Способ диагностики оксидативного стресса при невынашивании беременности Российский патент 2023 года по МПК G01N33/573 G01N33/68 G01N33/92 

Изобретение относится к области клинической медицины и позволяет путем биохимических исследований диагностировать оксидативный стресс, как основной патогенетический фактор невынашивания беременности.

Актуальность предлагаемого способа определяется высокой частотой идиопатических (невыясненных) форм неудачных гестаций, которые трансформируют потери беременности в привычное невынашивание (Малышкина А.И., Григушкина Е.В., Таланова И.Е. Факторы риска угрозы прерывания беременности у женщин с привычным невынашиванием: анализ анкетного опроса 353 беременных женщин. Гинекология. 2022; 24 (2): 126-131. dol: 10.26442/20795696.2022.2.201342). Таким образом можно предположить, что внедрение в практическую медицину способа, позволяющего определять при идиопатической форме невынашивания беременности основной патогенетический механизм, может оказать неоценимую помощь в работе практикующего врача акушера-гинеколога.

В последние годы изучение патогенетических механизмов и маркеров из независимых патологических путей, которые бы адекватно отражали нарушение метаболических и биохимических процессов, происходящих в тканях хориона и приводящих к невынашиванию беременности, становится приоритетным направлением в работе многих исследователей (Бушмелева Н.Н., Вахрушева Ю.Н. Этиопатогенетический аспект ранних репродуктивных потерь при совершенствовании организации медицинской помощи женщинам (аналитический обзор) // Социальные аспекты здоровья населения Электронное издание. - 2020. - №66 (5). - Режим доступа: http://vestnik.mednet.ru/content/view/1199/30/lang,ru/. - Дата обращения: 05.12.2021).

Оксидативный стресс (ОС) - патологический процесс, который развивается в результате нарушения равновесия между прооксидантами и антиоксидантами лежит в основе многих заболеваний в том числе акушерской и гинекологической патологии (Perrone S., Laschi Е., Buonocore G. Biomarkers of oxidative stress in the fetus and in the newborn // Free Radic Biol Med. 2019. Vol. 142. P. 23-31. doi: 10.1016/j.freeradbiomed.2019.03.034; Aouache R., Biquard L., Vaiman D., Miralles F. Oxidative stress in preeclampsia and placental diseases // International Journal of Molecular Sciences. 2018. Vol. 19, no. 5. P. 1496-1525. dol: 10.3390/ijms19051496._Perrone S., Laschi E., Buonocore G. Biomarkers of oxidative stress in the fetus and in the newborn // Free Radic Biol Med. 2019. Vol. 142. P. 23-31. doi: 10.1016/j.freeradbiomed.2019.03.034).

Под влиянием как внешних, так и внутренних неблагоприятных факторов происходит накопление избыточного количества активных форм кислорода (АФК), которые оказывают повреждающие воздействие на клетки путем процессов перекисного окисления липидов (ПОЛ) и белков. Ускорение процессов ПОЛ может являться причиной дестабилизации мембран и развития патологии (Владимиров, Ю.А. Свободные радикалы в биологических системах / Соросовский образовательный журнал. - 2000. - Т. 6, No 12. - С. 13-19). В результате избыточного ПОЛ образуются цитотоксичные вторичные соединения такие, как малоновый диальдегид (МДА), который используются в качестве маркера для оценки повреждающего воздействия ОС (Узбеков, М.Г. Перекисное окисление липидов и антиоксидантные системы при психических заболеваниях. Социальная и клиническая психиатрия. - 2014. - Т. 24., No 4. - С. 97-103). Являясь органическим соединением, МДА быстро и легко реагирует с тиобарбитуровой кислотой (ТБК), где продуктом реакции является так называемый триметиновый комплекс, имеющий характерную розовую окраску (λ_макс.=532 нм). Благодаря таким реакционным способностям МДА часто используется, как надежный маркер ОС в организме.

В зависимости от используемых восстановителей, инициация ПОЛ может происходит двумя путями - ферментативным (НАДФН - зависимым) с высоким сродством к эндогенному железу и неферментативным (в присутствии аскорбата натрия). Ферментативный путь осуществляется ферментами: липоксиоксигеназы, НАДФН-зависимые микросомальные оксигеназы, циклооксигеназы. Образование перекисей по ферментативному пути осуществляется преимущественно в эндоплазматическом ретикулуме. В случае неферментативного (аскорбатзависимого) пути аскорбиновая кислота регенерирует ионы за счет обратного восстановления Fe3⁺ до Fe⁺, активируемым металлами с переменной валентностью. По данному пути образование перекисей липидов происходит во всех мембранных структурах. Особенность неферментативного цепного окисления в биологических мембранах заключается в том, что оно практически не происходит в отсутствие металлов с переменной валентностью, в частности ионов двухвалентного железа. Резко выраженное прооксидантное действие Fe²⁺ на ненасыщенные жирные кислоты в биологических мембранах обусловлено разложением продуктов реакции гидроперекисей, в результате которого в системе появляются новые свободные радикалы, инициирующие новые цепи окисления (Владимиров, Ю.А. Арчаков А.И. Перекисное окисление липидов в биомембранах / М.: Наука, 2003. - 272 с. Поэтому важным является не только выявление патологической активности ОС, но и путей активации процессов ПОЛ с целью персонализированного подбора антиоксидантной терапии. В благоприятных условиях и в отсутствии эндо и экзогенных факторов процессы ПОЛ протекают в клетках сбалансированно и поддерживаются антиоксидантными системами. К ферментам, защищающим клетки от воздействия АФК, относят супероксиддисмутазу (СОД), изоферменты которой находятся в цитозоле и в митохондриях и являются первой линией защиты. СОД является также индуцируемым ферментом, синтез СОД увеличивается при активации ПОЛ.

Огромный интерес в последние годы представляют цитокины, регулирующие клеточные связи. Фактор роста и дифференцировки-15 (GDF-15) - цитокин, источником которого в физиологических условиях являются клетки тро-фобласта и децидуальные стромальные клетки (Segerer SE, Rieger L, Kapp М, Dombrowski Y, Müller N, Dietl J, Kämmerer U. MIC-1 (a multifunctional modulator of dendritic cell phenotype and function) is produced by decidual stromal cells and trophoblasts. Hum Reprod. 2012 Jan;27(1):200-9. doi: 10.1093/humrep/der358) экпрессируется в ответ на клеточный стресс, митохондриальную дисфункцию (Cardoso, A. L, A. Fernandes, J.A. Aguilar-Pimentel, М.Н. de Angelis., J.R. Guedes, M.A. Brito, S. Ortolano, G. Pani, S. Athanasopoulou, E.S. Gonos, M. Schosserer, J. Grillari, P. Peterson, B.G. Tuna, S. Dogan, A. Meyer, R. van Os A.U. Trendelenburg Towards frailty biomarkers: Candidates from genes and pathways regulated in aging and age-related diseases // Ageing Research Reviews. 2018. Vol. 47. - P. 214-277. doi: 10.1016 j.arr.2018.07.004), на клеточное повреждение и воспаление (Liu Н., Wang Н., Tao L. et al. Stress-induced growth-differentiation factor 15 plays an intriguing role in cardiovascular diseases. Chin Med J. 2013; 126 (7): 1350-1354. Этот цитокин обладает сильной толерогенной функцией и может участвовать в защите полуаллогенного плода от иммуноопосредованного отторжения иммунной системой матери (Hromas, R.М. Hufford, J. Sutton, D. Xu, Y. Li, L Lu PLAB, a novel placental bone morphogenetic protein // Biochimica et Biophysica Acta. - 1997. - Vol. 1354, №1. - P.40-44. doi: 10.1016/s0167-4781 (97)00122-х) и способствовать выживанию плода за счет подавления продукции провоспалительных цитокинов материнского про и схождения (Moore, A.G., D.A. Brown, W.D. Fairlie, A.R. Bauskin, P.K. Brown, MX. Munier, P.K. Russell, L.A. Salamonses, E.M. Wallace, S.N. Breit. The transforming growth factors superfamily cytokine macrophage inhibitory cytokine-1 is present in high concentrations in the serum of pregnant // The Journal Clinical Endocrinology and Metabolism. - 2000. - Vol. 85, №12. - P. 4781 4788. doi:org/10.1210/jcem.85.12.7007).

Доказано, что окислительные биомаркеры и цитокины в настоящее время являются важным инструментом измерения ОС (Perrone S., Laschi Е., Buonocore G. Biomarkers of oxidative stress in the fetus and in the newborn // Free Radic Biol Med. 2019. Vol. 142. P. 23-31. doi: 10.1016/j.freeradbiomed. 2019.03.034).

В настоящее время существует способ определения причин невынашивания беременности, основанный на гистологическом исследовании удаленных тканей (М. Берстон «Гистохимия ферментов», пер. с англ. - М.: 1965; Р. Лилли «Патогистологическая техника и практическая гистохимия», пер. с англ. - М.: 1969; Э. Пирс «Гистохимия», пер. с англ. - М.: 1962; А.П. Авцына «Принципы и методы гистоцито-химического анализа в патологии». - Л., 1971; О.И. Топчиева, В.А. Прянишникова, З.П. Жемкова. «Биопсия эндометрия» -М.: Медицина, 1978). Недостатками гистологического способа являются: сложность технического исполнения; длительность исследования до выдачи окончательного заключения (10-14 дней), не позволяет определять ведущие патогенетические изменения, субъективность исследования.

Учитывая, что способов диагностики патогенетических нарушений невынашивания беременности на основании изучения биомаркеров в тканях хориона не представлено, за прототип был взят способ прогнозирования неразвивающейся беременности, основанный на определении биомаркеров в биологических жидкостях / Тишкова О.Г., Дикарева Л.В., Теплый Д.Л., Теплый Д.Д. (патент RU 2531084, 20.10.2014 г.) сущность которого заключается в том, что в супернатанте аспирационной жидкости из полости матки или менструальной крови определяют одномоментно содержание карбонильных групп белков, малонового диальдегида и при значениях от 9,43 до 16,91 нмоль/мг карбонильных групп и от 0,71 мкмоль/л до 7,28 мкмоль/л малонового альдегида судят об отсутствии их повреждающего воздействия на гравидарный эндометрий и плодное яйцо, а при значениях карбонильных групп белков от 22,32 мкмоль/мг и выше и при значениях малонового диальдегида более 7,28 нмоль/л судят об их повреждающем воздействии на плодное яйцо и высоком риске развития неразвивающейся беременности.

Недостатками прототипа является низкая чувствительность метода в отношении идиопатических форм невынашивания беременности, ограниченный набор маркеров, который не позволяет в полной мере говорить о ведущем патогенетическом механизме невынашивания беременности, используемые в качестве исследуемого материала биологические жидкости не отражают клеточный дисбаланс и буферную емкость клеток, отсутствие в исследовании показателей антиоксидантной системы не позволяет говорить об ОС, как патогенетическом механизме.

Цель предлагаемого изобретения заключается в повышении достоверности и информативности диагностики патогенетических механизмов невынашивания беременности.

Технический результат достигается тем, что в тканях хориона, полученных в результате спонтанного абортуса или путем инструментального выскабливании полости матки, определяют уровень малонового диальдегида при спонтанной, ферментативной и неферментативной реакции перекисного окисления липидов, показатель активности супероксидисмутазы и уровень фактора роста и дефференцировки-15, при значениях уровня малонового диальдегида при спонтанной реакции перекисного окисления липидов не менее 7,75 нмоль/ч при ферментативной реакции перекисного окисления липидов не менее 6,46 нмоль/ч при неферментативной реакции перекисного окисления липидов не менее 16,61 нмоль/ч, показателя активности супероксиддисмутазы не менее 245,8 нг/мл, уровня фактора роста и дифференцировки-15 не более 3259 пг/мл диагностируют оксидативный стресс при невынашивании беременности.

Способ осуществляется следующим образом.

Ткань хориона получают в результате выскабливания полости матки или самопроизвольного абортуса, отмывают в физиологическом растворе, гомогенизируют и центрифугируют 15 мин при 3000-5000 об/мин. В полученном супернатанте одномоментно определяют скорость спонтанного, неферментативного, неферментативного ПОЛ по способности ТБК реагировать с МДА в биологических субстратах по методике И.Д. Стальной, Т.Г. Гаришвили (1977), в модификации Е.А. Строева и Е.Г. Макарова (1986) в нмоль 1 ч образованного МДА.

Определение активности супероксиддисмутазы (СОД) - металлофермента, который активно защищает мембраны клеток от повреждающего воздействия свободных радикалов, выполняют по методу С. Чевари и соавторов (1985), который основан на способности СОД конкурировать с нитросиним тетразолием за супероксидные анионы. Оптическую плотность измеряли на спектрофотометре «Beckman Coulter DU-800» при длине волны 540 нм. Активность СОД рассчитывали (в процентах блокирования) по формуле:

где Ео - экстинкция реакционной смеси в отсутствии СОД (нулевой пробы); Епр - экстинкция исследуемой пробы в состоянии равновесия. СОД в гомогенате тканях хориона определяли количественным методом с помощью прямого иммуноферментного анализа с использованием микропланшетного фотометра Stat Fax 4200 (CITJA). GDF-15 определяют количественным методом с помощью прямого иммуноферментного анализа с использованием микропланшетного фотометра Stat Fax 4200 (CITJA), аналитического набора «Human GDF-15 /MIC-1 ELISA» (BioVender, Чехия), с диапазоном измерения: 22 - 4480 пг\мл и чувствительностью 22 пг/мл.

Предлагаемый способ был успешно апробирован в гинекологических отделениях ГБУЗ АО «Клинический родильный дом» г. Астрахань, АО ГБУЗ АМОКБ г. Астрахань, женской консультации «Клинического родильного дома» г. Астрахани в 2019-2021 гг.

Обследовано 80 женщин, из которых 40 пациенток с диагнозом неразвивающаяся беременность и самопроизвольный выкидыш на сроке 5-9 недель гестации составили основную группу исследования. В группу контроля вошли 40 женщины, решивших прервать беременность по желанию в аналогичные сроки. Всем женщинам наряду с традиционным клинико-лабораторным обследованием проводилось УЗИ органов малого таза трансвагинальным доступом, молочных желез, цитологическое исследование эндо - экзоцервикса, а также исследование тканей хориона заявленным способом.

Результаты апробации приводятся ниже.

Пример №1

Беременная Р., 1982 года рождения, поступила в гинекологическое отделение 5\10\21 г. с диагнозом: Беременность в сроке 8 недель гестации (на артифициальный аборт).

Жалоб при поступлении не предъявляет.

Менструальная и репродуктивная функции: менструации с 13 лет по 4 дня, регулярные, умеренные, цикл 33 дней. Последние менструации 2\12\21 г.

В анамнезе: роды - 1, аборты - 2.

Сопутствующая патология: хронический сальпингоофорит в стадии ремиссии.

Соматический анамнез не отягощен.

Объективно:

P.V. Наружные половые органы развиты правильно, слизистая влагалища не изменена. Тело матки увеличено до 8 недель беременности, мягкое, безболезненное. Придатки с обеих сторон без особенностей. Параметрии свободны. Выделений из п\путей нет.

УЗИ от 21.12.21 г. - матка размерами 54×46×48 мм, увеличена до 5 недель беременности, контуры четкие, ровные, структура неоднородная. В полости матки плодное яйцо КТР - 0,45 мм, СВД - 15 мм, сердцебиение плода определяется. Правый яичник 30×21 мм, левый яичник - 18×25 мм.

Проведено полное клинико-лабораторное обследование согласно приказа МЗ РФ от 20.10.2020 №1130н "Об утверждении Порядка оказания медицинской помощи по профилю "акушерство и гинекология". Отклонений от нормы в результатах исследования не выявлено.

Забор материала: ткань хориона получали путем вакуум-аспирации полости матки. Работа с полученным материалом велась согласно ранее представленным методикам. В результате были получены следующие показатели, исследуемых маркеров:

уровень МДА при ферментативной реакции ПОЛ равен 1,4 нмоль/ч; МДА при спонтанной реакции ПОЛ равен 2,1 нмоль/ч; МДА при неферментативной реакции ПОЛ равен 5,18 нмоль/ч,

показатель уровня активности СОД в тканях хориона 55,1 нг/мл,

показатель уровня CDF-15 в тканях хориона 8345,2 пг/мл.

Результат гистологического исследования постабортного материала №123098: децидуальная ткань, ворсины хориона, что характерно для прогрессирующей маточной беременности.

Пример №2

Беременная О., 1988 года рождения, поступила в гинекологическое отделение 13/03/22 г. с диагнозом: неразвивающаяся беременность в сроке 6 недель гестации по типу гибели эмбриона, с целью прерывания беременности по медицинским показаниям.

Жалобы при поступлении на задержку менструации, сукровичные выделения из половых путей в течение суток.

Менструальная и репродуктивная функции не нарушены: менструации с 15 лет по 5 дней, регулярные, умеренные, цикл 25 дней. Дата последних менструаций 3/02/22 г.

В анамнезе: 1 аборт. В 2008 году - лапаротомия, цистэктомия.

Соматический анамнез: железодефицитная анемия легкой степени.

Объективно:

P.V. Наружные половые органы развиты правильно, слизистая влагалища не изменена. Тело матки увеличено до 5 недель, мягкое, безболезненное. Придатки с обеих сторон без особенностей. Параметрии свободны. Выделения - сукровичные.

УЗИ органов малого таза от 10.03.22 г. - матка размерами 62×52×52 мм, увеличена до 5 недель беременности, контуры четкие, ровные, структура неоднородная. М-эхо 12 мм. В полости матки деформированное плодное яйцо КТР - 4,7 мм, СВД - 3 мм сердцебиение плода не определяется. Правый яичник 37×31 мм, левый яичник - 24×20 мм.

Проведено полное клинико-лабораторное обследование согласно приказа МЗ РФ от 20.10.2020 №1130н "Об утверждении Порядка оказания медицинской помощи по профилю "акушерство и гинекология". Отклонений от нормы в результатах исследования не выявлено. Выполнена вакуум-аспирация полости матки.

Результат гистологического исследования №0197709: децидуальная ткань, ворсины хориона с лимфоцитарной инфильтрацией, погибшее плодное яйцо.

Результат цитогенетического исследования №165 а - Кариопит 46ХХ, численных хромосомных аномалий у плода не обнаружено.

Забор и исследование полученного материала проводилось аналогично, см. пример №1:

показатель уровня МДА при ферментативной реакции ПОЛ равен 6,46 нмоль\ч; уровня МДА при спонтанной ПОЛ равен 7,75 нмоль/ч; уровня МДА при неферментативной реакции ПОЛ равен 16,61 нмоль/ч,

уровень активности СОД 248,5 нг/мл,

уровень CDF-15 в тканях хориона 3259 пг/мл.

В отсутствии других причин, после проведенного комплексного обследования можно предположить, что ведущем патогенетическим механизмом в развитии осложнения беременности является оксидативный стресс.

Пример №3

Пациентка С., 1986 года рождения, поступила в гинекологическое отделение 22\03\22 г. диагнозом: неразвивающаяся беременность в сроке 7 недель гестации по типу анэмбрионии, с целью прерывания беременности по медицинским показаниям.

Жалоб при поступлении не предъявляет.

Менструальная и репродуктивная функции: менструации с 11 лет по 5 дня, регулярные, умеренные, цикл 28 дней. Последние менструации 1\02\22 г.

В анамнезе: роды - 2, аборты - 0, выкидыши - 0.

Соматический анамнез не отягощен.

Объективно:

P.V. Наружные половые органы развиты правильно, слизистая влагалища не изменена. Тело матки увеличено до 5, мягкое, безболезненное. Придатки с обеих сторон без особенностей. Параметрии свободны. Выделения из п\путей слизистые.

УЗИ от 22.03.22 г. - матка размерами 62×62×58 мм, увеличена до 6 недель беременности, контуры четкие, ровные, структура неоднородная. М-эхо 16 мм. В полости плодное яйцо, желточный мешок в диаметре до 3,7 см, эмбрион не определяется. Правый яичник 37×31 мм, левый яичник - 24×20 мм.

Проведено полное клинико-лабораторное обследование согласно приказа МЗ РФ от 20.10.2020 №1130н "Об утверждении Порядка оказания медицинской помощи по профилю "акушерство и гинекология". Отклонений от нормы в результатах исследования не выявлено. Выполнена вакуум-аспирация содержимого полости матки.

Результат гистологического исследования №02913467: децидуальная ткань, ворсины хориона, маточная беременность.

Результат цитогенетического исследования №118\а Кариотип Кариотип: 47, XY+21.

Заключение: патологический кариотип. Синдром Дауна.

Забор и исследование полученного материала проводилось аналогично, см. пример №1:

уровень МДА при ферментативной реакции ПОЛ равен 3,57 нмоль/ч; при спонтанной реакции ПОЛ равен 5,3 нмоль/ч; при неферментативной реакции ПОЛ 3,1 нмоль/ч;показатель уровня активности СОД 45,2 нг/мл. Показатель уровня CDF-15 в тканях хориона 8696 пг/мл. На основании проведенных исследований установлен ведущий патогенетический механизм неудачной гестации - хромосомные аберрации.

Пример №4

Пациентка С., 1981 года рождения, поступила в гинекологическое отделение 26/05/22 г. диагнозом: неполный самопроизвольный выкидыш в сроке 8 недель гестации.

Жалобы при поступлении на обильные кровянистые выделения из п\путей.

Менструальная и репродуктивная функции не нарушены: менструации с 12 лет по 5 дней, регулярные, умеренные, цикл 28 дней. Дата последних менструаций 23/02/22 г.

В анамнезе: 2 неразвивающиеся беременности в сроках 5 и 7 недель.

Соматический анамнез: без особенностей.

Объективно:

P.V. Наружные половые органы развиты правильно, слизистая влагалища не изменена. В зеркалах в области цервикального канала части плода. Тело матки увеличено до 7 недель, мягкое. Придатки с обеих сторон без особенностей. Параметрии свободны. Выделения - кровянистые обильные.

УЗИ органов малого таза от 26.05.22 г. - матка размерами 60×72×62 мм, увеличена до 6-7 недель беременности, контуры четкие, ровные, структура неоднородная. М-эхо 12 мм. В полости матки ткани хориона. Правый яичник 37×31 мм, левый яичник - 24×20 мм.

Проведено полное клинико-лабораторное обследование согласно приказа МЗ РФ от 20.10.2020 №1130н "Об утверждении Порядка оказания медицинской помощи по профилю "акушерство и гинекология". Отклонений от нормы в результатах исследования не выявлено. Выполнена вакуум-аспирация полости матки.

Результат гистологического исследования №9298345: децидуальная ткань, ворсины хориона с лимфоцитарной инфильтрацией.

Результат цитогенетического исследования №170 а - Кариопит 46ХХ, численных хромосомных аномалий у плода не обнаружено.

Забор и исследование полученного материала проводилось аналогично, см. пример №1:

показатель уровня МДА при ферментативной реакции ПОЛ равен 10,2 нмоль/ч; при спонтанной реакции ПОЛ равен 9,01 нмоль/ч; при неферментативной реакции ПОЛ равен 24,41 нмоль/ч:

показатель уровня активности СОД равен 301,2 нг/мл;

показатель уровня CDF-15 равен 1689 пг/мл.

В результате проведенного комплексного обследования и отсутствии других факторов и причин, можно предположить, что ведущем патогенетическим механизмом в развитии осложнения беременности является оксидативный стресс.

Таким образом, предлагаемый способ позволяет в короткие сроки, на малом объеме биологического материала диагностировать оксидативный стресс при патологии репродуктивного процесса (особенно невынашивании беременности идиопатического генеза), что позволит в дальнейшем разработать персонализированный подход к лечению и профилактике данного вида осложнения беременности.

Заявляемый способ отличается малой инвазивностью, технической простотой выполнения, является информативным и достоверным для диагностики оксидативного стресса, доступностью выполнения в условиях женской консультации, стационарных ЛПУ.

Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству, клинической лабораторной диагностике, и может быть использовано для диагностики оксидативного стресса при невынашивании беременности путем биохимического исследования биоматериала. В тканях хориона, полученных в результате спонтанного абортуса или путем инструментального выскабливания полости матки, определяют уровень малонового диальдегида при спонтанной, ферментативной и неферментативной реакции перекисного окисления липидов, показатель активности супероксидисмутазы и уровень фактора роста и дифференцировки-15. При значениях уровня малонового диальдегида при спонтанной реакции перекисного окисления липидов не менее 7,75 нмоль/ч, при ферментативной реакции перекисного окисления липидов не менее 6,46 нмоль/ч, при неферментативной реакции перекисного окисления липидов не менее 16,61 нмоль/ч, показателя активности супероксиддимутазы не менее 245,8 нг/мл, уровня фактора роста и дифференцировки-15 не более 3259 пг/мл, диагностируют оксидативный стресс при невынашивании беременности. Способ обеспечивает возможность повышения достоверности и информативности диагностики патогенетических механизмов невынашивания беременности за счет определения в тканях хориона уровня малонового диальдегида, показателя активности супероксидисмутазы и уровня фактора роста и дефференцировки-15, что позволяет выявить механизм оксидативного стресса. 4 пр.

Способ диагностики оксидативного стресса при невынашивании беременности путем биохимического исследования биоматериала, отличающийся тем, что в тканях хориона, полученных в результате спонтанного абортуса или путем инструментального выскабливания полости матки, определяют уровень малонового диальдегида при спонтанной, ферментативной и неферментативной реакции перекисного окисления липидов, показатель активности супероксидисмутазы и уровень фактора роста и дифференцировки-15, при значениях уровня малонового диальдегида при спонтанной реакции перекисного окисления липидов не менее 7,75 нмоль/ч, при ферментативной реакции перекисного окисления липидов не менее 6,46 нмоль/ч, при неферментативной реакции перекисного окисления липидов не менее 16,61 нмоль/ч, показателя активности супероксиддимутазы не менее 245,8 нг/мл, уровня фактора роста и дифференцировки-15 не более 3259 пг/мл, диагностируют оксидативный стресс при невынашивании беременности.