование человеческого и/или мышиного APRIL в качестве иммуногенов. FLAG-меченные APRIL-иммуногены готовили в объеме 200 мкл, состоящем из 100 мкл стерильного PBS и 100 мкл адъювантной системы эмульгированного RIBI (Sigma Aldrich), состоящей из определенной смеси монофосфорилпиридиновой кислоты A (MPL, выделенной из Salmonella minnesota) и синтетического дикориномиколата трегалозы (TDM, аналог димиколата трегалозы из кордового фактора туберкулезной бациллы). 3 мышей на группу иммунизировали два раза в неделю на протяжении четырех недель. Титры сыворотки антител против APRIL затем детектировали с помощью непрямого ИФА с использованием FLAG-GCN4 APRIL, R & D Systems. Вкратце, 50 нг FLAG-GCN4 hAPRIL (105-250) или FLAG-GCN4 mAPRIL (96-241) в PBS наносили в виде покрытия на 96-луночные плоскодонные планшеты Maxisorp (NUNC # 439454) в течение ночи при 4°C. Планшеты с покрытием блокировали в 1x блокирующем буфере, содержащем 5% BLOTTO™ в PBS и 0,05% Tween-20 (PBST) в течение 1 часа при комнатной температуре. Все последующие стадии инкубации сопровождались промежуточной стадией промывки 3 раза в PBST. Титры антитела против APRIL определяли из кратного разведения сывороток мыши (в PBS), начиная с 1:1000 и с последующей инкубацией с 1:5000 HRP-конъюгированными кроличьих антител против мышиного IgG (Jackson Immunoresearch Laboratories) в течение 1 часа при комнатной температуре. Реактивность иммуноглобулина против APRIL визуализировали, используя 100 мкл/на лунку свежеприготовленного субстрата TMB (KPL). Колориметрическое проявление проводили в течение 10 минут при комнатной температуре перед подавлением ферментативной реакции путем добавления 100 мкл 1Н серной кислоты и путем количественной оценки с помощью поглощения при 450 нм. Мышей с сильными сероположительными титрами против первичного иммуногена (человеческого или мышиного APRIL) стимулировали путем инъекции в хвостовую вену за три дня до умерщвления, удаления селезенки и выделения слияний спленоцитов. Были отмечены мыши с предпочтительной межвидовой перекрестной реактивностью на основе профилирования сыворотки.

P3X63Ag8.653 плазмоцитомы (АТСС # CRL-1580), называемые здесь P3X-клетками, использовали в качестве источника миеломы партнера по слиянию. Выделенные из селезенки В-клетки иммортализовали с использованием опубликованных модифицированных методов. Вкратце, клетки P3X культивировали по меньшей мере в течение 1 недели до использования и поддерживали в логарифмической фазе для достижения плотности клеток-мишеней от 6×10⁵ и 1,2×10⁶ клеток/мл и с 95%-ной жизнеспособностью за день до последующего проведения слияния спленоцитов. Клетки селезенки выделяли из 2-3 мышей на группу иммунизации после эвтаназии и сердечной пункции и собирали в DMEM+1% антибиотик (пенициллин/стрептомицин), а затем осторожно промывали центрифугированием (2X) до образования тканевого дебриса и осветляли суспендированные спленоциты. Затем спленоциты осаждали путем центрифугирования в течение 10 мин при 400хg при 4°С и эритроциты лизировали при комнатной температуре в течение 5 минут после осторожного ресуспендирования клеточного осадка в 1X буфере для лизиса эритроцитов. Спленоциты собирали центрифугированием (2X) после разбавления ледяным DMEM. Клетки P3X также промывали 3 раза в DMEM перед слиянием.

Спленоциты мыши сливали с клетками P3X в среде для слияния (50% PEG 1450, Sigma Aldrich)) при соотношении 3:1 в соответствии с установленными методами. Вкратце, предварительно нагретый ПЭГ постепенно добавляли к осажденной смеси спленоцитов и клеток Р3Х (37°С с осторожным ресуспендированием) с последующим постепенным добавлением предварительно нагретой DMEM. Слитые клетки собирали низкоскоростным центрифугированием и ресуспендировали в гибридомных селективных средах (гипоксантин-аминоптерин-тимидин, Sigma Aldrich) с последующей инкубацией при 37°C в течение 30 минут. Слитые клетки высевали в 96-луночный планшет с плотностью приблизительно 2×10⁶ клеток селезенки на планшет (20000 клеток на лунку).

Супернатанты гибридомы скринировали с помощью ИФА на 14-й день после слияния, как описано (Пример 2). Вкратце, супернатанты из кондиционированной среды количественно определяли на предмет суммарного IgG с помощью биоинферометрии с использованием набора AMC количественного определения мышиного IgG (Pall Biosciences). Супернатанты из кондиционированных сред гибридомы нормализовали до 10 мкг/мл, когда это было возможно, и анализировали на реактивность APRIL как для FLAG-GCN4-hAPRIL, так и для FLAG GCN4-mAPRIL, как описано. Для исключения клонов с сильной иммунореактивностью к специфичнымм эпитопам FLAG или ACRP30 (необязательные эпитопы, присутствующие в исходном иммуногене), также включали промежуточный скрининг с использованием белка, отличного от APRIL FLAG-меченого (FLAG-ACR30-myc-his). APRIL-положительные гибридомы (человеческий APRIL или мышиный) подвергали скринингу на активность блокирования рецептора с помощью ИФА, как описано в Примере 3. Вкратце, рекомбинантный TACI-Fc наносили в виде покрытия на 96-луночные планшеты Maxisorp по 100 нг/на лунку в 0,1 М карбонатно-бикарбонатном буфере (рН 9,6) в течение ночи при 4°C. Планшеты блокировали 1% BSA в 1xPBS в течение 1 часа при 37°C, а затем промывали 3 раза в 1X PBST (с 0,025% Tween). Рекомбинантный FLAG-меченый APRIL (мышиный или человеческий) в концентрации 50 нг/мл предварительно смешивали в связывающем буфере с супернатантом из гибридомных сред, нормализованных, когда это возможно, до концентрации IgG 10 мкг/мл. Преинкубацию антитела против APRIL проводили в течение 1 часа при 30°С при перемешивании до добавления к планшетам с покрытием TACI-Fc, с последующей инкубацией в течение 1 часа также при 30°С. Детектирование FLAG-APRIL, связанного с TACI-Fc, определяли количественно с использованием антитела против FLAG M2, конъюгированного с HRP (Sigma Aldrich), используемого при разбавлении 1:10000, как описано в Примере 3. APRIL-иммунореактивные гибриды, которые также демонстрировали ингибирование по меньшей мере на 10% или для человеческого APRIL или для мышиного APRIL, субклонировали методом лимитированного разбавления и повторно оценивали на активность связывания и блокирования APRIL и на титр IgG с помощью ИФА, как описано в настоящем документе. Гибридомы с положительной активностью, но низким титром IgG дополнительно изотипировали для определения потенциальных IgM-продуцирующих клонов. Положительные гибридомы отбирали для масштабирования культивирования, очистки антител и дополнительной характеристики, как описано в Примере 2.

Пример 2. Очистка и характеристика антител против APRIL, полученных из мышиных гибридом

Тринадцать гибридомных клонов из Примера 1 культивировали последовательно в более крупном масштабе из 96-луночных планшетов на 24-луночные планшеты, а затем в колбы T150 (объемом 20 мл). Перед очисткой клетки переносили из HAT-селективной среды в заранее определенные среды с низким Ig. Супернатанты собирали через 3-5 дней после переноса среды и осветляли центрифугированием с последующей стерильной фильтрацией через мембраны PES 0,22 мкм (Corning). Титры IgG подтверждали биоинферометрией, как описано в настоящем документе. Супернатанты разбавляли 1:1 с использованием 2х связывающего буфера с Протеином G (1 М глицин, 2 М NaCl, pH 9). Антитела очищали с помощью аффинной хроматографии на Протеине G с использованием 1 мл колонок Протеин G HiTrap (GE Health Care) со скоростью потока 1 мл/мин и в соответствии с рекомендациями производителя. IgG элюировали из колонки с Протеином G путем снижения рН с использованием 0,1 М глицинового буфера, рН 2,8 с последующей немедленной нейтрализацией с использованием 2 М TRIS, pH 8,5. Очищенные антитела готовили повторно путем диализа в 1x PBS, pH 7,4 с последующей концентрацией ультрафильтрацией с использованием устройства фильтрации Ultra-30 AMICON с порогом молекулярной массы 30кДа. Конечную концентрацию антител определяли спектрофотометрически с помощью NanoDrop с использованием обобщенного коэффициента оптической плотности для мышиных антител (IgG1). Чистоту и целостность антител подтверждали SDS-PAGE как в восстанавливающих, так и в невосстанавливающих условиях. Изотип антитела определяли с использованием набора для изотипирования мышиных mAb Rapid ELISA (Pierce/Thermofisher Scientific) в комбинации с предварительным анализом последовательности (см. Пример 3). Было определено, что все очищенные антитела являются преимущественно распределением IgG1 и G2a; было определено, что легкие цепи относятся к классу каппа. Было определено, что относительно меньшая подгруппа иммунореактивных антител против APRIL, полученных из мышей B-002/B-003 (например, 02-009, 02-016, 046, ФИГ.1A-1B), относится к IgM, и ее не переносили для очистки.

Очищенные антитела были дополнительно охарактеризованы на связывание с APRIL, межвидовую перекрестную реактивность APRIL (человеческий APRIL против мышиного APRIL) и активности блокирования рецептора с использованием TACI-Fc. Для связывания использовали непрямой ИФА на основе APRIL для определения в первом приближении относительной аффинности очищенных антител против APRIL к человеческому APRIL или мышиному APRIL. Метод ИФА в целом был таким, как описано выше. Вкратце, HA-GCN4 hAPRIL (аминокислотные остатки 105-250) и HA-GCN4 mAPRIL (аминокислотные остатки 96-241) наносили в виде покрытия с плотностью 50 нг/на лунку. Стадии блокирования и промывки выполняли, как описано в настоящем документе. Связывание антител против APRIL с APRIL количественно определяли с использованием 8-точечного разбавления тестируемого антитела, которое охватывало четыре log-шкалы. Связывание антител с APRIL детектировали с использованием конъюгата кролиьего антимышиного IgG (H+L)-HRP (Jackson ImmunoResearch Laboratories). Данные связывания антител анализировали с помощью нелинейного регрессионного анализа с использованием трехпараметрической подгонки для определения максимального связывания и кажущихся значений EC₅₀. Результаты представлены на ФИГ. 3. Человеческие специфические моноклональные антитела против APRIL h01A (описанные, например, в Guadagnoli, M. et al. Blood 117, 6856-6865 (2011)), описанные здесь как mAb 1313 и A019C11 (описанные, например, в Jagessar S. et al. J Neuroimmune Pharmacol 7: 557-570 (2012)), обозначенные в настоящем описании как mAb 0201, использовали в качестве положительного контроля для связывания с человеческим APRIL и для сравнительных целей. Мышиное специфичное антитело Apry-1-1 (Adipogen) также использовали для количественной оценки связывания антитела с мышиным APRIL.

Активность блокирования рецептора антител против APRIL также измеряли с помощью ИФА с использованием рекомбинантного TACI или BCMA (внеклеточного домена (ов)), экспрессированного и очищенного в виде Fc-слитых белков, в эксперименте связывания на основе конкуренции. Для этого эксперимента рекомбинантные TACI-Fc или BCMA-Fc получали в клетках HEK 293 после транзиторной трансфекции этих клеток с использованием экспрессирующего вектора Fc pc-tPA-Fc. Вкратце, этот вектор конструировали из родительского экспрессирующего вектора млекопитающих pcDNA3.1 (Life Technologies) с использованием стандартных методов молекулярного клонирования. Вектор конструировали так, чтобы он включал консенсусную 5'-последовательность инициации трансляции Козака, а затем N-концевую сигнальную последовательность tPA для процессирования и оптимизированной секреции рекомбинантного белка в среду в виде растворимого белка. С-концы внеклеточных APRIL-связывающих доменов человеческого TACI или человеческого BCMA сливали в рамке с Fc-частью человеческого IgG1, начиная с положения E98 в CH1. ДНК-последовательности синтезировали согласно оптимизации кодонов для экспрессии в млекопитающих и первоначально клонировали в pcDNA3.1, как правило, в виде кассеты Bam H1-Xba. Варианты рецепторов клонировали в результирующий вектор в виде фрагментов ДНК Asc1-Bbs1 или Asc1-Not1 в зависимости от стратегии конструкции и клонирования. TACI-Fc содержит последовательности TACI 29-110 человека, которые включают как домены CRD1, так и CRD2, и в целом соответствует рецептору-ловушке на основе TacI-Fc. Эта последовательность описана в настоящем документе как HuTACI-Fc-001 (или чаще, как TACI-Fc, если не указано иное). Вариант TACI, также экспрессируемый в виде слитого белка Fc, включает только CRD2. TACI может включать С-концевую область (или так называемый «стебель») от аминокислот 110 до приблизительно 166, которые непосредственно предшествуют трансмембранному домену. BCMA-Fc содержит внеклеточный домен связывания цитокинов (аминокислотные остатки 1-54) и описан в настоящем документе как HuBCMA-Fc-001 (или чаще, как BCMA-Fc, если не указано иное).

Рекомбинантный TACI-Fc или BCMA-Fc наносили в виде покрытия на 96-луночные планшеты в 0,1 М карбонатно-бикарбонатном буфере (рН 9,6) в течение ночи при 4°C. Планшеты промывали три раза 1хPBST (PBS+0,025% Tween 20) с последующим блокированием 1% BSA в 1xPBS, 37°C в течение 1 часа. Все последующие стадии промывки проводили с помощью 1хPBST. Для оценки блокирования антител либо 15 нг/мл, либо 50 нг/мл HA-GCN4-huAPRIL предварительно инкубировали с различными концентрациями антител в диапазоне от 0,03 до 30 мкг/мл в связывающем буфере, состоящем из 1% BSA и 0,025% Tween-20 в 1X PBS. Пре-инкубацию проводили при 30°C в течение 1 часа при перемешивании. Премикс антитела против APRIL с 50 нг/мл APRIL или 15 нг/мл APRIL затем добавляли к планшетам с покрытием в виде TACI-Fc или ВСМА-Fc, соответственно, и инкубировали в течение еще одного часа при 30°C. HA-меченый APRIL, связывающийся с любым рецептором, количественно определяли с использованием козьего поликлонального анти-HA меченого-HRP антитела (Abcam), добавляемого при разведении 1:10000 с последующей колориметрической проявкой, используя 100 мкл/на лунку свежеприготовленного субстрата TMB (KPL) в течение 30 минут при комнатной температуре перед подавлением ферментативной реакции добавлением 1Н серной кислоты. Сигнал ИФА определяли количественно по абсорбции при 450 нм. Результаты показаны на ФИГ. 2А-2В и ФИГ. 3. Данные ИФА анализировали нелинейной регрессией. Значения IC₅₀ рассчитывали на основе четырехпараметрической подгонки кривых титрования антител. Там, где это необходимо, % ингибирования рассчитывают на основе нормализации данных при отсутствии контроля антител (0% ингибирования) против фона (без APRIL), установленного как 100% ингибирование. Человеческие антитела mAb 1313 и mAb 0201 использовали в качестве положительных контролей и для сравнительных целей. В качестве отрицательного контроля использовали неблокирующие антитела Aprly-1 или Aprly-5 (Enzo Biosciences). Специфичное для мыши блокирующее антитело aprily-1-1 (Adipogen) обычно использовали в качестве положительного контроля в экспериментах с использованием мышиного APRIL (HA-GCN4-mAPRIL).

Функциональную активность антител против APRIL также оценивали с использованием клеточного анализа сигнальной трансдукции рецептора. В этом анализе связывание APRIL либо с TACI, либо с BCMA приводит к активации рецептора, которая, в свою очередь, приводит к последующей активации NF-κB, транскрипционного фактора, который в конечном итоге опосредует запрограммированные изменения экспрессии и фенотипа генов B-клеток. Использование известных репортерных клеточных линий NF-κB для этой цели было описано в литературе. Использование гетерологичных (нелимфоидных) клеточных линий, лишенных экспрессии TACI или BCMA, но где TACI или BCMA можно вводить экзогенно посредством трансфекции, позволяет осуществить контролируемый обусловленный рецептором анализ сигнализации APRIL и ингибирования этого сигнала антителами против APRIL. С этой целью была выбрана коммерческая NF-κB-репортерная клеточная линия, производная клеток 293TN, NF-κB/293/GFP-LucTM (System Biosciences). Эти клетки стабильно трансфецировали генами как GFP, так и люциферазы светлячков, располагающихся тандемно с контролем транскрипции минимального промотора CMV (mCMV) и множества копий элемента распознавания NF-κB.

Клетки NF-κB/293/GFP-LucTM поддерживали и выращивали в среде для роста клеток 293TN (базовая среда DMEM, дополненная GlutaMAX и FBS) в соответствии с инструкцией производителя. Для трансфекций использовали экспрессирующие плазмиды pcMV6-XL4/TACI и pcMV6-XL4/BCMA (Origene). Эти плазмиды кодируют полноразмерный человеческий TACI (TNFRSF13B, номер регистрации NМ_012452) или BCMA (TNFRSF17, номер регистрации NМ_001192) 293TN репортерные клетки трансфецировали при плотности приблизительно 6×10⁵ клеток/мл (> 90% жизнеспособность) с использованием PEI-MAX следующим образом: Для pcMV6-XL4/TACI, 10,4 нг/мл (~ 1 нг/лунка); для культуры клеток pcMV6-XL4/BCMA 83 нг/мл (~ 8 нг/лунка). Суммарную концентрацию плазмид поддерживали постоянной при 1,67 мкг/мл объема культуры (167 нг /на лунку) с использованием пустого вектора pcMV6-XL4 по мере необходимости для поддержания постоянных количеств плазмиды для каждой трансфекции. Трансфекции масштабировали соответствующим образом на основе количества необходимых планшетов. 100 мкл трансфекционной смеси переносили в каждую лунку. Планшеты переносили в инкубатор на 37°C при 5% CO₂ в течение 20-24 часов.

На второй день рекомбинантный APRIL (HA-GCN4-APRIL) преинкубировали с последовательно разведенным антителом в полной 293TN культуральной среде перед добавлением к клеткам. Вкратце, для APRIL-опосредованной активации сигнальной трансдукции TACI 40 нг/мл APRIL (концентрация мишеней 2X) смешивали 1:1 с последовательно разведенным антителом (также разведенным в культуральной среде) в 96-луночном планшете; для APRIL-опосредованной активации сигнальной трансдукции BCMA, 200 нг/мл APRIL (концентрация мишени 2X) также смешивали 1:1. Смесь антитело-APRIL инкубировали в течение 1 часа при 37°C при встряхивании. 40 мкл преинкубированной смеси добавляли к трансфецированной клеточной культуре после удаления отработанных культуральных сред. Клетки инкубировали при 37°C, как указано выше, в течение дополнительных 20-24 часов. NF-κВ-управляемую активность люциферазы затем количественно определяли с использованием набора для люциферазы ONE-Glo™ (Promeg а), в основном в соответствии с протоколом производителя, но с незначительными изменениями. Относительные флуоресцентные единицы (RLU) измеряли на непрозрачных белых 96-луночных планшетах с использованием планшетного ридера с люминометром. Результаты представлены на ФИГ.4. Данные были нормализованы к отсутствию контроля Ab после коррекции для фонового сигнала анализа (без APRIL). Значения IC₅₀ были получены из нелинейного регрессионного анализа кривых титрования антител для четырехпараметрической подгонки. Антитела 1313 и 0201 обычно использовали в качестве положительных контролей. В случае использования рекомбинантного мышиного APRIL, apry1-1 использовали в качестве положительного контроля. Не нейтрализующие антитела Aprily-1 или Aprily-5 против человеческого APRIL обычно использовали в качестве отрицательных контролей.

Пример 3. Определение и молекулярное клонирование последовательностей иммуноглобулинов против APRIL.

Последовательности генов VH и VL мышиных антител, полученные из скрининга гибридом, первоначально определяли с помощью ПЦР с обратной транскрипцией РНК В-клеток с использованием пула заранее определенного набора праймеров, специфичных для последовательностей мышиных Ig, различной вырожденности. Конструкция 5'-праймера для секвенирования VH была основана на всестороннем анализе базы данных иммуноглобулинов мыши с соответствующим выравниванием с вариабельными лидерными последовательностями. Из этого анализа лидерные последовательности VH группировали (или сортировали на основе родства последовательности и представленности «семейств» зародышевой линии); конструировали уникальный набор праймеров, каждый из которых, по прогнозам, должен отжигаться более специфично на эти отсортированные семейства последовательностей VH, и использовали в качестве коктейля в реакции ОТ-ПЦР. 3'-праймеры конструировали для отжига в константной области тяжелой цепи. Этот набор праймеров был, естественно, менее сложным и соответствовал уникальным последовательностям в CH1, которые определяют четыре известные константные области IgG мыши (IgG1, IgG2a, IgG2b и IgG3). Связанные с IgM последовательности VH амплифицировали, как описано выше, но с заменой 3'-праймера IgM-изотипа. Аналогичным образом для амплификации соответствующих последовательностей VL из мышиной гибридомной РНК использовали так называемый «пул-праймер» для ОТ-ПЦР. Аналогичным образом осуществляли систематический запрос всех известных лидерных последовательностей VL мыши. Поскольку легкие цепи как каппа, так и лямбда не имеют общих последовательностей константной области и вариабельной области, были разработаны отдельные наборы праймеров (каппа-специфичные и лямбда-специфичные). 3'-праймеры были сконструированы на основе константной области легкой цепи, специфичной для изотипа (каппа против лямбда) способом, аналогичным описанному выше для последовательностей тяжелой цепи. ОТ-ПЦР-амплификацию последовательностей генов гибридомы из В-клеточной РНК выполняли с использованием других известных методов. Вкратце, РНК экстрагировали из клеток 0,5-2×10⁶ с использованием набора RNeasy (Life Technologies) в соответствии с инструкциями производителя. Лизис клеток облегчали с использованием Qiashredder или связанного с ним способа для первоначальной экстракции нуклеиновых кислот. Очищенную РНК количественно определяли по УФ-поглощению. Синтез кДНК и последующую амплификацию ПЦР (с использованием Taq-полимеразы Platinum и смесей праймеров, описанных выше) выполняли в тандеме, используя набор одностадийной ОТ-ПЦР Superscript III One Step RT-PCR kit (Life Technologies). ПЦР-ампликоны очищали с использованием набора для очистки ПЦР Qiaquick (Life Technologies) и определяли количественно с помощью УФ-поглощения при 260 и 280 нм с использованием спектрофотометра Nanodrop. Продукты ПЦР также анализировали электрофорезом в агарозном геле для подтверждения прогнозируемого размера и очищали из геля по мере необходимости. Последовательности генов VH и VL определяли путем прямого секвенирования продуктов ПЦР с использованием вложенных праймеров. Неоднозначные данные последовательностей сопровождались повторной амплификацией клеточной РНК с помощью ОТ-ПЦР, как описано выше, но с модификацией протокола и использованием подгрупп более коротких праймеров; если необходимо, продукты ПЦР клонировали путем ТА-клонирования в промежуточный вектор) и трансформировали в химически компетентные клетки TOP10 (Life Technologies) или DH5α (New England Biolabs) в соответствии с протоколами производителей. Данные последовательности ДНК анализировали с использованием общедоступных баз данных (например, Международной информационной системы иммуногенетики (IMGT), VBase или NCBI Ig-Blast) для оценки использования зародышевой линии, идентификации CDR-последовательностей и оценки предполагаемого изотипа, когда это возможно. В целом, стратегия секвенирования привела к идентификации уникальных последовательностей VH для каждой представляющей интерес гибридомы; несколько клонов привели к идентификации множества легких цепей.

Полученные последовательности VH и VL Ig амплифицировали с помощью ПЦР и клонировали отдельно в экспрессирующие векторы млекопитающих o-pcMG2 и o-pcMK2, соответственно, для рекомбинантного продуцирования в клетках HEK293 в виде парных мышиных IgG2 (HC) и каппа (LC) изотипированных антител. Праймеры, специфичные для гена, конструировали на основе последовательностей VH и VL, идентифицированных, как описано выше. Конструкция праймера включала в себя 18-23 перекрывающихся нуклеотидов, комплементарных соответствующим каркасным областям последовательностей генов вариабельных доменов, в дополнение к векторным комплементарным последовательностям, предназначенным для обеспечения клонирования на основе рекомбинации с помощью модифицированной сборки Gibson, слитых в рамке с последовательностями вариабельной области посредством лигирования ДНК, как описано ниже. Конструкцию праймеров проводили с помощью программного обеспечения NEB Builder (New England Biolabs) или Primer3. Дополнительная конструкция праймера содержала включение последовательностей распознавания эндонуклеаз рестрикции на соответствующих 5'-концах для субклонирования, если необходимо. В случае неоднозначных вариабельных последовательностей конструкция праймеров включала использование умеренно вырожденных нуклеотидных последовательностей (в 1-2 положениях) или суррогатных («наилучшие предположения») кодонов, на основе знания предсказанных каркасных последовательностей зародышевой линии, идентифицированных в исходном анализе последовательностей VH и VL.

Для молекулярного клонирования с помощью ОТ-ПЦР РНК экстрагировали из гибридом, в основном так, как описано. Первую цепь кДНК синтезировали с использованием Superscript III First Strand Synthesis Supermix (Life Technologies) в соответствии с протоколом производителя. 2,5 мкл кДНК ДНК-матрицы амплифицировали с помощью ПЦР с использованием высокоточной ДНК-полимеразы Q5 (New England BioLabs). Амплификация включала в целом 35 циклов с помощью «сенсорной» ПЦР», используя сначала трехстадийную амплификацию в течение 10 циклов, за которой следуют 25 циклов с двухстадийной амплификацией (отжиг и протяжка при 72°C). ПЦР-ампликоны оценивали электрофорезом в агарозном геле для подтверждения чистоты, правильного размера и приблизительных количеств. Очистку из геля продуктов ПЦР проводили при необходимости с использованием набора для очистки из геля Qiaquick (Qiagen). Экспрессирующие векторы HC и LC Ig линеаризовали и готовили для клонирования путем двойного гидролиза эндонуклеазой рестрикции. 5'-концы гидролизованных векторов затем дефосфорилировали щелочной фосфатазой креветки с последующей тепловой инактивацией ферментов. Продукты ПЦР лигировали в 50 нг линеаризованного вектора (очищенный из геля) с использованием NEB Builder (New England Biolabs) при молярном соотношении 2:1 вставка:вектор. 2 мкл лигазной смеси трансформировали в химически компетентные клетки E. coli (DH5α, New England Biolabs) и высевали на LB с антибиотиком. Рекомбинантные клоны отбирали секвенированием ДНК колонии с последующей очисткой плазмиды положительных клонов в масштабе 200 мл E.coli с использованием наборов Purelink Maxiprep с низким содержанием эндотоксина (Life Technologies) в соответствии с протоколами производителя.

Для продуцирования рекомбинантных антител приблизительно 225 мкг каждого из очищенных экспрессирующих векторов Ig (HC и LC) использовали для транзиторной трансфекции клеток HEK 293F. Примерно 2×10⁶ клеток/мл трансфецировали с использованием реагента для трансфекции на основе PEI-Max и культивировали в среде Freestyle 293 в целом в течение 5-7 дней. Титры антител определяли количественно биоинферометрией с использованием биосенсоров с иммобилизованным Протеином A (Biosensors Pall).

Рекомбинантные антитела очищали из супернатанта культуры после осветления с помощью низкоскоростного центрифугирования и стерильной фильтрации через 0,22 мкм PES-мембраны с последующим добавлением коктейля ингибитора протеазы (Cocktail III, Thermofisher) для ослабления ущерба протеолиза. Антитела очищали с помощью аффинной хроматографии с Протеином А, используя 1 мл колонку Hitrap с Протеином A (GE Healthcare) с элюированием при низком pH, как описано, с последующим нейтрализацией с помощью TRIS, pH 8,5. Антитела повторно готовили и концентрировали в 1xPBS, pH 7,4 путем тандемного диализа и ультрафильтрации с использованием центрифужных концентраторов Amicon-Ultra 30.

Пример 4. in vitro активности связывания и блокирования рецептора антител против APRIL

Рекомбинантные антитела против APRIL охарактеризовывали как в отношении активности связывания APRIL, так и блокирования рецептора с использованием методов как на основе ИФА, так и методов клеточной сигнализации, как описано в настоящем документе. Как показано на ФИГ. 5-6, первый подход связывания с человеческим APRIL с помощью непрямого ИФА выявил несколько антител с низкой и субнаномолярной аффинностью связывания с цитокином-мишенью на основе значений EC₅₀, экстраполированных из нелинейных регрессионных анализов кривых титрования антител. Антитела 2218, 2419 и 2621, в частности, связывались с человеческим APRIL с кажущейся аффинностью связывания с мишенью менее чем 0,2 нМ; антитела 3530 и 2922 связывались с человеческим APRIL с кажущейся аффинностью связывания с мишенью от 0,2 нМ до 1 нМ. 3125 связывалось с человеческим APRIL с более низкой кажущейся аффинностью (> 1 нМ). Аналогичный анализ связывания моноклональных антител с мышиным гомологом APRIL выявил только mAb 3530, обладающее значительным межвидовым связыванием с мишенью (данные не показаны). Функциональный анализ активности блокирования антител оценивали с помощью конкурентного ИФА с использованием Fc-рецептора в качестве лиганда захвата APRIL в 96-луночном формате, как описано в настоящем документе. Этот анализ включал использование как биологически соответствующих APRIL TNFR-родственных рецепторов (человеческий TACI и человеческий BCMA) в целях оценки любой селективности по отношению к антитело-опосредованному антагонизму взаимодействий APRIL-рецептора. Как показано на ФИГ. 9, значения IC₅₀ антитела рассчитывали по нелинейному анализу кривых титрования антител. Блокирующие антитела 1313 и 0201 против человеческих белков использовали в качестве положительных контролей и для сравнительных целей. В качестве отрицательного контроля использовали не нейтрализующее антитело Aprily-5 (Enzo Biosciences). Основываясь на данных in vitro, все рекомбинантные антитела продемонстрировали по меньшей мере частичное блокирование человеческого APRIL с человеческим TACI-Fc. Как показано на ФИГ. 7, моноклональные антитела 2218, 2419, 2621, 3327 и 3530 блокировали связывание APRIL-TACI с соответствующими значениями IC₅₀ в низком или субнаномолярном диапазоне. mAb 3125 и 2922, по-видимому, блокируют с несколько меньшей эффективностью, причем значения IC₅₀ составляют больше 10 нМ. Как показано на ФИГ. 8, аналогичная оценка блокирования рецепторов с использованием BCMA-Fc указывает, что антитела 2218, 2419 и 3327 также способны блокировать связывание BCMA с низкой или субнаномолярной активностью. mAb 3530, по-видимому, является относительно селективным по отношению к блокированию связывания APRIL с TACI-Fc по сравнению с BCMA-Fc; таким образом, это антитело можно рассматривать как «TACI-селективное». mAb 2621, по-видимому, не блокирует связывание APRIL с BCMA-Fc, как оценивалось в этом анализе; само по себе mAb 2621 можно рассматривать как потенциально «TACI-специфичное» антитело.

Функциональную (рецепторный антагонизм) активность антител против APRIL дополнительно оценивали с использованием ортогонального, клеточного NF-κB репортерного анализа транскрипции для оценки ингибирования APRIL-опосредованной активации сигнала рецептора. Этот анализ включал гетерологичную экспрессию полноразмерного (трансмембранного) TACI или BCMA с помощью транзиторной плазмидной трансфекции в HEK293 и сконструированной клеточной линии HEK293, содержащей стабильно трансфецированный NF-κB-транскрипционно активированный репортерный ген люциферазы. Анализ в целом проводили, как описано в настоящем документе, используя рекомбинантный Hu APRIL в качестве экзогенного источника активирующего рецептор цитокина. Данные нормализовали к отсутствию контроля антитела после вычитания фонового сигнала (без APRIL или Ab). Данные суммированы на ФИГ. 11А-11В. На основе этих данных эффективную активность блокирования рецепторов моноклональных антител 2218 и 2419 дополнительно подтверждали дозозависимым от антитела образом. Эти активности включали блокирование рецепторов как BCMA, так и TACI. Моноклональные антитела 2922 и 3125 качественно проявляли меньшую активность, что соответствовало их относительно более низкой активности в блокирующем ИФА рецептора-Fc (то есть по сравнению с mAb 2218 и 2419). Очевидные расхождения между этими двумя анализами могут быть связаны с различными уровнями экспрессии рецепторов, обновлением белка или другими биологическими факторами, отсутствующими в менее сложных анализах связывания на основе ИФА. Тем не менее, эти данные, взятые вместе, демонстрируют явную функциональную активность рекомбинантных антител против APRIL в отношении антагонизма активности APRIL, описанного в настоящем документе.

Дополнительные экспериментальные данные включают, например, следующее. Связывание иллюстративных антител против APRIL с человеческим APRIL показано на ФИГ. 16. Относительные аффинности связывания иллюстративных антител против APRIL показаны на ФИГ. 17. Ингибирование антителом APRIL-опосредованной рецепторной сигнализации показано на ФИГ. 18A-18B. Ингибирование антителом связывания APRIL с TNFSF-рецепторами TACI и BCMA показано на ФИГ. 19А-19В. Ингибирование антителом связывания APRIL с человеческим TACI-Fc и человеческим BCMA-Fc суммировано в таблице на ФИГ. 20.

Пример 5: Межвидовая перекрестная реактивность антител против APRIL

В дополнение к демонстрации функциональной активности нескольких антител против APRIL также оценивали перекрестную реактивность этих антител по отношению к связыванию и блокированию как мышиного, так и человеческого APRIL. Для этой характеристики использовала тот же набор анализов in vitro, что и описанный, но с включением аналогичных мышиных HA-меченых APRIL (R & D Systems). Для иллюстративных целей включали подгруппу данных из блокирующего ИФА на основе рецептор-Fc (как TACI-Fc, так и BCMA-Fc). В этом анализе mAb 3530 сравнивали с антителами 1313 (специфичное для человека блокирующее антитело против APRIL), Apry-1-1 (специфичное для мыши блокирующее антитело против APRIL) и не нейтрализующее антитело Aprly-5 (отрицательный контроль). Данные о блокирующей активности рецептора с титрованием антител суммированы на ФИГ. 10A-10B для блокирования связывания APRIL с человеческим TACI-Fc и человеческим BCMA-Fc, соответственно. В соответствии с другими данными mAb 3530, по-видимому, является «TACI-селективным» антителом на основе его относительного профиля нейтрализации (TACI против BCMA). Кроме того, это антитело способно явно блокировать связывание обоих, мышиного и человеческого APRIL с TACI-Fc со сравнимой эффективностью (кажущиеся значения IC₅₀). Насколько нам известно, это первый пример межвидовой перекрестной реактивности антитела против APRIL с обоими последствиями как в отношении специфичности эпитопа, а также для использования в доклинической разработке этого антитела с использованием подходящих (изогенных) моделей грызунов.

Перекрестно-блокирующая активность APRIL антител против APRIL также показана на ФИГ. 21A-21B.

Пример 6: Функциональная активность антитела против APRIL для снижения сывороточного IgA in vivo

В дополнение к своей роли в стимулировании роста опухоли цитокин APRIL играет несколько критических ролей в регуляции адаптивного иммунитета и иммунитета слизистой в отношении модуляции функции B- и T-клеток. Эта иммунологическая активность включает индукцию продуцирования IgA в В-клетках посредством рецептор-опосредованной индукции переключения класса Ig, пролиферации В-клеток и выживаемости связанных с IgA+ плазматических клеток. Эта центральная роль APRIL в продуцировании IgA приводит к его потенциалу в качестве терапевтической мишени для заболеваний, связанных с дисрегулированным продуцированием IgA и/или образованием IgA-содержащих иммунных комплексов. Такие заболевания включают, но не ограничиваясь этим, IgA-нефропатию, связанный с IgA васкулит (например, пурпура Шенлейна-Геноха), SLE, связанные с IgA моноклональные гаммопатии, алкогольное заболевание печени и т. д.. Таким образом, биологическую активность терапевтического антитела против APRIL можно оценить in vivo непосредственно по снижению уровня IgA в сыворотке после введения такого антитела в лабораторную модель грызунов. С этой целью в качестве тестируемого изделия также использовали специфичное к мышиному APRIL, блокирующее антитело Apry-1-1 (Adipogen), используемое, как описано в настоящем документе, в качестве контроля для оценки активности антитела против APRIL in vitro. Возрастной группе самцов мышей B6C3F1 (6-10 недель) вводили 20 мг/кг антитела два раза в неделю через инъекцию IP в течение 8 недель. В качестве отрицательного контроля (носитель) использовали солевой раствор для инъекций. Сывороточный уровень изотип-специфического иммуноглобулина (IgG, IgM и IgA) контролировали индивидуально с помощью ИФА примерно каждые 12 дней. Массу тела контролировали 3 раза в неделю, общий и биохимический анализ крови и общее состояние животных контролировали на регулярной основе. Забор крови проводили перед дозированием (день 0, до забора крови). Выживаемость после забора крови наблюдали в конце 2 недель (конец фазы I) через 4 недели и 6 недель. Терминальный забор крови проводили в конце 8 недель. Результаты показаны на ФИГ. 12A-12B.

В этом исследовании хроническое введение функционального антитела против APRIL с in vitro подтвержденной блокирующей активностью привело к снижению уровня IgA в сыворотке ниже 50%. Снижение наблюдали к 24-му дню, и оно поддерживалось в ходе обработки антителами. Обработка антителом против мышиного APRIL не имела статистически значимого влияния на общий уровень Ig сыворотки по сравнению с контролем; общий и биохимический анализ крови также не были подвержены влиянию.

Пример 7: Картирование эпитопов

Для картирования эпитопов использовали варианты человеческого APRIL с сайт-направленными мутациями. Как показано на ФИГ. 22, APRIL изображен в виде тримера (голубой, зеленый и пурпурный). Типичный эпитоп, содержащий высоко-аффинный сайт связывания с рецептором CRD2, изображен темно-синим. Положения аминокислотных изменений отмечены предшествующим номером аминокислоты дикого типа и последующей мутацией (например, R233G представляет мутацию аргинина в положении 233 до глицина).

Осуществляли картирование эпитопов иллюстративных антител 4035, 2419 и 3833. Связывание антитела с человеческими и мышиными вариантами оценивали с помощью ИФА. Сравнение осуществляли с эталонным антителом 1313. FLAG-меченый APRIL захватывали из культуральной среды с использованием анти-FLAG-антитела. Результаты показаны на ФИГ. 23A-23B, 24A-24B и 25A-25B. Дифференцированное картирование эпитопов иллюстративных антител против APRIL осуществляли с помощью направленного мутагенеза. Первичную характеристику сайта связывания человеческого APRIL проводили путем сайт-направленного мутагенеза выбранных положений аминокислот в APRIL с последующей оценкой связывания антитела с этими вариантами с помощью ИФА. Иллюстративные данные для трех антител против APRIL 4035 (закрашенные круги), 2419 (закрашенные квадраты) и 1313 (незакрашенные треугольники) показаны на ФИГ. 26 для иллюстративных целей.

Дифференциальные профили связывания иллюстративных антител против APRIL показаны в Таблице 6. Приведены иллюстративные аминокислотные остатки, которые связываются с молекулами антител против APRIL, описанными в настоящем документе. Один или более из этих остатков образуют по меньшей мере часть связывающей области на APRIL. Иллюстративные остатки в области связывания, которые, как прогнозируется, оказывают влияние на связывание (например, на основе описанных в настоящем документе исследований направленного мутагенеза), отмечены «Х». Иллюстративные остатки, которые, как прогнозировалось, оказывают меньшее или вообще не оказывают влияния на связывание (например, на основе описанных в настоящем документе исследований направленного мутагенеза), отмечены «N» для сравнительных целей.

Таблица 6. Дифференциальные профили связывания иллюстративных антител против APRIL (таблица раскрывает SEQ ID NO: 338-341, соответственно, в порядке появления)

1313 4035 3833 2419 Влияние Нет влияния Влияние Нет влияния Влияние Нет влияния Влияние Нет влияния АК положение АК 129 Asp 130 Asp 131 Ser 132 Asp X 170 Leu 174 Val N X X 175 Thr 176 Phe X X N X 177 Thr 178 Met 179 Gly 180 Gln 181 Val X N N X 190 Gln X X N X 192 Thr 195 Arg X X 196 Cys 197 Ile 200 Met 201 Pro 202 Ser 203 His 205 Asp 206 Arg N X X 208 Tyr X X X N 226 Ser N 228 Ile N N X 230 Pro 231 Arg 232 Ala 233 Arg 237 Asn X N N N 241 His

Пример 8: Гуманизация мышиных антител против APRIL

Отобранные антитела против APRIL получали после иммунизации мыши, как описано в настоящем документе. Вариабельные области отобранных антител, а именно 2419, 4035 и 4540, впоследствии гуманизировали для целей потенциального терапевтического использования и снижения иммуногенности. Вкратце, гуманизирование выполняли путем идентификации зародышевых линий человека, проксимальных к мышиным вариабельным областям тяжелой (VH) и легкой (VL) цепи. После идентификации, области, определяющие комплементарность (CDR), из mAb2419 VH и VL трансплантировали на матрицы зародышевой линии человека VH и VL, соответственно, с использованием структурно-ориентированной конструкции. Дополнительные мутации (включая обратные мутации до родительского остатка в мышином mAb) селективно вводили на основе визуального осмотра структурной модели. Конструкции гуманизированных антител рекомбинантно продуцировали в клетках HEK293 после транзиторной трансфекции отдельных векторов для экспрессии тяжелой и легкой цепи. Рекомбинантные антитела очищали с помощью аффинной хроматографии с Протеином А, используя стандартные методы. Затем гуманизированные антитела тестировали на связывание с APRIL, функциональное блокирование рецепторов (взаимодействия TACI-APRIL и BCMA-APRIL) и термостабильность с использованием дифференциального сканирующего флуоресцентного анализа денатурации белка. Относительную активность и профили стабильности сравнивали с родительскими антителами мыши, на основе которых проводили гуманизацию.

Пример 9: in vitro активности связывания и блокирования рецептора гуманизированных антител против APRIL

Относительное связывание иллюстративных антител против APRIL измеряли с помощью непрямого ИФА. Связывание гуманизированных вариантов мышиных антител 4035 и 2419 с человеческим APRIL показано на ФИГ. 27A-27B, соответственно. Связывание гуманизированного варианта человек-мышь перекрестно-реактивного антитела 4540-063 с обоими, человеческим и мышиным APRIL показано на ФИГ. 28A-28B, соответственно. Сравнение гуманизированных антител против APRIL с родительскими (не гуманизированными) мышиными антителам проводили для сравнительных целей. Экстраполированные значения EC₅₀ суммированы на ФИГ. 29А-29B. Иллюстративные молекулы антител связываются с APRIL с пикомолярной аффинностью.

Кажущуюся аффинность связывания антител 2419-1406 и 4035-062 с тримерным человеческим APRIL также измеряли с помощью ИФА. Тример APRIL был стабилизирован N-концевым слиянием APRIL с доменом олигомеризации изолейциновой застежки (GCN4). Связывание APRIL с человеческим TACI-Fc показано для сравнительных целей. Результаты связывания ИФА показаны на ФИГ. 29C. Пикомолярные значения EC₅₀, полученные из кривых связывания, изображенных на ФИГ. 29С, суммированы на ФИГ. 29D. Антитело продемонстрировало пикомолярное (пМ) связывание с тримерным человеческим APRIL, которое было измерено с помощью ИФА. Наблюдали более высокую аффинность связывания 2419-1406 и 4035-062 с APRIL относительно связывания APRIL с его собственным рецептором (TACI-Fc).

Измеряли ингибирование связывания APRIL с TNFSF-рецепторами TACI и BCMA с помощью гуманизированных вариантов IgG2κ родительского мышиного антитела 2419. Анализ основан на блокирующем ИФА рецепторов с использованием рекомбинантных человеческих APRIL (R & D Systems) и человеческих TACI-Fc (ФИГ.30А) или BCMA-Fc (ФИГ.30В). Родительское, химерное 2419 (мышиные VH-VL, трансплантированные к константным областям IgG1κ человека) включали для сравнительных целей, также как химерное антитело 4035 против человеческого APRIL. Ингибирование анализировали с помощью нелинейной регрессии с использованием четырехпараметрической кривой с подгонкой после нормализации к 100% активности (без контроля антител). Значения IC₅₀ суммированы на ФИГ. 33.

Измеряли ингибирование связывания APRIL с TNFSF-рецепторами TACI (ФИГ.31А) и BCMA (ФИГ.31B) с помощью дополнительных гуманизированных вариантов 2419 (IgG2κ) 2419-0205 и 2419-1406 и гуманизированного варианта (4035-062) родительского антитела 4035. Гуманизированное 4035-062 относится к подтипу IgG1κ. Химерные, не гуманизированные версии мышиных антител 4035 и 2419, и 1313 с включали для сравнительных целей. mAb1313 является контрольным антителом против APRIL. Использовали TACI-Fc и BCMA-Fc. Значения IC₅₀ суммированы на ФИГ. 33.

Измеряли ингибирование связывания APRIL с TNFSF-рецепторами TACI (ФИГ.32А) и BCMA (ФИГ.32В) с помощью гуманизированных вариантов антитела 4540, перекрестно-нейтрализующего мышиный/человеческий APRIL. Гуманизированное антитело 4540 относится к подтипу IgG1κ. Родительское 4540 (не гуманизированная химера) и гуманизированное 4035-062 (ФИГ.30А-30В) включали для сравнительных целей. Ингибирование анализировали с помощью нелинейной регрессии с использованием четырехпараметрической кривой с подгонкой, как описано для ФИГ. 29А-29В и ФИГ. 30A-30B. Значения IC₅₀ также суммированы на ФИГ. 33. Субнаномолярное блокирование связывания APRIL-рецептора наблюдали для большинства тестируемых антител.

Эти результаты выявили, что гуманизация и переформатирование (например, как IgG2) обычно, если не всегда, приводят к сопоставимому сохранению активности блокирования рецепторов.

Оценивали ингибирование антителами APRIL-опосредованной рецепторной сигнализации. Ингибирование опосредованной APRIL-рецептором внутриклеточной сигнализации NFκB оценивали с использованием репортерной клеточной линии HEK 293 NFκB после транзиторной трансфекции либо полноразмерных человеческих рецепторов семейства TNF-рецепторов TACI, либо экспрессирующими векторами с кДНК BCMA. Данные нормализовали к отсутствию контроля антител (100%). Ингибирование TACI- и BCMA-опосредованной сигнализацией NFκB показано на ФИГ. 34A-34B, соответственно.

На ФИГ. 35 изображены приблизительные значения IC₅₀ для ингибирования антителом APRIL-опосредованной рецепторной сигнализации. Данные экстраполировали из ФИГ. 34A-34B на основе нелинейного регрессионного анализа с использованием переменного наклона, трехпараметрической подгонки концентрации антител против ответа. Отрицательный контроль антител (нет связывания APRIL) продемонстрировал отсутствие активности в этом анализе (данные не показаны). Эти результаты выявили эффективное ингибирование APRIL-опосредованного NFκB-зависимого сигнального пути (с низкой или субнаномолярной IC₅₀) с помощью иллюстративной молекулы антитела против APRIL. Блокирование происходит как с рецептором TACI, так и с BCMA.

Пример 10: Оценка специфичности связывания антител против APRIL с APRIL

Отобранные антитела против APRIL оценивали на предмет потенциальной перекрестной реактивности с другими членами суперсемейства TNFa (TNFSF) семейства цитокинов, включающими: человеческий TNFα (TNFSF2, Adipogen), человеческий CD40 (TNFSF4, Adipogen), человеческий FasL (TNFSF6, Adipogen), человеческий TRAIL (TNFSF10, Adipogen), человеческий RANKL (TNFSF11, Adipogen), человеческий Tweak (TNFSF12, Abcam), человеческий и мышиный BAFF (TNFSF13B, AB Biosciences и Adipogen, соответственно) и человеческий LIGHT (TNFSF14, Adipogen). Эти цитокины имеют общую степень вариабельности последовательности, а также структурную гомологию более высокого порядка. Среди них BAFF, по-видимому, наиболее тесно связан с APRIL, с идентичностью 29% и сходством аминокислотной последовательности 53%.

Связывание оценивали по протоколу непрямого ИФА, используя аналогичные методы, описанные для оценки связывания APRIL; цитокины иммобилизовали на ИФА-планшете при 50 нг на лунку и затем подвергали воздействию раствора каждого из тестируемых антител при фиксированной концентрации 10 мкг/мл. Конъюгаты поликлональных антител против человеческого или мышиного Ig-HRP (Jackson Laboratories) использовали для детектирования связывания антитела. Результаты, представленные на ФИГ. 36, выявили, что одиннадцать из двенадцати антител, тестированных в этом анализе, специфично связываются с APRIL при отсутствии какой-либо измеримой перекрестной реактивности с другими членами TNFSF, по существу выше аналитического фона. Антитело 4338 продемонстрировало детектируемое связывание как с человеческой, так и с мышиной версией BAFF, и его использовали в качестве аналитического контроля.

mAb 2419-1406 и 4035-062 демонстрировали минимальную или отсутствие посторонней перекрестной реактивности белка в обширном массиве из более чем 4500 мембранных белков человека (RETROGENIX™). Пример конструкции массива экспрессии белков представлен на ФИГ. 37А. Подтверждающий/вторичный скрининг выполняли на 12 белках (ФИГ.37B- 37C). Связывание с Fc-рецепторами наблюдали как для 2419-1406, так и для 4035-062, как и прогнозировалось. Более слабое связывание с FcγR1 наблюдали для антитела 2419-1406, что согласуется с тем, что оно относится к изотипу IGg2. Незначительное связывание с PDGFR также детектировали для 2419-1406. Связывание антител 4035-062 с любыми другими мембранными мишенями, за исключением описанных, не наблюдали.

Пример 11: Идентификация эпитопа-мишени для максимальной эффективности антител против APRIL

Эпитоп иллюстративной молекулы антитела против APRIL, mAb 2419, был картирован с использованием комбинации эмпирических и вычислительных инструментов и данных. Эти методы и результирующие данные включали 1) кристаллографию низкого разрешения mAb 2419 Fab в комплексе с человеческим APRIL (аминокислоты 115-250) в сочетании с 2) структурным моделированием (ФИГ.38А) и 3) насыщенным мутагенезом APRIL в выбранных положениях в пределах поверхности APRIL проводили в комбинации с дисплеем поверхности APRIL в дрожжах (ФИГ. 38B). Как показано на обоих ФИГ. 38A-38B, молекула антитела нацелена на нелинейный четвертичный эпитоп, охватывающий два разных мономера APRIL в рамках более сложного тримерного комплекса. Эпитоп 2419 также существенно перекрывается с областью APRIL, соответствующей высокоаффинному сайту связывания с рецептором (сайт CRD2), критичной для блокирования обоих, рецептора TACI и BCMA (ФИГ.38B). Вторичный сайт связывания с рецептором (сайт CRD1) также перекрывается с эпитопом 2419, что подразумевает блокирование взаимодействий TACI-APRIL. Исходя из этого анализа, положения в APRIL, которые определяют эпитоп 2419, включают V133, V181, E185, Q187, G188, R189, Q190, E191, T192, R195, H218, L219, H220, S226, I228, P230 (расположены в мономере А); V121, I123, Q139, P140, A141, L142, N237, S239, P240 и H241 (расположены в мономере B).

Более целенаправленный анализ этого эпитопа путем мутагенеза выбранных доступных на поверхности положений APRIL указывает на подгруппу положений в большем эпитопе 2419 (структурно изображен на ФИГ.38А), которые, по-видимому, особенно критичны для связывания антитела. Эти так называемые «горячие остатки», т.е. те остатки, которые имеют решающее значение для взаимодействия между APRIL и mAb 2419, эмпирически определены) с использованием комбинации описанных выше методов) как те положения, где мутация от последовательности дикого типа до почти любого другого аминокислотного остатка приводит к существенной потере связывания 2419 с APRIL. Примеры таких положений включают V181, Q190, T192 и I228 на одном мономере, и A141 и H241 на соседнем мономере.

Таблица 8. Иллюстративные аминокислотные остатки человеческого APRIL, которые связываются с mAb 2419 (нумерация аминокислот на основе SEQ ID NO: 85)

Положение Мономер Горячий остаток Человеческий V133 A V181 A Y E185 A Q187 A G188 A R189 A Q190 A Y E191 A T192 A Y R195 A H218 A L219 A H220 A S226 A I228 A Y P230 A V121 B I123 B Q139 B P140 B A141 B Y L142 B N237 B S239 B P240 B H241 B Y

Таким образом, эпитоп перекрывает прогнозированные области для максимального блокирования рецепторов и нацелен на нелинейный четвертичный эпитоп, охватывающий два разных мономера APRIL, что подразумевает нейтрализацию биологически наиболее активной формы APRIL (тримера).

Пример 12. Фармацевтические свойства антител против APRIL.

Термостабильность иллюстративных молекул антител против APRIL, 2419-1406 и 4035-062, измеряли с использованием анализа флуоресцентного сканирования Sypro-Orange® (ФИГ.39А). Температуры термического плавления (значения Tпл) для 2419-1406 и 4035-062 приведены на ФИГ. 3. mAb 2419-1406 и mAb 4035-062 демонстрируют высокую термостабильность.

Мышиную модель tg32 использовали в качестве суррогата для прогнозирования PK фармакокинетики антител (PK) у людей. PK контрольного антитела (IgG1) с заранее установленной PK приблизительно 25 дней (у людей) также оценивали в этом исследовании для сравнительных целей. Как показано на ФИГ. 40A-40B, наблюдали благоприятный PK-профиль иллюстративной молекулы антитела против APRIL, 2419-1406 и 4035- 062, в трансгенной мышиной линии tg32, несущей гуманизированный FcRn.

Пример 13: Межвидовые перекрестно-реактивные антитела против APRIL эффективно снижают уровни IgA в сыворотке у мышей

Мышиное mAb 4540 представляет собой перекрестно реактивное между видами (мышь и человек) антитело против APRIL с активностью, нейтрализующей рецептор. mAb 4540 нацелено на перекрывающий эпитоп APRIL с mAb 2419-1406. mAb4540 использовали в качестве суррогата для оценки влияния обработки mAb против APRIL на снижение уровня IgA в сыворотке у мышей C57/BL6. 11-недельным мышам вводили субхронически (1 раз в неделю путем инъекции ip) 20 мг/кг mAb 4540, mAb 3833 или изотипическое контрольное антитело в течение семи недель. Базальный сывороточный уровень общего IgA количественно определяли с помощью ИФА. Как показано на ФИГ. 41, обработка mAb 4540 или mAb 3833 снижала уровень IgA в сыворотке у мышей C57/BL6.

Включение с помощью ссылки

Все публикации, патенты и номера регистрации, упомянутые в настоящем описании, настоящим включены в качестве ссылки в полном объеме, как если бы каждая отдельная публикация или патент была конкретно и индивидуально указаны для включения в качестве ссылки.

Эквиваленты

Хотя обсуждались конкретные варианты осуществления настоящего изобретения, приведенное выше описание является иллюстративным, а не ограничивающим. Многие варианты изобретения станут очевидными для специалистов в данной области после рассмотрения настоящей спецификации и формулы изобретения, приведенной ниже. Полный объем изобретения должен определяться ссылкой на пункты формулы изобретения вместе с полным объемом их эквивалентов и спецификацией вместе с такими вариантами.

--->

СПИСОК ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ

<110> VISTERRA, INC.

<120> МОЛЕКУЛЫ АНТИТЕЛ ПРОТИВ APRIL И ИХ ПРИМЕНЕНИЯ

<130> P2029-7004WO

<140>

<141>

<150> 62/422,848

<151> 2016-11-16

<150> 62/399,087

<151> 2016-09-23

<150> 62/313,684

<151> 2016-03-25

<150> 62/259,897

<151> 2015-11-25

<160> 346

<170> PatentIn version 3.5

<210> 1

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический пептид"

<400> 1

Gly Tyr Ser Ile Thr Ser Gly Tyr

1 5

<210> 2

<211> 5

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 2

Ser Tyr Asp Gly Tyr

1 5

<210> 3

<211> 11

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 3

Tyr Tyr Asp Tyr Glu Asp Trp Tyr Phe Gly Val

1 5 10

<210> 4

<211> 15

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 4

Arg Ala Ser Glu Ser Val Ser Ile Ile Gly Thr Asn Ser Ile His

1 5 10 15

<210> 5

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 5

His Ala Ser Asn Leu Glu Thr

1 5

<210> 6

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 6

Leu Gln Ser Arg Lys Ile Pro Tyr Thr

1 5

<210> 7

<211> 6

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 7

Ser Gly Tyr Tyr Trp Asn

1 5

<210> 8

<211> 16

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 8

Tyr Ile Ser Tyr Asp Gly Tyr Asn Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Lys Asn

1 5 10 15

<210> 9

<211> 120

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 9

Asp Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln

1 5 10 15

Ser Leu Ser Leu Thr Cys Ser Val Thr Gly Tyr Ser Ile Thr Ser Gly

20 25 30

Tyr Tyr Trp Asn Trp Ile Arg Gln Phe Pro Gly Asn Lys Leu Glu Trp

35 40 45

Met Gly Tyr Ile Ser Tyr Asp Gly Tyr Asn Asn Tyr Asn Pro Ser Leu

50 55 60

Lys Asn Arg Ile Ser Ile Thr Arg Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Phe

65 70 75 80

Leu Lys Leu Asn Ser Val Thr Thr Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Asn Tyr Tyr Asp Tyr Glu Asp Trp Tyr Phe Gly Val Trp Gly Thr

100 105 110

Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 10

<211> 111

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 10

Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu Ala Met Ser Leu Gly

1 5 10 15

Lys Arg Ala Thr Ile Ser Cys Arg Ala Ser Glu Ser Val Ser Ile Ile

20 25 30

Gly Thr Asn Ser Ile His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro

35 40 45

Lys Leu Leu Ile Tyr His Ala Ser Asn Leu Glu Thr Gly Val Pro Ala

50 55 60

Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Arg Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Asp

65 70 75 80

Pro Val Glu Glu Asp Asp Val Ala Ile Tyr Tyr Cys Leu Gln Ser Arg

85 90 95

Lys Ile Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

100 105 110

<210> 11

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 11

Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr

1 5

<210> 12

<211> 6

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 12

Tyr Pro Leu Arg Gly Ser

1 5

<210> 13

<211> 11

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 13

His Gly Ala Tyr Tyr Ser Asn Ala Phe Asp Tyr

1 5 10

<210> 14

<211> 15

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 14

Arg Ala Ser Glu Ser Val Asp Asn Asp Gly Ile Arg Phe Met His

1 5 10 15

<210> 15

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 15

Arg Ala Ser Asn Leu Glu Ser

1 5

<210> 16

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 16

Gln Gln Ser Asn Lys Asp Pro Tyr Thr

1 5

<210> 17

<211> 5

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 17

Asp Tyr Thr Ile His

1 5

<210> 18

<211> 17

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 18

Trp Ile Tyr Pro Leu Arg Gly Ser Ile Asn Tyr Asn Glu Lys Phe Lys

1 5 10 15

Asp

<210> 19

<211> 120

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 19

Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Arg Leu Ser Cys Glu Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr

20 25 30

Thr Ile His Trp Val Lys Gln Arg Ser Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Trp Ile Tyr Pro Leu Arg Gly Ser Ile Asn Tyr Asn Glu Lys Phe

50 55 60

Lys Asp Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Lys Ser Ser Ser Thr Val Tyr

65 70 75 80

Leu Glu Leu Gly Arg Leu Thr Ser Lys Asp Ser Ala Val Tyr Phe Cys

85 90 95

Ala Arg His Gly Ala Tyr Tyr Ser Asn Ala Phe Asp Tyr Trp Gly Gln

100 105 110

Gly Thr Thr Leu Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 20

<211> 111

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 20

Asn Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly

1 5 10 15

Gln Arg Ala Thr Ile Ser Cys Arg Ala Ser Glu Ser Val Asp Asn Asp

20 25 30

Gly Ile Arg Phe Met His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro

35 40 45

Lys Leu Leu Ile Tyr Arg Ala Ser Asn Leu Glu Ser Gly Ile Pro Ala

50 55 60

Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Arg Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Asn

65 70 75 80

Pro Val Glu Thr Asp Asp Val Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Asn

85 90 95

Lys Asp Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys

100 105 110

<210> 21

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 21

Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr

1 5

<210> 22

<211> 6

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 22

Tyr Ile Gly Asn Gly Tyr

1 5

<210> 23

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 23

Tyr Tyr Pro Trp Phe Thr Tyr

1 5

<210> 24

<211> 11

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 24

Arg Ala Ser Glu Asn Ile Tyr Ser Tyr Leu Ala

1 5 10

<210> 25

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 25

Asn Ala Lys Thr Leu Ala Glu

1 5

<210> 26

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 26

Gln His His Tyr Asp Thr Pro Phe Thr

1 5

<210> 27

<211> 5

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 27

Ser Tyr Gly Ile Asn

1 5

<210> 28

<211> 17

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 28

Tyr Ile Tyr Ile Gly Asn Gly Tyr Ala Glu Tyr Asn Glu Arg Phe Lys

1 5 10 15

Gly

<210> 29

<211> 116

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 29

Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val Arg Pro Gly Ser

1 5 10 15

Ser Val Lys Met Ser Cys Lys Thr Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr

20 25 30

Gly Ile Asn Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Tyr Ile Tyr Ile Gly Asn Gly Tyr Ala Glu Tyr Asn Glu Arg Phe

50 55 60

Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ser Asp Thr Ser Ser Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Ile Tyr Phe Cys

85 90 95

Ala Leu Tyr Tyr Pro Trp Phe Thr Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val

100 105 110

Thr Val Ser Ala

115

<210> 30

<211> 107

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 30

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Ser Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Glu Asn Ile Tyr Ser Tyr

20 25 30

Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Gln Gly Lys Ser Pro Gln Leu Leu Val

35 40 45

Tyr Asn Ala Lys Thr Leu Ala Glu Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Gln Phe Ser Leu Lys Ile Asn Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Gly Asn Tyr Tyr Cys Gln His His Tyr Asp Thr Pro Phe

85 90 95

Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

100 105

<210> 31

<400> 31

000

<210> 32

<211> 6

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 32

Tyr Pro Arg Asp Ser Ser

1 5

<210> 33

<211> 12

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 33

Glu Gly Tyr Asp Tyr Asp Lys Arg Gly Phe Asp Tyr

1 5 10

<210> 34

<211> 15

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 34

Lys Ala Ser Gln Ser Val Ser Phe Ala Gly Thr Asn Leu Met His

1 5 10 15

<210> 35

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 35

Arg Ala Ser Asn Leu Glu Pro

1 5

<210> 36

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 36

Gln Gln Ser Arg Glu Tyr Pro Trp Thr

1 5

<210> 37

<211> 5

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 37

Ser Tyr Asp Val Phe

1 5

<210> 38

<211> 17

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 38

Trp Ile Tyr Pro Arg Asp Ser Ser Thr Lys Tyr Asn Glu Lys Phe Lys

1 5 10 15

Gly

<210> 39

<211> 121

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 39

Gln Val Gln Leu His Gln Ser Gly Pro Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Leu Ser Cys Lys Thr Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr

20 25 30

Asp Val Phe Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Trp Ile Tyr Pro Arg Asp Ser Ser Thr Lys Tyr Asn Glu Lys Phe

50 55 60

Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Val Asp Thr Ser Ser Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu His Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Phe Cys

85 90 95

Ala Lys Glu Gly Tyr Asp Tyr Asp Lys Arg Gly Phe Asp Tyr Trp Gly

100 105 110

Gln Gly Thr Thr Leu Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 40

<211> 111

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 40

Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly

1 5 10 15

Gln Arg Ala Ile Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gln Ser Val Ser Phe Ala

20 25 30

Gly Thr Asn Leu Met His Trp Tyr Gln Gln Arg Pro Gly Gln Gln Pro

35 40 45

Lys Leu Leu Ile Tyr Arg Ala Ser Asn Leu Glu Pro Gly Val Pro Thr

50 55 60

Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Arg Thr Asp Phe Thr Leu Asn Ile His

65 70 75 80

Pro Val Glu Glu Asp Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Arg

85 90 95

Glu Tyr Pro Trp Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

100 105 110

<210> 41

<400> 41

000

<210> 42

<211> 6

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 42

Asp Pro Glu Thr Gly Gly

1 5

<210> 43

<211> 6

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 43

Trp Asn Asp Gly Asp Tyr

1 5

<210> 44

<211> 16

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 44

Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Tyr Ser Asn Gly Lys Thr Tyr Leu Asn

1 5 10 15

<210> 45

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 45

Gln Val Ser Lys Leu Asp Pro

1 5

<210> 46

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 46

Leu Gln Gly Thr Tyr Tyr Pro Tyr Thr

1 5

<210> 47

<211> 5

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 47

Asp Tyr Glu Met His

1 5

<210> 48

<211> 17

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 48

Ala Ile Asp Pro Glu Thr Gly Gly Thr Ala Tyr Asn Gln Arg Phe Lys

1 5 10 15

Gly

<210> 49

<211> 115

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 49

Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val Arg Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Thr Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr

20 25 30

Glu Met His Trp Val Lys Gln Thr Pro Val His Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Ala Ile Asp Pro Glu Thr Gly Gly Thr Ala Tyr Asn Gln Arg Phe

50 55 60

Lys Gly Lys Ala Ile Leu Thr Thr Asp Lys Ser Ser Ile Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Arg Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Thr Arg Trp Asn Asp Gly Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Leu Thr

100 105 110

Val Ser Ser

115

<210> 50

<211> 112

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 50

Asp Val Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Ser Val Thr Ile Gly

1 5 10 15

Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Tyr Ser

20 25 30

Asn Gly Lys Thr Tyr Leu Asn Trp Phe Gln Gln Arg Pro Gly Gln Ser

35 40 45

Pro Lys Arg Leu Met Tyr Gln Val Ser Lys Leu Asp Pro Gly Ile Pro

50 55 60

Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Glu Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile

65 70 75 80

Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Leu Tyr Tyr Cys Leu Gln Gly

85 90 95

Thr Tyr Tyr Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

100 105 110

<210> 51

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 51

Gly Tyr Ser Phe Thr Gly Tyr

1 5

<210> 52

<211> 6

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 52

Asn Pro Tyr Asn Gly Asp

1 5

<210> 53

<211> 11

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 53

Glu Gly Asp Gly Tyr Tyr Trp Tyr Phe Asp Val

1 5 10

<210> 54

<211> 15

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 54

Arg Ala Ser Glu Ser Val Asp Asn Tyr Gly Ile Ser Phe Met Asn

1 5 10 15

<210> 55

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 55

Ala Ala Ser Asn Gln Gly Ser

1 5

<210> 56

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 56

Gln Gln Ser Lys Glu Val Pro Arg Thr

1 5

<210> 57

<211> 5

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 57

Gly Tyr Phe Met Asn

1 5

<210> 58

<211> 17

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 58

Arg Ile Asn Pro Tyr Asn Gly Asp Thr Phe Tyr Asn Gln Lys Phe Lys

1 5 10 15

Gly

<210> 59

<211> 120

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 59

Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Met Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ser Phe Thr Gly Tyr

20 25 30

Phe Met Asn Trp Val Lys Gln Ser His Gly Lys Ser Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Arg Ile Asn Pro Tyr Asn Gly Asp Thr Phe Tyr Asn Gln Lys Phe

50 55 60

Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Val Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala His

65 70 75 80

Met Glu Leu Arg Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Leu Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Ser Glu Gly Asp Gly Tyr Tyr Trp Tyr Phe Asp Val Trp Gly Ala

100 105 110

Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 60

<211> 111

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 60

Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly

1 5 10 15

Gln Arg Ala Thr Ile Ser Cys Arg Ala Ser Glu Ser Val Asp Asn Tyr

20 25 30

Gly Ile Ser Phe Met Asn Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro

35 40 45

Lys Leu Leu Ile Tyr Ala Ala Ser Asn Gln Gly Ser Gly Val Pro Ala

50 55 60

Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Ser Leu Asn Ile His

65 70 75 80

Pro Met Glu Glu Asp Asp Thr Ala Met Tyr Phe Cys Gln Gln Ser Lys

85 90 95

Glu Val Pro Arg Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

100 105 110

<210> 61

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 61

Gly Tyr Thr Phe Thr Asp His

1 5

<210> 62

<211> 6

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 62

Asp Pro Asp Thr Gly Asp

1 5

<210> 63

<211> 6

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 63

Trp Thr Gly Gly Asp Tyr

1 5

<210> 64

<211> 5

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 64

Asp His Glu Met His

1 5

<210> 65

<211> 17

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 65

Val Ile Asp Pro Asp Thr Gly Asp Thr Thr Tyr Asn Gln Lys Phe Lys

1 5 10 15

Gly

<210> 66

<211> 115

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 66

Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val Arg Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp His

20 25 30

Glu Met His Trp Val Arg Gln Thr Pro Val His Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Val Ile Asp Pro Asp Thr Gly Asp Thr Thr Tyr Asn Gln Lys Phe

50 55 60

Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Asp Leu Arg Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Phe Tyr Cys

85 90 95

Thr Arg Trp Thr Gly Gly Asp Tyr Trp Gly His Gly Thr Thr Leu Thr

100 105 110

Val Ser Ser

115

<210> 67

<211> 16

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 67

Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Tyr Ser Asp Gly Lys Thr Tyr Leu Asn

1 5 10 15

<210> 68

<400> 68

000

<210> 69

<400> 69

000

<210> 70

<211> 112

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 70

Asp Ala Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Ser Val Thr Ile Gly

1 5 10 15

Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Tyr Ser

20 25 30

Asp Gly Lys Thr Tyr Leu Asn Trp Phe Gln Gln Arg Pro Gly Gln Ser

35 40 45

Pro Lys Arg Leu Met Tyr Gln Val Ser Lys Leu Asp Pro Gly Ile Pro

50 55 60

Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Glu Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile

65 70 75 80

Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Val Tyr Tyr Cys Leu Gln Gly

85 90 95

Thr Tyr Tyr Pro Tyr Thr Phe Gly Ser Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

100 105 110

<210> 71

<211> 360

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полинуклеотид"

<400> 71

gatgtacagc ttcaggagtc aggacctggc ctcgtgaaac cttctcagtc tctgtctctc 60

acctgctctg tcactggcta ctccatcacc agtggttatt actggaactg gatccggcag 120

tttccaggaa acaaactgga atggatgggc tacataagct acgatggtta caataactac 180

aacccatctc tcaaaaatcg aatctccatc actcgtgaca catctaagaa ccagtttttc 240

ctgaagttga attctgtgac tactgaggac acagccacat attactgtgc aaactactat 300

gattacgaag actggtactt cggtgtctgg ggcacaggga ccacggtcac cgtctcctca 360

<210> 72

<211> 333

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полинуклеотид"

<400> 72

gacattgtgc tgacccaatc tccagcttct ttggctatgt ctctagggaa gagggccacc 60

atctcctgca gagccagcga aagtgtcagt attattggta ctaattcaat acactggtac 120

caacagaaac caggacagcc acccaaactc ctcatctatc atgcatccaa cctagaaact 180

ggagtccctg ccaggttcag tggcagtggg tctagaacag acttcaccct caccattgat 240

cctgtggagg aagatgatgt tgcaatctat tactgtctgc aaagtaggaa gattccgtac 300

acgttcggag gggggaccaa gctggaaata aaa 333

<210> 73

<211> 360

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полинуклеотид"

<400> 73

caggtccagc tgcagcagtc tggagctgag ctggtgaaac ccggggcatc agtgaggctg 60

tcctgcgagg cttctggcta caccttcacg gactatacta tacactgggt aaagcagagg 120

tctggacagg gtcttgagtg gattggatgg atttaccctc taagaggtag tataaactac 180

aatgagaaat tcaaggacaa ggccacattg actgcggaca aatcctccag cacagtctat 240

ttggagcttg gtagattgac atctaaggac tctgcggtct atttctgtgc aagacacgga 300

gcctactata gtaacgcctt tgactactgg ggccaaggca ccactctcac agtctcctca 360

<210> 74

<211> 333

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полинуклеотид"

<400> 74

aacattgtaa tgacccaatc tccagcttca ttggctgtgt ctctaggtca gagggccacc 60

atctcctgca gagccagcga gagtgttgat aatgatggca ttagatttat gcactggtac 120

cagcagaaac caggacagcc acccaaactc ctcatctatc gtgcatccaa cctagaatct 180

gggatccctg ccaggttcag tggcagtggg tctaggacag acttcaccct cactattaat 240

cctgtggaga ctgatgatgt tgcaacctat tactgtcagc aaagtaataa ggatccgtac 300

acgttcggag gggggaccaa gctggagctg aaa 333

<210> 75

<211> 348

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полинуклеотид"

<400> 75

gaggtccagc ttcagcagtc tggagctgag ctggtgaggc ctgggtcctc agtgaagatg 60

tcctgcaaga cttctggata tactttcaca agctacggta taaactgggt gaagcagagg 120

cctggacagg gcctggaatg gattggatat atttatattg gaaatggtta tgctgagtac 180

aatgagaggt tcaagggcaa ggccacactg acttcagaca catcctccag cacagcctac 240

atgcagctca gcagcctgac atctgaggac tctgcaatct atttctgtgc actatactat 300

ccctggttta cttactgggg ccaggggact ctggtcactg tctctgca 348

<210> 76

<211> 321

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полинуклеотид"

<400> 76

gacatccaga tgactcagtc tccagcctcc ctttctgcat ctgtgggaga ttctgtcacc 60

atcacatgtc gagcaagtga gaatatttac agttatttag catggtatca gcagaaacag 120

ggaaaatctc ctcagctcct ggtctataat gcaaaaacct tagctgaagg tgtgccatca 180

aggttcagtg gcagtggatc aggcacacag ttttctctga agatcaacag cctgcagcct 240

gaagattttg ggaattatta ctgtcaacat cattatgata ctccgttcac gttcggaggg 300

gggaccaagc tggaaataaa a 321

<210> 77

<211> 363

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полинуклеотид"

<400> 77

caggttcagc tgcaccagtc tggacctgag ctggtgaagc ctggggcttc agtgaagttg 60

tcctgcaaga cttctggcta caccttcaca agctacgatg tcttctgggt gaagcagagg 120

cctggacagg gacttgagtg gattggatgg atttatccta gagatagtag tactaaatac 180

aatgagaagt tcaagggcaa ggccacattg actgtagaca catcctccag cacagcatac 240

atggagctcc acagcctgac atctgaggac tctgcggtct atttctgtgc aaaagagggg 300

tatgattatg acaagagggg ctttgactac tggggccaag gcaccactct cacagtctcc 360

tca 363

<210> 78

<211> 333

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полинуклеотид"

<400> 78

gacattgtgc tgacccaatc tccagcttct ttggctgtgt ctctagggca gagggccatc 60

atctcctgca aggccagcca aagtgtcagt tttgctggta ctaatttaat gcactggtac 120

caacagagac cagggcagca acccaaactc ctcatctatc gtgcatccaa cctagaacct 180

ggggttccta ccaggtttag tggcagtggg tctaggacag acttcaccct caatatccat 240

cctgtggagg aagatgatgc tgcaacctat tactgtcagc aaagtaggga atatccgtgg 300

acgttcggtg gaggcaccaa gctggaaatc aaa 333

<210> 79

<211> 345

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полинуклеотид"

<400> 79

caggttcaac tgcagcagtc tggggctgag ctggtgaggc ctggggcttc agtgacgctg 60

tcctgcaagg cttcgggcta cacttttact gactatgaaa tgcactgggt gaagcagaca 120

cctgtgcatg gcctggaatg gattggagct attgatcctg aaactggtgg tactgcctac 180

aatcagaggt tcaagggcaa ggccatactg actacagaca aatcctccat cacagcctac 240

atggagctcc gcagcctgac atctgaggac tctgccgtct attactgtac aagatggaat 300

gatggcgact actggggcca aggcaccact ctcacagtct cctca 345

<210> 80

<211> 336

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полинуклеотид"

<400> 80

gatgttgtga tgacccagac tccactgtct ttgtcggtta ccattggaca accagcctcc 60

atttcttgca agtcaagtca gagcctctta tacagtaatg gaaagacata tttgaattgg 120

tttcaacaga ggcctggcca gtctccaaag cgcctaatgt atcaggtgtc caaactggac 180

cctggcatcc ctgacaggtt cagtggcagt ggatcagaaa cagattttac acttaaaatc 240

agcagagtgg aggctgaaga tttgggactt tattactgct tgcaaggtac atattatccg 300

tacacgttcg gaggggggac caagctggaa ataaaa 336

<210> 81

<211> 360

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полинуклеотид"

<400> 81

gaggtccagc tgcagcagtc tggacctgag ctggtgaagc ctggggcttc agtgaagatg 60

tcctgcaagg cttctggtta ctcctttact ggctacttta tgaactgggt gaagcagagc 120

catggaaaga gccttgagtg gattggacgt attaatcctt acaatggtga tactttctac 180

aaccagaagt tcaagggcaa ggccacattg actgtagaca aatcctctag cacagcccac 240

atggagctcc ggagcctgac atctgaggac tctgcactct attattgtgc aagcgaaggt 300

gatggttact actggtactt cgatgtctgg ggcgcaggga ccacggtcac cgtctcctca 360

<210> 82

<211> 333

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полинуклеотид"

<400> 82

gacattgtgc tgacccaatc tccagcttct ttggctgtgt ctctagggca gagggccacc 60

atctcctgca gagccagcga aagtgttgat aattatggca ttagttttat gaactggttc 120

caacagaaac caggacagcc acccaaactc ctcatctatg ctgcatccaa ccaaggatcc 180

ggggtccctg ccaggtttag tggcagtggg tctgggacag acttcagcct caacatccat 240

cctatggagg aggatgatac tgcaatgtat ttctgtcagc aaagtaagga ggttcctcgg 300

acgttcggtg gaggcaccaa gctggaaatc aaa 333

<210> 83

<211> 345

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полинуклеотид"

<400> 83

caggttcaac tgcagcagtc tggggctgag ctggtgaggc ctggggcttc agtgaagctg 60

tcctgcaagg cttcgggcta cacatttact gaccatgaaa tgcactgggt gagacagaca 120

cctgtgcatg gcctggaatg gattggagtt attgatcctg acactggtga tactacctac 180

aatcagaaat tcaagggcaa ggccacactg actgcagaca aatcctccag cacagcctac 240

atggacctcc gcagcctgac atctgaggac tctgccgtct tttactgtac acggtggact 300

gggggggact actggggcca tggcaccact ctcacagtct cctca 345

<210> 84

<211> 336

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полинуклеотид"

<400> 84

gatgctgtga tgacccagac tccactgtct ttgtcggtta ccattggaca accagcctct 60

atctcttgca agtcgagtca gagcctctta tatagtgatg gaaagacata tttgaattgg 120

ttccaacaga ggccaggcca gtctccaaag cgcctaatgt atcaggtgtc caaactggac 180

cctggcatcc ctgacaggtt cagtggcagt ggatcagaga cagattttac acttaaaatc 240

agcagagtgg aggctgagga tttgggagtt tattactgct tgcaaggtac atattatccg 300

tatacgttcg gatcggggac caagctggaa ataaaa 336

<210> 85

<211> 250

<212> БЕЛОК

<213> Homo sapiens

<400> 85

Met Pro Ala Ser Ser Pro Phe Leu Leu Ala Pro Lys Gly Pro Pro Gly

1 5 10 15

Asn Met Gly Gly Pro Val Arg Glu Pro Ala Leu Ser Val Ala Leu Trp

20 25 30

Leu Ser Trp Gly Ala Ala Leu Gly Ala Val Ala Cys Ala Met Ala Leu

35 40 45

Leu Thr Gln Gln Thr Glu Leu Gln Ser Leu Arg Arg Glu Val Ser Arg

50 55 60

Leu Gln Gly Thr Gly Gly Pro Ser Gln Asn Gly Glu Gly Tyr Pro Trp

65 70 75 80

Gln Ser Leu Pro Glu Gln Ser Ser Asp Ala Leu Glu Ala Trp Glu Asn

85 90 95

Gly Glu Arg Ser Arg Lys Arg Arg Ala Val Leu Thr Gln Lys Gln Lys

100 105 110

Lys Gln His Ser Val Leu His Leu Val Pro Ile Asn Ala Thr Ser Lys

115 120 125

Asp Asp Ser Asp Val Thr Glu Val Met Trp Gln Pro Ala Leu Arg Arg

130 135 140

Gly Arg Gly Leu Gln Ala Gln Gly Tyr Gly Val Arg Ile Gln Asp Ala

145 150 155 160

Gly Val Tyr Leu Leu Tyr Ser Gln Val Leu Phe Gln Asp Val Thr Phe

165 170 175

Thr Met Gly Gln Val Val Ser Arg Glu Gly Gln Gly Arg Gln Glu Thr

180 185 190

Leu Phe Arg Cys Ile Arg Ser Met Pro Ser His Pro Asp Arg Ala Tyr

195 200 205

Asn Ser Cys Tyr Ser Ala Gly Val Phe His Leu His Gln Gly Asp Ile

210 215 220

Leu Ser Val Ile Ile Pro Arg Ala Arg Ala Lys Leu Asn Leu Ser Pro

225 230 235 240

His Gly Thr Phe Leu Gly Phe Val Lys Leu

245 250

<210> 86

<211> 234

<212> БЕЛОК

<213> Homo sapiens

<400> 86

Met Pro Ala Ser Ser Pro Phe Leu Leu Ala Pro Lys Gly Pro Pro Gly

1 5 10 15

Asn Met Gly Gly Pro Val Arg Glu Pro Ala Leu Ser Val Ala Leu Trp

20 25 30

Leu Ser Trp Gly Ala Ala Leu Gly Ala Val Ala Cys Ala Met Ala Leu

35 40 45

Leu Thr Gln Gln Thr Glu Leu Gln Ser Leu Arg Arg Glu Val Ser Arg

50 55 60

Leu Gln Gly Thr Gly Gly Pro Ser Gln Asn Gly Glu Gly Tyr Pro Trp

65 70 75 80

Gln Ser Leu Pro Glu Gln Ser Ser Asp Ala Leu Glu Ala Trp Glu Asn

85 90 95

Gly Glu Arg Ser Arg Lys Arg Arg Ala Val Leu Thr Gln Lys Gln Lys

100 105 110

Asn Asp Ser Asp Val Thr Glu Val Met Trp Gln Pro Ala Leu Arg Arg

115 120 125

Gly Arg Gly Leu Gln Ala Gln Gly Tyr Gly Val Arg Ile Gln Asp Ala

130 135 140

Gly Val Tyr Leu Leu Tyr Ser Gln Val Leu Phe Gln Asp Val Thr Phe

145 150 155 160

Thr Met Gly Gln Val Val Ser Arg Glu Gly Gln Gly Arg Gln Glu Thr

165 170 175

Leu Phe Arg Cys Ile Arg Ser Met Pro Ser His Pro Asp Arg Ala Tyr

180 185 190

Asn Ser Cys Tyr Ser Ala Gly Val Phe His Leu His Gln Gly Asp Ile

195 200 205

Leu Ser Val Ile Ile Pro Arg Ala Arg Ala Lys Leu Asn Leu Ser Pro

210 215 220

His Gly Thr Phe Leu Gly Phe Val Lys Leu

225 230

<210> 87

<211> 247

<212> БЕЛОК

<213> Homo sapiens

<400> 87

Met Pro Ala Ser Ser Pro Phe Leu Leu Ala Pro Lys Gly Pro Pro Gly

1 5 10 15

Asn Met Gly Gly Pro Val Arg Glu Pro Ala Leu Ser Val Ala Leu Trp

20 25 30

Leu Ser Trp Gly Ala Ala Leu Gly Ala Val Ala Cys Ala Met Ala Leu

35 40 45

Leu Thr Gln Gln Thr Glu Leu Gln Ser Leu Arg Arg Glu Val Ser Arg

50 55 60

Leu Gln Gly Thr Gly Gly Pro Ser Gln Asn Gly Glu Gly Tyr Pro Trp

65 70 75 80

Gln Ser Leu Pro Glu Gln Ser Ser Asp Ala Leu Glu Ala Trp Glu Asn

85 90 95

Gly Glu Arg Ser Arg Lys Arg Arg Ala Val Leu Thr Gln Lys Gln Lys

100 105 110

Lys Gln His Ser Val Leu His Leu Val Pro Ile Asn Ala Thr Ser Lys

115 120 125

Asp Asp Ser Asp Val Thr Glu Val Met Trp Gln Pro Ala Leu Arg Arg

130 135 140

Gly Arg Gly Leu Gln Ala Gln Gly Tyr Gly Val Arg Ile Gln Asp Ala

145 150 155 160

Gly Val Tyr Leu Leu Tyr Ser Gln Val Leu Phe Gln Asp Val Thr Phe

165 170 175

Thr Met Gly Gln Val Val Ser Arg Glu Gly Gln Gly Arg Gln Glu Thr

180 185 190

Leu Phe Arg Cys Ile Arg Ser Met Pro Ser His Pro Asp Arg Ala Tyr

195 200 205

Asn Ser Cys Tyr Ser Ala Gly Val Phe His Leu His Gln Gly Asp Ile

210 215 220

Leu Ser Val Ile Ile Pro Arg Ala Arg Ala Lys Leu Asn Leu Ser Pro

225 230 235 240

His Gly Thr Phe Leu Gly Leu

245

<210> 88

<211> 222

<212> БЕЛОК

<213> Homo sapiens

<400> 88

Met Pro Ala Ser Ser Pro Phe Leu Leu Ala Pro Lys Gly Pro Pro Gly

1 5 10 15

Asn Met Gly Gly Pro Val Arg Glu Pro Ala Leu Ser Val Ala Leu Trp

20 25 30

Leu Ser Trp Gly Ala Ala Leu Gly Ala Val Ala Cys Ala Met Ala Leu

35 40 45

Leu Thr Gln Gln Thr Glu Leu Gln Ser Leu Arg Arg Glu Val Ser Arg

50 55 60

Leu Gln Gly Thr Gly Gly Pro Ser Gln Asn Gly Glu Gly Tyr Pro Trp

65 70 75 80

Gln Ser Leu Pro Glu Gln His Ser Val Leu His Leu Val Pro Ile Asn

85 90 95

Ala Thr Ser Lys Asp Asp Ser Asp Val Thr Glu Val Met Trp Gln Pro

100 105 110

Ala Leu Arg Arg Gly Arg Gly Leu Gln Ala Gln Gly Tyr Gly Val Arg

115 120 125

Ile Gln Asp Ala Gly Val Tyr Leu Leu Tyr Ser Gln Val Leu Phe Gln

130 135 140

Asp Val Thr Phe Thr Met Gly Gln Val Val Ser Arg Glu Gly Gln Gly

145 150 155 160

Arg Gln Glu Thr Leu Phe Arg Cys Ile Arg Ser Met Pro Ser His Pro

165 170 175

Asp Arg Ala Tyr Asn Ser Cys Tyr Ser Ala Gly Val Phe His Leu His

180 185 190

Gln Gly Asp Ile Leu Ser Val Ile Ile Pro Arg Ala Arg Ala Lys Leu

195 200 205

Asn Leu Ser Pro His Gly Thr Phe Leu Gly Phe Val Lys Leu

210 215 220

<210> 89

<211> 330

<212> БЕЛОК

<213> Homo sapiens

<400> 89

Met Ala Ala Arg Arg Ser Gln Arg Arg Arg Gly Arg Arg Gly Glu Pro

1 5 10 15

Gly Thr Ala Leu Leu Val Pro Leu Ala Leu Gly Leu Gly Leu Ala Leu

20 25 30

Ala Cys Leu Gly Leu Leu Leu Ala Val Val Ser Leu Gly Ser Arg Ala

35 40 45

Ser Leu Ser Ala Gln Glu Pro Ala Gln Glu Glu Leu Val Ala Glu Glu

50 55 60

Asp Gln Asp Pro Ser Glu Leu Asn Pro Gln Thr Glu Glu Ser Gln Asp

65 70 75 80

Pro Ala Pro Phe Leu Asn Arg Leu Val Arg Pro Arg Arg Ser Ala Pro

85 90 95

Lys Gly Arg Lys Thr Arg Ala Arg Arg Ala Ile Ala Ala His Tyr Glu

100 105 110

Val His Pro Arg Pro Gly Gln Asp Gly Ala Gln Ala Gly Val Asp Gly

115 120 125

Thr Val Ser Gly Trp Glu Glu Ala Arg Ile Asn Ser Ser Ser Pro Leu

130 135 140

Arg Tyr Asn Arg Gln Ile Gly Glu Phe Ile Val Thr Arg Ala Gly Leu

145 150 155 160

Tyr Tyr Leu Tyr Cys Gln Ser Ser Asp Ala Leu Glu Ala Trp Glu Asn

165 170 175

Gly Glu Arg Ser Arg Lys Arg Arg Ala Val Leu Thr Gln Lys Gln Lys

180 185 190

Lys Gln His Ser Val Leu His Leu Val Pro Ile Asn Ala Thr Ser Lys

195 200 205

Asp Asp Ser Asp Val Thr Glu Val Met Trp Gln Pro Ala Leu Arg Arg

210 215 220

Gly Arg Gly Leu Gln Ala Gln Gly Tyr Gly Val Arg Ile Gln Asp Ala

225 230 235 240

Gly Val Tyr Leu Leu Tyr Ser Gln Val Leu Phe Gln Asp Val Thr Phe

245 250 255

Thr Met Gly Gln Val Val Ser Arg Glu Gly Gln Gly Arg Gln Glu Thr

260 265 270

Leu Phe Arg Cys Ile Arg Ser Met Pro Ser His Pro Asp Arg Ala Tyr

275 280 285

Asn Ser Cys Tyr Ser Ala Gly Val Phe His Leu His Gln Gly Asp Ile

290 295 300

Leu Ser Val Ile Ile Pro Arg Ala Arg Ala Lys Leu Asn Leu Ser Pro

305 310 315 320

His Gly Thr Phe Leu Gly Phe Val Lys Leu

325 330

<210> 90

<211> 205

<212> БЕЛОК

<213> Homo sapiens

<400> 90

Met Gly Gly Pro Val Arg Glu Pro Ala Leu Ser Val Ala Leu Trp Leu

1 5 10 15

Ser Trp Gly Ala Ala Leu Gly Ala Val Ala Cys Ala Met Ala Leu Leu

20 25 30

Thr Gln Gln Thr Glu Leu Gln Ser Leu Arg Arg Glu Val Ser Arg Leu

35 40 45

Gln Gly Thr Gly Gly Pro Ser Gln Asn Gly Glu Gly Tyr Pro Trp Gln

50 55 60

Ser Leu Pro Glu Gln His Ser Val Leu His Leu Val Pro Ile Asn Ala

65 70 75 80

Thr Ser Lys Asp Asp Ser Asp Val Thr Glu Val Met Trp Gln Pro Ala

85 90 95

Leu Arg Arg Gly Arg Gly Leu Gln Ala Gln Gly Tyr Gly Val Arg Ile

100 105 110

Gln Asp Ala Gly Val Tyr Leu Leu Tyr Ser Gln Val Leu Phe Gln Asp

115 120 125

Val Thr Phe Thr Met Gly Gln Val Val Ser Arg Glu Gly Gln Gly Arg

130 135 140

Gln Glu Thr Leu Phe Arg Cys Ile Arg Ser Met Pro Ser His Pro Asp

145 150 155 160

Arg Ala Tyr Asn Ser Cys Tyr Ser Ala Gly Val Phe His Leu His Gln

165 170 175

Gly Asp Ile Leu Ser Val Ile Ile Pro Arg Ala Arg Ala Lys Leu Asn

180 185 190

Leu Ser Pro His Gly Thr Phe Leu Gly Phe Val Lys Leu

195 200 205

<210> 91

<211> 241

<212> БЕЛОК

<213> Mus musculus

<400> 91

Met Pro Ala Ser Ser Pro Gly His Met Gly Gly Ser Val Arg Glu Pro

1 5 10 15

Ala Leu Ser Val Ala Leu Trp Leu Ser Trp Gly Ala Val Leu Gly Ala

20 25 30

Val Thr Cys Ala Val Ala Leu Leu Ile Gln Gln Thr Glu Leu Gln Ser

35 40 45

Leu Arg Arg Glu Val Ser Arg Leu Gln Arg Ser Gly Gly Pro Ser Gln

50 55 60

Lys Gln Gly Glu Arg Pro Trp Gln Ser Leu Trp Glu Gln Ser Pro Asp

65 70 75 80

Val Leu Glu Ala Trp Lys Asp Gly Ala Lys Ser Arg Arg Arg Arg Ala

85 90 95

Val Leu Thr Gln Lys His Lys Lys Lys His Ser Val Leu His Leu Val

100 105 110

Pro Val Asn Ile Thr Ser Lys Ala Asp Ser Asp Val Thr Glu Val Met

115 120 125

Trp Gln Pro Val Leu Arg Arg Gly Arg Gly Leu Glu Ala Gln Gly Asp

130 135 140

Ile Val Arg Val Trp Asp Thr Gly Ile Tyr Leu Leu Tyr Ser Gln Val

145 150 155 160

Leu Phe His Asp Val Thr Phe Thr Met Gly Gln Val Val Ser Arg Glu

165 170 175

Gly Gln Gly Arg Arg Glu Thr Leu Phe Arg Cys Ile Arg Ser Met Pro

180 185 190

Ser Asp Pro Asp Arg Ala Tyr Asn Ser Cys Tyr Ser Ala Gly Val Phe

195 200 205

His Leu His Gln Gly Asp Ile Ile Thr Val Lys Ile Pro Arg Ala Asn

210 215 220

Ala Lys Leu Ser Leu Ser Pro His Gly Thr Phe Leu Gly Phe Val Lys

225 230 235 240

Leu

<210> 92

<211> 240

<212> БЕЛОК

<213> Mus musculus

<400> 92

Met Pro Ala Ser Ser Pro Gly His Met Gly Gly Ser Val Arg Glu Pro

1 5 10 15

Ala Leu Ser Val Ala Leu Trp Leu Ser Trp Gly Ala Val Leu Gly Ala

20 25 30

Val Thr Cys Ala Val Ala Leu Leu Ile Gln Gln Thr Glu Leu Gln Ser

35 40 45

Leu Arg Arg Glu Val Ser Arg Leu Gln Arg Ser Gly Gly Pro Ser Gln

50 55 60

Lys Gln Gly Glu Arg Pro Trp Gln Ser Leu Trp Glu Gln Ser Pro Asp

65 70 75 80

Val Leu Glu Ala Trp Lys Asp Gly Ala Lys Ser Arg Arg Arg Arg Ala

85 90 95

Val Leu Thr Gln Lys His Lys Lys Lys His Ser Val Leu His Leu Val

100 105 110

Pro Val Asn Ile Thr Ser Lys Asp Ser Asp Val Thr Glu Val Met Trp

115 120 125

Gln Pro Val Leu Arg Arg Gly Arg Gly Leu Glu Ala Gln Gly Asp Ile

130 135 140

Val Arg Val Trp Asp Thr Gly Ile Tyr Leu Leu Tyr Ser Gln Val Leu

145 150 155 160

Phe His Asp Val Thr Phe Thr Met Gly Gln Val Val Ser Arg Glu Gly

165 170 175

Gln Gly Arg Arg Glu Thr Leu Phe Arg Cys Ile Arg Ser Met Pro Ser

180 185 190

Asp Pro Asp Arg Ala Tyr Asn Ser Cys Tyr Ser Ala Gly Val Phe His

195 200 205

Leu His Gln Gly Asp Ile Ile Thr Val Lys Ile Pro Arg Ala Asn Ala

210 215 220

Lys Leu Ser Leu Ser Pro His Gly Thr Phe Leu Gly Phe Val Lys Leu

225 230 235 240

<210> 93

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 93

Gly Phe Ser Leu Thr Ile Tyr

1 5

<210> 94

<211> 5

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 94

Trp Ser Asp Gly Ser

1 5

<210> 95

<211> 10

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 95

Asn Trp Val Asp Gln Ala Trp Phe Ala Tyr

1 5 10

<210> 96

<211> 11

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 96

Arg Ala Ser Lys Asn Ile Tyr Ser Tyr Leu Ala

1 5 10

<210> 97

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 97

Asn Ala Lys Thr Leu Pro Glu

1 5

<210> 98

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 98

Gln His His Tyr Gly Thr Pro Leu Thr

1 5

<210> 99

<211> 5

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 99

Ile Tyr Asp Val His

1 5

<210> 100

<211> 16

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 100

Val Ile Trp Ser Asp Gly Ser Thr Asp Tyr Asn Ala Ala Phe Ile Ser

1 5 10 15

<210> 101

<211> 118

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 101

Gln Val Gln Leu Lys Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Ala Pro Ser Gln

1 5 10 15

Ser Leu Ser Ile Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Thr Ile Tyr

20 25 30

Asp Val His Trp Val Arg Gln Ser Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Leu

35 40 45

Gly Val Ile Trp Ser Asp Gly Ser Thr Asp Tyr Asn Ala Ala Phe Ile

50 55 60

Ser Arg Leu Ser Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Ser Gln Val Phe Phe

65 70 75 80

Lys Met Asn Ser Leu Gln Ala Asp Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys Ala

85 90 95

Arg Asn Trp Val Asp Gln Ala Trp Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr

100 105 110

Leu Val Thr Val Ser Ala

115

<210> 102

<211> 107

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 102

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Glu Thr Ile Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Lys Asn Ile Tyr Ser Tyr

20 25 30

Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Gln Gly Lys Ser Pro Gln Leu Leu Val

35 40 45

Tyr Asn Ala Lys Thr Leu Pro Glu Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Gln Phe Ser Leu Lys Ile Asn Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Gly Ser Tyr Tyr Cys Gln His His Tyr Gly Thr Pro Leu

85 90 95

Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys

100 105

<210> 103

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 103

Gly Tyr Ile Phe Thr Asp Tyr

1 5

<210> 104

<211> 6

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 104

Tyr Pro Gly Ser Gly Asn

1 5

<210> 105

<211> 12

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 105

Glu Ser Asn Tyr Val Gly Tyr Tyr Ala Met Asp Tyr

1 5 10

<210> 106

<211> 16

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 106

Arg Ser Ser Gln Ser Val Val Asn Ser Asn Gly Asn Thr Tyr Leu Glu

1 5 10 15

<210> 107

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 107

Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser

1 5

<210> 108

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 108

Phe Gln Gly Ser His Val Pro Trp Thr

1 5

<210> 109

<211> 5

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 109

Asp Tyr Thr Ile Asn

1 5

<210> 110

<211> 17

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 110

Trp Ile Tyr Pro Gly Ser Gly Asn Arg Lys Tyr Asn Asp Lys Phe Lys

1 5 10 15

Gly

<210> 111

<211> 121

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 111

Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ala Gly Tyr Ile Phe Thr Asp Tyr

20 25 30

Thr Ile Asn Trp Val Lys Gln Ser Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Trp Ile Tyr Pro Gly Ser Gly Asn Arg Lys Tyr Asn Asp Lys Phe

50 55 60

Lys Gly Lys Ala Thr Met Thr Ala Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Phe Cys

85 90 95

Ala Arg Glu Ser Asn Tyr Val Gly Tyr Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly

100 105 110

Gln Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 112

<211> 112

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 112

Asp Val Leu Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Ser Leu Gly

1 5 10 15

Asp Gln Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Val Val Asn Ser

20 25 30

Asn Gly Asn Thr Tyr Leu Glu Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser

35 40 45

Pro Asn Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro

50 55 60

Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile

65 70 75 80

Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Val Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly

85 90 95

Ser His Val Pro Trp Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

100 105 110

<210> 113

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 113

Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr

1 5

<210> 114

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 114

Tyr Pro Gly Gly Ile Gly Gly Gly Tyr

1 5

<210> 115

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 115

Ser Glu Thr Gly Arg Ala Met Asp Tyr

1 5

<210> 116

<211> 11

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 116

Lys Ala Ser Gln Asp Ile Asn Lys Tyr Ile Ala

1 5 10

<210> 117

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 117

Tyr Thr Ser Thr Leu Lys Pro

1 5

<210> 118

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 118

Leu Gln Tyr Asp Asn Leu Asn Thr

1 5

<210> 119

<211> 5

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 119

Asn Tyr Trp Ile Gly

1 5

<210> 120

<211> 20

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 120

Asp Ile Tyr Pro Gly Gly Ile Gly Gly Gly Tyr Thr Lys Tyr Asn Glu

1 5 10 15

Lys Phe Lys Gly

20

<210> 121

<211> 121

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 121

Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val Arg Pro Gly Thr

1 5 10 15

Ser Val Lys Met Ser Cys Lys Ala Ala Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr

20 25 30

Trp Ile Gly Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly His Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Asp Ile Tyr Pro Gly Gly Ile Gly Gly Gly Tyr Thr Lys Tyr Asn

50 55 60

Glu Lys Phe Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Thr Ser Ser Ser

65 70 75 80

Thr Ala Tyr Met Gln Leu Gly Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Ile

85 90 95

Tyr Phe Cys Ser Arg Ser Glu Thr Gly Arg Ala Met Asp Tyr Trp Gly

100 105 110

Gln Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 122

<211> 106

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 122

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Leu Gly

1 5 10 15

Gly Lys Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asp Ile Asn Lys Tyr

20 25 30

Ile Ala Trp Tyr Gln His Lys Pro Gly Lys Gly Pro Arg Leu Leu Ile

35 40 45

His Tyr Thr Ser Thr Leu Lys Pro Gly Ile Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Arg Asp Tyr Ser Phe Ser Ile Ser Asp Leu Glu Pro

65 70 75 80

Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln Tyr Asp Asn Leu Asn Thr

85 90 95

Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

100 105

<210> 123

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 123

Gly Tyr Ser Phe Thr Asp Tyr

1 5

<210> 124

<211> 6

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 124

Asp Pro Ser Asn Gly Gly

1 5

<210> 125

<211> 11

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 125

Arg Asp Asn Tyr Gly Ser Gly Thr Met Asp Tyr

1 5 10

<210> 126

<211> 11

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 126

Lys Ala Ser Gln Asn Val Gly Thr Asp Val Ser

1 5 10

<210> 127

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 127

Trp Ala Ser Asn Arg Phe Thr

1 5

<210> 128

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 128

Glu Gln Tyr Ser Ile Tyr Pro Leu Thr

1 5

<210> 129

<211> 5

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 129

Asp Tyr Asn Ile Tyr

1 5

<210> 130

<211> 17

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 130

Tyr Ile Asp Pro Ser Asn Gly Gly Pro Gly Tyr Asn Gln Lys Phe Arg

1 5 10 15

Gly

<210> 131

<211> 120

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 131

Glu Ile Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ser Phe Thr Asp Tyr

20 25 30

Asn Ile Tyr Trp Val Lys Gln Ser His Gly Lys Ser Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Tyr Ile Asp Pro Ser Asn Gly Gly Pro Gly Tyr Asn Gln Lys Phe

50 55 60

Arg Gly Lys Ala Thr Leu Thr Val Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Phe

65 70 75 80

Leu His Leu Asn Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Arg Asp Asn Tyr Gly Ser Gly Thr Met Asp Tyr Trp Gly Gln

100 105 110

Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 132

<211> 107

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 132

Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Gln Lys Phe Met Ser Thr Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Ser Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asn Val Gly Thr Asp

20 25 30

Val Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ser Pro Lys Pro Leu Ile

35 40 45

Tyr Trp Ala Ser Asn Arg Phe Thr Gly Val Pro Asp Arg Phe Ile Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Asn Val Gln Ser

65 70 75 80

Glu Asp Leu Ala Asp Tyr Phe Cys Glu Gln Tyr Ser Ile Tyr Pro Leu

85 90 95

Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys

100 105

<210> 133

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 133

Gly Tyr Ser Phe Thr Asp Asp

1 5

<210> 134

<211> 6

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 134

Asp Pro Leu Asn Gly Gly

1 5

<210> 135

<211> 11

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 135

Arg Asp Asn Tyr Ala Thr Gly Thr Met Asp Tyr

1 5 10

<210> 136

<211> 11

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 136

Lys Ala Ser Lys Asn Val Gly Thr Asp Val Ser

1 5 10

<210> 137

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 137

Glu Gln Tyr Ser Ser Tyr Pro Leu Thr

1 5

<210> 138

<211> 5

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 138

Asp Asp Asn Met Tyr

1 5

<210> 139

<211> 17

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 139

Tyr Ile Asp Pro Leu Asn Gly Gly Thr Gly Tyr Asn Gln Lys Phe Lys

1 5 10 15

Gly

<210> 140

<211> 120

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 140

Glu Ile Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ser Phe Thr Asp Asp

20 25 30

Asn Met Tyr Trp Val Lys Gln Ser His Gly Lys Ser Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Tyr Ile Asp Pro Leu Asn Gly Gly Thr Gly Tyr Asn Gln Lys Phe

50 55 60

Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Val Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Phe

65 70 75 80

Leu His Leu Asn Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Arg Asp Asn Tyr Ala Thr Gly Thr Met Asp Tyr Trp Gly Gln

100 105 110

Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 141

<211> 107

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 141

Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Gln Lys Phe Met Ser Thr Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Ser Ile Thr Cys Lys Ala Ser Lys Asn Val Gly Thr Asp

20 25 30

Val Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ser Pro Lys Pro Leu Ile

35 40 45

Tyr Trp Ala Ser Asn Arg Phe Thr Gly Val Pro Asp Arg Phe Thr Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Asn Asn Val Gln Ser

65 70 75 80

Glu Asp Leu Ala Asp Tyr Phe Cys Glu Gln Tyr Ser Ser Tyr Pro Leu

85 90 95

Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys

100 105

<210> 142

<211> 6

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 142

Tyr Pro Ile Asn Gly Tyr

1 5

<210> 143

<211> 11

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 143

Asp Ser Asn Tyr Val Gly Trp Tyr Phe Asp Val

1 5 10

<210> 144

<211> 16

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 144

Arg Ser Ser Gln Ser Leu Val His Ser Asn Gly Asn Thr Tyr Leu His

1 5 10 15

<210> 145

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 145

Ser Gln Ser Thr His Val Pro Arg Thr

1 5

<210> 146

<211> 15

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 146

Arg Ala Ser Lys Ser Val Ser Thr Ser Gly Tyr Ser Tyr Met His

1 5 10 15

<210> 147

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 147

Phe Thr Ser Asp Leu Glu Pro

1 5

<210> 148

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 148

Gln His Ser Arg Glu Leu Pro Tyr Pro

1 5

<210> 149

<211> 5

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 149

Asp Tyr Asn Met Asp

1 5

<210> 150

<211> 17

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 150

Asn Ile Tyr Pro Ile Asn Gly Tyr Thr Gly Tyr Asn Gln Arg Phe Lys

1 5 10 15

Asn

<210> 151

<211> 120

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 151

Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr

20 25 30

Asn Met Asp Trp Val Lys Gln Ser His Gly Lys Ser Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Asn Ile Tyr Pro Ile Asn Gly Tyr Thr Gly Tyr Asn Gln Arg Phe

50 55 60

Lys Asn Lys Ala Thr Leu Thr Val Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu His Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Asp Ser Asn Tyr Val Gly Trp Tyr Phe Asp Val Trp Gly Ala

100 105 110

Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 152

<211> 112

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 152

Asp Val Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Ser Leu Gly

1 5 10 15

Asp Gln Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu Val His Ser

20 25 30

Asn Gly Asn Thr Tyr Leu His Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser

35 40 45

Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro

50 55 60

Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Phe Lys Ile

65 70 75 80

Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Val Tyr Phe Cys Ser Gln Ser

85 90 95

Thr His Val Pro Arg Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

100 105 110

<210> 153

<211> 111

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 153

Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu Thr Val Ser Leu Gly

1 5 10 15

Gln Arg Ala Thr Phe Ser Cys Arg Ala Ser Lys Ser Val Ser Thr Ser

20 25 30

Gly Tyr Ser Tyr Met His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro

35 40 45

Lys Leu Leu Ile Tyr Phe Thr Ser Asp Leu Glu Pro Gly Val Pro Ala

50 55 60

Arg Phe Thr Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Asn Ile His

65 70 75 80

Pro Val Glu Glu Glu Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln His Ser Arg

85 90 95

Glu Leu Pro Tyr Pro Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

100 105 110

<210> 154

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 154

Gly Tyr Thr Phe Ala Asp Tyr

1 5

<210> 155

<211> 6

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 155

Phe Pro Gly Ser Gly Ser

1 5

<210> 156

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 156

Gly Asp Ser Gly Arg Ala Met Asp Tyr

1 5

<210> 157

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 157

Tyr Thr Ser Thr Leu Gln Ser

1 5

<210> 158

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 158

Leu Gln Tyr Asp Asn Leu Leu Thr

1 5

<210> 159

<211> 5

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 159

Asp Tyr Tyr Ile Asn

1 5

<210> 160

<211> 17

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 160

Trp Ile Phe Pro Gly Ser Gly Ser Thr Tyr Tyr Asn Glu Lys Phe Lys

1 5 10 15

Gly

<210> 161

<211> 118

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 161

Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Ala Asp Tyr

20 25 30

Tyr Ile Asn Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Trp Ile Phe Pro Gly Ser Gly Ser Thr Tyr Tyr Asn Glu Lys Phe

50 55 60

Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Val Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Leu Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Phe Cys

85 90 95

Ala Arg Gly Asp Ser Gly Arg Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr

100 105 110

Ser Val Thr Val Ser Ser

115

<210> 162

<211> 106

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 162

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Leu Gly

1 5 10 15

Gly Lys Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asp Ile Asn Lys Tyr

20 25 30

Ile Ala Trp Tyr Gln His Lys Pro Gly Lys Gly Pro Arg Leu Leu Ile

35 40 45

His Tyr Thr Ser Thr Leu Gln Ser Gly Ile Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Arg Asp Tyr Ser Phe Ser Ile Ser Asn Leu Glu Pro

65 70 75 80

Glu Asp Asn Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln Tyr Asp Asn Leu Leu Thr

85 90 95

Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys

100 105

<210> 163

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 163

Gly Phe Ser Leu Thr Asp Tyr

1 5

<210> 164

<211> 5

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 164

Trp Asn Asp Gly Ser

1 5

<210> 165

<211> 10

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 165

Asn Trp Tyr Gly Gly Tyr Trp Phe Ala Tyr

1 5 10

<210> 166

<211> 11

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 166

Arg Ser Ser Glu Asn Ile Tyr Ser Tyr Leu Ala

1 5 10

<210> 167

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 167

Asn Ala Asn Ala Leu Ala Glu

1 5

<210> 168

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 168

Gln His His Tyr Gly Thr Pro Phe Thr

1 5

<210> 169

<211> 5

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 169

Asp Tyr Asp Val His

1 5

<210> 170

<211> 16

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 170

Val Ile Trp Asn Asp Gly Ser Thr Asp Tyr Asn Thr Ala Phe Ile Ser

1 5 10 15

<210> 171

<211> 118

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 171

Gln Ala His Leu Lys Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Ala Pro Ser Gln

1 5 10 15

Ser Leu Ser Ile Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Thr Asp Tyr

20 25 30

Asp Val His Trp Val Arg Gln Ser Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Leu

35 40 45

Gly Val Ile Trp Asn Asp Gly Ser Thr Asp Tyr Asn Thr Ala Phe Ile

50 55 60

Ser Arg Leu Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Ser Gln Val Phe Phe

65 70 75 80

Lys Met Asn Ser Leu Gln Ala Asp Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys Ala

85 90 95

Arg Asn Trp Tyr Gly Gly Tyr Trp Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr

100 105 110

Leu Val Thr Val Ser Ala

115

<210> 172

<211> 107

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 172

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu Ser Ala Ser Ala Gly

1 5 10 15

Glu Thr Val Thr Ile Thr Cys Arg Ser Ser Glu Asn Ile Tyr Ser Tyr

20 25 30

Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Gln Gly Lys Ser Pro Gln Leu Leu Val

35 40 45

Tyr Asn Ala Asn Ala Leu Ala Glu Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Val Thr Gln Phe Ser Leu Lys Ile Asn Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Gly Ser Tyr Tyr Cys Gln His His Tyr Gly Thr Pro Phe

85 90 95

Thr Phe Gly Ser Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

100 105

<210> 173

<211> 354

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полинуклеотид"

<400> 173

caggtgcagc tgaaggagtc aggacctggc ctggtggcgc cctcacagag cctgtccatc 60

acctgcacag tctctggttt ctcattaacc atctatgatg tacactgggt tcgccagtct 120

ccaggaaagg gtctggagtg gctgggagtg atatggagtg atggaagcac agactataat 180

gcagctttca tatctagact gagcatcagc aaggacaact ccaagagcca agttttcttt 240

aaaatgaaca gtctgcaagc tgatgacaca gccatatact actgtgccag aaattgggtc 300

gaccaggcct ggtttgctta ctggggccaa gggactctgg tcactgtctc tgca 354

<210> 174

<211> 321

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полинуклеотид"

<400> 174

gacatccaga tgactcagtc tccagcctcc ctatctgcat ctgtgggaga aactatcacc 60

atcacatgtc gagcaagtaa gaatatttac agttatttag catggtatca gcagaaacag 120

ggaaaatctc ctcagctcct ggtctataat gcaaaaacct taccagaagg tgtgccatca 180

aggttcagtg gcagtggatc aggcacacag ttttctctga agatcaacag cctgcagcct 240

gaagattttg ggagttatta ctgtcaacat cattatggta ctccgctcac gttcggtgct 300

gggaccaagc tggagctgaa a 321

<210> 175

<211> 363

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полинуклеотид"

<400> 175

caggtccaac tgcagcagtc tggacctgag ctggtgaagc ctggagcttc agtgaagctg 60

tcctgcaagg ctgctggcta catcttcact gactatacta taaactgggt gaagcagagt 120

cctggacagg gacttgagtg gattggatgg atttatcctg gaagtggtaa tcgtaaatac 180

aatgacaagt tcaagggcaa ggccacaatg actgcagaca aatcctccag cacagcctac 240

atgcagctca gcagcctgac ctctgaggat tctgcggtct atttctgtgc aagagagagt 300

aactacgtgg ggtactatgc tatggactat tggggtcaag gaacctcagt caccgtctcc 360

tca 363

<210> 176

<211> 336

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полинуклеотид"

<400> 176

gatgttttga tgacccaaac tccactctcc ctgcctgtca gtcttggaga tcaagcctcc 60

atctcttgca gatctagtca gagcgttgta aatagtaatg gaaacaccta tttagaatgg 120

tacctgcaga aaccaggcca gtctccaaat ctcctgatct acaaagtttc caatcgattt 180

tctggggtcc cagacaggtt cagtggcagt ggatcgggga cagatttcac actcaagatc 240

agcagagtgg aggctgagga tctgggagtt tattactgtt ttcaaggttc acatgttccg 300

tggacgttcg gtggaggcac caagctggaa atcaaa 336

<210> 177

<211> 363

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полинуклеотид"

<400> 177

caggtccagc tgcagcagtc tggagctgag ctggtaaggc ctgggacttc agtgaagatg 60

tcctgcaagg ctgctggata caccttcaca aactactgga taggttgggt aaagcagagg 120

cctggacatg gccttgagtg gattggagat atttaccctg gaggtatagg aggtggttat 180

actaagtaca atgagaagtt caagggcaag gccacactga ctgcagacac atcctccagc 240

acagcctaca tgcagctcgg cagcctgaca tctgaggact ctgccatcta tttctgttca 300

agatcggaaa ctggacgggc tatggactac tggggtcaag gaacctcagt caccgtctcc 360

tca 363

<210> 178

<211> 318

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полинуклеотид"

<400> 178

gacatccaga tgacacagtc tccatcctca ctgtctgcat ctctgggagg caaagtcacc 60

atcacttgca aggcaagcca agacattaat aagtatatag cttggtacca acacaagcct 120

ggaaaaggtc ctaggctgct catacattac acatctacat taaagccagg catcccatca 180

aggttcagtg gaagtgggtc tgggagagat tattccttca gcatcagtga cctggagcct 240

gaagatattg caacttatta ttgtctacag tatgataatc tgaacacgtt cggagggggg 300

accaagctgg aaataaaa 318

<210> 179

<211> 360

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полинуклеотид"

<400> 179

gagatccagc tgcagcagtc tggacctgag ctggtgaagc ctggggcttc agtgaaggtg 60

tcctgcaagg cttctggtta ttcattcact gactacaaca tctactgggt gaagcagagc 120

catggaaaga gccttgagtg gattggatat attgatcctt ccaatggtgg tcctggctac 180

aaccagaagt tcaggggcaa ggccacattg actgttgaca agtcctccag cacagccttc 240

ctgcatctca acagcctgac atctgaggac tctgcagtct attactgtgc aagaagggac 300

aactacggct cggggactat ggactactgg ggtcaaggaa cctcagtcac cgtctcctca 360

<210> 180

<211> 321

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полинуклеотид"

<400> 180

gacattgtga tgacccagtc tcaaaaattc atgtccacat cagtaggaga cagggtcagc 60

atcacctgta aggccagtca gaatgtgggt actgatgtat cctggtatca acagaaacca 120

gggaaatctc ctaaaccact gatttactgg gcatcaaacc ggttcactgg agtccctgat 180

cgcttcatag gtagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagcaa tgtgcagtct 240

gaagacttgg cagattattt ctgtgagcaa tatagcatct atccgctcac gttcggtgct 300

gggaccaagc tggagctgaa a 321

<210> 181

<211> 360

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полинуклеотид"

<400> 181

gagatccagc tgcagcagtc tggacctgag ctggtgaagc ctggggcgtc agtgaaggta 60

tcctgcaagg cttctggtta ctcattcact gacgacaaca tgtactgggt gaagcagagc 120

catggaaaga gccttgagtg gattggatat attgatcctc tcaatggtgg tactggctac 180

aaccagaaat tcaagggcaa ggccacactg actgttgaca agtcctccag cacagccttc 240

ctgcatctca acagcctgac atctgaggac tctgcagtct attactgtgc aagaagggac 300

aactacgcca cggggactat ggactactgg ggtcaaggaa cctcagtcac cgtctcctca 360

<210> 182

<211> 321

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полинуклеотид"

<400> 182

gacattgtga tgacccagtc tcaaaaattc atgtccacat cagtaggaga cagggtcagc 60

atcacctgca aggccagtaa gaatgtgggt actgatgtat cctggtatca acagaaacca 120

gggaaatctc ctaaaccact gatttactgg gcatcaaacc ggttcactgg agtccctgat 180

cgcttcacag gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcaacaa tgtgcagtct 240

gaagacttgg cagattattt ctgtgagcaa tatagcagct atccgctcac gttcggtgct 300

gggaccaagc tggagctgaa a 321

<210> 183

<211> 360

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полинуклеотид"

<400> 183

gaggtccagc tgcagcagtc tggccctgag ctggtgaagc ctggggcttc agtgaagata 60

tcctgcaagg cttctggata cacattcact gactacaaca tggactgggt gaagcagagc 120

catggaaaga gccttgagtg gattggaaat atttatccta tcaatggtta tactggctac 180

aaccagaggt tcaagaacaa ggccacattg actgtagaca agtcctccag cacagcctac 240

atggaactcc acagcctgac atctgaggac tctgcggtct attactgcgc aagagatagt 300

aactacgttg gctggtactt cgatgtctgg ggcgcaggga ccacggtcac cgtctcctca 360

<210> 184

<211> 336

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полинуклеотид"

<400> 184

gatgttgtga tgacccaaac tccactctcc ctgcctgtca gtcttggaga tcaagcctcc 60

atctcttgca gatctagtca gagccttgta cacagtaatg gaaacaccta tttacattgg 120

tacctgcaga agccaggcca gtctccaaag ctcctgatct acaaagtttc caaccgattt 180

tctggggtcc cagacaggtt cagtggcagt ggatcaggga cagatttcac attcaagatc 240

agcagagtgg aggctgagga tctgggagtt tatttctgct ctcaaagtac acatgttcct 300

cggacgttcg gtggaggcac caagctggaa atcaaa 336

<210> 185

<211> 333

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полинуклеотид"

<400> 185

gacattgtgc tgacacagtc tcctgcttcc ttaactgtat ctctggggca gagggccacc 60

ttctcatgca gggccagcaa aagtgtcagt acatctggct atagttatat gcactggtac 120

caacagaaac caggacagcc acccaaactc ctcatctatt ttacatccga cctagaacct 180

ggggtccctg ccaggttcac tggcagtggg tctgggacag acttcaccct caacatccat 240

cctgtggagg aggaggatgc tgcaacctat tactgtcagc acagtaggga gcttccgtac 300

cccttcggag gggggaccaa gttggaaata aaa 333

<210> 186

<211> 354

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полинуклеотид"

<400> 186

caggtccagc tacagcagtc tggacctgag ctggtgaagc ctggggcttc agtgaagata 60

tcctgcaagg cttctggcta caccttcgct gactactata taaactgggt gaagcagagg 120

cctggacagg gacttgagtg gattggatgg atttttcctg gaagtggtag tacttactac 180

aatgagaagt tcaagggcaa ggccacactt actgtagaca aatcctccag cacagcctac 240

atgttgctca gcagcctgac ctctgaggac tctgcggtct atttctgtgc aagaggggac 300

tccggtaggg ctatggacta ctggggtcaa ggaacctcag tcaccgtctc ctca 354

<210> 187

<211> 318

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полинуклеотид"

<400> 187

gacatccaga tgacacagtc tccatcctca ctgtctgcat ctctgggagg caaagtcacc 60

atcacttgca aggcaagcca agacattaac aaatatatag cttggtacca acacaagcct 120

ggaaaaggtc ctaggctgct catacattac acatctacat tacagtcagg catcccatca 180

aggttcagtg gaagtgggtc tgggagagat tattccttca gcatcagcaa cctggagcct 240

gaagataatg caacttatta ttgtctacag tatgataatc ttctcacgtt cggtgctggg 300

accaagctgg agctgaaa 318

<210> 188

<211> 354

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полинуклеотид"

<400> 188

caggcgcacc tgaaggagtc aggacctggc ctggtggcgc cctcacagag cctgtccatc 60

acctgcacag tctctggttt ctcattaacc gactatgatg tacactgggt tcgccagtct 120

ccaggaaagg gtctggagtg gctgggagtg atatggaatg atggaagcac agactataat 180

acagctttca tatctagact gaccatcagc aaggacaact ccaagagcca agttttcttt 240

aaaatgaaca gtctgcaagc tgatgacaca gccatatact actgtgccag aaattggtat 300

ggtggctact ggtttgctta ctggggccaa gggactctgg tcactgtctc tgca 354

<210> 189

<211> 321

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полинуклеотид"

<400> 189

gacatccaga tgactcagtc tccagcctcc ctatctgcat ctgcgggaga aactgtcacc 60

atcacatgtc gatcaagtga gaatatttac agttatttag catggtatca gcagaaacag 120

ggaaaatctc ctcagctcct agtctataat gcaaatgcct tagcagaagg tgtgccatcg 180

aggttcagtg gcagtggatc agtcacacag ttttctctga agatcaacag cctgcagcct 240

gaagattttg ggagttatta ctgtcaacat cattatggta ctccattcac gttcggctcg 300

gggacaaagt tggaaataaa a 321

<210> 190

<211> 120

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 190

Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln

1 5 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Tyr Ser Ile Thr Ser Gly

20 25 30

Tyr Tyr Trp Asn Trp Ile Arg Gln His Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp

35 40 45

Ile Gly Tyr Ile Ser Tyr Asp Gly Tyr Asn Asn Tyr Asn Pro Ser Leu

50 55 60

Lys Asn Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser

65 70 75 80

Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Tyr Tyr Asp Tyr Glu Asp Trp Tyr Phe Gly Val Trp Gly Gln

100 105 110

Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 191

<211> 120

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 191

Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln

1 5 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Tyr Ser Ile Thr Ser Gly

20 25 30

Tyr Tyr Trp Ser Trp Ile Arg Gln His Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp

35 40 45

Ile Gly Tyr Ile Ser Tyr Asp Gly Tyr Thr Tyr Tyr Asn Pro Ser Leu

50 55 60

Lys Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser

65 70 75 80

Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Tyr Tyr Asp Tyr Glu Asp Trp Tyr Phe Gly Val Trp Gly Gln

100 105 110

Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 192

<211> 120

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 192

Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln

1 5 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Tyr Ser Ile Thr Ser Gly

20 25 30

Tyr Tyr Trp Asn Trp Ile Arg Gln His Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp

35 40 45

Ile Gly Tyr Ile Ser Tyr Asp Gly Tyr Asn Asn Tyr Asn Pro Ser Leu

50 55 60

Lys Ser Arg Val Thr Ile Ser Arg Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser

65 70 75 80

Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Tyr Tyr Asp Tyr Glu Asp Trp Tyr Phe Gly Val Trp Gly Gln

100 105 110

Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 193

<211> 120

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 193

Gln Val Gln Leu Gln Gln Trp Gly Ala Gly Leu Leu Lys Pro Ser Glu

1 5 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ala Val Tyr Gly Tyr Ser Ile Thr Ser Gly

20 25 30

Tyr Tyr Trp Asn Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp

35 40 45

Ile Gly Tyr Ile Ser Tyr Asp Gly Tyr Asn Asn Tyr Asn Pro Ser Leu

50 55 60

Lys Asn Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser

65 70 75 80

Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Asn Tyr Tyr Asp Tyr Glu Asp Trp Tyr Phe Gly Val Trp Gly Gln

100 105 110

Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 194

<211> 120

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 194

Gln Val Gln Leu Gln Gln Trp Gly Ala Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu

1 5 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ala Val Tyr Gly Tyr Ser Ile Thr Ser Gly

20 25 30

Tyr Tyr Trp Asn Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp

35 40 45

Ile Gly Tyr Ile Ser Tyr Asp Gly Tyr Asn Asn Tyr Asn Pro Ser Leu

50 55 60

Lys Asn Arg Val Thr Ile Ser Arg Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser

65 70 75 80

Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Asn Tyr Tyr Asp Tyr Glu Asp Trp Tyr Phe Gly Val Trp Gly Gln

100 105 110

Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 195

<211> 120

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 195

Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu

1 5 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Tyr Ser Ile Thr Ser Gly

20 25 30

Tyr Tyr Trp Asn Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp

35 40 45

Ile Gly Tyr Ile Ser Tyr Asp Gly Tyr Asn Asn Tyr Asn Pro Ser Leu

50 55 60

Lys Asn Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser

65 70 75 80

Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Asn Tyr Tyr Asp Tyr Glu Asp Trp Tyr Phe Gly Val Trp Gly Gln

100 105 110

Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 196

<211> 120

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 196

Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu

1 5 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Tyr Ser Ile Thr Ser Gly

20 25 30

Tyr Tyr Trp Asn Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp

35 40 45

Ile Gly Tyr Ile Ser Tyr Asp Gly Tyr Asn Asn Tyr Asn Pro Ser Leu

50 55 60

Lys Asn Arg Val Thr Ile Ser Arg Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser

65 70 75 80

Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Asn Tyr Tyr Asp Tyr Glu Asp Trp Tyr Phe Gly Val Trp Gly Gln

100 105 110

Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 197

<211> 120

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 197

Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Met Lys Pro Ser Glu

1 5 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ser Val Ser Gly Tyr Ser Ile Thr Ser Gly

20 25 30

Tyr Tyr Trp Ser Trp Ile Arg Lys Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Tyr

35 40 45

Ile Gly Tyr Val Ser Tyr Asp Gly Ser Thr Tyr Tyr Asn Pro Ser Leu

50 55 60

Lys Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Arg Phe Ser

65 70 75 80

Leu Lys Leu Asn Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Asn Tyr Tyr Asp Tyr Glu Asp Trp Tyr Phe Gly Tyr Trp Gly Gln

100 105 110

Gly Ile Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 198

<211> 120

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 198

Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Met Lys Pro Ser Glu

1 5 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ser Val Ser Gly Tyr Ser Ile Thr Ser Gly

20 25 30

Tyr Tyr Trp Asn Trp Ile Arg Lys Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp

35 40 45

Ile Gly Tyr Ile Ser Tyr Asp Gly Tyr Asn Asn Tyr Asn Pro Ser Leu

50 55 60

Lys Ser Arg Val Thr Ile Ser Arg Asp Thr Ser Lys Asn Arg Phe Ser

65 70 75 80

Leu Lys Leu Asn Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Asn Tyr Tyr Asp Tyr Glu Asp Trp Tyr Phe Gly Val Trp Gly Gln

100 105 110

Gly Ile Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 199

<211> 120

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 199

Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Val Ser Gly Tyr Ser Ile Thr Ser Gly

20 25 30

Tyr Tyr Trp Asn Trp Ile Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp

35 40 45

Val Ala Ser Ile Ser Tyr Asp Gly Tyr Asn Asn Tyr Asn Pro Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Ile Thr Ile Ser Arg Asp Asp Ser Lys Asn Thr Phe Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Asn Tyr Tyr Asp Tyr Glu Asp Trp Tyr Phe Gly Val Trp Gly Gln

100 105 110

Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 200

<211> 120

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 200

Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Val Ser Gly Tyr Ser Ile Thr Ser Gly

20 25 30

Tyr Tyr Trp Asn Trp Ile Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp

35 40 45

Val Ala Tyr Ile Ser Tyr Asp Gly Tyr Asn Asn Tyr Asn Pro Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Ile Thr Ile Ser Arg Asp Thr Ser Lys Asn Thr Phe Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Asn Tyr Tyr Asp Tyr Glu Asp Trp Tyr Phe Gly Val Trp Gly Gln

100 105 110

Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 201

<211> 120

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 201

Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Tyr Ser Ile Thr Ser Gly

20 25 30

Tyr Tyr Trp Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp

35 40 45

Val Ala Tyr Ile Ser Tyr Asp Gly Tyr Asn Asn Tyr Asn Pro Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Asn Tyr Tyr Asp Tyr Glu Asp Trp Tyr Phe Gly Val Trp Gly Gln

100 105 110

Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 202

<211> 111

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 202

Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Glu Ser Val Ser Ile Ile

20 25 30

Gly Thr Asn Ser Ile His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro

35 40 45

Arg Leu Leu Ile Tyr His Ala Ser Asn Leu Glu Thr Gly Ile Pro Ala

50 55 60

Arg Phe Ser Gly Ser Gly Pro Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser

65 70 75 80

Ser Leu Glu Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Leu Gln Ser Arg

85 90 95

Lys Ile Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

100 105 110

<210> 203

<211> 111

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 203

Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu Ala Val Ser Pro Gly

1 5 10 15

Gln Arg Ala Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Glu Ser Val Ser Ile Ile

20 25 30

Gly Thr Asn Ser Ile His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro

35 40 45

Lys Leu Leu Ile Tyr His Ala Ser Asn Leu Glu Thr Gly Val Pro Ala

50 55 60

Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Asn

65 70 75 80

Pro Val Glu Ala Asn Asp Thr Ala Asn Tyr Tyr Cys Leu Gln Ser Arg

85 90 95

Lys Ile Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

100 105 110

<210> 204

<211> 111

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 204

Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Val Ser Pro Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Glu Ser Val Ser Ile Ile

20 25 30

Gly Thr Asn Ser Leu His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro

35 40 45

Arg Leu Leu Ile Tyr His Ala Ser Gln Ser Ile Ser Gly Ile Pro Ala

50 55 60

Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser

65 70 75 80

Ser Leu Gln Ser Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Arg

85 90 95

Lys Ile Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

100 105 110

<210> 205

<211> 111

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 205

Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Val Ser Pro Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Glu Ser Val Ser Ile Ile

20 25 30

Gly Thr Asn Ser Ile His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro

35 40 45

Arg Leu Leu Ile Tyr His Ala Ser Asn Leu Glu Thr Gly Ile Pro Ala

50 55 60

Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Arg Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser

65 70 75 80

Ser Leu Gln Ser Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Leu Gln Ser Arg

85 90 95

Lys Ile Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

100 105 110

<210> 206

<211> 111

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 206

Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Glu Ser Val Ser Ile Ile

20 25 30

Gly Thr Asn Ser Met Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro

35 40 45

Lys Leu Leu Ile Tyr His Ala Ser Tyr Leu Glu Ser Gly Val Pro Ser

50 55 60

Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser

65 70 75 80

Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln Ser Arg

85 90 95

Lys Ile Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

100 105 110

<210> 207

<211> 111

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 207

Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Glu Ser Val Ser Ile Ile

20 25 30

Gly Thr Asn Ser Met His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro

35 40 45

Lys Leu Leu Ile Tyr His Ala Ser Asn Leu Glu Ser Gly Val Pro Ser

50 55 60

Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Arg Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser

65 70 75 80

Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln Ser Arg

85 90 95

Lys Ile Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

100 105 110

<210> 208

<211> 111

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 208

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Glu Ser Val Ser Ile Ile

20 25 30

Gly Thr Asn Ser Met His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro

35 40 45

Lys Leu Leu Ile Tyr His Ala Ser Asn Leu Glu Ser Gly Val Pro Ser

50 55 60

Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Phe Thr Ile Ser

65 70 75 80

Ser Leu Gln Pro Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln Ser Arg

85 90 95

Lys Ile Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

100 105 110

<210> 209

<211> 120

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 209

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr

20 25 30

Thr Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Trp Ile Tyr Pro Leu Arg Gly Ser Ile Asn Tyr Asn Glu Lys Phe

50 55 60

Lys Asp Arg Val Thr Ser Thr Arg Asp Thr Ser Ile Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Arg Leu Arg Ser Asp Asp Thr Val Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg His Gly Ala Tyr Tyr Ser Asn Ala Phe Asp Tyr Trp Gly Gln

100 105 110

Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 210

<211> 120

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 210

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr

20 25 30

Tyr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Arg Ile Tyr Pro Leu Arg Gly Ser Thr Asn Tyr Ala Gln Lys Phe

50 55 60

Gln Gly Arg Val Thr Ser Thr Arg Asp Thr Ser Ile Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Arg Leu Arg Ser Asp Asp Thr Val Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg His Gly Ala Tyr Tyr Ser Asn Ala Phe Asp Tyr Trp Gly Gln

100 105 110

Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 211

<211> 120

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 211

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr

20 25 30

Thr Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Trp Ile Tyr Pro Leu Arg Gly Ser Ile Asn Tyr Asn Glu Lys Phe

50 55 60

Lys Asp Arg Val Thr Met Thr Ala Asp Thr Ser Ser Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Arg Leu Arg Ser Asp Asp Thr Val Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg His Gly Ala Tyr Tyr Ser Asn Ala Phe Asp Tyr Trp Gly Gln

100 105 110

Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 212

<211> 120

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 212

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Glu Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr

20 25 30

Thr Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Trp Ile Tyr Pro Leu Arg Gly Ser Ile Asn Tyr Asn Glu Lys Phe

50 55 60

Lys Asp Arg Val Thr Met Thr Ala Asp Thr Ser Thr Asp Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Lys Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg His Gly Ala Tyr Tyr Ser Asn Ala Phe Asp Tyr Trp Gly Gln

100 105 110

Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 213

<211> 120

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 213

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Val Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr

20 25 30

Thr Met Tyr Trp Val Lys Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Glu Ile Tyr Pro Leu Arg Gly Ser Ile Asn Phe Asn Glu Lys Phe

50 55 60

Lys Ser Lys Ala Thr Leu Thr Val Asp Lys Ser Ala Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg His Gly Ala Tyr Tyr Ser Asn Ala Phe Asp Tyr Trp Gly Gln

100 105 110

Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 214

<211> 120

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 214

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Val Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr

20 25 30

Thr Met His Trp Val Lys Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Glu Ile Tyr Pro Leu Arg Gly Ser Ile Asn Phe Asn Glu Lys Phe

50 55 60

Lys Ser Lys Ala Thr Leu Thr Val Asp Lys Ser Ala Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg His Gly Ala Tyr Tyr Ser Asn Ala Phe Asp Tyr Trp Gly Gln

100 105 110

Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 215

<211> 111

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 215

Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Glu Ser Val Asp Asn Asp

20 25 30

Gly Ile Arg Phe Met His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro

35 40 45

Arg Leu Leu Ile Tyr Arg Ala Ser Asn Leu Glu Ser Gly Ile Pro Ala

50 55 60

Arg Phe Ser Gly Ser Gly Pro Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser

65 70 75 80

Ser Leu Glu Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Asn

85 90 95

Lys Asp Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

100 105 110

<210> 216

<211> 111

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 216

Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Glu Ser Val Asp Asn Asp

20 25 30

Gly Ile Arg Phe Met His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro

35 40 45

Arg Leu Leu Ile Tyr Arg Ala Ser Asn Leu Glu Ser Gly Ile Pro Ala

50 55 60

Arg Phe Ser Gly Ser Gly Pro Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser

65 70 75 80

Ser Leu Glu Pro Glu Asp Val Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Asn

85 90 95

Lys Asp Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

100 105 110

<210> 217

<211> 111

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 217

Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Ile Asn Cys Arg Ala Ser Glu Ser Val Asp Asn Asp

20 25 30

Gly Ile Arg Phe Met His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro

35 40 45

Lys Leu Leu Ile Tyr Arg Ala Ser Asn Leu Glu Ser Gly Val Pro Asp

50 55 60

Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Arg Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser

65 70 75 80

Ser Leu Gln Ala Glu Asp Val Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Asn

85 90 95

Lys Asp Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

100 105 110

<210> 218

<211> 111

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 218

Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Ile Asn Cys Arg Ala Ser Glu Ser Val Asp Asn Asp

20 25 30

Gly Ile Arg Phe Met His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro

35 40 45

Lys Leu Leu Ile Tyr Arg Ala Ser Asn Leu Glu Ser Gly Val Pro Asp

50 55 60

Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Arg Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Asn

65 70 75 80

Ser Leu Gln Ala Glu Asp Val Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Asn

85 90 95

Lys Asp Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Leu Lys

100 105 110

<210> 219

<211> 111

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 219

Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Val Ser Pro Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Ile Ser Cys Arg Ala Ser Glu Ser Val Asp Asn Asp

20 25 30

Gly Ile Arg Phe Met His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro

35 40 45

Lys Leu Leu Ile Tyr Arg Ala Ser Asn Leu Glu Ser Gly Val Pro Ala

50 55 60

Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Arg Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser

65 70 75 80

Ser Val Glu Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln His Ser Trp

85 90 95

Glu Ile Pro Pro Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

100 105 110

<210> 220

<211> 118

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 220

Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Ser Leu Thr Ile Tyr

20 25 30

Asp Val His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ala Val Ile Trp Ser Asp Gly Ser Thr Asp Tyr Asn Ala Ala Phe Ile

50 55 60

Ser Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu

65 70 75 80

Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala

85 90 95

Arg Asn Trp Val Asp Gln Ala Trp Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr

100 105 110

Leu Val Thr Val Ser Ser

115

<210> 221

<211> 118

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 221

Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Ser Leu Thr Ile Tyr

20 25 30

Asp Val His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Gly Val Ile Trp Ser Asp Gly Ser Thr Asp Tyr Asn Ala Ala Phe Ile

50 55 60

Ser Arg Phe Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu

65 70 75 80

Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala

85 90 95

Arg Asn Trp Val Asp Gln Ala Trp Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr

100 105 110

Leu Val Thr Val Ser Ser

115

<210> 222

<211> 118

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 222

Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Ser Leu Thr Ile Tyr

20 25 30

Asp Val His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ala Val Ile Trp Ser Asp Gly Ser Thr Asp Tyr Ala Asp Ser Val Lys

50 55 60

Gly Arg Phe Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu

65 70 75 80

Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala

85 90 95

Arg Asn Trp Val Asp Gln Ala Trp Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr

100 105 110

Leu Val Thr Val Ser Ser

115

<210> 223

<211> 118

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 223

Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Val Ser Gly Phe Ser Leu Thr Ile Tyr

20 25 30

Asp Val His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Gly Val Ile Trp Ser Asp Gly Ser Thr Asp Tyr Ala Asp Ser Val Lys

50 55 60

Gly Arg Phe Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Asn Thr Val Tyr Leu

65 70 75 80

Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala

85 90 95

Arg Asn Trp Val Asp Gln Ala Trp Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr

100 105 110

Leu Val Thr Val Ser Ser

115

<210> 224

<211> 118

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 224

Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu

1 5 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Thr Ile Tyr

20 25 30

Asp Val His Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Val Ile Trp Ser Asp Gly Ser Thr Asp Tyr Asn Ala Ala Phe Ile

50 55 60

Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu

65 70 75 80

Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala

85 90 95

Arg Asn Trp Val Asp Gln Ala Trp Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr

100 105 110

Leu Val Thr Val Ser Ser

115

<210> 225

<211> 118

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 225

Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu

1 5 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Thr Ile Tyr

20 25 30

Asp Val His Trp Val Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Val Ile Trp Ser Asp Gly Ser Thr Asp Tyr Asn Pro Ser Leu Lys

50 55 60

Ser Arg Val Thr Ile Ser Lys Asp Thr Ser Lys Asn Gln Val Ser Leu

65 70 75 80

Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala

85 90 95

Arg Asn Trp Val Asp Gln Ala Trp Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr

100 105 110

Leu Val Thr Val Ser Ser

115

<210> 226

<211> 118

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 226

Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Met Lys Pro Ser Glu

1 5 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ser Val Ser Gly Asp Ser Ile Thr Ile Tyr

20 25 30

Asp Trp His Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Val Val Trp Ser Asp Gly Ser Thr Asp Tyr Asn Pro Ser Leu Lys

50 55 60

Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Arg Phe Ser Leu

65 70 75 80

Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala

85 90 95

Arg Asn Trp Val Asp Gln Ala Trp Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr

100 105 110

Leu Val Thr Val Ser Ser

115

<210> 227

<211> 118

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 227

Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu

1 5 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Thr Ile Tyr

20 25 30

Asp Val His Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Val Ile Trp Ser Asp Gly Ser Thr Asp Tyr Asn Pro Ser Leu Lys

50 55 60

Ser Arg Val Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu

65 70 75 80

Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala

85 90 95

Arg Asn Trp Val Asp Gln Ala Trp Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr

100 105 110

Leu Val Thr Val Ser Ser

115

<210> 228

<211> 107

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 228

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Lys Asn Ile Tyr Ser Tyr

20 25 30

Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Asn Ala Lys Thr Leu Pro Glu Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln His His Tyr Gly Thr Pro Leu

85 90 95

Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

100 105

<210> 229

<211> 107

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 229

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Lys Asn Ile Tyr Ser Tyr

20 25 30

Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Val

35 40 45

Tyr Asn Ala Lys Thr Leu Pro Glu Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln His His Tyr Gly Thr Pro Leu

85 90 95

Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

100 105

<210> 230

<211> 107

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 230

Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Lys Asn Ile Tyr Ser Tyr

20 25 30

Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Asn Ala Lys Thr Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln His His Tyr Gly Thr Pro Leu

85 90 95

Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

100 105

<210> 231

<211> 107

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 231

Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Lys Asn Ile Tyr Ser Tyr

20 25 30

Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Val

35 40 45

Tyr Asn Ala Lys Thr Leu Pro Glu Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln His His Tyr Gly Thr Pro Leu

85 90 95

Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

100 105

<210> 232

<211> 107

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 232

Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Val Ser Pro Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Lys Asn Ile Tyr Ser Tyr

20 25 30

Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Asn Ala Lys Thr Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Ser

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln His His Tyr Gly Thr Pro Leu

85 90 95

Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

100 105

<210> 233

<211> 107

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 233

Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Phe Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Lys Asn Ile Tyr Ser Tyr

20 25 30

Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Asn Ala Lys Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln His His Tyr Gly Thr Pro Leu

85 90 95

Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

100 105

<210> 234

<211> 107

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 234

Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Phe Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Lys Asn Ile Tyr Ser Tyr

20 25 30

Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Asn Ala Lys Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln His His Tyr Gly Thr Pro Leu

85 90 95

Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

100 105

<210> 235

<211> 118

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 235

Gln Leu Gln Leu Gln Glu Ser Gly Ser Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln

1 5 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ala Val Ser Gly Phe Ser Leu Thr Asp Tyr

20 25 30

Asp Val His Trp Val Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Val Ile Trp Asn Asp Gly Ser Thr Asp Tyr Asn Pro Ser Leu Ile

50 55 60

Ser Arg Val Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Asn Gln Val Ser Leu

65 70 75 80

Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala

85 90 95

Arg Asn Trp Tyr Gly Gly Tyr Trp Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr

100 105 110

Leu Val Thr Val Ser Ser

115

<210> 236

<211> 118

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 236

Gln Leu Gln Leu Gln Glu Ser Gly Ser Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln

1 5 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ala Val Ser Gly Gly Ser Ile Thr Asp Tyr

20 25 30

Asp Trp His Trp Val Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Val Ile Trp Asn Asp Gly Ser Thr Asp Tyr Asn Pro Ser Leu Ile

50 55 60

Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Asn Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu

65 70 75 80

Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala

85 90 95

Arg Asn Trp Tyr Gly Gly Tyr Trp Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr

100 105 110

Leu Val Thr Val Ser Ser

115

<210> 237

<211> 118

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 237

Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Ser Phe Thr Asp Tyr

20 25 30

Asp Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ala Val Ile Trp Asn Asp Gly Ser Thr Asp Tyr Ala Thr Ser Val Ile

50 55 60

Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu

65 70 75 80

Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala

85 90 95

Arg Asn Trp Tyr Gly Gly Tyr Trp Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr

100 105 110

Leu Val Thr Val Ser Ser

115

<210> 238

<211> 118

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 238

Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Ser Phe Thr Asp Tyr

20 25 30

Asp Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Gly Val Ile Trp Asn Asp Gly Ser Thr Asp Tyr Ala Thr Ser Val Ile

50 55 60

Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu

65 70 75 80

Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala

85 90 95

Arg Asn Trp Tyr Gly Gly Tyr Trp Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr

100 105 110

Leu Val Thr Val Ser Ser

115

<210> 239

<211> 118

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 239

Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Met Lys Pro Ser Glu

1 5 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ser Val Ser Gly Gly Ser Ile Thr Asp Tyr

20 25 30

Asp Trp His Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Val Val Trp Asn Asp Gly Ser Thr Asp Tyr Asn Pro Ser Leu Lys

50 55 60

Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Arg Phe Ser Leu

65 70 75 80

Lys Leu Asn Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala

85 90 95

Arg Asn Trp Tyr Gly Gly Tyr Trp Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Ile

100 105 110

Leu Val Thr Val Ser Ser

115

<210> 240

<211> 118

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 240

Gln Val Thr Leu Lys Glu Ser Gly Pro Ala Leu Val Lys Pro Thr Gln

1 5 10 15

Thr Leu Thr Leu Thr Cys Thr Phe Ser Gly Phe Ser Leu Thr Asp Tyr

20 25 30

Asp Val His Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Ala Leu Glu Trp Leu

35 40 45

Ala Val Ile Trp Asn Asp Gly Ser Thr Asp Tyr Ser Pro Ser Leu Lys

50 55 60

Ser Arg Leu Thr Ile Thr Lys Asp Thr Ser Lys Asn Gln Val Val Leu

65 70 75 80

Thr Met Thr Asn Met Asp Pro Val Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys Ala

85 90 95

Arg Asn Trp Tyr Gly Gly Tyr Trp Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr

100 105 110

Leu Val Thr Val Ser Ser

115

<210> 241

<211> 107

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 241

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ser Ser Glu Asn Ile Tyr Ser Tyr

20 25 30

Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Val

35 40 45

Tyr Asn Ala Asn Ala Leu Ala Glu Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Val Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln His His Tyr Gly Thr Pro Phe

85 90 95

Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

100 105

<210> 242

<211> 107

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 242

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Thr Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ser Ser Glu Asn Ile Tyr Ser Tyr

20 25 30

Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Val

35 40 45

Tyr Asn Ala Asn Ala Leu Ala Glu Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Val Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Asp Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln His His Tyr Gly Thr Pro Phe

85 90 95

Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

100 105

<210> 243

<211> 107

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 243

Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Val Ser Pro Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Glu Asn Ile Tyr Ser Tyr

20 25 30

Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Asn Ala Asn Ala Ser Ala Glu Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Ser

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln His Tyr Gly Thr Pro Phe

85 90 95

Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

100 105

<210> 244

<211> 107

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 244

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Glu Asn Ile Tyr Ser Tyr

20 25 30

Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Leu

35 40 45

Tyr Asn Ala Asn Arg Leu Glu Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Ser Tyr Tyr Cys Gln His His Tyr Gly Thr Pro Phe

85 90 95

Thr Phe Gly Ser Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

100 105

<210> 245

<211> 107

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 245

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Glu Asn Ile Tyr Ser Tyr

20 25 30

Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Leu

35 40 45

Tyr Asn Ala Asn Arg Leu Glu Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Ser Tyr Tyr Cys Gln His His Tyr Gly Thr Pro Phe

85 90 95

Thr Phe Gly Ser Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

100 105

<210> 246

<211> 121

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 246

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr

20 25 30

Trp Ile Gly Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Asp Ile Tyr Pro Gly Gly Ile Gly Gly Gly Tyr Thr Lys Tyr Asn

50 55 60

Glu Lys Phe Lys Gly Arg Val Thr Met Thr Ala Asp Thr Ser Thr Ser

65 70 75 80

Thr Ala Tyr Met Glu Leu Arg Ser Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val

85 90 95

Tyr Tyr Cys Ser Arg Ser Glu Thr Gly Arg Ala Met Asp Tyr Trp Gly

100 105 110

Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 247

<211> 121

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 247

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr

20 25 30

Trp Ile Gly Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Asp Ile Tyr Pro Gly Gly Ile Gly Gly Gly Tyr Thr Lys Tyr Ala

50 55 60

Gln Lys Leu Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Ala Asp Thr Ser Thr Ser

65 70 75 80

Thr Ala Tyr Met Glu Leu Arg Ser Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val

85 90 95

Tyr Tyr Cys Ser Arg Ser Glu Thr Gly Arg Ala Met Asp Tyr Trp Gly

100 105 110

Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 248

<211> 121

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 248

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr

20 25 30

Trp Ile Gly Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Asp Ile Tyr Pro Gly Gly Ile Gly Gly Gly Tyr Thr Lys Tyr Ala

50 55 60

Gln Lys Phe Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Ala Asp Thr Ser Thr Ser

65 70 75 80

Thr Ala Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val

85 90 95

Tyr Tyr Cys Ser Arg Ser Glu Thr Gly Arg Ala Met Asp Tyr Trp Gly

100 105 110

Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 249

<211> 121

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 249

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr

20 25 30

Trp Ile Gly Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Asp Ile Tyr Pro Gly Gly Ile Gly Gly Gly Tyr Thr Lys Tyr Asn

50 55 60

Glu Lys Phe Lys Gly Arg Val Thr Met Thr Ala Asp Thr Ser Thr Ser

65 70 75 80

Thr Ala Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val

85 90 95

Tyr Phe Cys Ser Arg Ser Glu Thr Gly Arg Ala Met Asp Tyr Trp Gly

100 105 110

Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 250

<211> 121

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 250

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Leu Lys Arg Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr

20 25 30

Trp Met Gly Trp Val Lys Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Asp Ile Tyr Pro Gly Gly Ile Gly Gly Gly Tyr Thr Asn Tyr Ala

50 55 60

Gln Lys Phe Lys Gly Lys Ala Thr Met Thr Ala Asp Thr Ser Ser Ser

65 70 75 80

Thr Ala Tyr Met Gln Leu Ser Arg Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val

85 90 95

Tyr Tyr Cys Ser Arg Ser Glu Thr Gly Arg Ala Met Asp Tyr Trp Gly

100 105 110

Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 251

<211> 106

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 251

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Gln Ala Ser Gln Asp Ile Asn Lys Tyr

20 25 30

Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile

35 40 45

His Tyr Thr Ser Thr Leu Lys Pro Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Phe Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln Tyr Asp Asn Leu Asn Thr

85 90 95

Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

100 105

<210> 252

<211> 106

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 252

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asp Ile Asn Lys Tyr

20 25 30

Ile Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile

35 40 45

His Tyr Thr Ser Thr Leu Lys Pro Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Arg Asp Tyr Thr Phe Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln Tyr Asp Asn Leu Asn Thr

85 90 95

Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

100 105

<210> 253

<211> 106

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 253

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Gln Ala Ser Gln Asp Ile Asn Lys Tyr

20 25 30

Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Tyr Thr Ser Thr Leu Glu Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Phe Ser Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln Tyr Asp Asn Leu Asn Thr

85 90 95

Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

100 105

<210> 254

<211> 118

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 254

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Ala Asp Tyr

20 25 30

Tyr Ile Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Trp Ile Phe Pro Gly Ser Gly Ser Thr Tyr Tyr Asn Glu Lys Phe

50 55 60

Lys Gly Arg Val Thr Met Thr Val Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Phe Cys

85 90 95

Ala Arg Gly Asp Ser Gly Arg Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr

100 105 110

Leu Val Thr Val Ser Ser

115

<210> 255

<211> 118

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 255

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Ala Asp Tyr

20 25 30

Tyr Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Trp Ile Phe Pro Gly Ser Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Glu Lys Phe

50 55 60

Lys Gly Arg Val Thr Ser Thr Arg Asp Thr Ser Ile Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Arg Leu Arg Ser Asp Asp Thr Val Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Gly Asp Ser Gly Arg Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr

100 105 110

Leu Val Thr Val Ser Ser

115

<210> 256

<211> 118

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 256

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Ala Asp Tyr

20 25 30

Tyr Ile Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Trp Ile Phe Pro Gly Ser Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Gln Lys Leu

50 55 60

Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Thr Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Arg Ser Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Gly Asp Ser Gly Arg Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr

100 105 110

Leu Val Thr Val Ser Ser

115

<210> 257

<211> 118

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 257

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Ala Asp Tyr

20 25 30

Tyr Ile Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Trp Ile Phe Pro Gly Ser Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Gln Lys Leu

50 55 60

Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Val Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Arg Ser Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Gly Asp Ser Gly Arg Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr

100 105 110

Leu Val Thr Val Ser Ser

115

<210> 258

<211> 118

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 258

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Leu Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Ala Asp Tyr

20 25 30

Tyr Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Trp Ile Phe Pro Gly Ser Gly Ser Thr Tyr Tyr Asn Gln Lys Phe

50 55 60

Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Val Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Arg Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Gly Asp Ser Gly Arg Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr

100 105 110

Leu Val Thr Val Ser Ser

115

<210> 259

<211> 106

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 259

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asp Ile Asn Lys Tyr

20 25 30

Ile Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile

35 40 45

His Tyr Thr Ser Thr Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Phe Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln Tyr Asp Asn Leu Leu Thr

85 90 95

Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

100 105

<210> 260

<211> 106

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 260

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asp Ile Asn Lys Tyr

20 25 30

Ile Ala Trp Tyr Gln His Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile

35 40 45

His Tyr Thr Ser Thr Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Arg Asp Tyr Thr Phe Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln Tyr Asp Asn Leu Leu Thr

85 90 95

Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

100 105

<210> 261

<211> 106

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 261

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Gln Ala Ser Gln Asp Ile Asn Lys Tyr

20 25 30

Leu Ala Trp Tyr Gln His Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile

35 40 45

His Tyr Thr Ser Thr Leu Glu Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Phe Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln Tyr Asp Asn Leu Leu Thr

85 90 95

Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

100 105

<210> 262

<211> 118

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 262

Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu

1 5 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Thr Ile Tyr

20 25 30

Asp Val His Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Val Ile Trp Ser Asp Gly Ser Thr Asp Tyr Asn Pro Ser Leu Lys

50 55 60

Ser Arg Val Thr Ile Ser Lys Asp Thr Ser Lys Asn Gln Val Ser Leu

65 70 75 80

Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala

85 90 95

Arg Asn Trp Val Asp Gln Ala Trp Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr

100 105 110

Leu Val Thr Val Ser Ser

115

<210> 263

<211> 118

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 263

Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu

1 5 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Gly Ser Ile Thr Ile Tyr

20 25 30

Asp Trp His Trp Val Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Val Ile Trp Ser Asp Gly Ser Thr Asp Tyr Asn Pro Ser Leu Lys

50 55 60

Ser Arg Val Thr Ile Ser Lys Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu

65 70 75 80

Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala

85 90 95

Arg Asn Trp Val Asp Gln Ala Trp Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr

100 105 110

Leu Val Thr Val Ser Ser

115

<210> 264

<211> 118

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 264

Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu

1 5 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Gly Ser Ile Thr Ile Tyr

20 25 30

Asp Trp His Trp Val Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Val Ile Trp Ser Asp Gly Ser Thr Asp Tyr Asn Pro Ser Leu Lys

50 55 60

Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu

65 70 75 80

Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala

85 90 95

Arg Asn Trp Val Asp Gln Ala Trp Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr

100 105 110

Leu Val Thr Val Ser Ser

115

<210> 265

<211> 118

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 265

Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu

1 5 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Gly Ser Ile Thr Ile Tyr

20 25 30

Asp Trp His Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Val Ile Trp Ser Asp Gly Ser Thr Asp Tyr Asn Pro Ser Leu Lys

50 55 60

Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu

65 70 75 80

Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala

85 90 95

Arg Asn Trp Val Asp Gln Ala Trp Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr

100 105 110

Leu Val Thr Val Ser Ser

115

<210> 266

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 266

Asp Tyr Ser Phe Thr Gly Tyr

1 5

<210> 267

<211> 6

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 267

His Pro Tyr Tyr Gly Gly

1 5

<210> 268

<211> 10

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 268

Glu Arg Ser Asn Phe His Ala Leu Asp Tyr

1 5 10

<210> 269

<211> 5

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 269

Gly Tyr Asn Met Asn

1 5

<210> 270

<211> 17

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 270

Asn Ile His Pro Tyr Tyr Gly Gly Thr Ser Phe Asn Gln Lys Phe Met

1 5 10 15

Gly

<210> 271

<211> 119

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 271

Glu Ile Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Asp Tyr Ser Phe Thr Gly Tyr

20 25 30

Asn Met Asn Trp Val Met Gln Ser His Gly Lys Ser Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Asn Ile His Pro Tyr Tyr Gly Gly Thr Ser Phe Asn Gln Lys Phe

50 55 60

Met Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Gln Leu Asn Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Glu Arg Ser Asn Phe His Ala Leu Asp Tyr Trp Gly Gln Gly

100 105 110

Thr Ser Val Thr Val Ser Ser

115

<210> 272

<211> 111

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 272

Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu Thr Val Ser Leu Gly

1 5 10 15

Gln Arg Ala Thr Phe Ser Cys Arg Ala Ser Lys Ser Val Ser Thr Ser

20 25 30

Gly Tyr Ser Tyr Met His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro

35 40 45

Lys Leu Leu Ile Tyr Phe Thr Ser Asp Leu Glu Pro Gly Val Pro Ala

50 55 60

Arg Phe Thr Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Asn Ile His

65 70 75 80

Pro Val Glu Glu Glu Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln His Ser Arg

85 90 95

Glu Leu Pro Tyr Pro Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

100 105 110

<210> 273

<211> 16

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 273

Val Ile Trp Ser Asp Gly Ser Thr Asp Tyr Asn Pro Ser Leu Lys Ser

1 5 10 15

<210> 274

<211> 11

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 274

Gln Ala Ser Gln Asp Ile Asn Lys Tyr Leu Ala

1 5 10

<210> 275

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 275

Tyr Thr Ser Thr Leu Glu Thr

1 5

<210> 276

<211> 5

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 276

Asp Tyr Tyr Met Asn

1 5

<210> 277

<211> 17

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 277

Trp Ile Phe Pro Gly Ser Gly Ser Thr Tyr Tyr Asn Gln Lys Phe Gln

1 5 10 15

Gly

<210> 278

<211> 17

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 278

Trp Ile Phe Pro Gly Ser Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Gln Lys Leu Gln

1 5 10 15

Gly

<210> 279

<400> 279

000

<210> 280

<211> 15

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 280

Arg Ala Ser Glu Ser Val Asp Asn Asp Gly Ile Arg Phe Leu His

1 5 10 15

<210> 281

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 281

Arg Ala Ser Asn Arg Glu Thr

1 5

<210> 282

<211> 17

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 282

Trp Ile Tyr Pro Leu Arg Gly Ser Ile Asn Tyr Ala Gln Lys Phe Gln

1 5 10 15

Gly

<210> 283

<211> 120

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 283

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr

20 25 30

Thr Ile His Trp Val Arg Gln Ala Thr Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Trp Ile Tyr Pro Leu Arg Gly Ser Ile Asn Tyr Ala Gln Lys Phe

50 55 60

Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Ala Asn Lys Ser Ile Ser Thr Val Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Phe Cys

85 90 95

Ala Arg His Gly Ala Tyr Tyr Ser Asn Ala Phe Asp Tyr Trp Gly Gln

100 105 110

Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 284

<211> 111

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 284

Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Val Ser Pro Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Glu Ser Val Asp Asn Asp

20 25 30

Gly Ile Arg Phe Leu His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro

35 40 45

Arg Leu Leu Ile Tyr Arg Ala Ser Asn Arg Glu Thr Gly Ile Pro Ala

50 55 60

Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser

65 70 75 80

Ser Leu Gln Ser Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Asn

85 90 95

Lys Asp Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

100 105 110

<210> 285

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 285

Arg Ala Ser Thr Arg Ala Thr

1 5

<210> 286

<211> 111

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 286

Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Val Ser Pro Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Glu Ser Val Asp Asn Asp

20 25 30

Gly Ile Arg Phe Leu His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro

35 40 45

Arg Leu Leu Ile Tyr Arg Ala Ser Thr Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala

50 55 60

Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Arg Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser

65 70 75 80

Ser Leu Gln Ser Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Asn

85 90 95

Lys Asp Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

100 105 110

<210> 287

<211> 17

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 287

Trp Ile Tyr Pro Leu Arg Gly Ser Ile Asn Tyr Ser Pro Ser Phe Gln

1 5 10 15

Gly

<210> 288

<211> 120

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 288

Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Glu

1 5 10 15

Ser Leu Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr

20 25 30

Thr Ile His Trp Val Arg Gln Met Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Trp Ile Tyr Pro Leu Arg Gly Ser Ile Asn Tyr Ser Pro Ser Phe

50 55 60

Gln Gly Gln Val Thr Ile Ser Ala Asp Lys Ser Ile Ser Thr Val Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Trp Ser Ser Leu Lys Ala Ser Asp Thr Ala Met Tyr Phe Cys

85 90 95

Ala Arg His Gly Ala Tyr Tyr Ser Asn Ala Phe Asp Tyr Trp Gly Gln

100 105 110

Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 289

<211> 120

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 289

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr

20 25 30

Thr Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Trp Ile Tyr Pro Leu Arg Gly Ser Ile Asn Tyr Ala Gln Lys Phe

50 55 60

Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Phe Cys

85 90 95

Ala Arg His Gly Ala Tyr Tyr Ser Asn Ala Phe Asp Tyr Trp Gly Gln

100 105 110

Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 290

<211> 17

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 290

Trp Ile Tyr Pro Leu Arg Gly Ser Ile Asn Tyr Ala Glu Lys Phe Lys

1 5 10 15

Gly

<210> 291

<211> 120

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 291

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr

20 25 30

Thr Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Trp Ile Tyr Pro Leu Arg Gly Ser Ile Asn Tyr Ala Glu Lys Phe

50 55 60

Lys Gly Arg Val Thr Leu Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Val Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Phe Cys

85 90 95

Ala Arg His Gly Ala Tyr Tyr Ser Asn Ala Phe Asp Tyr Trp Gly Gln

100 105 110

Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 292

<211> 120

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 292

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr

20 25 30

Thr Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Trp Ile Tyr Pro Leu Arg Gly Ser Ile Asn Tyr Ala Gln Lys Phe

50 55 60

Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Ala Asp Lys Ser Ile Ser Thr Val Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Arg Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg His Gly Ala Tyr Tyr Ser Asn Ala Phe Asp Tyr Trp Gly Gln

100 105 110

Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 293

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 293

Arg Ala Ser Thr Leu Glu Thr

1 5

<210> 294

<211> 120

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 294

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr

20 25 30

Thr Ile His Trp Val Arg Gln Ala Thr Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Trp Ile Tyr Pro Leu Arg Gly Ser Ile Asn Tyr Ala Gln Lys Phe

50 55 60

Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Ala Asn Lys Ser Ser Ser Thr Val Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Phe Cys

85 90 95

Ala Arg His Gly Ala Tyr Tyr Ser Asn Ala Phe Asp Tyr Trp Gly Gln

100 105 110

Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 295

<211> 111

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 295

Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Val Ser Pro Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Glu Ser Val Asp Asn Asp

20 25 30

Gly Ile Arg Phe Leu His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro

35 40 45

Arg Leu Leu Ile Tyr Arg Ala Ser Thr Leu Glu Thr Gly Ile Pro Ala

50 55 60

Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser

65 70 75 80

Ser Leu Gln Ser Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Asn

85 90 95

Lys Asp Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

100 105 110

<210> 296

<211> 120

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 296

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr

20 25 30

Thr Ile His Trp Val Arg Gln Ala Thr Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Trp Ile Tyr Pro Leu Arg Gly Ser Ile Asn Tyr Ala Gln Lys Phe

50 55 60

Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Ala Asp Lys Ser Ile Ser Thr Val Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Phe Cys

85 90 95

Ala Arg His Gly Ala Tyr Tyr Ser Asn Ala Phe Asp Tyr Trp Gly Gln

100 105 110

Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 297

<211> 357

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полинуклеотид"

<400> 297

gagatccagc tgcagcagtc tggagctgaa ctggtgaagc ctggggcttc agtgaagata 60

tcctgcaagg cttctgatta ctcattcact ggctacaaca tgaactgggt gatgcagagc 120

catggaaaga gccttgagtg gattggaaat attcatcctt actatggtgg tactagcttc 180

aatcagaagt tcatgggcaa ggccacattg actgcagaca aatcttccag cacagcctac 240

atgcagctca acagcctgac atctgaagac tctgcagtct attactgtgc aagagagaga 300

agtaacttcc atgctctgga ctactggggt cagggaacct cagtcaccgt ctcctca 357

<210> 298

<211> 333

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полинуклеотид"

<400> 298

gacattgtgc tgacacagtc tcctgcttcc ttaactgtat ctctggggca gagggccacc 60

ttctcatgca gggccagcaa aagtgtcagt acatctggct atagttatat gcactggtac 120

caacagaaac caggacagcc acccaaactc ctcatctatt ttacatccga cctagaacct 180

ggggtccctg ccaggttcac tggcagtggg tctgggacag acttcaccct caacatccat 240

cctgtggagg aggaggatgc tgcaacctat tactgtcagc acagtaggga gcttccgtac 300

cccttcggag gggggaccaa gttggaaata aaa 333

<210> 299

<211> 354

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полинуклеотид"

<400> 299

caggtacaac tccaggaatc cgggcctggg ctcgtcaaac caagcgaaac actctctctc 60

acctgcaccg tttctgggtt ttctcttact atctatgacg tacattgggt aaggcaacca 120

cccgggaagg ggctggagtg gatcggtgta atctggtcag atggatctac agactacaac 180

ccatccctta aaagcagggt gaccatttct aaggacactt ccaagaacca agtatccctt 240

aaattgtcct ctgtaaccgc agcagacacc gcagtttact actgcgcacg aaattgggtt 300

gaccaagcat ggtttgcata ttggggacag ggaactcttg tcactgtgtc ttca 354

<210> 300

<211> 321

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полинуклеотид"

<400> 300

gatattcaaa tgacccaatc cccctcatca ctttcagcat ctgtcggtga tcgggtcacc 60

attacttgca gagccagtaa gaatatctac agctacctgg cttggtatca gcaaaaacct 120

ggtaaggccc ctaaacttct cgtttacaat gctaagaccc ttcccgaggg agttccttcc 180

aggttttccg gtagcgggag tggaacagat ttcaccttga ctatttctag cttgcagccc 240

gaggatttcg ctacatacta ctgccagcat cactatggaa cccccctgac cttcggtcag 300

ggaaccaagc tcgagatcaa a 321

<210> 301

<211> 354

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полинуклеотид"

<400> 301

caagtccagc tcgtacagag cggggcagag ctgaagaagc ctggggcctc cgtcaaggtc 60

tcctgtaagg cttctggtta cacatttgcc gactactaca tgaactgggt acggcaagcc 120

ccaggtcaag ggctggaatg gatgggatgg atttttccag ggagcggcag cacttactac 180

aaccagaaat ttcaaggtcg tgtgacaatg accgtggata aaagcagctc tacagcttac 240

atggagcttt cccgcttgag gtccgatgat actgccgtat attattgtgc ccgtggtgac 300

tcaggtaggg ccatggacta ttggggacag ggcaccctcg tgaccgtgtc cagc 354

<210> 302

<211> 318

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полинуклеотид"

<400> 302

gatatccaga tgacacaatc cccttcatcc ttgagcgcat cagttggcga cagggtcacc 60

ataacttgtc aggctagtca ggatattaac aagtacctgg cttggtatca acacaagcct 120

ggaaaggccc ccaaattgct gattcactac acctctacat tggaaactgg cgtacccagt 180

cgcttttctg ggagtggaag cggaactgat ttcactttca ctatatccag tcttcagcca 240

gaagatatcg caacttacta ttgtcttcag tatgataact tgcttacttt cggaggaggg 300

accaaagttg aaatcaag 318

<210> 303

<211> 354

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полинуклеотид"

<400> 303

caggtgcagt tggtccaatc cggggctgag gtgaagaagc ctggggcctc tgttaaagtt 60

agttgcaagg catcaggcta caccttcgct gactactaca tcaactgggt tagacaggcc 120

cccgggcagg ggttggagtg gatgggttgg atttttccag gatcaggttc aacatattac 180

gcacaaaaac tgcaaggtag agtaaccatg acaactgata ctagcacctc cacagcctat 240

atggaactcc gctctctcag gagtgacgat acagccgttt attactgcgc ccgtggggat 300

tcaggccgtg caatggatta ctggggtcaa gggaccctcg tgaccgtaag ttca 354

<210> 304

<211> 360

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полинуклеотид"

<400> 304

caagttcagt tggtgcaaag cggggcagaa gtgaagaaac ctggtgcttc tgtgaaagtt 60

tcctgcaagg ccagcggcta cacctttact gattacacaa tacactgggt acggcaggca 120

actgggcaag gattggaatg gatggggtgg atatacccat tgcgagggtc tataaactac 180

gcacagaaat ttcaaggtcg agtaacaatg acagccaaca aatcaataag caccgtttat 240

atggaactct catctctcag gagtgaggat accgccgtgt atttctgcgc acgacacggt 300

gcatattact caaacgcttt cgactattgg ggccagggca cccttgtgac tgttagtagc 360

<210> 305

<211> 333

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полинуклеотид"

<400> 305

gagatagtaa tgactcagtc tcccgctaca cttagtgtaa gcccagggga gcgagcaacc 60

ctcagttgca gagcatctga gagtgttgat aatgatggaa tacgttttct ccattggtat 120

caacaaaaac cagggcaggc ccccagattg ctgatctacc gtgcttccaa tcgcgagact 180

ggcattcctg cacgtttcag cggcagcggc tccggaaccg agtttacact tactattagc 240

tcactccagt ctgaagactt cgctgtgtat tactgtcagc aatccaacaa ggacccatac 300

actttcggag gcggcactaa ggttgagatc aaa 333

<210> 306

<211> 333

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полинуклеотид"

<400> 306

gagatagtta tgactcagtc tcccgccaca ctttcagtaa gtcccggtga acgcgccacc 60

ctgtcctgcc gtgcttccga atcagtggat aatgacggca ttaggttttt gcactggtac 120

caacaaaagc ccggacaggc cccccgcctg ctgatatatc gtgcatcaac acgagcaaca 180

gggatccccg ctcgatttag tggatccgga agcaggaccg aatttacact taccatttcc 240

tcacttcagt cagaagattt cgccgtttac tactgtcagc agtcaaataa ggatccttac 300

acatttgggg gcggtacaaa agtcgagatc aaa 333

<210> 307

<211> 360

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полинуклеотид"

<400> 307

gaggtccagt tggtccagtc aggagccgaa gtcaagaagc ctggggaaag cctgaaaata 60

agttgcaaag ctagtggata tacatttaca gattatacca ttcattgggt ccggcaaatg 120

ccaggaaaag gcttggagtg gatggggtgg atttatcccc tccgaggctc aataaattat 180

agtcctagtt ttcaggggca ggtaactatt agcgctgata aaagtatttc tacagtttat 240

ttgcagtgga gttcattgaa ggctagtgac accgctatgt atttctgcgc tagacatggt 300

gcatattatt caaatgcctt cgactattgg ggccagggca ccctcgtcac tgtgagttcc 360

<210> 308

<211> 360

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полинуклеотид"

<400> 308

caggtgcaac ttgttcagtc aggggctgaa gtaaagaagc caggctcatc agtcaaggta 60

tcatgcaaag catctggcta tacatttaca gattacacca ttcactgggt gaggcaagct 120

cccggtcaag gtctcgagtg gatggggtgg atataccctc tcagaggctc tataaattac 180

gctcagaaat ttcaagggag agttacaatt actgctgata aaagtaccag cactgcttat 240

atggagcttt cctcacttcg ttcagaggac accgccgttt acttttgtgc ccggcatggt 300

gcctattatt caaatgcctt cgattattgg gggcagggaa ctttggtcac agtttcatct 360

<210> 309

<211> 360

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полинуклеотид"

<400> 309

caagttcaac ttgtccaaag tggggctgaa gttaaaaaac ctggatcatc agtcaaggtt 60

tcatgcaaag ccagcggtta cacatttaca gactatacaa tacattgggt tcgacaggct 120

cccgggcaag ggctcgaatg gatgggatgg atttatcccc tcaggggctc aattaactat 180

gctgagaaat ttaagggtcg tgtaacactc accgccgata aatccacctc aaccgtatat 240

atggagcttt cttctcttcg ctctgaagat accgccgtct atttctgcgc acgacacggg 300

gcatactatt ctaatgcttt tgactactgg ggacaaggga cacttgtgac cgttagtagc 360

<210> 310

<211> 360

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полинуклеотид"

<400> 310

caagtgcagt tggtccagag tggagcagag gtgaagaagc ctggtgcttc cgtcaaggtg 60

agttgcaagg catctggtta tactttcact gactacacaa ttcattgggt caggcaggcc 120

cctggacagg gactggaatg gatgggatgg atctatccac ttagaggatc aatcaactat 180

gctcaaaagt tccagggtcg tgtaacaatg accgcagaca aaagtatctc aactgtatac 240

atggaattgt cccgattgag gagcgacgac acagccgtat attattgtgc caggcacgga 300

gcctactaca gtaatgcctt cgactactgg gggcagggca cccttgttac cgtgtccagc 360

<210> 311

<211> 360

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полинуклеотид"

<400> 311

caagtgcagc tcgttcagtc tggcgcagaa gtgaagaagc caggagcttc cgttaaagtg 60

tcctgtaaag cctctggata tacattcaca gattatacaa ttcactgggt gagacaagca 120

accggtcaag gtctcgaatg gatgggctgg atataccccc tccgaggttc catcaactac 180

gctcaaaaat tccaaggacg agtcactatg acagcaaaca agagttcctc cactgtatat 240

atggaactct ctagtttgcg ctctgaagac accgccgtgt acttctgtgc caggcacggc 300

gcatactatt ctaatgcatt tgactattgg gggcagggca cattggtaac agttagttcc 360

<210> 312

<211> 333

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полинуклеотид"

<400> 312

gaaattgtaa tgacccagag ccccgccacc cttagtgtgt ccccaggcga gagggccact 60

ctttcttgcc gcgcaagcga atccgtagac aacgatggta taagattttt gcattggtat 120

cagcaaaagc caggccaggc accccggctt ctcatctaca gagctagcac cctcgaaact 180

ggaatccccg ctcgtttttc aggatctggt agcggaacag aatttacttt gacaattagt 240

agtttgcagt cagaggactt tgctgtctat tattgccagc agtctaataa agatccatac 300

accttcggcg gagggaccaa agtagagatt aaa 333

<210> 313

<211> 360

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полинуклеотид"

<400> 313

caagttcagt tggtgcaaag cggggcagaa gtgaagaaac ctggtgcttc tgtgaaagtt 60

tcctgcaagg ccagcggcta cacctttact gattacacaa tacactgggt acggcaggca 120

actgggcaag gattggaatg gatggggtgg atatacccat tgcgagggtc tataaactac 180

gcacagaaat ttcaaggtcg agtaacaatg acagccgaca aatcaataag caccgtttat 240

atggaactct catctctcag gagtgaggat accgccgtgt atttctgcgc acgacacggt 300

gcatattact caaacgcttt cgactattgg ggccagggca cccttgtgac tgttagtagc 360

<210> 314

<211> 15

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 314

Lys Ser Ser Gln Ser Val Asp Asn Asp Gly Ile Arg Phe Leu His

1 5 10 15

<210> 315

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 315

Arg Ala Ser Thr Arg Glu Ser

1 5

<210> 316

<211> 111

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 316

Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Asp Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Ile Asn Cys Lys Ser Ser Gln Ser Val Asp Asn Asp

20 25 30

Gly Ile Arg Phe Leu His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro

35 40 45

Lys Leu Leu Ile Tyr Arg Ala Ser Thr Arg Glu Ser Gly Val Pro Asp

50 55 60

Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser

65 70 75 80

Ser Leu Gln Ala Glu Asp Val Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Asn

85 90 95

Lys Asp Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

100 105 110

<210> 317

<211> 120

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 317

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr

20 25 30

Thr Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Trp Ile Tyr Pro Leu Arg Gly Ser Ile Asn Tyr Ala Gln Lys Phe

50 55 60

Gln Gly Arg Val Thr Leu Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Val Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Phe Cys

85 90 95

Ala Arg His Gly Ala Tyr Tyr Ser Asn Ala Phe Asp Tyr Trp Gly Gln

100 105 110

Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 318

<211> 333

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полинуклеотид"

<400> 318

gacattgtaa tgacccagtc tcccgatagc ctcgctgtct cactcggaga acgcgcaacc 60

atcaactgca agtcctccca aagcgttgac aatgacggca ttaggttttt gcactggtac 120

cagcagaaac ccggtcaacc tcctaagttg ctcatttacc gagcatctac ccgcgagtca 180

ggagtacctg atcgcttttc cggtagcggt agtggaacag attttactct gaccattagt 240

tcactccagg cagaagatgt ggctgtctac tactgccaac agtcaaataa agacccttat 300

accttcggtg ggggtaccaa agtagagatc aaa 333

<210> 319

<211> 360

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полинуклеотид"

<400> 319

caggtgcagt tggtccagag cggggcagag gttaagaagc ctggggcctc agtaaaggta 60

tcctgcaagg cttctgggta caccttcaca gattacacta ttcattgggt gcgccaagca 120

cctggtcaag gccttgaatg gatgggatgg atttacccct tgcgagggag tattaattat 180

gcacagaagt tccagggaag ggttactctt accgccgaca agtccacatc aaccgtttac 240

atggagcttt cctctctcag gtccgaagac actgctgtat atttctgcgc tcggcatggg 300

gcttattaca gcaacgcctt cgattactgg ggtcagggta cattggtcac agtgtccagt 360

<210> 320

<211> 327

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 320

Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser

1 5 10 15

Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe

20 25 30

Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly

35 40 45

Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu

50 55 60

Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr

65 70 75 80

Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys

85 90 95

Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro

100 105 110

Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys

115 120 125

Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val

130 135 140

Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr

145 150 155 160

Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu

165 170 175

Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His

180 185 190

Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys

195 200 205

Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln

210 215 220

Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu

225 230 235 240

Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro

245 250 255

Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn

260 265 270

Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu

275 280 285

Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val

290 295 300

Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln

305 310 315 320

Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro

325

<210> 321

<211> 328

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 321

Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys

1 5 10 15

Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr

20 25 30

Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser

35 40 45

Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser

50 55 60

Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr

65 70 75 80

Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys

85 90 95

Arg Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys

100 105 110

Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro

115 120 125

Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys

130 135 140

Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp

145 150 155 160

Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu

165 170 175

Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu

180 185 190

His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn

195 200 205

Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly

210 215 220

Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu

225 230 235 240

Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr

245 250 255

Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn

260 265 270

Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe

275 280 285

Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn

290 295 300

Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr

305 310 315 320

Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro

325

<210> 322

<211> 328

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 322

Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys

1 5 10 15

Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr

20 25 30

Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser

35 40 45

Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser

50 55 60

Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr

65 70 75 80

Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys

85 90 95

Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys

100 105 110

Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro

115 120 125

Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys

130 135 140

Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp

145 150 155 160

Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu

165 170 175

Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu

180 185 190

His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn

195 200 205

Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly

210 215 220

Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu

225 230 235 240

Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr

245 250 255

Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn

260 265 270

Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe

275 280 285

Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn

290 295 300

Ile Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr

305 310 315 320

Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro

325

<210> 323

<211> 323

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 323

Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser

1 5 10 15

Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe

20 25 30

Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly

35 40 45

Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu

50 55 60

Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Asn Phe Gly Thr Gln Thr Tyr

65 70 75 80

Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Thr

85 90 95

Val Glu Arg Lys Cys Cys Val Glu Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro

100 105 110

Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr

115 120 125

Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val

130 135 140

Ser His Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val

145 150 155 160

Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser

165 170 175

Thr Phe Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Val His Gln Asp Trp Leu

180 185 190

Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ala

195 200 205

Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro

210 215 220

Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln

225 230 235 240

Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala

245 250 255

Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr

260 265 270

Pro Pro Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu

275 280 285

Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser

290 295 300

Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser

305 310 315 320

Leu Ser Pro

<210> 324

<211> 323

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 324

Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser

1 5 10 15

Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe

20 25 30

Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly

35 40 45

Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu

50 55 60

Ser Ser Val Val Thr Val Thr Ser Ser Asn Phe Gly Thr Gln Thr Tyr

65 70 75 80

Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Thr

85 90 95

Val Glu Arg Lys Cys Cys Val Glu Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro

100 105 110

Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr

115 120 125

Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val

130 135 140

Ser His Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Met

145 150 155 160

Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser

165 170 175

Thr Phe Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Val His Gln Asp Trp Leu

180 185 190

Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ala

195 200 205

Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro

210 215 220

Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln

225 230 235 240

Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala

245 250 255

Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr

260 265 270

Pro Pro Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu

275 280 285

Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser

290 295 300

Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser

305 310 315 320

Leu Ser Pro

<210> 325

<211> 323

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 325

Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser

1 5 10 15

Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe

20 25 30

Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly

35 40 45

Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu

50 55 60

Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr

65 70 75 80

Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Thr

85 90 95

Val Glu Arg Lys Cys Cys Val Glu Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro

100 105 110

Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr

115 120 125

Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val

130 135 140

Ser His Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val

145 150 155 160

Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser

165 170 175

Thr Phe Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Val His Gln Asp Trp Leu

180 185 190

Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ala

195 200 205

Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro

210 215 220

Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln

225 230 235 240

Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala

245 250 255

Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr

260 265 270

Pro Pro Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu

275 280 285

Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser

290 295 300

Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser

305 310 315 320

Leu Ser Pro

<210> 326

<211> 323

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид"

<400> 326

Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser

1 5 10 15

Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe

20 25 30

Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly

35 40 45

Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu

50 55 60

Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Asn Phe Gly Thr Gln Thr Tyr

65 70 75 80

Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Thr

85 90 95

Val Glu Arg Lys Cys Cys Val Glu Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro

100 105 110

Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr

115 120 125

Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val

130 135 140

Ser His Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val

145 150 155 160

Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser

165 170 175

Thr Phe Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Val His Gln Asp Trp Leu

180 185 190

Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ala

195 200 205

Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro

210 215 220

Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln

225 230 235 240

Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ser

245 250 255

Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr

260 265 270

Pro Pro Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu

275 280 285

Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser

290 295 300

Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser

305 310 315 320

Leu Ser Pro

<210> 327

<211> 15

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (1)..(1)

<223> /замена="Lys"

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (2)..(2)

<223> /замена="Ser"

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (4)..(4)

<223> /замена="Gln"

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (14)..(14)

<223> /замена="Leu"

<220>

<221> ПРОЧИЕ_ОСОБЕННОСТИ

<222> (1)..(15)

<223> /замечание="Остатки варианта, представленные в последователности, не

имеют предпочтения по отношению к тем, что представлены в аннотациях

для положений варианта"

<400> 327

Arg Ala Ser Glu Ser Val Asp Asn Asp Gly Ile Arg Phe Met His

1 5 10 15

<210> 328

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (4)..(4)

<223> /замена="Thr"

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (5)..(5)

<223> /замена="Arg"

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (6)..(6)

<223> /замена="Ala"

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (7)..(7)

<223> /замена="Thr"

<220>

<221> ПРОЧИЕ_ОСОБЕННОСТИ

<222> (1)..(7)

<223> /замечание="Остатки варианта, представленные в последовательности,

не имеют предпочтения по отношению к тем, что представлены в

аннотациях для положений варианта"

<400> 328

Arg Ala Ser Asn Leu Glu Ser

1 5

<210> 329

<211> 17

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (12)..(12)

<223> /замена="Ser" или "Ala"

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (13)..(13)

<223> /замена="Pro" или "Gln"

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (14)..(14)

<223> /замена="Ser"

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (16)..(16)

<223> /замена="Gln"

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (17)..(17)

<223> /замена="Gly"

<220>

<221> ПРОЧИЕ_ОСОБЕННОСТИ

<222> (1)..(17)

<223> /замечание="Остатки варианта, представленные в последовательности,

не имеют предпочтения по отношению к тем, что представлены в

аннотациях для положений варианта"

<400> 329

Trp Ile Tyr Pro Leu Arg Gly Ser Ile Asn Tyr Asn Glu Lys Phe Lys

1 5 10 15

Asp

<210> 330

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (3)..(3)

<223> /замена="Thr"

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (4)..(4)

<223> /замена="Phe"

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (6)..(6)

<223> /замена=" "

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (7)..(7)

<223> /замена="Asp" или "Ser"

<220>

<221> ПРОЧИЕ_ОСОБЕННОСТИ

<222> (1)..(8)

<223> /замечание="Остатки варианта, представленные в последовательности,

не имеют предпочтения по отношению к тем, что представлены в

аннотациях для положений варианта"

<400> 330

Gly Tyr Ser Ile Thr Ser Gly Tyr

1 5

<210> 331

<211> 6

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (1)..(1)

<223> /замена="Tyr" или " "

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (2)..(2)

<223> /замена="Pro"

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (3)..(3)

<223> /замена="Leu" или "Arg"

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (4)..(4)

<223> /замена="Asn" или "Arg"

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (5)..(5)

<223> /замена="Ser"

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (6)..(6)

<223> /замена="Asp" или "Ser"

<220>

<221> ПРОЧИЕ_ОСОБЕННОСТИ

<222> (1)..(6)

<223> /замечание="Остатки варианта, представленные в последовательности,

не имеют предпочтения по отношению к тем, что представлены в

аннотациях для положений варианта"

<400> 331

Asn Ser Tyr Asp Gly Tyr

1 5

<210> 332

<211> 12

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (1)..(1)

<223> /замена="Glu" или "His"

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (2)..(2)

<223> /замена=" "

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (3)..(3)

<223> /замена="Asp" или "Ala"

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (4)..(4)

<223> /замена="Gly" или "Tyr"

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (6)..(6)

<223> /замена="Asp" или " "

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (7)..(7)

<223> /замена="Tyr" или "Ser" или "Lys"

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (8)..(8)

<223> /замена="Asn" или "Arg"

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (9)..(9)

<223> /замена="Ala" или "Gly"

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (11)..(11)

<223> /замена="Asp"

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (12)..(12)

<223> /замена="Tyr"

<220>

<221> ПРОЧИЕ_ОСОБЕННОСТИ

<222> (1)..(12)

<223> /замечание="Остатки варианта, представленные в последовательности,

не имеют предпочтения по отношению к тем, что представлены в

аннотациях для положений варианта"

<400> 332

Tyr Gly Tyr Asp Tyr Glu Asp Trp Tyr Phe Gly Val

1 5 10

<210> 333

<211> 15

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (1)..(1)

<223> /замена="Lys"

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (4)..(4)

<223> /замена="Gln"

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (7)..(7)

<223> /замена="Ser"

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (8)..(8)

<223> /замена="Phe" или "Ile"

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (9)..(9)

<223> /замена="Ala" или "Ile" или "Asp"

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (11)..(11)

<223> /замена="Thr"

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (12)..(12)

<223> /замена="Asn" или "Arg"

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (13)..(13)

<223> /замена="Leu" или "Ser"

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (14)..(14)

<223> /замена="Ile"

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (15)..(15)

<223> /замена="His"

<220>

<221> ПРОЧИЕ_ОСОБЕННОСТИ

<222> (1)..(15)

<223> /замечание="Остатки варианта, представленные в последовательности,

не имеют предпочтения по отношению к тем, что представлены в

аннотациях для положений варианта"

<400> 333

Arg Ala Ser Glu Ser Val Asp Asn Tyr Gly Ile Ser Phe Met Asn

1 5 10 15

<210> 334

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (1)..(1)

<223> /замена="Arg" или "His"

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (5)..(5)

<223> /замена="Leu"

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (6)..(6)

<223> /замена="Glu"

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (7)..(7)

<223> /замена="Pro" или "Thr"

<220>

<221> ПРОЧИЕ_ОСОБЕННОСТИ

<222> (1)..(7)

<223> /замечание="Остатки варианта, представленные в последовательности,

не имеют предпочтения по отношению к тем, что представлены в

аннотациях для положений варианта"

<400> 334

Ala Ala Ser Asn Gln Gly Ser

1 5

<210> 335

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (1)..(1)

<223> /замена="Leu"

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (4)..(4)

<223> /замена="Arg" или "Asn"

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (5)..(5)

<223> /замена="Lys"

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (6)..(6)

<223> /замена="Tyr" или "Ile" или "Asp"

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (8)..(8)

<223> /замена="Trp" или "Tyr"

<220>

<221> ПРОЧИЕ_ОСОБЕННОСТИ

<222> (1)..(9)

<223> /замечание="Остатки варианта, представленные в последовательности,

не имеют предпочтения по отношению к тем, что представлены в

аннотациях для положений варианта"

<400> 335

Gln Gln Ser Lys Glu Val Pro Arg Thr

1 5

<210> 336

<211> 6

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (1)..(1)

<223> /замена=" "

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (2)..(2)

<223> /замена="Asp" или "Ser"

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (4)..(4)

<223> /замена="Phe" или "Thr" или "Asp"

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (5)..(5)

<223> /замена="Met" или "Ile" или "Val"

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (6)..(6)

<223> /замена="His" или "Phe"

<220>

<221> ПРОЧИЕ_ОСОБЕННОСТИ

<222> (1)..(6)

<223> /замечание="Остатки варианта, представленные в последовательности,

не имеют предпочтения по отношению к тем, что представлены в

аннотациях для положений варианта"

<400> 336

Ser Gly Tyr Tyr Trp Asn

1 5

<210> 337

<211> 17

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (1)..(1)

<223> /замена="Arg или "Trp"

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (3)..(3)

<223> /замена="Tyr" или " "

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (4)..(4)

<223> /замена="Pro"

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (5)..(5)

<223> /замена="Leu" или "Arg"

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (6)..(6)

<223> /замена="Asn" или "Arg"

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (7)..(7)

<223> /замена="Ser"

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (8)..(8)

<223> /замена="Asp" или "Ser"

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (9)..(9)

<223> /замена="Thr" или "Ile"

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (10)..(10)

<223> /замена="Phe" или "Lys"

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (13)..(13)

<223> /замена="Gln" или "Glu"

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (14)..(14)

<223>/замена="Lys"

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (15)..(15)

<223> /замена="Phe"

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (17)..(17)

<223> /замена="Gly" или "Asp"

<220>

<221> ПРОЧИЕ_ОСОБЕННОСТИ

<222> (1)..(17)

<223> /замечание="Остатки варианта, представленные в последовательности,

не имеют предпочтения по отношению к тем, что представлены в

аннотациях для положений варианта"

<400> 337

Tyr Ile Asn Ser Tyr Asp Gly Tyr Asn Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Lys

1 5 10 15

Asn

<210> 338

<211> 4

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 338

Asp Asp Ser Asp

1

<210> 339

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 339

Val Thr Phe Thr Met Gly Gln Val

1 5

<210> 340

<211> 4

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 340

Met Pro Ser His

1

<210> 341

<211> 4

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<400> 341

Pro Arg Ala Arg

1

<210> 342

<211> 16

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (12)..(12)

<223> /замена="Pro"

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (13)..(13)

<223> /замена="Ser"

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (14)..(14)

<223> /замена="Leu"

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (15)..(15)

<223> /замена="Lys"

<220>

<221> ПРОЧИЕ_ОСОБЕННОСТИ

<222> (1)..(16)

<223> /замечание="Остатки варианта, представленные в последовательности,

не имеют предпочтения по отношению к тем, что представлены в

аннотациях для положений варианта"

<400> 342

Val Ile Trp Ser Asp Gly Ser Thr Asp Tyr Asn Ala Ala Phe Ile Ser

1 5 10 15

<210> 343

<211> 5

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (4)..(4)

<223> /замена="Met"

<220>

<221> ПРОЧИЕ_ОСОБЕННОСТИ

<222> (1)..(5)

<223> /замечание="Остатки варианта, представленные в последовательности,

не имеют предпочтения по отношению к тем, что представлены в

аннотациях для положений варианта"

<400> 343

Asp Tyr Tyr Ile Asn

1 5

<210> 344

<211> 17

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (12)..(12)

<223> /замена="Ala"

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (13)..(13)

<223> /замена="Gln"

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (15)..(15)

<223> /замена="Leu"

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (16)..(16)

<223> /замена="Gln"

<220>

<221> ПРОЧИЕ_ОСОБЕННОСТИ

<222> (1)..(17)

<223> /замечание="Остатки варианта, представленные в последовательности,

не имеют предпочтения по отношению к тем, что представлены в

аннотациях для положений варианта"

<400> 344

Trp Ile Phe Pro Gly Ser Gly Ser Thr Tyr Tyr Asn Glu Lys Phe Lys

1 5 10 15

Gly

<210> 345

<211> 11

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (1)..(1)

<223> /замена="Gln"

<220>

<221> ПРОЧИЕ_ОСОБЕННОСТИ

<222> (1)..(11)

<223> /замечание="Остатки варианта, представленные в последовательности,

не имеют предпочтения по отношению к тем, что представлены в

аннотациях для положений варианта"

<400> 345

Lys Ala Ser Gln Asp Ile Asn Lys Tyr Ile Ala

1 5 10

<210> 346

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /замечание="Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид"

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (6)..(6)

<223> /замена="Glu"

<220>

<221> ВАРИАНТ

<222> (7)..(7)

<223> /замена="Thr"

<220>

<221> ПРОЧИЕ_ОСОБЕННОСТИ

<222> (1)..(7)

<223> /замечание="Остатки варианта, представленные в последовательности,

не имеют предпочтения по отношению к тем, что представлены в

аннотациях для положений варианта"

<400> 346

Tyr Thr Ser Thr Leu Gln Ser

1 5

<---

Изобретение относится к области биотехнологии, в частности к молекуле антитела против лиганда А, индуцирующего пролиферацию (APRIL), способу ее получения, а также к содержащей ее композиции и набору. Также раскрыты молекула нуклеиновой кислоты, кодирующая вариабельную область тяжелой цепи (VH) и вариабельную область легкой цепи вышеуказанной молекулы антитела, а также содержащая ее клетка и вектор. Изобретение эффективно для лечения диабетической нефропатии у индивида. 15 н. и 27 з.п. ф-лы, 41 ил., 8 табл., 13 пр.

1. Молекула антитела против лиганда А, индуцирующего пролиферацию (APRIL), содержащая вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую три определяющие комплементарность области тяжелой цепи (HCDR1, HCDR2 и HCDR3), и вариабельную область легкой цепи (VH), содержащую три определяющие комплементарность области легкой цепи (LCDR1, LCDR2 и LCDR3).

где VH содержит HCDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:11; HCDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:12, и HCDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:13; и VL содержит LCDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:280; LCDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:285, и LCDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:16, согласно нумерации Chothia; или

где VH содержит HCDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:17; HCDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:282, и HCDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:13; и VL содержит LCDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:280; LCDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:285, и LCDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:16, согласно нумерации Kabat.

2. Молекула антитела по п.1, которая содержит один или оба из следующих:

(i) VH, содержащая аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или которая гомологична по меньшей мере на 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% любой аминокислотной последовательности SEQ ID NO:283, 288, 289, 291, 292, 294, 296 или 317; или

(ii) VL, содержащая аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или которая гомологична по меньшей мере на 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% аминокислотной последовательности SEQ ID NO:286.

3. Молекула антитела по п.1 или 2, которая содержит:

(i) VH, содержащая аминокислотную последовательность SEQ ID NO:296, или аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или которая гомологична по меньшей мере на 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% аминокислотной последовательности SEQ ID NO:296; или

(ii) VL, содержащая аминокислотную последовательность SEQ ID NO:286, или аминокислотную последовательность, которая отличается не более чем на 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислотных остатков или которая гомологична по меньшей мере на 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% аминокислотной последовательности SEQ ID NO:286.

4. Молекула антитела по любому из пп.1-3, которая представляет собой синтетическую или выделенную молекулу антитела и/или представляет собой молекулу гуманизированного антитела, необязательно, где молекула антитела содержит одну или несколько каркасных областей, полученных из последовательности каркасной зародышевой линии человека.

5. Молекула антитела по любому из пп.1-4, которая содержит константную область тяжелой цепи IgG1, IgG2, IgG3 или IgG4, необязательно, где молекула антитела содержит константную область тяжелой цепи IgG2 и/или содержит константную область каппа или лямбда легкой цепи, например, константную область легкой цепи каппа.

6. Молекула антитела по любому из пп.1-5, где Fc-область молекулы антитела содержит:

(i) одну или несколько мутаций, расположенных на границе раздела между доменами CH2 и CH3, необязательно, где одна или несколько мутаций повышает аффинность связывания с неонатальным рецептором FcRn, время полужизни молекулы антитела или и то, и другое;

(ii) 1, 2, 3, 4, 6 или все мутации, выбранные из T250Q, M252Y, S254T, T256E, M428L, H433K или N434F IgG1;

(iii) одна или несколько мутаций в положениях 233-236 или 322 IgG1 или IgG2 человека, или одна или несколько замен в положениях 327, 330 или 331 IgG4 человека, необязательно, где одна или несколько мутаций снижают комплемент-зависимую цитотоксичность (CDC); и/или

(iv) 1, 2, 3, 4, 6, 7 или все мутации, выбранные из E233P, L234V, L235A, G236, K322A, A327G, A330S или P331S.

7. Молекула антитела по любому из пп.1-6, которая содержит две вариабельные области тяжелой цепи и две вариабельные области легкой цепи, или представляет собой Fab, F(ab')2, Fv, Fd или одноцепочечный фрагмент Fv (scFv).

8. Молекула антитела против лиганда А, индуцирующего пролиферацию (APRIL), содержащая вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:296, и вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую аминокислоту последовательность SEQ ID NO:286.

9. Молекула антитела против лиганда А, индуцирующего пролиферацию (APRIL), содержащая вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:296, и вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую аминокислоту последовательность SEQ ID NO:286;

где молекула антитела содержит константную область тяжелой цепи IgG2 и константную область каппа легкой цепи.

10. Фармацевтическая композиция для лечения IgA-нефропатии у субъекта, содержащая эффективное количество молекулы антитела по любому из пп.1-9 и фармацевтически приемлемый носитель.

11. Молекула нуклеиновой кислоты, кодирующая вариабельную область тяжелой цепи (VH) и вариабельную область легкой цепи (VL) молекулы антитела по любому из пп.1-9.

12. Молекула нуклеиновой кислоты, кодирующая вариабельную область тяжелой цепи (VH) молекулы антитела по любому из пп.1-9.

13. Молекула нуклеиновой кислоты, кодирующая вариабельную область легкой цепи (VL) молекулы антитела по любому из пп.1-9.

14. Вектор экспрессии, содержащий молекулу нуклеиновой кислоты по любому из пп.11-13.

15. Выделенная клетка для получения молекулы анти-APRIL антитела, где клетка содержит:

(i) молекулу нуклеиновой кислоты по п.11 или

(ii) вектор экспрессии, содержащий молекулу нуклеиновой кислоты по п.11.

16. Набор для лечения IgA-нефропатии, содержащий молекулу антитела по любому из пп.1-9 и инструкцию по применению молекулы антитела.

17. Способ получения молекулы анти-APRIL антитела, включающий культивирование клетки по п. 15 в условиях, которые обеспечивают получение молекулы антитела.

18. Способ по п.17, дополнительно включающий выделение или очистку молекулы антитела.

19. Способ лечения IgA-нефропатии у индивида, включающий введение индивиду молекулы антитела по любому из пп.1-9 или композиции по п.10.

20. Способ по п.19, где молекулу антитела вводят индивиду внутривенно или подкожно.

21. Способ по п.19 или 20, где молекулу антитела вводят индивиду в дозе от 0,1 мг/кг до 50 мг/кг, до 0,2 мг/кг до 25 мг/кг, от 0,5 мг/кг до 10 мг/кг, от 0,5 мг/кг до 5 мг/кг, от 0,5 мг/кг до 3 мг/кг, от 0,5 мг/кг до 2,5 мг/кг, от 0,5 мг/кг до 2 мг/кг, от 0,5 мг/кг до 1,5 мг/кг, от 0,5 мг/кг до 1 мг/кг, от 1 мг/кг до 1,5 мг/кг, от 1 мг/кг до 2 мг/кг, от 1 мг/кг до 2,5 мг/кг, от 1 мг/кг до 3 мг/кг, от 1 мг/кг до 10 мг/кг или от 1 мг/кг до 5 мг/кг или 1 мг/кг, 2 мг/кг, 4 мг/кг или 8 мг/кг, или

в фиксированной дозе от 10 мг до 1000 мг, от 10 мг до 500 мг, от 10 мг до 250 мг, от 10 мг до 150 мг, от 10 мг до 100 мг, от 10 мг до 50 мг, от 250 мг до 500 мг, от 150 мг до 500 мг, от 100 мг до 500 мг, от 50 мг до 500 мг, от 25 мг до 250 мг, от 50 мг до 150 мг, от 50 мг до 100 мг, от 100 мг до 150 мг, от 100 мг до 200 мг или от 150 мг до 250 мг,

необязательно, где молекулу антитела вводят один раз в неделю, два раза в неделю, один раз в две недели или один раз в четыре недели, или один раз в месяц, один раз в два месяца или один раз в три месяца.

22. Способ по любому из пп.19-21, где введение молекулы антитела снижает уровень IgA в периферической ткани, необязательно, где периферическая ткань представляет собой сыворотку, ткань слизистой, костный мозг или любую их комбинацию.

23. Способ по любому из пп.19-22, где введение молекулы антитела снижает уровень варианта IgA, необязательно, где вариант IgA представляет собой IgA1, IgA1 в полимерной форме (pIgA1), IgA1 с O-связанным гликозилированием или любую их комбинацию.

24. Способ по любому из пп.19-23, дополнительно включающий определение уровня IgA в образце периферической ткани у индивида, необязательно, где периферическая ткань представляет собой сыворотку, ткань слизистой или костный мозг.

25. Способ по любому из пп.19-24, дополнительно включающий проведение второй терапии IgA-нефропатии у пациента.

26. Способ лечения диабетической нефропатии у индивида, включающий введение индивиду молекулы антитела по любому из пп.1-9 или композиции по п.10.

27. Молекула антитела по любому из пп.1-9 или композиция по п.10 для применения в способе лечения IgA-нефропатии у индивида.

28. Молекула антитела для применения по п.27, где молекулу антитела вводят индивиду внутривенно или подкожно.

29. Молекула антитела для применения по п.27 или 28, где молекулу антитела вводят индивиду в дозе от 0,1 мг/кг до 50 мг/кг, от 0,2 мг/кг до 25 мг/кг, от 0,5 мг/кг до 10 мг/кг, от 0,5 мг/кг до 5 мг/кг, от 0,5 мг/кг до 3 мг/кг, от 0,5 мг/кг до 2,5 мг/кг, от 0,5 мг/кг до 2 мг/кг, от 0,5 мг/кг до 1,5 мг/кг, от 0,5 мг/кг до 1 мг/кг, от 1 мг/кг до 1,5 мг/кг, от 1 мг/кг до 2 мг/кг, от 1 мг/кг до 2,5 мг/кг, от 1 мг/кг до 3 мг/кг, от 1 мг/кг до 10 мг/кг или от 1 мг/кг до 5 мг/кг или 1 мг/кг, 2 мг/кг, 4 мг/кг или 8 мг/кг, или

в фиксированной дозе от 10 мг до 1000 мг, от 10 мг до 500 мг, от 10 мг до 250 мг, от 10 мг до 150 мг, от 10 мг до 100 мг, от 10 мг до 50 мг, от 250 мг до 500 мг, от 150 мг до 500 мг, от 100 мг до 500 мг, от 50 мг до 500 мг, от 25 мг до 250 мг, от 50 мг до 150 мг, от 50 мг до 100 мг, от 100 мг до 150 мг, от 100 мг до 200 мг или от 150 мг до 250 мг,

необязательно, где молекулу антитела вводят один раз в неделю, два раза в неделю, один раз в две недели или один раз в четыре недели, или один раз в месяц, один раз в два месяца или один раз в три месяца.

30. Молекула антитела для применения по любому из пп.27-29, где молекула антитела снижает уровень IgA в периферической ткани, необязательно, где периферическая ткань представляет собой сыворотку, ткань слизистой, костный мозг или любую их комбинацию.

31. Молекула антитела для применения по любому из пп.27-30, где молекула антитела снижает уровень варианта IgA, необязательно, где вариант IgA представляет собой IgA1, IgA1 в полимерной форме (pIgA1), IgA1 с O-связанным гликозилированием или любую их комбинацию.

32. Молекула антитела для применения по любому из пп.27-31, где применение включает определение уровня IgA в образце периферической ткани у индивида, необязательно, где периферическая ткань представляет собой сыворотку, ткань слизистой или костный мозг.

33. Молекула антитела для применения по любому из пп.27-32, где применение включает проведение второй терапии IgA-нефропатии у пациента.

34. Молекула антитела по любому из пп.1-9 или композиция по п.10 для применения в способе лечения диабетической нефропатии у индивида.

35. Применение молекулы антитела по любому из пп.1-9 или композиции по п.10 для получения лекарственного средства для лечения IgA-нефропатии у индивида.

36. Применение по п.35, где молекулу антитела вводят индивиду внутривенно или подкожно.

37. Применение по п.35 или 36, где молекулу антитела вводят пациенту в дозе от 0,1 мг/кг до 50 мг/кг, от 0,2 мг/кг до 25 мг/кг, от 0,5 мг/кг до 10 мг/кг, от 0,5 мг/кг до 5 мг/кг, от 0,5 мг/кг до 3 мг/кг, от 0,5 мг/кг до 2,5 мг/кг, от 0,5 мг/кг до 2 мг/кг, от 0,5 мг/кг до 1,5 мг/кг, от 0,5 мг/кг до 1 мг/кг, от 1 мг/кг до 1,5 мг/кг, от 1 мг/кг до 2 мг/кг, от 1 мг/кг до 2,5 мг/кг, от 1 мг/кг до 3 мг/кг, от 1 мг/кг до 10 мг/кг или от 1 мг/кг до 5 мг/кг или 1 мг/кг, 2 мг/кг, 4 мг/кг или 8 мг/кг, или

в фиксированной дозе от 10 мг до 1000 мг, от 10 мг до 500 мг, от 10 мг до 250 мг, от 10 мг до 150 мг, от 10 мг до 100 мг, от 10 мг до 50 мг, от 250 мг до 500 мг, от 150 мг до 500 мг, от 100 мг до 500 мг, от 50 мг до 500 мг, от 25 мг до 250 мг, от 50 мг до 150 мг, от 50 мг до 100 мг, от 100 мг до 150 мг, от 100 мг до 200 мг или от 150 мг до 250 мг,

необязательно, где молекулу антитела вводят один раз в неделю, два раза в неделю, один раз в две недели или один раз в четыре недели, или один раз в месяц, один раз в два месяца или один раз в три месяца.

38. Применение по любому из пп.35-37, где молекула антитела снижает уровень IgA в периферической ткани, необязательно, где периферическая ткань представляет собой сыворотку, ткань слизистой, костный мозг или любую их комбинацию.

39. Применение по любому из пп.35-38, где молекула антитела снижает уровень варианта IgA, необязательно, где вариант IgA представляет собой IgA1, IgA1 в полимерной форме (pIgA1), IgA1 с O-связанным гликозилированием или любую их комбинацию.

40. Применение по любому из пп.35-39, где применение включает определение уровня IgA в образце периферической ткани у индивида, необязательно, где периферическая ткань представляет собой сыворотку, ткань слизистой или костный мозг.

41. Применение по любому из пп.35-40, где применение включает проведение второй терапии IgA-нефропатии у пациента.

42. Применение молекулы антитела по любому из пп.1-9 или композиции по п.10 для получения лекарственного средства для лечения диабетической нефропатии у индивида.

название	год	авторы	номер документа
Моноклональное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, которое специфически связывается с BCMA, и его применение	2022	Белясникова Алина Валерьевна Кытманова Ольга Леонидовна Иванова Анастасия Андреевна Филина Валентина Юрьевна Савинова Алина Сергеевна Морозов Дмитрий Валентинович	RU2820350C2
Антитела к TSLP человека и их применение	2021	Чжан Сюэпин Лю Чжиган Чжоу Сяовэй Ху Цзюньцзе Хао Сяобо Лю Юйлань	RU2825460C1
АНТИТЕЛО ПРОТИВ СТОЛБНЯЧНОГО ТОКСИНА И ЕГО ПРИМЕНЕНИЕ	2020	Лю Чжиган Чжоу Сяовэй Лю Юйлань Хао Сяобо Ху Цзюньцзе	RU2815280C1
АНТИТЕЛО К АЛЬФА-РЕЦЕПТОРУ ИНТЕРЛЕЙКИНА-4 ЧЕЛОВЕКА, СПОСОБ ЕГО ПОЛУЧЕНИЯ И ЕГО ПРИМЕНЕНИЕ	2021	Чжан, Чэнхай Го, Цзиньлинь Юань, Юйцзин	RU2807060C1
ХИМЕРНЫЕ АНТИГЕННЫЕ РЕЦЕПТОРЫ, НАЦЕЛЕННЫЕ НА FLT3	2018	Сасу, Барбра Джонсон Деттлинг, Даниэль Элизабет Соммер, Сесар Адольфо Йеунг, Йик Энди Хамзе, Мустафа Марк	RU2820859C2
АНТИТЕЛО ПРОТИВ IL-5, ЕГО АНТИГЕНСВЯЗЫВАЮЩИЙ ФРАГМЕНТ И ЕГО МЕДИЦИНСКОЕ ПРИМЕНЕНИЕ	2018	Ин, Хуа Ши, Цзиньпин Ван, Ифан Ху, Циюе Гэ, Ху Тао, Вэйкан	RU2772716C2
АНТИТЕЛО К PD-L1, ЕГО АНТИГЕНСВЯЗЫВАЮЩИЙ ФРАГМЕНТ И ИХ ФАРМАЦЕВТИЧЕСКОЕ ПРИМЕНЕНИЕ	2019	Гу, Сяолин Цзян, Цзяхуа Чжан, Лэй Ху, Циюэ Гу, Цзиньмин Тао, Вэйкан	RU2778085C2
АНТИТЕЛА, НАЦЕЛЕННЫЕ НА EPN1	2019	Робинсон, Мэттью, К.	RU2816856C2
НОВЫЕ АНТИТЕЛА ПРОТИВ ФАКТОРА XI И ИХ ПРИМЕНЕНИЯ	2017	Вильмен, Андреас Бухмюллер, Анья Таккер, Эрик	RU2758160C2
БИСПЕЦИФИЧЕСКОЕ АНТИТЕЛО ПРОТИВ CD3E/BCMA И ЕГО ПРИМЕНЕНИЕ	2019	Лю Чжиган Вань Шунань Лю Юйлань Хао Сяобо Ху Цзюньцзе Гуо Цзинцзин	RU2800164C2

WO2010100056 A2, 10.09.2010
	0	SU160397A1
WO2007039489 A1, 12.04.2007
BERTRAND HUARD et al., Selective APRIL Blockade Delays Systemic Lupus Erythematosus in Mouse, PLoS ONE, 2012, Vol.7, N.2, e31837, doi:10.1371/journal.pone.0031837
RU2013151455 A, 27.05.2015.

МОЛЕКУЛЫ АНТИТЕЛ ПРОТИВ APRIL И ИХ ПРИМЕНЕНИЯ Российский патент 2023 года по МПК C07K16/28 A61K39/395 A61P1/00 A61P1/16 A61P13/12 A61P17/00 A61P35/00 A61P29/00 A61P37/06 A61P43/00 A61P9/00

Описание патента на изобретение RU2793755C2

Похожие патенты RU2793755C2

Иллюстрации к изобретению RU 2 793 755 C2

Реферат патента 2023 года МОЛЕКУЛЫ АНТИТЕЛ ПРОТИВ APRIL И ИХ ПРИМЕНЕНИЯ

Формула изобретения RU 2 793 755 C2

Документы, цитированные в отчете о поиске Патент 2023 года RU2793755C2

RU 2 793 755 C2